Case Report: družinska želodca Rak in Chordoma v istem Family

zadevi Poročilo: družinska želodca Rak in Chordoma v isti družini
Abstract
želodčnega raka, so drugi najpogostejši malignom na svetu in predstavljajo veliko breme za vse družbe čeprav se pojavnost bolezni zmanjšuje v industrializiranem svetu. Etiologija bolezni je zapleten in je verjel, da je predvsem zaradi okoljskih dejavnikov, vendar majhen delež primerov se ugotovi, da so povezana z genetskimi dejavniki. Opredeljeni sta bili dve podedovane oblike raka na želodcu, tisti, ki je povezan z družinsko clusterings raka na želodcu in druga pa podskupina družin, ki pripadajo dedne non polipoze kolorektalnega raka (ali Lynch sindrom). V tem poročilu predstavljamo majhno jedrno družino, ki je nenavadno, da je strnitev malignosti ki vključuje raka na želodcu, debelem črevesu in chordoma. Genetska analiza ni razkrila nobene vzročne mutacije v genih, povezanih z HNPCC ali v e-kadherina. Skupaj lahko klinična slika v tej družini, kažejo, da so drugi genetski dejavniki za te družine grozdenja malignosti.
Ključne besede
rak želodca HNPCC E-kadherina chordoma Uvod
gastrični rak predstavlja drugi najpogostejši maligni proces na svetu, čeprav zdi se pojavnost bolezni, ki se zmanjšuje v industrializiranem svetu. Želodčni rak so morfološko heterogena s tremi vrstami; difuzna raka želodca, A žleznega (ali črevesna) tip in mešanico difuzni in črevesno boleznijo.
Vzroki raka želodca sta okolja in genetski ali mešanica obeh. Pred kratkim je bila ugotovljena dokončna genski vzrok za raka želodca (mutacije gena E-kadherina), najprej v velikem New Zealand Maori Kindred [1], ter nato še v drugih želodčnih družin [2]. Bolniki oskrbovanju mutacije v genu E-kadherina običajno predstavi z difuzno boleznijo ker niso bili genetski faktorji vpleten v družinskih skupke črevesne raka želodca.
Alternativni genetske vzroke želodčnega raka v povezavi z različnimi drugimi epitelnih rakov dednega ne polipoza debelega črevesa in danke (HNPCC). Ta subjekt je označen z zgodnjim nastopom kolorektalnega raka in številnih drugih epitelijskih malignih sprememb, vključno rak endometrija in raka na želodcu. Genska osnova tega pogoja je razčlenitev popravilo DNA neusklajenost zaradi mutacij v genih, ki nadzorujejo ta proces. Trenutno so štirje geni izolirana in je povezano s HNPCC, hMLH1, hMSH2, hMSH6 in hPMS2. Oba hMSH2 in hMSH6 prebivajo na kromosomu 2 hMLH1 je na kromosomu 3 in hPMS2 je na kromosomu 7 (za pregled glej Niessen et al 2004 [3]).
Chordomas so redki počasi rastočih tumorjev kosti, ki so verjeli, da izhajajo iz hrbtna struna ostanki [3]. So ponavadi pojavijo na dnu lobanje in imajo relativno benigno histološke videz. Kljub benignih videz chordomas imajo infiltracijsko lastnosti, ki jih je težko nadzorovati. Obstaja rahlo premoč za moške, ki se prizadete s skupno med moškimi in ženskami razmerju približno 1,7: 1. Pogost pojav pri moških postane bolj očitna pri bolnikih s sakralnimi chordomas kjer je razmerje med moškimi in ženski pristopi 3: 1. Malo znanega o molekularni osnovi chordomas, saj se zdi, da ni bruto kromosomska nenormalnost ali katerokoli drugo prepoznavna značilnost. Opredeljeni sta bili dve genetske loci. Prvi znak genetske osnove za chordoma prišel iz študij povezovalnih da odkrijejo genski lokus na kromosomu 1 [4]. Drugi locus je bil določen v majhnih serijah družin, povezanih z kromosom 7q33, ki je pokazala številne potencialne genov kandidatk [5].
V tem poročilu so ugotovili manjšo družino, ki je značilna za rakom želodca in prisotnosti . od chordoma v eno od treh bratov vsi, ki so podlegli malignosti
Bolniki in metode
družinsko anamnezo bolezni, je naslednji: proband predstavljena v starosti 56 let, s slabo diferencirano adenokarcinomom na slepo črevo brez prisotnosti adenomatoznih polipov. Ob izrezu je tumor metastaziral treh bezgavk. Bolnik je bilo ugotovljeno, da ima široko metastatsko bolezen v starosti 60 let umrl eno leto kasneje. Edini drugi presenetljivo ugotovitev v zvezi s tem bolniku je prirojena aplazija levega stegna. Zgodovina družina proband pokazala zgodovino raka prebavil (glej sl. 1). Slika 1 Rodovnik družine. St rak = želodec; Ch = chordoma; CRC = kolorektalnega raka. Kvadrati predstavljajo samcev, krogi ženske
je Oče proband z diagnozo raka na želodcu v starosti 67 let. Tumor je bil diagnosticiran kot nediferencirani mucinozni karcinoma z pečatni prstan celic, ki so imeli v času operacije je že razširil na jetra.
Najstarejši brat pacienta diagnosticirali pri starosti 7 1/2 let z malignim chordoma na dnu lobanje in umrl kmalu zatem. Tumor se je nahajala med clivus in most, ki je privedla do značilne nevrološke znake. Tumor je učinkujejo najmanj na vidnega živca, ki izhaja iz hude atrofije predvsem na desni strani. Poleg tega je bilo več jetrne metastaze.
Bil drugi brat diagnosticirali adenokarcinom želodca s poreklom iz Kardije. Tumor je bil nediferencirana mucinozni tip vrinjeni pečatni prstan celic, podobno kot pri očetu. Ob diagnozi je bilo ugotovljeno, da je bolezen, ki je postala razširjena z metastazami do vretenc, jeter, nadledvične žleze in pljučih.
DHPLC analizo
celotno kodirajo zaporedja hMSH2, hMLH1 in E-kadherina vključno intron /ekson meje so bili pregledani za mutacije, z analizo DHPLC. Vse nenavadne Konformeri so nadalje ocenjujejo neposredno zaporedja DNK.
Verižne reakcije s polimerazo (PCR) pomnoževanje za analizo DHPLC je bila izvedena s pomočjo začetnih oligonukleotidov, specifičnih za hMSH2 in hMLH1 kot je opisano zgoraj (Holinski-Feder et al 2001). Reakcijo je sestavljalo 1,0 uM vsak primer, 1 U Taq platina (Gibco-BRL), 2-5 mM MgCl 2 in 200 μ
M vsakega dNTP.
PCR pomnoževanje smo dosegli z začetnim denaturacijo pri 94 ° C za 5 minut čemur sledi 14 ciklov 94 ° C za 1 min, 7 ° C dotika razdalje za 1,5 min in 72 ° C za 2 min, nato 20 ciklov z nizom temperaturo kaljenja 0,5 ° C nižja od dnu dotika območje. Korak kaljenja smo izvedli kot dotika protokola z razponom 7 ° C, zmanjšuje 0,5 ° C /cikel nad 14 ciklih. Temu je sledil končni fazi razširitve pri 72 ° C za 10 minut, končni denaturacijskim koraku pri 95 ° C 5 min in počasno kaljenja od 95 ° C do 65 ° C v času 30 minut za spodbujanje heterodupleksna formaciji. PCR smo izvedli na PCR izrecno (Hybaid) instrument je opremljen z ogrevano pokrovom se izognili uporabi mineralnega olja.
DHPLC Analiza je bila izvedena z uporabo Varian Helix sistemom (Varian Inc., Walnut Creek, CA). PCR produkti (2-5 μ
l) smo injicirali neposredno v DNA mrka (Hewlett Packard) ali stolpca Helix (Varian) in eluirali iz kolone z uporabo večjo acetonitrila gradient in temperature na koloni pečice primeren za vsako ekson hMSH2 , hMLH1 in E-kadherina (dejanske temperature na voljo na zahtevo). Heteroduplexes nastanejo med PCR za heterozigotnosti vzorcu so odkrili dodatne vrha eluiranjem pred homoduplex vrha. Odkrivanje heteroduplexes je bila enostavnejša z uporabo DHPLC pregleda priložene programske opreme iz Varian. Napovedane taljenja Temperature dvojnih nasedle izdelkov DNK so bili pridobljeni s pomočjo programa DHPLC-taline na voljo od http:... //Www vstavljanje Stanford edu /taljenje html (za podrobnosti glej Preglednici 1a in 1b. ).
Za vsak segment negativna kontrola fragment (pomnožili iz DNK izoliranega iz normalnega zdravem darovalcu, ki ni imel družinske zgodovine bolezni) smo teče skozi kolono denaturacijsko pri temperaturi 50 ° C, ne-denaturirnih. 50 ° C maksimalno profil smo nato primerjali s Stanford tališča profilu vsakokratne fragment kot tudi korakih tri 1 ° C na obeh straneh predvidene talilno temperaturo. Delno so bili vzpostavljeni denaturirani pogoji, ko je bil narejen premik zadrževanja vsaj enaka ali 30 sekund po 1 ° razponu C prirastka. Optimalna temperatura tališča je vedno upošteva kot višji temperaturi, pod delno denaturirnih pogojih, ki ne kažejo degradacije profila.
DNA zaporedja
Vse heteroduplexes bili predmet zaporedja DNK za ugotavljanje natančne genetske spremembe na semiautomated zaporedja enote ( model 310, Perkin-Elmer Applied Biosystems Division, Foster City, CA) z uporabo dideoksi. Zaporedje izdelkov PCR smo izvedli s pomočjo različica 1 BIGDYE dideoksi sekvenciranja Ready reakcijsko zmes komplet (Perkin-Elmer, Foster City, CA).
Rezultati
družini upodobljen na sliki. 1 v skladu z merili Amsterdam II, kjer lahko drugi epitelijskih malignih obolenj nadomeščajo kolorektalnega raka. Prisotnost dveh želodčnih rakov je nenavaden in bi lahko nakazujejo na družinske raka želodca zaradi mutacij v E-kadherina.
Ni bilo na voljo za testiranje imunohistokemijo ali mikrosatelitskih nestabilnosti materiala. Vzorec DNK je na voljo pri proband, ki je bil izpostavljen mutacije analizo. Ker je družina izpolnjevali meril Amsterdam II je bil prvotno hMSH2 in hMLH1 analiza mutacija izvede. Brez mutacij so bile ugotovljene v kodirni sekvenci bodisi hMSH2 ali hMLH1 vključno intronska /pregrad EXON.
Ker je bilo dva posameznika z diagnozo raka želodca še zaslon mutacijo so izvedene v gena E-kadherina vendar ni bilo ugotovljeno nobeno škodljivih sprememb .
Razprava
neprepoznanje mutacij v hMLH1, hMSH2 ali E-kadherina kažejo, da je verjetno, da bo drugi genetski dejavniki, povezane bolezni v tej družini. Obstaja pa možnost, da je bila mutacija zamudil v eni od teh treh genov, saj analiza izbris ni bila izvedena niti ni bilo mogoče narediti tako, da ni bilo dovolj genski material, da bi to zgodilo. Poleg tega, ker bolniki podlegel njihovim bolezni pred nekaj desetletji, je malo verjetno, da bi se lahko testiranje imunohistokemijo ali mikrosatelitno nestabilnost opravljene za oceno verjetnosti te družine v lasti subjekta HNPCC. E-kadherina bil verjetno kandidat zaradi prisotnosti pečatni prstan celic v dveh želodcu raka.
Ostaja več možnosti glede na to, kar bi lahko prišlo v tej majhni družini. Prvič, je še vedno možno, da gre res za HNPCC družina ne le zato, ker lahko pride do mutacije v obeh hMLH1 ali hMSH2 pa tudi nismo preučiti hMSH6 ali hPMS2. Gen hPMS2 ostaja verjetno kandidat, kot je bilo povezano z recesivno podedovanih primerov sindroma Turcot je [9]. Poleg tega hPMS2 nahaja na kromosomu 7 in je obdan z pseudogenes, od katerih so nekateri izražene čeprav na precej nižjih ravneh kot tipa hPMS2 divji. Ker je bila nova locus za chordoma ugotovili tudi na kromosomu 7 ostaja možnost, da so v tej družini ti dve ugotovitve med seboj povezani. Na žalost, ne bomo nikoli vedeli, odgovor na to, ker ni dovolj Preostali material za študij iz proband in vzorci tumor, sprejetih od drugih družinskih članov niso več na voljo. Kar zadeva očeta proband ne vemo, če je bila prirojena aplazija levega stegna povezana z boleznijo v tej družini.
Skratka, ta družina ni samo izziv v zvezi z identifikacijo genetske predispozicije pa tudi, če bi bili družinski člani živi danes, za genetsko svetovanje.

• Izpiranje želodca v akutni organofosforjevo zastrupitve s pesticidi (GLAOP) - randomizirano kontrolirano preskušanje multiple vs. single izpiranje želodca v neizbranih zastrupitve akutni organofosf…
• Intratorakalnih odvodnjavanje iz perforirane prepyloric želodca z paraoesophageal kilo tipa II