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PLoS ONE: In Vivo antiossidante e antiulcera attività di Parkia speciosa etanolica Estratto di foglie di etanolo-indotta ulcera gastrica a ratti

Astratto

Sfondo

Il presente studio è stato condotto per esaminare gli effetti gastroprotettori di Parkia speciosa
etanolo-indotta lesioni mucosa gastrica nei ratti.

Metodologia /risultati principali

ratti Sprague Dawley sono stati divisi in 7 gruppi. Gruppi 1-2 sono stati via orale sfidati con carbossimetilcellulosa (CMC); gruppo 3 ha ricevuto 20 mg /kg omeprazolo e gruppi 4-7 ricevuti 50, 100, 200 e 400 mg /kg di estratto etanolico foglia, rispettivamente. Dopo 1 ora, CMC o etanolo assoluto è stato somministrato per via orale a gruppi 2-7. I ratti sono stati sacrificati dopo 1 ora. Poi, le lesioni alla mucosa gastrica sono stati stimati attraverso la valutazione del muco parete gastrica, l'aspetto macroscopico delle aree ulcera, l'istologia, immunoistochimica e saggi enzimatici. Gruppo 2 esposto lesioni della mucosa significativi, con una ridotta muco parete gastrica e gravi danni alla mucosa gastrica, mentre sono state osservate riduzioni di lesioni della mucosa per i gruppi 4-7. Gruppi 3-7 dimostrato un'inversione nella diminuzione periodica colorazione acido-Schiff (PAS) indotta da etanolo. Non sono stati osservati sintomi di tossicità o di morte durante le prove di tossicità acuta.

Conclusione

Il trattamento con l'estratto ha portato alla sovraregolazione di proteina heat-shock 70 (HSP70) e la sottoregolazione del pro BAX proteina -apoptotic. aumenti significativi dei livelli di difesa antiossidante enzimi glutatione (GSH) e superossido dismutasi (SOD) nel omogeneizzato della mucosa gastrica sono state osservate, mentre quella di un marker della perossidazione lipidica (MDA) era significativamente diminuito. La significatività è stata definita come p < 0,05 rispetto al gruppo di controllo ulcera (Gruppo 2)

Visto:. Al Batran R, Al-Bayaty F, Jamil Al-Obaidi MM, Abdualkader AM, Hadi HA, Ali HM, et al. (2013) In Vivo antiossidante e antiulcera attività di Parkia speciosa
etanolica Estratto di foglie di etanolo-indotta ulcera gastrica nei ratti. PLoS ONE 8 (5): e64751. doi: 10.1371 /journal.pone.0064751

Editor: Herbert B. Tanowitz, Albert Einstein College of Medicine, Stati Uniti d'America

Ricevuto: 20 gennaio 2013; Accettato: 17 Aprile 2013; Pubblicato: 28 maggio 2013

Copyright: © 2013 Al Batran et al. Questo è un articolo ad accesso libero distribuito sotto i termini della Creative Commons Attribution License, che permette l'uso senza restrizioni, la distribuzione e la riproduzione con qualsiasi mezzo, a condizione che l'autore originale e la fonte sono accreditati

Finanziamento:. Gli autori esprimere gratitudine alla Università della Malaysia per il sostegno finanziario di UM /Mohe High Impact Research Grant (HIR Concessione n F000009-21001). I finanziatori avevano alcun ruolo nel disegno dello studio, la raccolta e l'analisi dei dati, la decisione di pubblicare, o preparazione del manoscritto

Competere interessi:.. Gli autori hanno dichiarato che non esistono interessi in competizione

Introduzione

ulcere peptiche, caratterizzati dalla presenza di un danno della mucosa, sono prevalentemente causata da infezione con Helicobacter pylori
, antiaggreganti come l'acido acetilsalicilico [1], non-steroidei anti-infiammatori farmaci (FANS), come i bifosfonati orali, cloruro di potassio, farmaci immunosoppressori [2], gli inibitori del reuptake della serotonina [3], il consumo di alcol e il fumo di sigaretta [4]. Questi fattori possono causare l'erosione sottomucosa ed inibire cicloossigenasi, disturbando così la protezione dello strato di mucosa gastrica [5]. Anatomicamente, ulcere peptiche verificano soprattutto nello stomaco e duodeno prossimale. ulcere peptiche sono causate da uno squilibrio tra difensiva (secrezione di muco, barriera mucosa, il flusso di sangue, la rigenerazione cellulare e agenti protettivi endogeni) e distruttiva (acido e la secrezione di pepsina) funzioni del sistema gastrico [6]. lesioni gastriche indotte da alcol alterano i fattori di difesa gastrici quali secrezione di muco e mucosa circolazione [7]. L'etanolo provoca lesioni necrotiche nella mucosa gastrica attraverso percorsi multipli, producendo direttamente lesioni necrotiche, che a sua volta riduce la secrezione di fattori difensivi, bicarbonato e la produzione di muco [8]. Il muco parete gastrica è pensato di svolgere un ruolo importante come una barriera difensiva contro i danni gastrointestinali [9]. secrezione di muco è considerato un fattore cruciale difesa che protegge la mucosa gastrica da lesioni [10]. Il livello di muco parete gastrica è stata valutata in precedenza ed è utilizzato come indicatore di secrezione di muco gastrico [11]. I ricercatori hanno segnalato un gran numero di piante medicinali con proprietà antiulcera [12] - [14]. farmaci a base vegetale rappresentano una grande risorsa non sfruttata che ha mostrato un enorme potenziale terapeutico. Parkia speciosa
è anche conosciuto come fagiolo di puzza o "petai." Tutto copre, baccelli dei fagioli piatte lunghe con semi verdi. Questi fagioli sono popolari in Asia del sud-est, tra cui la Malaysia e l'India nord-orientale. I fagioli sono venduti nei baccelli o come semi che sono già separati dai baccelli. I fagioli possono subire delle scosse sono in salamoia ed esportati. Inoltre, P. speciosa
è ritenuto dai residenti locali di possedere proprietà medicinali [15] ed è stato segnalato per esporre ipoglicemico, antibatterica, antitumorale e l'attività antiossidante [16]. Il presente studio è stato condotto per stabilire l'antiossidante e antiulcera attività del Parkia speciosa
estratto di foglie di etanolo contro le ulcere gastriche etanolo-indotta nei ratti.

Materiali e Metodi

Materiali e reagenti

Tutti i materiali ei reagenti sono stati ottenuti da Sigma (Sigma Aldrich, Germania), e la MDA, SOD e kit di misurazione di attività di GSH sono stati acquistati da Cayman Chemical Company (Cayman, stati Uniti d'America). Omeprazolo è stato utilizzato come riferimento antiulcera di droga ed è stato ottenuto presso l'Università di Malaya Medical Centre (UMMC). Il farmaco è stato sciolto in 0,5% (w /v) carbossimetilcellulosa (CMC) e somministrato per via orale a ratti alla dose di 20 mg /kg di peso corporeo (5 ml /kg) secondo Mahmood et al [17].

materiale vegetale e Preparazione del greggio estratto

Fresh Parkia speciosa
foglie sono stati ottenuti da etno Resources (Selangor, Malesia). L'identità della pianta è stata confermata al Rimba Ilmu Erbario, Istituto di Scienze Biologiche, Università della Malaysia attraverso il confronto con il campione di voucher. Le foglie fresche sono stati appesi a testa in giù in un luogo caldo e asciutto (lontano dalla luce diretta del sole) con una buona circolazione dell'aria per due settimane ad asciugare. Quindi, usando un miscelatore elettrico, le foglie secche sono state convertite in polvere finissima. Una quantità di 100 g della polvere era bagnato per 3 giorni in un pallone contenente 500 ml di etanolo al 95%. La miscela è stata filtrata con un panno carta mussola e il filtro fine (Whatman n ° 1). La miscela è stata filtrata distillata usando un evaporatore rotante (Eyela, USA) e ha prodotto quasi il 17,4% di massa secca. L'estratto secco è stato diluito in CMC e somministrato per via orale a ratti alla dose di 50, 100, 200 o 400 mg /kg di peso corporeo (in 0,5% CMC, 5 ml /kg di peso corporeo), in accordo con precedenti relazioni [18 ].

Tossicità acuta

maschi sani e ratti femmina Sprague Dawley (6-8 settimane) sono stati ottenuti dalla casa degli animali (Università della Malaysia, Etica n PM /07/05 /2010/1111 /MAA /R). I ratti hanno pesato tra 180-200 g. Gli animali sono stati dati pellet ratto standard e l'acqua del rubinetto ad libitum
e sono stati posti singolarmente in gabbie separate con le parti inferiori di filo a maglie larghe per evitare coprofagia durante l'esperimento. Uno studio di tossicità acuta è stata eseguita per determinare una dose sicura per il P. speciosa
estratto. Un totale di 48 ratti (24 maschi e 24 femmine) sono stati equamente divisa in 4 gruppi che hanno ricevuto il veicolo (0,5% CMC, 5 ml /kg) oppure 1, 3 o 5 g /kg di estratto di foglie (5 ml /kg) . Gli animali sono stati tenuti a digiuno durante la notte (ma ha permesso l'acqua) prima del dosaggio. Il cibo è stato sospeso per altre 3 o 4 ore dopo la somministrazione. Gli animali sono stati osservati per 48 ore dopo la somministrazione della polvere per l'insorgenza di sintomi clinici o tossicologici. La mortalità, eventualmente, è stato osservato un periodo di 2 settimane. Gli animali sono stati sacrificati mediante overdose di xilazina e ketamina anestesia il 15 ° giorno. Istologica, ematologici e parametri biochimici di siero sono stati determinati secondo i metodi standard [19]. Il comitato etico per la sperimentazione animale della Facoltà di Medicina, Università della Malaysia, ha approvato l'esperimento. Nel corso degli esperimenti, tutti gli animali sono stati trattati umanamente secondo i criteri descritti nella "Guida per la cura e l'uso di animali da laboratorio" [20].

animale Stock

adulti sani ratti Sprague Dawley (6-8 settimane), ciascuno del peso tra 200-220 g, sono stati ottenuti dalla casa degli animali presso l'Università di Malaya (Etica n PM /12/05/2010 /MAA /R). I ratti sono stati divisi casualmente in 7 gruppi di 6 ratti ciascuno e hanno ricevuto una dieta a pellet di serie e l'acqua del rubinetto ad libitum.
I ratti sono stati posti singolarmente in gabbie separate con le parti inferiori di filo a maglie larghe per evitare coprofagia durante l'esperimento .

ulcera gastrica induzione da etanolo

Gli animali sono stati tenuti a digiuno per 24 ore prima dell'esperimento [17]. Gruppi 1 e 2 hanno ricevuto veicolo (0,5% CMC) per via orale. Gruppo 3 ha ricevuto una dose orale di 20 mg /kg di omeprazolo in 0.5% CMC (5 ml /kg), e gruppi di 4-7 ricevuti estratto etanolico di Parkia speciosa
a dosi di 50, 100, 200 o 400 mg /kg come pretrattamento. A 1 ora dopo il pretrattamento, il veicolo o etanolo assoluto è stato somministrato per via orale a gruppi 2-7 [12]. Un'ora più tardi, i ratti sono stati sottoposti ad eutanasia, e loro stomaci sono stati sezionati.

Misura della gastrico succo Acidità

Gli animali sono stati sacrificati, e loro stomaci sono stati rimossi. Il contenuto dello stomaco sono stati raccolti, misurati, centrifugati, e sottoposti ad analisi per acidità titolata contro 0,01 N NaOH a pH 7 [21].

Determinazione del gastrico parete muco (GWM)

Il modificati procedura di Piper et al. è stato utilizzato per analizzare il muco parete gastrica. I segmenti ghiandolari dallo stomaco del controllo e ratti trattati sono stati rimossi e pesati. Ciascun segmento è stata trasferita immediatamente al blu Alcian 1% (in soluzione di saccarosio, tamponata con acetato di sodio, pH 5), e il colorante in eccesso è stato rimosso mediante lavaggio con soluzione di saccarosio. Il colorante in complesso con muco parete gastrica è stata estratta con cloruro di magnesio. Un campione 4 ml dell'estratto blu è stata poi agitata con un ugual volume di etere etilico. L'emulsione ottenuta è stata centrifugata, e l'assorbanza dello strato acquoso venne misurata a 580 nm. La quantità di Alcian blu estratto per grammo (al netto) di tessuto ghiandolare è stata quindi calcolata [22].

macroscopico gastrico Lesione Valutazione

Gli stomaci di ratto sono stati esaminati sotto uno stereomicroscopio. La lunghezza e la larghezza (mm) di ogni singola lesione emorragica è stata misurata mediante un planimetro (10 × 10 mm 2 = area dell'ulcera) sotto un microscopio da dissezione (1,8 ×). L'area dell'ulcera (UA) è stato calcolato utilizzando la somma delle aree di tutte le lesioni per ogni stomaco secondo un protocollo precedentemente pubblicato [23]. L'UA è stato calcolato utilizzando la seguente formula:

percentuale di inibizione (I%) è stato calcolato come segue:.

Antiossidante Attività

Preparazione di omogeneizzato

gastrico tessuto omogenato 10% (w /v) è stato preparato in tampone fosfato ghiacciato 50 mM (pH 7.4) contenente un mammifero cocktail di inibitori delle proteasi e quindi centrifugati a 4000 rpm per 10 minuti (4 ° C).

Misurazione della superossido dismutasi (SOD) di attività.

l'attività SOD è stata misurata in base al protocollo di Sun ed altri [24]. L'attività enzimatica è stata valutata misurando la capacità dell'enzima di inibire la riduzione fotochimica di tetrazolio nitro-blu (NBT). In questo saggio, la riduzione fotochimica di riboflavina genera O 2-; ciò riduce la NBT per produrre un sale formazano che assorbe la luce alla lunghezza d'onda di 560 nm. In presenza di SOD, riduzione NBT è inibita perché l'enzima converte il radicale superossido in perossido. I risultati sono espressi come la quantità di SOD necessaria per inibire il tasso di riduzione NBT del 50% in unità dell'enzima per grammo di proteine. I surnatanti delle omogenati sono stati centrifugati una seconda volta (20 min, 12.000 rpm, 4 ° C), e il supernatante risultante è stata determinata. In una camera oscura, 1 ml del reagente (50 mM tampone fosfato, 100 nM EDTA e 13 mM L-metionina, pH 7,8) è stato miscelato con 30 ml di campione, 150 ml di 75 mM NBT e 300 ml di 2 mM riboflavina. La soluzione viene poi esposto a luce fluorescente (15 W) per 15 min e letta utilizzando uno spettrofotometro a 560 nm.

Misurazione della perossidazione lipidica (MDA).

Tissue malondialdeide (MDA) ( mmol /L) è stato determinato con il metodo a doppia riscaldamento di Draper e Hadley [25]. Una miscela di reazione contenente 8,1% di solfato di sodio dodecil, tampone 20% acetato (pH 3,5) e di acido tiobarbiturico 0,8% (TBA) è stato mescolato bene con 0,2 ml di stomaco omogenato tissutale per 3 minuti e poi incubate a 95 ° C per 60 min. Dopo raffreddamento, la sostanza TBA-reattiva (MDA) è stato estratto con 1 ml di H 2O e 2,5 ml di una n-butanolo: miscela piridina (15:01, v /v). Lo strato organico superiore che contiene il MDA, che è stato prodotto dalla perossidazione lipidica, è stata misurata a 532 nm.

Determinazione del glutatione totale (GSH).

La mucosa gastrica è stato pesato, tritata con le forbici e omogeneizzati a 48 ° C in tampone fosfato salino (PBS). L'omogenato è stato immediatamente precipitato con acido tricloroacetico 0,1 ml al 25%, ed il precipitato è stato rimosso mediante centrifugazione a 4200 rpm per 40 min a 4 ° C. Il supernatante è stato usato in un saggio 5,5'-ditiobis (2-nitrobenzoico acido) per determinare GSH. Assorbanza è stata misurata a 412 nm utilizzando uno spettrofotometro [26].

L'esame istologico della mucosa gastrica

I campioni parete gastrica sono stati fissati in formalina al 10% tamponata per 24 ore prima di paraffina trattamento dei tessuti (Leica, Germania). I tessuti dello stomaco sono stati sezionati ad uno spessore di 5 micron e colorati con ematossilina ed eosina per valutare la degenerazione istologica [27].

Studio delle mucose glicoproteine ​​

Le sezioni della porzione ghiandolare del ratto stomaco sono state colorate con acido periodico di Schiff (PAS), come descritto da McManus et al [28].

colorazione immunoistochimica

la colorazione immunoistochimica per le proteine ​​HSP70 e BAX è stato condotto secondo il protocollo del produttore ( DakoCytomation, Stati Uniti d'America).

Analisi statistica

Tutti i valori sono riportati come media ± SEM e sono stati analizzati mediante ANOVA seguito dal test post-hoc di Tukey per confronti multipli utilizzando il pacchetto statistico per il software Scienze Sociali (SPSS 18). Le differenze tra le medie sono state considerate statisticamente significative quando il valore p era inferiore a 0,05.

Risultati

Studio di tossicità acuta

Nessun morte o tossicità significativa è stata osservata nel controllo o i gruppi di trattamento (dosi di estratto di 1, 3 o 5 g /kg per 14 giorni), valutata sulla base di osservazioni cliniche e istopatologiche.

Gross Valutazione delle lesioni gastriche

l'attività antiulcera della Parkia speciosa
estratto di foglie nel modello di lesione gastrica etanolo-indotta è riportata nella tabella 1. I risultati hanno dimostrato che i ratti pretrattati con omeprazolo o Parkia speciosa
estrae prima del trattamento con assoluta etanolo (gruppi 3-7) esposte zone sensibilmente minori di ulcera gastrica di fatto gruppo 2 (Figura 1). Etanolo assoluto prodotta ampi e visibili lesioni emorragiche nella mucosa gastrica. Parkia speciosa
estrarre significativamente inibito la formazione di ulcere indotte da etanolo assoluto e, ovviamente, è diminuito il danno della mucosa gastrica in modo dose-dipendente, vale a dire, il Parkia speciosa
estrarre ha soppresso significativamente la formazione di ulcere . Curiosamente, un appiattimento delle pieghe della mucosa gastrica è stata osservata nel gruppo 7. La protezione della mucosa gastrica è anche il più importante nel gruppo 7 (Tabella 1 e Figura 1). L'inibizione della formazione di ulcera gastrica nel gruppo 6 è stato significativo e paragonabile a quella osservata nel gruppo di trattamento con omeprazolo (gruppo 3) (Tabella 1 e Figura 1).

L'effetto di Parkia Speciosa su GWM, SOD, MDA e GSH

Gli effetti di P. speciosa recensioni sul muco parete gastrica a lesioni della mucosa gastrica etanolo-indotta nei ratti sono stati esaminati. Gruppo 2 mostrato una significativa diminuzione della Alcian blu capacità di legame del muco parete gastrica, mentre i gruppi 4-7 hanno dimostrato un miglioramento significativo nella Alcian blu capacità legante della mucosa gastrica. Analogamente, nel gruppo 2, etanolo riduce l'attività SOD, mentre i gruppi 4-7 mostravano un significativo aumento dell'attività enzimatica SOD rispetto al gruppo 2. L'attività MDA era significativamente superiore nel gruppo 2 rispetto al gruppo 1, mentre i gruppi 4-7 dimostrato significativamente diminuita attività MDA. Inoltre, l'effetto del Parkia speciosa
estrarre sul totale GSH in omogenati mucosa gastrica è stata valutata. trattamento etanolo ha provocato un impoverimento significativo di GSH nel gruppo 2 rispetto al gruppo 1. Al contrario, i gruppi 47 esposti contenuto di GSH significativamente aumentata (Figura 2).

istologica Valutazione delle lesioni gastriche

osservazioni istologiche del gruppo 1 ha indicato che non vi era alcuna interruzione dell'epitelio superficie, mentre l'esame istologico ha mostrato gravi danni alla mucosa gastrica nel gruppo 2, con lesioni necrotiche penetrano in profondità nella mucosa accompagnato da esteso edema e leucociti infiltrazione dello strato sottomucosa (Figura 3). Gruppo 4 ha esposto perturbazione moderata del epitelio di superficie, con edema e dei leucociti infiltrazione dello strato sottomucosa, e il gruppo 5 ha mostrato una perturbazione lieve dell'epitelio superficie con edema ed infiltrazione dei leucociti nello strato sottomucosa. Gruppo 6 ha mostrato interruzione lieve dell'epitelio superficie con edema ed infiltrazione dei leucociti dello strato sottomucosa. Gruppo 7 ha mostrato lieve edema e dei leucociti infiltrazione dello strato sottomucosa, ma nessuna rottura dell'epitelio superficie. Gruppo 3 ha esposto una perturbazione lieve dell'epitelio di superficie, con edema della sottomucosa e l'infiltrazione dei leucociti. Questi risultati hanno dimostrato che gli estratti vegetali esercitato effetti citoprotettivi in ​​modo dose-dipendente (Figura 3).

acido periodico-Schiff (PAS)

La mucosa gastrica negli animali pretrattati con Parkia speciosa
estratto o omeprazolo (gruppo 3-7) visualizzato aumentato intensità di colorazione PAS rispetto ai ratti del gruppo 2, che indica un aumento del contenuto di glicoproteine ​​della mucosa gastrica nei ratti pretrattati (Figura 4).

immunoistochimica

l'espressione della proteina HSP70 nella mucosa gastrica è stata downregulated nel gruppo 2, ma upregulated nel gruppo 3-7 (Figura 5)
.

colorazione immunoistochimica della mucosa gastrica di ratti pretrattati con Parkia speciosa
estrarre o omeprazolo dimostrato un downregulation della proteina BAX (Figura 6). Inoltre, i livelli di proteina BAX nel gruppo 2 ratti erano superiori a quelli dei gruppi 3-7 (Figura 6).

Discussione

Il test di tossicità acuta non ha suggerito alcun tossicità o mortalità nel P. speciosa
ratti -treated. Questa prova ha rivelato che l'impianto è sicuro e nessuna tossicità quando somministrato per via orale fino a 5 g /kg. Alcuni farmaci antiulcera sono stati segnalati per aumentare la quantità di secrezione di muco gastrico nella mucosa gastrica [29]. Il pretrattamento con Parkia speciosa
estrarre significativamente aumentato il contenuto di muco gastrico nei ratti con ulcere etanolo-indotta, indicando che l'effetto gastroprotettori di Parkia speciosa
è mediato in parte dal mantenimento del muco parete gastrica. Questo muco è composto da glicoproteine ​​mucina di tipo, che possono essere rilevati dal blu Alcian [30]; l'aumento Alcian colorazione blu dimostra l'effetto protettivo della somministrazione orale di Parkia speciosa
, che può essere mediata dalla formazione di complessi di protezione tra Parkia speciosa Comprare e il muco che funge da barriera contro agenti necrotizzanti introdotto allo stomaco [31]. Qui, il Parkia estratto speciosa
impedito la diminuzione della concentrazione di muco parete gastrica dopo trattamento con etanolo. Così, una possibile meccanismo con cui la mucosa gastrica è protetto da Parkia speciosa
comporta il rafforzamento della resistenza barriera mucosa, generato da un rivestimento protettivo. E 'probabile che l'effetto protettivo della Parkia speciosa
è dovuto almeno in parte al mantenimento dello strato di muco nella mucosa gastrica; Parkia speciosa
è stato osservato per evitare l'esaurimento di muco parete gastrica etanolo-indotta. I risultati del presente studio ha dimostrato che Parkia speciosa
estratto è una attività antiulcera efficace contro le lesioni della mucosa gastrica etanolo-indotta. L'estratto della pianta ha aumentato il contenuto di muco della parete gastrica, che è coerente con i risultati riportati da Thirunavukkarasu et al. [32].

I nostri risultati hanno rivelato la protezione della mucosa gastrica e l'inibizione di leucociti infiltrazione nella parete gastrica nei ratti pretrattati con estratto di Parkia speciosa
. L'attivazione e l'infiltrazione di neutrofili sembrano essere coinvolti nei processi iniziali che formano queste lesioni. Analogamente, Abdulla et al. [12] hanno dimostrato che la riduzione di infiltrazione di neutrofili nei tessuti gastrici ulcerate contribuito a prevenire ulcere gastriche in ratti. Wasman et al. [33] hanno dimostrato che la somministrazione orale di estratto vegetale prima della somministrazione di etanolo significativamente diminuita infiltrazione di neutrofili nella mucosa gastrica. L'etanolo provoca gravi danni alla mucosa gastrica e porta ad una maggiore infiltrazione dei neutrofili in questo tessuto.

Il presente studio ha stabilito che il pretrattamento con Parkia speciosa
ridotto neutrofili infiltrazione nel tessuto ulcerato. Abbiamo anche osservato un appiattimento delle pieghe della mucosa, il che suggerisce che l'effetto gastroprotettori del Parkia speciosa
estratto di foglie può essere attribuito ad una diminuzione della motilità gastrica. Cambiamenti nella motilità gastrica sono stati implicati nello sviluppo e nella prevenzione delle lesioni gastriche sperimentali. Il rilassamento dei muscoli circolari può proteggere la mucosa gastrica mediante un appiattimento delle pieghe. Questo appiattimento aumenta la superficie mucosa esposta agli agenti necrotizzante e riduce il volume delle sostanze irritanti gastrici che vengono a contatto con la cresta Rugal [12], [33].

tessuto omogenato gastrico preparati dai gruppi che sono stati pretrattati con estratto della pianta esposta una significativa attività antiossidante, con livelli di MDA e elevati livelli di GSH e SOD, è sceso in risposta allo stress ossidativo a causa di un trattamento di etanolo. SOD converte superossido in perossido di idrogeno (H 2O 2), che si trasforma in acqua catalasi nei lisosomi o glutatione perossidasi nei mitocondri [34]. MDA è il prodotto finale della perossidazione lipidica e viene utilizzato per determinare i livelli di perossidazione lipidica [35]. Perossidazione lipidica provoca una perdita di fluidità di membrana, trasporto di ioni compromessa e l'integrità della membrana e in ultima analisi una perdita di funzione cellulare.

I nostri risultati sperimentali indicano che Parkia speciosa
estratto etanolico inibita significativamente gli effetti negativi della etanolo sui livelli di GSH gastrico a tutti i dosaggi utilizzati. Il livello di GSH gastrico era più alto per la dose di 400 mg /kg e disponibilità per la dose di 50 mg /kg, mentre il livello di GSH era diminuita nel gruppo di controllo ulcera. Gli attuali risultati e articoli precedentemente pubblicati indicano che vi è un rapporto importante tra i livelli di GSH gastrico e la gravità delle ulcere. GSH e GSH-correlati enzimi sono noti come agenti protettivi dei tessuti importanti per le loro proprietà antiossidanti [36], [37].

L'acido periodico di Schiff (PAS) metodo istochimico produce una caratteristica colorazione Carmine nelle regioni di stomaco che secernono mucopolisaccaridi. Le sezioni di tessuto dal gruppo di ratti che è stato trattato con estratto /kg vegetale 400 mg mostravano colorazione intensa riflettendo secrezione di muco nelle ghiandole gastriche. produzione di muco è uno dei principali meccanismi di difesa della mucosa gastrica locale [38].

BAX promuove l'apoptosi [39], mentre BCL-2 inibisce questo processo. L'apoptosi può essere causata da uno squilibrio nella espressione di proteine ​​antiapoptotiche BCL-2 famiglia e proteine ​​BAX apoptosi nelle ulcere da stress [40]. HSP70 è una proteina di kDa 70 dalla famiglia HSP che viene espresso in cellule di mammifero. Queste proteine ​​sono responsabili per la protezione dei processi omeostatici cellulari da lesioni ambientali e fisiologici preservando la struttura delle proteine ​​normali e la riparazione o la rimozione delle proteine ​​danneggiate [41], e lo studio di questa proteina può quindi fornire dati interessanti per chiarire i possibili meccanismi d'azione . HSP70 difende le cellule dallo stress ossidativo o shock termico. specie reattive Etanolo generati (ROS) normalmente agiscono per inibire l'espressione di HSP70 e aumentare l'espressione di BAX. HSP70 impedisce queste proteine ​​denaturate in parte da aggregare e permette loro di ripiegare. L'up-regolazione di HSP70 che è stato osservato in questo studio suggerisce che il Parkia speciosa
estratto protetto i tessuti dello stomaco attraverso la sovraregolazione di HSP70. Inoltre, HSP70 è stato suggerito di esercitare la propria attività citoprotettiva proteggendo mitocondri e interferendo con il programma apoptotico indotto da stress. La colorazione immunoistochimica ha mostrato che l'espressione della proteina BAX era downregulated in ratti pretrattati con estratto di Parkia speciosa
.

Conclusione

In conclusione, P. speciosa
estratto è stato chiaramente dimostrato di funzionare come un agente antiulcera. I risultati suggeriscono che il P. speciosa
estratto può agire migliorando la difesa della mucosa gastrica e /o inibendo la sintesi dei leucotrieni. L'estratto della pianta protetto i tessuti dello stomaco attraverso l'up-regolazione della HSP70 e downregulation della proteina BAX. Parkia speciosa
invertito la diminuzione della colorazione PAS indotta da etanolo, ha aumentato significativamente le attività di GSH e SOD, e diminuito il livello di perossidazione lipidica (MDA) nel P. speciosa-
gruppi pretrattati.

Riconoscimenti

Gli autori sono grati al personale della Facoltà di Medicina, e Animal House per la cura e la fornitura di ratti e agli altri che hanno partecipato a questo lavoro.

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