Zdravilni potencial Picrorhiza kurroa (Scrofulariaceae) korenike proti razjed na želodcu, indometacin povzroča: a. Mehanične raziskovanje

Zdravilni potencial Picrorhiza kurroa
(Scrofulariaceae) korenike proti razjed na želodcu, indometacin povzroča:. Mehanizmov raziskovanje
Povzetek
Ozadje
Ta študija je bila izvedena za oceno potenciala korenike indijskega zdravila rastlina, Picrorhiza kurroa
pri zdravljenju, indometacin povzroča akutne želodčne razjede pri miših in preučila njeno sposobnost, da se spremeni oksidativni stres in raven prostaglandinov (PGE 2) in ESPG med postopkom.
Metode
moški švicarski albino miši, gnojne z indometacin (18 mg /kg, po, enkratni odmerek) so se zdravili do 7 dni z različnimi odmerki ekstrakta metanola P. kurroa
korenik (določen kot PK). Sposobnost celjenja najbolj učinkovit odmerek PK (20 mg /kg, str. O. X 3 d) smo primerjali z omeprazolom (Omez) (3 mg /kg, str. O. X 3 d). Učinki drog zdravljenje za enega do tri dni na biokemičnimi parametri so bili ovrednoteni s primerjavo rezultatov s tem neobdelanih miši od 1 st in 3 tretjem dnevu razjede. V želodcu tkiva miši so za biokemične analize, uporabljene.
Rezultati
makroskopski indeksov je pokazala največjo razjede na 3 rd dan po indometacinom uprave, ki je bila dejansko zacelila s PK. V skladu z režimom optimizirano zdravljenja, PK in Omez zmanjšala indeksov razjede za 45,1% (P
< 0,01), in 76,3% v tem zaporedju (P
< 0,001)., V primerjavi z nezdravljenimi razjedami na miših
v primerjavi z razjedami na neobdelanih miši, ki so se zdravili s PK 3 dni opazili zmanjšano raven thiobarbituric kisline reaktivnih snovi (TBARS) (32,7%, P
< 0,05) in beljakovin karbonilno (37,7%, P
<0,001), in povečana mucin (42,2%, P
< 0,01), sluznični PGE 2 (21,4%, P
< 0,05), in izrazi COX-1 in 2 (26,9% in 18,5%, P
< 0,05) ESPG (149,0% P
< 0,001) in VEGF (56,9%, P
< 0,01). Omez zmanjšala TBARS (29,4%, P
< 0,05) in beljakovin karbon (38,9%, P
< 0,001), in povečana mucin (38,3%, P
< 0,01), brez občutno spremenil druge parametre.
Zaključek
PK (20 mg /kg, PO × 3 dni) bi lahko učinkovito zdraviti, indometacin povzroča želodčne razjede pri miših z zmanjšanjem oksidativnega stresa, in spodbujanje mucinsko izločanje, sintezo prostaglandinov in povečuje izrazov ciklooksigenaze encimov in rastnih faktorjev. je
Ozadje
prebavil toksičnosti, povezane z nesteroidna protivnetna zdravila (NSAID) pomemben medicinski problem, kljub nedavnim farmacevtskih napredek [1]. Poleg indukcijo razjede v želodcu, se pojavijo tudi nesteroidna protivnetna zdravila za zaviranje razjede zdravljenje [2, 3]. Zato, preprečevanje gastrointestinalne motnje še vedno skrbi za klinične medicine in raziskovalcev. Kljub njihovi učinkovitosti pri upravljanju razjede želodca z NSAID inducira so trenutno na voljo sintetični anti-razjeda zdravila podeljuje neželene učinke, ki pa so tudi draga, zlasti za podeželsko prebivalstvo. V ta namen smo poročali obetavno anti-ulkusnih več dejavnosti rastlinske proizvode [4-6]
Picrorhiza kurroa
. (Družina: Scrofulariaceae, splošno ime: Picrorhiza, katuka, kutki) je majhna trajnica zel raste v hribovitih delih regije severozahodne himalajske v Indiji in Nepalu. List, lubje in podzemni deli rastline, predvsem korenike se pogosto uporabljajo v tradicionalni indijski (ayurveda) sistemov medicine od antičnih časov. Čeprav kaže, antioksidant, deluje protivnetno in imunomodulatorne dejavnosti, je najbolj pomemben za njegovo hepatoprotektivni učinek. Grenke korenike Picrorhiza
so bila uporabljena za tisoč let v Indiji za zdravljenje ljudi z prebavne [7], in zaprtje zaradi nezadostnega prebavni izločanja [8]. Picrorhiza
se šteje kot trophorestorative zelišče za jetra, kot tudi močan imunski stimulans [9]. Njen sestavni, poročajo tudi picroliv da imajo choleretic učinek [10], in preprečuje poškodbe jeter, ki ga etanola [11] je povzročil, kemikalije [12] in mikroorganizme [13].
Glavni cilj te raziskave je bil preučiti celjenje last ekstrakta metanola P. kurroa
koreniko (določen kot PK) proti akutni razjed na želodcu, indometacin povzroča miši vis-à-vis
da komercialnega zdravila, omeprazol (Omez). Indometacin, predstavnik nesteroidna protivnetna zdravila (NSAID) družine, povzroča želodčnih razjed skozi različne postopke, vključno s proizvodnjo ROS, ki zavirajo sintezo prostaglandinov, infiltracijo polimorfonuklearnih levkocitov, indukcijo apoptoze in začetek peroksidacije lipidov [14, 15]. Zato je razjeda zdravilne sposobnosti zdravil, ki jih histopatologijo ocenjene, je bila povezana z njihovimi učinki pri zmanjševanju-indometacin povzroča oksidativni stres. Antioksidant aktivnost testnih vzorcev smo testirali glede na njihovo sposobnost, da zaščitijo oksidacijske škode na lipidov, proteinov in tiolne odvisni antioksidanta prestregli v želodcu tkivih. Nadalje je nesteroidna protivnetna zdravila inducirano gastropatije pripišemo tudi zmanjšane sinteze prostaglandinov [16]. Zato je vloga testnih vzorcev v večje izločanje sluzi, in izraz epidermalni rastni faktor (EGF), kot tudi dvignili PGE bile preiskane tudi 2 sinteze.
Metod
rastlinskega materiala
korenika P. kurroa
(označena kot PK), nabavljeno na domačem trgu je bila uporabljena za to delo. Obrat je bil taksonomsko identifikacijo (pristop št. 324139), ki ga ankete Botaničnega v Indiji, indijski botanični vrt, Kokata, Indija.
Kemija
2-Thiobarbituric kislino (TBA), etanol, so butanol in etilacetat pridobljenih iz E. Merck (Mumbai, Indija), medtem ko je bila trikloroocetno kislino (TCA), Thomas Baker (Mumbai, Indija). Alcian modra, indometacin, goveji serumski albumin (BSA), haematoxylene, alum, eozin, butilhidroksitoluen (BHT), gvanidin hidroklorid, trifluoroocetne kisline (TFA), omeprazol (Omez), 3,3 '-diaminobenzidine (DAB), kunčjega anti -mouse ESPG in Trizma bazo smo nabavili od Sigma kemikalije (St. Louis, MO, ZDA). Drugi reagenti so bili 35% vodikovega peroksida (Lancaster, Morecambe, Velika Britanija), 2,4-dinitrofenil hidrazin (DNPH), dinatrijev hidrogenfosfat in natrijev dihidrogen fosfat (DOLB, Pool Dorset, Velika Britanija), saharoza in 5,5'-ditiobis- -2-nitrobenzioc kisline (DTNB) (SRL, Mumbai, Indija), konj in serum koza (Banaglore Genie, Banaglore, Indija), PGE 2 metabolita komplet (Cayman Chemical, Michigan, ZDA) in peroksidaze konjugirano kozje dodatka proti rabbit IgG (EMD Biosciences, sandiego, ZDA).
Instrumentation
absorbance spektrofotometrijo je bila opravljena pri 25 ° C, z uporabo JASCO v-550 UV-Vis spektrofotometer. Valovnih dolžin skenira in meritve absorbance so bile izvedene v 1 ml kremena celice z dolžino 1 cm poti.
Priprava rastlinskih izvlečkov
zračno posušena korenina P. kurroa
(250 g) je bilo sesekljano na drobne koščke, namoči v metanolu (1 l) za dva dni in supernatant dekantiramo. Po ponavljanju celotnega procesa trikrat, združene ekstrakte filtriramo skozi najlonsko mrežico in uparili v vakuumu in končno liofiliziramo. Surov ekstrakt, ki je določen PK celotni rokopis je shranjen v vakuumskem eksikatorju.
Pripravo zdravil
Droge so pripravljeni iz PK in Omez kot vodne suspenzije v 2% gumi akacije kot vozila, in dajemo na miših ustno.
farmakoloških preskusov
živali in eksperimentalnim protokolom za razjede
so samci švicarski albino miših so gojene na Dr. BC Roy Post Graduate Institute of temeljnih medicinskih znanosti, Kolkata, Indija in Barč Laboratory Animal House Facility , Mumbai, India. To je bilo nabavljeno po pridobitvi pred (Post Graduate Institute of temeljnih medicinskih znanosti, Kolkata Odbor za etiko Animal 507 /CPCSEA, Sankcija št IAEC /SB-2/2004 /UCM-16, z dne 06.15.04 in odbor Barč živali etiko (BAEC) laboratorijske živali objekt. sankcioniranje št. BAEC /03/05 z dne 11.07.05) z ustreznimi odbori za etiko živali obeh centrov in so ravna po mednarodnih smernicah živali etični odbor. Stara miši 6-8 tednov (25-30 g) so bili vzrejeni na uravnoteženem laboratorijsko prehrani, kot na NIN, Hyderabad, Indija in glede na vodovodno vodo ad libitum. So bili vzdržujemo pri 20 ± 2 ° C, 65-70% vlažnost in dan /noč cikel (12 h /12 h). Na začetku vsakega poskusa smo vse živali označene z značilnimi zarez v ušesu in okončin in nato naključna. To je bilo storjeno, da opravlja vse poskuse v slepi način. Razjede v miši smo inducirali z dajanjem indometacin (18 mg /kg, str. O.) Raztopimo v destilirani vodi in suspendiramo v vozilu, gumi akacije (2%) kot enkratni odmerek. Naše študije s 5, 10, 15, 18, 20, 25 in 30 mg /kg, str. o. od indometacin pokazala, da najnižje doze (5 in 10 mg /kg) predvideno manjše razjede po 6 urah dajanja zdravila, medtem ko so višji odmerki (25 in 30 mg /kg) je privedlo do smrtnosti. Izbrani odmerek (18 mg /kg) proizvaja optimalno razjede, z vnetjem in sluznice žalitev, brez povzročanja smrtnosti pri miših. Živali so bili prikrajšani za hrano, ampak je imel prost dostop do vode iz pipe 24 ur pred razjedo indukcijo.
Standardizacija odmerka drog
Za standardizacijo odmerkov drog, PK (5, 10, 20 in 40 mg /kg) je dobila v enkratnem odmerku na dan do sedem dni. Prvi odmerek PK in Omez so imeli 6 ur po indometacin uprave. V naslednjih šestih dneh smo testne vzorce glede na 9. uri na vsak dan. Pet miši so bile posnete v vsaki skupini in vsak eksperiment smo ponovili trikrat. Miši so žrtvovali na 1 st, 3 rd, 5 th in 7 th dni, 4 ur po dajanju zadnjega odmerka PK. Obseg celjenje razjed je bila ocenjena iz makroskopske škode ocen (MDS) iz neobdelanih in obdelanih razjedami na miših v posameznih dnevih. Režim optimizirana zdravljenja (odmerek zdravila in trajanje zdravljenja) so bili ocenjeni z MDS skupin miši, ki so prejemali metodo zdravljenja.
Ocena razjede in zdravljenje z MDS
Miši žrtvovali po prevelikem odmerku tiopental. Želodec od običajnih in tretiranih skupinah so se hitro odstranili, odprta ob večji ukrivljenosti in temeljito sprati z fiziološke raztopine. V gnojne želodca površine sluznice smo prikazali s pomočjo preglednega stanja in seciranje mikroskopom. MDS je bila ocenjena [17], ki ga razvrščanje škodo želodca na 0-4 lestvici, ki temelji na resnosti hiperemija in hemoragičnih poškodb: 0 - skoraj normalno sluznice, 0,5 - hiperemija, 1 - en ali dva lezij, 2 - hude poškodbe , 3 - zelo hude poškodbe, 4 - sluznico polno poškodb. (lezije - hemoragične erozije, hiperemija - žilne zastojev). Poskuse smo izvedli z dvema raziskovalci slepo skupini in zdravljenjem živali. Oddelki so bili označeni za odpravila pristranskost opazovalca. Podatki za analize so prikazani kot povprečje ± SEM od pregleda najmanj tri odseke na žival in pet živali na skupino.
Študije o biokemičnih parametrov
Rezultati MDS pokazala največjo razjede po treh dneh zdravljenje odvisnosti od drog. Želodec razjede v nezdravljenih miših je prav tako dosegel najvišjo vrednost na 3 rd dan po indometacinom upravo. Zato smo ocenili biokemične parametre v okviru režima, optimizirano zdravljenja [PK (20 mg /kg) in Omez (3 mg /kg)] do 3 tretjem dnevu samo razjede. Za to so bile naslednje sedmimi skupinami vsaka vsebuje 5 miši izberemo izmed tistih, ki se uporabljajo pri testu MDS in navedeni podatki izhajajo iz treh ponovitev:
skupine I - normalne kontrolne miši; Skupina II - gnojne miši in žrtvovali po 10 urah (štejejo kot en dan); Skupina III - gnojne miši in žrtvoval na 3 rd dan; Skupina IV-V - gnojne miših, zdravljenih s PK in Omez oziroma za 1 dan, in žrtvovali 4 ure po dajanju vzorcev; Skupina VI-VII -. Gnojne miših, zdravljenih s PK in Omez oziroma za 3 dni, in žrtvovali v 3 rd dan, 4 ure po zadnjem odmerku testnih vzorcev
kvantifikacijo beljakovin in lipidov odškodnine v razjede in zdravljenje
žleznega želodca tkiv zberemo od petih živali, za vsako tkivo, speremo z ustreznim pufrom in se uporablja za biokemične študije. Mokre uteži tkiv smo zabeležili in poskuse smo izvedli v treh izvodih. Žleznega porcije od kontrole, smo gnojne in obdelamo drog miših sprejeti v različnih časovnih intervalih homogenizirali s steklenimi teflonsko homogeniziranje cevi v 50 mM fosfatnem pufru, pH 7,4 in centrifugirali pri 1200 x g, da dobimo supernatant. Količina beljakovin karbonili v homogenata tkiva, je bila določena na podlagi katerih so poročali metodo [18]. DNPH (4 ml, 10 mM) v 2 M HCl dodamo supernatantu (1,0 ml), ki je bila inkubirana 1 uro s prekinjenim stresanjem. Dodali smo ledeno mrzlo 20% vodna raztopina STS (5 ml) in zmes inkubiramo 15 minut. Oborjeni protein smo sprali 3-krat s etanola-etil acetata (1: 1), raztopimo v 1 ml raztopine, ki vsebuje 6 M gvanidin HCl v 20 mM kalijevega fosfata (enobaznega) prilagojena na pH 2,3 s trifluoroocetno kislino. Po centrifugiranju je bila absorbanca supernatanta berejo 362 nm (∈ = 2,2 x 10 4 M -1 cm -1).
Za analizo peroksidacije lipidov (z vidika TBARS), 10% homogenat iz vsake od posameznih vzorcev smo pripravili pufru (320 mM saharoze, 5 mM HEPES, 20 mM EDTA in 0,01% BHT). Ti so bili podvrženi diferencialno centrifugiranje (1200 x g in 12000 x g), da dobimo mitohondrijev pelete, ki so bili sprani s pufrom (150 mM KCI in 20 mM fosfatni pufer) in končno suspendirali v 50 mM fosfatnem pufru, pH 7,4. Membrana frakcija mitohondrijsko (1 ml) smo obdelali z STS-TBA-HCl (2 ml, 15% TCA, 0,375% TBA, 0,25 N HCl), ki vsebuje 0,01% BHT, segrevamo na vreli vodni kopeli 15 minut, ohladimo in centrifugiramo . Absorbanco supernatanta smo izmerili pri 535 nm (∈ = 1,56 × 10 5 M -1 cm -1) [19].
Merjenje brez beljakovin tiolom (NP-TSH )
Po metodi poročali [20], je bila izmerjena želodca sluznični NP-TSH. Na kratko, fundic želodec homogenate iz nadzora, razjedami, miših, zdravljenih z drogami, v 0,2 M Tris-HCl pufru, pH 8,2, ki vsebuje 20 mM EDTA in centrifugira. Alikvot homogenata (1 ml) smo oborili z ledeno mrzlo 20% TCA (1 ml) in centrifugiramo. Supernatant (1 ml) smo dodali 2 ml 0,8 M Tris-HCl pufru, pH 9, ki vsebuje 20 mM EDTA in mešane z 0,1 ml 10 mM DTNB. Absorbanca rumene kromogena pri 412 nm (∈ = 13,6 x 10 4 M -1 cm -1) je bil prebran.
Mucin testa
Po metode, objavljene [21] je bila prosta mucin v želodcu tkivih ocenjen. Na kratko smo žlez del želodca ločen od lumen želodca, stehtamo in takoj prenese v 10 ml 0,1% w /v raztopine Alcian modro (Ab) (v raztopini 0,16 M saharoze puferskih z 0,05 mM raztopine natrijevega acetata, pH naravnamo na 5,8). Po obarvanjem 2 h smo presežek barvilo odstranimo iz tkiva z dvema zaporednima splakovanje z 10 ml raztopine 0,25 M saharoze. Barvilo kompleksiran z želodčno sluznico stene smo ekstrahirali z 10 ml 0,5 M magnezijevega klorida s prekinitvami stresanjem (1 min) pri 30 min intervalih 2 uri. Modra ekstrakt (2 ml) smo močno stresali z enakim volumnom dietil etra. Dobljeno emulzijo smo centrifugirali pri 3600 obratih na minuto za 10 minut in absorbanco vodno plast bere 580 nm. Količina Ab pridobljeni na g mokrega žleznega tkiva smo izračunali iz standardne krivulje, pripravljene z uporabo različnih koncentracij Ab.
COX-1 in COX-2 ekspresije Preskusno
V 30 minutah po obiranju, z razjedami odseki želodcu tkiva so bile določene v nevtralnem-buffered 10% formalinom slane in prerezana. Po 24 urah pritrdilnih sledila vključitvijo v parafinsko blok, je bilo zmanjšanje v odseke 5 mikronov na steklu in izrazi COX-1 in COX-2 kvantificiramo po poročali postopka [22], z majhno spremembo. Po deparaffinization v ksilen, so odseki obdelamo z stopenjski serijo alkohola in nato rehidrirane v PBS pri pH 7,5. Odseki smo zaporedoma obdelamo s 3% vodikovega peroksida v PBS, in proteinske zaviralcev (5% goveji serumski albumin, 5% običajnega koza serumu v PBS) in inkubirali preko noči pri 4 ° C, s primarnim protitelesom (miš anti-COX-1 in COX 2, 1: 200). Po inkubaciji 2 uri pri sobni temperaturi s peroksidazo konjugirano kunčjega anti-mouse sekundarnih protiteles (1: 500), je bila pozitivna reakcija zazna izpostavljanja stabilno DAB za 2 do 5 minut. V kontrolnih odsekih so izpuščeni protitelesa in dodamo samo PBS. Po counterstaining diapozitive s hematoksilinom Meyer je bilo intenzivnosti barvnih immunolocalized izdelkov ovrednotili s Biovis MV500 programske opreme. Pet področij iz vsakega oddelka so skenirani in je bila izračunana integrirana optična gostota (IOD) na vsakem območju. IOD negativne kontrole smo odšteli od IOD vsak eksperimentalni sekciji za vsako žival v vseh skupinah.
Prostaglandinov vsebnosti
po obiranju želodca, smo izrezali korpus (polna debelina), stehtamo (100 mg ) in suspendiramo v 10 mM natrijevim fosfatnim pufrom, pH 7,4 (1 ml). Tkiva smo mleto fino s škarjami in inkubirali pri 37 ° C 20 min. Po centrifugiranju (9000 x g), prostaglandin E 2 (PGE 2) ravni v supernatanta smo izmerili z ELISA [23], in koncentracije so izraženi kot pg /mg proteina.
ESPG izraz test
imunskim barvanjem ESPG bila izvedena [22] po metodi, podobni tisti, ki se uporablja za COX-1 in COX-2, z manjšimi spremembami. V tem primeru, ko blokiranje endogenega peroksidazo in zdravljenju z blokatorji proteina, so odseki tkiva inkubiran preko noči pri 4 ° C, s primarnim protitelesom po ustreznem razredčenju. V kontrolnih odsekih, dodamo le PBS izpuščanjem protitelesa. Po inkubaciji 1 uro pri sobni temperaturi s peroksidazo konjugirana kozjega anti-kunčjega IgG smo pozitivno reakcijo zazna izpostavljenostjo DAB za 2 do 5 minut. Po counterstaining diapozitive s hematoksilinom Meyer je bilo intenzivnosti barvnih immunolocalized izdelkov, količinsko, z uporabo Biovis MV500 programske opreme. Pet področij iz vsakega oddelka so skenirani in je bila izračunana integrirana optična gostota (IOD) na vsakem območju. IOD negativne kontrole smo odšteli od IOD vsak eksperimentalni sekciji za vsako žival v vseh skupinah.
Vsebnost serumu VEGF
serumu VEGF smo merili z uporabo vzorcev krvi, pripravljene iz padajočem aorte s komercialno na voljo ELISA kompleti naslednjih navodilih proizvajalca.
želodca sekrecijski testom (pylorous ligacija modela)
Da bi preučili učinke testnih zdravil na izločanje želodčne, je bila izvedena piloricne ligacija želodca standardizirane v našem laboratoriju. Eno skupino miši (eksperimentalni kontrola) prejela 2% gumi akacijo v destilirani vodi (0,2 ml na miših, PO), medtem ko so različne skupine zdravljenja zaradi PK (20 mg /kg x 3 d), Omez (3 mg /kg x 3 d), indometacin (18 mg /kg x 1 d) kot taka ali skupaj s PK (20 mg /kg x 3 d), Omez (3 mg /kg x 3 d) oz. Na 3 tretjem dnevu je bila trebuha živali odpre pod svetlobnim etru anestezijo za pilorusa vezavo (PL). Po zaprtju trebuha, so bile živali pošljejo v kletkah v svetlobo za zadrževanje in pustimo, da si opomore od anestezije. Po 6 urah smo žrtvovali živali, odprli trebuh in ligaturo smo dali okoli požiralniku. Želodec je bil odstranjen in je bilo izprazniti vsebino v merilno epruveto za centrifugiranje, potem ko majhno nick po večji ukrivljenosti, ki mejijo na pilorično vezavo. Vsebine želodca so bili zbrani, merjeno, centrifugirali in izpostavljena biokemične analize.
Statistična analiza
so podatki predstavljeni kot povprečje ± SEM. Parametrični podatki, ki jih vsebuje, so analizirali vse biokemične parametre uporabo seznanjenih test "t" za seznanjenih podatkov ali enosmerno analizo variance (ANOVA) in nato čez Dunnet multiple primerjave preizkus objavili. Neparametrični podatki (makroskopski točkovanja) smo analizirali s testom Kruskal-Wallis (neparametrični ANOVA), ki ji sledi Dunn je multiple primerjave objavili test. Verjetnost vrednost P
< 0.05 je zdelo pomembno. IC 50 vrednost PK je bila ocenjena s pomočjo analize probit in stopnjo pomembnosti analiz smo raziskali s testom hi-kvadrat.
Rezultati
Pridobivanje in fitokemikalija analiza
Proces ekstrakcije dobimo metanol ekstrakt, PK v 12.57% w /w dobitkom. Analiza TLC PK je pokazala, da je kompleksna zmes velikega števila organskih spojin, večina od njih prisotna kot glikozidov, kot razkriva Molisch testu. Prisotnost apocynin, andorsin, picrosides I in II, in katukoside skupaj z drugimi neznanih spojin v PK smo potrdili s primerjavo svoj profil TLC s tistimi iz avtentičnih vzorcev.
Standardizacija odmerka PK za celjenje želodčne razjede pri miših
odmerek PK za učinkovito celjenje razjed bila optimizirana z izvedbo zdravljenje z PK (5, 10, 20 in 40 mg /kg) do sedem dni in primerjavo vrednosti MDS iz obdelanega in neobdelanega miši na posameznih dnevih . Časovni potek obsegu želodčne razjed (kot je pokazala z vrednostmi MDS) in njeno preprečevanje z različnimi odmerki PK so prikazani na sl. 1. Miši, ki so prejemali vozilo pokazala le nobenih poškodb sluznice. Obdelava miši z indometacin (18 mg /kg) proizvaja tipične časovno odvisna akutne poškodbe v želodčni sluznici. Razjed dosegel največ na 3 tretjem dnevu razjed, ko je MDS vrednost povečala za 162,1% v primerjavi z na prvi dan (P
< 0,001). Zatem je bilo postopno okrevanje zaradi naravnega zdravljenja in na 7. th dan po razjed je bila vrednost MDS primerjavi s tisto na dan ena zmanjšana za 49,2% (P
< 0,01). Slika 1 Časovni potek želodčne razjed in njeno preprečevanje z različnimi odmerki PK. Želodčne razjede pri miših smo inducirali z zaužitjem indometacina (18 mg /kg telesne teže). Različne doze PK so bile uporabljene za poskuse. Indeksi razjede so bile izmerjene v različnih dneh 4 h po zadnjem odmerku PK in vrednosti so povprečje ± S.E.M. (N = 15). AP
< 0,01, BP
< 0,001 v primerjavi s 1. dan ulceriranega neobdelanih miši; cP
< 0,01, dP
< 0,001 v primerjavi s skupino III miši.
PK, na vseh izbranih odmerkih so pokazale, maksimalno razjede na 3 tretjem dnevu razjede, učinek pa je odvisna od odmerka. V primerjavi z ustreznimi razjedami nadzora, zmanjšanja MDS (45,1% -52,9%, P
< 0,01) so bili po PK (20 in 40 mg /kg) podobna, in bistveno bolje kot, da je na manjši odmerek (10 mg /kg). Učinek PK (5 mg /kg) je bil zanemarljiv. Pod podobnimi pogoji, zdravljenje z Omez (3 mg /kg) za 3 dni zmanjšalo vrednost MDS s 76,3% (P
< 0,001) v primerjavi s položajem skupine III miši. Zdravljenje opazili na podaljšanje zdravljenja do sedem dni s PK je bila boljša od tiste, opažene pri režimu zdravljenja tri dni. Vendar pa je velik del tega je zaradi autohealing, z manj prispevka PK.
Splošno, zdravljenje z PK (20 mg /kg) in Omez (3 mg /kg), 3 dni po indukciji razjeda, ki optimalno celjenje razjed . Glede na to so bile vse nadaljnje poskuse izvedemo z istim režimom zdravljenja. Izbrani odmerek Omez, ki je tudi priporočeni terapevtski odmerek za človeka je optimizirana pri nas [6].
Za neobdelanih miši, so opazili vrh razjede (najvišja MDS), na tretji dan indometacin uprave. Zato je bil ta časovni točki izbrana izvedeti IC 50 vrednost PK. Glede na vrednosti MDS za dan 3 rd gnojne neobdelanih miši kot 100%, IC 50 vrednost PK je bilo ugotovljeno, da je 23.30 ± 3,50 mg /kg.
Kvalitativna ocena
makroskopskih preiskav je pokazala, da indometacin dajanje povzročile znatno škodo na žleznega dela miši želodčne sluznice. V 6 urah po indometacin upravo, površinske erozije in blago vnetje v želodcu opazili kaže akutne razjede. Na dan indukcije razjedo, je bila izguba foveolar strukturo skupaj z Grobni arhitekturi vidna lastnost v večini neobdelanih miši. Prav tako so opazili blage vnetne infiltrat vsebuje nevtrofilcev v lamine proprie. Zdravljenje z obema PK in Omez celo za en dan omejila škodo z neenotno področjih ogoljelog strukturne epitela.
Indometacin inducirano gastropatije postal bolj izrazit tretji dan, ki kažejo izrežemo številna področja razjede z vnetnimi infiltrirati vsebuje nevtrofilcev in makrofagov v sluznica, sub-sluznica in mišic plašč skupaj z hemoragične korena. so opazili večje število nenormalnih celic s spremenjeno jedra v razmerju citoplazemskim. Zdravljenje s PK in Omez 3 dni pripeljali do zmanjšanja števila vnetnih celic skupaj s povečanim številom zdravih normalnih celicah v želodčni sluznici, kot tudi submucosa, korena in mišičnih plasti z minimalno sluznice zastojev.
Vpliv PK in Omez na peroksidacijo lipidov in beljakovin oksidacijo v želodcu tkivu
učinkov samega indometacin vnosa in po uporabi PK in Omez o obsegu peroksidacije lipidov (merjeno v smislu TBARS), oksidacijo beljakovin (merjeno v smislu vsebine protein karbonilne ), se je tiolna odvisna obrambni sistem (NP-TSH) in mucin vsebino želodca tkiva miši je prikazano v tabeli 1 in tabeli 2.Table 1. učinek PK in Omez na ravni TBARS, proteinskih karbonili, ne- protein tiola in mucin v ulkusa želodca tkivo micea na prvi dan razjed
Parametri
miši skupine I normalno nadzor
ABB Group II 1. dan gnojne nadzor
skupina III PK obdelano
Skupina IV Omez obdelano
TBARS (nmolov /mg beljakovin)
0,85 ± 0,03
1,18 ± 0.05c
0,94 ± 0.06d
0,89 ± 0.07d
beljakovin karbonili (nmol /mg beljakovin)
1,08 ± 0,05
1,62 ± 0.09b
1,49 ± 0,12
1,53 ± 0,07
NP-TSH (nmol /mg tkiva)
1,99 ± 0,09
1,66 ± 0.08b
1,86 ± 0,08
1,81 ± 0,09
mucin (ug /g tkiva)
335,03 ± 14,43
213,02 ± 0.59b
240,33 ± 20,49
253,33 ± 14.53d
aStomach razjede pri miših je bila povzročena z zaužitjem indometacin (18 mg /kg) . PK (20 mg /kg /dan x 1 dan) in Omez (3 mg /kg /dan x 1 dan) smo uporabili kot testne vzorce. Teste smo izvedli 4 ur po dajanju testnih vzorcev. Vrednosti so povprečje ± SEM (n = 15). BP
< 0,05 CP
< 0.01 v primerjavi z običajnimi miši; dP
< 0.05 v primerjavi s skupino II miši.
Tabela 2 Učinek PK in Omez na ravni TBARS, proteinskih karbonili, brez beljakovin tiol in mucin v ulkusa želodca tkivo micea na treh dan razjeda
Parametri
skupine I običajne nadzorne
skupina III 3. dan gnojne nadzor
Group V PK obdelano
ABB Group VI Omez obdelano
TBARS (nmolov /mg beljakovin)
1,02 ± 0,06
1,53 ± 0.06c
1,03 ± 0.09d
1,08 ± 0.05d
beljakovinski karbonili (nmol /mg beljakovin)
1,18 ± 0,07
2,61 ± 0.17c
1,62 ± 0.10f
1,59 ± 0.09f
NP-TSH (nmol /mg tkiva)
2,06 ± 0,09
1,73 ± 0,09
2,06 ± 0.14d
2,05 ± 0,1 D
mucin (mg /g tkiva)
343,30 ± 16,91
213,29 ± 17.91b
303,34 ± 17.4e
295,06 ± 15.62e
aStomach razjede pri miših je bila povzročena z zaužitjem indometacin (18 mg /kg). PK (20 mg /kg /dan x 3 dni) in Omez (3 mg /kg /dan x 3 dni) smo uporabili kot testne vzorce. Teste smo izvedli na dan tri razjed, 4 h po zadnjem odmerku zdravila. Vrednosti so povprečje ± SEM (n = 15). BP
< 0,05 CP
0.001 v primerjavi z običajnimi miši, dP
< 0,05, ep
< 0,01, fP
< . 0,001 v primerjavi s skupino III miši
indometacin upravljanje izrazito spodbudila peroksidacijo lipidov v želodčnih tkivih, dvižne vsebine TBARS za 38,8% (P
< 0,01) in 53% (P
< 0,001) oziroma na 1 st in 3 tretjem dnevu razjed, v primerjavi s položajem normalnih kontrolnih miši s. Zdravljenje s PK in Omez pokazala takojšnji učinek, zmanjšuje vsebnost TBARS za 20,3% in 24,6% v tem zaporedju v primerjavi s skupino II miši (P
< 0,05). Zdravljenje s PK in Omez tri dni je zmanjšala za 32,7% in 29,4% v primerjavi z mišmi skupine III (P
< 0,05).
Primerjavi z normalno vrednostjo, je bila vsebnost beljakovin karbon v ulkusa miši višji (50%) na prvi dan (P
< 0,05), ki je na maksimalno razjed povečala za 120,3% (P
< 0,001). Nobena od testnih zdravil pokazala takojšen vpliv na dan.

• Zaščitnih učinkov (1- (4-hidroksi-fenil) -3-m-tolil-propenon halkonsko v-indometacin inducirane želodca erozivnega škode rats
• Želodca patogen človek Helicobacter pylori je potencialno aceton karboksilaza, ki poveča njeno sposobnost, da kolonizira mice