Plos ONE: Aberrant CCR4 izražanja je vključena v tumorska invazija na bezgavkah negativni človeške želodčne raku

Povzetek

Cellular kemotaksa je najbolj znana funkcija kemokine receptorjev, ki so tesno povezane s tumorsko metastaz. Pravzaprav bi lahko pozitivno izražanje receptorjev za kemokine treba opredeliti tudi celo pri nekaterih bolnikih brez metastatskih tumorjev, medtem ko se je klinična pomembnost teh podatkov ni bila v celoti ugotovljena. Naše raziskave so namenjeni razjasnitvi profile izražanja CCR4 in raziskati njeno morebitno vlogo v histološko vozlišča negativna (pN0) raka želodca (GC). Imunohistokemija (IHK) ali analiza immunohistofluorescence (IHF) je bil opravljen na vzorcih, pridobljenih od 108 bolnikov z pN0 GC. Ugotovili smo, da je CCR4 odklonsko preveč izražen inpN0 GC tkiva, z različnimi vzorcev izražanja na tumorske celice in je povezana s T-fazi ( P
= 0,002). Matrigel in vitro
vdor testa so pokazali, da prekomerno ekspresijo CCR4 v celičnih linijah GC bistveno izboljšala invazivno sposobnost teh celic. Rezultati v realnem času RT-PCR in gelatinzymography pokazala znatno povečanje matrix metalo (MMP) -9 proizvodnje s prisilno izražanje CCR4 v celičnih linijah GC inducirane. Naši podatki kažejo, da je zmotno CCR4 izraz vključeni v tumorsko invazijo pN0 GC in, razumljivo, lahko antagonisti CCR4 biti koristne kandidatov za nadzor zgodnje dogodke v napredovanja tumorja

Navedba. Yang Y, Du L, Yang X, Qu A Zhang X Zhou C, et al. (2015) Aberrant CCR4 izražanja je vključena v tumor Invazija bezgavk-Negative človeške želodčne raku. PLoS ONE 10 (3): e0120059. doi: 10,1371 /journal.pone.0120059

Akademska Urednik: Chih-Hsin Tang, China Medical University, Tajvan

Prejeto: 29. september 2014; Sprejeto: 3. februar 2015; Objavljeno: 19. marec 2015

Copyright: © 2015 Yang et al. To je prost dostop članek razširja pod pogoji Creative Commons Attribution License, ki omogoča neomejeno uporabo, distribucijo in razmnoževanje v katerem koli mediju, pod pogojem, da prvotni avtor in vir knjižijo

Data voljo: Avtorji potrditev da so njihovi podatki v rokopisu in sedanji dodatne informacije datoteko

Financiranje:. Ta študija je bila podprta z National Natural Science Foundation Kitajske (Grant št 81271916 in 81301506), raziskovalni sklad za doktorski programa Visoko šolstvo Kitajske (št 20120131110055), Neodvisna ustanova za inovacije Shandong University (IIFSDU, 2012TS174), Shandong tehnološki razvoj projekta (STDP, 2013GSF11859), Naravoslovno Foundation Shandong (Grant No. ZR2013HM104) in National Key Klinični Medicinska Posebnosti Foundation

konkurenčni interesi:. avtorji so izjavili, da ne obstajajo konkurenčni interesi

Uvod

Podobno kot večina raka, raka želodca (GC) je zelo. agresivna malignosti, ki se nagiba k invazijo v okoliška tkiva in metastaze v oddaljene organe. Čeprav imajo bolniki z rakom želodca bezgavkami negativni boljše rezultate od tistih z vozlišča metastaz [1, 2], od katerih so nekateri še vedno trpi zaradi lokalnih ponovitev in oddaljenih zasevkov po kurativno resekcijo [3-5]. Opredeljevanje učinkovitih dejavnikov ali ključne molekule povezujejo z napredovanjem bolezni v uprizorilo bolnikih z rakom želodca z negativnimi bezgavkami je potrebno, če upoštevamo, da bi ti bolniki koristijo adjuvans terapij.

kemotaksa igra ključno vlogo pri tumorski metastaze, usmerjanje gibljivost metastatskih celicah skozi gradienti kemoatraktanti. Predvsem kemokin receptorji posredujejo organ specifičnega metastaze tumorjev z interakcijo z ujemajočimi Kemokini na ciljnih organih [6]. Želodčne rakave celice lahko izražajo različne kemokina receptorje, kot kemokinski receptor 4 (CXCR4) in kemokinski receptor 7 (CCR7), in co-opt teh molekul za metastaze [7-12]. Druge vloge kemokine receptorje v napredovanju raka, razen za kemotaksi so redko odkrili. CCR4, Ci-C tipa kemokin receptor, je bila predhodno osredotočena na njegovo biološko funkcijo v immunopathogenesis hematoloških tumorjev [13]. Do danes je bilo relativno malo pozornosti vlogi CCR4 pri spodbujanju metastaze nekaterih solidnih tumorjev, vključno z rakom želodca [14-17]. Naša skupina je pokazala, da so limfocitov bogati GK ponavadi pogosteje pozitiven za CCR4, in našel novo vlogo CCR4 v tumorsko povzročene imunosupresijo [18], kar kaže na različne profile izražanja iz CCR4 v GC tkiva in večnamenske vloge te molekule pri napredovanju GC.

znano je, da je invazija prvi korak, ki vodi do raka metastaz. Dokazila, ki so pokazale, da so nekateri kemokinskih receptorji, kot CXCR4 [19] in CCR7 [20], spodbujanje B-celično kronično limfocitno levkemijo celic invazijo z up-regulacijo MMP-9. Nedavno Yu et al. so pokazali, da bi CXCR4 spodbujajo migracijo celic in invazijo skozi induciranje ekspresije MMP-9 in MMP-13 v oralni skvamoznih celic karcinoma [21]. Li in kolegi ugotovili, da je bil CCR7 vključen v humani invazije raka debelega črevesa z uravnavanjem MMP-9 [22]. Ni pa jasno, ali bi CCR4 spodbujati tudi rakavih celic invazijo.

Glede na široko distribucijo kemokine receptorjev v tumorjih innjihovega morebitne vloge v tumorske invazije in metastaz, smo predpostavili, da pN0 bolniki z rakom na želodcu nosi določeno kemokina receptorji so lahko bolj verjetno, da bodo imeli nadaljnje napredovanje. Če želite preizkusiti našo hipotezo, smo raziskovali izražanja profile CCR4 v želodčnih rakavih celicah pN0 bolnikov in njeno vlogo v rakave celice invazije želodca.

Materiali in metode

Bolniki in vzorci

vzorce tkiva so bili pridobljeni od 108 bolnikov (75 samcev in 33 samic, starih 35-71 let, povprečna starost 62 let) z rakom pN0 želodca v postopku kurativno resekcijo primarnega tumorja v bolnišnici Qilu Shandong University (Jinan, Kitajska). Uporabili smo nad ujema sosednje normalne želodčnih tkiva in tkiva pri 56 bolnikih želodca displazijo (36 moških in 20 žensk, starih 35-68 let, povprečna starost 48 let) kot kontrole. Vse histopatološka diagnoze in malignih klasifikacije so določena z višjimi patologi v času diagnoze, v skladu s Svetovne zdravstvene organizacije Mednarodne histološko klasifikacije tumorje [23], in pooperativno patološko uprizoritev je bila določena na osnovi Mednarodne zveze proti raku (UICC) [24 ]. Študija je odobril Odbor za etiko bolnišnice Qilu, in je bila pridobljena tudi pisno soglasje obvestil od vseh bolnikov.

Imunohistokemija in immunohistofluorescence

IHC ali IHF je bila izvedena na parafinskih odsekih, ki uporabljajo protitelesa proti človeku CCR4 (LS-A351, LifeSpanBioSciences, Seattle, WA, ZDA) in Anti-pan Cytokeratin (CK) protitelesa (ab80826, abcam, Cambridge, MA, ZDA), v skladu z navodili, ki jih vsak proizvajalec. Fluorescentne protitelesa vključujejo koze anti-zajec TRITC konjugiranih protiteles (E031320; Amyjet Scientific, Inc. Wuhan, Kitajska), kozje anti-mouse FITC-konjugiranih protiteles (E0312400; Amyjet Scientific, Inc. Wuhan, Kitajska). Vzorce smo prikazali in opazili pod fluorescenčnim mikroskopom (IX81, Olympus, Tokio, Japonska), in rezultati IHC smo analizirali, kot smo že poročali [18]

celični kulturi

človeškega želodca. rakave celične linije SGC-7901 in BGC-823 so bile kupljene od kulturo zbirke kitajske akademije znanosti (Shanghai, Kitajska) in vzdrževane v RPMI-1640 (Hyclone, Logan, UT, ZDA), dopolnjena z 10% FBS (Gipco, Invitrogen, Carlsbad, CA, ZDA) pri 37 ℃ v vlažni atmosferi 5% CO _2.

prehodna prekomerno izražanje CCR4 v SGC-7901 in BGC-823 celic

prehodno transfekcije plazmida EGFP CCR4 (CCR4) ali EGFP izražanja vektor za (mock) v celičnih linijah želodca je bila izvedena z Lipofectamine 2000 (Invitrogen, Carlsbad, CA, ZDA), kot je že poročala [18]. In transfekcijske učinkovitosti so bili določeni s fluorescenčnim mikroskopom, v realnem času reverzna transkripcija-verižne reakcije s polimerazo (RT-PCR) in pretočno citometrijo (FCM), oz.

Količinska mRNA RT-PCR in v realnem času RT -PCR

Total RNA smo izolirali iz celic, z uporabo TRIzola reagenta (Invitrogen, Carlsbad, CA, ZDA) in reverzne transkriptaze reakcije so bile izvedene z kompleta po protokolu proizvajalca (Fermentas, St. Leon-Rot, Nemčija ). Za RT-PCR so bili uporabljeni primerji in pogoji PCR za pomnoževanje CCR4, kot je prej [25] opisano. In človeški gliceraldehid-3-fosfat dehidrogenaze (GAPDH) (naprej primer, 5'-GGTGGTCTC-CTCTGACTTCAACAG-3 '; reverzne premaz, 5'-GTTGTTGTAGCCA-AATTCGTTGT-3') je bila usedas internega standarda. V realnem času RT-PCR smo primerji za CCR4, MMP-9 in GAPDH in pogoji ojačevanja uporablja kot že poročali [18, 25, 26].

FCM analiza

Celice požanjemo inkubirali z fikoeritrin (PE), označenih s anti-CCR4 monoklonsko protitelo (FAB1567P, R &D Systems) ali z miško IgG2b-PE nadzor izotipna (IC0041P, R &D Systems), v skladu z navodili proizvajalca. FCM analiza je bila nato izvedena s pomočjo FACSCalibur (Becton Dickinson, Heidelberg, Nemčija) za analizo CCR4 izraz na SGC-7901 in BGC-823 celic, oz.

poskusa vdora v Matrigel

in vitro
invazija test smo izvedli z uporabo 24-celična kultura vstavi vsebujejo 8-um membrane (BD bioznanosti, San Jose, CA). Vsaka membrana je obložena z Matrigel (30 fig, Becton Dickinson, San Jose, CA) in inkubirali 30 min. Nato 0,2 ml transfektirali ali starševski GC Celice smo resuspendirali v seruma RPMI-1640 s koncentracijo 1,5 10 ^{5 /ml in v zgornjo komoro in 0,6 ml RPMI-1640 medij, ki vsebuje 10% FBS je x dodamo k basolateral komoro. Po 24 h inkubacije pri 37 ℃ s 5% CO _{2, smo celice fiksna in obarvamo z 0,2% eozinom Y. število celic, ki so prešle v bazalnih strani membrane je količinsko pod svetlobnim mikroskopom pri 200-kratni povečavi povečava.}}

preživetja celic vsebnosti

celice smo zasejali v 96-vdolbinami pri 5 x 10 ^{3 celic /jamico in kultivirani za navedeni čas točk. sposobnost preživetja celic je bila ocenjena s pomočjo CCK8 (Beyotime, HAIMEN, Kitajska), po navodilih proizvajalca. Absorbanco smo izmerili pri 450 nm valovne dolžine. Vsakič točka je bila ponovljena v treh vodnjakov in test je bil independentlyperformed za trikrat.}

želatina cimografijo

Supernatante smo zbrali s centrifugiranjem po 24 h po transfekciji in rešiti na SDS-PAGE gel, ki vsebuje 0,1% (m /v) želatina. Po elektroforezi so bili proteini renaturirani z umivanjem gel dvakrat 40 minut v 2,5% Triton X-100, ki mu sledi inkubacija 18 ur pri 37 ° C v mešanici, ki vsebuje Tris-HCl 50 mM (pH 7,6), CaCl _{2 5mMm in NaCl 200 mM. Nato je bil gel kratko splaknemo z destilirano vodo in obarvamo z 0,25% Coomassie Brilliant Blue R250 /45% metanola /10% ocetne kisline 4 ure in nato razbarvamo v 45% metanola, 8% ocetne kisline. Geli so bili nato skenira in fotografirali z Kodark sistemov.}

Statistična analiza

Podatki iz vsaj treh neodvisnih poskusov smo analizirali in izražena kot srednja vrednost ± SD. Razmerje med CCR4 izražanja in T-fazi smo analizirali s hi-kvadrat testom. Druge podatke smo analizirali s testom Student t ali ANOVA kadar je to primerno. A P
vrednost manj kot 0,05 smo upoštevali kot statistično značilne. Vse analize so bile izvedene s pomočjo statistične programske opreme (različice 13.0, SPSS Inc., Chicago, IL).

Rezultati

Prekomerno izražanje CCR4 z različnih vzorcev izražanja v pN0 zgodnjem tkivu raka želodca

CCR4 izraz v rakavih celic so odkrili na različnih stopnjah. Med 108-parafin vgrajeni tkiv, 29 primerih (26,9%) je pokazala negativen izraz (-), 30 primerov (27,8%) je pokazala šibko izražanje (+), 35 primerih (32,4%) je pokazala zmerno izraz (++), in 14 primerov (13,0%) je pokazala močan izraz (+++) (sl. 1A-D). Vse sosednje normalno želodčne tkiva je pokazala negativno barvanje za CCR4, in le 2 (3,6%) primerov želodčnega displazije je pokazala šibko izražanje membrane CCR4 (sl. 1E in F).

Tako membrane in citoplazmo izraz CCR4 bilo opazili najpogosteje v dobro diferenciranih tumor gnezda črevesne tipa, medtem ko so manj diferencirane celice večinoma prikaže citoplazemskega vzorec CCR4 izražanja v difuzna tipa raka želodca (sl. 2). Zanimiv pojav je bil, da so celice z zelo invazivno potencialom, kot so mišično invazije, vaskularno penetracije in živcev invazije, prikaže tudi citoplazemske CCR4 izraz vzorec (sl. 3).

CCR4 prekomerno ekspresijo spodbuja želodčne rakave celice invazija

na značilnih odsekov, se je pokazalo tudi, da je raven izraz CCR4 povečevala z globine tumorske invazije (sl. 3). Analiza je IHC jasno pokazala, da prekomerno izražanje CCR4 je pozitivno povezana s stopnjo T ( P
= 0,002), vaskularne invazije ( P
= 0,001) in perinevralni invazija (P = 0,002) v pN0 GC (tabela 1).

, so poročali smo, da so bile ravni CCR4 beljakovin precej nizka, v nekaterih želodčnih celičnih linijah [18], in s tem, da bi dobili nove vpoglede v CCR4 posredovano tumorske invazije, preveč izraz CCR4 v celičnih linijah želodčnih izvedemo, kot smo že prej opisali [18]. Visoke transfekcijske učinkovitosti smo določili z realnem času RT-PCR, FCM in fluorescenčno mikroskopijo, oziroma (sl. 4A-C). EGFP je bil izražen v jedra, citoplazmi in membrane kontrolnih Vektor celic, ki so bile transficirane z modelnim plazmida; in fluorescentni protein fuzijski bil lokaliziran v citoplazmi in membrane plazmidnih transfektiramo celice CCR4. Poskus vdora v Matrigel je pokazala, da so bile številke EGFP CCR4-transfektirali želodčnih rakavih celic, ki potekata skozi Matrigel znatno višje od tistih modelnega transfektirali želodčnih rakavih celic (sl. 4D). CCK8 Test je pokazala, da je imel čezmernim CCR4 ni vplival na proliferacijo želodčni rak celic (S1 slika).

CCR4 urejeno MMP-9 proizvodnja v želodčnih rakavih celic

Za testiranje možne mehanizme, ki podpirajo CCR4 posredovanega tumorska invazija, smo ocenili vpliv CCR4 na MMP-9 izražanja in delovanja. Realnem času analize RT-PCR (sl. 5A) je pokazala, da EGFP CCR4-transfektirana želodca rakave celice izražena višjo raven MMP-9 mRNA, v primerjavi z modelnim transfektirali celic pri 24 po transfekciji. Želatina cimografijo analiza (sl. 5B) je pokazala, da so bili izločanje in aktivnost MMP-9 močno navzgor regulirana v supernatantih iz EGFP CCR4-transfektirali celic v primerjavi z modelnim transfektirali celic v 48 urah po transfekciji, z ali brez dodatka eksogeni CCL22.

Pogovor

interakcije med kemokine receptorjev rakavih celic in njihovo ujemanje Kemokini predstavljajo ključne korake v tumorske metastaze. Vendar pa ugotovitve naš sedanji studyshowed, ki so bili pozitivni na CCR4 obarvanje tudi določeno število bolnikov z rakom želodca brez limfni metastaz. Za razliko od večine prejšnjih študij o funkcijah kemotaksi posredovane s strani nekaterih kemokine receptorje, ta raziskava je pokazala, roman, invazivnega vedenja CCR4.

kemokin receptorje spadajo v družino sedem-transmembranski G-protein povezan receptorjev, ki so membrane proteinov in funkcionalne posledice delovanja kemokinski receptorja se na splošno domneva, da so odvisni od stimuluse ekstracelularne ligande [27]. Vendar pa histološki vzorci te študije so pokazali, da so bile različne izraz vzorce za CCR4. CCR4 v ne-neoplastične celice pokazala negativno obarvanje, samo z rahlim membransko obarvanje v želodcu displazijo lezij. Membrane in citoplazme izraz CCR4 najpogosteje pojavil v zmerno do dobro diferenciranih tumorjev gnezda, medtem ko izraz v manj diferenciranih celic večinoma omejeni predvsem v citoplazmo. In bolj mikavno, kot je prikazano na značilnih odsekov, tumorske celice kažejo visoko invazivne zmogljivosti, kot so mišično invazije, vaskularno penetracije in živcev invazije, pogosto je pokazala povečano citoplazemske izraz CCR4. Naši podatki kažejo tesno povezavo med citoplazemske CCR4 izraz vzorec in agresivnih vedenj v želodcu rakavih celic. Ta ugotovitev je v nasprotju s skupnim predpostavki, da se zunajcelična domena receptorja kemokinski nujno potreben tumorja metastaz preko interakcije z njegovim ligandom. Podobni pojavi so opazili pri kemokin receptor CXCR4, čigar jedrska lokalizacijo bila povezana z napredovanjem različnih tumorjev [28-30]. Ti podatki indictate, da bi se v želodcu rakave celice napadejo bližnja tkiva preko CCR4 na ligand neodvisen način. Druga hipoteza je bila, da bi lahko CCR4 Internalizacija njegov ligand povzročil predstavlja mehanizem, ki se je razvila v citoplazemski CCR4 izrazom vzorec. CCL22 je CCR4 ligand proizvaja človeških želodčnega tkiva raka [31], ki je znana tudi causeCCR4 internalizacijo z membrano citoplazme [32, 33], kar kaže citoplazemske obarvanje lahko pokaže aktivira signalizacije naslednje CCR4-CCL22 vezavo. Več študij je potrebno razkriti natančne mehanizme, ki podpirajo te nenormalne vzorce izražanja kemokin receptorjev, ki sodeluje pri napredovanja tumorja. Poleg tega počasi stopnjuje izraz CCR4 na predrakavih tkivih, vendar statistično neznatno višji kot v tumorskih-sosednji normalnih tkiv, predlagal, da bi CCR4 prav tako sodelujejo pri preneoplastičnih stopnjah zgodnji razvoj tumorjev.

V naši prejšnji študija, smo ugotovili, da je bil CCR4 izraženi pri GC tkiva, vendar nismo našli z in brez bezgavkah metastaze [18] velike razlike med bolniki. Zato smo predpostavili, da bi kemokin receptorji prav tako igrajo pomembno vlogo pri razvoju raka pN0 bolnikov. V tej raziskavi, so naši rezultati kažejo pozitivno korelacijo med CCR4 izražanja in T-faze, ki so bili v skladu z našimi ugotovitvami imunohistokemija da CCR4 izraz večinoma povečale, saj je globina tumorske invazije napredovala. Učinek CCR4 na rakave celice invazije želodca je bila delno potrjena s transwell celično invazijo testih. Te teste smo izvedli v pogojih, kjer dodamo ni eksogeni CCR4 receptorski ligand. Je bilo možno, da obstajajo različni mehanizmi za urejanje tumorskih celic invazijo s CCR4, posredovanega z ligandom neodvisen način, skladen s fenomenom citoplazemskega vzorca CCR4, ki je povezano z visoko invazivne obnašanje tumorskih celic v GC tkivu. Potrdili smo, da je prekomerno izražanje CCR4 tesno povezano z višjo stopnjo tumorja invazivnosti, kar nakazuje, da bi lahko CCR4 prekomerno ekspresijo daje metastatskega potenciala v GC celicah ter nadalje spodbujati napredovanje tumorja. tudi Domnevali smo, da so bili avtokrin CCR4 ligande vključeni tudi v mobilni gibljivost vitro
. Koncentracije CCL22 v kulturnih celičnih linijah Supernatant GC transfektiranih z ali brez CCR4 bile precej nizka, kot smo ocenjevali (podatki niso prikazani). Vendar pa te možnosti ni mogoče izključiti, da bi lahko avtokrin ali parakrin proizvodnja CCL22 prispeva k tumorske invazije preko CCL22 /CCR4 os in vivo
. CCL17 in CCL22, kot visoko afiniteto CCR4 ligandi, ki ga proizvaja GC in drugih rakavih tkiv. Zlasti, CCL22, ki se proizvaja bodisi z rakavimi celicami ali tumor povezan makrofagov, so poročali, da se vključijo v metastaz več raka [15-17]. To kaže na morebitno avtokrin /parakrin zanko vključuje CCL22 in CCR4 med različnimi vrstami celic.

MMP-2 in MMP-9 so najbolj zadeva, in dobro opisane MMP z močnim proteolitično aktivnost v ekstracelularnega matriksa (ECM). Skladnost med realnem času testov RT-PCR in želatina cimografijo eksperimentov je jasno pokazala, da prekomerno ekspresijo CCR4 v želodcu rakavih celic znatno povečala MMP-9 izražanja in aktivnosti. Ti poskusi še dodatno poudaril in izrazil dejansko vlogo v tumorske invazije pod določenimi pogoji, z ali brez stimulacije s strani eksogeno CCL22. Menijo, da matrica MMP-9 degradira kolagena tipa IV, ki je glavna sestavina bazalne membrane, ki je povezano z rakavih celic invazije in metastaz pri bolnikih z rakom želodca [34]. Tukaj smo zagotovili nove namige o osnovni mehanizem, ki bi CCR4 spodbujanje želodčni rak celic invazijo s uravnavanjem MMP-9. Podobne ugotovitve so bile tudi v zvezi s tumorsko invazijo prek nekaterih kemokine receptorjev, kot CXCR4 in CCR7 [19, 20, 22]. In MMP-2, katerega struktura je podobna MMP-9, so poročali tudi, da je povezana z rakom želodca [35]. Vendar smo ugotovili, MMP-9, vendar ne MMP-2, je ključna molekula sodeluje pri CCR4 posredovana tumorske invazije, kar je lahko posledica različnih pomožnih regulatorjev, ki sodelujejo z CCR4 v različnih mikrookolje. Čeprav MMP-2 ekspresijo v CCR4 transfektirali želodčnih rakavih celic zdelo prav tako višja kot v modelno transfektirali celicah je bila razlika statistično nepomembna (podatki niso prikazani). sposobnost preživetja celic testa so pokazali, da je čezmernim CCR4 ne vpliva na rast želodčni rak celic in vitro
, kar je bilo v skladu s predhodnimi študijami, ki so pokazali na CCR4 ligande ni, lahko pride do proliferacije celic [14], s čimer se izognemo možnosti ki lahko vplivajo na indeks invazijo ali MMP-9 znesek. Te analize so bile izvedene z ali brez zunanjega CCL22, z velikimi razlikami v MMP-9 izražanja med CCR4 in navidezno transfektirane celice. Mi špekulirajo možne mehanizme okrepljenega MMP-9 izražanja, ki ga CCR4-prekomerno morda delno zaradi avtokrinskega ali parakrin izražanja CCL22 in vivo
. Še drugi MMP, ki se lahko sodelujejo v tem procesu in natančne signalne poti ostali treba nadalje raziskati v prihodnje.

Na koncu smo poročali prvič, da je bil CCR4 odklonsko preveč izražen v raku pN0 želodca in bi lahko spodbujali tumorja invazijo. Poleg tega so naši podatki kažejo, da bi lahko CCR4 inducirane MMP-9 proizvodnja vsaj delno pod nov mehanizem za CCR4 posredovano tumorske invazije. Tako bi antagonisti CCR4 biti koristne kandidatov za nadzor zgodnje dogodke v napredovanje tumorja.

Podpora Informacije
S1 Sl. Čezmerno CCR4 ni imel nobenega vpliva na rast želodčni rak celic v
. Vitro
Po transfekciji s CCR4 ali modele plazmida in stimulacijo z ali brez eksogenega CCL22, SGC-7901 in BGC-823 celice reseeded v 96-dobro ploščo. sposobnost preživetja celic je bila ocenjena z CCK8 testom na označenih časovnih točkah
doi:. 10,1371 /journal.pone.0120059.s001
(TIF)

• Plos ONE: Čezmerno evkariontskih Translation Začetek Factor 5A2 (EIF5A2) korelira z Cell agresivnosti in Poor preživetje v želodcu Cancer
• Plos ONE: Preživetje Pravilno jetrne arterije bezgavko metastaz pri bolnikih z želodčnim rakom: Posledice za D2 limfadenektomijo