Stomach Health > Mo. Gesondheet >  > Gastric Cancer > Gastric Cancer

PLOS NËMMEN: MicroRNA-206: Effektiv Inhibition vun Gastric Cancer zerstéiert duerch d'c-hu Passerelle

Wat VerfÜgung

MicroRNAs sinn endogenous kuerz Kette Nukleotid RNAs datt Gentherapie Funktioun vun direkt bindend vun Zil- mRNAs regléieren. An dëser Etude, ze propagéieren mir d'Effete vun microRNA-206 (Mir-206) op d'Entwécklung vun gastric Kriibs. Mir-206 war éischt zu gastric Kriibs uplanzen gin downregulated confirméiert. Ëmgedréit, upregulation vun c-iwwerrascht an Otemschwieregkeeten Echantillon vun der Mënschheet gastric Kriibs bestätegt, mat hirem Niveau inversely mat Mir-206 Ausdrock soll. Aféierung vum Mir-206 inhibited bewosst Prolifératioun vun G1 Zell Zyklus verhaft Pinguin, souwéi Wanderung an Invasioun. Desweideren, wichteg Prolifératioun an /oder Migratioun Zesummenhang Molekülle wéi c-erfëllt ass, CDK4, p-RB, p-Akt an p-Erk sech bestätegt duerch Western blot Analyse downregulated gin. Reklamme vun c-Index och direkt AGS Zell Prolifératioun, Migratioun an Invasioun betraff. An VIVO VerfÜgung, Mir-206 ausdrécken entholl Zellen och Wuesstem Retard am Verglach zu onberéiert entholl Zellen ugewisen. Eis Resultater bewisen, dass Mir-206 c-hu Ausdrock vun gastric Kriibs opgeléist an als mächtegst entholl suppressor an c-hu overexpressing erhéijen Funktioun konnt. Inhibition vum Mir-206 Funktioun ze aberrant Zell Verbreedung bäidroen kéinten a Migratioun, flénke gastric Kriibs Entwécklung VerfÜgung

Fro:. Zheng Z, Yan D, Chen X, Huang H, Chen K, Li G, et al. (2015) MicroRNA-206: Effektiv Inhibition vun Gastric Cancer zerstéiert duerch d'c-hu Passerelle. PLoS NËMMEN 10 (7): e0128751. Doi: 10.1371 /journal.pone.0128751 VerfÜgung

Redakter: Hiromu Suzuki, Sapporo Medical University, Japan VerfÜgung

Arnaque: 4. Februar 2015; Akzeptéiert: 1. Mee 2015; Publizéiert: 17. Juli 2015 zu

Copyright: © 2015 Zheng et al. Dëst ass eng oppen Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz CC BY verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt si vum original Auteur an d'Quell Kaiser VerfÜgung

Data Disponibilitéit: All Daten zu engem Deel, vun der National Natural Science Foundation vu China Grant 81100671 (gekierzt), Zhejiang Provincial Natural Science Foundation vu China Grant Y2110609 war Dës Aarbecht ënnerstëtzt, (: si bannent de Pabeier a seng Ennerstëtzung Informatiounen Fichieren VerfÜgung

Funding. gekierzt), an Wenzhou Science & Technology Bureau Grant Y20080096 (gekierzt). D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung

Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung

Aféierung VerfÜgung

Gastric Kriibs ass déi véiert stäerkste gemeinsam Kriibs an der zweeter Virwaat Ursaach vum Kriibs Zesummenhang Doud an d'Welt [1]. Seng morbidity a veruerteelt ass besonnesch an asiatesch Länner ausgeschwat wéinst enger Rei vun Aflëss [1]. Zënter senger Presentatioun oft mat fortgeschratt Krankheet verbonnen ass, ass et eng dréngend brauchen fir Fortschrëtter an hir Detectioun an schlussendlech seng Gestioun. Am Moment, d'Verständnis vun microRNAs (miRNAs) op beaflossen Opstellung gastric Kriibs ass eng rapid lues virugeet. VerfÜgung

Well d'éischt Beschreiwung vun miRNA an der nematode C VerfÜgung. elegans VerfÜgung zréck an 1993, den Impakt vun dëse klenge Net-coding RNAs huet verschidde Secteuren vun molekulare Biologie transzendéiert [2]. MiRNAs sinn héichgradeg Otemschwieregkeeten spezifesch biomarkers mat de Potential résident Otemschwieregkeeten Aart a Verännerung. Well overexpression an ënner-Ausdrock hunn souwuel mat tumorigenesis assoziéiert gouf [3], hir Rollen als oncogenes an entholl suppressor Genen sinn souwuel gutt etabléiert [4, 5]. Während de leschte puer Joer, hire Impakt op d'Entwécklung an erkennen staark Uergel erhéijen dorënner gastric Kriibs lues opgekläert gëtt. Et sinn schon e puer vun de gastric Kriibs anti-apoptotic Mechanismus identifizéiert miRNAs wéi Mir-21 an Mir-148a [6, 7]. Aner Weeër beaflosst vun miRNAs och Zell Zyklus Werdegang mat vum Mir-222/221, Mir-106b /93/25 an Mir-24 [6, 7]. VerfÜgung

Ee vun den anere villverspriechend nei miRNAs fir staark Uergel erhéijen ëmfaasst Mir-206 [8]. Dëst besonnesch miRNA gehéiert zu enger Grupp vu "myomiRs" déi am Sous Muskel Entwécklung [9] Équipe ass. Spillschoul mat villen anere Krankheeten wéi Häerzkrankheeten, chronescher obstructive deser Krankheet an Alzheimer ass, seng Roll an oncogenesis scho Leescht méi kuerzem och rhabdomyosarcoma, haett Kriibs, colorectal Kriibs, schwannoma, an gastric Kriibs [8, 9] assoziéiert gouf. Obwuel an e puer Aarte vu Kriibs dorënner spillt an Waldenstrom macroglobulinemia nik, Mir-206 meeschtens zu staark Uergel erhéijen opgeléist ass [9]. Mir-206 gouf duerch suppressing cyclin D2 [10] gastric Kriibs Verbreedung zu Deel zu inhibit virdrun gewisen. An der Enquête, konzentréiere mir op d'Roll vum Mir-206 zu oncogenesis gastric Kriibs duerch d'c-hu Passerelle, déi an enger Rei vu erhéijen [11] en Afloss sécher Passerelle fir oncogenesis Traditionell gouf. c-kennegeléiert huet schonn virausgesot an dës Distanz an der Zil- Gentherapie vu multiple miRNAs dorënner Mir-206 ze ginn [9, 12]. VerfÜgung

Resultater VerfÜgung

Herzogtum vum Mir-206 Nerve fräi c-hu Ausdrock vun gastric Kriibs VerfÜgung

Real-Zäit RT-Hinnen alleguer Analyse war standing den Ausdrock vun Mir-206 zu 40 gastric Kriibs uplanzen an normal Stoffer ze entdecken. Mir-206 Niveauen am meeschte Otemschwieregkeeten Echantillon vun gastric entholl (34/40) waren fonnt vill manner gin wéi normal Stoffer (Lalumi 1A). Mir-206 Ausdrock war inversely fir den Niveau vun c-kennegeleiert entholl Echantillon (Lalumi 1B) observéiert dinn. Déi meescht entholl Echantillonen, mat ofgeholl Mir-206 Ausdrock, awer héije Prozentsaz (> 50%) vun c-hu staining. Ëmgedréit, erhéijen mat normal Ausdrock vu Mir-206 huet ganz schwaach oder negativ c-hu Ausdrock. VerfÜgung

Mir-206 entschlof G1 verhaft an inhibited Zell Prolifératioun, Migratioun an Invasioun vun AGS gastric Kriibs Zellen VerfÜgung

Als mir-206 Ausdrock vun gastric Kriibs uplanzen ofgeholl huet, gesicht mir ob d'Aféierung vun mir-206 hu keng biologesch Wierkung op AGS Zellen ze bestëmmen. AGS Zellen mat der Protein Mir-206 transfected zougedréckt inhibition vun Wuesstem Zell als Verglach zu negativ Kontroll baséiert op der MTS assay (Lalumi 2A). FACS Analyse vun den Zellen zougedréckt G1 Zell Zyklus verhaft (S1 Lalumi). D'Zuel vun de Kolonien huet och mat transfection vum Mir-206 (S2 Lalumi) reduzéiert. VerfÜgung

Mir-206 Wanderung an Invasioun vun AGS Zellen inhibit kann (Lalumi 2B an S3 Lalumi). Eng dramatesch Reduktioun vun Migratioun géintiwwer der ënneschter CHAMBERS war an Mir-206 transfected AGS Zellen (; 0,01, n = 3 86 ± 15 vs. 165 ± 16 an AGS Zellen, P VerfÜgung &Si besteet) observéiert. Zousätzlech, mat Mir-206 transfected Zellen zougedréckt datt HGF-entschlof invasiveness war och dëse Mir-206 transfection (57 ± 12 vs. 116 ± 14 an AGS Zellen vill Souen, P VerfÜgung &Si besteet; 0,01, n = 3). VerfÜgung

Mir-206 downregulated c-hu Ausdrock an aner Zell Zyklus-Zesummenhang Proteinen VerfÜgung

Mir hun virdrun identifizéiert c-hu wéi enger direkter Zil vum Mir-206 [9]. Western blot Analys confirméiert datt c-hu Ausdrock vum Mir-206 transfection zu AGS Zellen (Lalumi 3) verkierzt huet. Soll, ectopic Mir-206 och verwandelt-reglementéiert d'Expressioun vun CDK4, p-RB, p-Akt an p-Erk. VerfÜgung

Downregulation vun c-hu inhibited gastric Kriibs Zell Prolifératioun, Migratioun an Invasioun VerfÜgung

Next, c-hu spezifesch siRNA war éischt benotzt den Ausdrock vun c-kennegeleiert AGS Zellen (S4 Lalumi) geloss. MTS assays sech standing der Verbreedung vun Zellen ze entdecken. AGS Zellen mat c-hu siRNA transfected zougedréckt Zell Wuesstem als Verglach zu negativ Kontroll Zellen reduzéiert (Lalumi 4A; 25,10 ± 3,81% erofgoen). Béid HGF-entschlof Wanderung an Invasioun huet ofgeholl wann een c-hu siRNA Zellen ze negativ Kontroll transfected Zellen transfected. Als zu Lalumi 4B an S5 Lalumi uginn, an Migratioun erofgoen (88 ± 10 vs. 155 ± 15, P &Si besteet; 0,01, n = 3) a Invasioun (72 ± 7 vs. 126 ± 12, P &Si besteet; 0,01, n = 3) huet esouwuel statistesch relevant. VerfÜgung

Aféierung vum Mir-206 Trupen entholl Wuesstem zu VIVO

Mir nächst propagéieren wann overexpression vum Mir-206 konnt entholl Wuesstem géint zu VIVO VerfÜgung. No 8 Wochen, goufen d'averaged entholl Bänn Krankheet vill manner aus Zellen mat lentivirus ausdrécken Mir-206, wéi mat Kontroll (Lalumi 5) am Verglach. VerfÜgung

Diskussioun VerfÜgung

Gastric Kriibs wesentlechen Gesondheet bliwwen ass Pfleeg Belaaschtung weltwäit trotz Joer vu Fuerschung [1]. Laut der DÉI, bleift gastric Kriibs eng vun den Top Kriibs etiologies mat engem héijen Taux vun veruerteelt [1]. Wéi mat anere staark Uergel erhéijen, ass et ëmmer méi kloer, dass bessere Verständnis vun entholl oncogenesis néideg ass Iwwregens hätt vun deene Patienten ze verbesseren. Well verwandelt an asiatesch Länner, zouginn Donnéeën iwwert d'Roll vun miRNAs op der Entwécklung oder Ennerdréckung vun gastric Cancers [6]. VerfÜgung

miRNAs hunn duebel Funktiounen am Beräich vun gastric Kriibs Entwécklung [6, 13]. Verschidde miRNAs sinn entholl suppressors an anerer sinn oncomiRs [6]. Ueda et al. fonnt upregulated 22 miRNAs an an de Plasma vun Patienten mat gastric Kriibs downregulated 13 [13]. Ziler déi ënner Ermëttlungen am Fall vun gastric Kriibs sinn och Reglementatioun vun p16, via Mir-24, an p21 duerch Mir-222/221 a Mir-106b /93/25 [6]. Anerer, wéi Mir-21, kann an bis zu 92% vun gastric Kriibs Otemschwieregkeeten Echantillon [14] upregulated ginn. Kandidaten an gastric Kriibs identifizéiert Déngscht als entholl suppressors och Mir-181b, Mir-101 an Mir-486 [6]. Zum Beispill, ass Mir-101 geduecht EZH2, Cox-2, Mcl-1 an Erhëtzung [15] zu viséieren. Mir-486 geduecht ass OLFM4 ze beaflossen, méiglecherweis apoptosis Auswierkungen afgerappt [16]. VerfÜgung

gegrënnt hunn, datt d'Majoritéit vun miRNAs als entholl suppressors déngen, ze propagéieren mir d'c-hu Passerelle an gastric Kriibs. An ënnersicht d'c-hu Passerelle fir rhadbomyosarcoma, hunn mir d'Wichtegkeet vun dëser Passerelle an sarcoma [9]. c-erfëllt ass bekannt an gastric Kriibs gin dysregulated [11, 17-19]. D'begéint proto-oncogene encodes engem FAQ als hepatocyte Wuesstem Faktor (HGF) receptor bekannt déi tyrosine kinase Aktivitéit leie [18]. Mir normalerweis fannen et ausgedréckt nëmmen am Desaccord Zellen mee hunn och hir dysregulation zu oncogenesis [18] gesinn. An dëser Etude, konnt bis mir dat bestätegen c-kennegeleiert gastric Kriibs vill Équipe ass an hirer Roll als Zil Mir-206 ass dréien an oncogenesis. VerfÜgung

Zell Zyklus Werdegang vun gastric Kriibs dysregulated ass. Baséierend op virdrun Rapporten, ass cyclin D2 zu gastric Kriibs nik wann Mir-206 betraff ass [10]. Mir-206 gouf dës mächtegst prognostic Bissau ginn [10]. Seng downregulation ass mat méi allgemeng Iwwerliewe assoziéiert. Restauratioun vum Mir-206 féiert zu G0 /G1 Zell Zyklus verhaft, confirméiert seng Roll als entholl suppressor. Eis Aarbecht awer och Zell Zyklus dysregulation mat CDK4 an phosphorylated-RB betraff ginn. CDK4 ass e Member vun der cycline ofhängeg kinase Famill mat SÖSC /dëss FAQ kinase Aktivitéit. Et féiert zu G1 Phase Werdegang. Zousätzlech, féiert d'kinase zu der phosphorylation vun RB, déi engem entholl suppressor zu Zell Zyklus Werdegang Équipe ass. VerfÜgung

Obwuel ähnlech Experienz hunn an gastric, spillt an Broscht Cancers bestätegt gouf, schéngt d'Roll vum Mir-206 eng entgéintgesate Effet vun Colon Kriibs ze hunn [6, 20]. An ëmgedréit, et gesäit Korrelatioun war tëscht Mir-206 an KLF4 vun engem Rot vu mënschlechen Colon Cancers [20] uginn. KLF4, déi oncogenic Eegeschafte vun anere Cancers huet wéi Broscht, Haut an haett, Funktiounen als entholl suppressor vun Colon Kriibs [20]. Seng Promoteur ass zwéinHyperfeinstrukturniveaue-methylated mat nik Niveau vun Mir-206 zu downregulation vun KLF4 Virwaat [20]. Dës Conclusiounen unzeginn dat Mir-206 net ähnlech zu all epithelial Zellen Funktioun kënnen, déi negates eng Gréisst all Approche passt zu chemotherapeutics. VerfÜgung

Am Moment studéieren, mir e Mechanismus fir Regulatioun vun c-hu Gentherapie Ausdrock identifizéiert duerch Mir-206 zu gastric Kriibs. c-hu overexpression folgenden Mir-206 downregulation schéngt d'gemeinsam etiology fir d'pathogenesis vun gastric Kriibs an der Majoritéit vun Echantillon vun dëser Etude iwwerpréift ginn. Am Resumé, hien huet mir dat Mir-206 negatif der c-hu sécher Passerelle zu Zell Prolifératioun a Migratioun Équipe modulates. Eis Studien wäert hoffentlech wichteg Medeziner Konsequenzen an der Behandlung vun gastric Kriibs hunn. Mir-206 ass e Kandidat fir béid immunohistochemical erkennen kleng erhéijen a méiglech Zil fir biologesche therapeutics. VerfÜgung

spontan a Methode VerfÜgung

Zell Kultur VerfÜgung

De Mënsch Linn gastric Kriibs Zell, . (; Hyclone, Logan, féier FBS) VerfÜgung

IFLA- AGS, kaaft aus ATCC (Manassas, VA), war zu Ham d'F-12 mëttlerer (Invitrogen, Karlsbad CA) ergänzt mat 10% an et Bovine serum ugebaut Ausso VerfÜgung

Dës Etude gouf am strikte Aklang mat de Recommandatiounen a Akraafttriede vun der Wenzhou Medical University Déieren Care an Benotzt Comité duerchgefouert (hänkt Number: WZMCOPT-043011). Véierzeg gastric entholl uplanzen an normal Donateur gastric Stoffer sech aus der zweeter laizistesch Spidol vun Wenzhou Medical University (Wenzhou, China) kritt. Sample Kollektioun war vun der Wenzhou Medical University IFLA- Comité op Fuerschung mat mënschlechen Theme guttgeheescht, a schrëftlech informéiert Averständnes war aus jidfer Fall kritt. All Experimenter waren am Respekt mat der Helsinki Deklaratioun an national Gesetzer gesuergt. VerfÜgung

Chemeschen RT-Hinnen alleguer VerfÜgung

Total RNS gouf vum Mënsch gastric entholl Echantillonen an normal Kontrollen mat Trizol reagent (Invitrogen) ofgebaut. 10 NG vun insgesamt RNS sech fir cDNA Synthes vun der Taqman MicroRNA Réckproduktioun Transkriptioun Kit (Obwuel Biosystems, Foster City, CA), a Mir-206 Ausdrock Niveau benotzt vun der Taqman MicroRNA Assay (Obwuel Biosystems) laachen war. Real-Zäit RT-Hinnen alleguer war mat der Obwuel Biosystems ViiA 7 standing Real-Time Hinnen alleguer System (Obwuel Biosystems). VerfÜgung

Immunohistochemical staining vun c-hu VerfÜgung

Moment vun formalin-fix paraffin-Ënnerbewosstsinn Mënsch gastric entholl uplanzen (5 μm) gemaach goufen an duerno mat xylene an Ethanol de-paraffinized. Drënner waren mat 0.3% Waasserstoff Hem behandelt an dann landen bei 4 ° C mat c-hu antibody op 1 incubated: 300 dilution (CST, Beverly, MA). Immunohistochemical staining war mat der Stellt HRP /botzt erkennen System gesuergt (Dako, Glostrup, Dänemark). VerfÜgung

Zell Prolifératioun assay VerfÜgung

AGS Zellen sech am Joer 2000 Zellen plated pro gutt am 96-gutt Placke ( ëmsou, High Wycombe, UK) fir all transfection. Transfections sech mat reagent (Lipofectamine RNAiMAX; Invitrogen) gesuergt, an triplicates. Fir all gutt, 50 nm Mir-206 mimics Protein (Ambion, Austin, Suerge), oder eng negativ Kontroll (Ambion) transfection gouf agestallt. . No 72 Stonne vu Kultur, war Zell Prolifératioun vun MTS assay (CellTiter 96 meng; Promega, Madison, allem) évaluéieren VerfÜgung

Transwell Migratioun assays VerfÜgung

24 Stonnen folgenden transfection, goufen AGS Zellen recoltéiert vun trypsinization an Katakombe eemol mat d-Hanks Léisung (Invitrogen). Ze moossen Zell Migratioun oder Invasioun, 8-μm pore Gréisst Kultur oder Matrigel Text (Transwell; ëmsou) waren an der Wells vun Placke 24-gutt Kultur geluecht. Am ënneschten ëmkomm, 400 μL F-12 mat 10% FBS an 20 Dummeldéng /ml vun HGF ugebaut. Dunn, 5x10 4 Zellen sech un der ieweschter Chambre notéiert. No 20 Stonnen vun incubation, datt d'Zellen duerch d'Pore sech Kierchefënster mat glaskloer mauve a observéiert ënnert der microscope (König, Oberkochen, Däitschland) mat engem 20X Zil. VerfÜgung

Western blot Analyse VerfÜgung

AGS Zellen (1x10 5) huet sech zu 6-gutt Placke rakommen an F-12 fir 24 Stonnen virun transfection ugebaut. 72 Stonnen no transfection, goufen d'Zellen mat kal PBS gewäsch an zu engem lysis gefiermt ënnerworf (35 mm Tris-Cl [pH 6,8], 20 g /L Natrium dodecyl sulfate [SDS], 100 mm dithiothreitol). Protein lysates (20 μg all) sech mat 8% SDS-polyacrylamide gelies electrophoresis getrennt, dann elektro-transferéiert op nitrocellulose filter Schläimhait. D'Schläimhait sech mat engem gefiermt mat 5% nonfat Mëllech vun PBS mat 0,05% Tween-20 fir 2 Stonne gespaart an Nuecht mat antibody bei 4 ° C incubated. No enger zweeter wäschen mat PBS mat 0,05% Tween-20, goufen d'Schläimhait mat peroxidase-conjugated Secondaire antibodies (Millipore, Darmstadt, Däitschland) an entwéckelt mat enger verstäerkter chemiluminescence erkennen Kit (Pierce, Rockford, IL) incubated. GAPDH war als Luede Kontroll benotzt. Antibodies fir CDK4, p-RB, Erk, Akt, p-Erk, p-Akt, c-zesummegesaat GAPDH sech aus Zell sécher Technology (Beverly, MA). VerfÜgung

SiRNA assays VerfÜgung

c-hu-spezifesch siRNA (Ambion) an negativ Kontroll siRNA (Ambion) waren benotzt c-hu Ausdrock vun AGS Zellen ze downregulate. 50 nm vun c-hu-spezifesch siRNA oder negativ Kontroll siRNA war an AGS Zellen mat Lipofectamine RNAiMAX transfected. MTS assay war 72 Stonnen an der transfection duerchgefouert hierkommen Transwell an Matrigel assays 24 Stonnen no transfection gesuergt huet, wéi uewe beschriwwen. VerfÜgung

An VIVO VerfÜgung entholl Wuesstem assay VerfÜgung

D' Pre-microRNA Ausdrock gesond lenti-Mir-206 an pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP Kontroll Vecteure vum System Biosciences (Mountain View, CA) kaaft huet. AGS Zellen sech mat lentivirus Krankheet ausdrécken Mir-206 oder negativ Kontroll. Weiblech Sauna Mais, 6 Wochen vun Alter, sech mat AGS Zellen inoculated (8x10 6) ausdrécken Mir-206 oder negativ Kontrollen an hire Säiten, a geaffert dann no 8 Wochen. Entholl Gréisst gouf gemoos a Volumen war mat der Formel berechent: ( L VerfÜgung x W VerfÜgung 2) x 0,5, ( L VerfÜgung, Längt; W VerfÜgung Breet), no der Method virdrun gemellt [21]. All Etuden a Prozedure goufen vun der Wenzhou Medical University Déieren Care an Benotzt Comité ofgeseent. VerfÜgung

statistique Analyse VerfÜgung

All Donnéeën goufen als déi mengen ± Sem gewisen. Resultater gewise gi wéi d'mengen Wäert ± Sem vun de Resultater vun triplicates zu eent Experimenter kritt ausgedréckt. Resultater vertrieden déi zu dräi separat Experimenter kritt. Ënnerscheeder tëscht experimentell Gruppen a Kontroll Gruppe waren analyséiert de Student d' t VerfÜgung Azeton benotzt. war um statistique Bedeitung akzeptéiert P VerfÜgung &Si besteet; 0,05. VerfÜgung

Informatiounen Ennerstëtzung VerfÜgung S1 Figebam. FACS Analyse vun AGS Zellen transfected mat Mir-206. VerfÜgung AGS Zellen sech 48 Stonnen no transfection mat Mir-206 gesammelt oder NC, Kierchefënster mat propidium Kaliumiodid, an duerch onkontrolléiert cytometry analyséiert. Dausend Zellen sech an all Prouf bewäert. De stäerkste Vertrieder Resultater vun dräi onofhängeg Experimenter si duergestallt VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0128751.s001 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung S2 Figebam. Kolonie Opstellung assay. VerfÜgung AGS Zellen transfected mat Mir-206 oder NC op niddreg Dicht rakommen goufen. No 7 Deeg, war Kolonie Opstellung vun staining mat glaskloer mauve alles. Typesch Resultater vun dräi onofhängeg Experimenter sinn dës zur VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0128751.s002 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung S3 Figebam. D'Auswierkunge vun Mir-206 op AGS Zellen sech mat Transwell an Matrigel assays évaluéieren. D'Zuel vun Zellen VerfÜgung datt duerch d'Kultur Neiegkeet Pore (weider) oder no eruewert duerch d'Matrigel Neiegkeet Pore (iwwer) war fotografeschen mat engem migrated Équipe 20X microscope Zil VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0128751.s003 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung S4 Figebam. . Downregulation vun c-Eckstouss siRNA VerfÜgung Western blot Analyse war gesuergt mat entweder c-hu siRNA oder eng negativ Kontroll (NC) Ennerdréckung vun c-hu Ausdrock der lipofectamine transfection vun AGS Zellen ze confirméieren VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0128751.s004 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung S5 Figebam. D'Auswierkunge vun c-hu siRNA op AGS Zellen sech mat Transwell an Matrigel assays évaluéieren. D'Zuel vun Zellen VerfÜgung datt duerch d'Kultur Neiegkeet Pore (weider) oder no eruewert duerch d'Matrigel Neiegkeet Pore (iwwer) war fotografeschen migrated hu mat engem 20X microscope Zil VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0128751.s005 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung

Other Languages