PLoS ONE: Helicobacter pylori promovira epitelnih-mczcnhimnog tranzicije u rak želuca by snižavanje programirana stanična smrt Protein 4 (PDCD4)

Sažetak pregled

Helicobacter pylori pregled, gram-negativne, microaerophilic bakterija pronađena u želucu, pretpostavlja se da je povezan s karcinogeneze, invazije i metastaziranja na probavne bolesti. Citotiksin povezane gen A (CagA) je onkogeni protein H. pylori pregled koji je kodiran CAG patogeničnosti otok u vezi s razvojem raka želuca. Prijelaz epitelnog-mezenhimalnih (EMT) je glavni biološki događaj invazije ili metastaziranja epitelnih stanica. H. pylori pregled može promovirati EMT u ljudskim staničnim linijama karcinoma želuca, ali su posebni mehanizmi još uvijek nejasna. Mi smo istražili osnovni molekularni mehanizam EMT induciran H. pylori
CagA kod raka želuca. U našem članku, otkrio je želudac uzoraka raka i susjednih ne-kancerogene primjeraka imunohistokemijski i otkrili povećanu ekspresiju EMT vezane uz regulatorni protein TWIST1 i mczcnhimnog markera vimentin u tkivima oboljelih od raka, a faktor programirane stanične smrti 4 (PDCD4) i epitelni marker izraz E-kadherina smanjen u uzorcima karcinoma. Te su promjene povezane sa stupnjem malignosti tkiva. Osim toga, PDCD4 i TWIST1 razine su povezane. U želučanih stanica raka cocultured s CagA plazmid ekspresije, CagA aktivira TWIST1 i vimentin izraz, i inhibiraju ekspresiju E-kadherina po snižavanje PDCD4. CagA također promovira mobilnost želučanih stanica raka tako što regulira PDCD4. Dakle, H. pylori pregled CagA izazvana EMT u želučanim stanicama raka, što otkriva novu signalnu stazu EMT u želučanim staničnim linijama karcinoma pregled

Izvor:. Yu H, Zeng J, Liang X, Wang W, Zhou Y, Sun Y, et al. (2014) Helicobacter pylori pregled Promiče epitela-mczcnhimnog tranzicije u rak želuca by snižavanje programirane smrti stanice protein 4 (PDCD4). PLoS ONE 9 (8): e105306. doi: 10,1371 /journal.pone.0105306 pregled

Urednik: Rajeev Samant, Sveučilište Alabama u Birminghamu, Sjedinjene Američke Države Netlogu

Primljeno: 12 veljača 2014; Prihvaćeno: 21. srpnja 2014; Objavljeno: 21. kolovoz 2014 pregled

Copyright: © 2014 Yu i sur. Ovo je otvorenog pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan

financiranja. Ovo djelo je podržan od strane Nacionalnog Basic Research programa Kine (br 973 programa 2012CB911202.), Nacionalna Natural Science Foundation of China (br: 81171536, 81371781, 81272654, 81372680 i 81170514), medicinske znanosti i tehnologije Development program Shandong (nema . 2013WS0209) i Nezavisni zaklada inovacije Sveučilišta Shandong (br. 2012TS106). U financijeri nisu imali ulogu u studiju dizajna, prikupljanja i analize podataka, Odluka o objavi, ili pripremu rukopisa pregled

U konkurenciji interese.. Autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled

Uvod pregled

Helicobacter pylori pregled ( H. pylori pregled) je helix oblika, Gram-negativna bakterija povezana s bolesti probavnog sustava, uključujući kronični gastritis, peptički ulkus, karcinom želuca, i za sluznicu povezane limfom limfnog tkiva. H. pylori pregled je klasificiran kao kancerogen od strane Svjetske zdravstvene organizacije i Međunarodne agencije za istraživanje raka (WHO /IARC) u 1994. [1], [2]. pregled

H. pylori pregled geni imaju citotiksin povezane gen A (CagA) patogenosti otok koji kodira veliki virulencije proteina CagA i sustav za tip IV izlučivanjem (T4SS). CagA se dostavlja na stanice domaćina po T4SS i inducira nastanak i napredovanja raka. [3] H. pylori pregled može deregulirati proliferaciju stanica, utječu na normalan apoptoze, oblik utjecaj stanica ukinuti spojni aktivnost i olakšati epitela-to-mezenhimalnih prijelaza (EMT) fenotip nakon premješta u stanicu domaćina [4], [5]. H. pylori pregled, sredstva za povećanje proteina CagA utječe većina tih puteva. In vivo eksperimenti su pokazali da
transgenih ekspresija CagA može dovesti do više malignih miševa, uključujući želučanog epitelne hiperplazije, mijeloidne leukemije B-stanica limfoma ili gastrične polipa i adenokarcinom želuca i tankog crijeva [6]. Međutim, molekularni mehanizam H. pylori pregled CagA interakciji na stanicama domaćina je još uvijek nejasna. pregled

EMT početku je bio prepoznat kao značajka embriogeneze, vitalni proces za morfogeneze tijekom embrionalnog i srca razvoja. Međutim, ona također doprinosi fibroze tkiva, invazija tumora i metastaza. EMT karakterizira nekoliko različitih osobina, kao što su gubitak adhezije stanica, povećanja mobilnosti stanica, otpornost na apoptozu, i neka svojstva matičnih stanica. S EMT, epitelne markeri kao što su E-kadherina pokazuju smanjenje ekspresije i mczcnhimnog markera kao što su vimentin pokazuju povećanu ekspresiju. Ostale regulatorne molekule poput puža, TWIST i cjevčica pokazuju promijenio izraz lica [7], [8], [9]. Onkogeni putevi koji mogu potaknuti EMT uključuju transformirajući čimbenik rasta beta (TGF-beta), Src, Ets, Ras, Wnt /β-katenina, usjek, nuklearni faktor-kB i integrina [10], [11], [12]. pregled

Infekcija s ljudskom patogenih faktora H. pylori pregled Pretpostavlja se da će dovesti do EMT, invazije ili metastaziranja raka želuca. Na primjer, regulaciju matrične metaloproteinaze 7 patogenim H. pylori
djelomice ovisi o gastrina i može imati ulogu u razvoju raka želuca, potencijalno kroz EMT, neizravno induciranim razina topljivog heparin-vezujući faktor rasta endotela [13]. H. pylori pregled CagA uključen u invaziju tumorskih stanica deregulating c-met receptora signalne [14]. Kao što je dobro, CagA može povećati aktivaciju Wnt /β-katenina signalnog puta prekidanjem stabilizaciju E-kadherina-β-katenina kompleksa. Dakle, CagA igra vitalnu ulogu u razvoju intestinalne metaplazije [15]. Osim toga, analize mikropolja je predložio da fosforilacija status CagA može utjecati na ekspresiju EMT-vezanih gena u stanicama raka želuca [16]. Međutim, malo se zna o mehanizmima koji su temelj na EMT izazvanu CagA. Pregled

Programirana stanična smrt protein 4 (PDCD4) je lokaliziran za jezgre u proliferacijom stanica [17]. Kao važan post-transkripcije meti mikrornk (miR) Mir-21, PDCD4 se odnosi na napredovanje tumora i prognoze u ljudskom pluća, kolorektalni, dojke i rakom želuca [18], [19]. Tumorski supresor PDCD4 može vezati za eIF4A ili eIF4G i spriječiti prijevod. PDCD4 može regulirati mitogenom-aktiviranu protein kinazu 4 1 ili receptom urokinaze aktivatora plazminogena (uPAR) izraz da inhibiraju karcinom invaziju i intravasation [20], [21]. PDCD4 također mogu utjecati na transkripciju gena. To interakciju s vezanja DNA domenu TWIST1 i inhibira Y-box vezujući protein 1 izraza [22]. Kao što je dobro, gubitak PDCD4 izraza povezana s malignom transformacijom u rakom želuca [23], [24]. Podreguliranje PDCD4 se odnosi na diferencijaciju tumora kod raka probavnog sustava [25]. Međutim, da li PDCD4 je uključen u EMT izazvane CagA kod raka želuca i specifični mehanizam još uvijek je potrebno dodatno razjašnjavanje. Pregled

Evo, istraživali smo na regulaciju EMT-povezanih proteina i PDCD4 izražavanja u želučanom raka tkiva i CagA aktivacija TWIST1 izražavanja i inhibicije E-kadherina i PDCD4 izražavanja u želučanih stanica raka. pregled

Materijali i metode

pacijenata i uzorci tkiva pregled

studija je odobren od strane Etičkog Odbor Shandong University School of medicine, a svi uzorci i informacije prikupljeni su sa pismenog pristanka. Želučani tumorskih tkiva i njihovi podudaraju non-kancerogen tkivo je od 30 bolesnika tijekom operacije na Qilu bolnici Sveučilišta Shandong (Jinan, Kina) od 2010. do 2012. godine nijedan od pacijenata nije primio adjuvantne kemoterapije ili radioterapije prije operacije. Dijagnoza raka želuca histopatološki potvrđena je hematoksilinskom i eozinskom bojenju. Pregled

Kultura stanica i transfekcija pregled

Human želučanih stanične linije raka (AGS, BGC-823 i SGC-7901) su dobiveni iz Kine Academia Sinica Cell Repozitorij (Shanghai). Stanice su inkubirane u preporučenim medijima i vlažnoj atmosferi koja sadrži 5% CO _{2 na 37 ° C, bez antibiotika. SGC-7901 stanice i BGC-823 stanice su uzgojene u RPMI 1640 mediju uz dodatak 10% fetalnog goveđeg seruma (FBS) i AGS stanice su uzgojene u F12 mediju obogaćenom sa 10% FBS. Mediji i FBS nabavljeni su od Invitrogen (USA). Zatim, stanice su transfektirane sa plazmida pcDNA3.1 or pCDNA3.1-CagA (poklon od Dr. Yongliang Zhu Sveučilišta Zhejiang, Kina) i pEGFP-C1 ili pEGFP-C1-PDCD4 (izgrađeni i daje dr Youhai Chen , Perelman School of medicine, University of Pennsylvania, Philadelphia, SAD) pomoću X-treme GENA HP reagensa za transfekciju (Roche Diagnostics, Njemačka), u skladu s protokolima proizvođača. pregled}

izolacija RNA, reverzna transkripcija i QRT-PCR pregled

Ukupna RNA je ekstrahirana iz stanica korištenjem Trizol reagensa (Invitrogen, USA). Reverzna transkripcija uključeni Superscript III Prvo Strand Synthesis Kit (Invitrogen). Ekspresija gena otkrivena je pomoću kvantitativne PCR u realnom vremenu SYBR premiks Ex Taq (Takara, Kina) i normalizacije koji su uključeni u 2 ^{- △△ metoda CT u odnosu na p-aktin. Sekvencijama su za PDCD4, smisao, 5'-CAGTTGGTGGGCCAGTTTATTG-3 'i antisens-, 5'-AGAAGCACGGTAGCCTTATCCA-3'; E-kadherinom smislu, 5'-AATCCAAAGCCTCAGGTCATAAACA-3 'i antisense, 5'-TTGGGTCGTTGTACTGAATGGTC-3'; CagA, osjećaj, 5'-CCGGGGTACCAATTGGAGAGCAGAACCG-3 'i antisense, 5'-CCGTCGAGTTAAGATTTTTGGAAACC-3'; i TWIST1, smisao, 5'-GGCATCACTATGGACTTTCTCTATT-3 'i antisense, 5'-GGCCAGTTTGATCCCAGTATT-3'; vimentin, osjećaj, 5'-CTCTTCCAAACTTTTCCTCCC-3 'i antisense, 5'-AGTTTCGTTGATAACCTGTCC-3'; Puž, razum, 5'-GGAAGCCTAACTACAGCGAGCT-3 'i negativna, 5'-TCCCAGATGAGCATTGGCA-3'; β-aktin, osjećaj, 5'-GTGGGGCGCCCCAGGCACCA-3 'i antisense, 5'-CTCCTTAATGTCACGCACGATTT-3'. pregled}

Western blot analiza pregled

Protein je ekstrahirana iz uzoraka i razdvojeni pomoću SDS-PAGE i zatim preneseni na PVDF membrane (Millipore Corp., Billerica, MA, USA), koji su odmah blokirane s 5% nemasnim mlijekom u TBST koji sadrži 1% Tween-20 1.5 h na sobnoj temperaturi. Nakon ispiranja fosfatno puferiranom fiziološkom otopinom (PBS) 3 puta, membrane se inkubiraju sa protutijelima na PDCD4 (1:500 Cell Signaling Technology, USA), TWIST1 (1:2000, Novus Biologicals, USA), puž (1:1000 , stanično signaliziranje Technology, SAD), CagA (1:500, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), E-kadherina (1:1000, stanično signaliziranje Technology, SAD), vimentin (1:1000, stanično signaliziranje Technology, USA ) i β-aktin (1:2000, Sigma-Aldrich, USA) kao normalizacijsku kontrolu, na 4 ° C preko noći, zatim se s hren peroksidaza-konjugiranog sekundarnog antitijela na sobnoj temperaturi 1 sat. Nakon ispiranja, Imunoreaktivni vrpce su vizualizirani hemiluminiscencija (Millipore Corp., Billerica, MA, USA). Western blot ispitivanje je provedeno 3 puta za svaki uzorak. Protein je stavljeno na 20 do 50 ug po stazi. Pregled

Imunohistokem pregled

parafin ugrađen uzorci tkiva su de-parafin s ksilen i dehidrirana s ocijenjen serije alkohola. Antigen dohvat toplinska obrada provodi u 0.1 M citratnog pufera. I blokiranje Aktivnost endogene peroksidaze je korišten za 3% H _{2O 2. Zatim inkubira s antitijelima protiv PDCD4 (1:200), Twist1 (1:500), vimentin (1:100) ili E-kadherina (1:500) i odgovarajućih peroksidaza-konjugiranog sekundarnog antitijela i DAB za jezgru. Protutijela za imunokemijska ispitivanja su oni koji se koriste za Western blot. Konačno, Hematoxylin je bio korišten za counterstaining slajdova. Tumor diferencijaciju tkiva raka određena je na slijepi način. A prvo protutijelo je zamijenjena s puferom kao negativna kontrola. Uzorci su pregledani pod Nikon Eclipse E800 (Nikon, Tokyo, Japan) mikroskopom. Pregled}

Svi obojeni dijelovi su uočeni i postigao 2 nezavisna zaslijepljeni istražiteljima i slajdovi su dobili indeks ukupno bojenja (SI) rezultat u skladu s intenzitet bojenja i postotak pozitivnih tumorskih stanica. Bojenje intenzitet je ocijenjena kao 0, bez mrlja; 1, slaba bojenje; 2, umjereno bojenje; i 3, intenzivno obojenje. Tumorskih stanica udio ocijenjena je kao 0, ≤20% pozitivnih tumorskih stanica; 1, 20% -40% pozitivnih tumorskih stanica; 2, 40% -60% pozitivnih tumorskih stanica; 3, 60% -80% pozitivnih tumorskih stanica; i 4, ≥80% pozitivnih tumorskih stanica. Po procjeni SI, rezultati bojanje je konačno zabilježen kao 0-4, niska izražavanja; 4-6, umjerena izraz; i 6-12, visoka izraz. Ako tumačenje bojenje razlikovala između istražiteljima, podaci za sekcije su odbačeni. Pregled

Matrigel invazija Test pregled

Matrigel invazija pokus je uključena u prerastanja komoru (Costar, New York, SAD). SGC-7901 stanice su transficirane s 2 ug pCDNA3.1, pEGFP-C1; pCDNA3.1-CagA, pEGFP-C1; ili pCDNA3.1-CagA, pEGFP-C1-PDCD4. Nakon 48 h, 1 × 10 ^{5 poštanskim transfektirane stanice su tripsinizirane i stavljene na transjažičnih komora prevučene 20 ug Matrigel. Medij koji sadrži 20% FBS u donjoj komori je služio kao kemotakskijsko sredstvo, a gornja komora je ispunjena medij koji sadrži 10% FBS-a. Non-migrirali stanice su uklonjene sa pamučnim brisevi nakon 24 ili 48 sati. Stanica koje migriraju na donjoj filtera su obojene s 0.1% kristalno ljubičastog i broje na mikroskop. Konačno, preostale stanice se prikupe za proteina i RNA izolata. Svaki tretman je ponovljen 3 puta. Pregled}

Statistička analiza pregled

Podaci su izraženi kao srednja vrijednost ± SD. Studentski t pregled testa ili hi-kvadrat test je korišten za usporedbu 2 skupine. Analiza podataka koji su uključeni SPSS 12.0 (SPSS, Chicago, IL, USA). P izvoznici < 0,05 smatrana je statistički značajna pregled

Rezultati pregled

1.. Izražavanje TWIST1, E-kadherina, vimentin i PDCD4 u rak želuca Netlogu

Da bi se ispitala povezanost EMT i raka želuca, bere smo 30 uzoraka kliničkih tkiva od pacijenata s rakom želuca. Biopsije su podijeljeni u srednji /niskom diferencijaciju tkiva, visoke diferencijaciju tkiva i nekanceroznog tkiva u susjedstvu karcinoma po hematoksilinskom i eozinskom bojenju (Sl. 1). Imunohemije, TWIST1 i vimentin ekspresija bila je viša u malignih tkiva od nekanceroznog tkiva, a ekspresija E-kadherina i PDCD4 bila suprotna TWIST1 (Sl. 1A-E). TWIST1 i PDCD4 ekspresija je povezana sa stupnjem diferencijacije tumora, ali ne i spol ili dob (p = 0,021 ip = 0,013, tablica 1). Kao što je dobro, smanjio PDCD4 ekspresija je obrnuto povezana s promijenjenim izražavanja TWIST1 tijekom karcinoma želuca (p = 0,035, tablica 2). Dakle, EMT može igrati važnu ulogu u želučanom karcinogeneze i razvoj. Pregled

2. TWIST1, vimentin ili izraz E-kadherina u stanicama želučane je regulirano CagA pregled

Dalje, istraživali smo da li CagA, kao raspireni faktor H. pylori pregled, utjecali na EMT i time promovirao invaziju i metastaziranje karcinoma želuca. Mi smo izabrali 3 ljudskim staničnim linijama karcinoma diferencijacije statusima (AGS, dobro diferencirani želučane epitelnih stanica linije; SGC-7901, umjereno diferencirani stanična linija i BGC-823 slabo diferencirani stanična linija) želuca. CagA ekspresijski plazmid je transfektiran u različitim staničnim linijama želuca. Iako su morfološke promjene CagA transficirane stanice nisu zabilježene (podaci nisu prikazani), ekspresija transkripcijskih faktora i staničnih markera su pogođeni CagA. MRNA i proteina izraz TWIST1 i vimentin se regulira prema gore s CagA transfekcije (Sl. 2A-G) i da PDCD4 i E-kadherina je regulirani (Sl. 2A-G), no nije došlo do značajnih promjena u puž izražavanja u CagA transfekcija skupina. Stoga, H. pylori pregled CagA može utjecati na EMT regulatora uključujući TWIST1. Štoviše E-kadherina, kao važan epitela markerom i vimentin, kao mczcnhimnog markera regulirano TWIST1, također su pod utjecajem CagA i EMT vezanih gena PDCD4 je regulirani. Pregled

3. Izražavanje TWIST1, vimentin i E-kadherina je bio pod utjecajem PDCD4 Netlogu

Mi smo sljedeći analizirali molekularni mehanizam EMT regulirano H. pylori
CagA u želučanim stanicama raka. PDCD4 suprimira rast stanica preko direktne interakcije sa TWIST1 u humanom raku prostate, [22]. Imunohistokem i statistička analiza pokazala relevantnost PDCD4 i TWIST1 postojala u želučanom karcinomu (sl. 1, Tablica 2). Međutim, mehanizmi u podlozi PDCD4 funkciju želuca stanice raka nisu bili jasni. Tako AGS? GSC-7901 i BGC-823 stanice se transfektiraju s plazmidom za ekspresiju PDCD4. PDCD4 mRNA i ekspresija proteina je reguliran u svim plazmida transfektirane stanične linije (Sl. 3A-G). Osim toga, mRNA i proteina nivoi TWIST1 i vimentin, ali ne i puža smanjene su do različitog stupnja, te su povećane razine E-kadherina (Sl. 3A-G). Dakle, TWIST1, vimentin i izraz E-kadherina može se regulirati PDCD4 u želučanim epitelnim stanicama. Pregled

4. EMT je regulirano CagA preko inhibirajući PDCD4 u želučanim epitelnim stanicama pregled

Na temelju gore navedenih nalaza, mi hipoteze da je proces EMT izazvana H. pylori pregled CagA dogodila snižavanje PDCD4, kontraučinak mi želudac epitelne stanice s CagA plazmida i PDCD4 nadekspresijom plazmida. Smanjena ekspresija PDCD4 se vratiti s CagA i prekomjerno PDCD4 ubacivanja. Također, povećana ekspresija TWIST1 i vimentin inhibirana i smanjena ekspresija E-kadherina je reguliran u ko-transficirane grupe. Te je došlo do promjena na razini mRNA i proteina (sl. 4A-G). Migracija ljudskog raka želuca stanična linija sGC 7901 transfektirane s plazmidima određena je invaziju u Matrigel pokus. Rezultati pokazuju da je izazvana CagA plazmida. Migracija stanica Test je također otkrila da PDCD4 pojačana ekspresija regulirani CagA izazvanu njihovu invaziju i metastaziranje sposobnosti (sl. 5a). Sl. 5B prikazuje migrirali stanica brojeve SGC-7901 u CagA transfekcionog skupini su očito više od kontrolne skupine, dok je iznos premještene stanice u kotransfekcijskim grupe je znatno manje od CagA transfekcijsku grupe. Biološki pojave pokazuju promocija EMT by CagA se oporavio djelomično povišenom PDCD4 izražavanja. Na temelju dokaza, to zaključiti da PDCD4 mogu biti potrebne za H. pylori pregled CagA posredovane rak želuca napredovanje pregled

Rasprava pregled

Glavni rezultati ovog istraživanja mogu se prikazati kako slijedi: a. 1) H. pylori pregled CagA odgovorno za indukciju TWIST1 ili vimentin i inhibiciju E-kadherina u stanicama raka želuca. 2) epitela-mezenhimalne prijelaz CagA izazvanog je dijelom ovisi o reguliranju PDCD4. 3) TWIST1 i PDCD4 uključuje u EMT raka želuca. Pregled

Rak želuca je više koraka i postupno bolest. Višak proliferacija epitelnih stanica je važan dio osnovnog tumorske angiogeneze ili početkom rasta [5]. Nakon toga, invazija stanica, u početku ogleda kroz membranu, smatra prediktor završnoj fazi raka; što na kraju dovodi do metastatskog širenja i smrtnosti [26]. Patogene infekcije mogu uzrokovati rak tumorgenesis i maligne transformacije stanica domaćina. Kao važan patogenih faktora rizika, Helicobacter pylori pregled su usko povezani s čira želuca, povezanog sa sluznicom limfoma limfnog tkiva u želucu i želučane adenokarcinoma [20], [27], [28], [29] , CagA, jedan od najvažnijih principa čimbenika virulencije u H. pylori pregled, inducira nastanak i razvoj karcinoma želuca. Maligne transformacije stanica domaćina uključuje u regulationary mreže, uključujući brojne stanične proteine, ne-kodirajuće RNA, te ostale molekule bioloških aktivnosti. Međutim, mehanizam CagA učinci na sluznicu želuca je toliko složen i nejasno. Pregled

EMT je vrlo očuvan biološki proces u embrionalnom razvoju organa, što omogućuje epitelne stanice gube epitela fenotip i dobiti mezenhimalne fenotip. To uključuje gubitak stanične polarnosti u epitelnim stanicama, gubitak sposobnosti za povezivanje s bazalne membrane, pristup mczcnhimnog fenotipa kao što su veće migracije i invazije, anti-apoptoze, te sposobnost da se degradirati izvanstanični matriks [8], [30] , EMT igra bitnu ulogu u kroničnim upalnim bolestima, fibroznih bolesti, progresiju tumora i procesu obnove tkiva, osobito u stjecanju migraciju i invaziju sposobnosti za malignih epitelnih stanica. Abnormalna aktivnost u EMT epith odraslih epitelnih stanica inhibira stanične adhezijske molekule, uzrokuje smanjena sposobnost adhezije, i na taj način omogućila tumorske stanice širiti u tijelu, na kraju promovira metastaza [31], [32], [33]. Stoga EMT se smatra početkom invazije i metastaziranja, a također je znak snažne sposobnosti invaziju i metastaziranje tumorskih stanica. H. pylori pregled potiče prijelaz epitela-mezenhimalne by TNF-a koji izaziva proteina [34]. Trenutna studija pokazuje CagA može dovesti epitelne stanice do morfoloških promjena. Predloženo je da se CagA ekspresija nije dovoljna tek za poremetiti apikalni spojeve već sliči epitela u mezenhimalnog tranzicije u Madin-Darby stanice psećeg bubrega [35]. Epitelne stanice zaražene bakterijom pojavio razne genomike promjene i utjecaj na EMT markera izazvanih H. pylori pregled je vjerojatno na način cagPaI vezane. Podaci su pokazali da epitelnih mezenhimalne prijelaza (EMT) povezani s grupom geni bili gore ili prema dolje reguliran CagA pozitivni H. pylori
sojeva u AGS [36], [37]. Treba spomenuti, regulatorni mreža CagA uključivanja u EMT raka želuca još uvijek treba pojasniti. Pregled

Kako istražiti određeni mehanizam EMT promovira CagA kod raka želuca, usporedili smo gene izraz susjedne upotrijebljenih tumorskih tkiva i želučani tkiva karcinoma imunohistokemijski. Rezultati upućuju na to da ekspresija Twist1 /vimentin u tkivu karcinoma viša od susjednih non-tumorskog tkiva, a njegova ekspresija u srednjem /tkivima niskim diferencijacije karcinoma veća od visokih diferencijacije tkiva. Međutim, E-kadherina i PDCD4 smanjio u procesu tranzicije epitelnih-mezenhimalne u raka želuca. Zanimljivo je da postoji na negativnu korelaciju za iskazivanje TWIST1 i PDCD4. Naše istraživanje sugerira geni EMT vezane su povezane s procesom raka želuca, u skladu s prethodnim istraživanjima promatranja gubitak epitela proteina i /ili stjecanja ekspresije mezenhimalnim proteina dogodila u želučanom karcinomu. Nadalje, oni su redom korelaciji slabo diferenciranim histologiju, poodmakloj fazi i siromašnih pacijenata ishodom [38]. Osim toga, PDCD4 je nedavno otkrili molekulu koja ima ključnu ulogu u mnogim biološkim procesima koji mogu izazvati bolesti ili pojavu i razvoj tumora. PDCD4 inhibira proces prevođenja vezanjem za iniciranje prijevoda faktor eIF4A ili eIF4G. Različite induktori apoptoze stanice se stimuliraju i povećanju ekspresije PDCD4, koji bi mogao dodatno regulira p21, CDK4 ugljičnu anhidrazu II i JNK /c-Jun /AP-1. PDCD4 mogao spriječiti invaziju vezane receptom urokinaze aktivatora plazminogena izraz, invazije ili infiltraciju krvnih žila, i metastaza; zbog toga smanjuje ekspresiju PDCD4 igra važnu ulogu u nastanku tumora, razvoj i prognozu [17], [33], [39], [40]. Pa, pitali smo, ako Twist1 i PDCD4 sudjelovao u EMT CagA inducirana. Pregled

Nakon toga, otkrili smo EMT povezane transkripcijskih faktora i markere ekspresija u CagA transficiranim staničnim linijama karcinoma želuca. Naši podaci su pokazali da je H. pylori pregled CagA može se reguliraju ekspresiju TWIST1 i vimentin ali ne i puževa, te se regulira E-kadherina i PDCD4 u želučanom staničnih linija (AGS, SGC-7901 i BGC-823). Rezultati nisu bili pogođeni status diferencijacije transfektiranih stanica. Iako nismo promatrati morfološke promjene CagA inficiranim stanicama, invaziju i metastaziranje mogućnost želučanih stanica raka može se ubrzati CagA preko bunara invazije stanica testu. To je djelomično uzrokovano funkcionalnom heterogenosti CagA u različitim tkivima. Tako je učinak EMT izazvana H. pylori
još uvijek je potrebno dodatno istražiti. Mir-21 promaknut TGF-β-induciranu proces diferencijacije myofibroblast ciljajući PDCD4. TGF-β izazvana Mir-21 izraz u fibroblasta i Mir-183 regulirani PDCD4 i inhibiran TGF-β-induciranu apoptozu u stanicama ljudskog hepatocelularnog karcinoma [41], [42]. U međuvremenu, TGF-β regulirano puž, uviti, ili ZEB1 i utjecao na EMT i metastaza [43]. Štoviše, PDCD4 nađeno je da se uključe u transkripciji previše. Štoviše, COOH terminus Twist1 sadrži osnovnu heliks-loop-helix domenu predloženo je da posreduju u izravnu interakciju s PDCD4 proteina. Tako, PDCD4 interakciju s DNA veznu domenu Twist1 inhibira njegovu sposobnost vezanja DNA ciljnih gena u humanim stanicama raka prostate [22] .Stoga, da nadalje ispitati bilo PDCD4 može regulirati TWIST1 u želučanim stanice raka. Naše je istraživanje pokazalo da TWIST1 dolje je regulirano PDCD4 visoku ekspresiju plazmida u realnom vremenu PCR i Western blot pokusa, dok je ekspresija E-kadherina bio suprotan TWIST1 u AGS, SGC-7901 i BGC-823. Izraz mRNK puž je regulirani u AGS i SGC-7901, dok preotein izraz nije uočeno iste promjene. To može biti zbog složenosti sinteze proteina. To jest, protein ne samo regulirana na razini transkripcije, ali i prijevod i prevrtanje razini. To ponekad čini da mRNA nije izravni pokazatelj razine proteina u stanicama. Prošle, proveli smo daljnja istraživanja o ulozi PDCD4 u epitelnim-mezenhimalne tranzicije CagA inducirana. Želučani epitelne stanice su transficirane s ekspresijskim plazmidom CagA i PDCD4 nadekspresijom plazmid istovremeno. Obnova PDCD4 izražavanja može inhibirati TWIST1 i vimentin i navesti E-kadherina koji regulirano CagA, PDCD4 također potvrđuje da bi mogao utjecati na invaziju i metastaziranje sposobnost u želučanih stanica po invaziju u Matrigel testu. Iako su potrebna dodatna istraživanja kako bi testirali tu hipotezu, zaključili smo u osnovi to epitelnih-mezenhimalne prijelaz CagA izazvanog je dijelom ovisi o reguliranju PDCD4. Pregled

Ukratko, mi pokazati da H. pylori pregled CagA inducira ekspresiju TWIST1 i EMT na želučanih stanica raka tako što regulira PDCD4 (Sl. 6). Mi dati neki uvid u molekularne mreže raka želuca inducirane H. pylori
infekcije i opskrbu teorijsku podlogu za PDCD4 kao biološki cilj za dijagnozu ili tretman raka. Buduća istraživanja uključuju mišji modeli mogu dovesti do boljeg razumijevanja uloge PDCD4 u H. pylori
pobuđenog EMT od raka želuca. pregled

• PLoS ONE: Mir-30b, Down-regulirana u rak želuca, potiče apoptozu i suzbija rast tumorskih ciljajući inhibitor aktivatora plazminogena-1
• PLoS ONE: Helicobacter pylori od raka želuca i čira dvanaesnika Show Isto Phylogeographic podrijetla u andske regije u Colombia