PLoS ONE: Открытие онкомаркеров для рака желудка по Proteomics

Абстрактный
<р> Рак желудка (GC) имеет высокий уровень заболеваемости и смертности среди различных видов рака во всем мире. Развитие неинвазивных диагностических методов и технологий для отслеживания возникновения GC актуальна, и поиск надежных биомаркеров considered.This исследование, призванное непосредственно обнаружить дифференциальные биомаркеров из GC тканей двумерная-дифференциального гель-электрофореза (2D-ПГЛП), и дальнейшего подтверждения экспрессии белка с помощью вестерн-блоттинга (ВБ) и иммуногистохимии (IHC) .Pairs тканей GC (раковых тканей желудка и соседних нормальных тканей), полученных после операции была исследована для 2D-DIEG.Five белков wereconfirmed ВБ и IHC, включая глюкозу -regulated белок 78 (GRP78), глутатион-s-трансферазы пи (GSTpi), аполипопротеина а (ApoAI), альфа-1-антитрипсина (A1AT) и gastrokine-1 (ГКН-1). Среди результатов, GRP78, GSTpi и A1ATwere significantlyup регулируемых и вниз регулируется соответственно у больных раком желудка. Кроме того, GRP78 и ApoAI коррелировали с A1AT для белка expressions.This исследования предполагает, что эти белки могут быть кандидатами надежных биомаркеров для рака желудка
<р> Образец цитирования:. Ву JY, Чэн CC, Ван JY, Ву DC, Се JS Ли SC, и др. (2014) Открытие онкомаркеров для рака желудка протеомика. PLoS ONE 9 (1): e84158. DOI: 10.1371 /journal.pone.0084158
<р> Редактор: Сальваторе В. Пиццо, Duke University Medical Center, Соединенные Штаты Америки
<р> Поступило: 19 августа 2013 года; Принято: 12 ноября 2013 года; Опубликовано: 3 января 2014
<р> Copyright: © 2014 Wu и др. Это статья с открытым доступом распространяется в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution, которая позволяет неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, что оригинальный автор и источник кредитуются

Финансирование:. Эта работа была поддержана грантами NSC96-3111-P-042A-004-Y, NSC100-2314-B-037-040, а также Национальный научный совет Китайской Народной Республики. Эта работа была также поддержана Гаосюн медицинской университетской больницы (KMUH97-7R32, KMUH98-8R33). Доноры не играет никакой роли в дизайн исследования, сбора и анализа данных, решение о публикации или подготовки рукописи
<р> Конкурирующие интересы:.. Авторы заявили, что не существует никаких конкурирующих интересов

Введение
<р> Хотя theprevalence рака желудка снижается, и изменения в географическом, он остается одним из самых распространенных видов рака в азиатских странах и является четвертым наиболее часто встречающихся рака (9% всех случаев рака) по всему миру. Возрастные стандартизованный уровень заболеваемости (ASR) больше, чем 20 на 100000 в странах с высоким уровнем риска, таких как Китай, Япония и Корея [1], [2], [3]. Он также является второй ведущей причиной смерти от рака у обоих полов во всем мире (737,000 смертей, 9,7% от общего числа). В Восточной Азии, показатели смертности были оценены как примерно 28,1 на 100000 у мужчин и 13,0 на 100000 у женщин, whilein Северной Америке, они около 2,8 и 1,5 соответственно [4].

пятилетняя выживаемость варьировались от 90% до менее чем на 5 процентов, в основном, в зависимости от стадии постановки диагноза [5], [6] .Если рак желудка можно обнаружить и лечить на ранних стадиях, выживаемость пятилетняя rateis лучше, чем 90%; Тем не менее, существует ISNO кажущуюся или специфический симптом ранней стадии cancer.Thus желудка, раннее detectionof рака желудка becomesmore difficult.Although сывороточного пепсиногена (PG) testssuch, как низкая концентрация PGI и /или низкое соотношение PGI /II были наводящие скрининг-тесты в высоко- в странах повышенного риска, таких как Япония, они weregood показатели атрофический гастрит, а не диагностики markersof рака желудка [7] - [9] .Essentially, эндоскопия beenthe инструмент перспективным с 2,7 до 4,6 раз выше, чем уровень обнаружения исследований бария [10]. Тем не менее, в начале желудка диагноз рака по endoscopydependson профессионального мастерства.
<Р> Некоторые неинвазивных биомаркеров для диагностики и последующего наблюдения в желудочно-кишечного тракта и печени tumorshave сообщалось. Например, альфа-фетопротеин (AFP) является одним из клинически полезных биомаркеров для диагностики и последующей гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК) .AFP был повышен выше 20 нг /мл в одном исследовании более чем у 70% больных с ГЦК [11]. Согласно выводам Европейской ассоциации Барселона-2000 по изучению печени (EASL) конференции, ГЦК может быть диагностирована без случаев biopsyin, где AFP больше, чем 400 нг /мл с узелка размером более 2 см, доказательствам артериальной hypervascularization в больных циррозом [12] .Incolorectal рак (CRC), предоперационная раково антигена (СЕА) уровень является весьма значительным прогностическим ковариатой и американского общества клинической онкологии (ASCO), что она должна быть проверена, рекомендуется предварительно оперативно предоставлять прогностическую информацию [13]. Серийные возвышений CEA показывают более высокую вероятность рецидива CRC. Тем не менее, не существует надежного биомаркером рака желудка.
<Р> Таким образом, поиск надежных биомаркеров для рака желудка является очень важным для клинической практики. Цель этого исследования, чтобы обнаружить надежные белковые биомаркеров из подобранных тканей (опухоли и прилегающих к ним нормальных тканей) с помощью гель-электрофореза двумерная разностей (2D-ПГЛП), и идентифицировать белки с помощью матричной лазерной десорбцией /ионизацией-визуализации масс-спектрометрии (MALDI были подписаны -IMS).

материалы и методы

образцы тканей
<р> образцы тканей были получены после того, как информирующие согласий. Соединенный опухоль samplesincluding и прилегающих к нему пациентов нормальные tissuesfrom были получены из эндоскопических биопсий опухолей или surgery.The классов были определены в соответствии с американской совместной комиссии по Cancer Поэтапное системы (AJCCS) патологоанатомами под метиленовым синим staining.Clinical информации пациентов было зафиксировано, в том числе возраст, пол, тип опухоли, прорастание и выживание. Кроме того, концентрация СЕА в сыворотке также измеряли радиоактивным иммуноанализа в обычной медицинской diagnosis.The individualsenrolled в настоящем исследовании, дали письменное информированное согласие на публикацию этих тематических details.This исследование было одобрено Институциональным наблюдательным советом Гаосюн медицинского университета Чжун Больница Хо Мемориал (KMUH-IRB-980382).

Два электрофорез измерение-гель разница
<р> Один (таблица 1) пара образцов тканей washomogenized (PRO 200, Bertec, Тайвань) в умеренном объеме буфера для лизиса (50 мМ Трис-HCl, 8 М мочевины, 4% (вес /объем) 3 - [(3-холамидопропил) диметиламмонио] -1-пропансульфонат, и pH8.5). Индивидуум 50 мкг образца белка метили 400 пмоль Су3 или Cy5 отдельно в течение 30 мин (фиг. 1В). Кроме того, Отстоявшийся смесь образца (100 мкг) метили 800 пмоль Cy2 в качестве внутреннего стандарта в то же время. Впоследствии маркировка reactionswere остановлено путем инкубирования 1 мкл 10 мМ буфера лизина в течение 30 минут, а затем один-кратный объем образца буфера (8 М мочевины, 20 мМ дитиотреитола, 4% (вес /объем) 3 - [(3 -Cholamidopropyl) диметиламмонио] -1-пропансульфонат, 0,5% (об /об) буфера ИПГ и мало бромфеноловый синий) был added.The первый разделение, изоэлектрофокусирование, проводили с использованием колпачка нагрузки на гель полос (7 см, ИЭТ 4- 7) при 20 ° C при хранении 15000voltage-часов (система IPGphor, GE Healthcare). После уравновешивания с использованием додецилсульфата натрия, вторые separationwas проводили using4-12% додецилсульфата натрия в полиакриламидном геле. Изображения геля были приобретены (Typhoon TRIO Переменный режим Imager, GE Healthcare) с использованием 488, 532 и 633 нм лазеров с фильтром излучения 520, 532 и 670 нм соответственно. Все изображения были проанализированы с помощью программного обеспечения DeCyder 6.5 (GE Healthcare), чтобы выбрать дифференциальные белки, которые wereselected в зависимости Weather.co.ua исполнился размещения ниже существенного значения 0,05 в зависимости от Student т
-test.

В геле триптическое переваривание
<р> гели окрашивали Sybro Ruby (SIGMA) были впоследствии обесцвечивают с 10% метанола и 7% -ной уксусной кислоты в деионизированной воде в течение ровно 30 min.The видимых пятен гелей под УФ просвечивания (Spectroline) были используется, чтобы вырыть для интересных белков вручную. Эти частицы геля промывали в 100 мкл 25 мМ бикарбоната аммония в 50% ацетонитрила в течение 15 мин, а затем промывали в 200 мкл 25 мМ бикарбоната аммония в деионизированной воде в течение 15 мин в два раза, а затем, достаточно ацетонитрила добавляли усадку гель частиц. После сушки вниз, индивидуальный гель particleswereincubated с 3 мкл 20 нг /мкл трипсина в 25 мМ бикарбоната аммония при температуре 4 ° С в течение 1 ч, а затем 3 мкл 25 мМ бикарбоната аммония добавляли к переваривать белки при 56 ° С в течение 1 час. После того, как в-гель пищеварении, 2 мкл 100% ацетонитрила с 1% трифторуксусной кислоты добавляли к растворам, а затем образцы обрабатывали ультразвуком в течение 10 мин, чтобы освободить пептиды из частиц геля.

Масс-спектрометрический анализ для идентификации белков
<р> Каждый раствор белка переваривали трипсином смешивали 1:1 с 10 мг /mlof α-циано-4-гидроксикоричной кислоты, растворенной в 50% ацетонитрил /0,1% трифторуксусной кислоты, и наносили на мишень AnchorChip MALDI (Bruker Daltonics GmbH , Бремен, Германия) до полного высыхания. Пептиды анализировали с помощью MALDI-TOF /TOF UltraflexIII (Bruker Daltonics) до 20 кВ с положительной модели, и данные пиков были переданы FlexAnalysis ™ 3.0 программного обеспечения (Bruker Daltonics) для расширенного расчета и калибровки. MASCOT 2.2 (Matrix Science) был использован, чтобы соответствовать пептиды с базой данных NCBI или Swiss-Prot для идентификации белков. Установка была ограничена человеческим систематике parameters.Meanwhile, carbamidomethyl цистеин был использован в качестве фиксированной модификации, и окисленный метионин в качестве переменной модификации. Вероятность (Р) была основана на mowse Балл рассчитывается от -10 × log (P). Белок балл больше, чем 56 было статистически значимым ( р
&л; 0,05). Кроме того, одним из основных белковых пиков, появляющихся на спектре был использован для подтверждения идентичный результат путем определения аминокислотной последовательности, которая называется пептидный фрагмент метод дактилоскопии.

вестерн-блоттинга
<р> пар образцов ткани гомогенизируют (Pro 200, Bertec) в буфере для лизиса (10 мМ фосфата натрия, 0,9% хлорида натрия, 1% Triton-X100, рН 7,4) и инкубировали при встряхивании при 4 ° с в течение 1 часа. После того, как избавиться от осажденных гранул с помощью высокоскоростного центрифугирования (10000 оборотов в минуту, 5 минут), добавляли пипеткой надосадочную жидкость к образцу буфера (10 мМ фосфата натрия, 0,9% хлорида натрия, 8 М мочевины, 30% глицерина, 2 % додецилсульфата натрия, 0,1% β-меркаптоэтанол и 0,1% бромфенолового синего) путем 1: 1 отношение и варят при температуре 100 ° с в течение 5 мин для белка denature.Approximately 20 мкг каждого белка образца наносили на индивидуальную сетку 4- 12% додецилсульфат натрия-электрофорез в полиакриламидном геле (SDS-PAGE, Invitrogen). Iblot сухая система блоттинга (Invitrogen) использовали для трансформации белков в поливинилиденфторида (PVDF) мембрану на основе иона, протекающего вдоль с медным электродом. После того, как с использованием 0,5% молока, чтобы запачкайте PVDF мембрану в течение 30 мин, добавляли theindividual первичное антитело (2 мкг /мл) в течение инкубации в течение 2 ч при встряхивании. Последовательные вторичные антитела, конъюгированные с пероксидазой хрена (HRP) (2 мкг /мл) инкубировали в течение 1 часа при встряхивании последовательно. Между инкубационной процессами, repeatedlywashings по PBS буфера (10 мМ фосфат натрия, рН 7,4 и 0,9% хлорида натрия) weredone. Система обнаружения СТЭК (Millipore) была выполнена, и изображения были приобретены Imaging System (Gel Doc XR System, Bio-Rad) в зависимости от времени умеренного исследуете.

Immunohistochemistry
<р> иммуногистохимический performedusing стандартный пероксидазы на основе метода окрашивания. Образцы ткани были сокращены на криостат (HM525, Microm) секции .Fresh ткани (10 мкм) на слайдах лизина покрытием были driedon нагревателем при температуре 37 ° С и последовательно погружаются последовательным 75%, 95% и 100% этанола для 1 минута для фиксации белка. Вкратце, эндогенную активность пероксидазы гасили 3% перекиси водорода в течение 10 минут. Эпизод антиген подвергалось погрузив сползание ткани в 10 мМ цитрата кислоты в кипящей воде в течение 25 минут. Последовательные инкубацию с отдельными первичной antibodyandthe HRP-конъюгированные вторичные антитела были выполнены для индивидуального 1 часа при встряхивании. AEC комплект (Sigma) использовали для окрашивания тканей, и операция с последующим прилагаемую инструкцию. Если коротко, то themixed раствор 2,5 М ацетатного буфера, АЕС хромогенный (3-амино-9ethylcarbazole) и 3% перекиси водорода wasperformed мгновенно и последовательно инкубировали с тканевых slides.The изображения окрашивания слайдов наблюдались и приобретенные под микроскопом (BX51, Olympus) .

анализ статистики
<р> статистическая программа SPSS была выполнена, чтобы вычислить значение согласно Student т
-test и корреляция между GRP78, GSTpi, A1AT, ApoAI и GKN- 1. Significantdifference ( значение р
) была приемлемой как менее чем 0,5.

Результаты

Обнаружение биомаркеров на основе 2D-ПГЛП
<р> анализировали желудочные раковые ткани 2Д-DIGE и по сравнению с парными нормальными тканями, для поиска предполагаемых биомаркеров рака желудка. Отличия proteinexpressions более чем в 1,2 раза были предполагаемые кандидаты. Гель изображение было представление белков местоположения, помеченный Cy-красителями (рис. 1). Пятнадцать белков могут быть идентифицированы, в том числе глюкозы регулируемого белка 78 (GRP78), теплового шока родственной 71 кДа белка (HSC70), белок дисульфид-изомеразы A3 (PDIA3), митохондриального АТФ-синтазы субъединицы бета (ATPB), дисульфид белка изомеразы связанных белков 5 (PDIRP5), gastricsin, глутатион-трансферазы сек пи (GSTpi), аполипопротеина AI (ApoAI), альфа-1-антитрипсина (A1AT) и gastrokine-1 (GKN-1) .В 3 дублированные повторы, некоторые идентичные белки были найдены на разных местах геля и исключены под подозрение в посттрансляционной модификации. Наконец, пять белков, в том числе GRP78, GSTpi, ApoAI, A1AT и GKN-1 были подтверждены и дополнительно подтверждена в качестве предполагаемых маркеров рака желудка. Детальные сравнения по stereopicture и увеличенной геля imageswere показано на рисунке 2.

вестерн-блоттинга и статистический анализ
<р> Twelvepairs тканей от больных раком желудка были использованы в качестве группы проверки. Четыре пациента были стадии I, 3 пациента были II стадия, у 2 пациентов были стадия III, и 3 пациента были стадией IV. Клиническая информация была указана в таблице 1.Five белков (GRP78, GSTpi, ApoAI, A1AT и GKN-1) были подтверждены результатами Western blotting.Amongthe, GRP78 и GSTpiwere significantlyup регулируемой в то время как A1AT была значительно понижающей регуляции в желудочном раковые ткани по сравнению с нормальными тканями (рис. 3) .For GSTpi, nineout из 12 пациентов (75%) было до регулируемых белковых выражений в tumortissues; с другой стороны, 10 из 12 пациентов (83%) имеют понижающей регуляции A1AT белка expression.Regarding взаимосвязь между белковыми выражениями и клинической стадии, GRP78 имеет тенденцию к увеличению с этапа I на сцене IValthough никакой статистической значимости не было обнаружено. Выражение GSTpi и A1AT не коррелировали с клинической стадии (рисунок 4)
<р> Интересно, что белковые выражения GRP78 в этих парах тканей соответствовали у ApoAI (г ^{2:. -0,61, р
&л; 0,01) и A1AT (г 2: -0,49, р
&л; 0,05) (рис 5).. В то же время, экспрессия белка ApoAI коррелировала к тому, что из A1AT (г 2: 0,62, р
&л; 0,01, рис 4.). Результаты показали, что эти три предположительных биомаркеров, GRP78, ApoAI и A1AT, были связаны друг с другом в экспрессии белка. На противоположность этому, GSTpi и ГКН-1, казалось, независимым для экспрессии белка.}

Иммуногистохимия
<р> DespiteGRP78, GSTpi и A1AT будучи statisticallydifferent существенно то, что экспрессивная тенденцией других белков была такой же, как наблюдение в эксперименте 2D-ПГЛП. Иммуногистохимическое был использован для проверки полученных результатов от вестерн-блоттинга эксперимента. GRP78, GSTpi, ApoAI, GKN-1, и A1AT были подтверждены в желудочном раковых тканей и нераковых тканей, как показано в белковых выражений Рисунок 6.the в парах тканей были совместимы с наблюдением в вестерн-блоттинга. В частности, повышающей регуляции белков, GRP78 и GSTpi, были специально расположены на желудочных клеток аденокарциномы. С другой стороны, понижающей регуляции белки, включая ApoAI и A1AT присутствовали на нормальных желудочных желез. Другой вниз регулируется белком, GKN-1, было показано, как тот, который появился на слизистой оболочке желудка ткани.

Обсуждение

Важно иметь биомаркеров для диагностики и последующего наблюдения желудочный cancer.However, карциноэмбриональный антиген (СЕА), углеводный антиген (CA19-9) и CA72-4 не обычно используются в настоящем клиническими практиками исследования, направленного на раскрытие предполагаемых биомаркеров путем сравнения дифференциальных белков между найденными раком и нормальными тканями. После этого эти предполагаемые биомаркеры были исследованы в проверке group.Five предполагаемых белков, в том числе GRP78, GSTpi, ApoAI, A1AT и GKN-1, были идентифицированы с помощью гель-электрофореза два dimensiondifference (2D-ПГЛП), andmatrix-лазерной десорбцией /ионизационно визуализации масс-спектрометрии (MALDI-IMS) и fatherlyvalidated в 12 клинических patients.Among пяти предполагаемых белков, GRP78 и GSTpi были значительно повышающей регуляции и особенно усиливается в раковых клетках с помощью вестерн-блоттинга и контраста immunohistochemistry.In, A1AT wassignificantlydown Регулируют и имели положительный и отрицательная корреляция с выражением ApoAI и GRP78.
<р> Многие предполагаемые биомаркеры рака желудка были предложены в предыдущих уровнях studies.High из GSTpi в карцином желудка было показано в работе [14] были также коррелируют .The выражения GSTpi с желудка stagewhere рака повышен GSTpi werefound в 50% на стадии I или II, и 80% на стадии III или IV больных раком желудка [15] .А предыдущее исследование показало, что GSTpi-положительные пациенты имели меньше пятилетние показатели выживаемости без признаков болезни (49,0%) по сравнению с GSTpi-отрицательных пациентов (75,0%), указали GSTpi был маркером прогностическое значение [16] .В настоящем исследовании, избыточная экспрессия GSTpi в 75% больных раком желудка также demonstrated.However, степень сверхэкспрессии GSTpi не коррелировала с клинической стадии (рис. 4).
<Р> Over-expressionof GRP78 белок также сообщил, как мнимого биомаркера желудочно-кишечного тракта cancers.GRP78 над-выражения могут быть обнаружены и связанной с ними к стадии и прогноза аденокарциномы пищевода [17], и колоректального рака [ ,,,0],18]. Это является одним из клеточных белков реакция на стресс, которые играют важную роль в биологии опухолей, таких как регуляции апоптоза и поддержания внутриклеточного баланса кальция [19], [20]. Было также сообщено, что более-выражения GRP78 методом иммуногистохимии в желудочном образцов рака и метастатических лимфатических узлов были обратно коррелируют с выживаемостью пациентов [21]. Однако методы, используемые в настоящем исследовании, были отличаться от доклада Чжана. Мы исследовали белки-кандидаты с помощью 2D-Dige для разделения дифференциальных белков и MALDI-TOF /TOF для идентификации пептидов в совпавшего рака и нормальным tissues.In нашего исследования, избыточная экспрессия GRP78 увеличивали и имел тенденцию к корреляции с клинической стадии, хотя нет статистическая значимость из-за ограниченности числа случаев
. <р> понижающей регуляции белков может играть важную роль в процессе канцерогенеза. В настоящем исследовании, трех белков, ApoAI, A1AT и GKN-1, были понижающей регуляции в нормальных тканях желудка по сравнению с раком желудка tissues.The отношения ApoAI и рака желудка не сообщалось. ApoAI является одним из основных белковых компонентов холестерина липопротеинов высокой плотности (HDL-C) и играет основную роль в поддержании транспорта холестерина и atheroprotective эффект HDL-C [22] .Apolipoproteins такие как ApoAI могут модулировать липополисахаридом inducedinflammatory ответ в сепсис [23]. В настоящем исследовании, возможно, что снижение ApoAI является отражением хронического воспаления, что является причиной канцерогенеза. Дальнейшее исследование необходимо, чтобы продемонстрировать связь между уменьшением ApoAI и Dys регуляции воспаления
. <Р> Несмотря на то, увеличилась A1AT в начальных стадиях и корреляции с прогрессом желудка стадий рака наблюдалась Bernacka К. и др. [ ,,,0],24], ограниченные данные могли бы пролить свет увеличился A1AT в качестве опухолевого маркера рака желудка. Вместо этого, снижение A1AT при раке желудка было обнаружено в нашем исследовании. A1AT обладает противовоспалительной активностью в лабораторных условиях и способствует подавлению синтеза провоспалительных цитокинов, таких как интерлейкин-8, TNF-альфа, интерлейкина-1 бета [25]. Было сообщено, что генетические факторы, которые влияют на интерлейкин-1-бета может определять фенотип болезни антихеликобактерной инфекции [26]. Вполне возможно, что снижение A1AT подавляет провоспалительного цитокина подавление эффекта. [25]. В нашем исследовании, корреляция между снизился A1AT и ApoA1 предполагалось показатель хронического воспаления.
<Р> Gastrokine-1 (GKN-1), обладающая некоторыми митогенные воздействие на эпителиальные клетки кишечника (IEC-6), снизился -regulated в желудочном опухолевой ткани по сравнению с совпавшего нормальной слизистой оболочки желудка в нашем исследовании. Желудочный восстановление слизистой оболочки после травмы может быть затруднена, если ГКН-1 подавляется [27], [28] .Это было сообщено, что GKN1 связана с апоптотических сигналов, которые имеют важное значение для восстановления тканей при неопластической трансформации [29]. Данные настоящего исследования также предполагает пониженную GKN-1 можно найти в желудочном раковых тканей.
<Р> Метод протеомики на основе для выявления связанных с апоптозом протеинов в раке желудка Ранее сообщалось, Бай Z. и др [ ,,,0],30] .Nevertheless, дифференциальное выражение белки данного исследования не были идентичны докладе Бая предлагая ENO1, GRP78, GRP94, PPIA, PRDX1 и PTEN как потенциальный рак желудка biomarkers.Regarding развитие рака желудка, это сложный процесс, и экспонаты взаимодействия между хозяином, окружающей среды, и бактерии, такие как хеликобактер пилори
.A один фактор или белок не мог быть в состоянии предсказать возникновение и прогрессирование рака желудка. В настоящем исследовании, были признаны дифференцированно выражены в подобранных тканей (опухоли и прилегающей нормальной ткани) пять предполагаемых белков. Два из них (GRP78 и GSTpi) были повышающей регуляции и другие (ApoAI, A1AT и GKN-1) были вниз регулируется. Дальнейшие исследования будут необходимы для выяснения theseproteins asbiomarkers для обнаружения рака желудка.

• PLoS ONE: Снижение Core-фукозилирования Содействует злокачественного рака желудка
• PLoS ONE: MYC Дерегуляция в желудочном рака и его последствия клинико-патологическими