PLoS ONE: Фаза II исследования Оценка 2 схемы дозирования пероральной Foretinib (GSK1363089), CMET /VEGFR2 Ингибитор, у пациентов с метастатическим раком желудка

Абстрактный

Цель
<р> Рецепторы для гепатоцитов и сосудистых факторов роста эндотелия клеток (МЕТ и VEGFR2, соответственно) являются критическими онкогенные посредниками в аденокарциномы желудка. Цель состоит в том, чтобы изучить эффективность и безопасность foretinib, пероральный ингибитор мультикиназный таргетирования MET, RON, AXL, Tie-2 и рецепторы VEGFR2, для лечения метастатической аденокарциномы желудка.

Пациенты и методы <бр>

безопасность Foretinib и переносимость, а частота объективного ответа (ЧОО) оценивали у пациентов с использованием прерывистой (240 мг /сут, в течение 5 дней каждые 2 недели) или ежедневно (80 мг /сут) схемы дозирования. Тридцать обследованных пациентов были необходимы для достижения альфа = 0,10 и бета = 0.2, чтобы проверить гипотезу о том, что альтернативная монотерапия foretinib привело бы к ЧОО на ≥25%. До 10 дополнительных пациентов могли быть зачислены, чтобы обеспечить по меньшей мере восемь с Met
амплификации. Корреляционные исследования включали опухоль Met
усиление, передача сигналов MET, фармакокинетики и плазменные биомаркеры foretinib активности

Результаты
<р> С марта 2007 по октябрь 2009 года 74 пациентов были включены. 74% мужчин; Средний возраст 61 лет (диапазон, 25-88); 93% ранее получали терапию. Лучший ответ был стабильное заболевание (SD) в 10 (23%) пациентов, получающих периодическое дозирование и пять (20%), получающих ежедневную дозировку; Продолжительность SD была 1.9-7.2 месяцев (в среднем 3,2 месяца). Из 67 пациентов с образцов опухолей, 3 имели Met
звукоусиления, один из которых имел SD. Лечение связанных с неблагоприятные события произошли у 91% больных. Темпы гипертензии (35% против 15%), так и при повышенных аспартатаминотрансферазы (23% против 8%) были выше, с прерывистой дозирования. У обоих пациентов с высоким фоновым опухоли фосфо-Met (Pmet), то Pmet: общее соотношение МЕТ белка снизилось с foretinib лечения

Заключение
<р> Эти результаты указывают на то, что лишь немногие желудочных карцином приводятся исключительно. MET и VEGFR2, и подчеркивают разнообразную молекулярную онкогенезу этого заболевания. Несмотря на свидетельства MET ингибирования foretinib, один агент foretinib не хватало эффективности в невыбранных пациентов с метастатическим раком желудка

Пробный регистрации

ClinicalTrials.gov NCT00725712
<р> Citation:. Шах М.А. , Вайнберг З.А., Catenacci ТГВ, Хохстера HS, Ford J, Кунц P и др. (2013) Фаза II исследование, оценивающее 2 схемы дозирования пероральной Foretinib (GSK1363089), CMET /VEGFR2 ингибатора, у пациентов с метастатическим раком желудка. PLoS ONE 8 (3): e54014. DOI: 10.1371 /journal.pone.0054014
<р> Редактор: Хосе Луис Перес-Грасиа, Университетская клиника Наварры, Испания
<р> Поступило: 2 июля 2012 года; Принято: 5 декабря 2012 года; Опубликовано: 14 марта 2013
<р> Copyright: © 2013 Шах и др. Это статья с открытым доступом распространяется в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution, которая позволяет неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, что оригинальный автор и источник кредитуются
<р> Финансирование:. Финансирование для это исследование было предоставлено GlaxoSmithKline. Доноры были глубоко вовлечены в дизайн исследования, сбор данных и анализ. У них не было никакой роли в принятии решения о публикации, но они были вовлечены в подготовке рукописи
<р> Конкурирующие интересы:. Доктор Kallender, доктор Мартин, доктор Y. Liu, доктор Ганьон д-р Л. Лю, Д-р Джилмер являются сотрудниками, и имеют доли в GlaxoSmithKline. Доктор Кир является сотрудником FivePrime Therapeutics Inc. с долей участия в Exelixis. Редакционная поддержка в виде разработки проекта плана, разработка рукописи первого проекта, монтажных таблиц и рисунков, листоподборочные комментарии автора, техническое редактирование и привязка была предоставлена ​​Энн Шервуда, кандидат Connexion Healthcare, Ньютаун, штат Пенсильвания, и МЕДИТЕК Media, Манчестер , Великобритания, и финансировалось GlaxoSmithKline. Там нет патентов, продукты в разработке или реализуемой продукции, чтобы объявить. Это не меняет приверженность авторов на всех политик PLoS ONE на данных и материалов обмена, как подробно на сайте в руководстве для авторов.

Введение
<р> Рак желудка (GC) является четвертым наиболее распространенным видом рака во всем мире [1], [2], по оценкам, 990000 новых случаев заболевания и 730,000 смертей ежегодно происходят [3], несмотря на свою распространенность, разработки лекарственных средств для GC отстает от прогресса, наблюдаемого в других злокачественных опухолей [4], с медианой выживание и ЛТ; 1 год для поздних стадиях заболевания [5]. Недавний успех в ориентации человеческого эпидермального фактора роста рецептора 2 (HER2) в GC [6] дает надежду таким же успехом с другими молекулярными мишенями.

рецепторные тирозинкиназы (RTK) MET и сосудистого рецептора фактора роста эндотелия сосудов 2 ( VEGFR2 /КДР) появляются терапевтические мишени в аденокарциномы желудка. МЕТ, рецептор фактора роста гепатоцитов (HGF), является главным медиатором роста опухолевых клеток, выживание и моторики [7]. Met
усиление было продемонстрировано в 5-23% первичных опухолей желудка [8] - [14] и связано с плохим прогнозом [8], [9], [14]. В строках GC клеток, Met
усиление связано с наличием однородных областей окрашивания, что указывает на усиление целевого и предполагая уязвимость к МЕТ торможения [15]. Активирующий Met
мутация в GC также сообщалось [16]. МЕТ белок избыточная экспрессия коррелирует с увеличением глубины опухолевой инвазии и метастазирования потенциала [17], [18]. VEGFR2 опосредует миграцию эндотелиальных клеток, пролиферацию и выживание [19], [20], и МЭТ и VEGFR2 работа совместно продвигать неоангиогенез [20]. RON, A MET связанных с РТК, недавно была найдена высоко выражена у 74% GC опухолей [14]. MET была высоко выражена у 43% РОН-экспрессирующих опухолей и коэкспрессией прогнозировала хуже общей выживаемости (OS), чем избыточная экспрессия RON в одиночку [14].
<Р> Foretinib является пероральным, малые молекулы мультикиназный ингибитор, который нацелен на MET, RON, AXL, Tie-2 и VEGFR2 рецепторов с высоким в пробирке
сродством [21], [22]. Foretinib связывает глубоко в аденозинтрифосфата карман своих целей, что приводит к конформационным изменениям и киназы торможения [20], [21]. В доклинических исследованиях foretinib заторможенной пролиферации опухолевых клеток, инвазию и ангиогенез опухоли [20], [21]. В оценке фазы I, пероральное foretinib 240 мг ежедневно в течение 5 дней каждого 2-недельного цикла (прерывистое введение) и 80 мг ежедневно (непрерывное дозирование) хорошо переносилась и показала предварительные данные о противоопухолевой активности у пациентов с солидными опухолями [23 ], [24]. Фармакодинамика (PD) исследования, проведенные на образцах биопсии опухоли последовательного у трех пациентов, получавших прерывистый дозы foretinib также выявили снижение АКТ и ERK фосфорилирования следующие foretinib дозирования [23]. Данные из одной фазы II и одной фазы I /II исследования показали наличие регрессии опухоли у пациентов с папиллярной карциномы почек [25], [26], и гепатоцеллюлярной карциномы [27], соответственно. Foretinib в целом хорошо переносится в этих популяциях.
<Р> На основании опубликованных данных об онкогенных MET и VEGFR2 сигнализации в GC, и ингибирование затрагивающего пути MET в фазе I foretinib оценки, мы исследовали безопасность и эффективность монотерапии foretinib в лечение, ранее получавших терапию метастатической аденокарциномы желудка. Мы дополнительно проанализировали связь между фармакокинетики (PK) и профили PD и противоопухолевой эффективности, а также по сравнению безопасности и эффективности для прерывистой по сравнению с ежедневными режимов дозирования. В качестве коррелятивных целей, мы оценивали Met
усиление и MET ориентации с foretinib в пожилом GC.

Пациенты и методы
<р> Протокол для этого исследования и поддержки КОНСОРТ Контрольный список доступны как Вспомогательная информация; см Контрольный список S1 и протокол S1.

Пациенты
<р> Это исследование было выполнено в соответствии с надлежащей клинической практике и следовали применимым требованиям пациента неприкосновенность частной жизни и Декларацию Хельсинки. Протокол исследования был одобрен медицинскими этическими комитетами всех участвующих в учреждения, и пациенты дали письменное информированное согласие до участия. Список всех участвующих учреждений и их комитетов по медицинской этике содержится в Приложении S1.
<Р> изначальных прав пациента (март 2007 г.) включали гистологически подтвержденный, слабо дифференцированы, распространенным или метастатическим аденокарциномы желудка, в том числе перстень клеток GC и не -squamous, не-саркоматозный опухолей желудочно-пищеводного соединения (GEJ). В апреле 2008 года, протокол исследования был изменен, чтобы включить пациентов с умеренно и хорошо дифференцированным желудка /желудочно-пищеводного соединения опухолей и пациентов с дистальной аденокарциномы пищевода. Пациенты должны были иметь измеримое заболевание каждого Критерии оценки ответа солидных опухолей (RECIST) (версия 1.0) [28], Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) общее состояние 0-2 и адекватной почек, печени, гематологические и функции коры надпочечников. Лица с известными метастазов в головной мозг, или более трех линий предварительного цитотоксической химиотерапии местно-распространенного или метастатического заболевания были исключены.

Дизайн исследования и лечение
<р> Это было однорукавная, многоцентровое, этап II исследования по изучению последовательно два режима дозирования устного foretinib бисфосфат (далее именуемый foretinib): прерывистый (240 мг /сут в течение 5 дней подряд через каждые 2 недели) и суточной дозы (80 мг /сут в течение каждого 2-недельного цикла). Ежедневный прием дозирования когорты началось после регистрации в прерывистой когорты дозирования была завершена. Лабораторные оценки и медицинские осмотры проводились перед каждым 2-недельного цикла дозирования для обеих когорт, и опухоли оценивали через 8 недель лечения и примерно каждые 8 ​​недель после этого. Оценка безопасности были запланированы 30, 90 и 180 дней после последней дозы foretinib.

Эффективность Меры Результата
<р> Результаты первичной эффективности была частота объективного ответа (ЧОО) определяется как доля субъектов, для которых лучший объективный ответ был подтвержден полный ответ или подтвердил частичный ответ на RECIST [28]. Вторичные измерения эффективности были выживаемость без прогрессирования (ВБП), уровень стабилизации заболевания, продолжительность стабилизации заболевания (SD) и ОС.

Безопасность Меры Результата
<р> Токсичность оценка нежелательных явлений (НЯ) и лабораторные переменные были определены в соответствии с критериями Национального института рака общей терминологии для неблагоприятных событий (CTCAE) версии 3.0.

корреляционных исследований
<р> соотносительные целями было оценить Met
амплификации гена в ГХ, чтобы определить реакцию на foretinib опухолей, несущих Met
усиление, для оценки foretinib ориентации МЕТ и для оценки потенциальных плазменных биомаркеров foretinib активности. Анализ Met
усиление при 7q31 проводили на архивных или недавно подготовленных залитых парафином опухолевых биопсий с помощью флуоресцентного Ситу
гибридизации в (FISH) анализа (CarisDX, Феникс, Аризона). Полисомию был дифференцирован от амплификации гена с использованием соотношения ≥2 для среднего число копий MET
и КООС 7 (хромосома 7 центромерная маркер). PD маркеры клинической активности (например, фосфорно-МЕТ [Pmet]) были оценены в парных образцах свежей биопсии опухоли, собранных на исходном уровне и через 5-8 дней после начала лечения foretinib в ежедневной когорты.
<Р> Плазменные уровни PK растворимого МЕТ (Смет), HGF, растворимый VEGFR2 (sVEGFR2) и VEGF-A оценивали с использованием электрохемилюминесцентных двухузельного иммунологические (мезо Scale Discovery, Gaithersburg, MD). Образцы плазмы анализировали на foretinib с использованием аналитического метода основан на экстракции жидкость-жидкость, а затем с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии /тандемной масс-спектрометрического анализа.

MKN-45 желудочные исследования карциномы ксенотрансплантатов человека.
<Р> Женский бестимусных голых мышей были помещены в научно-исследовательском центре Пьемонта в соответствии с рекомендациями Руководства NIH по уходу и использованию лабораторных животных.
<р> Ксенотрансплантаты были созданы путем подкожной имплантации 1 × 10 7 MKN- 45 клетки суспендировали в 50% Матригель в правые фланги испытуемых мышей. Объемы опухолей рассчитывали, используя уравнение (Д × Ш 2) /2, где л и ш относятся к больших и малых размеров, полученных из измерений штангенциркулем в указанные дни после имплантации. Для исследования эффективности, лечение началось, когда группа означают объем опухоли достиг ~180 мм 3. Транспортное средство для foretinib составляет 1% гидроксипропилметилцеллюлозы (от низкого класса вязкости, Е3): 0,2% ЛСН (лаурилсульфат натрия, ВЭЖХ): 98,8% воды. Мыши, несущие MKN-45 опухоли желудка (п = 10 на группу) обрабатывали носителем или foretinib один раз в сутки (QD) в течение 21 дней при дозе 6 мг /кг или 10 мг /кг, или 30 мг /кг через день ( Q2D) в течение 42 дней или не лечить. Крускала-Уоллиса с ретроспективном статистического теста Данна было выполнено
<р> * P
&л;. 0,05 считали значимым
<р> Для Pmet /MET и ПК анализирует, обнаженном виде. мышей с MKN-45 опухолей измерения от 200 до 300 мм 3 в размере получили транспортное средство, foretinib или Pazopanib перорально один раз в день в течение 3-х дней. Foretinib количественно оценивали с помощью ВЭЖХ-МС /МС в образцах плазмы, собранных в течение 24-часового периода отбора проб после трех последовательных ежедневных доз. Опухоли собирали 1, 2, 4, 8 или 24 ч после последнего приема препарата. Фосфорилирование MET в MKN-45 опухолей определяли с помощью иммунопреципитации с анти-МЕТ-антителом (Cell Signalingĸ7), а затем с помощью иммуноблоттинга с антителом против фосфотирозина (Sigma # P5872) и, параллельно, с анти-Met антитела (Invitrogen-2257). Изображения были визуализированы и количественно как на 700 и 800 каналов, используя LI-COR Odyssey ИК-изображений. Образцы были также проанализированы с использованием двух сайтов электрохемилюминесцентных иммунологических для полного МЕТ и Pmet. Данные были проанализированы статистически с двусторонним Т-тест, где P &
ЛТ; 0,01 считается значительным

Плазма Отбор проб Расписание для Смет, HGF, sVEGFR2 и VEGF-A <суб> 165..
<р> Для пациентов, получающих периодическое дозирование, образцы плазмы собирали предварительной дозы и через 4 часа после дозирования в дни 1, 5, 43 и 47, и пре-дозу только в дни 15 и 29. Для пациентов в ежедневной дозирования когорты, образцы плазмы собирали перед введением дозы и через 4 часа после введения дозы в дни 1, 8 и 15, и перед введением дозы только в дни 29 и 43. образец 1 неделю до дозы рассматривалась базовая линия для обеих когортах.

FISH.
<р> Шестьдесят ядер были проанализированы с помощью FISH с использованием БАК бактериальной искусственной хромосомы зонд, содержащий все Met
ген (обозначенный красным Cy3) и центромеры 7 конкретных зонд, CEP7 (метили SpectrumGreen), от молекулярной профилированию института, ныне CarisDx (Феникс, Аризона). Клетки анализировали с как минимум из двух разных областей метастатических опухолей образца. Met
амплификации определяется следующим образом: отношение по крайней мере 2 для среднего число копий MET
и CEP7 по крайней мере, 60 клеток или любых клеток, содержащих множественные копии MET
гена в гомогенного окрашивания областей, выполненных Caris Dx (Феникс, Аризона).

Met Функциональный анализ.
<р> Prometheus Laboratories (San Diego, CA) выполняется функциональное профилирование MET. Белковые лизаты были приготовлены в соответствии со стандартной рабочей процедуре Прометее. Если коротко, то каждый образец опухоли обрабатывали 10-кратным объемом "Протеин позже" буфера для лизиса, с последующей гомогенизацией ткани. Супернатанты собирали после центрифугирования гомогената ткани при 16000 оборотах в минуту в течение 15 минут при 4 ° С. Концентрации белка определяли с помощью ВСА анализа. Белковые лизаты аликвоты и хранили при -70 ° С перед COPIA анализа. МЕТ активации и экспрессии были профилированные использованием COPIA, мультиплексированный, близость на основе совместной работы, иммунологического платформы (COPIA, Prometheus Laboratories, San Diego, CA). оценка Иммуногистология проводили с использованием секций, изготовленных из доступных ОКТ срезах тканей.

фармакодинамические биомаркеров анализы.
<р> электрохемилюминесцентные двухузельного иммунологические для HGF и SMET были разработаны с использованием коммерчески доступных реагентов, как описано ранее ( Атауды и др., 2006). Аналитические наборы для подобного анализа плазменных уровней sVEGFR2 и VEGF были получены от мезо Scale Discovery (Gaithersburg, MD). -A VEGF система анализа использовали распознает VEGF-A изоформ 165 и 121 с сопоставимой аффинностью; он не признает VEGF членов семьи PlGF или VEGF-D. Признание VEGF-B или -C не определен. Стандартные кривые, изготовленные с использованием очищенных рекомбинантных белков были включены в каждый 96-луночный планшет, и все анализы имели общий коэффициент вариации &л, 10%. Все образцы и стандарты были проанализированы в трех экземплярах. Исходные данные были обработаны и проанализированы с помощью Microsoft Excel (2008 для Mac) и GraphPad Prism (V5.0) пакетов программного обеспечения.

Статистический анализ
<р> Для каждого дозирования графика, исследование было приведено в действие для альтернативная гипотеза, что Орр с foretinib бы по меньшей мере на 25% по отношению к нулевой гипотезе, что составляет менее 10% (H <югу> 0: р <суб> o≤0.10 против р <к югу> a≥0.25). Для достижения частоты ошибок типа I меньше, чем 0,10, и по меньшей мере на 80% мощности, зачисление 30 обследованных пациентов было запланировано в каждой группе. Размер выборки был основан на биномиальном расчета распределения точных вероятностей для коэффициентов ошибок при нулевой и альтернативных гипотез. Если меньше, чем восемь из обследованных пациентов имели Met
-amplified опухоли, до 10 дополнительных обследованных пациентов могли быть зачислены в общей сложности 40 пациентов.
<Р> Население безопасности были включены все пациенты, которые получили ≥1 дозы препарата. Конечные точки эффективности были проанализированы у пациентов, у которых была исходная и после исходного опухоли оценки, и получили ≥75% доз в протокольных утвержденных в течение первых 8 недель лечения, или которые, до завершения первых 8 недель, прекратившие foretinib из-за к связанной с наркотиками токсичности или прогрессирования заболевания.
<р> число (%) пациентов с объективным ответом и SD была обобщена в том числе 95% доверительный интервал. Время до момента наступления событий конечных точек, в том числе 95% доверительный интервал, суммировали с использованием методов Каплана-Мейера.
<Р> Корреляционный анализ включал корреляцию foretinib воздействия с мерами безопасности и эффективности. Foretinib экспозиции определяли как концентрацию предварительной дозы в день 5 для прерывистого когорты и концентрации корыта на 15-й день для ежедневной когорте. Прочный логистический регрессионный анализ с использованием ММ-оценки и последующего моделирования методом Монте-Карло были использованы для оценки взаимосвязи между foretinib воздействием и процентное изменение размера опухоли в надир. Поскольку моменты времени выборки PK представляют различные меры воздействия для каждого режима дозирования, анализы эффективности были проведены отдельно для каждого режима.
<Р> Для плазменных уровней Смет, sVEGFR2, VEGFA и HGF, маркер базового уровня и изменений от исходного уровня были проанализированы в каждый момент времени с помощью дисперсионного анализа и их взаимоотношений с концентрацией в плазме foretinib и клиническим исходом (сумма наибольшего диаметра [SLD], PFS и ответ RECIST) были исследованы с помощью анализа Спирмена. Корреляция между плазмы PD, дозирования и концентрации в плазме foretinib и выживаемости без прогрессирования заболевания и ответов RECIST, соответственно, были протестированы с использованием пропорциональных рисков и логистической регрессии.

Результаты

Пациенты
<р> Из марта 2007 года октябрь 2009 года 74 пациентов были включены с 15 участвующих центров США: 48 в пульсирующем когорты дозирования и 26 в суточной когорты дозирования (рисунок 1). Демографические и исходные характеристики пациентов представлены в таблице 1. Шестьдесят девять пациентов (44 в пульсирующем когорты, 25 в ежедневной когорты) были оценены на эффективность. Обратите внимание, что заявки на участие в ежедневной когорте остановилась, когда стало очевидно, что Первичной конечной точкой эффективности не будет достигнута, и что зачисление 10 дополнительных пациентов, не даст значительное количество метформин
усиленных пациентов.
<р> большинство пациентов были мужчины, белый неиспаноязычных, с плохо дифференцированной опухоли (одна треть Лорен диффузный гистологии). Девяносто три процента пациентов, ранее были обработаны; среднее число предшествующих противораковых терапии составляла 1, диапазон (1-3), чаще всего в том числе фторпиримидином (96%), платины (84%) или доцетакселом (46%). Три пациента имели Met
амплификации гена и еще 22% увеличилось число копий из-за полисомию.

Эффективность
<р> Как показано в таблице 2, ни один пациент в каждой группе не достигнуто полный или частичный ответ. Десять (23%) обследованных пациентов в пульсирующем когорты и пять (20%) обследованных пациентов в ежедневной группе имели лучший результат SD. Продолжительность SD (рис S2A в файле S1) колебалась от 1,91 до 7,16 месяцев, средней продолжительностью 3,2 месяца. Водопад участок для ответа (рис 2) свидетельствует о скромную активность наблюдается с одним агентом foretinib в предварительно обработанную или метастатическим GC.
<Р> Там не было никаких опухолевых реакций в трех пациентов с Met
гена усиление; один пациент опытный SD (2,1 месяцев). Второй Met
-amplified пациент не был оцениваемого для ответа опухоли, будучи прекращено foretinib из-за повышенной аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ), прежде чем была выполнена оценка опухоли. Третий Met
-amplified пациент имел прогрессирующее заболевание. Все три пациента находились в прерывистой когорте. По оценкам, средний показатель ВБП составила 1,7 месяца (95% ДИ: 1,6-1,8 месяцев) общий (1,6 месяца в пульсирующем когорты, 1,8 месяца в суточной когорты). По оценкам, медиана ОВ 7,4 месяцев с перерывами дозирования и 4,3 месяца с суточной дозы (рис. S2b в файле S1).

Безопасность

В таблице 3 приведены, связанных с лечением НЯ сообщили в ≥10% субъектов в целом. Периодическое когорты продемонстрировали более высокую частоту гипертензии, диареи и АЛТ и АСТ возвышений по сравнению с ежедневным когорте. Большинство НЯ, связанных с лечением были легкой степени тяжести (<, категория 3). Десять случаев смерти произошли во время лечения или в течение 30 дней после последней дозы foretinib; Восемь пациентов умерли вследствие прогрессирования заболевания, у одного пациента с предварительным заболеванием сердца умер от остановки сердца считается не связаны с foretinib, и считался один пациент смерть без ясной причины, возможно, связано с foretinib. Этот пациент был найден у себя дома, так и причиной смерти не была установлена.

PK и PD
<р> исследования ксенотрансплантата мышей с использованием человеческого GC-производный Met
-amplified клеточная линия MKN-45 показал дозозависимое блокаду роста опухоли, которая совпала со значительным, долговечны ингибирование уровней опухоли Pmet (рис S1 в File S1). Отношения между foretinib PK (т.е. образцов впадина) и размера опухоли для каждой группы показана на рис S3 в файле S1. Спаренные образцы биопсии опухоли были собраны исходно и через 5 до 8 дней после начала лечения foretinib в заключительных девяти пациентов, включенных в ежедневную когорте. Пять пациентов были парные образцы биопсии ткани адекватные для анализа активации MET (Pmet /общая MET) и ингибирование затрагивающего пути MET. Из этих пяти, два имели высокие уровни Pmet исходно, которые были значительно сокращены после лечения foretinib (&К раствору 5-кратное уменьшение Pmet /общее соотношение MET). Несмотря на это, оба пациента имели прогрессирующее заболевание при их первой проверке по лечению.
<Р> Для дальнейшей оценки foretinib активности, плазменные уровни Смет, HGF, sVEGFR2 и VEGF-A были измерены в исходном состоянии и во время лечения. Медиана концентрации Смет, sVEGFR2 и VEGF-A значительно изменились по сравнению с первым интервалом дозирования в пульсирующем когорте (рис 3 и в таблице S1 в файле S1). Медиана SMET и уровни VEGF-A коррелирует с увеличением плазменной foretinib (рис. 2А, В и С), в то время как средний показатель sVEGFR2 (рис. 2D) уменьшились в течение этого интервала. Средние уровни Смет и VEGF-A в пульсирующем когорте снизилась за последующего 9-дневного отпуска лекарственных средств (данные не показаны), что указывает на краткосрочный эффект foretinib. Средние уровни HGF также увеличилась в течение периодов дозирования и снижение во время лечения праздников, но значительно выросли только за период от исходного уровня до 47 дня ( P
&л; 0,0009). В противоположность этому, циркулирующие уровни sVEGFR2 устойчиво и значительно уменьшились в течение периода 47 дней ( P
&л; 0,0001). Плазменная концентрации этих маркеров не коррелировали с ответом RECIST; Тем не менее, наблюдались скромные, но значимые корреляции между распространенностью опухоли на 8-й неделе (SLD) и уровень Смет (Спирмена R
= 0,5441, P
= 0,0049), а-А уровень VEGF (Спирмен R
= 0,6216, P
= 0,0012), соответственно (Рисунок 4).

Обсуждение
<р> GC является агрессивной и широко распространенным заболеванием, для которого новый крайне необходимы методы лечения. Мы исследовали эффективность монотерапии foretinib, новый пероральный ингибитор MET, RON, AXL, Tie-2 и VEGF2R RTKs, у пациентов, ранее получавших метастатического ГХ. В качестве первой клинической оценки MET торможения в GC, важные выводы из этого исследования. Мы покажем, что ориентированные на пути MET может быть безопасным и хорошо переносимым у пациентов с прогрессирующим заболеванием. Наиболее распространенными foretinib-НЯ (усталость, артериальная гипертензия и желудочно-кишечные проблемы) были легко управляемы. Наиболее распространенные foretinib связанные лаборатории патологии (повышенный уровень АЛТ и АСТ) были бессимптомно. Гипертензия, доза ограничивающими АЕ для foretinib, как полагают, является результатом его активности анти-VEGFR. Минимальная активность противоопухолевый была замечена с одним агентом foretinib, несмотря на свидетельства поражения цели и доказательства ткани-мишени торможения.
<Р> Два дозирующих когорты показали сходные профили безопасности. Там, где эти условия отличаются, частота нежелательных явлений была в целом ниже, в суточную по сравнению с прерывистым когорте. Хотя оба когорты продемонстрировали свидетельства ингибирования затрагивающего пути, и не продемонстрировали значительную противоопухолевую активность. ОС численно улучшена в прерывистом когорты по сравнению с ежедневной когорте. Причина этого не ясна, но популяции пациентов отличались и число пациентов в ежедневной группе была невелика.
<Р> Заметим, что менее 5% пациентов в нашем исследовании выставлены MET
амплификации. Это ниже, чем оценки частоты на 5% до 23% сообщили, что ранее для опухолевых образцов GC [8] - [14]. В противоположность этому, увеличение Met
числа копий гена в связи с полисомию 7 (т.е. ≥3 Met
копии генов через 60 клеточных ядер рыбы) имели место в 27% исследуемой популяции. Наши данные согласуются с другой недавней оценки Met
амплификации гена в локализованной GC [29] и предсказывают, что низкий процент ШС приводятся в движение Met
амплификации гена.
<Р> минимальная эффективность наблюдается при foretinib несмотря на PK и PD доказательства целевого торможения дополнительно предполагает, что передача сигналов MET не может иметь решающее значение в большинстве случаев GC без Met
амплификации. Дозирование графики и уровни сыворотки foretinib в этом исследовании, были аналогичны тем, которые наблюдаются в фазе II испытании foretinib для лечения папиллярной почечно-клеточного рака, где сообщается об эффективности монотерапии foretinib [30] (и Д. Bottaro, личное сообщение ), предполагая, что концентрации сыворотки, необходимых для адекватного ингибирования foretinib цели РТК были достигнуты. PD данные свидетельствуют о том, что foretinib действительно ингибируют MET фосфорилирования и вниз по течению сигнализации у пациентов с исходно высоким MET фосфорилирования. Отсутствие ответа опухоли у этих больных, так и в небольшом количестве пациентов с метформин
усиленных опухолей позволяет предположить, что опухоли желудка зависит от онкогенных, кроме или в дополнение к, MET сигнальных путей.
<Р> Армирование этот вывод, во время дозирования периодов в прерывистой дозирования группы, в соответствии с сообщенной "эффект класса" малых молекул-ингибиторов VEGFR [31], [32] наблюдались быстрые и значительное увеличение плазменной концентрации VEGF-A. Эти изменения плазмы VEGF указывают на системную реакцию на лекарства и происходит максимально в дозах, обеспечивающих оптимальный охват целевой киназы [32], [33]. Тот факт, что foretinib ингибирует MET и VEGFR с подобной активностью, и что мы наблюдали аналогичное изменение PD в Смет, далее предполагает, что адекватные уровни ингибирующих МЕТ foretinib были достигнуты. Кроме того, увеличение VEGF-A и SMET достоверно коррелирует с распространенностью опухоли (рис. 3), что свидетельствует о том, что изменения в этих маркеров PD отражают опухолеассоциированному foretinib торможения. Существенное отрицательное модулирование плазменных уровней sVEGFR2 также согласуется с предварительного клинического исследования с ингибитором VEGFR, демонстрирующих противоопухолевой активностью [33]. Таким образом, значительные изменения в плазме VEGF-A, Смет и sVEGFR2 здесь наблюдается согласуются с поражения целевой киназы и торможения. Поскольку средний опухоль SLD не изменялась в течение исследования, остается неясным, были ли связаны между собой долгосрочные изменения, наблюдаемые для маркера Смет, VEGF-A и sVEGFR2, в частности, к опухолевой. Значимая корреляция между 8-й недели SLD опухоли и Смет или уровни VEGF-A может предложить такие отношения и требует дальнейшего изучения.
<Р> Также возможно, что передача сигналов онкогенными MET в GC является динамическим и что ингибирование МЕТ может быть преодолен путем активации других сигнальных путей. Например, активация HER-киназы было продемонстрировано, чтобы преодолеть MET ингибирование тирозинкиназы в Met
онкоген пристрастившихся GC доклинических моделях [34]. И наоборот, подавление EGFR, могут быть преодолены путем активации пути через MET <ЕМ>
усиление встретились [35], предполагая, что эти пути могут избыточно активировать АКТ и способствовать выживанию клеток. HER2 избыточно экспрессируется или усиливается в 20% опухолей желудка и является предиктором трастузумаба эффективности [6], предполагая, что это может обеспечить путь к выживанию опухолевых клеток, что ингибирование MET обходит в значительной части пациентов с GC. Для того, чтобы оценить потенциальные механизмы устойчивости, Cepero и др. подвергаются опухолевые клетки человека, которые были "Мет-зависимым" для возрастающих концентраций двух различных ингибиторов MET [36]. Клетки, которые выработали резистентность к этим препаратам, приобретенных Met
усиление и последующая избыточная экспрессия дикого типа KRAS
, предполагая, что эти изменения могут представлять собой общий механизм сопротивления [36]. Foretinib может быть более эффективным при введении на более ранней стадии заболевания ингибировать инвазию и метастазирование известные доклинические эффекты foretinib.
<Р> Таким образом, это первое исследование, чтобы оценить MET, RON, AXL, Tie-2 и VEGFR2 ингибирование в GC. Монотерапия foretinib показал минимальную противоопухолевую активность в этом неотобранной, предварительно обработанную, или метастатическим GC населения. Даже у пациентов, которые были метформин
усиливается или показали повышенную Pmet и доказательства ингибирования на образцах биопсии лечения, монотерапия foretinib не было связано со значительным регрессию опухоли. Будущие клинические исследования таргетирование МЕТ в опухолях желудка следует рассмотреть вопрос о обогащают популяцию пациентов для тех с Met
усиления и доказательства активации пути. Рисунок S1. Рисунок S3.

• PLoS ONE: Ориентация CDH17 Подавляет Опухоль прогрессия рака желудка по Downregulating Wnt /-катенин Signaling
• PLoS ONE: Casticin потенцирует TRAIL-индуцированный апоптоз клеток рака желудка через эндоплазматический ретикулум Stre…