Ploche ONE: Znížená galektinu-9 a Zvýšená Tim-3 Expression súvisia s zlou prognózou u rakoviny žalúdka

Abstract

Úvod

galektinu-9 (Gal-9) indukuje adhéziu a agregáciu niektorých typov buniek a inhibuje metastázovaniu nádorových buniek. T-bunky molekula domain-3-obsahujúce imunoglobulínu a mucín 3 (TIM-3) hrá kľúčovú úlohu v imunitnej regulácie. Cieľom tejto štúdie je preskúmať Gal-9 a Tim-3 zmeny v rakoviny žalúdka a ich prognostické hodnoty.

Metódy

Gal-9 a Tim-3 expresia bola hodnotená za použitia tkanív microarray spôsob imunohistochémia v 305 karcinómov žalúdka, z ktorých 84 bolo spárovaných priľahlej normálne vzorky. Bunkové línie SGC-7901, BGC-823, MGC-803, MKN45 a boli tiež zafarbené GES-1. Korelácia bola analyzovaná medzi jednotlivými úrovňami expresie Gal-9 a Tim-3 proteín a nádorové parametre alebo klinickými výsledkami.

Výsledky

Gal-9 a Tim-3 zafarbia pozitívnych na nádorové bunky v 86,2% (263/305), a 60,0% (183/305) u pacientov s karcinómom žalúdka, resp. Gal-9 expresie bola v rakovine významne vyššia ako u normálnej sliznice ( P Hotel &0,001). Znížená Gal-9 expresie bola spojená s lymfatickým-cievne invázie, lymfatických uzlín, vzdialené metastázy a horšie TNM stagingu ( P
= 0,034, P
= 0,009, P
= 0,002 a P
= 0,043, v danom poradí). Na rozdiel od toho Tim-3 expresie bola v rakovine významne nižšie ako v kontrolnej sliznici ( P Hotel &0,001). Pacienti s lymfatických-vaskulárne invázie mali vyššie hladiny expresie Tim-3 ( P Hotel &0,001). Okrem toho, viacrozmerné analýza ukazuje, že oba high Gal-9 expresie a nízka expresie Tim-3 boli významne spojené s dlhým celkovým prežitím ( P
= 0,002, P
= 0,010, respektíve); Kombinácia Gal-9 a Tim-3 prejavu bol nezávislým prognostickým ukazovateľom pre pacientov s rakovinou žalúdka (RR: 0,43; 95% CI: 0,20-0,93). H. pylori
zdravotný stav nebol spojený s Gal-9 a Tim-3 výrazu ( P
= 0,102, P
= 0,565).

Záver

výsledky naznačujú, že expresia Gal-9 a Tim-3 v nádorových bunkách môže byť potenciálnym, nezávislý prognostický faktor u pacientov s karcinómom žalúdka. Gal-9 a TIM-3 môžu hrať dôležitú úlohu v žalúdočnej karcinogenéze

Citácia :. Jiang J, Jin M-S, F Kong, Cao D, Ma H-X, Jia Z a kol. (2013) Znížená galektinu-9 a Zvýšená Tim-3 Expression sú vztiahnuté k zlou prognózou rakoviny žalúdka. PLoS ONE 8 (12): e81799. doi: 10,1371 /journal.pone.0081799

Editor: Pierre Busson, Ústav Cancerology Gustave Roussy, Francúzsko

prijatá: 06.01.2013; Prijaté: 26.októbra 2013; Uverejnené: 10.12.2013

Copyright: © 2013 Jiang et al. Toto je článok o otvorený prístup distribuovaný pod podmienkami Creative Commons Attribution licencie, ktorá umožňuje neobmedzené použitie, distribúciu a reprodukciu v nejakom médiu, za predpokladu, že pôvodný autor a zdroj sú pripísané

Financovanie :. Táto štúdia bol podporený národná prírodná Science Foundation Číny (81072369 a 81273065). Platcovia mal žiadnu úlohu v dizajne štúdie, zber a analýzu dát, rozhodnutie publikovať, alebo prípravu rukopisu

Konkurenčné záujmy: .. Autori vyhlásili, že žiadne konkurenčné záujmy neexistujú

Úvod

karcinóm žalúdka zostáva štvrtý najčastejšie diagnostikovaná rakovina a je druhou najčastejšou príčinou úmrtí na rakovinu súvisiace celom svete [1]. Galektiny sú skupina proteínov, ktoré sa viažu beta-galaktosidov cez evolučne konzervovaných sekvencií prvky domény rozpoznávania uhľohydrátov (CRD) [2], [3]. Rodina galektinu prispieva k nádorovej transformácie, prežitie nádorových buniek, tkanív invázie a metastáz z niekoľkých typov rakoviny, vrátane rakoviny žalúdka [4]. Predchádzajúce štúdie ukázali, že hladina expresie galektinu-3, bol významne vyšší v žalúdočných karcinómov v porovnaní s priľahlou normálnou tkanív. Galektinu-3 a galektinu-4 môžu byť užitočné nádorových markerov pre karcinómov žalúdka, pokiaľ ide o progresie nádoru a potenciálnosti metastáz do lymfatických uzlín, najmä v niektorých histologických typov rakoviny žalúdka [5], [6]. Galektinu-9 (Gal-9) je novým členom rodiny proteínov galektinu [7]. V posledných rokoch významnú úlohu sa objavil na Gal-9 v zdraví a chorobe [8]. V fyziológie, Gal-9 sa zdá byť rozhodujúce modulátor T-bunkovej imunity indukciou apoptózy v špecifických subpopulácií T-buniek. Vzhľadom k tomu, tieto populácie T-buniek sú spojené s autoimunity, zápalových ochorení a odmietnutia transplantátu, bolo nastolila, že aplikácia exogénneho Gal-9 môžu obmedziť patogénne T-bunkovej aktivity [9], [10]. Okrem toho, Gal-9 je lokalizovaná v cytoplazme a na bunkovom povrchu buniek a zdá sa byť prepustený z nádorových buniek [11]. U solídnych nádorov, dostupné štúdie naznačujú, že Gal-9 má funkciu tlmiacich nádory, so stratou Gal-9 je úzko spojená so zvýšenou metastáz a vysokú recidívy [12], [13], [14], [15]. Kadowaki et al tiež ukázala, že Gal-9 signalizácia môže predĺžiť prežitie indukciou makrofágy diferencovať do plasmacytoidní dendritické bunky, makrofágy, ako na myšiam modeli karcinómu pľúc [16]. Tieto údaje predstavil, že Gal-9 môže byť možný prognostický faktor s anti-metastatického potenciálu. Avšak, expresia Gal-9 nebol doteraz skúmaný u karcinómu žalúdka.

T-buniek immunoglobulin- a mucín molekulu doménu-3-on, ktorá obsahuje 3 (Tim-3) je pomocné T-bunky typu 1 (Th1) -specifické povrchová molekula, bunka, ktorá sa zdá k regulácii odpovedi Th1 a navodenie periférne tolerancie [17], [18]. V poslednej dobe, aberantne expresie Tim-3 bola hlásená u melanómu buniek, čo prispieva k nízkej adhézny schopnosť nádorových buniek a podporovať prežitie tumoru [19]. Zhuang et al taktiež preukázali významnú úlohu Tim-3 expresie v nádorových bunkách, ako nezávislý prognostický faktor u pacientov s non-malých buniek karcinómov pľúc [20]. Zhu C et al ukázala, že Gal-9 je Tim-3 ligand, a navrhol, že Tim-3-Gal-9 dráha môže sa vyvinuli na zabezpečenie účinnej ukončenie efektorových Th1 buniek [21]. Skúmať vzťah medzi Tim-3-Gal-9, dráhy a postupu rakoviny žalúdka je expresia proteínu Gal-9 a Tim-3 bola skúmaná v 305 pacientov s karcinómom žalúdka, z ktorých 84 prípadov sa spárovanými susednou vzorkami normálneho tkaniva. Združenie expresiu proteínu s pacientom klinickými charakteristikami a prognóze boli tiež skúmané v tejto štúdii.

Metódy

Študijné populácie

Tristo päť pacientov, vrátane 231 mužov a 74 žien s rakovinou žalúdka, ktorí podstúpili chirurgický zákrok od augusta 2000 do decembra 2010 na prvej nemocnici Jilin University bolo zaradených do tejto štúdie. Pacienti neobdržali žiadnu liečbu pred chirurgickým zákrokom. Diagnóza rakoviny žalúdka bolo vykonané na základe morfologických a imunohistochemických nálezoch, ktoré boli hodnotené dvoma nezávislými patológov (MSJ a YPW). Karcinómov žalúdka boli odstránené chirurgické odstránenie; priľahlé normálne žalúdočné epiteliálne vzorky boli takisto odobraté z 84 pacientov pre porovnanie. Pacient vo veku pohybovali v rozmedzí od 32 do 87 rokov, s priemerným vekom 64 rokov. Písomný informovaný súhlas bol získaný od všetkých pacientov a Protokol štúdia bola schválená etickou komisiou prvého nemocnice Jilin univerzity.

Bunková kultúra

rakovina žalúdka u ľudí bunkové línie SGC-7901 , BGC823, MGC803, MKN45 boli získané z Ústavu žalúdka a kolorektálny chirurgie, prvá nemocnica Jilin univerzity. Imortalizovaná žalúdočnej sliznice ľudská bunková línia GES-1 poskytuje nemocnica rakovina Pekinskej univerzite. Bunky boli kultivované v médiu RPMI-1640 s obsahom 10% teplom inaktivovaného fetálneho hovädzieho séra (FBS) a 100 ng /ml penicilínu a streptomycínu v inkubátore (50 ml /l CO2) pri 37 ° C. Médium na bunkách bolo menené každé 2-3 dni. Bunky v logaritmickej fáze rastu boli odobraté pre ďalšie experimenty.

Imunohistochémia

Stručne povedané, sekcia (4 um na šírku) z tkanivovej microarry (TMA), bloky boli zbavené parafínu a dehydratáciu, tepelne vyvolané získavanie epitop bol vykonaný ponorením sklíčok v 10 mmol citrátovom pufri (pH 6,0) s teplotou varu vyrovnávacia pamäť pre 10 mi v tlakovom hrnci. Po blokovaní 3% H 2O _{2, Všetky rezy boli inkubované cez noc pri 4 ° C s anti ľudský galektinu-9 polyklonálnej protilátky (zriedenej 1: 250, ab69630, abca, UK) a anti ľudský Tim-3 polyklonálne protilátka (8 ug /ml, AF2365, R &D Systems, Minneapolis, USA), 3,3-Diaminobenzidine (DAB), bol použitý ako chromogén, a rezy boli kontrastne hematoxylínom. Pre negatívne kontroly, nádorové sklíčka boli ošetrené izotypu IgG z králika (normálne králičie IgG, SC-2027, Santacruz, USA) a kôz (normálne kozie IgG, SC-2342, Santacruz, USA), aby sa nahradenie primárnej protilátky, všetky negatívne kontroly preukázali zanedbateľný pozadia škvrnu. Bunkové línie (SGC-7901, BGC-823, MGC-803, MKN45 a GES-1) boli rutinne kultivované, rakovina žalúdka bunkové pelety boli vložené do parafínu a spracované ako tkanivové snímok. bunkové línie karcinómu žalúdka boli zafarbené rovnakým spôsobom.}

nafarbená boli hodnotené dvoma nezávislými patológov (MSJ a YPW), ktorí boli oslepení na klinických údajov a výsledok je široko prijímaný semi-kvantitatívna analýza (HSCORE systém) bol použitý pre hodnotenie farbiace intenzity a percentá buniek zafarbených konkrétnej veľkosti intenzity. HSCORE bola vypočítaná za použitia tejto rovnice: HSCORE = ΣPi (i) (i = 0,1,2,3, Pi = 0 ~ 100%). i znamená intenzitu farbenia, teda bez zafarbenia = 0, slabá farbenie = 1, mierne farbenie = 2 a silné farbenie = 3. Pi predstavuje percentá zafarbených buniek sa intenzity v rozmedzí od 0 do 100. Preto je HSCORE sa pohybuje v rozmedzí od 0 do 300, HSCORE na teplotu 0 je považovaná za pozitívnu farbenie a HSCORE = 0 je považovaná za kompletnú negatívneho farbenia. V rozchádzajú Výsledky farbenia intenzity z dvoch patológov boli vyriešené preskúmaním prípadov dohromady a dohodnúť sa na skóre, a rozchádzajú výsledky percentách zafarbených buniek boli vyriešené výpočtom prostriedky skóre.

westernovým prenosom

Ak chcete potvrdiť správnosť semi-vyčíslenie imunitným-histológia, Western blotting boli spravované v žalúdočných rakovinových bunkách línií. Bunky sa lyžovali lyzačním pufrom za studena a centrifugovány pri 12000 g počas 10 minút, pufra sa zmieša s bunkovými lyzáty a varí sa po dobu 5 minút pri teplote 95 ° C. 10 ug celkového proteínu bolo nanesené na 10% SDS polyakrylamidovom gélu diskontinuálnym pre elektroforézu a potom prenesené na PVDF membrány. Membrány boli blokované v 5% hovädzieho sérového albumínu a inkubované s primárnymi protilátkami (anti-Gal 9 a proti Tim-3) cez noc pri 4 ° C v Tris pufrovaný soľný roztok s 0,1% Tween 20. Po premytí boli membrány inkubované v chrenovej peroxidázy konjugovanej s protilátkami po dobu 1 hodiny pri teplote miestnosti. Membrány potom boli inkubované a westernovým prenosom snímky boli odobraté a analyzované. β-aktínu bol použitý ako vnútorná kontrola a všetky denzitometrické hodnoty boli normalizované proti relatívnej beta-aktínu hodnoty.

Stanovenie H. pylori
aj infekcia

Medzi 305 žalúdočné prípadov rakoviny, boli odoberané vzorky krvi od 104 pacientov na vyšetrenie H. pylori
aj infekcie pred chirurgickým zákrokom. 4 ml pôstu vzoriek krvi boli ponechané pri teplote miestnosti po dobu 30 minút a potom sa odstredí. Sérum bola spracovaná a uložená pri -80 ° C. Sérum imunoglobulínu (Ig) G protilátky H. pylori
boli detekované H. pylori
i-IgG enzyme-linked ImmunoSorbent assay (ELISA) kit (Biohit, Helsínk, Fínsko). Titre protilátok boli stanovené pomocou optickej hustoty (OD) hodnoty podľa protokolu výrobcu a titre vyššie ako odrezať hodnota 30EIU, boli považované za pozitívne na H. pylori
infekcie. Vzorky na kontrolu kvality kit ukázal Variačný koeficient vo výške 4,5% za H
. pylori
infekcie vyšetrenie.
Analýza

Štatistiky

HSCORE z Gal- 9 a Tim-3 vyjadrenia sú prezentované ako medián (medzikvartilové). Wilcoxonův uzavreté párov podpísal-rank test a Mann-Whitney U test alebo Kruskal-Wallis H testov boli použité pri porovnávaní párované skupiny a dve nezávislé skupiny, resp. Spôsob podľa Kaplan-Meiera bol použitý na odhad celkového prežitia, a rozdiely v prežitie bola analyzovaná s použitím log-rank testu. Cox proporcionálny nebezpečenstvo model bol použitý na výpočet relatívne riziká (RR) a príslušné 95% intervaly spoľahlivosti (95% CI) po úprave podľa veku (Variable stupnice), pohlavia (nominálne variabilný), lymfatická-cievne invázie (nominálne premenná) a TNM staging (stupnica premenná). Všetky štatistické testy boli dvojstranný a P
-hodnoty menšie ako 0,05 boli považované za štatisticky významné. Všetky analýzy boli vykonané za použitia softvérového balíka SPSS 18.0 (SPSS Inc. USA).

Výsledky

Vyjadrenie Gal-9 a Tim-3 rakoviny žalúdka a žalúdočných rakovinových bunkových línií

imunohistochemická analýza ukázala, že Gal-9 a Tim-3 zafarbia pozitívnych na nádorové bunky v 86,2% (263/305), 60,0% (183/305) pacientov s karcinómom žalúdka, resp. Väčšina nádorových buniek v žalúdočnej tkanive karcinómu ukázala silnú cytoplazmatickú Gal-9 imunologické, ale malé množstvo buniek karcinómu žalúdka ukázali negatívny imunologické pre Gal-9 (obr. 1A, 1B, 1C). Žalúdočné nádorové bunky preukázalo jasnú cytoplazmatickú a nukleárnej pozitivita pre Tim-3 imunologickej (obr. 1D, 1E, 1F, 1G).

Medzi 84 párových vzoriek, Gal-9 pozitívne farbenie bol nájdený v 68/84 ( 81,0%), rakovina žalúdka a v bazálnych buniek 51/84 (60,7%) normálne sliznice, respektíve ( P
= 0,004). Naopak, Tim-3 pozitívne farbenie bolo zistené 55/84 (65,5%) u rakoviny žalúdka a 72/84 (82,7%) v normálnom sliznici, respektíve ( P
= 0,002). Okrem toho, bunkové línie SGC-7901, BGC-823and MGC-803 a GES-1 vykazovali slabú cytoplazmatickú Gal-9 imunologickej (obr. 1 H), ale MKN45 ukázali negatívny imunologické pre Gal-9 (obr. 1i). Štyri žalúdočné rakovina bunkové línie tiež ukázala silnú cytoplazmatickú a nukleárnej pozitivita pre Tim-3 farbením (obr. 1 Ján). Avšak, GES-1 bunky vykazovali negatívny farbenie pre Tim-3 (Figure.1K).

Detekcia Gal-9 a aktivácia Tim-3 bola overená z rovnakých buniek pomocou Western Blot, ktorý je uvedený na obrázok 2.

Gal-9 expresiu v rakovinových lézií bol podstatne vyšší ako v normálnej sliznici (medián HSCORE: 140 vs 20; P Hotel &0,001 obr. 3A). Tim-3 HSCORE v rakovinových lézií bola výrazne nižšia, než v normálnej sliznici (medián HSCORE: 40 vs 170; P Hotel &0,001 obrázok 3B).

Gal-9 a au-. 3 úrovne expresie a H. pylori
aj infekcia

zo 104 pacientov s karcinómom žalúdka testovaných na H. pylori
aj protilátky, celkový pozitívny sadzba H. pylori
aj infekcia bola 65,4%. V analýze podskupín vek, H. pylori
aj infekcia sadzba bola vyššia v skupine 45-65 rokov, v porovnaní s menej ako 45 rokov skupiny, alebo starší ako 65 rokov skupiny. Výsledky ukázali žiadnu koreláciu medzi H. pylori
aj infekcie a Gal-9 a Tim-3 výrazu ( P
= 0,102, P
= 0,565). (3C, 3D).

Korelácia Gal-9 a Tim-3 expresie s patologickým parametre

Ako je uvedené v tabuľke 1, HSCORE Tim-3 bola významne vyššia u mužov ako pacientky ( P
= 0,010). Hladiny tim-3 expresie boli pozitívne koreluje s vekom ( P
= 0,004), ale hladiny Gal-9 expresné negatívne koreluje s vekom ( P
= 0,049). Existujú významné rozdiely v Gal-9 a Tim-3 úrovní expresie medzi podskupinami žilovej infiltrácie, u pacientov s žilovej infiltrácie, stredné HSCORE Gal-9 bola významne nižšia ( P
= 0,034) a au- 3 bol významne vyšší ( P Hotel <0,001). Podľa fázach TNM, vyššia HSCORE bola pozorovaná u pacientov štádiu I nádory v porovnaní s inými stupňoch ( P
= 0,043). Výrazne vyššia HSCORE Gal-9 bola zistená u pacientov bez lymfatických uzlín ( P
= 0,009) a u pacientov bez vzdialených metastáz ( P
= 0,022). Tiež sme analyzovali expresiu Gal-9 a Tim-3 podľa nádoru diferenciácie (High, Middle a Low) a hĺbkou invázie (T1-T4), sa nezistili žiadne významné rozdiely. Klinické charakteristiky subjektov sú zhrnuté v tabuľke 1 v detaile.

High Gal-9 Expresia a negatívne vyjadrenia Tim-3 boli významne spojené s dlhým celkovým prežitím

Follow-up informácie boli k dispozícii všetkých 305 pacientov, pokrývajúca obdobie v rozmedzí od 3 do 135 mesiacov (medián 40 mesiacov). Žiadny pacient zomrel na pooperačné komplikácie počas 30 dní od začiatku sledovaného obdobia, a 120 (39,3%) pacientov zomrelo počas sledovania. Kaplan-Meierove krivky prežitia boli vynesené v závislosti na HSCORE (negatívne, HSCORE≤100, HSCORE≤200 a HSCORE > 200). Celková miera prežitia bolo signifikantne vyššie u Gal-9 HSCORE > 200 skupina než u iných skupín (log-rank test P
= 0,011). Ako krivky prežitia negatívneho skupina, skupina HSCORE≤100 a skupina HSCORE≤200 boli podobné, sme kombinovali je pre ďalšiu analýzu a krivky prežitia Kaplan-Meier bolo uvedené v Figure.4A ( P
= 0,002). Pacienti s Tim-3-negatívnymi nádormi mali dlhšie celkové prežívanie. Rovnaké výsledky sa dosiahli, keď boli všetky pozitívne pacienti expresné kombinované (Figure.4B, Log-rank test, P
= 0,01). Kaplan-Meierove krivky prežitia bola tiež vynesená v závislosti na Gal-9 a Tim-3 ko-expresiou, celková miera prežitia pacientov, ktorí boli Gal-9 HSCORE > 200 a Tim-3 Negatívne sa prejavilo výrazne vyššie, a pacienti, ktorí boli Gal -9 HSCORE≤200 a Tim-3 pozitívnych bola významne nižšia (Figure.4C, Log-rank test, P Hotel <0,001).

Kombinácia Gal-9 a Tim-3 výraz bol nezávislý prognostický ukazovateľ

Tabuľka 2 ukázala, že viacrozmerné analýza faktorov súvisiacich s prognózou pacienta. Jednorozmerného analýza ukázala, že tieto faktory boli významne súvisí s pooperačné prežitie: TNM štádiu, žilovej infiltrácia a kombinácie Gal-9 a Tim-3 expresie ( P Hotel &0,001, P
= 0,001, P Hotel < 0,001 príslušne). Potom, čo ďalej upraviť podľa veku a pohlavia, multivariačný regresná analýza ukázala, že Gal-9 a Tim-3 ko-expresie a TNM štádium boli nezávislé prognostické faktory, ale Lymfatické-cievne invázie nebol nezávislý prognostický faktor.

Diskusia

v tejto štúdii vyššej výrazy Gal-9 boli nájdené u pacientov bez lymfatických-vaskulárne invázie, lymfatických uzlín a vzdialených metastáz. Navyše, vyšší výrazy Gal-9 je úzko spojená s lepšou prežitie. Tieto zistenia sú v súlade s predchádzajúcou správou rakoviny prsníka, hepatocelulárnym karcinómu, karcinómu krčka maternice a malígneho melanómu [12], [13], [14], [15], [22]. Gal-9 expresie v karcinómu žalúdka lézií bola významne vyššia ako v párových susediacich normálnych žalúdočných epiteliálnych tkanív, tento výsledok nás viedlo k hypotéze, že Gal-9 vykazujú protinádorovú aktivitu v nádorových nesúcich tkanív prostredníctvom incresed agregácie nádorové bunky [23] , Avšak toto zistenie sa líši od vyjadrenia Liang je. Zistili, že Gal-9 expresie v nádorových tkanivách 38 invazívny karcinóm skvamóznych buniek (SCC krčka maternice) pacientov bol významne nižší ako v normálnom krčnej dlaždicového epitelu od 23 zdravých kontrol. Ale Gal-9 výrazy v dobre diferencované SCC boli významne vyššie v porovnaní s tými v high grade dlaždicových intrapiehelial lézie [14]. Bohužiaľ, nemali porovnávať výraz Gal-9 v rakovinových tkanív párových susedných normálnych tkanív. Rozpor z rôznych štúdií, môže byť vzhľadom na individuálne variácie imunitného stavu, spôsobuje zápal a tkanivové špecifity Gal-9 expresie. Okrem toho rôzne ochorenia sú citlivé na apoptotické eliminácia rekombinantný Gal-9. V súlade s týmto pozorovaním, čo naznačuje, že môžu byť gal-9 atraktívnym kandidátom pre liečbu rakoviny. Ošetrenie rekombinantným Gal-9 môže zabrániť šíreniu metastáz rakoviny [16], [24], [25].

Tim-3 je povrchová molekula, ktorá sa môže špecificky identifikovať Th1 bunky z buniek Th2 ako myšou ľudia [26]. Bolo tiež zistené, že na cytotoxické CD8 + T-buniek, Th17, Treg, monocyty, dendritické bunky, žírne bunky, natural killer (NK) buniek, melanóm, SCC a rakovina pľúc bunky [19], [20], [27], [ ,,,0],28], [29], [30]. Tu, prvýkrát sme ukázali, Tim-3 expresiu v rakovinových bunkách žalúdku a bunkových línií. Okrem toho sme zistili, že významná korelácia medzi Tim-3 expresiu v rakovinových bunkách a klinických patologických parametrov lymfatických-vaskulárne invázie. Ďalej sme zistili, že miera prežitia pacientov s pozitívnymi Tim-3 expresie nádorov bola významne nižšia ako u negatívnej Tim-3 expresie. Jednorozmerného a multivariačný analýzy tiež ukázal, že Tim-3 nadmerná expresia v nádorových buniek v spojení so zlou prognózou rakoviny žalúdka.

Tim-3 je silný immunoinhibitory molekula podieľa na imunitný tolerancie, a autoimunitných odpovedí. Mechanizmy pre reguláciu Tim-3 expresie v nádorových bunkách nie sú ešte celkom objasnený. Wiener et al uvádzajú, že TGF-β1 zvýšenej Tim-3 výraz, ktorý vyústil v lokálnej imunosupresiu [19]. Medzitým, vysoká nádorové hladiny TGF-D1 boli významne spojené so zníženým prežitia pacientov s rakovinou žalúdka. Predchádzajúce štúdie identifikovali Tim-3 ako negatívny regulátor pomocných T-buniek 1 reakcií [26]. V poslednej dobe sa však nové výskumy ukazujú, že Tim-3 môže podporovať aj pre-zápalovú odpoveď, čo naznačuje, že Tim-3 má dvojakú úlohu v imunite [31], [32]. To znamená, že expresné hladiny Tim-3 v rakovinových bunkách sa môžu spájať s cytokín produkujúce počas procesu žalúdočné rakoviny. Navyše nedávne štúdie zistili, že Tim-3 zvýšená expresia bola spojená s kratším celkovým prežitím epiteliálnych rakovín, vrátane rakoviny pľúc, rakoviny krčka maternice a [20], [30], naše výsledky sú v súlade s týmito správami. Ešte dôležitejšie ako všetky tieto nálezy, Cao et al potvrdili, že sa reguluje expresiu Tim-3 v Hela bunkách významne inhibujú ako migráciu a inváziu buniek Hela [30]. Tieto výsledky naznačujú, že Tim-3 nielen potlačenie protinádorovej imunity, ale aj priamo podporovať vývoj rakoviny.

Identifikácia Gal-9 ako ligand pre Tim-3 sa teraz pevne stanovená Tim-3-Gal -9 cestou ako dôležitý regulátor Th1 imunitou, čo vedie k apoptóze Th1 buniek [21], [33]. V tejto štúdii sme zistili, že obaja vyššia Gal-9 Expresia a negatívne expresie Tim-3 boli významne spojené s lepšou celkové prežívanie ( P
= 0,002, P
= 0,010, v danom poradí); kombinácia Gal-9 a Tim-3 expresie bol nezávislý prognostický marker u karcinómu žalúdka. Tieto výsledky ukazujú, že Tim-3-Gal-9 dráha môže hrať dôležitú úlohu v žalúdku rakoviny.

Okrem toho, H. pylori
je skupina 1 karcinogénna na základe Svetovej zdravotníckej organizácie (WHO) a Medzinárodná agentúra pre výskum rakoviny (IARC) [34]. Bolo všeobecne známe, že rakovina žalúdka je viacstupňový proces, ktorý zahŕňa rad akcií, ako sú atrofickej gastritídy ,, črevnej metaplázia, dysplázia a karcinómu. Predchádzajúce správy si všimli, že Tim-3-Gal-9 interakcia môže mať značný vplyv na zápalové [26], [35], [36], [37]. Tiež sme skúmal, či H. pylori
infekcia môže ovplyvniť hladinu expresie Gal-9 a Tim-3. Avšak, v tejto štúdii, hladiny Gal-9 a Tim-3 expresné neboli štatisticky odlišné medzi H. pylori
H. pylori
skupiny a (+) (-) skupine u rakoviny žalúdka ( P
= 0,101, P
= 0,565). Potrebné ďalšie vyšetrovanie s additionalsamples na stanovenie role Gal-9 a Tim-3 v H. pylori
-infection.

Na záver, táto štúdia preukázala expresiu Gal-9 a Tim-3 u rakoviny žalúdka. Dôležité je, že mnohorozmerné analýzy odhalili významnú úlohu Gal-9 a Tim-3 ako nezávislý prognostický faktor u pacientov s karcinómom žalúdka. To znamená, že stav Gal-9 a Tim-3 by mohla byť stanovená na klinickom vyšetrení a môže mať hodnotu ošetrenie v budúcnosti [38], [39].

Poďakovanie

Autori by rád poďakoval Dr Jennifer S. Davis, pán Chang-Song Gua a pani Ying Song pre ich technickú podporu.

• PLoS ONE: Ekonomické vyhodnotenie prvej línie adjuvantnej chemoterapiou pre resekabilním rakovina žalúdka u pacientov v China
• Ploche ONE: Výskyt, prediktívne faktory, a Klinické výsledky akútnych ľadvinových zranenia po žalúdočnej chirurgia pre žalúdočné Cancer