PLoS ONE: MicroRNA-206: Efektyvus slopinimas skrandžio vėžio progresavimo per c-met būdas

Anotacija

mikro RNR yra endogeninių trumpas grandinės nukleotidų RNR, reguliuojantys genų funkciją tiesiogiai jungdamasis tikslinių mRNR. Šiame tyrime mes ištyrė MicroRNA-206 (MIR-206) poveikį skrandžio vėžio vystymąsi. Pasaulis-206 pirmą kartą buvo patvirtinta, kad downregulated skrandžio vėžio egzempliorių. Priešingai, ląstelę c-met buvo patvirtinta audinių mėginių žmogaus skrandžio vėžiu, su savo lygio atvirkščiai koreliavo su Pasaulis-206 išraiška. Įvadas Pasaulis-206 inhibuoja ląstelių proliferacijos, sukeldami G1 ląstelės ciklo suėmimą, taip pat migracija ir invazija. Be to, svarbūs proliferaciją ir /ar su migracija susiję molekulės, pavyzdžiui, c-met, CDK4, p-Rb, p-Akt ir p-ERK buvo patvirtinta, kad downregulated Vakarų blot analizė. Nukreipimas C-met taip pat tiesiogiai susijęs su AGS ląstelių proliferaciją, migraciją ir invazija. , in vivo
, PPN-206 išreiškiantys naviko ląstelės taip pat rodomas augimas vėlavimas lyginant su nepakeistą vėžinių ląstelių. Mūsų rezultatai parodė, kad Pasaulis-206 slopino c-met išraišką skrandžio vėžio ir gali veikti kaip stiprus naviko slopintuvas C-MET ekspresija navikų. Slopinimas miR-206 funkcijos galėtų prisidėti prie nukrypusiu nuo normos ląstelių proliferaciją ir migracijos, todėl skrandžio vėžio išsivystymo

nurodomoji:. Zheng Z, Yan D, Chen X, Huang H, Chen K, Li G, ir kt. (2015) MicroRNA-206: Efektyvus slopinimas skrandžio vėžio progresavimo per c-met keliu. PLoS ONE 10 (7): e0128751. Doi: 10,1371 /journal.pone.0128751

redaktorius: Hiromu Suzuki, Saporas medicinos universitetas, Japonija

Įstojo: vasario 4 2015; Priėmė: Gegužės 1, 2015 m Paskelbta: Lie 17, 2015

Visos teisės saugomos: © 2015 Zheng et al., Tai atviros prieigos straipsnis platinama pagal Creative Commons Attribution licencija, kuri leidžia nevaržomai naudotis, paskirstymo ir dauginimąsi bet kokioje laikmenoje sąlygomis, su sąlyga, kad pirmasis autorius ir šaltinis įskaitomos

Duomenų Prieinamumas: Visi susiję duomenys yra per popieriaus ir jo Pagalbinė informacija failus

finansavimas:. Šis darbas buvo remiamas iš dalies, Nacionalinės Gamtos mokslo fondo Kinijos Grant 81100671 (DY), Zhejiang provincijos Gamtos mokslo fondas Kinijos dotacijos Y2110609 ( DY) ir Wenzhou Mokslas & Technologijos biuras Grantas Y20080096 (DY). Į finansuotojai neturėjo vaidmenį studijų dizainas, duomenų rinkimo ir analizės, sprendimų skelbti, ar ruošiant rankraštį

konkuruojančių interesų.. Autoriai pareiškė, kad nėra konkuruojantys interesai egzistuoja

Įvadas

Skrandžio vėžys yra ketvirtoji dažniausia vėžio ir antroji pagrindinė priežastis, dėl vėžio susijusių mirčių pasaulyje [1]. Jo sergamumas ir mirtingumas yra ypač ryškus Azijos šalių dėl įvairių įtakų [1] įvairovė. Nuo jo pateikimas yra dažnai susijęs su progresavusia liga, yra skubiai reikia pažangos jo aptikimo ir galiausiai jos valdymą. Šiuo metu iš mikro RNR supratimas (miRNAs) ant įtaką skrandžio vėžio formavimąsi vyksta sparčiai.

Nuo pirmojo aprašymas Mirna į nematodas , C
. elegans
atgal į 1993, šių mažų ne kodavimo RNR poveikis išėjo keli filialai molekulinės biologijos [2]. MiRNAs yra labai audinio specifinis biologiniai žymenys, dėl kurių gali keičia ir transformuoja gyventojo audinį. Nes raiškos ir pagal-išraiškos tiek buvo susijęs su tumorigenezei [3], veikiančių kaip onkogenų bei navikų supresorinių genų yra tiek gerai nustatyta [4, 5]. Per pastaruosius keletą metų, jų įtaka plėtojant ir aptikimo organo navikų, įskaitant skrandžio vėžio pamažu išaiškintas. Jau yra keletas nustatytos skrandžio vėžiu kovos su apoptozės mechanizmo miRNAs, pvz Pasaulis-21 ir Pasaulis-148A [6, 7]. Kiti keliai įtakojo miRNAs apimti ląstelių ciklą, kurį sudaro miR-222/221, PPN-106B /93/25 ir Pasaulis-24 [6, 7].

Vienas iš kitų naujų perspektyvių miRNAs kietasis organas navikai apima miR-206 [8]. Tai ypač Mirna priklauso "myomiRs", kuris dalyvauja skeleto raumenų išsivystymas [9] grupei. To, buvo susijęs su daugeliu kitų ligų, įskaitant širdies ligos, lėtinės obstrukcinės plaučių ligos ir Alzheimerio liga, jos vaidmuo onkogenezei gavo kontrolę daugiau neseniai įskaitant rabdomiosarkoma, plaučių vėžio, gaubtinės ir tiesiosios žarnos vėžio, skvanomos, ir skrandžio vėžio [8, 9]. Nors padidėjusi keletą rūšių vėžio, įskaitant kiaušidžių ir limfoplazmocitinė limfoma, PPN-206 dažniausiai slopinamas kietoje organų navikų [9]. Pasaulis-206 buvo anksčiau slopina skrandžio vėžio plitimą iš dalies slopina ciklino D2 [10]. Šiame tyrime, mes sutelktas į PPN-206 vaidmenį skrandžio vėžio onkogenezėje per c-Met keliu, kuris tradiciškai buvo įtakingą signalizacijos kelią už onkogenezėje į navikų [11] įvairovė. C-Met buvo prognozuojama ir įrodyta, kad tikslinis genas keliais miRNAs įskaitant miR-206 [9, 12].

Rezultatai

slopinimas miR-206 lėmė padidėjęs C-Met išraiška skrandžio vėžio

Realaus laiko PGR analizė buvo atlikta siekiant nustatyti PPN-206 išraišką 40 skrandžio vėžiu egzempliorių ir normaliuose audiniuose. buvo rasta Pasaulis-206 lygis daugelyje audinių pavyzdžių skrandžio naviko (34/40), kad būtų gerokai mažesnis nei įprasta audinių (pav 1A). Pasaulis-206 išraiška buvo atvirkščiai susijusi su c-met lygio pastebėtas navikų mėginiuose (pav 1b). Dauguma navikų mėginiuose, su sumažėjusiu Pasaulis-206 raiškos, parodė didelį procentą (> 50%), C-Met dažymo. Priešingai, navikai su normalia raiška miR-206 parodė labai silpną arba neigiamą c-met išraiška.

Pasaulis-206 sukelto G1 areštas ir slopino ląstelių proliferacija, migracija ir invazija į AGS skrandžio vėžio ląstelių

Kaip Pasaulis-206 išraiška sumažėjo skrandžio vėžio egzempliorių, siekėme nustatyti, ar miR-206 įvedimas neturėjo biologinio poveikio AGS ląsteles. AGS ląstelės transfekuotos su miR-206 molekulės parodė, slopina ląstelės augimo, palyginti su neigiamos kontrolės remiantis MTS tyrime (pav 2A). FACS analizė ląstelių parodė, G1 ląstelės ciklo suimti (S1 Fig). Kolonijų skaičius taip pat buvo sumažintas su transfekciją PPN-206 (S2 pav).

Pasaulis-206 gali slopinti migracija ir invazija AGS ląstelių (pav 2b ir S3 pav). Dramatiškas mažinimo migracijos į apatinių kamerose buvo pastebėtas Pasaulis-206 perkeltų AGS ląstelių (86 ± 15 vs 165 ± 16 AGS ląstelių P
< 0,01, n = 3). Be to, ląstelės transfekuotos su miR-206 parodė, kad HGF sukeltas invazyvumas buvo taip pat žymiai trukdo šių miR-206 transfekciją (57 ± 12 vs 116 ± 14 į AGS ląstelių, P
< 0,01, n = 3).

Pasaulis-206 downregulated c-Met išraiška ir kitos ląstelės ciklo susijusių baltymų

Mes jau anksčiau nustatė c-met kaip tiesioginis tikslas PPN-206 [9]. Vakarų dėmė analizė patvirtino, kad C-Met išraiška buvo sumažintas Pasaulis-206 transfekciją į AGS ląstelių (3 pav). Kartu, negimdinis Pasaulis-206 taip pat žemyn sureguliavo CDK4, p-Rb, p-Akt ir p-ERK išraiška.

downregulation C-MET slopina skrandžio vėžio ląstelių dauginimosi, migracijos ir invazija

Be to, c-Met specifinis siRNR pirmą kartą buvo naudojami mažinti c-susitiko AGS ląstelių (S4 pav) išraiška. MTS tyrimai buvo atlikti siekiant nustatyti, ar ląstelių proliferaciją. AGS ląstelės transfektuotose c-met siRNA buvo mažiau ląstelių augimą, palyginti su neigiamų kontrolinių ląstelių (pav 4A; 25.10 ± 3.81% sumažėjimas). Tiek HGF sukelta migracija ir invazija sumažėjo lyginant C-Met siRNR perkeltų ląstelių neigiamose kontrolinėse perkeltų ląstelių. Kaip nurodyta pav 4B ir S5 pav, mažėjimą migracija (88 ± 10 vs 155 ± 15, P < 0,01, n = 3) (72 ± 7 vs ir invazija 126 ± 12, P < 0,01, n = 3) abu buvo statistiškai reikšmingas.

Įvadas miR-206 slopinamas vėžinių augimas vivo

kitas tiriamas, jei raiška miR-206 gali nuslopinti naviko augimą in vivo
. Po 8 savaičių, suvidurkintoms auglio apimtis buvo gerokai mažesnis iš ląstelių užsikrėtusių lentiviruso išreiškė Pasaulis-206, lyginant su kontrole (5 pav).

Diskusijos

Skrandžio vėžio išliko reikšmingai sveikata rūpintis naštą visame pasaulyje, nepaisant metų tyrimų [1]. Pagal PSO, skrandžio vėžys išlieka viena iš viršų vėžio etiologies su dideliu greičiu [1] mirtingumo. Kaip ir kitas kietasis organų navikai, tai vis aiškiau, kad geriau suprasti naviko onkogenezėje būtina gerinti šių pacientų prognozę. Būdamas paplitęs Azijos šalyse, duomenys atsiranda ant miRNAs vaidmens kūrimo ar slopinimo skrandžio vėžio [6].

miRNAs jau dvigubas funkcijas pagal skrandžio vėžio vystymąsi [6, 13]. Kai miRNAs yra naviko slopintuvai ir kiti oncomiRs [6]. Ueda ir kt. Rasta 22 miRNAs aktyvinama ir 13 downregulated pacientų su skrandžio vėžiu [13] plazmoje. Tikslus, kurie yra tiriama atsižvelgiant į skrandžio vėžio atveju yra reguliatoriai P16, Via miR-24, ir p21 per miR-222/221 ir miR-106B /93/25 [6]. Kiti, pavyzdžiui, miR-21, gali būti aktyvinama ne daugiau nei 92% skrandžio vėžys audinių mėginių [14]. nustatytos skrandžio vėžio, naudojamas kaip naviko slopintuvai kandidatai yra mir-181b, MIR-101 ir mir-486 [6]. Pavyzdžiui, PPN-101 yra manoma, kad nukreipti EZH2, COX-2, MCL-1 ir FOS [15]. Pasaulis-486 yra manoma, kad įtakos OLFM4, galbūt įtakos apoptozę pasroviui [16].

Nustačiusi, kad miRNAs dauguma tarnauja kaip naviko slopintuvai, mes ištirti, C-Met kelią skrandžio vėžio. Tiriant C-Met kelią už rhadbomyosarcoma, mes nustatėme, kad šio kelio svarbą sarkomos [9]. c-Met yra žinoma, kad būti dysregulated skrandžio vėžio [11, 17-19]. RER Proto-onkogeno koduoja baltymą, vadinamą hepatocitų augimo faktoriaus (HGF) receptorių turinti tirozino kinazės aktyvumą [18]. Mes paprastai tai yra išreiškiama tik kamieninių ląstelių, tačiau taip pat matė savo reguliacijos sutrikimas į onkogenezėje [18]. Šiame tyrime mes galėjome patvirtinti, kad C-Met žymiai dalyvauja skrandžio vėžio ir jos, kaip Pasaulis-206 taikinio vaidmuo yra lemiama onkogenezėje.

Mobilusis ciklas progresavimas dysregulated skrandžio vėžio. Remiantis ankstesnėmis ataskaitomis, cikloniniai D2 yra padidėjusi skrandžio vėžio, kai Pasaulis-206 veikia [10]. Pasaulis-206 buvo įrodyta, kad būti stiprus prognostinė žymeklis [10]. Jo downregulation yra susijęs su trumpesnį bendrojo išgyvenimo. Restauravimas miR-206 sukelia G0 /G1 ląstelės ciklo arešto, patvirtindamas savo, kaip naviko slopintuvas vaidmenį. Mūsų darbas taip pat parodė, bus paveikta ląstelės ciklo reguliacijos sutrikimas su CDK4 ir fosforilinto-Rb. CDK4 yra iš cycline priklausomo kinazės šeimai su SER /THR baltymų kinazės aktyvumo narys. Jis veda į G1 fazės progresavimą. Be to, kinazė veda prie Rb, kurie yra auglio slopinamojo dalyvauja ląstelės ciklo progresavimas fosforilinimo.

Nors panašios išvados buvo patvirtinta į skrandžio, kiaušidžių ir krūties vėžio, miR-206 vaidmuo atrodo turėti priešingą poveikį gaubtinės žarnos vėžiui gydyti [6, 20]. Atvirkštinė koreliacija pasižymėjo tarp miR-206 ir KLF4 į žmogaus storosios žarnos vėžio [20] Ekspertų grupės. KLF4, kuri turi onkogeninių savybių kitų vėžio, pavyzdžiui, krūties, odos ir plaučių, veikia kaip auglio slopinamojo gaubtinės žarnos vėžiui gydyti [20]. Jo rengėjas yra hiper-metilo su aukštesnio lygio PPN-206, vedančių į downregulation iš KLF4 [20]. Šie rezultatai rodo, kad Pasaulis-206 gali neveikti panašiai visose epitelio ląstelių, kurios paneigia vienas dydis tinka visiems požiūrį chemoterapiniai vaistai.

Šiame tyrime mes nustatė reglamentavimo C-Met genų ekspresijos mechanizmą per miR-206 skrandžio vėžio. c-Met raiškos taip miR-206 downregulation atrodo, kad bendra etiologijos su skrandžio vėžio patogenezės į mėginių, analizuojamos šiame tyrime dauguma. Trumpai tariant, mes įrodyta, kad miR-206 neigiamai moduliuoja c-met Signalinis kelio dalyvauja ląstelių proliferaciją ir migracijos. Mūsų tyrimai tikiuosi turės svarbių klinikinių pasekmių skrandžio vėžiui gydyti. Pasaulis-206 yra kandidatas tiek imunohistocheminio aptikti mažų auglių ir galimo tikslo biologinių terapijos.

Medžiagos ir metodai

ląstelių kultūros

žmogaus skrandžio vėžio ląstelių linija, AGS, pirktos iš ATCC (Manassas, VA), buvo auginami Ham F-12 Medium (Invitrogen, Carlsbad, CA) papildytas 10% vaisiaus galvijų serumo. (FBS; Hyclone, Logan, UT)

etika pareiškimas

Šis tyrimas buvo atliktas griežtai laikantis rekomendacijų ir patvirtinimo Wenzhou medicinos universitetas gyvūnų globa ir vaistų komitetas (leidimo numeris: WZMCOPT-043.011). Keturiasdešimt skrandžio naviko pavyzdžiai ir įprastus donorės skrandžio audiniai buvo gauti iš antrosios dukterinė ligoninę Wenzhou medicinos universiteto (Wenzhou, Kinija). Pavyzdžių rinkinys buvo patvirtintas Wenzhou medicinos universiteto etikos komiteto mokslinių tyrimų su žmogaus dalykai, ir raštu informuoti sutikimas buvo gautas iš kiekvienu atveju. Visi eksperimentai buvo atliekami laikantis Helsinkio deklaracijos ir nacionalinių teisės aktų.

Kiekybinė PGR

Viso RNR buvo išskirta iš žmogaus skrandžio navikų mėginiuose ir įprastos kontrolės su Trizol reagento (Invitrogen). 10 ng visos RNR buvo naudojama sintezei, kurį TaqMan MicroRNA atvirkštinės transkripcijos rinkinys (Applied Biosystems, Foster City, CA), ir Pasaulis-206 raiškos lygmenyje buvo įvertintas pagal TaqMan MicroRNA tyrimas (Applied Biosystems). Realaus laiko PGR buvo atliekama naudojant Applied Biosystems VIIa 7 realiojo laiko PGR sistema (Applied BIOSYSTEMS).

imunohistocheminį dažymo C-MET

skirsniuose formalinu fiksuotos parafino įterptųjų žmogaus skrandžio naviko pavyzdžiai (5 mkm) buvo ir tada panaikinti paraffinized su ksileno ir etanolio. Skaidres buvo gydomi 0,3% vandenilio peroksido, ir inkubuojami per naktį 4 ° C su c-met antikūno 1: 300 praskiedimo (CST, Beverly, MA). Imunohistocheminį dažymo atlikta naudojant įsivaizduoti HRP /DAB aptikimo sistemą (DaKo, Glostrup, Danija).

ląstelių proliferacija tyrimas

AGS ląstelės buvo padengtas iki 2000 ląstelių viename pat 96 duobučių lėkštelėse ( costar, High Wycombe, Jungtinė Karalystė) kiekvienam transfekciją. Transfekcija buvo atliekami su reagento (Lipofectamine RNAiMAX; Invitrogen), trimis egzemplioriais. Už kiekvieną gerai, 50 nm Pasaulis-206 imituoja molekulė (Ambion, Ostinas, TX) arba neigiama kontrolė (Ambion) transfekcija dirbo. Po 72 valandų kultūros, ląstelių proliferacija buvo vertinama naudojant MTS tyrimo (CellTiter 96 vandeninės; Promega Madison, WI).

Transwell migracijos tyrimai

24 valandas nuo transfekciją, AGS ląstelės buvo surenkamos trypsinization ir išplauti vieną kartą su "D-Hanks tirpalo (Invitrogen). Norint išmatuoti ląstelių migraciją ar invazija, 8-mikronų akučių dydis kultūrą ar Matrigel įdėklai (Transwell; Costar) buvo pateikti į 24 duobučių kultūros plokščių šulinių. Apatinėje kameroje, 400 pL F-12, kurių sudėtyje yra 10% FBS ir buvo pridėta 20 ng /ml HGF. Tada 5x10 ^{4 ląstelės buvo įtraukta į viršutinę kamerą. Po to, kai 20 valandų inkubacijos ląstelės, kurios migravo per poras buvo tamsintas su violetinei ir stebimas per mikroskopą (Zeiss, Oberkochen, Vokietija), naudojant 20X tikslą.}

Western blot analizė

AGS ląstelės (1x10 ^{5) buvo sėjamos 6-duobučių lėkštelėse ir auginami F-12 už 24 valandoms iki transfekciją. 72 valandas po transfekciją, ląstelės buvo plaunamos šaltu PBS ir stebimas jų lizės buferiniame tirpale (35 mmol Tris-Cl [pH 6,8], 20 g /l natrio dodecilsulfato [SDS], 100 mM ditiotreitolo). Baltymų fragmentai (20 mikrogramų kiekvienas) buvo atskirtos, naudojant 8% SDS-poliakrilamido gelyje, tada elektro-perkeliamas ant nitroceliulioz filtrų membranas. Membranos buvo blokuotos buferinė, kurių sudėtyje yra 5% Nonfat pieno PBS su 0,05% Tween-20 2 valandas ir inkubuojami per naktį su antikūno, esant 4 ° C temperatūroje. Po antrojo plovimo su PBS su 0,05% Tween-20, membranos buvo inkubuojamos su peroksidaze konjuguotų antrinių antikūnų (Millipore ", Darmstadt, Vokietija) ir sukurtas su chemiliuminescencijos sustiprinimo nustatymo rinkinys (Pierce, Rockford, IL). GAPDH buvo naudojamas kaip krovimo valdymu. Antikūnai CDK4, p-rb, ERK, Akt p-ERK p-Akt, C-Met ir GAPDH buvo iš mobiliųjų Signalizacijos technologijos (Beverly, MA).}

siRNA tyrimai

c-MET-specifinis siRNR (Ambion) ir neigiamos kontrolės siRNR (Ambion) buvo naudojami downregulate c-met išraišką AGS ląsteles. 50 nM c-MET-konkretų siRNA ar neigiamos kontrolės siRNA buvo pernešta į AGS ląstelių su Lipofectamine RNAiMAX. MTS tyrimas buvo atliktas per 72 valandas po transfekciją, o Transwell ir Matrigel tyrimai buvo atlikti praėjus 24 valandoms po transfekciją, kaip aprašyta aukščiau.

, in vivo
naviko augimo tyrimas

prieš MicroRNA išraiška konstruoja Lenti-Pasaulis-206 ir pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP kontrolė vektorius buvo įsigytas iš sistemos biomokslų (Mountain View, CA). AGS ląstelės buvo užsikrėtę lentiviruso išreiškė Pasaulis-206 arba neigiamą kontrolę. Moteris nude pelių, 6 savaičių amžiaus, buvo pasėta AGS ląstelių (8x10 ^{6) išreikšti MIR-206 arba neigiamą kontrolę į savo šonus, tada paaukojo po 8 savaičių. Naviko dydis buvo matuojamas ir apimtis buvo apskaičiuojamas pagal šią formulę: ( L
X W pervežimas 2) x 0,5 ( L pervežimas, ilgis W
, plotis), atsižvelgiant į metodo anksčiau pranešė [21]. Visi tyrimai ir procedūros buvo patvirtintos Wenzhou medicinos universiteto Gyvūnų priežiūros ir naudojimo komitetas.}

Statistinė analizė

Visi duomenys buvo parodyta kaip vidurkis ± SEM. Rodomi rezultatai yra išreikštas vidutinės vertės ± SEM gautų rezultatų iš trimis egzemplioriais per vieną eksperimentą. Rezultatai atstovauti tuos, kurie gaunami iš trijų atskirų eksperimentų. Skirtumai tarp eksperimentinių grupių ir kontrolinės grupių buvo analizuojami naudojant Stjudento , T
-test. Statistinis reikšmingumas buvo priimtas P
< 0,05.

Pagalbinė informacija
S1 pav. FACS analizė AGS ląstelių transfektuotose Pasaulis-206.
AGS ląstelių buvo surinkti 48 valandas po transfekciją su miR-206 arba NC, tamsintas su propidiumo jodido, ir analizuojami tėkmės citometrijos. Dešimt tūkstančių ląstelės buvo įvertintas kiekvieno mėginio. Tipiškiausių rezultatai trijų nepriklausomų eksperimentų pavaizduotos
Doi:. 10,1371 /journal.pone.0128751.s001
(TIF)
S2 pav. Kolonija formavimas tyrimas.
AGS ląsteles transfektuotose Pasaulis-206 arba NC buvo pasėtos ne mažo tankio. Po 7 dienų, kolonija formavimas buvo nustatomas, nudažant violetinei. Tipiniai rezultatai trijų nepriklausomų eksperimentų rodomi
Doi:. 10,1371 /journal.pone.0128751.s002
(TIF)
S3 pav. Į PPN-206 dėl AGS ląstelių poveikis buvo vertinamas su Transwell ir Matrigel tyrimus.
Ląstelių, kad migravo per kultūra įterpti poras (up) arba įsiveržė per Matrigel įterpti poras (žemyn) skaičių buvo fotografuotas naudojant 20X mikroskopas tikslas
Doi:. 10,1371 /journal.pone.0128751.s003
(TIF)
S4 pav. . Downregulation c-pasitiktas siRNA
Vakarų dėmė analizė buvo atlikta siekiant patvirtinti slopinimas C-Met išraiškos po lipofectamine transfekciją AGS ląstelių arba su c-met siRNA ar neigiamos kontrolės (NK)
Doi:. 10,1371 /journal.pone.0128751.s004
(TIF)
S5 pav. C-MET siRNA poveikis AGS ląstelių buvo vertinamas Transwell ir Matrigel tyrimus.
Ląstelių, kad migravo per kultūra įterpti poras (up) arba įsiveržė per Matrigel įterpti poras (Žemyn) skaičių buvo fotografuotas naudojant 20x mikroskopas tikslas
Doi:. 10,1371 /journal.pone.0128751.s005
(TIF)

• PLoS ONE: Exosomal miRNAs iš pilvaplėvės plovimas Skysčių kaip potencialūs prognostiniai biologinių žymenų peritoninės metastazių skrandžio Cancer
• PLoS ONE: didinimas spinduliuotės iki Ursolic rūgšties BGC-823 Žmogaus adenokarcinoma Skrandžio vėžio ląstelių Line