PLoS ONE: sinergističkog Uloga između p53 i JWA: Prognostički i prediktivni biomarkera u rak želuca

Sažetak pregled

Izražavanje p53 Čini se da je u korelaciji s prognozom u bolesnika s malignosti, ali njegova uloga u želučanom karcinomu je ostao kontroverzna. Nedavno smo izvijestili da JWA, An ADP-sličan faktor 6 interakcije protein 5 (ARL6ip5), bio je i prognostički za ukupno preživljavanje i prediktivni za bazi platine liječenju raka želuca. U ovoj studiji željeli smo istražiti ekspresiju p53 kao prognostički i prediktivni biljeg u resekcijom karcinoma želuca, sam ili u kombinaciji sa JWA. Ekspresija p53 ispitana je u tri velika skupina pacijenata (ukupno n = 1155) od raka želuca. Visoka ekspresija p53 bila značajno povezana s nepovoljnim kliničko parametara i smanjene ukupno preživljenje pacijenata. Nadalje, bolesnici s visoku ekspresiju p53 u tumorima stekla izuzetnu opstanak korist od adjuvantne prve linije platina-based-kemoterapije. Sinergija između p53 i JWA u predviđanju ishoda pacijenata pokazalo se, dok se više ne primjećuje značajno povišene prediktivna vrijednost u vezi kemoterapije. Dakle, izraz p53 je moćan prognostički i prediktivni čimbenik za resekcijom raka želuca s pomoćnim sredstvom kemoterapijom na bazi platine. Kombinirani učinak p53 s JWA kao učinkoviti prognostički pokazatelji pronađen prvi put pregled

Izvor:. Liu X, Wang S, Xia X, Chen Y, Zhou Y, Wu X, et al. (2012) sinergistički ulogu između p53 i JWA: prognostički i prediktivnog biomarkera u rak želuca. PLoS ONE 7 (12): e52348. doi: 10,1371 /journal.pone.0052348 pregled

Urednik: DunFa Peng, Vanderbilt University Medical Center, Sjedinjene Američke Države pregled

Primljeno: 3. kolovoz 2012; Prihvaćeno: 12. studenoga 2012; Objavljeno: 21. prosinca 2012 pregled

Copyright: © 2012 Liu i sur. Ovo je otvorenog pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan

financiranja. Ova studija je podržan u sklopu koje je projekt financiran od strane prioritetne akademski program razvitka (PAPD) Jiangsu visoka učilišta (http://jsycw.ec.js.edu.cn); Nacionalna zaklada Prirodne znanosti Kine (30.930.080 i 81,110027 milijuna) (http://www.nsfc.gov.cn); Zaklada Cancer Center Nanjing Medical University (08ZLKF08) (http://202.195.178.127/zlsys). U financijeri nisu imali ulogu u studiju dizajna, prikupljanja i analize podataka, Odluka o objavi, ili pripremu rukopisa pregled

U konkurenciji interese.. Autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled

Uvod pregled

karcinoma želuca utječe na oko milijun ljudi godišnje, što je drugi vodeći uzrok smrtnosti od raka povezanih u svijetu s ukupnom stopom preživljavanja od pet godina manje od 30% [1]. Jadna rezultat je ostao u osnovi nepromijenjen tijekom posljednjih desetljeća, unatoč poboljšanjima u kirurške, kemo i radioterapije [2]. Značajne razlike u prognozi među pacijentima nakon standardne operacije postoji, što ukazuje na specifične biomarkeri hitno [3] je potrebno. Osim toga, odabir pacijenata koji će imati koristi od kemoterapije je veliki problem što je veliki dio unnessesarily tretira i samo dobiti ozbiljne nuspojave. [4] Dakle, učinkovita molekularni markeri hitno su potrebni kako bi se izbjeglo previše ili undertreatment. Pregled

p53 proteina (kodiran ljudski genom TP53 pregled) je vjerojatno najpoznatiji od svih tumora smetnji, a karakterizira po mogućnosti induciranja staničnog ciklusa, popravka DNA, starenje, i apoptozu [5]. Mutacija ili funkcionalna inaktivacija p53 je gotovo univerzalna značajka ljudskog raka, igrati ključnu ulogu u nastanku tumora jer mutanta p53 može stjecati nove onkogene svojstva [6] - [9]. Nadalje, za razliku od divljeg tipa proteina p53 koji se brzo razgrađuje, mutirani oblici imaju produženi poluživot koji pogoduju intranuklearnog pohranjivanje, postaje detektirati imunohistokemijski [10] - [12]. Nakupljanje proteina p53 kod raka želuca je vezan za prognozu i predviđanje tretman [13], [14]. Međutim, njegova povezana uloga i mehanizam dosad ostaju sporno [15], [16]. Pregled

Naš nedavni rezultati medjusobno da JWA, također poznat kao ARL6ip5, slično kao s p53 u nekim aspektima, bitno je za preživljavanje stanice i učinkovit popravak DNA nakon oksidativnog oštećenja DNA, kao i kemijski induciranog raka apoptoze stanica [17], [18]. Štoviše, JWA i XRCC1, drugi DNA popravak proteina, može biti kandidat prognostički i prediktivni biomarkera za pacijente s rakom želuca [19]. Osim toga, SNP je od JWA pregled gena su povezani s povećanom sklonosti želučanog karcinoma u kineskoj populaciji [20]. Dakle, mi smo znatno zanima hoće li JWA raditi kao suradnik s p53 poboljšanja prediktivnog potenciju u rak želuca. Pregled

Ovdje smo s ciljem da se razjasni prijevodni značaj i identificirati izraz uzoraka p53 u tri velike nezavisne skupinama pacijenata oboljelih od raka želuca i ispitati eventualnu prognostičku i prediktivni ulogu ovog markera. Više intrigantno, hipoteza se može vrednovati o tome je li p53 i JWA može se kombinirati kao novi prediktor s više preciznosti u ocjeni preživljavanja. Pregled

Materijali i metode

Pacijenti i uzorci pregled

Tri neovisna retrospektivna skupina pacijenata su proučavali. Trening kohorta i testiranje kohorte su prikupljeni u Nantong Cancer Hospital, Nantong Grad, u istočnom dijelu provincije Jiangsu i validacija kohorta je regrutirao u Yixing Narodne bolnice, Yixing City, u južnom dijelu provincije Jiangsu, Kina. Tkiva su dobiveni iz odgovarajućih patologija podjela. kriteriji za uključivanje bili karcinom želuca pomiješa s radikalom gastrektomije, sa ili bez pomoćne kemoterapije. Kriteriji za isključenje su bolesnici s prethodnom raka želuca ili aktivnog raka ne-želuca. Također, oni koji su dobili pre-kirurški kemoterapije ili zračenja su isključeni. Pismeni informirani pristanak dobiven je od svakog pacijenta prije stjecanja tkiva i prije operacije se izvodi. Institucionalni Odobrenje je dobiven od strane etičkog nadzora odbora Nanjing Medical University prije ovog istraživanja. Pregled

bolesnika liječenih samo operacijom Netlogu

Trening kohorta uključeno 103 pacijenata koji su bili podvrgnuti samo radikalni gastrektomije u Nantong Cancer Hospital od 1. ^{st May 1990-1 st lipnja 1995. Međutim, 20 uzoraka su izostavljeni zbog podataka koji nedostaju, a jedan uzorak je izgubljena tijekom dohvat antigena ili bez tumorskih stanica prisutnih u jezgri, tako da 82 paru tkiva pacijenata bili su konačno ocijeniti ekspresije p53. pregled}

ispitivanje kohorta se sastojala od svih 640 kirurških slučajeva od raka bolnice Nantong od 1. ^{st prosinca 2000. do 1 st travnja 2005, a kohorta valjanosti uključeni svi 1022 kiruršku slučajeva u Yixing Narodnoj bolnici od 1 st siječnja 1999. do 31 st prosinca 2006. Ovi bolesnici su liječeni samo ili s postoperativnom adjuvantne kemoterapije operacije (za detalje vidi sl. S1). Raspodjela demografskim karakteristikama, a odabrani kliničko varijable bolesnika između dva okruga (Nantong i Yixing) su ranije [19] što je opisano. S obzirom da nema podataka za preživljavanje, 998 od tih bolesnika bilo je uključeno samo 578 i. Nadalje, zbog izgubljene jezgre ili nedovoljnih tumorskih stanica u tkivu, 485 i 588 tumorske jezgre su analizirani na ekspresiju p53 u testiranje i provjeru valjanosti skupini, redom. Pregled}

bolesnika liječenih adjuvantne kemoterapije pregled

u trening skupini, niti jedan od pacijenata primio nikakav oblik adjuvantne terapije. Od 485 pacijenata koji se koriste za analizu u ispitnoj skupini, 111 pacijenata (22,9%) pomiješa se s pomoćne kemoterapije nakon kurativno resekcije. Režimi uključeni kombinirani kemoterapije s fluorouracil, leukovorina i oksaliplatina (Flo) (6 slučajeva); monoterapija mitomicin C (46 slučaja); derivati ​​fluorouracil (47 predmeta); i drugi tretmani (12 slučajeva). Od 588 bolesnika u skupini valjanosti, režim za 223 bolesnika (37,9%) s postoperativnom kemoterapijom uključeno kombiniranu kemoterapiju sa FLO (87 slučajeva); u kombinaciji kemoterapije s fluorouracil, leukovorina i Platinol (FLP) (79 slučaja); u kombinaciji kemoterapije s fluorouracilom i paklitakselom (FP) (11 slučaja); u kombinaciji kemoterapije s etopozid, leukovorina, fluorouracila i Platinol (ELFP) (28 slučajeva); i drugi tretmani (18cases). Što se tiče resekcijom pacijenata oboljelih od raka želuca s kemoterapije, distribucija demografskim karakteristikama, a odabrani kliničko varijable bolesnika između FLO grupe i FLP skupine bile su slične (sve P izvoznici > 0,05), osim histološkom tipu ( P pregled = 0,001 Tablica S1). Osim toga, sedam patološki potvrdio je rak želuca i odgovarajuće ne-kancerogene svježe smrznute želučane sluznice tkiva iz nedavnih pacijenata u Nantong Cancer Hospital su prikupljeni za Western blot analize. Pregled

Ukupno preživljenje (OS) je primarni krajnji točka ova analiza. Preživljavanje put utvrđeno je od datuma operacije do datuma smrti ili do posljednjeg nastavka. Datum smrti za svaki slučaj koji je dobiven od pacijenata zapisa ili obitelji pacijenata kroz follow-up telefonske pozive i dalje dvostruko ovjerava nadležnoj civilnih poslova i javne sigurnosti odjela. dobiven Detaljni kliničko informacije. Lauren kriteriji koriste za razvrstavanje tumora u crijevnoj tipa ili difuznog tipa [21] i postavio prema tumora, čvorova, metastaza (TNM) smjernicama [22]. Pregled

Izgradnja tkiva MicroArray (TMA) i Imunohistokem pregled

parafin uklopljenih arhivirani tkiva materijal tumor i okolno normalno želuca tkivo se koristi za TMA gradnje. TMAs su pripravljeni kao što je prethodno objavljene [19]. Ukratko, duple 1,0 mm promjera jezgre tkiva iz svakog uzorka se uguraju od parafinskog tumora bloka i odgovarajuće ne-tumorskih tkiva u trening skupini ili od jezgre od primarnih biopsije tumora testiranja i validacije skupinama. Kao kontrola tkiva, a biopsija normalne želučanog epitela tkiva su umetnute u četiri kutovima i sredini svakog slajda. Pregled

Standardni protokol se koristi za imunološko na TMAs. Detaljan postupak je ranije opisano [19]. IHC provedena je pomoću DO7 monoklonsko protutijelo (1:80; Dako, Carpinteria, CA), koji detektira divlji tip i mutirane oblike p53 proteina, uz Elivision ™ Super HRP Kits (Maixin-Bio Fujian, Kina) , primjenjujući različite otkrivanje i pronalaženje antigen metode. Izostavljanje primarnog protutijela služila kao negativna kontrola. Obojenja na desetine kontrola tkivo u svakom microarray slide prethodno su ocijenili kao kontrola kvalitete u imunološkim. Pregled

Procjena imunohemije Netlogu

Na početku, bojanje p53 u tkivima su zabio samostalno dva patologa zaslijepljeni kliničkim podacima, primjenom polu-kvantitativna imunoreaktivnost rezultat (IRS) u trening skupini. Kriteriji bodovanja za IRS su prijavili drugdje [23]. Intenzitet imunobojanje je prikazano na slici. S2. A podudarnost za IRS bojenje rezultatom p53 između dva patologa je 74 (90%) u 82 tumora trening seta; a nekoliko odstupanja su riješeni konsenzusom pomoću multihead mikroskopa. Varijabilnost u p53 bojenja je 4 (5%) u duple jezgre 82 tumora. Ovi slučajevi su obojeni cijelo slide IHC-a i dalje je u mrežu. Pregled

Optimalna vrijednost gušeći od IRS dobiven je prijemnik-operator karakteristične (ROC) analize, a površina ispod krivulje (AUC) na različitim granična vrijednost je izračunata p53 IRS za 1, 3 i 5 godina ukupno vrijeme preživljavanja. Optimalna vrijednost granična točaka p53 IRS u Nantong okrugu skupini (kombinirani trening kohorte i testiranje skupine) iznosio je 4 zbog prediktivne vrijednosti ove kritična točka za smrt bio je najbolji (sl. S3). Pod tim uvjetima, uzorci s IRS 0-4 i IRS 5-12 klasificirana kao niske i visoke ekspresije p53 u tumorima, respektivno. Nakon uspostave imunohistokemijske kriterije ocjenjivanja u Nantong okrugu kohorte, izraz p53 u Yixing okruga kohorti (validacija kohorti) je postigao isti patologa s točno istom postupku. Pregled

Western blot-pregled

Western blot ispitivanje je provedeno kao što je opisano [19]. Monoklonsko mišje anti-p53 antitijelo (1:1000; Dako, Carpinteria, CA), i monoklonsko mišje anti-β-aktin antitijelo (1:2000, Beyotime Biotechnology, Nantong, Kina) korišteni su za primarno antitijelo. Imunoreaktivni vrpce su detektirane s Phototope-HRP Western blot detekciju kit (Cell Signaling Technology Inc, Beverly, MA, USA). Za denzitometrijsku analize, p53 protein linijama na membranama mjerene su slike J softvera (verzija 1,44, Wayne Rasband, National Institutes of Health, USA), nakon normalizacije na odgovarajući P-aktin razini. Pregled

Statistička analiza

Veza između ekspresije p53 i kliničko parametara procijenjena je Fisher-ov točan test. Diferencijalne ekspresije p53 u primarnim tumorima i njihovih odgovarajućih nisu tumori su ocijenjeni od strane Wilcoxon testa (grupirani) i Spearman rank reda korelacije (sirovo ocjene). Veza između ekspresije p53 i JWA je osnovana od strane Spearmanovim rang reda korelacije (sirovo ocjene) i Fisher-ovog točnog testa (grupirani). Vjerojatnost razlika u OS kao funkcija vremena utvrđeno je pomoću Kaplan-Meier metodi, s log-rank test za značaja. Jednosmjerna ili multivarijatne Cox regresijska analiza je provedena procijeniti sirove omjere opasnosti (HRS), podešenog HRS-a i njihovih 95% intervala pouzdanosti (CIS), s podešavanjem za potencijalne Ëimbenike. Zatim smo analizirali prediktivnu vrijednost parametara pomoću vremenski ovisne analize ROC krivulje za cenzuriranih podataka i izračunati AUC krivulje ROC. Procijenjena je nastupe različitih rezultata crtanjem (t, AUC [t]) za različite vrijednosti od praćenja vremena (t). Sve statističke analize provedene su pomoću softvera Statistička analiza sustava (verzija 9.1.3; SAS Institute, Cary, NC), Stata statistički softver (verzija 10.1; StataCorp, College Station, TX) i R softvera (verzija 2.10.1 The R zaklada za statistiku računarstva). P-vrijednost < 0,05 se smatrala statistički značajna pregled

Rezultati

Povećana P53 izražavanja u rak želuca Versus susjedna normalna tkiva

Sedam pari ljudskih uzoraka s rakom želuca. uključujući primarne želučanog tkiva raka i uskladiti normalnu sluznicu želuca izabrano je za testiranje ekspresije p53 proteina Western analizom. Povišena ekspresija p53 dogodila u 6 od 7 želučanih tumora u usporedbi s uparenim normalne sluznice želuca (sl. 1). Imunohistokemijsko bojanje želučane microarray tkiva (TMA) korištena je za dodatno potvrđuju ekspresije p53 u 82 bolesnika s karcinomom želuca u trening skupini. Pokazalo se da je p53 bojenje uglavnom je lokaliziran u jezgri (Sl. 1b). Distribucija različitosti IRS za ekspresiju p53 u tumorima i odgovarajuće ne-tumora prikazane na Sl. 1C. Štoviše, izraz p53 znatno je povećan u 65 od 82 (79,2%) želučanog karcinoma u usporedbi s podudarnim normalnim želučanog tkiva ( P izvoznici < 0,001, Wilcoxon testa; Sl. 1C). U sva tri neovisne skupinama bolesnika liječenih samo s operacijom samo izraz p53 negativno korelira s JWA u kancerogenih tkiva ( P izvoznici < 0,001 za sve korelacije, tablica 1). Pregled

Korelacija između p53 izražavanja i kliničkopatološka obilježja u bolesnika liječenih samo operacijom Netlogu

u sva tri skupinama, svjedočio smo da je ekspresija p53 u kancerogenih tkiva značajno korelira s limfnih čvorova metastaza (N-kategorije). Povećana ekspresija p53 usko je povezana s višim TNM fazi obuke i testiranja skupinama, ali bez značaja u skupini validacije. Nadalje, povećana ekspresija p53 posebno je povezan s drugim kliničkopatološkim karakteristika, kao što su dubina invazije (T-kategorije), udaljene metastaze (M-kategorije), promjer tumora i histološkog tipa u odgovarajućoj skupini. Zanimljivo je da je u svim bolesnika liječenih samo operacijom (n = 817), našli smo više crijevna tipa pacijenata pokazalo je niska, a više difuzno tipa pacijenti su pokazali visoku ekspresiju p53 ( P izvoznici < 0,001, podaci nisu prikazani ). Ekspresija p53 imali korelaciju s dobi i spolu (Tablica 1). Pregled

Korelacija p53 izražavanja i OS u bolesnika liječenih samo operacijom pregled

U trening skupini, 82 uzoraka primarnog tumora pogodan za analiza je pokazala statistički značajnu negativnu korelaciju između ekspresije p53 i ukupnog 5-godišnje preživljavanje pomoću krivulje preživljavanja Kaplan-Meier ( P izvoznici < 0,001). Ovi rezultati su potvrđene u dva neovisna i većim skupinama bolesnika s rakom želuca uz minimalne pet godina follow-up (n = 374 i N = 365, odnosno) (Sl. 2a-c). Ostali značajni negativni prediktori za preživljavanje univarijantne analiza u tri neovisna skupina bile su limfni čvor metastaze (N-kategorija, P izvoznici < 0,01 za sve, Tablica S2) i klinički TNM stadij ( P
≤.001 za sve, Tablica S2). pregled

multivarijatna Cox regresijska analiza pokazala je da je nizak ekspresije p53 neovisno pozitivan prognostički čimbenik za rak želuca u sva tri kohorte ( p izvoznici <-.001 za sve, Tablica 2). Kako bi se dodatno ocijeniti prognostičku vrijednost ekspresije p53, proveli smo na vremenski ovisan ROC analize za cenzuriranih podataka koja je pokazala da kombinacija kliničkom procjenom rizika (TNM stadiju, histološki tip i promjer tumora) i p53 pridonio puno više od kliničkih parametara sama u oba treninga i testiranja skupina (Sl. 3). Na primjer, u testiranju skupine AUC pri 5 godina bila je 0,707 (95% CI = 0,653-0,761) za kliničkom procjenom rizika, dok je znatno povećan na 0,856 (95% CI = 0,818-0,894) u kombinaciji s rizikom p53 postići. Međutim, taj učinak nije bio značajan u skupini valjanosti zbog relativno visokog AUC (oko 0,8) kliničkih prediktora (Sl. S4). Pregled

Korelacija između p53 izražavanja i OS u bolesnika s adjuvantne kemoterapije pregled

testiranje i vrednovanje skupinama, OS je analiziran između bolesnika koji su primali adjuvantne kemoterapije u odnosu na one koji nisu. Podaci su pokazali da nema razlike u OS između operacije samo grupe i bilo režim postoperativne adjuvantne kemoterapije (podaci nisu prikazani), osim u skupini koja je primala fluorouracil leukovorin-oksaliplatina (Flo) (n = 87, log-rank testa, P
= 0,032, sl. 4). Više varijacija Cox regresijska analiza uključujući i šest varijabli (dob, spol, TNM stadiju, histoloških tipova, promjer tumora i kemoterapije) izvršena je ukazati na korist od kemoterapije na OS. Postoji statistički značajna korist za one koji su dobili Flo kemoterapije nakon operacije nad samim skupine operacije (HR = 0,55; 95% CI = 0,37-0,82, podaci nisu prikazani). Naime, ovaj učinak je samo kod bolesnika s visokim ekspresije p53 gdje adjuvans FLO očito povećana OS u usporedbi sa samim operacije (HR = 0,56; 95% CI = ,35-0,89 Tablica S3; Log-rang test, P
= 0,014, sl. 4). pregled

također smo analizirali značaj drugom kemoterapijom na bazi platine, fluorouracil-leukovorin-Platinol (FLP) režim (n = 79) u resekcijom želuca. Rezultati nisu predstavljati značajnu razliku za preživljavanje (log-rank test, P pregled = 0,134, sl. S5), dok su bolesnici s niskim izražajem p53 dobijete FLP režim čak izlagane lošije preživljenje u usporedbi s onima koje su primale operacije (samo P pregled = 0,003, sl. S5). Osim toga, pacijenti FLP liječenje visoku ekspresiju p53 nije značajno preživljavanje raskorak u odnosu na one sa samim operacije ( P pregled = 0,648, sl. S5). Nadalje multivarijatna analiza razjašnjen da veći rizik za smrtnost u bolesnika s niskim ekspresije p53 primaju FLP tretman u usporedbi s operacijom (samo HR = 1,91, 95% CI = 1,08-3,36, Tablica S4). Pregled

sinergijski učinak p53 sa JWA izražavanja na OS u bolesnika liječenih kirurgiju ili samo adjuvantne kemoterapije pregled

u bolesnika s operacijom sami su dalje podijeljeni u tri različite grupe na osnovu bojanjem p53 i JWA: p53 visoka s JWA niskim, p53 niska s JWA visoke i oba visoka ili niske. Pokazano je da pacijenti s p53 niskim i JWA visoka imao najbolji rezultat za preživljavanje u ove tri skupine ( P izvoznici < 0,001, log-rank test, Sl. 2D-F). Multivarijatna Cox regresijska analiza pokazala je da kombinirani izraz niskog p53 i visoki JWA bio neovisan pozitivan prognostički faktor za rak želuca u sva tri kohorte ( P izvoznici < 0,001 za sve, tablica 2). Kako bi se dodatno ocijeniti prognostičku vrijednost p53 plus JWA izražavanja, proveli smo još jedan vremenski ovisan ROC analize koja je pokazala da kombinacija kliničkog rizika rezultat i p53 plus JWA pridonijeli više od suradnje kliničkom procjenom rizika samo s p53 u oba trening i testiranje kohorte (sl. 3). Na primjer, u trening skupini, AUC na 5 godina bio je 0.568 (95% CI = 0,400-0,737) za kliničku ocjenu rizika plus p53 rezultat rizika, dok je značajno povećan na 0.865 (95% CI = 0,786-0,944) kada korištena je kombinacija kliničkom procjenom rizika s p53 plus JWA rezultatom rizika. Međutim, ovaj efekt opet nije bio očit u skupini valjanosti zbog razloga gore (sl. S4) spominje. Pregled

Na temelju doprinosa razine ekspresije p53 na kemoterapiju ishod, stratificiran smo takvih bolesnika u koordinaciji s JWA kao na sljedeći način: FLO tretirana skupina s visokim ekspresije p53 bio je podijeljen na p53 visoka JWA niskim i p53 visoka s JWA visoka; i FLP tretirana skupina s niskim izražajem p53 također svrstati u p53 niska s JWA niskim i p53 niska s JWA visoka. OS je reevaluated između ove podskupine. Međutim, bez očita opstanak razlika je predstavljen u sinergijskom uzorka s JWA (Sl. S6). Pregled

Rasprava pregled

Rak želuca je heterogena bolest gdje je ishod varira čak i kod pacijenata sa sličnim klinički i patološki značajke. Čak i uz operacije u ranim fazama, prognoza može biti tužan, a dodatna kemoterapija je na snazi ​​samo u podskupinama bolesnika. Novi molekularni markeri su potrebni tradicionalni inscenacije sustavi za rak želuca nedovoljno za predviđanje ishoda [24]. U ovom istraživanju, zabilježili smo i pokazali da visoka ekspresija p53 bila značajno povezana s nepovoljnim kliničko parametara i smanjene ukupno preživljenje pacijenata. Nadalje, bolesnici s visoku ekspresiju p53 u tumorima stekla izuzetnu opstanak korist od adjuvantne prve linije kemoterapijom na bazi platine (Flo ili FLP). Sinergija između p53 i JWA u predviđanju ishoda pacijenata pokazalo se, dok se više ne primjećuje očito povišena prediktivna vrijednost odnosi na kemoterapiju. Pregled

U ovom istraživanju smo našli očito povećana ekspresija proteina p53 u želučanog tkiva raka u odnosu na podudarne normalno sluznica, što ukazuje na potencijalno važnu status p53 u želučanom karcinogeneze. Navodno, P53 pregled gen mutiran u gotovo 50% svih ljudskih tumora, uključujući rak želuca [25] i mutiranog proteina ostaje u stanicama za duže vrijeme, omogućujući otkrivanje imunohistokemijski [26], [27 ]. Dakle, općenito je prihvaćeno da pozitivno bojenje uglavnom predstavlja mutirane oblike p53, dok divlji tip p53 protein se razgrađuje brže i čini slab ili negativan bojenje [10], [26]. Naši podaci su u skladu sa studijama iz drugih istraživača koji je otkrio da je pozitivna ekspresija p53 bila je povezana s nepovoljnim kliničko karakteristike i lošom prognozom bolesnika s rakom želuca, koji su prošle ljekovito gastrektomije [28] - [30]. To je napomenuti da postoje neke razlike u kliničko značajkama između Nantong i Yixing skupinama. Od Nantong Cancer Hospital je rak Specijalna bolnica dok Yixing Narodna bolnica je jedan sveobuhvatan, pacijenti u bivši su često na višem stupnju u odnosu na potonje. Prema tome, pacijenti u Nantong skupini pokazali lošije kliničko- karakteristike. Osim toga, p53 i JWA izraz otkrivene su samo u tkivima ovdje, ali ne u krvi ili serumu bolesnika s rakom želuca, zbog ne izlučuju proteine. Zanimljivo je prethodna studija pokazala je snažnu povezanost između visokog p53 auto-antitijela u serumu želučanog adenokarcinoma pacijenata i lošom prognozom, limfnih čvorova metastaza i niske diferencijaciju [31]. Štoviše, pokazalo se da je ekspresija p53 u želučanom tkivu raka korelaciji s p53 serumskih antitijela [32]. Nismo imali seruma prikupljeni za sličan analizu, ali to će biti vrlo zanimljivo kao test krvi je jednostavnije i vjerojatno više ponovljiva od immonohistochemistry. Što se tiče JWA, serumski test još uvijek u tijeku i treba se pokazati u budućnosti. Pregled

A fascinantno i važno pitanje nas privlače najviše je razlog zašto bi visoki izražaj p53 igrati upravo suprotna uloga na prognostički i prediktivne učinak. Ova pojava može se pripisati različitim oblicima p53 i njihovih istaknutih svojstava u biologiji tumora i otpornost na liječenje. Poznato je mutantnih p53 proteina su visoko izražen u mnogi karcinomi i doprinosi maligne transformacije, proliferacije i metastaziranja djelomično inhibira divlji tip p53, kao i drugi članovi p53 porodice [6], [33]. Miš modeli ležaj knock-mutacije p53 pokazalo je da mutirani p53 proteini mogu voziti formiranje tumora, invaziju i metastaziranje preko dominantnog negativnog inhibicije divljeg tipa p53 uz dobitak-funkcije ili 'neomorphic "aktivnosti koje mogu inhibirati ili aktivirajte funkciju od ostalih proteina [34], [35]. Isto tako u našoj studiji, visoka ekspresija p53 u želučanim tumora u korelaciji s limfnih čvorova metastaza, visokog TNM stadiju i drugih nepovoljnih kliničko značajke, što dovodi do agresivnijeg fenotipa s lošijim prognozama kada se ne liječi. Nasuprot tome, pozitivan učinak prediktivna visoku ekspresiju p53 na preživljavanje u oba platina liječenih pacijenata može ukazivati ​​na dvostrukom ulogom p53 u kemoterapije otpora. Trenutno, glavna prepreka u platine kemoterapije je popravak platine oštećena DNA, što rezultira povećanom otpornosti, smanjen apoptoze i konačno neuspjeha liječenja. P53 divljeg tipa može djelomično igraju tako ulogu tijekom ovog procesa putem staničnog ciklusa i sljedeće popravak oštećenja induciranog kemijskim sredstvima [36] - [39]. S druge strane, mutantnih p53 proteina u mogućnosti djelovati na DNA oštećenje popravak kao njihove divljeg tipa u kojem su pacijenti postaju osjetljivije na kemikalije [36], [40], [41]. Međutim, detaljni mehanizam mutanta p53 u platine liječenje treba dodatno istražiti. Mora se napomenuti da su pacijenti dobili više preživljavanja korist od FLO nego iz FLP, koja može biti dijelom i zbog toga FLO smanjuje toksičnost u usporedbi s FLP kao što je navedeno prije [19].

JWA je tipičan odgovoru na stres gen kao i tumor supresor [18], [42]. In vitro i in vivo ispitivanja potvrdili su da gubitak JWA potisnut staničnu diferencijaciju i povećanu migraciju stanica i metastaziranje [42] - [44]. Naši najnoviji rezultati očituje nizak izraz JWA u želučanim tumora u korelaciji s nepovoljnim kliničko pokazateljima ali bolje kemoterapije ishodom [19]. U ovom istraživanju, otkrili smo da JWA poboljšana prognostičku vrijednost p53, što ukazuje da je gubitak JWA kombinaciji s p53 mutacija može povećati tumora agresivnost i metastaza, što je vjerojatno zato što JWA je također član popravka DNA put i eventualno odigrati međusobnu ulogu u želučanom karcinogeneze. Zanimljivo, čak i ako su oba biljega odvojeno su prediktivni za platine liječenje, kombinacija nije poboljšala prediktivnu vrijednost, ali ovaj rezultat je otežano male skupine pacijenata u podskupine. Veći broj pacijenata koji su primali kemoterapijom na bazi platine režima trebaju biti uključeni u našem budućem istraživanju da bi se potvrdilo naše rezultate. Osim toga, ne postoji izravan regulatorni učinak je pokazao između p53 i JWA (podaci nisu prikazani), možda i oni djeluju u različitim popravak putova [17], [18], [45] - [48] i neizravna veza postoji između njih u određenim situacijama. Štoviše, p53 i JWA može sinergijski reguliraju iste molekule ili signalnih putova koji treba da se razjasni u daljnjim istraživanjima. Pregled

U sažetku, otkrili smo kombiniranu vrijednost tumorskih p53 s JWA kao učinkoviti prognostički čimbenici za prvi put , koliko je nama poznato. Iako se još nije dokazano definitivno istovremenog djelovanja tih dvaju proteina, može pružiti potencijalnim prediktorima za adjuvantne kemoterapije režim na bazi platine.

popratne podatke
Slika S1. pregled Consort dijagram za microarray tkiva studija pregled doi:. 10,1371 /journal.pone.0052348.s001 pregled (TIF) pregled Slika S2.
Reprezentativne slike p53 imunokemijska ispitivanja humanih karcinoma želuca. A, negativno obojeni; B, slabo pozitivno bojenje; C, umjereno pozitivno bojenje; D, jaka pozitivno bojanje (A-D: mjerilo, 25 um) pregled, doi:. 10,1371 /journal.pone.0052348.s002 pregled (TIF) pregled slika S3. pregled ROC krivulje koje prikazuju odnos između površine ispod krivulje (AUC) kod različitih vrijednosti porama P53 imunoreaktivnosti rezultatom (IRS) za 1, 3 i 5 godina ukupno vrijeme preživljavanja pregled doi:. 10,1371 /journal.pone. 0052348.s003 pregled (TIF) pregled slika S4. pregled ROC analize za kliničku ocjenu rizika, kombinirane p53 ili p53 plus JWA i kliničkom procjenom rizika u skupini validacije. AUC = površina ispod krivulje pregled doi:. 10,1371 /journal.pone.0052348.s004 pregled (TIF) pregled slika S5. pregled Krivulje preživljavanja prema p53 ekspresije u validacije skupini tretirani sa ili bez funkcionalnog vodećeg partnera. P
vrijednosti izračunate su s log-rank testa. Napomena: S, samo operacijom; . FLP, fluorouracil-leukovorin-Platinol pregled doi: 10,1371 /journal.pone.0052348.s005 pregled (TIF) pregled slika S6. pregled Krivulje preživljavanja prikazom sinergijski učinak p53 /JWA ekspresije u skupini validacije primanje adjuvantne kemoterapije. P
vrijednosti izračunate su s log-rank testa. Napomena: S, samo operacijom; FLO, fluorouracil leukovorin-oksaliplatin; FLP, fluorouracil-leukovorin-Platinol pregled doi:. 10,1371 /journal.pone.0052348.s006 pregled (TIF) pregled Tablica S1. pregled Raspodjele demografskih i kliničko karakteristike bolesnika liječenih sa ili bez kemoterapije pregled doi:. 10,1371 /journal.pone.0052348.s007 pregled (DOC) pregled Tablica S2.

• PLoS ONE: adjuvantne kemoterapije za starije bolesnika s rakom želuca nakon D2 Gastrectomy
• PLoS ONE: Klinička i prognostički Udruga faktor transkripcije SOX4 u želučanom Cancer