PLoS One: Enhanced M1 makrofág polarizáció Human Helicobacter pylori-asszociált sorvadásos gyomorhurut és a beoltott Mice

absztrakt katalógusa

Háttér katalógusa

Fertőzés Helicobacter pylori katalógusa kiváltja krónikus gyomor- gyulladás fejlődhet sorvadás és gyomor adenokarcinóma. Polarizációja makrofágok jellemző mind a rák és a fertőzés, és elősegítheti progresszió vagy felbontása betegség. Azonban a szerepe a makrofágok és a polarizációs során H. pylori fertőzés katalógusa nem jól definiált. katalógusa

Módszertan /fő eredményei katalógusa

használatával egér modellben a fertőzés és a gyomor biopszia 29 magánszemélyek elemeztük makrofág toborzás és a polarizáció során H. pylori
fertőzés áramlási citometriával és a valós idejű PCR-rel. Találtunk egy szekvenciális toborzása neutrofilek, eozinofilek és makrofágok a gyomor nyálkahártya fertőzött egerek. Génexpressziós analízise gyomor szövetek és rendezve makrofágok feltárta, hogy a gyomor makrofágok polarizált M1 után H. pylori
fertőzés, és ez a folyamat jelentős mértékben felgyorsult előzetes vakcinázás. Emberi H. pylori fertőzés katalógusa jellemezte vegyes M1 /​​M2 polarizációja makrofágok. Azonban a H. pylori katalógusa -asszociált atrófiás gastritis, a kifejezés indukálható nitrogén-oxid szintáz jelentősen emelkedett képest egyszerű gyomorhurut, azt jelzi, hogy a fokozott M1 makrofág polarizáció ebben pre-malignus elváltozás. katalógusa

Következtetések /Jelentősége katalógusa

Ezek az eredmények azt mutatják, hogy az oltás egerek ellen H. pylori
felerősíti M1 polarizációja gyomor makrofágok, és hogy hasonló fokozott M1 polarizáció jelen van az emberi H. pylori katalógusa indukált sorvadásos gyomorhurut. katalógusa

Citation: Quiding-Järbrink M, Raghavan S, M Sundquist (2010) Fokozott M1 makrofág polarizáció Humán Helicobacter pylori katalógusa -asszociált sorvadásos gyomorhurut és A beoltott egerek. PLoS ONE 5 (11): e15018. doi: 10,1371 /journal.pone.0015018 katalógusa

Szerkesztő: Niyaz Ahmed, University of Hyderabad, India katalógusa

Beérkezett: augusztus 26, 2010; Elfogadva: október 7, 2010; Megjelent: november 23, 2010 katalógusa

Copyright © 2010 Quiding-Järbrink et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: Ez a tanulmány támogatta a kiválósági központ MIVAC által finanszírozott svéd stratégiai Kutatási Alapítvány, a Adlerbert Research Foundation, Wilhelm & Martina Lundgren alapítványa, Inga-Britt & Arne Lundberg alapítása, és az Sahlgrenska Egyetemi Kórház. A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

Helicobacter pylori
megtelepedni a gyomor hámszövet több mint a fele a világ népességének [1]. A fertőzés gyakran élet-hosszú, és beindítja a krónikus gyulladás a gyomor nyálkahártya, ami körülbelül 1-2% a fertőzött egyének végül alakul gyomor adenokarcinóma [1]. Gyomorrák kialakulásával, különösen a bél típusú, egy többlépcsős folyamat, amely előrehaladtával évtizedek óta keresztül premalignus elváltozások a gyomor nyálkahártya, mint például a atrófiás gasztritisz, az intesztinális metaplázia, és diszplázia [2]. Az eredmény a fertőzés függ virulencia a fertőző H. pylori katalógusa törzs, a környezeti tényezők, mint a dohányzás és az étrend, és a fogadó genetikai tényezőket, amelyek befolyásolják a típusa és intenzitása a gyulladásos választ. [1] katalógusa

Egy erős pro-gyulladásos választ társul megnövekedett reaktív oxigén és nitrogén gyökök a gyomornyálkahártya [3], amelyek elősegítik a rák fejlődését. [4] Például fertőzött egerek H. pylori katalógusa hat hónapig, nagyobb gyakorisággal a gyomorsav mutációk képest fertőzött egerekben [5]. Ezen túlmenően, az egerek, amelyek hiányosak az enzim indukálható nitrogén-oxid-szintáz (iNOS) van egy csökkentett incidenciája gyomorrák után H. pylori
fertőzés és karcinogén kihívás, összehasonlítva a normál egerekben [6]. Míg iNOS hozzájárul a gyomorrák kialakulásával, a magas szintű a kemokin CCL18 gyomor tumorok társul túléléséhez gyomor rákos betegek [7]. Érdekes, iNOS által termelt klasszikusan aktivált /M1 makrofágok mivel CCL18 termelés fémjelzi a Alternatívaként aktivált /M2 makrofágok [8]. Összefoglalva, ezek az eredmények arra utalnak, hogy a makrofág polarizáció lehet fontos szerepet fejlődésének H. pylori
-asszociált gyomorrák.

M1 makrofágok jellemzően részt venni a kezdeti immunválasz a behatoló mikroorganizmusok és elősegíti a T helper (Th) 1 immunitás, míg az M2 makrofágok során indukálódik a felbontás fázis gyulladás és részt vesznek a törmelék öblítő olyan lágy szövetek, és előmozdítása Th2 immunitás [8], [9]. Polarizációja makrofágok által irányított mikrokörnyezet. M1 makrofágok által indukált interferon-γ és mikrobiális termékek, mint a lipopoliszacharid [9]. Másrészt, az M2 makrofágok által indukált TH2- vagy gyulladásellenes citokinek és növekedési faktorok, beleértve az IL-4, IL-10 és a transzformáló növekedési faktor-β [8], [9].

alatt H. pylori
fertőzés, makrofágok toborzott a gyomor nyálkahártya, amennyiben ezek hozzájárulnak a termelés a proinflammatorikus citokinek és kemokinek [10], [11], [12], [13], [14], [15] . Ezenkívül egy újabb vizsgálat azt mutatta, hogy a liposzóma-közvetített kiürülését makrofágok csökkent gyomor patológia H. pylori katalógusa-fertőzött egerekben [16]. Ennek ellenére, a funkció a makrofágok során in vivo H. pylori fertőzés katalógusa viszonylag gyengén meghatározott. A funkció makrofágok szorosan kapcsolt a polarizációs állapot, ami szintén úgy tűnik, hogy szerepe van a gyomorrák kialakulásával [6], [7]. Ezért megvizsgáltuk a makrofág polarizáció a gyomor nyálkahártyájában H. pylori
-fertőzött egerek és az emberek. Megmutatjuk, hogy az oltás egerek ellen H. pylori
sebesség és felerősíti az M1 polarizációja gyomor makrofágok. Ezen túlmenően, a rákot megelőző lézió atrófiás gasztritisz jellemzi fokozott makrofág M1 polarizáció emberekben.

Eredmények

Megnövekedett gyakoriságát makrofágok, eozinofilek és neutrofilek a gyomornyálkahártya után H. pylori fertőzés katalógusa katalógusa

A felvételi veleszületett sejteket a fertőzés helyén előfeltétele fertőző ellenőrzés. Nem csak a veleszületett sejtek, például makrofágok és neutrofilek, részt baktériumölésben; ők is termelnek a gyulladásos mediátorok, amely előkészítette a terepet a következő immunválaszt. Annak vizsgálatára, a felhalmozódása a veleszületett sejtek a gyomor nyálkahártya alatt H. pylori
fertőzés, mi fertőzött C57BL /6 egerekben az egér-adaptált H. pylori
Sydney törzs 1 (SS1), majd négy, nyolc és 26 hétig elemeztük a gyomor gyulladásos beszűrődés az egyes egerek többszínű áramlási citométerrel. A teljes száma lamina propria izolált sejtek a gyomorban nem változott az első négy hét a fertőzés, de nyolc héttel a fertőzés után az összes izolált sejtek megduplázódott, és 26 héttel a fertőzés volt egy nyolc-szeres növekedést a teljes száma izolált sejtek összehasonlítva a nem fertőzött egerek (1A.). Között a sejtek toboroznak a gyomor voltak makrofágok, eozinofil és neutrofil. Gyomor makrofágok azonosítottak expresszáló sejtek CD11b és a fő hisztokompatibilitási komplex II osztály (MHC-II), de hiányzik expressziója Gr1 (neutrophil marker), CD103 (által kifejezett egy részhalmazát dendritikus sejtek (DC-k)), és sziálsav-kötő immunoglobulin- mint lektin (Siglec-F, eosinophil marker) (ábra. 1B). Ezek a sejtek kifejezett makrofág marker F4 /80 (ábra. 1E), és az alapján sejt morfológiája is megerősítette a makrofágok (ábra. 1B). A frekvencia a makrofágok a gyomornyálkahártya változatlan maradt, miután négy és nyolc héttel a H. pylori fertőzés katalógusa (ábra. 1F). Azonban 26 hét után a gyakorisága gyomorrák makrofágok képest növekedett a nem fertőzött egerek (ábra. 1F). Katalógusa

Az eozinofil sejteket definiált CD11b ^{+ Siglec-F + sejtek (ábra. 1C, [17]). Ezek a sejtek kifejezett köztes szintjeit F4 /80 volt, és magas Side Scatter profil amikor áramlási citometriával analizáltuk (ábra. 1E). Krezilibolya festése rendezve CD11b + Siglec-F + sejtek megerősítette eosinophil morfológia (ábra. 1C). A frekvencia az eozinofil sejtek a gyomor nyálkahártyájának megduplázódott nyolc hét után, és tovább növekedett 26 hét után a fertőzés (ábra. 1F). Katalógusa}

neutrofil sejteket definiált CD11b ^{+ Gr1 + sejtek (ábra . 1D). Mivel a Gr1 antitest felismeri mind a Ly6C és Ly6G epitóp azt megerősítette, hogy minden CD11b + Gr1 + sejtek kifejezett specifikus neutrofil marker Ly6G (ábra. 1D és E). A frekvencia a neutrofilek megnövekedett 10-szeres nyolc héttel a fertőzés után, és tovább növekedett 26 hét után (ábra. 1F). Így alatt H. pylori fertőzés katalógusa van egy szekvenciális neutrofilek felhalmozódását és eozinofil, majd makrofágok a gyomor lamina propria. katalógusa}

jellemzése gyomor dendritikus katalógusa

jellemzésére gyomor DC, először azonosították a lakosság CD11c ^{+ MHC-II + sejtek (2A.). Amikor ezeket a sejteket tovább analizáltuk expressziójának F4 /80 és a αE integrin lánc CD103, a fele a CD11c + MHC-II + sejteket azonosították F4 /80 + makrofágok (2A. ). Azonban, többek között a CD11c + MHC-II + sejtek hogy hiányzott expressziója F4 /80, két populáció feltételezett dendritikus differenciális expressziója CD103 lehet megkülönböztetni (2A.). Mivel a sok fluorokrómok szükséges úgy döntöttünk, hogy csak jellemzik a gyomor CD103 +
dendritikus Továbbá, mivel ezek a sejtek szerepet játszanak, mint fontos antigénprezentáló sejtek nyálkahártyaszövetek [18]. Gyomor- CD103 + DC-k könnyen azonosítható festéssel CD11c és CD103 (ábra. 2B). A gyomor CD103 + DC-k magas szinten expresszált MHC-II, valamint állt a CD11b alacsony, és egy CD11b magas részhalmaza (ábra. 2C). Összehasonlításképpen, a gyomor CD103 - DC-ket minden CD11b magas (ábra. 2D). Ezen túlmenően, a CD103 + DC-k hiányzott expresszióját CD8α és F4 /80 (ábra. 2C). Azonban a gyakorisága CD103 + DS nem változott jelentősen a gyomornyálkahártya fertőzés után (ábra. 2E). Katalógusa}

Gyomor makrofágok és CD103 ^{+ DS nem upregulate kostimulációs molekulák után H. pylori fertőzés katalógusa katalógusa}

Annak érdekében, hogy vizsgálja meg a lehetséges hatásait H. pylori
fertőzés a kifejezés a kostimulációs molekulák és az MHC-II által gyomor makrofágok és CD103 ^{+ DC-k, a ezen markerek expressziója elemeztük áramlási citometriával után négy, nyolc és 26 hétig a fertőzés. Az egyensúlyi állapotban, a makrofágok és a CD103 + DC-k a gyomor lamina propria kifejezte hasonló szinten a kostimulációs molekula CD86 valamint MHC-II (3A.). Meglepő módon, a kifejezés a CD86 és MHC-II akár gyomor- makrofágok vagy CD103 + DS-ben nem növekedett a fertőzés után H. pylori katalógusa relatív korú naiv egerek elemzett párhuzamosan (ábra. 3B). Így a makrofágok és a CD103 + DS a gyomor lamina propria nem upregulate CD86 és MHC-II után H. pylori fertőzés
ellenére folyamatos gyulladásos választ. katalógusa}

M1 polarizációja gyomor makrofágok során H. pylori fertőzés katalógusa katalógusa

Mivel eredményeink azt javasolta, hogy a gyomor makrofágok esetleg nem lesz teljesen aktiválva során H. pylori fertőzés katalógusa, mi jellemzi ezeket a sejteket tovább vizsgálta a M1 /​​M2 polarizáció. Annak megállapításához, makrofág polarizáció során H. pylori
fertőzés, használtuk real-time PCR mérésére gének expressziójának társított M1 vagy M2 polarizációja makrofágok a gyomor szövetben [8], [9]. Is mértük az IL-10, amely lehet előállítani szabályozó makrofágok [9]. Egyik markerek elemzett differenciáltan expresszálódó négy hét után H. pylori fertőzés
képest naiv egerek (4A.). Nyolc héttel a fertőzés után a kifejezés az M1-markerek iNOS és CXCL11 szignifikánsan emelkedett, és ezek a markereket tovább fokozódik a 26 hetes fertőzés (4A.). Ezen túlmenően, az IL-10-t serkentett nyolc és 26 hétig a fertőzés képest naiv egerek (ábra. 4A). Ezzel szemben, az M2 markerek találhatók a gyulladásos 1. zóna (FIZZ1) és argináz-1 nem eltérően expresszált a gyomorban négy, nyolc vagy 26 hetes fertőzés képest naiv egerek (ábra. 4A).

forrásának azonosítása iNOS és CXCL11 a gyomornyálkahártya, a makrofágok (CD11b ^{+ Gr1 -Siglec-F -MHC-II +), eozinofil (CD11b + Gr1 -Siglec-F + MHC-II -), és a maradék sejteket után kapuzássai ki makrofágok és eozinofil (CD11b - és CD11b + Gr1 +) soroltam poolozott gyomor lamina propria sejtek fertőzött egerek H. pylori
26 hétig (ábra. 4B). A mRNS expressziója iNOS és CXCL11 rendezett sejtpopulációk a fertőzött egerek, valamint a teljes gyomor lamina propria származó sejteket mind a naiv és a fertőzött egerek ezután határozzuk meg real-time PCR. Elegendő számú leválogatott makrofágok nem lehetett beszerezni naiv egerek megbízható elemzését mRNS expresszió. Gyomor makrofágok kifejezve a legmagasabb szintű iNOS és CXCL11 összehasonlítva a másik szortírozott sejtpopulációk és a teljes gyomor lamina propria sejtek válogatás előtt (ábra. 4C). Összefoglalva, ezek az eredmények azt mutatják, hogy a gyomorsav makrofágokat polarizált M1 alatt H. pylori fertőzés katalógusa.}

elleni védőoltás H. pylori katalógusa erősíti makrofág M1 polarizáció katalógusa

Védő elleni immunizálás H. pylori katalógusa általában társított gyors fejlődés a gyomor Th1 [19]. Mivel a Th1 citokin interferon-γ indukál makrofág M1 polarizáció [9] azt vizsgáltuk, hogy a vakcinázás befolyásolhatja makrofág polarizáció során H. pylori fertőzés
. Ebből a célból, egereket immunizáltunk szublingválisan a H. pylori
lizátum és a kolera toxin adjuváns, és ezt követően megtámadta H. pylori
SS1. Ez immunizálási rend vezetett a jelentős csökkenéséhez bakteriális terhelés a gyomorban négy héttel a fertőzés után (ábra. 5A). Ugyanakkor, a kifejezés az M1 és M2 markerek a gyomorban analizáltuk real-time PCR-rei. Az immunizált egerekben, csak a kifejezés a CXCL11 szignifikánsan emelkedett négy héttel a fertőzés után összehasonlítva a naiv egerek (ábra. 5B). Ezzel ellentétben, immunizált egerek egy nagy fokozza a mind az M1-markerek iNOS és CXCL11 mivel a kifejezés az M2 markerek FIZZ1 és argináz-1 nem változott, négy héttel a fertőzés után (ábra. 5B). A fokozott expressziója iNOS és CXCL11 immunizált /fertőzött egerek nem volt köszönhető, hogy a immunizálás egyedül, hiszen immunizált de nem-fertőzött egerek nem változott a kifejezés bármely elemzett M1 vagy M2 markerek képest teljesen kezeletlen egerek (az adatokat nem mutatjuk ).

Ezen kívül, elemeztük a frekvencia a makrofágok a gyomor nyálkahártyáján az immunizálás és egerek áramlási citometriával. Relatív, hogy fertőzött-csak egerekben, immunizált egerek szignifikánsan nagyobb gyakorisággal jelentkeznek gyomor makrofágok három héttel a fertőzés után (ábra. 5C). Annak ellenére azonban, hogy a makrofágok vettek fel a gyomor nyálkahártyáján az immunizálás és egerekben a makrofágok nem upregulate expresszióját CD86 vagy az MHC-II viszonyítva fertőzött csak-egerek (ábra. 5D). Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a sikeres vakcináció H. pylori
lizátum és a kolera-toxin, a makrofágok felhalmozódnak a gyomornyálkahártya és gyorsan polarizált M1 a fertőzés után.

dúsításának makrofág M1 polarizáció humán atrófiás gasztritisz

következő betöltött szerepét vizsgáltuk a H. pylori fertőzés
és sorvadásos gyomorhurut makrofág polarizáció az emberi gyomor nyálkahártyáját. Ebből a célból, a kifejezés a humán M1 (iNOS, CXCL11) és az M2 markerek (CCL17, CCL18, CD206) mértük származó biopsziák antrumból real-time PCR-rei. H. pylori
-fertőzött egyének komplikációmentes gyomorhurut szignifikánsan megemelkedett expressziója mRNS mindkét M1 (iNOS, 8-szoros; CXCL11, 20-szeres) és M2 markerek (CCL17, 30-szeres; CCL18, 70-szeres, CD206 , 2-szeres), mint a nem fertőzött önkéntesekben (ábra. 6a). Vannak azonban olyanok, sorvadásos gyomorhurut (4/6 volt intestinalis metaplasia mellett sorvadás) kifejezve még magasabb iNOS mRNS képest a komplikációmentes gyomorhurut (20-szeres), míg a CXCL11 és markerek M2 polarizációs hasonlóképpen kifejezve (ábra. 6A). Valóban, a kifejezés iNOS 180-szorosára emelkedett egyének sorvadásos gyomorhurut képest nem fertőzött kontroll (6A.), Jelezve, fokozott M1 polarizációja gyomor makrofágok betegeknél sorvadásos gyomorhurut. Katalógusa

Annak vizsgálatára, hogy a fokozott mRNS expressziója M1 és M2 markerek is fordítja megnövekedett fehérje szinten, a teljes fehérjéket extraháltunk antrális biopsziás minták és a koncentrációt az iNOS és CCL18 ELISA-val meghatároztuk. A gyomor biopszia magánszemélyek sorvadásos gyomorhurut volt, csak a fehérje kivonással egy önkéntes, amelyet különbözőképpen jelzett 6B. Fele a H. pylori
-fertőzött egyének kimutatható szintű volt az iNOS fehérje a antrumban mivel a koncentráció a iNOS volt a kimutatási határ alatt az összes nem fertőzött egyének (6B.). A kifejezés az iNOS mRNS és iNOS fehérje szignifikáns korrelációt mutatott (r ^{2 = 0,88, P
< 0,01), jelezve, hogy az mRNS elemzés tükrözi fehérje expresszió, még akkor is, ha a fehérje szintje alacsony. A koncentráció az M2 marker CCL18 növelte a gyomor szövet H. pylori katalógusa-fertőzött egyének képest nem fertőzött kontroll (6B.). Ráadásul az összefonódás a CCL18 fehérje szignifikáns korrelációt mutatott a kifejezés CCL18 mRNS (R 2 = 0,754, P katalógusa < 0,01). Katalógusa}

Mindent összevetve, ezek a megállapítások jelzik jelenléte mind az M1 és M2 makrofágok a gyomor nyálkahártyájának az H. pylori
-fertőzött egyének. Továbbá, sorvadásos gyomorhurut van társítva egy erős amplifikációját iNOS expresszió a gyomor nyálkahártyájának, jelezve egy továbbfejlesztett M1 polarizációja makrofágokban.

Discussion

Ebben a tanulmányban megvizsgáltuk a polarizáció a gyomor makrofágok a krónikus H. pylori fertőzés
. Megmutatjuk, hogy H. pylori
-fertőzött egyének kifejezni mRNS gyomornyálkahártya indikatív vegyes M1 /​​M2 polarizáció a makrofágok, és ezt tovább megerősítette a fehérje szinten. Azonban a H. pylori
-indukált atrófiás gasztritisz volt jelentős emelkedést a kifejezés a iNOS képest egyszerű gyomorhurut. Sorvadásos gyomorhurut ruházza fokozott a kockázata a gyomorrák képest egyszerű H. pylori
-asszociált gastritis [20]. A fokozott expressziója iNOS in atrófiás gasztritisz hozzájárulhat gyomorrák fejlesztés útján reaktív nitrogén gyökök, amely elősegítheti a karcinogenezis indukciós a DNS-károsodás, zavar a DNS-javítás, poszt-transzlációs módosítása, fehérjék, és a p53-mutációk [4]. Valóban, iNOS-hiányos egerek csökkentett előfordulási gyomor adenokarcinóma után H. pylori
fertőzés és kihívás egy kémiai karcinogén, összehasonlítva a normál egerekben [6]. Továbbá, polimorfizmusok promoter régiójában iNOS, ami magasabb transzkripciós aktivitás, korrelálnak nagyobb gyakorisággal az intesztinális típusú gyomorrák japán nők [21].

Ezzel szemben a humán H . pylori
fertőzés, SS1-fertőzött C57BL /6 egerekben mutatott génexpressziós profil a gyomornyálkahártya indikatív makrofág M1 polarizáció. A génexpressziós analízise az szortírozott makrofágok izolált gyomornyálkahártya fertőzött egerek megerősítette, hogy expressziója az M1 markerek iNOS és CXCL11 gazdagodott a rendezett makrofág populáció. Továbbá, az M1-es polarizációs gyomor makrofágok jelentősen felgyorsult előzetes oltást. Már négy héttel a fertőzés után, immunizált egerekből serkentett expresszióját iNOS és CXCL11 egy hasonló szinten, mint ami látható 26 hét után a fertőzött csak-egerekben. Tanulmányok iNOS-deficiens egerekben kimutatták, hogy az iNOS elősegíti fejlődését atrófia és a rák, a gyomor nyálkahártya alatt Helicobacter
fertőzés [6], [22]. Ráadásul clearance H. pylori
védőoltás után függetlenül történik iNOS [23]. Így iNOS hozzájárulni látszik, hogy a fogadó patológiai helyett védelem alatt fertőzés H. pylori
. Ezért, ha a fokozott termelését iNOS a gyomornyálkahártya megmarad oltás után, lehet, hogy egy nemkívánatos mellékhatása, amelyek fokozhatják a súlyos H. pylori
indukált gyulladás és a rosszindulatú folyamatok, hacsak steril immunitás érhető el. Ugyanakkor a relatív hozzájárulását iNOS fogadó patológia versus védelem alatt különböző szakaszaiban H. pylori
fertőzés szavatolja a további vizsgálatot.

Megfigyeltük szekvenciális felvételét veleszületett sejtek a gyomor nyálkahártya a SS1-fertőzött egerek, a makrofágok felhalmozódó meglehetősen késői során fertőzés (26 hét). Ezzel ellentétben, a frekvenciák a gyomor neutrofilek és eozinofileket a gyomornyálkahártya megnövekedett nyolc héttel a fertőzés után, és szintje emelkedett maradt 26 hét. A felhalmozódás makrofágok történt sokkal gyorsabb a vakcinált egerekben, amely esetben a gyakorisága gyomor makrofágok növeltük már három héttel a fertőzés után. Korábban, neutrofilek kimutatták, hogy kell felvenni, hogy a gyomor nyálkahártya a SS1-fertőzött egerek két szakaszban, egy korai fázisában tetőzik 1-2 nappal a fertőzés után, és egy késői fázisú kezdve 2-3 héttel a fertőzés után [24]. A toborzás minta, hasonló a neutrofilek, szintén leírtak gyomor makrofágok [24]. Azonban a makrofágok határozták meg CD11b ^{+ Gr1 - sejtek [24], a sejt populáció kezünkben elsősorban áll eozinofil (ld. 1. és 2. ábra). Asim et al. definiált makrofágok CD11b + F4 /80 + sejtek, és a megfigyelt egy korai csúcs makrofág számot a gyomornyálkahártya 1-2 nappal a fertőzés után a H. pylori
[15]. Ezen túlmenően, a számát makrofágok ismét emelkedett 60 és 120 nappal a fertőzés után képest naiv egerekben [15]. Mi kiterjeszteni ezeket az eredményeket, azt mutatja, hogy a felvételi ilyen veleszületett sejt populációk fennmarad egészen 26 héttel a fertőzés után. Emellett leírjuk a felhalmozási eozinofileket a gyomor nyálkahártya, egy sejtpopuláció, amely messze felülmúlják a gyomor makrofágok és neutrofilek (ábra. 1). Sőt, a szerepe eozinofil H. pylori katalógusa indukált gyomorhurut kell vizsgálni. Eozinofilek és makrofágok Share expressziója számos markerek, beleértve a CD11b és F4 /80 (1., [25]). Ezért több marker elemezni kell egyszerre annak érdekében, hogy megkülönböztetni ezeket a veleszületett sejt populációk. Katalógusa}

tudtunk azonosítani két populáció dendritikus gyomornyálkahártya egerek. Mindkét alcsoport magas szinten expresszált CD11c és az MHC-II, hiányzott kifejezése a makrofág marker F4 /80, de különbözött tekintetében kifejezése CD103. A frekvencia a gyomor CD103 ^{+ DS nem változott után négy, nyolc vagy 26 hetes H. pylori fertőzés
. Ezzel szemben a mi tanulmány egy friss tanulmány szerint Kao et al. nem találtunk CD103 + DS gyomornyálkahártya nem fertőzött egerekben [26]. Inkább a CD103 + DS alakult 24 óra után H. pylori fertőzés
. Mivel az elemzés időpontjait különböznek, hogy a vizsgálati és a kísérleteink, nehéz közvetlenül összehasonlítani az eredményeket. Katalógusa}

Annak ellenére, hogy az M1 makrofágok általában fokozzák az MHC-II és kostimulációs molekulák, nem tudtunk kimutatni fokozott MHC -II vagy CD86 gyomor makrofágok vagy CD103 ^{+ dendritikus akár nem immunizált vagy immunizált egerek a fertőzés után. Ezzel szemben, in vitro inkubáció H. pylori
humán monociták [27], a humán monocita eredetű dendritikus sejtek [28], [29], [30], [31], rágcsáló csontvelő eredetű dendritikus sejtek [32], [33], vagy a humán primer gyomor- DC [34], serkenti upreguláció kostimulációs molekulák és MHC-II. Ezért az a tény, hogy fokozzák az MHC-II és a CD86 gyomor makrofágok és CD103 + dendritikus krónikus H. pylori
fertőzés okozhatja a gyulladásos miliő, és nem a baktériumok által önmagában. Sőt, a kölcsönhatás DS és H. pylori
in vitro nem szükségszerűen tükrözi, hogy mi történik in vivo, ahol a helyi mikrokörnyezetében a helyszínen az antigén beszerzés és az antigén prezentáció, valamint az egyenáramú részhalmaz részt vesznek az antigén bemutatása H. pylori katalógusa, befolyással lesz a válasz. Például, a szabályozó T-sejtek, amelyek elterjedtek a H. pylori
-fertőzött gyomornyálkahártya [35], [36], megakadályozhatja a túlszabályzását kostimulációs molekulák és az MHC-II DCS [37]. Ezen túlmenően, az IL-10 képes megakadályozni a túlszabályzását kostimulációs molekulák és az MHC-II a makrofágokon és DCS [38].}

az akut gyulladásos válaszokat, makrofágok jellemzően polarizált az M1 és gyakoroljon erős anti-mikrobiális hatásokat. Például fertőzés Salmonella typhimurium katalógusa vagy Listeria monocytogenes katalógusa indukál M1 polarizációja makrofágok, amely szükséges az irányítást a fertőzés [39]. A gyulladás jellemzi eltolódást makrofág polarizáció M2, amely elősegíti a szövetek gyógyulását. Tuberkulózisos betegek megjelenítéséhez fokozott termelése Th2 citokinek, mint a fertőzés előrehaladtával [40], [41], amely képes indukálni M2 polarizációja makrofágok. Egereknél, M1 polarizációja makrofágok képezi korai válasz Mycobacterium tuberculosis katalógusa, míg alveoláris makrofágok polarizált M2 késő szakaszában fertőzés [42]. Azonban a váltás a makrofágok által indukált polarizáció krónikus fertőzések gyakran eredményez csökkentett kapacitás a makrofágok megölni a behatoló baktériumokat [39], [43]. Másrészt, a krónikus gyulladás tartós M1 makrofág polarizációt jár fokozott kockázata a rák kialakulásának. [4] katalógusa

Van makrofágok hozzájárulnak, hogy a fogadó elleni védelem H. pylori katalógusa? Ellentétben a neutrofilek, makrofágok nem gyakran látható a gyomor lumenbe transzlokáció után az egész epithelium [44]. Mivel H. pylori
preferenciálisan tartózkodnak a gyomor nyálkahártya réteg vagy csatolt gyomornyálkahártya sejtek, makrofágok nem jön közvetlen érintkezésbe egész baktériumok. Valóban, kimerülése makrofágok által droggal feltöltött liposzómákat nem volt hatása a H. pylori katalógusa kolonizáció [16], ami arra utal, hogy a makrofágok nem közvetlenül járulnak hozzá a fogadó elleni védelem H. pylori
. Ezzel szemben a makrofágok elősegítik a gyomor patológia. Például liposzóma-közvetített kiürülését makrofágok enyhíthető a gyomorhurut által kiváltott H. pylori fertőzés katalógusa [16]. Ezen túlmenően, a szelektív törlését I-kB-kináz β mieloid sejtekben, ami megakadályozza, NF-kB ezekben a sejtekben, gátolta a gyomor atrófia után H. felis katalógusa fertőzés [45]. Így makrofágok úgy tűnik, nem járulnak hozzá Helicobacter katalógusa távolság, hanem inkább elősegíti a gyomor patológia. Katalógusa

Összefoglalva, ez a vizsgálat azt mutatja, hogy az oltás egerek ellen H. pylori katalógusa felerősíti M1 polarizációja gyomor makrofágok. Hasonló jelenség látható a humán atrófiás gasztritisz, ahol a vegyes M1 /​​M2 polarizáció jelen komplikációmentes gastritis helyébe egy M1-dominált polarizáció. Ez olyan daganatkeltő gyulladás, és a változó makrofág polarizáció M1 M2 ezért jelentenek terápiás célpont a krónikus H. pylori fertőzés katalógusa.

Anyagok és módszerek katalógusa

Etikai nyilatkozat katalógusa

A vizsgálatot a kormány által jóváhagyott állat etikai bizottság (Göteborgs djurförsöksetiska nämnd, 328/2008 és 254 /2009). A regionális emberi etikai bizottság Västra Götaland megye Svédország (706/03 és 85/06) jóváhagyta a vizsgálatot, és írásos beleegyezésüket adták az összes résztvevő. Ez az egyetlen olyan hatóság, amely az etikai engedélyt embereken folytatott kutatás Svédországban, és ez közvetlenül nem kapcsolódó, a kórházak és az egyetemek. Katalógusa

Egér katalógusa

nőstény C57BL /6 egereket a Charles River Laboratories (Sulzfeld, Németország), vagy abban az esetben, a vakcinázási kísérletek Taconic (Ejby, Dánia). Az egereket korban 8-12 hét. Katalógusa

A baktériumok és a fertőzés egerek katalógusa

H. pylori
SS1 növesztettünk Columbia ISO agarlemezeken 2 napon át 37 ° C-on, ami után azokat átadta a Brucella táplevesben kiegészített 5% magzati borjúszérumot (FCS) és antibiotikumokat (vankomicin, 10 ug /ml; B-polimixin , 20 U /ml, trimetoprim, 5 ug /ml), és inkubáljuk rázás éjszakán át 37 ° C-on mikroaerofil körülmények között. A fertőzés előtt, a motilitás a baktériumok igazoltuk mikroszkópia. A koncentráció a baktériumok becsültük spektrofotometriásán. Az egerek 3 × 10 ^{8 telepképző egység SS1 intragasztrikusan.}

Nyelvalatti immunizálás

egereknek négy 10 ul adag 500 ng H. pylori
lizátum (előállítva törzsből Hel305 a korábban leírt [46]) kombinált 10 ug kolera toxint (List Biological Laboratories Inc., Madison, NJ) szublingválisan 1 hetes időközönként [47], [48]. Két héttel az utolsó immunizálás után, az egereket gyomron és 3 × 10 ^{8 telepképző egység H. pylori
SS1.}

értékelése bakteriális kolonizáció

mennyiségi értékelését a bakteriális kolonizáció immunizálási kísérletekben, az egyik fele a gyomrot óvatosan mossuk PBS-sel és homogenizáljuk Ultra Turrax homogenizálóban ( IKA Labortechnika, Staufen, Németország). Sorozathígításait a homogenizátum szélesztünk Skirrow agar lemezeken. Amikor gyomor lamina propria sejteket izoláltunk az egész gyomor mennyiségi becslésére gyomor bakteriális terhelés nem hajtható végre. Ebben az esetben, a gyomor, amely vágja a nagyobb görbület mentén, és PBS-ben mostuk, gyengéden szélesztettünk Skirrow agar lemezeken. A jelenléte H. pylori katalógusa telepek megerősítette egy ureáz teszt. Ily módon tudtuk megerősíteni H. pylori katalógusa kolonizáció és továbbra is használhatja az egész gyomor a sejtek elkülönítésre. katalógusa

izolálása gyomor lamina propria sejtek katalógusa

A mirigyes gyomrot vágva 5 mm-es darabokra, és inkubáltuk összesen háromszor H.

• PLoS One: Pontosság és küszöbértékek az Pepsinogens I, II és gasztrin 17. diagnózisa Gyomor fundus atrófia: Influence of gyomorhurut
• PLoS One: Bakteriális Microbiota profilalkotás gyomorhurut nélkül Helicobacter pylori fertőzés vagy nem-szteroid gyulladáscsökkentő szer használata