Endotelio lipazės baltymas yra perspektyvus šlapimo biologinis diagnozuoti skrandžio cancer

Endotelio lipazės baltymas yra perspektyvus šlapimo biologinis diagnozuoti skrandžio vėžį pervežimas Anotacija
faktai
Skrandžio vėžys yra viena iš labiausiai paplitusių piktybinių navikų pasaulyje , Rasti veiksmingų diagnostikos biologinius žymenis šlapime ar serumu reikštų labiausiai idealus sprendimas nustatyti skrandžio vėžiu per metinę medicininę apžiūrą. Šis tyrimas buvo įvertinti kaip šlapimo biologinis žymuo diagnozuoti skrandžio vėžį endotelio lipazės (EL) potencialą.
Metodai Viesbutis The ekspresijos lygis EL buvo matuojamas naudojant Imunoblotingo ir imunohistocheminį dažymo eksperimentai (audinių, kraujo serume, ir šlapime) mėginiai skrandžio vėžiu sergančių pacientų, palyginti su
sveikų žmonių. Mes taip pat patikrino El lygių šlapimo mėginių kitų vėžio rūšių (plaučių, storosios žarnos ir tiesiosios žarnos vėžio) ir gerybinių pakitimų (gastritu ir skrandžio lejomiomomis) patikrinti, ar EL buvo būdingi skrandžio vėžio.
Rezultatas
Matėme aiškiai atskirti El raiškos lygių šlapimo mėginių 90 skrandžio vėžiu sergančių pacientų ir 57 sveikų savanorių. Tai buvo maždaug 9,9 karto sumažėjo vidutiniškai El raiškos lygmenų šlapimo mėginių skrandžio vėžiu, palyginti su sveikų (p
< 0,0001), pasiekti 0.967 AUC vertė ROC (ROC kreivė) kreivę, parodant tai labai tikslūs kaip diagnostinis persekiotoją skrandžio vėžio. Įdomu tai, kad ekspresijos lygis EL Audinių ir serumo mėginiuose nebuvo beveik kaip diskriminacinis kaip šlapimo mėginių (p
= 0,90 ir P
= 0,79). Be Imunohistocheminiais eksperimentų, teigiama išraiška EL baltymų buvo nustatyta 67% (8/12) skrandžio greta noncancerous ir 58% (7/12) skrandžio vėžio pavyzdžius. Nebuvo jokių reikšmingų statistinių formuluotę lygių šio baltymo tarp skrandžio vėžio ir derantį noncancerous audinių (P
= 0,67).
Išvados Viesbutis The šlapimo EL kaip labai tiksliai skrandžio vėžio biologinis žymuo, kuris yra potencialiai ., taikomo bendrajam atrankos su didelio jautrumo ir specifiškumo
Virtualūs Skaidrės
virtualus Pristatymas (-os) už šį straipsnį galima rasti čia: http:... //www diagnosticpathol nologija diagnomx ES /vs /4527331618757552
raktiniai žodžiai
Endotelio lipazės biologinis Skrandžio vėžio diagnozę faktai
Skrandžio vėžys yra viena iš labiausiai paplitusių piktybinių navikų pasaulyje, atstovaujanti trečioji pagrindinė priežastis, dėl vėžio susijusių mirčių vyrams ir penktasis pagrindinė priežastis, moterims [1]. Maždaug du trečdaliai skrandžio vėžio atvejų pasitaiko mažiau išsivysčiusiose šalyse, kurios vienam gyventojui beveik tris kartus didesnis nei išsivysčiusiose šalyse, pavyzdžiui, Europos šalyse ir Šiaurės Amerikoje [2]. Skrandžio vėžys yra aukštas mirtingumo lygis, nes ji neturi akivaizdžių klinikinių simptomų ankstyvoje stadijoje. Tyrimai rodo, kad, jei navikas buvo aptikta ir rezekcijos iš anksto,, vidutinis 5-metų išgyvenamumas yra gana didelė [3, 4]. Todėl, ankstyva diagnozė ir gydymas yra labai svarbus gerinant skrandžio vėžiu sergančių pacientų prognozę.
Nors labai daug pastangų buvo dedama į technologijų plėtrą, kad būtų lengviau diagnozuoti, naudojant gastroskopija ir imunohistocheminės analizės duomenimis, invazinės iš šių procedūrų pobūdis daro ją nepraktiška didelio masto atranka dėl skrandžio vėžio. Efektyvūs diagnostikos biologiniai žymenys šlapime arba serume reikštų labiausiai idealus problemos sprendimas, kuris leidžia bandymus skrandžio vėžiu per kraujo ar šlapimo testų metu metinių fizinės apžiūros metu. Keletas diagnostikos serumo žymekliai buvo siūloma skrandžio vėžio, pavyzdžiui, MG7-Ag [5], karcinoembrioninį antigeno (CEA), MUC1 ir MUC5AC [6]. Iš šiuolaikiškumą yra tai, kad beveik visi jie kenčia nuo gana žemo jautrumo ir ypatumus vėžio diagnozę, ir todėl nebuvo plačiai naudojamas kliniškai [7]. Palyginti su audinių ir kraujo serume, šlapime kolekcija yra santykinai lengviau ir mažiau invazinės. Ji gali būti labiau tinka didelio masto atranka dėl vėžio aptikimo [8]. Naudojant palyginamąsias PROTEOMIKOS analizes, buvo pasiūlyta galimų šlapimo biologinių žymenų skaičių ir gerai išbandyta kitų rūšių vėžio, pavyzdžiui, cisteino B ir clusterin šlapimo pūslės vėžio [9, 10] karboanhidrazės IX ir katepsino D inkstų vėžio [11, 12], o ADAM12 dėl krūties vėžio [13]. Skrandžio vėžio, buvo užregistruoti keli biologiniai žymenys, pavyzdžiui, pepsinogen I, prostaglandino E2 ir tirpaus c-erbB-2 [14-16]. Tikrasis diagnostikos galimybė skrandžio vėžio dar turi būti kruopščiai įvertintas, nes jie nebuvo plačiai naudojami klinikinės diagnostikos. Todėl, akivaizdu, kad skubiai reikia nustatymo ir įteisinimo naujų ir patikimų diagnostikos žymekliai atrankos skrandžio vėžiu.
Mes jau anksčiau atliko sistema biologijos tyrimą, kuriuo siekiama nustatyti galimus biologinius žymenis kandidates diagnozuoti skrandžio vėžį. Be šio tyrimo, mes išanalizavo genų ekspresijos duomenis 80 porų skrandžio vėžio audiniuose bei gretimų nevėžinės audinių, surinktų iš skrandžio vėžiu sergantiems pacientams, naudojant microarray žetonų, ir nustatė šimtus skirtingai išreikštas genų vėžio palyginti
kontrolės audiniuose [17 ]. Mes tada apmokyti parama vektorius mašina (SVM), pagrįstą klasifikatorių prognozuoti, kuris iš šių diferencijuotai išreikštų genų gali turėti jų baltymai išsiskiria su šlapimu. Tarp prognozuojama šalinimo baltymų, mes nustatėme, EL rodo aukštą diskriminacinę galią pagal savo raiškos šlapimo mėginių skrandžio vėžiu sergančių pacientų, palyginti su
sveikų žmonių [18].
Čia mes išplėsti mūsų ankstesniame tyrime, kuriuo siekiama (a) tolesnis patvirtina, kad EL turi aukštą diskriminacinę galią tarp šlapimo mėginiuose skrandžio vėžiu sergantiems pacientams ir sveikiems žmonėms per didesnių bandinių rinkiniu, ir (b) įrodyti, kad EL yra labai būdingi skrandžio vėžiu, lyginant savo gausa ir šlapimo mėginių skrandžio vėžio su kitomis vėžio tipai ir gerybiniai pakitimai.
metodai
Imties kolekcija
visi mėginiai buvo imami trijų ligoninių Jilin universitetas Normanas Bethune medicinos koledžo, Changchun, Kinija ir tuo vėžio ligoninėje susijęs su Sindziango medicinos universiteto Urumčis, Kinija. Skrandžio vėžio audiniuose ir derantį ne vėžiniai audiniai buvo chirurgiškai rezekcijos iš skrandžio vėžiu sergantiems pacientams. Serume ir ryte atsitiktinių sugavimų šlapimo mėginiai buvo imami iš vėžiu sergantiems pacientams prieš operaciją. Šie pavyzdžiai mėginiai buvo surinkti, laikotarpiu nuo 2011 m kovo mėn iki 2012 m rugsėjo 90 skrandžio vėžio atvejų iš viso (67males ir 23 moterų; amžiaus ribos: 31-85 metai) ir 57 sveikų savanorių (30 vyrai ir 27 moterys; amžiaus ribos : buvo tiriami 29-76 metų). Skrandžio vėžio atvejų buvo diagnozuota histologinių analizių, kaip žarnyno ir difuzinio tipo pagal Lauren klasifikacija. Be to, šlapimo mėginiai buvo paimti iš 9 plaučių vėžiu sergantiems pacientams, 10 iš gaubtinės žarnos vėžiu sergantiems pacientams, 10 tiesiosios žarnos vėžiu sergantiems pacientams, 2 gastritas pacientams, ir 2 skrandžio lejomiomomis pacientams, kurie yra naudojami patikrinti, ar EL yra specifinis skrandžio vėžio. Šie kriterijai buvo naudojami mėginio paėmimo: (i) vėžiu sergantiems pacientams neturėtų pradėjo bet kokiu būdu gydyti jų vėžio; ir (ii) savanoriai sveiką kontrolinės grupės neturėtų turėti kokių nors rimtų sisteminė liga praeityje. Rašytinis sutikimas forma buvo pasirašyta kiekvieno dalyvio, kai jie buvo informuoti apie tyrimo, kuris buvo patvirtintas tyrimų etikos komitetai Jilin universiteto medicinos koledžo ir Xinjiang medicinos universitetas, atitinkamai tikslu. 1 lentelėje apibendrinta pasitelktų šiame study.Table 1 d Šiame tyrime dalyvavusių
Info sveikų savanorių ir pacientų informavimo sveikų savanorių ir informacija pacientams
Audinių
Serumas

šlapimo

skrandžio vėžio
12
12
90
amžiaus vidurkis (ribos)
60 (42-76)
63 (84-39)
60 (31-85)
Lytis
Vyras
6
7
67
Moteris
6
5 23
naviko vietą
Cardia
3
2
39
Body
5
6
26
Antrum
3
4
16
Diffuse
1
0
9
Operation
Iš viso pašalintas skrandis
4
5
29
Tarpinė suma pašalintas skrandis
8
7
61
Lauren klasifikacija
žarnyno
5
4
39
Difuzinė
histologijos tipas Viesbutis High ar vidutinio sunkumo
5
5
43
prastas arba nediferencijuotos
7 8 51
7
7
47
naviko stadijos
Ι ir ΙΙ
2
4
31
ΙΙΙ and ΙV
10
8 pervežimas 59
Gylis invazija
t1 ir t2
5
9
30
T3 ir T4
7
3
60
mazgas statusas
N0
3
3
29
N1 ir N2
9
9
61
Metastazė statusas
M0
5
10
71
M1
7
2
19
Plaučių vėžys -
- CR.LT 9
vidutinis amžius (nuo)
46 (42- 57)
Colon vėžys -
- CR.LT 10
vidutinis amžius (diapazonas)
53 (46-65)
tiesiosios žarnos vėžiu -
-
9
vidutinis amžius (nuo)
62 (47-78)
Sveikas
12
12
57
amžiaus vidurkis (ribos)
60 (42 -76)
54 (41-72)
47 (29-76)
gastritas /Lėtinis uždegimas -
- CR.LT 2
vidutinis amžius (diapazonas)
56 (43-69)
gastritais lejomiomomis
2
amžiaus vidurkis (ribos) -
- CR.LT 56 (51-62)
imunoblotingu analizė
audiniai buvo sumalamas į miltelius skystame azote ir tada lizuojamos baltymų ekstrahavimo buferinio tirpalo [0,5 mol /l tri · Cl (pH 7,4), 150 mmol /l NaCl, 0,1 mmol /l etileno diamino tetra-rgstingumo (EDTA) (pH 7,0) , 1 mmol /l fenilmetilsulfonilfluoridą (PMSF), 2,5 mg /ml aprotinino, 1 mmol /l ditiotreitolo (DTT), 1% Triton X-100, 1% natrio deoksicholatas (SDS)]. Visi reagentai buvo įsigytas iš Beyotime (Beyotime, Šanchajus, Kinija). Serumo ir šlapimo mėginiai buvo laikomi proteazių inhibitorių buvimo (Roche, Bazelio, Šveicarija) sterilius indus ir centrifuguojamas (1000 × g 10 minučių, esant 4 ° C), kad pašalinti ląstelių komponentus. Supernatantq buvo surinkti ir saugomi -80 ° C (ilgiausias saugojimo 6 mėnesius). 2 ml šlapimo mėginiai buvo dializuojamas distiliuotu vandeniu per filtravimo membranos (Dinguo, Pekino, Kinijos) 8 kDa nukirpimas, esant 4 ° C ir tada liofilizuotas -20 ° C temperatūroje. Užšaldyti-džiovinti šlapimo mėginiai buvo resuspenduotos 10 mM fosfatinis-buferio druskų tirpalu (PBS) (pH 7,5). Baltymų koncentracija buvo matuojama naudojant BCA Baltymai Analizės komplektas (Beyotime, Šanchajus, Kinija). Šlapimo kreatinino koncentracija kvantuotas šarmine pikrato metodą (Jaffe reakcija), kurių kreatinino rutina testas pusiau autoanalyser (Vital Mikro 300, Nyderlandai).
Vakarų dėmė buvo naudojamas išmatuoti raiškos lygius EL. 20 mikrogramų bendrųjų baltymų buvo naudojami eksperimento metu. Visi mėginiai buvo atskirtos naudojant 4-15% SDS-PAGE (Bio-Rad Laboratories Inc., JAV) ir patenka ant spausdinamo PVDF membrana (Bio-Rad Laboratories Inc., JAV). Membrana buvo inkubuojami 5% pieno blokuojančiu tirpalu 2 valandas kambario temperatūroje. Membrana buvo inkubuojamos su polikloninis ožkos anti-žmogaus EL pirminiais antikūnais (1: 400; Santa Cruz Biotechnologijos, JAV) kambario temperatūroje 1 valandą, kuri buvo plaunamos tris kartus 5 minutes tirpalo fosfato buferio druskų tirpalo (PBS), o po to reaguoja su triušio prieš ožkų antrinio antikūno (1: 5000; Beyotime, Šanchajus, Kinija). Audinių, beta-aktino antikūnas (1: 1000; Santa Krusas Biotechnologijos, JAV) buvo recubated užtikrinti vienodą apkrovą. Pabaigoje, membrana buvo visiškai padengta vienodo dydžio stipriklis ir peroksido tirpalo yra ECL plius Kit (Beyotime, Šanchajus, Kinija) 1 minutę, tada visi membranos buvo veikiami filme. Iš juostos tankis išreiškiami skaičiais, naudojant gelio atvaizdas sistema (Tanon, Šanchajus, Kinija). Fiksuota suma 1 ng išgrynintas EL standartą (R & D Systems, Inc., JAV) buvo naudojamas kaip teigiama kontrolė kalibravimo. Su svarstyti šlapime susidarymo ir išskyrimo, densitometrija EL iš šlapimo pokyčiai buvo išreikštas lyginant su šlapimo kreatinino koncentracija.
Imunohistocheminis
matavimo raiškos lygius EL vėžį palyginti
gretimų noncancerous kontrolės audiniuose, abiejų tipų audinių buvo nustatytos 12-16 val 4% para-formaldehido (pH 7,0), įterptųjų parafinu ir supjaustyti į 4 mkm storio sekcijas. Plius skaidres kepdavo esant 60 ° C temperatūroje 30 min. Parafinas nugarinamas naudojant ksileno 30 minučių, ir skyriai buvo rehidrataciją per alkoholio sprendimų serijos prieš gydymą su 1 mM citrinų rūgšties, pH 6,0, esant 100 ° C temperatūroje 5 minutes ir su 1% H 2O 2 30 minučių. Po to, kai plaunami distiliuotu vandeniu, dalys buvo inkubuotos kambario temperatūroje su 5% kiaulių serumai PBS 30 minučių ir EL antikūno (1: 400; Santa Cruz BioTECHnologijos, JAV) atskiestų PBS per naktį 4 ° C, plaunamos tris kartus 5-ąją minutę PBS. Rasta antikūnai buvo ryškinamos su spalva reagento diaminobenzidinas (BIOS, Pekinas, Kinija). Skyriai buvo counterstained su Mayer hematoksilinu. Du patologai nežinant paciento klinikinę būklę įvertino visas tamsintas skyriuose savarankiškai. Ląstelės buvo skaičiuojamas smarkiai padidintą vaizdą kiekvienu atveju (× 400), ir buvo apskaičiuotas teigiamai Dažymo ląstelių procentas. Ląstelių eksponuoti EL išraiška dalis buvo suskirstyti taip: 0 = mažiau nei 10%; 1 = 11% -50%; 2 = 51% -75%; 3 = daugiau nei 75%. Dažymo intensyvumas buvo suskirstyti pagal santykinį intensyvumą taip: 0 = neigiama; 1 = silpnas; 2 = tarpinis produktas; 3 = stipri dėmių. Tada proporcija ir intensyvumo balai buvo padauginta turėti bendrą rezultatą indeksą. Už statistinės analizės, balai mažesni nei 2 buvo laikomas neigiamu, ir balai 2 arba aukštesnė buvo laikomas teigiamu.
Statistinė analizė
chi-square testą ir Vilkoksono anketa pasirašytą rangas testas buvo naudojamas analizuoti raiškos lygius EL į suporuotų vėžio ir noncancerous audinio mėginiai. Analizuoti EL ekspresijos lygio serume ir šlapimo mėginių tarp skrandžio vėžiu sergančių pacientų ir sveikų atitinkamai skirtumą, buvo naudojamas Mann-Whitney testą. Chi-kvadrato testas dirbo įvertinti ryšį tarp šlapimo EL ekspresijos lygį ir klinikos kintamųjų ryšį. Atidesni galia ekspresijos lygio EL šlapime tarp mėginių iš vėžio ir kontrolinės grupės buvo tiriama naudojant ROC kreivė (ROC) kreivės ir pagal ROC kreive (AUC) plotą. Visi testai buvo du uodega ir P
-Pridėtinės < 0,05 buvo laikomas statistiškai reikšmingas. Visi statistinės analizės buvo atliekamos naudojant GraphPad PRISM 5 statistinę programinę įrangą.
Rezultatai
EL raiškos lygių šlapimo
Dėl pusiau kiekybinės analizės šlapimo baltymų, mes panaudojome santykinius EL raiškos lygį, atsižvelgiant į tą šlapimo kreatinino kiekviename mėginyje normalizuoti EL išraišką skirtingose ​​šlapimo mėginių. Mes nustatėme aiškiai atskirti El raiškos lygių šlapimo mėginių 90 skrandžio vėžiu sergančių pacientų (1,39 ± 0,68) ir 57 sveikų savanorių (0,14 ± 0,32). Mes stebėjo maždaug 9,9 karto sumažėjo vidutiniškai EL baltymų koncentracijos šlapime mėginiais skrandžio vėžiu sergančių pacientų, palyginti su sveikų (p
< 0,0001). Rezultatus galima matyti 1A pav ir 2a pav. Mes brėžiamas ROC kreive klasifikavimo tikslumą naudojant El raiškos lygį visose šiose šlapimo mėginių, pateikti bendrą vaizdą atidesni galios baltymų. Atkreipkite dėmesį, kad AUC suteikia plačiai pripažintą indeksą matavimo užtikrinamojo klasifikatoriaus kokybę AUC = 1,0 atstovaujanti puikus klasifikavimo ir AUC = 0,5 atitinkančią jokio atskyrimo. EL pasiekė AUC vertės 0.967 su 95% pasikliautinasis intervalas (PI) Būdamas [0.942-0.993] rodo, kad šlapimo EL gali tarnauti kaip labai perspektyvus skrandžio vėžio biologinis žymuo dėl diagnostikos tikslais (2b pav.) 1 pav atstovas Vakarų dėmė analizė EL baltymų gausa. Teigiama kontrolė Lane (+), kuris yra komercinę EL standartinį produktą, kuris buvo naudojamas normalizuoti signalo atsaką visose geliai. (A) EL baltymų apie šlapimo mėginių gausa; (B) EL gausa vėžio audinių pavyzdžius ir atitikimo noncancerous mėginius iš skrandžio vėžiu pacientams, kuriems nebuvo gydyti. Β-aktino tarnauja kaip vidaus pakrovimo kontrolę įvertinant santykines baltymų gausa lygį; (C) EL baltymų gausa serumo mėginiuose.
2 paveikslas Šlapimo EL baltymų gausos skrandžio vėžiu sergančių pacientų, palyginti su sveikų. Kiekvienas duomenų taškas yra vienas asmuo. (A) EL gausa mėginiuose skrandžio vėžiu sergantiems pacientams žymiai mažesnės nei mėginiuose iš sveikų; (B), ROC kreivės šlapimo EL baltymų. AUC vertė buvo 0,967.
Atkreipiame dėmesį, kad EL juosta Vakarų dėmė buvo išvykęs į šlapimo mėginiuose 71 90 skrandžio vėžiu sergantiems pacientams ir visiems iš 57 sveikų savanorių turėti EL grupę savo šlapimo mėginių. Naudojant nebuvimą /buvimą EL grupės kaip nukirpimas per paskambinę asmuo, turintis skrandžio vėžiu, ar ne, pirmiau duomenys atsiranda skambinate jautrumas 79% [95% PI, 0,690-0,867] ir specifiškumas 100% [95% PI 0,937-1,000].
Mes išnagrinėjo EL raiškos lygį šlapimo mėginių, skrandžio vėžiu sergantiems pacientams ir jo ryšys su įvairių klinikos veiksnių, ty lyties, histologijos diferenciacijos, naviko stadijos, invazijos, ir metastazes statusą. Jokių reikšmingų statistinių ryšių tarp EL ekspresijos lygį ir nors iš šių veiksnių gali būti aptiktas. Tarp šlapimo EL ekspresijos lygį ir klinikos veiksnių koreliacija yra pateikta lentelė 2.Table 2 Koreliacija tarp šlapimo El išraiška ir klinikos funkcijų
klinikos (N) pervežimas pervežimas EL visai nėra (%)

EL metu (%)
P
n = 71
N = 19
Lytis
Vyras (67)
51 (72)
16 (84)
0,27
Moteris,
(23) (28)
20 3 (16)
histologinis tipas Viesbutis High ar vidutinio sunkumo (43)
31 (44)
12 (63)
0.13
prastas arba nediferencijuota (47)
40 (56)
7 ( 37)
Lauren klasifikacija
žarnyno (39)
29 (41)
10 (53)
0,36
Difuzinė (51)
42 (59)
9 (47)
Auglio etapais
Ι ir ΙΙ (31)
(31)
22 9 (47)
0.18
ΙΙΙ ir ΙV (59)
49 (69)
10 (53)
invazijos
T1 ir T2 Gylis (30)
21 (30) 9 (47)
0,14
T3 ir T4, (60)
50 (70)
10 (53)
mazgas statusas
Nėra, (29)
23 (32)
6 (32) 0,95
dabartis (61)
48 (68)
13 (68)
metastazių statusą
M0 (71)
55 (77)
16 (84)
0,52
M1 (19)
16 (23)
3 (16)
Mes taip pat patikrino, ar EL yra specifinis skrandžio vėžio. Iš pradžių pastangų, mes išnagrinėjome El raiškos lygį šlapimo mėginių trijų kitų vėžio rūšių (plaučių, storosios žarnos ir tiesiosios žarnos vėžys) ir gerybinių pakitimų (gastritas ir skrandžio lejomiomomis). Bandymas buvo padaryta dėl šlapimo mėginių 9 plaučių vėžio, 10 gaubtinės žarnos vėžio, 10, tiesiosios žarnos vėžio, 2 gastritas, ir 2 skrandžio lejomiomomis pacientams. Aišku, mes galime matyti, kad 9 iš 9, 9 iš 10, 10 iš 10, 2 iš 2, ir 2 iš 2 mėginiai turi EL juosta šlapime pavyzdžių plaučių vėžio, storosios žarnos vėžio, tiesiosios žarnos vėžio, gastritas ir skrandžio lejomiomomis pacientų, (3 pav.) Nors šis rezultatas negarantuoja kad EL trūksta šlapime yra tik iš skrandžio vėžio rodiklis, jis primygtinai rekomenduojame, kad EL yra labai specifinė. Didesni tyrimai bus atliekami mūsų atlikimo nagrinėjimą, kuris bus įtraukti iš esmės daugiau pacientų kitų ligų kuris gali būti susijęs su skrandžio vėžio, pavyzdžiui, kasos vėžio ir stemplės vėžio. 3 pav EL gausos šlapime mėginiais kitų vėžio rūšių ir gerybinių pakitimų. (A) Devyni plaučių vėžio mėginiai; (B), dešimt gaubtinės žarnos vėžio mėginiai; (C) Dešimt tiesiosios žarnos vėžys mėginiai; (D), Dviejų gastritas ir du gastritais lejomiomomis mėginiai. (+) Teigiama kontrolė Lane.
EL raiškos lygį audiniuose ir serumais Viesbutis The tyrimas rodo, kad EL baltymas yra išvykęs į skrandžio vėžio šlapimo mėginių. Atsižvelgiant į tai, kad šlapime yra tiek baltymų sekretuojamas iš urothelium, taip pat baltymų iš plazmos ar ląstelių lizė, mes taip pat išnagrinėjo EL raiškos lygį audinio arba serume skrandžio vėžiu sergantiems pacientams, siekiant padaryti išvadą dėl šios stebėtu nėra priežastis. Vakarų dėmė buvo atliktas siekiant įvertinti El raiškos lygį vėžio audinių mėginių ir atitikimo noncancerous mėginių iš 12 negydytų skrandžio vėžiu sergančių pacientų (1b pav.) buvo pastebėta jokio reikšmingo skirtumo tarp ekspresijos lygio EL tarp skrandžio vėžio audinių mėginių ir derantį noncancerous mėginių (Vilkoksono anketa pasirašė rank testas, p
= 0,90).
Be Imunohistocheminiais dažymo eksperimentai, mes nustatėme, kad rudos granulės daugiausia pasirodė citoplazmą (4 paveikslas). Teigiamas išraiška EL baltymų buvo nustatyta 58% (7/12) skrandžio vėžio ir 67% (8/12) skrandžio gretimų noncancerous mėginių (3 lentelė). Nebuvo skirtumo tarp ekspresijos lygio šio baltymo tarp skrandžio vėžio ir derantį noncancerous audinių (chi kvadrato testas, p
= 0,67). Mes taip pat išnagrinėjo galimą ryšį tarp EL ekspresijos lygį ir gali būti svarbi klinikos veiksnių anksčiau paminėtų. Ne santykiams buvo aptikta. Rezultatai pateikti 4 lentelėje 4 pav Imunohistocheminis analizė EL audiniuose skrandžio vėžio ir atitikimo noncancerous mėginius. Rudos granulės EL daugiausia pasirodė citoplazmoje. Gretimi noncancerous audiniai dažyti (A) (× 400). Vėžio audiniai tamsintas su (B) (× 400).
3 lentelė EL raiškos skrandžio vėžio ir gretimos noncance ROUS mėginių
N
El baltymų

P
Neigiama

Teigiamas
gretimų kontrolę
12
4 (33%)
8 (67%)
0,67
skrandžio vėžys
12 (42%)
7 (58%)
4 lentelė EL išraiška ir klinikos veiksniai skrandžio vėžio audiniuose
klinikos
5
N
El
P
Neigiama

Positive
Lytis
Vyras
6
2
4
0,56
Moteris
6 3
3
Amžius (metai)
≤50
3
1
2
0,74
> 50
9
4
5
Lauren klasifikacija
žarnyno
5
3
2
0,28
Difuzinė
7
2
5
histologinis tipas
labai diferencijuota
1 1
0
0,36
Vidutiniškai diferencijuoti
4
2
2
blogai diferencijuotos
7
2
5
naviko stadijos
I ir II
2
1
1
0,79
III ir IV
10
4
6
Gylis invazija
t1 ir t2
5
2
3
0.92
T3 ir T4
7
3
4
Limfmazgių metastazės
Teigiamas
3
1
2
0,74
Neigiamas
9
4
5
Mes tada matuojamas El raiškos lygį serume 12 skrandžio vėžiu sergančių pacientų, palyginti su
tie 12 sveikų žmonių (1c pav.) Tai gali būti vertinama, kad nėra aiškaus skirtumo tarp vėžio pavyzdžių ir sveiko kontrolės (Mann-Whitney testą, p pervežimas = 0,79). Atkreipiame dėmesį, kad EL ekspresijos lygis turi platų pasiskirstymą abiejose pavyzdžių rinkinių.
Diskusijos
Mūsų ankstesniame tyrime, mes sukūrėme naujovišką skaičiavimo metodą ir pritaikė jį prognozuoja, kad EL potencialiai gali būti labai perspektyvus diagnostikos šlapimo žymeklis skrandžio vėžio. Čia, mes dar labiau patvirtino šią numatymą didesnis mėginys rinkinio, ir be to, mes atradome, kad EL baltymas yra labai specifiškas skrandžio vėžio.
EL yra naujas narys trigliceridų lipazės genų šeimos, ir turi aukštos sekos homologiją su lipoproteinų lipazės (LPL) (45%), kepenų lipazės (HL) (41%) ir kasos lipazės (PL) (21%) [19, 20]. EL turi pirmiausia fosfolipazės ir turi trigliceridų lipazės aktyvumą, kuris turi svarbų vaidmenį kraujo plazmos didelio tankio lipoproteinų apykaitos ir aterosklerozės vystymosi [21-25]. Keletas tyrimų parodė, kad LPL vaidina svarbų vaidmenį kancerogenezėje, įskaitant žarnos ir kasos vėžio ir plaučių vėžio [26, 27]. Tačiau, EL nebuvo pranešta būti susijęs su bet kokiu vėžiu išskyrus sėklidžių gemalo ląstelių navikų, o mechanizmas yra neaiškus [28].
Atradimas, kad sąvoka lygiai EL gerokai sumažintas šlapime skrandžio vėžiu sergančių pacientų , o rodo jokio skirtumo tarp atitinkamų serumo mėginius, taip pat audinių mėginius yra labai intriguojantis. Viena iš galimų priežasčių gali būti dėl į glomerulų filtracijos sistema savybių. Ji yra žinoma, kad plazmos baltymų buvo filtruojamas nors į glomerulų dėl jų dydžių, mokesčių ir struktūra formos [29] pagrindu. Mažos ir teigiamo krūvio molekulės buvo lengviau filtruojamas į šlapimą, nei didelių ir neigiamo krūvio baltymų. El seka turi teigiamo krūvio grupių [30], kurios gali būti priežastis, kad jis gali būti filtruojamas iš sveikų žmonių šlapime skaičių. Tačiau vėžinių ląstelių mikroaplinka linkę būti labiau rūgštus [31], kuris potencialiai gali keistis teigiamai įkrautas grupes ELS į neigiamus, taigi išvengti molekules iš filtruojamas į šlapimą. Žinoma, tiksli priežastis dar turi būti suprantama, ir garantuoja, tolesnėms studijoms.
Šlapimo yra idealus neinvazinis šaltinis vėžio nustatymo. Tačiau, reikia pažymėti, kad šlapimas turi aukštą varijavimas baltymų koncentracijos visoje per dieną, kuris gali būti veikiama įvairių faktorių (amžius, dieta, ir surinkimo laiku). Dėl šios priežasties, ji yra pagrindinis normalizuoti baltymo koncentraciją šlapime, kai matavimo ekspresijos lygį baltymų. Todėl mes naudojome santykinius EL raiškos lygį, atsižvelgiant į tai, šlapimo kreatinino kiekvieno mėginio normalizuoti EL raiškos lygį skirtingose ​​šlapimo mėginių. Šio tyrimo rezultatai rodo, kad šlapimo EL išraiškos praradimas gali teikti plataus masto atrankos ir daugiau tiesioginių egzaminų pavyzdžiui, gastroskopija ir patologija bandymu biopsijos mėginio bus reikalingą galutiniam diagnozės metu preliminarų nuoroda skrandžio vėžio. Daugelis tyrimų pranešti, kad diagnostikos biologinis gali būti naudinga prognostinė ir išgyvenimo rodiklis skrandžio vėžio [32-34]. Tai buvo ne tik prognozuoti prognozavimo informacija apie vėžiu sergantiems pacientams, bet taip pat suteikti gydymo strategiją gydytojas. Taigi, mes išnagrinėjo tarp EL ekspresijos lygį ir klinikos ypatumus skrandžio vėžiu koreliaciją. Nors EL daro daug žadančią diagnostikos žymeklį skrandžio vėžio, neradome jokių stiprius ryšius tarp EL ekspresijos lygio ir naviko anketa prognozinių klinikos savybių, tokių kaip naviko tipo, invazija ir TNM sustojimo. Be to, dėl to, kad per trumpą laiką studijų ir reguliariai tolesnius veiksmus pacientams trūksta, mes negalime įvertinti išgyvenamumas šiame tyrime. Skurdžiais turimais duomenimis, EL išraiška negali būti naudojamas kaip naudingus prognozinių ir išgyvenimo rodiklių skrandžio vėžio. Kitas tyrimas, siekėme ištirti El baltymų raišką didesnių skaičių pacientams, sergantiems įvairių auglių ir tęsdama studijas, ir ištirti tiksliai mechanizmą El vaidmens skrandžio vėžio kancerogenezėje.
Išvada
išvada, nors jis nėra susijęs su naviko stadijos ar žemesnę klasę, šlapimo EL gali būti labai perspektyvus skrandžio vėžys biologinis, kurie gali būti taikomi didelio masto atsijos su dideliu diagnostiniu ištikimybės.
Pastabos
Xueyan Dong, Guoqing Wang prisidėjo vienodai šio darbo
Santrumpos
EL.
Endotelio lipazės
ROC: Rīga, ROC kreivė kreivė

AUC:
pagal ROC kreive apribotas plotas
deklaracijų
Padėka
Dėkojame Xiaoming Xu už jo indėlį, departamentas Patobiologijos laboratorija Norman Bethune medicinos kolegija Jilin universitetas. Šis darbas buvo remiamas nacionalinių sveikatos institutų (1R01GM075331), "įžymus mokslininkas" dotacija iš Gruzijos vėžio koalicija, ir sėkla finansavimas iš Gruzijos universitete. Taip pat buvo iš dalies remiamą Nacionalinės pagrindinių mokslinių tyrimų programą Kinijos (973 programos, 2011CB512003), Nacionalinis gamtos mokslo fondo Kinijos (81271897 ir 81071424), specializuoti mokslinių tyrimų fondo Doktorantūros programa aukštojo mokslo Kinijos (20110061120093), Kinija Docentas mokslo fondas (20110491311 ir 2012T50304), fondas Jilin provincijos sveikatos departamento (2011Z049) ir Bethune ypatingą pamatai Jilin universiteto pervežimas Autoriai "originalas pateiktas failai vaizdų
Žemiau išvardintos nuorodos į autorių originalių pateiktų failų vaizdų , Visi autoriai skaityti ir patvirtino galutinį rankraštį.

• Klinikos charakteristikos ir prognostinė analizė Lauren klasifikavimo skrandžio adenokarcinoma in China
• MicroRNA-206 slopina skrandžio vėžio ląstelių augimą ir metastazes