PLoS One: Fokozott mikroRNS-630 expressziója gyomorrákban társul rossz általános Survival

absztrakt katalógusa

A mikroRNS-ek vannak nem kódoló RNS-ek, amelyek szabályozzák a többszörös sejtfolyamataikba során daganatos progresszió. Között különböző mikroRNS, a miR-630 nemrég azonosítottak be kell vonni a sok kritikus folyamatok humán rosszindulatú daganatok. Célunk az volt, hogy vizsgálja meg a jelentősége és prognosztikus miR-630 humán gyomorrák. A gyomorrák és szomszédos normál egyedeire 236 betegek, akik nem kaptak neoadjuváns kemoterápia gyűjtöttünk. A kifejezés a miR-630 vizsgáltuk kvantitatív valós idejű PCR vizsgálattal és annak kapcsolata betegek teljes túlélése elemeztük a statisztikai elemzést. MiR-630 expressziós szintje szignifikánsan magasabb volt a gyomorrák képest szomszédos normál mintákat. Meg kell állapítani, hogy a miR-630 expresszió összefüggésbe hozható gyomorrák invázió, nyirokcsomó áttét, távoli áttétek és TNM. Ezen túlmenően, a túlélés elemzés bebizonyította, hogy a megemelkedett miR-630 expresszió járó szegény betegek teljes túlélése. A többváltozós túlélési analízis is bizonyította, hogy a miR-630 egy független prognosztikai után korrigált ismert prognosztikai tényezők. A jelen tanulmány bizonyította a túlzott expressziója a miR-630 és annak kapcsolata tumorprogresszió humán gyomorrák. Azt is biztosított az első bizonyíték arra, hogy a miR-630 expresszió független prognosztikai tényezője gyomorrákos betegeknél, ami lehet, hogy egy potenciális értékes biomarker gyomorrák. Katalógusa

Citation: Chu D, Zhao Z, Li Y, Li J., Zheng J, Wang W, et al. (2014) A megnövekedett mikroRNS-630 expressziója gyomorrákban társul általában gyenge túléléssel. PLoS ONE 9 (3): e90526. doi: 10,1371 /journal.pone.0090526 katalógusa

Szerkesztő: Alfons Navarro, University of Barcelona, ​​Spanyolország katalógusa

Beérkezett: szeptember 14, 2013; Elfogadva: február 3, 2014; Megjelent: március 12, 2014 katalógusa

Copyright: © 2014 Chu et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: Ez a munka ben támogatták Nemzeti Természettudományi Alapítvány Kína (No. 81201927, 81272204 és 31270812) és Kína posztdoktori Science Foundation (No. 2012M521862). A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

gyomorrák egyik leggyakoribb rosszindulatú betegségek világszerte [1]. A gyomorrák prognózisa rossz, és a betegek általában diagnosztizálják meglehetősen előrehaladott állapotban a legtöbb országban [2], [3]. Így a teljes 5 éves túlélési ráta körülbelül 40%, és hogy a betegek távoli metasztázis kevesebb, mint 5% [4] - [8]. Körülbelül 700.000 gyomorrákos beteg hal meg évente, és ezzel a második leggyakoribb oka a rák okozta halál világszerte. Az adatok azt mutatták, hogy a nyers halálozási arány a gyomorrák 25,2 100.000 (32,8 100.000 férfiaknál és 17,0 100.000 nőknél) [1]. De létezik méltó földrajzi előfordulás gyakorisága a gyomorrák a keleti országok, mint Kína és Japán legmagasabb a gyomorrák, mint a nyugati országokban [9], [10]. Kínában, a gyomorrák a második leggyakrabban diagnosztizált rák és a harmadik vezető daganatos halálok, a körülbelüli 464 439 új esetet és 352 315 rákos halálesetek 2008 A teljes becsült korspecifikus incidencia ráta 2008-ban 29,9 100.000 ember Kínában [9]. Tehát, gyomorrák továbbra is jelentős problémát jelent világszerte, annak ellenére, csökkenő előfordulási gyakorisággal nem csak a nyugati országokban, hanem Kínában. Katalógusa

A mikroRNS (miRNS) egy osztály erősen konzervált, egyszálú, kis nem kódoló RNS-molekulák, amelyek ismert endogén szabályozó transzkripció utáni génexpresszió szabályozása kifejezés révén transzlációs elnyomás és messenger RNS hasítási [11]. Ezek gátolják a génexpressziót a poszttranszkripciós szinten kötelező a 3 'nem transzlálódó régiót a megcélzott mRNS-ek eredményezhet mRNS lebomlás vagy a transzláció gátlását, attól függően, milyen mértékben komplementer bázispárosodás [12], [13]. Azt már széles körben elfogadott, hogy a miRNS-ek döntő fontosságú szerepet játszanak a különböző biológiai folyamatokban, beleértve a fejlesztési, a sejtburjánzást, differenciálódást, az apoptózist és anyagcsere [14]. A felgyülemlett bizonyítékok is arra utalnak, hogy a miRNS-ek részt vesznek a tumor angiogenezis, invázió és metasztázis humán rosszindulatú daganat [15]. Aberráns miRNS expressziós kapcsolatba hozták onkogenezis, és néhány miRNS jár, mint a tumor-csökkentő, míg mások, mint onkogének, attól függően, hogy célokat, amelyek betekintést nyújt a diagnózis és a prognózis a humán rosszindulatú betegségek [16]. A közelmúltban, bizonyítékok azt mutatták, hogy expressziója miRNS deregulált a különféle típusú emberi rosszindulatú betegségek, például gyomorrák, emlőrák, colorectalis rák, a prosztatarák, a tüdőrák, a hasnyálmirigyrák és a krónikus limfocitás leukémia [17] - [19]. Humán gyomorrák, több miRNS aberráns kifejezés azonosítottak, például a miR-21, miR-22, miR-23, miR-127, miR-148, miR-202 és miR-433, amely játszott onkogén vagy elnyomó szerepet [20] - [25]. Ezek az eredmények azt mutatták, hogy a miRNS-ek játszhat sokszínű és döntő szerepet az emberi daganatok, beleértve a gyomorrák. Azonban az expressziós profilját miRNS nagyon szövetek és daganatok specifikus és miRNS specifikus, így bizonyítva a funkcionális és klinikai jelentősége egy adott miRNS nyújthatnak klinikailag releváns betekintést miRNS funkció és hatásos a rák kezelése [12], [15]. Tudomásunk szerint eddig, a klinikai és prognosztikai jelentősége miR-630 expresszió gyomorrák nem számoltak be. Katalógusa

A jelen tanulmányban azt vizsgáltuk expressziós szintjének miR-630 klinikai gyomor- mintákat és szomszédos normál szövetben, valamint elemzi társítását betegek teljes túlélése. katalógusa

anyagok és módszerek katalógusa

a betegeket és mintákat katalógusa

Ez a tanulmány által jóváhagyott Etikai Bizottság a negyedik Katonai Orvostudományi Egyetem. Minden tag részt már írásos beleegyezését adta. Friss klinikai gyomorrák mintákat és szomszédos normál szövetben gyűjtöttünk 236 beteg műtéten átesett között 2007. január 2008. december Xijing Kórház Digestive Diseases, Negyedik Katonai Orvostudományi Egyetem. Ezen betegek egyike sem kapott kemoterápiát a műtét előtt. Ezen túlmenően, a normál szöveti mintákat vettünk 18 beteg műtéten átesett, de más okból, mint rosszindulatú betegség, mint a normál kontroll mintákban. A histomorphology valamennyi szövetmintából is megerősítette a Department of Pathology, Negyedik Katonai Orvostudományi Egyetem. A mintákat fel azonnal a folyékony N _{2 műtéti eltávolítása után 10 percig, majd egy -70 ° C-ultra-fagyasztó mRNS izolálás. A betegek klinikai adatait, mint például a kor, a nem, a differenciálás állapot és TNM, összegyűjtöttük és az adatbázisban tárolt. Teljes nyomon követése volt elérhető, legalább 5 év. A teljes túlélési úgy definiáljuk, mint az eltelt idő a műtét halálra betegek gyomorrák. Nyomon követési információ valamennyi résztvevő frissítve három havonként telefonon látogatás és kérdőív leveleket. Halál a résztvevők állapítottuk jelentse a család és ellenőrzött felülvizsgálata nyilvános adatait. Katalógusa}

kvantitatív valós idejű PCR katalógusa

A teljes RNS-t tisztítjuk a 236 gyomorrák és a megfelelő szomszédos normál példányok a gyártó által Trizol reagens (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). Csak azok a teljes RNS minták OD A260 /A280 arány közel értéke 2,0, ami azt jelzi, hogy az RNS-t tiszta, ezt követően elemeztük. A miR-630 és RNU44 belső kontroll specifikus cDNS-t szintetizáltunk a teljes RNS-gén-specifikus primerek szerint TaqMan mikro-RNS assay protokollt (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). A reverz transzkripciós termékeket ezután amplifikáltuk és detektáltuk real-time PCR Taqman microRNS Assay (Applied Biosystems) HSA-ra specifikus-miR-630. Minden egyes mintát vizsgált három példányban, és a nyers adatok mutatták be a relatív mennyiségi miR-630 expressziós értékeltük az összehasonlító ciklus küszöbérték (CT) módszer, normalizált tekintetében RNU44. Mean normalizált miR-630 expressziós ± standard deviáció (SD) számoltuk három párhuzamos elemzést. Real-time PCR-t végeztünk egy ABI 7500 rendszer (Applied Biosystems) és összehasonlító 2 ^{-ΔΔCt analízist SDS 2.2.2 szoftver (Applied Biosystems).}

Statisztikai elemzés

Egyesületek között miR-630 expresszió és a klinikopatológiai jellemzők elemeztük Mann-Whitney tesztet és Kruskal-Wallis tesztet, adott esetben. A túlélési görbéket kiszámításához a Kaplan-Meier módszerrel és különbségeket túlélési eloszlásában értékelték a log-rank teszt. Cox-féle arányos kockázati modellezése tényezők potenciálisan összefüggő túlélési végeztünk annak érdekében, hogy megállapítsák, mely tényezők is jelentősen befolyásolják a túlélést, és ellenőrző életkor, nem és differenciálódását állapotát. Különbségek a P katalógusa értéke 0,05 vagy kisebb tekintettük szignifikánsnak. Katalógusa

Eredmények katalógusa

miR-630 expressziója kimutatható gyomorkarcinóma katalógusa

a valós idejű PCR-assay, 236 esetben gyomorrák, megfelelő szomszédos normál egyedek és 18 esetben a normál kontroll mintákat vizsgáltuk. Relatív expresszióját miR-630 normalizáltuk RNU44 gyomorkarcinómában Azt találtuk, hogy 8,51 ± 1,63 (átlag ± SD), míg a megfelelő szomszédos normál volt 3,25 ± 0,63. Statisztikai eredmények bebizonyították, hogy ez a kifejezés a miR-630 gyomorrákban szignifikánsan magasabb volt, mint a szomszédos és normál kontroll minták ( P katalógusa < 0,05). Ezek az eredmények azt mutatták, hogy a miR-630 játszhat onkogén szerepet gyomorrák. Hogy elősegítse a további elemzést a szövetség között miR-630 expresszió és a klinikai jellemzők, mi manuálisan meghatározott gyomorrák miR-630 expressziója alacsonyabb 3,88 (átlag + SD kifejezése miR-630 a szomszédos példányok) alacsony miR-630 expressziós csoport, miközben példányok miR-630 expressziója nem kevesebb, mint 3,88 definiáltuk nagy miR-630 expresszió-csoport. Így többek között 236 esetben gyomorrák, 98 esetben rendeltek alacsony expressziós csoport, miközben 138 esetet rendelt magas expressziós csoportban. Katalógusa

kapcsolat a miR-630 és Klinikopatológiai Jellemzői Gyomorrák katalógusa

ahogy a vizsgálat bebizonyította, hogy a miR-630 expressziója növekedett gyomorrák, ami azt jelezte, hogy a miR-630 működhetne egy onkogén szerepe a gyomorrák. Mi tovább vizsgálták az egyesület a miR-630 expressziós klinikopatológiai betegeinek, hogy vizsgálja meg a lehetséges szerepe a gyomorrák progresszió. Statisztikai analízis eredményei azt mutatták, az 1. táblázatban, bebizonyította, hogy fokozott miR-630 expressziós társult előrehaladott gyomorrák invázió óta magas miR-630 expresszió gyakrabban kell kimutatni T3 és T4 tumorok ( p
= 0,007 ). Ami a tumor metasztázis tartották, emelkedett miR-630 expressziója kapcsolatban pozitív nyirokcsomó és távoli metasztázis magas miR-630 expresszió gyakrabban detektálható tumorok pozitív nyirokcsomók ( p
< 0,001), vagy távoli áttét ( P katalógusa = 0,002). Ezen túlmenően, amikor mértük a betegek klinikai jellemzői által TNM átmeneti rendszer, azt találtuk, hogy a miR-630 expresszió szignifikánsan összefüggött a TNM-beosztása a gyomorrák, mert magas miR-630 expresszió nagyobb valószínűséggel észlelhető tumorokban előrehaladott TNM-beosztása ( P katalógusa < 0,001). Ezek az eredmények azt sugallták, hogy a miR-630 játszhat onkogén szerepet a progresszió gyomorrák. Azonban a pozitív adag miR-630 nem találtak összefüggést a betegek neme ( P katalógusa = 0,788), az életkor ( P katalógusa = 0,471), a differenciálódás állapot ( P katalógusa = 0,890), a tumor helyén ( P katalógusa = 0,835), illetve lauren besorolás ( P katalógusa = 0.160). katalógusa

A kapcsolat a miR-630 és összességében betegek túlélése "gyomor rák katalógusa

a teljes követési időszak 130 236 beteg (55,1%) és a gyomorrák meghalt, és a medián teljes túlélési ideje minden felvett betegek 48 hónap. Kaplan-Meier analízist alkalmaztunk, hogy vizsgálja meg a prognosztikus miR-630 expressziós teljes túlélés a gyomorrákos betegeknél. Eredményei bebizonyították, hogy gyomorrákos betegeknél magas miR-630 expressziója jellemzően rosszabb teljes túlélés (log rank teszt: P katalógusa < 0,001, 1. ábra). A medián túlélési idő a betegek alacsony miR-630 expresszió nem becsülhető, mert több, mint 50% -ánál túlélte során a nyomon követési időszak. Míg a posztoperatív medián túlélési idő betegek magas miR-630 expresszió 34 hónap (95% CI: 28,2-39,8). Ha nem korrigált relatív hazárd (HR) tartották alacsony miR-630 expressziós referenciaként (1,00), gyomorrákos betegeknél magas miR-630 expresszió volt 2,28-szor magasabb a halálozás kockázata (95% CI: 1,57-3,32; P katalógusa < 0,001). Ami a klinikopatológiai jellemzők figyelembe vették, nyirokcsomó áttét (log rank teszt: P katalógusa = 0,002), a távoli áttétek (log rank teszt: P katalógusa < 0,001) és a TNM stádium (log rank teszt: P katalógusa < 0,001) is bizonyította, hogy vonják be a teljes túlélés, mivel gyomorrákos betegeknél nyirokcsomó-metasztázis, távoli áttét vagy előrehaladott minőségű jellemzően rosszabb a teljes túlélés és magasabb a halálozás kockázatát. Azonban nem (log rank teszt: P katalógusa = 0,168), az életkor (log rank teszt: P katalógusa = 0,572) differenciálás állapot (log rank teszt: P = katalógusa 0,156), a tumor helyén (log rank teszt: P katalógusa = 0,632), illetve lauren besorolás (log rank teszt: P katalógusa = 0,573) nem volt prognosztikai értéke a teljes túlélést a gyomorrákos betegeknél .

mivel a miR-630 expressziója bizonyult társítható betegek teljes túlélése egyváltozós túlélési analízis azt is vizsgáltuk, hogy a miR-630 szolgálhat független prognosztikai markere gyomorrákos betegeknél. Mert nyirokcsomó áttét, illetve távoli áttét információkat tartalmazza TNM adatok végeztünk Cox modell, amely korrigálva nem, életkor és TNM. Az eredmények azt mutatták, hogy a korrigált HR magas miR-630 expresszió csoport 3,51 (95% CI: 1,83-6,72; P katalógusa < 0,001). Ezek az eredmények azt bizonyították, hogy a miR-630 volt független prognosztikai faktora össztúlélése gyomorrákos betegeknél. Ily módon az miR-630 expresszió jelezheti a rossz általános túlélés tekintet nélkül korra, nemre vagy TNM (2. táblázat). Katalógusa

Vita katalógusa

A legutóbbi vizsgálatok szerint, több mint 1900 emberi miRNS azonosítottak, amelyek a becslések szerint szabályozza több mint 60% -a gének emlősök [26]. Lévén, hogy nagy jelentősége van a génexpresszió szabályozásában, azt már széles körben elfogadott, hogy a miRNS-ek részt vesznek a többszörös celluláris funkciókat, beleértve a szaporodást, apoptózis és differenciálódását, és ezáltal, hajtottak végre különböző fiziológiai és patológiás folyamatban kezdve fejlődés a rák [27 ] - [29]. Előző vizsgálat megkérdezett expressziós profilját miRNS az I. szakaszban nem kissejtes tüdőrák azonosítani minták, amelyek előre kiújulás műtéti eltávolítása után megállapította, hogy a mir-630 volt az egyik leggyakrabban miRNS között 1000 osztályozók azonosított [30]. Egy másik tanulmány a nem kissejtes tüdő találtuk, hogy a miR-630 képes szabályozni a cisplatin által kiváltott daganatos sejthalált, jelezve, miR-630 volt a potenciális modulátor a ciszplatin választ a nem-kissejtes tüdőrák [31]. MiR-630 is megállapították, hogy fokozódik a fej-nyaki laphámrák után cisplatin kezelés és modulálják a protein expresszióját ATG5, ATG6 /BECN1, ATG10, ATG12, ATG16L1 és UVRAG [32], [33]. A legújabb tanulmány igazolta, hogy túlszabályzását miR-630 hasnyálmirigyrák sejtek apoptózist indukál célzó IGF-1 R [34]. Mivel az egyes miRNS-ek a különböző rák típusok egy nagy számú különböző gén célkitűzéseket, így, különböző funkciói vannak a különböző rosszindulatú daganatok. Tehát, a funkcionális felfedezése egyes miRNS lehetővé teheti mélyebb betekintést a génexpresszió szabályozásában és összetettsége daganatos progresszió. Katalógusa

A jelen tanulmányban azt vizsgáltuk miR-630 mRNS expresszióját real-time PCR assay 236 esetben gyomorrák betegek, akik nem részesültek neoadjuváns kemoterápia. Ennek alapján a relatív expressziós számítás, elemeztük az egyesület a miR-630 klinikopatológiai jellemzői, valamint betegek prognózisát. Az eredmények azt mutatták, hogy a miR-630 expressziója növekedett a gyomorrák képest, hogy a szomszédos és normál kontroll szövetekben magas expresszióját miR-630 volt, nagyobb valószínűséggel kimutatható gyomorrák példányok, amelyek megjelölik lehetséges részvétel kialakulásában. Azt is tapasztaltuk, hogy a miR-630 expressziója szorosan kapcsolódik a gyomorrák invázió, nyirokcsomó-metasztázis, a távoli metasztázis és TNM-beosztása magas expresszióját miR-630 volt gyakrabban kell kimutatni tumorok mély invázió, nyirokcsomó-metasztázis, távoli metasztázis vagy előrehaladott TNM, ami arra utal, a lehetséges részvételét a miR-630 gyomorrák invázió és metasztázis. Együtt a fenti bizonyítékok alapján tehát azt javasolta, hogy a miR-630 is fontos szerepet játszanak a gyomorrák karcinogenitási és progresszióját. Katalógusa

Mivel a miR-630 expressziót találtunk, hogy vonják be a gyomorrák invázió és metasztázis, figyelembe véve a invázió a rák a környező szövetekre és metasztázis távoli szövetekben kulcsfontosságú tényezők a betegek prognózisát, miR-630 lehet a potenciális prognosztikai markere gyomorrákos betegeknél. Annak érdekében, hogy vizsgálja meg a prognosztikai szerepét miR-630 gyomorrák végeztünk Kaplan-Meier analízis teljes túlélés. Az eredmények azt mutatták, hogy a betegek gyomorrák magas miR-630 expressziós hajlamosak rosszabb teljes túlélés képest betegek tumor alacsony miR-630 expressziós, amely azt sugallta, hogy a miR-630 expresszió prognosztikus markereként gyomorrákos betegeknél. Folytassa az prognosztikai miR-630 gyomorrákban végeztünk Cox modellt, amelyet korrigált kor, nem és TNM betegek. Eredményei bebizonyították, hogy a fokozott miR-630 expresszió a marker a szegény teljes túlélés független korrigált tényezők, így a miR-630 lehetne használni, hogy meghatározza a betegek prognózisa a ki tekintve TNM. Ezek az eredmények azt mutatták, hogy a miR-630 képezhetné molekuláris prognosztikai marker adalékanyag TNM a gyomorrákos betegeknél, azonosító magas kockázatú egyének, akik nagyobb valószínűséggel tumorrecidiva a klinikai gyakorlatban, így jó jelöltek kap több agresszív kezelés. Ezek az eredmények voltak összhangban vizsgálatok középpontjában a nem-kissejtes tüdőrák, jelezve a állaga miR-630 funkciója az ilyen típusú daganat. Így a pozitív közötti kapcsolat miR-630 túltermelése és a rossz prognózis nem csak azonosítására használt gyomorrákos betegek nagyobb kockázata a korai tumorrecidiva hanem értékes nyomokat, hogy megértsék a lehetséges mechanizmusa gyomorrák invázió és metasztázis.

Összefoglalva, bebizonyítottuk, hogy a miR-630 expressziója növekedett a gyomorrák és összefügg a tumor progresszióját. A jelen tanulmány is bizonyította az első alkalom, hogy a miR-630 expresszió független prognosztikai faktora gyomorrákos betegeknél. Ezért lehetséges, hogy a miR-630 játszhatnak fontos szerepet invazivitását és metasztázis a gyomorrák. Az is lehetséges, hogy a miR-630 szolgál prognosztikus markereként a klinikai gyakorlatban, és még a gátlás a miR-630 használatával specifikus inhibitorok válhat egy új terápiás módszer kezelésére gyomorrák.

• PLoS One: A MAP3k1 SNP jósol Survival gyomorrák egy kínai népesség
• PLoS One: Klinikopatológiai jelentősége és prognosztikus Laktát-dehidrogenáz A Expression olyan gyomorrákos betegek