Stomach Health > Mo. Gesondheet >  > Gastric Cancer > Gastric Cancer

PLOS NËMMEN: N-Terminal Polypeptide vun Annexin A2 Verloschter Wonn vun Mycoplasma hyorhinis zu Gastric Cancer BTS

Wat VerfÜgung

Mycoplasma Wonn am Mënsch a seng kontaminéierte zu Zell Kulturen si weltwäit Problemer. D'Drogen am Moment sinn fir Präventioun oder bestéet mycoplasma Wonn leiden héich Empfindlechkeet, staark Resistenz an héich toxicity. Eis virdrun Aarbecht gewisen, datt Mycoplasma hyorhinis VerfÜgung ( M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung) Wonn vun der Interaktioun tëscht p37 vun M VerfÜgung mediated war. hyorhinis VerfÜgung an Annexin A2 (ANXA2) vum Provider Zellen, awer d'respektiv Wäert vun dëse Mechanismus war onbekannt. Ëmzestoussen, Wierderbuch mir der N-Uschloss vun ANXA2 polypeptide (A2PP) an fonnt dass A2PP d'Wonn vun M VerfÜgung geloss hätt. hyorhinis VerfÜgung zu gastric Kriibs Zellen an Spär M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn-entschlof Zell Migratioun. Doriwwer eraus, hunn mir dass A2PP M VerfÜgung reduzéiere kënnt. hyorhinis VerfÜgung kontaminéierte Trip Zellen. Desweideren, am Verglach mat de kommerzielle Antibiotiken Toast zu Zell Kultur benotzt ze verhënneren M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn, bewisen A2PP eng méi efficace, mä eng héich toxicity op Zell Wuesstem. Also, eiser Etude fir d'éischte Kéier réischt A2PP d'Potential fir d'Behandlung an d'Préventioun vun M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn VerfÜgung

Fro:. Yuan S, Qu L, Shou C (2016) N-Terminal Polypeptide vun Annexin A2 Verloschter Wonn vun Mycoplasma hyorhinis VerfÜgung zu Gastric Cancer BTS . PLoS NËMMEN 11 (1): e0147776. Doi: 10.1371 /journal.pone.0147776 VerfÜgung

Redakter: Gernot Zissel, Universitatsklinikum Freiburg, LËTZEBUERG VerfÜgung

Arnaque: 16 Oktober 2015; Akzeptéiert: 7 Januar 2016; Publizéiert: 26. Januar 2016 zu

Copyright: © 2016 Yuan et al. Dëst ass eng oppen Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung

Data Disponibilitéit:. All relevant Date sinn bannent de Pabeier. . Finanzéiert duerch National Natural Science Foundation of China (81572532): Microarray Donnéeën gouf zu NCBI Gene Expression Omnibus (Geo) (Bäitrëtt no.GSE73777) VerfÜgung

Funding verschéckt. http://www.nsfc.gov.cn/publish/portal1/. SCC scho der Finanzéierung. D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisiounen ze publizéieren, oder Virbereedung vun mëttelalterlech Handschrëft VerfÜgung

Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung

Aféierung

Pathogenic mycoplasmas, dorënner mycoplasma pneumoniae ( M VerfÜgung. pneumoniae VerfÜgung), mycoplasma hyorhinis ( M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung), mëndlech mycoplasma ( M VerfÜgung. orale VerfÜgung) an Mycoplasma genitalium ( M VerfÜgung. genitalium VerfÜgung), gehéieren zu der Klass mollicutes, déi de klengste microorganism wunnen ass an der Natur a kënnen onofhängeg zweete [1-2]. Vill Studien weisen dass Wonn mat dëse mycoplasmas mat entholl Entwécklung [3-8] verbonne war. M VerfÜgung. orale VerfÜgung chromosome Anomalie vun mënschlech behënnerte Zellen bewierkt a induces Zell Transformatioun [6]. Krankheet mat M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung oder M VerfÜgung. genitalium VerfÜgung kéint d'Wanderung an invasiveness vun Aarbecht epithelial Zellen Erhéijung [3]. M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn muss Giicht, serositis, uweist a Kriibs vum Mënsch verbonne ginn [9-12]. VerfÜgung

ervirgestrach, mycoplasma kontaminéierte zu Zell Kultur ass e grave Problem an der Taux vun Trip Zellen Personal vun mycoplasma ass héich. Zell Kultur ass an Wëssenschaft vum Liewen, wéi an der Basis Fuerschung, Medeziner Prozess Fuerschung, Entwécklung an Produktioun vun der biologescher Produiten, souwéi am Beräich vun biopharmaceutical an Impfungen Produktioun oft benotzt. d'Zellen aus microbial kontaminéierte bedengt ass kritesch d'Qualitéit vun der Fuerschung ze garantéieren. D'mycoplasma kontaminéierte ass déi gemeinsam Problem zu Zell Kultur mat engem Heefegkeet vun 30% -60% [1]. Et war dës déi véier Aarte vun mycoplasmas Kont fir méi wéi 95% vun Wonn zu Zell Kultur, dorënner M VerfÜgung. orale VerfÜgung, arginine mycoplasma ( M VerfÜgung. arginini VerfÜgung), M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung, an Levin d'kee Acholeplasma ( A VerfÜgung. laidlawii VerfÜgung) [13,14,15,16]. Well vun kleng Gréisst, ass mycoplasma knapps ënnert d'Liicht microscope fonnt ginn an ass einfach vun de Fuerscher ignoréiert. An de leschte Joeren, vill fir mycoplasma Behandlung benotzt Antibiotiken ërem an der Entstehung vun mycoplasma Resistenz duerchgesat. Fir dëse Grënn, ass et Imperativ nei Agenten fir Präventioun oder falender mycoplasma Wonn ze entwéckelen. VerfÜgung

Eis virdrun Aarbecht gewisen, datt M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn hänkt op der Interaktioun vun p37 (grouss Membran FAQ vun M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung) an Provider ANXA2 duerch hir N-Uschloss Beräicher. Mir hunn och polyclonal antibody zu p37 kéint d'Wonn vun M VerfÜgung blockéieren. hyorhinis VerfÜgung an erofgoen M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung -promoted Migratioun vun gastric Kriibs Zell [17]. Baséierend op dës Entdeckungen, konnten mir eng Hypothes, datt déi peptide, laut der Aminosaier Haaptrei Wierderbuch vun ANXA2 N-Uschloss Regioun (vun 1 gett zu 30 September AA, hei mir dës peptide als A2PP genannt), Spär M VerfÜgung konnt. hyorhinis VerfÜgung Wonn via seng Konkurrenz mat ANXA2 a méiglecherweis als Drogenofhängeger benotzt ginn fir d'Préventioun M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn zu Zell Kultur. An dëser Etude, getest mir dës Hypothesen a Verglach och d'Auswierkunge vun A2PP mat aner Drogen an Préventioun M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn. VerfÜgung

spontan a Methode VerfÜgung

Zell Kultur VerfÜgung

AGS gastric Kriibs Zell Linn war aus amerikanesche Type Kultur Collection (ATCC). BGC823 gastric Kriibs Zell Linn war vun der Korea etabléierten University Leit d'Spidol an huet aus Zell Kultur Center vun Chinese Academy vun Medical Sciences (Peking, China) kaaft. AGS an BGC823 Zellen sech cultured zu RPMI-1640 mëttelfristeg nà 10% An et Kallef serum aus Invitrogen (Carlssbab, CA, USA) kritt. Mycoplasma Test war virun all nei Experimenter vun Hinnen alleguer amplification vun M VerfÜgung ëmgesat. hyorhinis p37 VerfÜgung. VerfÜgung

Mycoplasma Ausbreedung a Co-Kultur VerfÜgung

Mycoplasma Ausbreedung a Co-Kultur ass wéi virdrun gemellt duerchgefouert [17,18,19]. VerfÜgung

Antibodies an Reagents VerfÜgung

Anti-p37 monoclonal antibody PD4 war generéiert a virdrun charakteriséiert [5,20,21]. Polyclonal anti-p37 antibody war vun immunizing Kanéngchen mat GST-p37 Fusioun FAQ folgenden der Norm Protokoll kritt. Anti-EGFR an Anti-phospho-EGFR war vun Zell sécher Technology (CST, USA) kaaft. Anti-ANXA2 war vun Novus Déi (Novus Déi, USA). Anti-phospho-ANXA2 war vun Santa Cruz (Santa Cruz, CA, USA). A2PP (1 gett zu 30 September AA) a verschidde gekierzt A2PP peptides, dorënner A2PP-Nd4 (5 September bis 30 September AA), A2PP-Nd8 (9 September un 30 September AA), A2PP-Nd12 (13 drëtte bis 30 September AA), A2PP-Nd16 (17 September bis 30 September AA), A2PP-Cd4 (1 gett zu 26 September AA), A2PP-Cd8 (1 gett zu 22 rg AA), A2PP-Cd12 (1 gett zu 18 September AA), A2PP- Cd16 (1 gett zu 14 September AA), zesumme mat ënnerschiddleche Kontroll peptides (ConP) waren déi Sbsbio (Peking, China) Wierderbuch. Antimicrobials mycoplasma ech (MYCO sin) an mycoplasma II (MYCO II) goufe vun M kaaft & C Gene TECHNOLOGY (Peking, China). François (CIP) war vum Double-Crane Pharm (Peking, China). VerfÜgung

Detektioun vun M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung vun Chemeschen Hinnen alleguer (qPCR) VerfÜgung

DNA aus AGS oder BGC823 Zellen no M VerfÜgung ofgebaut gouf. hyorhinis VerfÜgung Wonn duerch DNA lysis Prellbock (50 mm Tris pH 8.5, 1 mm héich, 0,5% Tween-20, an 200 mg /L proteinase K) laut der Norm Protokoll. qPCR war mat 30 NG DNA an SYBR Green Real-Zäit Hinnen alleguer 2 × premix Kit (Takara, Otsu, Japan) benotzt Step One System vum Abi (Foster City, CA, USA) gesuergt. D'Reaktioun vun de Programmer an p37 VerfÜgung -specific primers (vir: 5'-TATCTCATTGACCTTGACTAAC-3 "ëmgedréint: 5'-ATTTTCGCCAATAGCATTTG-3") goufen virdrun [22] gemellt. Ze vergläichen M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung DNA Niveau vun Zellen, GAPDH VerfÜgung (vir: 5'-TGAAGGTCGGAGTCAACGG-3 ", ëmgedréint: 5'-CCTGGAAGATGGTGATGGG-3") war als Kontroll Kick an de Donnéeën goufen analyséiert benotzt den 2 -ΔΔCt Method. Primers sech duerch Sangon (Shanghai, China) Wierderbuch. VerfÜgung

Western Blotting VerfÜgung

Zelle vu Kultur Plat mat 2 × SDS Luede gefiermt gesammelt goufen. Polyacrylamide gelies electrophoresis (SDS-PAGE) a Western blotting sech als virdru beschriwwen standing [23]. VerfÜgung

Zell Elisa VerfÜgung

96-gutt mat Zellen rakommen sech (1 × 10 4 /gutt), gefollegt vum Traitement vun uginn peptides an Wonn vun M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung fir 24 HR. Zellen mat 0,05% glutaraldehyde Sommet sech fir 10 min, dann Zell Elisa huet ëmschriwwen virdrun [24] gesuergt. VerfÜgung

Zolitt-Phase Assay bindend an Pull-Down Assay VerfÜgung

Recombinant GST-p37 an GST Proteinen sech generéiert an sidd wéi virdru beschriwwen [17]. GST-p37 an GST sech Iwwernuechtung zu Prellbock (0.1M Na 2CO 3, 0.1M NaHCO 3, PH 9.6) an bedeckt zu 96-Wells Placke bei 4 ° C verdënntem. D'Placke waren fir dräimol vun PBS gewäsch a blockéiert vun 5% Mëllech /PBS bei Raumtemperatur (RT) fir 2 HR Lait. No mat PBS wäschen, uginn Konzentratioune vun biotin-conjugated A2PP (Wierderbuch duerch Sbsbio) gouf fir 2 HR um RT derbäi a incubated. Nom Wäschen war mat PBST fir 3 Mol, streptavidin-conjugated HRP (Baltimore Pike, West Grove, PA, USA) ugebaut a fir 30 min bei RT incubated. No Faarf Entwécklung mat Zen-Phenylenediamine (Fläch), optesch Dicht op 490 nm (OD490) war mat engem Microplate Lieser (Bio-rad 550) opgeholl. Fir banal-verwandelt assay, 100 NG GST-p37 oder GST FAQ war Co-incubated mat 20 μM biotin-A2PP an streptavidin Glaspärelen (GE Gesondheetswiesen, Dammen an dir Hären, PA, USA) zu verbindlechen Prellbock (50 mm Tris-HCl pH 8.0, 150 mM NaCl, 0,5% NP-40, 0,5 mm DTT, 1 mm PMSF, an 1 × komplett protease inhibitors) bei 4 ° C Iwwernuechtung. D'precipitates sech fir véier Mol mat verbindlechen gefiermt zou an duerch Western blotting analyséiert. VerfÜgung

Co-Immunoprecipitation VerfÜgung

M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung infizéiert Zelle (BGC823 oder AGS) waren an lysis Prellbock (50 mm Tris-HCl pH 8.0, 150 mm NaCl, 1% Triton X-100, 0,5 mm DTT, 1 mm PMSF homogenized, an 1 × inhibitors komplett protease) bei 4 ° C fir 10 min. No 12, 000 g centrifugation fir 10 min bei 4 ° C, goufen supernatants erholl. Protein lysates (500 μg) incubated mat 20 μM A2PP oder ConP, 1 μg anti-ANXA2 plus FAQ G sepharose Glaspärelen (GE Gesondheetswiesen) bei 4 ° C Iwwernuechtung. Pre-immun IgG (1 μg) war als Kontroll benotzt. Preisen Glaspärelen sech fir véier Mol mat lysis gefiermt gewäsch, an 2 × Luede gefiermt eluted, gekacht, an déi westlech blotting analyséiert. VerfÜgung

Immunofluorescence Assay VerfÜgung

BTS op coverslips an cultured Iwwernuechtung rakommen goufen. Den nächsten Dag, goufen Zellen mat uginn peptides behandelt a Personal mat M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung fir 24 HR. Dunn huet Zellen fir dräimol mat Äis kal PBS gewäsch, fix zu 4% paraformaldehyde fir 15 min bei RT. No Outil fir 1 HR zu 5% BSA /PBS, goufen Zellen fir 1 HR mat uginn antibodies um RT incubated. Nächst, sech Zellen fir 3 mol erëm mat PBST gewäsch a mat FITC oder TRITC-Label Secondaire antibodies fir 30 min bei RT incubated. Nom Wäschen mat PBS an counterstaining mat DAPI, goufen Zellen op 50% glycerol /PBS Descher. A König LSM780 confocal microscope (König Microsystems, Oberkochen, Däitschland) war benotzt d'Lokalisatioun vun uginn Proteinen ze observéieren. VerfÜgung

Zell Migratioun Assay VerfÜgung

Transwell Chamber mat 8.0 μm pore Schläimhait (Corning, NY, USA) war an der Zell Migratioun assay benotzt. Ënnen ëmkomm war mat 800 μL mëttelfristeg wouvun 10% FBS als chemoattractant gefëllt. Zellen sech am serum-gratis mëttelfristeg wouvun M VerfÜgung resuspended. hyorhinis VerfÜgung plus A2PP oder ConP, da genau op der erop Chambre op enger Dicht vun all Transwell Staatsapparat transferéiert huet vun 2 × 10 5 Zellen /ML (120 μL /Chamber). Zellen sech fir 24 HR bei 37 ° C ze opgeholl erlaabt. Uewen Surface vun all Membran war vun Zellen mat engem Koteng Swab geschëppt. Zellen zu der leschter Säit vun der Membran méi wäit waren am kal methanol fix, mat 0,1% glaskloer mauve geschriwwen, an an néng ausgewielt microscopic Felder pro gutt gezielt. All Prouf war zu triplicate CHAMBERS virbereet an all Experimenter war fir op d'mannst 3 Mol widderholl. VerfÜgung

Zell prolifération Assay VerfÜgung

Gastric Kriibs Zellen sech am 96-gutt Kultur Placken um Dicht vu 5 × géint 10 3/100 μl /gutt an triplicates, an sech mat uginn reagents behandelt. Zouhuelen vun Zellen sech duerch d'Zell Niewebaach mat engem CloneSelect pauschal fënnt (cuisine Comments, Sunnyvale, CA, USA) laachen. VerfÜgung

Microarray Analys an Real-Time RT-Hinnen alleguer VerfÜgung

AGS an BGC823 Zellen ( 1 × 10 6 pro 10 cm 2 zappen) goufen behandelt mat A2PP, CIP, MYCO ech an MYCO II fir 24 HR, mat PBS gewäsch, an zu Trizol reagent recoltéiert. RNS Echantillon waren am OE Déi (Shanghai, China) andems Affymetrix GeneChip ® PrimeView ™ Mënscherechter Gene Expression Singular iwwerpréift. Microarray Donnéeën gouf zu NCBI Gene Expression Omnibus (Geo) (Bäitrëtt no.GSE73777) verschéckt. Raw Daten huet andems Affymetrix GeneChip Command Schlesselen (Versioun 4.0, Affymetrix) opgeholl. Next, war Genespring Software (Versioun 12,5, Agilent Technologies) d'Basis Analyse mat der Matière Donnéeën gelaf agestallt. Ze fänken mat, war d'raw Daten mat dem RMA sind normalized. Differentially sech ausdrécke Genen dann duerch fantastesch änneren identifizéiert. D'loung Formatioun fir Bastelen a verwandelt-reegelen Genen war eng fantastesch änneren ≥ 2.0. Uschléissend, GO a sech Kegg Analyse déieren aus Genen applizéiert dass zu Zell Zyklus a Zell apoptosis dinn. Real-Zäit RT-Hinnen alleguer war fréier d'Resultater vun microarray ze validéieren an standing laut dem Hiersteller "Uweisunge (SYBR, TOYOBO). Ausdrock Niveau vun Zesummenhang Genen huet normalized duerch GAPDH VerfÜgung an der 2 -ΔΔCT benotzt gouf relativ Gentherapie Ausdrock ze berechnen. D'primers fir real-Zäit RT-Hinnen alleguer ( ATF VerfÜgung, vir, 5'-GAGTGGCGACAGGATAGAGC-3 ", ëmgedréint, 5'-TTTAGCCTCCCTCCCTTAGC-3"; DDIT3 VerfÜgung, vir, 5 ' -GCGCATGAAGGAGAAAGAAC-3 ", ëmgedréint, 5'-ACCATTCGGTCAATCAGAGC-3"; CEBPB VerfÜgung, vir, 5'-AGCGACGAGTACAAGATCCG-3 ", ëmgedréint, 5'-AGCTGCTCCACCTTCTTCTG-3") waren déi Sangon Wierderbuch <. br>

statistique Analys VerfÜgung

Data sech als mengen ± Fils presentéiert. D'Ënnerscheeder sech duerch ANOVA benotzt SPSS 11,0 Software an P &Si besteet analyséiert; 0,05 war statistesch relevant considéréiert. VerfÜgung

Microarray Zougank Number VerfÜgung

Microarray Donnéeën huet an NCBI Gene Expression Omnibus (Geo) (Bäitrëtt keen. GSE73777). VerfÜgung

Resultater

huet A2PP keen Effekt op d'Nuetsvolen oder Migratioun vun der Gastric Cancer BTS VerfÜgung

fir d'Roll vun ANXA2 d'N-Uschloss Domän vun M VerfÜgung ze diskutéieren. hyorhinis VerfÜgung Wonn, mir éischtens Wierderbuch A2PP peptide zu N-Uschloss vun ANXA2 (Lalumi 1A) lueden. Biotin Fortgeschratten A2PP huet dës Distanz zu speziell mat GST-p37 an der staarker Phase bindend assay (Lalumi 1B) an zitt-verwandelt assay (Lalumi 1c) zesummekomm. Mir gemierkt dass A2PP net de Wirklechkeet vun AGS an BGC823 Zellen (Lalumi 1D) Afloss huet. Ausserdeem, an Konzentratioune manner wéi 20 μM, huet A2PP net Zell Prolifératioun (Lalumi 1E) inhibit suggeréiert datt A2PP minimal toxicity zu Zellen huet. EGFR gouf zu Regulatioun ANXA2 phosphorylation [17,25,26] agebonne, iwwerdeems A2PP keng Auswierkungen huet op d'phosphorylations oder FAQ Niveau vun EGFR an ANXA2 [Lalumi 2A]. Ausserdem, hu A2PP keng Auswierkungen op d'Migratioun vun AGS an BGC823 Zellen (Lalumi 2B an 2C). Bewosst Lokalisatioun vun ANXA2 ass duerch seng phosphorylation regulariséiert, wat fir seng Funktioun kritesch ass [17,27,28]. Mir fonnt A2PP rauszesichen der subcellular Lokalisatioun vun endogenous ANXA2 änneren (Lalumi 2D). Dës Resultater weisen, datt A2PP gehalen huet keen Effet op malignant phenotypes oder EGFR-ANXA2 sécher vun gastric Kriibs Zellen. VerfÜgung

A2PP Verloschter M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn VerfÜgung

Eis virdrun Aarbecht huet gewisen, datt N-Uschloss vun ANXA2 mediates M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn [17]. Wéi déi vun der Resultat vun Zell Elisa assay gewisen, hunn mir déi M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn war vun A2PP an enger Portioun-ofhängeg Fassong BGC823 an AGS Zellen blockéiert, mä ConP-behandelt Zellen sech nach héichqualifizéiert Personal vun M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung (Lalumi 3A). Dës Resultater goufen duerch qPCR assays (Lalumi 3B) ënnerstëtzt. Konsequent, ofgeholl A2PP och FAQ Niveau vun p37 FAQ am Western blotting Analyse (Lalumi 3C an 3D). Mëttlerweil, Niveaue vun phophos-AXNA2 an phophos-EGFR vun der Krankheet Zellen sech verwandelt-reegelen Behandlung mat A2PP (Lalumi 3C an 3), iwwerdeems total Niveau vun AXNA2 an EGFR relativ stabil waren (Lalumi 3C). An der immunofluorescence Analyse, war A2PP fonnt M VerfÜgung zu inhibit. hyorhinis VerfÜgung Wonn-entschlof p37 Heefung an Co-Lokalisatiouns tëscht p37 an ANXA2 (Lalumi 4A). An der Co-immunoprecipitation assay mat FAQ lysates vun M VerfÜgung. Hyorhinis VerfÜgung Krankheet Zellen, ofgeholl A2PP der Interaktioun tëscht p37 an ANXA2 (Lalumi 4B). Zesumme, ënnerstëtzt dës dofir d'Iddi, dass A2PP M VerfÜgung geloss hätt. hyorhinis VerfÜgung Wonn a confirméiert eis virdrun Entdeckung, datt d'N-Uschloss vun ANXA2 néideg ass fir mediating M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn [17]. VerfÜgung

A2PP Hien M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung -Induced Migratioun VerfÜgung

Eis virdrun Studien virgeschlo, dass M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn hätt Migratioun vun gastric Kriibs Zellen Promotioun [17, 23]. An dëser Etude, gemierkt mir dass M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung -promoted Migratioun vun gastric Kriibs Zellen war net vun ConP betraff, mä war Portioun-dependently inhibited vun A2PP (Lalumi 5A an 5B). Dës Resultater hindeit, datt A2PP inhibited M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung -induced Migratioun, déi mat hirer Fäegkeet verbonne war Wonn-gefördert phosphorylations vun EGFR an ANXA2 (Lalumi 3C an 3). VerfÜgung

A2PP Has Néideg Motif bis erof M geloss VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn VerfÜgung

Fir de kriteschen Motiv vun A2PP Markenzeeche, géng mir ob verschiddenste gekierzt peptides vun A2PP (Lalumi 6A) ze bestëmmen kéint reduzéiert M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn. An der qPCR Analyse, A2PP a gekierzt peptides A2PP-Nd4, Nd8, Nd12, Cd4, Cd8, an Cd12 reduzéiert M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn am gastric Kriibs Zellen, mä A2PP-Nd16 an A2PP-Cd16 dunn geloss M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn (Lalumi 6B). Ähnlech Muster vun inhibition war aus Western blotting assay (Lalumi 6C) kritt. Dës Resultater proposéiere d'Existenz vun engem spezifeschen Motiv vun A2PP essentiel ass fir seng Fähegkeet M VerfÜgung ze reduzéieren. hyorhinis VerfÜgung Wonn. Fir weider Kär Message vun dësem Potential Motif Kaart, mir Wierderbuch déi zwee peptides zu 11 entspriechend September -20 September AA (als wéi A2PP-10aa) an 13 September -18 September AA (als wéi A2PP-6aa) (Lalumi 7A). An qPCR assay, hätt souwuel peptides erofgoen M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn (Lalumi 7B), déi vun Westeuropa blotting assay (Lalumi 7C) ënnerstëtzt huet. Virun allem, goufen d'inhibitory Auswierkunge vun A2PP-10aa besser wéi déi vun A2PP-6aa, mä d'Auswierkunge vun béiden peptides sech manner sécherlech wéi déi vun A2PP (Lalumi 7B an 7C). Thesefore, d'Mëtt Message (11 September -20 September) vun A2PP kéint d'Grondlinne Motif ginn ze inhibit M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn. VerfÜgung

Se A2PP mat Aner Brunel D' M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn VerfÜgung

M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung war eent vun den Haapt Loftverschmotzung Quelle vun Zell Kultur [13,14,15]. Déi bescht Manéier M VerfÜgung eliminéiert. hyorhinis VerfÜgung Wonn ass Zellen ze verännert a séier sterilize all kontaktéiert kritt, mä e puer Krankheet Zellen net an e puer Fäll ersat ginn hätt. Demno, ass et Imperativ spezifesch antimicrobial Approche ze benotzen ze verhënneren oder eliminéiert M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn. Et muss anescht antimicrobial Agenten gi fir d'Préventioun M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung aus Droberoderin. Zum Beispill, kéint François (CIP) z'encouragéieren M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung an enger gëeegenter Konzentratioun [29]. Zwee antimicrobial Komponente genannt als mycoplasma ech (MYCO sin) an mycoplasma II (MYCO II) kéint reduzéieren M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn duerch seng FAQ a Nukleinsaier Synthes erauszesichen. Mä e puer Bedenken wéi héich Empfindlechkeet, staark Resistenz an héich toxicity kënnen hir Programmer zu Zell Kultur limitéiert. Baséierend op dës Iwwerleeungen, gleewe mir et néideg der efficiencies vun A2PP, CIP, MYCO ech an MYCO II zu bedengt M VerfÜgung ze vergläichen. hyorhinis VerfÜgung Wonn. Vun Western blotting an qPCR assays, fonnt mir dass A2PP d'inhibitory Effekt op M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn war gläicht dofir deem vun MYCO ech, mee war besser wéi déi vun CIP an MYCO II (Lalumi 8A an 8B). Spannen, fonnt mir dass A2PP kéint och effizient der M VerfÜgung eliminéiert. hyorhinis VerfÜgung Wonn an kräfteg Krankheet Zellen am Prozess vu Passagen aus P 1 zu P 3 (Lalumi 8C an 8D). Ervirgestrach, am Verglach mat MYCO ech an MYCO II, déi A2PP manner inhibitory Effekt op d'Zellen Prolifératioun (Lalumi 9A). Fir d'Mechanisme vun A2PP, CIP, MYCO ech an MYCO II d'Effekter op Zellen Prolifératioun beschen, mir microarray Analyse gemaach an opgefouert engem Ziel vun differentially ausgedréckt Genen vun A2PP, CIP, MYCO ech an MYCO II behandelt Zellen. Chemeschen RT-Hinnen alleguer Analyse zougedréckt fräi Meenungsäusserung vun apoptosis-Zesummenhang Genen ( ATF5 VerfÜgung, DDIT3 VerfÜgung, CEBPB VerfÜgung) vun MYCO ech an MYCO II Behandlung, mä kleng Ännerungen décidéiert zu A2PP an CIP Gruppen (Lalumi 9B) observéiert. Dës Resultater weisen, datt A2PP huet manner toxicity a besser präventiv Potential vun erauszesichen M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn am cultured Zellen. VerfÜgung

Diskussioun VerfÜgung

Mycoplasma Wonn an kontaminéierte sinn haut nach verwandelt an bedeitend Risiken fir Patienten a Fuerschung Qualitéit bréngen. An de leschte Joer, proposéiert Rei Etuden déi mycoplasma Wonn och mat tumorigenesis [3-8] verbonne war. Mycoplasma Krankheet konnt de DNA Schued Ursaach, betreffen Gentherapie Ausdrock, an desorganiséieren der Zell Zyklus Bomm an apoptotic Äntwert [30]. M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung war zu 56% vun gastric Cancers, 55,1% vun Colon Cancers an 39,7% Broscht Cancers Stoffer [20] fonnt. Nieft, zougedréckt serological Testen, datt 36% benign prostatic hyperplasia (BPH) an 52% Stoffer prostatic Kriibs huet M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung positive [4]. Dës Studie weist eng méiglech association tëschent M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn an d'Optriede vun erhéijen [4,20]. Wat an de Prozess vun Zell Kultur méi, ass, sinn déi gemeinsam kontaminéierte Quellen mycoplasma, Bakterien a Schimmel, mä de kontaminéierte Taux vun mycoplasma ass relativ héich [13]. Resultater vun verschiddenen Gruppen hunn, datt d'Quote vun mycoplasma kontaminéierte vu 15 bis 80% variéiert gewisen, e puer souguer 100% erreecht [15,31]. Eng Analyse vun DNA Message vun 1000 genomes Projet implizit datt 7% vun den Echantillon vun mycoplasma knaschtege sech [32]. Allerdéngs, mycoplasma Wonn an kontaminéierte bedengt ass schwéier. Eischtens, well vun pleomorphic, plasticity, filterability an einfach Creme, mycoplasmas liicht duerch microfiltration Membran Passe konnt, Stëmmung hinnen op de Provider Zell Uewerfläch gëtt oder op déi Zellen endocytosed ginn [1,13,33]. Zweetens, Éloquence mycoplasma Zell Maueren, si Géigestand seng Identitéit verléiert zu Antibiotiken Stëmmung déi Zell Mauer Synthes, wéi penicillin inhibit. Effikass antimicrobials do existéiert, mä hir kontinuéierlech Uwendungen zu Zell Kultur ass net well vun der toxicity zu Zellen recommandéieren. Endlech, mycoplasma ass eng atypical Bakterien, difficulities zu korrekt Diagnos dauernd [34]. VerfÜgung

Vill anti-mycoplasma Drogen entwéckelt goufen, wéi Erythromycin, Leucomycin, Roxithromycin, Ofloxacin, a François. Ee der ongewollt Effekter, toxicity, a Resistenz nach Problemer fir Spuer bréngen Reduktioun [10,11,35-38]. Nieft, hätt permanent Administratioun vun dësen Antibiotiken net komplett mycoplasma fir een oder méi Wochen [39,40] eliminéiert. Dofir, ass et kritesch nei Weeër ze fannen, datt d'mycoplasma Krankheet oder kontaminéierte effektiv an virgesinnen killen kann. D'Léisung fir dëst Zil kënne wahrscheinlech duerch d'characterization vun molekulare Mechanismen fonnt ginn mycoplasma Wonn Basisdaten. VerfÜgung

Eis virdrun studéieren, datt d 'Zesummespill vun P37 FAQ fonnt mat AXNA2 mediated M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn [17]. An dëser Etude, mir éischtens der N-Uschloss polypeptide vun ANXA2 (A2PP) Wierderbuch a validéiert hir spezifesch dÉxistenz GST-p37 FAQ am zolidd-Phase bindend an streptavidin banal-verwandelt assays. Inspiréiert vun esou Interaktioun, gefrot mir ob A2PP Wonn vun M VerfÜgung antagonize konnt. hyorhinis VerfÜgung. Mir hu fonnt, datt A2PP, an eng adequat Konzentratioun (20 μM), ofgeholl M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn, inhibited Wonn-gefördert Migratioun, a reduzéiert Wonn-dementéiert der phosphorylations vun EGFR an ANXA2 zu gastric Kriibs Zellen. Dës Effekter sech mat ofgeholl Interaktioun tëscht p37 an ANXA2 assoziéiert. Et ass ze bemierken, datt A2PP eleng minimal Auswierkungen op Prolifératioun vun Zellen an phosphorylations vun EGFR an ANXA2 Schatzkummer suggeréiert datt A2PP wahrscheinlech eng nëtzlech reagent ze reduzéieren M VerfÜgung gin ass. hyorhinis VerfÜgung Wonn. Dës Notioun ass duerch Vergläicher vun A2PP d'Branchen Antibiotiken 'Auswierkungen op Zell Prolifératioun a M VerfÜgung ënnerstëtzt. hyorhinis VerfÜgung Wonn, déi weisen, datt A2PP zwar manner toxicity zu Zellen haten awer staark Fähegkeet Wonn ze Krise. VerfÜgung

Trotz dass A2PP, eng 30 AA polypeptide, kéint erofgoen M VerfÜgung . hyorhinis VerfÜgung Krankheet effektiv, brauche mir nach ze verstoen ob gekierzt Formen vun A2PP ähnlechen anti- erreechen konnt M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung ëmmer. Andeems se mat e puer gekierzt peptides vun A2PP, fonnt mir dass den zentrale Message (11 September -20 September) vun A2PP kéint d'Grondlinne Motif ginn ze inhibit M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn. der inhibitory Auswierkunge vun gekierzt peptides sech awer nach net esou staark wéi dat vun voll Längt A2PP suggeréiert datt Reliefsailen Message essentiel adäquate Struktur ze erreechen efficace verbindlech mat p37 ze erhalen. Weider Studien sinn néideg op inhibiting d'Auswierkunge vun Verännerung oder /an stattfannen vun deem Motiv ze fannen M VerfÜgung. hyorhinis VerfÜgung Wonn VerfÜgung

Arbeschterlidder VerfÜgung

Mir Merci a seet Lin Meng, Dr. Zhihua Tian (all aus Korea University Cancer Hospital & Institut) erkennen. Fir déi kritesch reagents oder technesch Assistenz. VerfÜgung

Other Languages