PLoS ONE: Роль фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) и VEGF-R Генотипирование в руководстве метастатического процесса в pT4a резецировали рака желудка Patients

Абстрактный

В корне резекцию рака желудка возможность спрогнозировать сайт рецидив может быть клинически значимым для отбора после хирургического лечения. Ранее мы показали, что специфические опухолевые интегрины генотипы независимо связаны либо с брюшины или гематогенных метастазов (ITGA и ITGV). В последнее время VEGF и VEGF-R полиморфизмы Было продемонстрировано, что потенциально может повлиять ангиогенез опухоли и метастатического процесса в рак желудка. Затем мы исследовали роль VEGFs и VEGF-R генотипирование в определении либо перитонеальный карциноматоз или гематогенным метастазы в радикально резекции у больных раком желудка. Опухоль генотипирование для интегринов (ITGA и ITGV) также была проведена в соответствии с нашими предыдущими результатами. Генотипирование для VEGF-A, VEGF-C, VEGFR-1,2,3 и ITGA и ITGV проводили на pT4a радикально резецированных опухоли желудка повторяющимися либо с перитонеальным-только карциноматоз или гематогенных метастазов. 101 пациентов соответствовали критериям включения: 57 только с карциноматоз брюшины и 44 с гематогенным распространением только. При многомерном анализе, кишечная гистологии и генотип АС rs699947 (VEGFA) показал, независимо коррелируют с гематогенных метастазов (р = 0,0008 и 0,008 соответственно), в то время как диффузный гистологии и генотип АА rs2269772 (ITGA) независимо друг от друга коррелируют с перитонеального-только диффузии (р = &л; 0,0001 и 0,03 соответственно). Наши результаты, кажется, указывают, что объединение информации из генотипирования rs699947 (VEGFA, AC), rs2269772 (ITGA, АА) и опухоли гистологии может позволить врачам индивидуализировать рак желудка с высоким риском рецидива либо с брюшины или гематогенных метастазов. Инструмент выбора, вытекающие из этого анализа может позволить оптимальное использование имеющихся стратегий лечения у этих больных
<р> Цитирование:. Scartozzi M, Loretelli C, Галиции Е, Mandolesi А, Пистелли М, Bittoni А, и др. (2012) Роль фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) и VEGF-R Генотипирование в руководстве метастатического процесса в pT4a резецировали больных раком желудка. PLoS ONE 7 (7): e38192. DOI: 10.1371 /journal.pone.0038192
<р> Редактор: Kaustubh Датта, Университет штата Небраска медицинский центр, Соединенные Штаты Америки
<р> Поступила 24 января 2012 года; Принято: 1 мая 2012 года; Опубликовано 9 июля, 2012
<р> Copyright: © 2012 Scartozzi и др. Это статья с открытым доступом распространяется в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution, которая позволяет неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, что оригинальный автор и источник кредитуются

Финансирование:. Авторы не имеют никакой поддержки или финансирования сообщать
<р> конкурирующие интересы:.. авторы заявили, что не существует никаких конкурирующих интересов

Введение
<р> глобальный результат для радикально резекции у больных раком желудка остается практически неизменным через годы в западных странах, с 5-летней выживаемости в диапазоне от 15% до 35% всех случаев [1], [2]. Несмотря на многочисленные усилия, большинство клинических исследований, изучающие роль послеоперационные лечения показали противоречивые результаты.
<Р> В западных странах только польза скромное выживание, наблюдалось для адъювантной химиотерапии в основном в суммарном анализе и благотворное влияние химиорадиотерапии казалось, ограничивается пациентов, получающих недостаточную очистку лимфатической [3], [4].
<р> перитонеального карциноматоз может быть первым местом рецидива приблизительно от 40 до 50% пациентов, перенесших радикальную резекцию [5], [ ,,,0],6], [7]. На основе этих данных, потенциальная роль внутрибрюшинного химиотерапии в предотвращении перитонеального карциноматоза высказано предположение [6], [7]. Однако сдерживание заболевания с локорегионального лечения может оказаться недостаточным у пациентов с высоким риском развития гематогенных метастазов и должны быть лучше защищены только те, которые могут повторяться в брюшине без гематогенной диффузии. К сожалению, прогностическими факторами для сайта рецидива и потенциально в состоянии предложить персонализированный послеоперационную стратегии в значительной степени не хватает. Хотя многие клинические детерминанты были проанализированы в прошлом, лишь немногие из них оказались эффективно актуальными в прогнозировании сайт рецидива. Клинические и патологические факторы, такие как опухолевого серозный, опухоль гистологии (диффузный против кишечных), степень лимфаденэктомии и наличие опухолевых клеток в брюшную промывание во время лапаротомии, были указаны в качестве предсказанием для сайта рецидива рака желудка [4] , [8], [9].
<р> В предыдущем анализе мы обнаружили, что генотипирование rs2269772 ( ITGA
) и rs11902171 ( ITGV
) может представлять собой критический актив в определении высокого риска у больных раком желудка для перитонеального карциноматоз [10].
<р> Факторы роста эндотелия сосудов (VEGF) надсемейство было выявлено критически влияние ангиогенеза в солидных опухолях. Опубликованные данные свидетельствуют о том, что при наличии опухолевых факторов, связанных с ангиогенезом отдаленные метастазы, более вероятно, происходят [11], [12].
<Р> Интересно, что было также продемонстрировано, что ангиогенный фенотип может отличаться от кишечно-типа и диффузного типа рака желудка. В разных анализов опухоли кишечного типа, кажется, на самом деле биологически более зависимой от ангиогенеза, чем опухоли диффузного типа [13], [14], [15].

однонуклеотидных полиморфизмов (SNP) в роста эндотелия сосудов факторы (VEGF) и рецепторов VEGF (VEGF-R) генов коррелировали с опухолью неоангиогенезом через различные биологические механизмы. У пациентов с колоректальным раком специфических полиморфизмов в VEGF-R2 было показано, что существенное влияние на плотность микрососудов [16]. Конкретные ОНП в гене VEGFA привели в состоянии определить ответ на химиотерапию через модуляцию структуры опухолевых кровеносных сосудов и функции [17].
<Р> Опухоль лимфангиогенез строго зависит от биологической активности VEGFC и VEGF-R3 [ ,,,0],18], [19]. Интересно лимфатической диффузия наряду с прямой колонизации раковых клеток также являются важным, но биологически различны, шаги для перитонеального распространения. Исходя из этих предположений, мы можем выдвинуть гипотезу о том, что измененное выражение VEGFC /VEGFR-3 пути может влиять на перитонеальный распространение раковых клеток через лимфатическую систему [20]. С другой стороны, путь VEGFC /VEGF-R3 было также продемонстрировано отношение к гематогенного распространения рака, а также [21].
<Р> Предсказание расположение рецидива среди лиц высокого риска может позволить с учетом адъювантной подходов. Поэтому мы исследовали роль опухолевых VEGFs и VEGF-Rs полиморфизмов в определении либо перитонеальный карциноматоз или гематогенным метастазы в радикально резекции у больных раком желудка. Клинические данные и результаты SNPs для опухолевых VEGFs, VEGF-R и интегринов были проанализированы с целью предложить биологически управляемый профиль для использования в качестве инструмента для соответствующего выбора обработки в соответствующем пациента.

Методы

пациенты Выбор
<р> пациентов популяция исследования была выбрана из центральной базы данных, включая пациентов, страдающих от рака желудка, работающих в четырех различных учреждениях нашего региона. Классификация Т, N и М-факторов было сделано в соответствии с цифровой системой, введенной 7 ^{й TNM.
<Р> Только пациенты, которые повторялись в течение 2-х лет, либо с перитонеального-только карциноматоз или гематогенным метастазы после лечебной резекции желудка для аденокарциномы желудка pT4a, которые не получали адъювантной химиотерапии и чьи опухоли образца была доступна, были отобраны для опухоли генотипирования. У больных с отдаленными метастазами либо в момент постановки диагноза или в присутствии эксфолиативных опухолевых клеток в перитонеального лаважа, полученной во время лапаротомии, были исключены из анализа. Мы решили ограничить наш анализ пациентов с опухолями pT4a, как эта группа пациентов с повышенным риском перитонеального диффузии и часто считается для локорегионального лечения, такие как внутрибрюшинного химиотерапии. Однако не незначительная часть этих больных не повторялись локально и, следовательно, инструмент выбора в этой ситуации было бы особенно ценным активом для лечащего врача. Поскольку большинство рецидивов регистрируются в течение 2 лет с момента постановки диагноза мы решили исключить пациентов возвращающиеся после этого периода времени для того, чтобы получить однородную популяцию.
<Р> Последующая деятельность по итогам обеих групп (перитонеальный или только гематогенные метастазов) произошло в три месяца интервалы. Последующая деятельность состояла из физического осмотра, полный анализ крови, рентгенографию грудной клетки и УЗИ брюшной полости или КТ по ​​клиническим показаниям. Сайт и дата первого рецидива и дата смерти были записаны}

Этика Заявление
<р> Это исследование было одобрено этическим комитетом AOU Ospedali Riuniti -. Умберто I нашего института. Все пациенты дали письменное информированное согласие.

Опухоль VEGF и VEGF-R генотипирование
<р> и VEGF VEGF-R генотипирование проводили на формалином парафиновых встраиваемый блок ткани (около 30 мг) первичной образцы желудочного рака.
<р> парафин удаляли с помощью ксилола и образцы промывали дважды со 100% -ным этанолом. ДНК выделяли из deparaffinised ткани с использованием изоляции Kit RecoverAll ™ Total нуклеиновая кислота FFPE ТКАНЕЙ (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA), в соответствии с инструкциями изготовителя. ДНК из каждого образца затем элюировали в 120 мкл элюирование раствора.
<Р> одиночных нуклеотидных полиморфизмов (SNP) в пределах каждого гена были выбраны с помощью программного обеспечения Pupasuite (http://pupasuite.bioinfo.cipf.es/index~~HEAD=dobj. JSF - версия 2.0.0, bioinfo 2008), база данных СКЗИ полиморфизм единичного нуклеотида (dbSNP), порожденную Национальный центр информации по биотехнологии (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/SNP) и обзор хода работы медицинской литературе, используя следующие критерии:

полиморфизм имел некоторую степень вероятности того, чтобы изменить структуру или экспрессию гена в биологически соответствующим образом (то есть влияет на ESE последовательности, 3 'UTR или промоторную область);

малая частота аллеля была выше на 10% (с единственным исключением rs2305948, rs6877011 и rs307822);.
<литий> генетический полиморфизм был создан и хорошо документированный

<р> Дальнейшие соображения вынудили выбор ОНП для нашего исследования. Корреляция между наличием определенного аллеля на полиморфный сайт и экспрессии соответствующего белка был задокументирован ранее для VEGF [22], [23]. ОНП в регуляторных последовательностей, таких как интроны и 5 'и 3' UTRs, было показано, что изменить мРНК стабильности [24], [25] обработки эффективности [26], изоформы выражение [27], [28] и локализации [29] , Кроме того, регуляторные последовательности мотива в пределах 3 'UTR мРНК было показано, что влияет на стабильность мессенджера и /или его трансляционной эффективности [28]. Таким образом, можно утверждать, что ОНП в этих последовательностей, могут влиять на VEGF и экспрессию гена VEGF-R. Кроме того, на этих базах, мы выбрали ОНП известно, влияют на экспрессию VEGF и VEGF-R и те, которые расположены в регуляторных последовательностей, для которых предполагаемая роль в регуляции белка можно предположить.
<Р> Во всем мире мы предположили, что выбранный ОНП имел . влияние на экспрессию белка и, следовательно, на биологической функции
<р> Выбранные ОНП распределились следующим образом: шесть полиморфизмов в гене VEGFA (rs10434, G > A; rs2010963, G &° с; rs25648, C ≫ T; rs3025039, C > Т; rs699947, А &° с; rs833061, C > Т), два в VEGFC (rs4604006, Т &° с; rs7664413, C > Т), два в VEGF-R1 (FLT1) (rs664393, G > А; rs7993418, > G), четыре в VEGF-R2 (KDR) (rs1870377, A > T; rs2071559, A > G, rs2305948, G > A; rs7667298, A > G) и три в VEGF-R3 (FLT4) (rs307805, > G, rs6877011, C > G; rs307822, G > A). локализациях, положения и биологические эффекты исследуемого VEGF и VEGFR ОНП были обобщены в таблице 1.
<р> SNP генотипирование проводили TaqMan технологии, с использованием SNP генотипирования продуктов (Applied Biosystems). была проведена полимеразная цепная реакция (ПЦР) и генотипы были проанализированы на 7300 Real-Time PCR System (Applied Biosystems) с использованием ABI Prism 7300 программное обеспечение Последовательность Detection System (версия 1.3.1, Applied Biosystems). Каждая реакция содержала 0,2 мкл общей геномной ДНК. Генотипирование проводили персоналом лаборатории ослеплены состояния пациента, и случайное 10% образцов были повторены для проверки процедур генотипирования.
<Р> Все ОНП генотипирование было представить общий уровень вызовов на ≥90% должны быть включены в наш анализ.

опухоль Integrins генотипирование
<р> генотипирование для опухолевых интегринов независимо друг от друга, связанных либо с брюшины или гематогенных метастазов в нашем предыдущем исследовании (генотипы а и г rs2269772, ITGA
и G и C генотипы rs11902171, ITGV
) проводили, как описано ранее [10].

Статистический анализ
<р> Статистический анализ был проведен с программным обеспечением версии MedCalc 10.4.8 для Windows. Связь между категориальными переменными оценивали с помощью критерия хи-квадрат. Логистический регрессионный анализ был использован для оценки независимой роли переменных привела значимыми при однофакторного анализа
<р> Тестируемые переменные включали секс (мужскую и женскую), возраст (&65 Лт; Yrs против ≥ 65 лет)., Отсутствие или наличие метастазов в лимфатических узлах (pN0 против Pn +), тип лимфаденэктомии (D1 по сравнению с D2), опухоль гистологии в соответствии с классификацией Лорен (кишечная против диффузным), лимфатической /кровеносных сосудов инвазия (наличие против отсутствия), клинический центр где была проведена операция, интегрины генотипирования (генотипы а и г rs2269772, ITGA
и G и C генотипы rs11902171, ITGV
) и каждый из VEGF и VEGF-R полиморфизм.
<р> отношение шансов на (отношение шансов) исход в 2-х группах (перитонеальный карциноматоз только и гематогенные метастазы) рассчитывали с 95% доверительного интервала. Значительный уровень 0,05 был выбран для оценки статистической значимости.
<Р> Все полиморфизмы были исследованы на отклонение от Харди-Вайнберга с использованием Powermarker v. 3.25 пакет (www.statgen.ncsu.edu/powermarker~~HEAD=dobj).
<р> неравновесия по сцеплению (LD) анализ был также осуществлен с использованием Powermarker v. 3.25 пакет (www.statgen.ncsu.edu/powermarker~~HEAD=dobj). LD оценивали с помощью r2, с r2 = 1 указывает на полное LD и R2 = 0 указывает на отсутствующую LD.

Результаты

Харди-Вайнберга и неравновесном сцеплении
<р> Частоты протестированные генотипы привели сопоставимы с теми, сообщили в кавказцев, без существенного отклонения от равновесия Харди-Вайнберга.
<р> неравновесном сцеплении не наблюдалось для опухолевых генотипов независимо коррелирует ни с брюшины или гематогенных метастазов.

пациенты Характеристики
<р> сто один пациентов были доступны для нашего анализа: 66 мужчин и 35 женщин, средний возраст на момент постановки диагноза 67 лет (диапазон 34-89). Последующие данные были доступны для всех пациентов, включенных. Последующая деятельность состояла из физического осмотра, полный анализ крови, рентгенографию грудной клетки и УЗИ брюшной полости или КТ /МРТ по клиническим показаниям. Были рассмотрены только те пациенты, которые исключительно развитые либо перитонеальный карциноматоз или гематогенным метастазами в течение всего курса их болезни.
<р> Все пациенты подверглись радикальной операции (R0) для pT4a рака желудка, региональные лимфатические узлы были отрицательными для метастазов (pN0) в 23 пациентов (23%). Большинство пациентов прошли лимфаденэктомия D2 (94 случаев, 93%). Отчет показал Патология кишечника гистологию в 51 случаях (51%) и диффузный гистологию у 50 больных (49%) (таблица 1). Пятьдесят семь пациентов (56%) развилась диффузия опухоли брюшины карциноматоз только, в то время как гематогенные метастазы были диагностированы у остальных 44 пациентов (44%). Клинико-патологическими переменные обеих групп (карциноматоз-только и гематогенные метастазы) были сопоставимы за исключением опухоли гистологии. Все основные клинические и патологические характеристики приведены в таблице 2.

Опухоль VEGF и VEGF-R генотипирование
<р> Все ОНП генотипированы представил общий уровень обработки вызовов на ≥90%.
<Р> Повторные образцы для проверки генотипирования подтвердили результаты, полученные с помощью предыдущего анализа во всех случаях.
<р> опухоли желудка, показывающие генотип АА rs10434 ( VEGFA
), АС генотип rs699947 (VEGFA) и Г.Г. генотип rs7993418 (Flt1) привело к более склонны к гематогенных метастазов (перитонеальный карциноматоз против гематогенные метастазы: 8% против 27%, р = 0,02; 30% против 59%, р = 0,006 и 2% против 16%, p = 0,02 соответственно) (таблица 3). Никакой корреляции не было обнаружено между этими опухолевыми генотипов и перитонеального-только диффузии.
<Р> Анализ остальных полиморфизмов VEGF и VEGF-R не показали никакой корреляции с либо перитонеального карциноматоз или гематогенных метастазов (таблица 4).

опухоль Integrins генотипирование
<р> в мировом масштабе приводит к опухоли интегринов генотипирования подтвердили наши предыдущие выводы.
<р> Пациенты опухоли с генотипом GG rs2269772 ( ITGA
) привели в меньшей степени подвержены перитонеального карциноматоз (перитонеальный карциноматоз против гематогенные метастазы: 39% и 77% больных соответственно, р = 0,002), тогда как АА генотип rs2269772 ( ITGA
) был чаще связан с перитонеального карциноматоз (перитонеального карциноматоз против гематогенные метастазы: 25% и 5% больных соответственно, р = 0,014). CC генотип rs11902171 ( ITGV
) был чаще связан с перитонеального карциноматоз (перитонеальный карциноматоз против гематогенного метастазов: 21% и 5% больных соответственно, р = 0,016). Напротив, пациенты с генотипом GG rs11902171 в ITGV
гена разработанного перитонеального карциноматоз реже, чем гематогенные метастазы (перитонеальные карциноматоз против гематогенные метастазы: 42% и 66% пациентов соответственно, р = 0,02) .

Другие клинические /патологические факторы
<р> Среди других тестируемых переменных, опухоль диффузного гистологии показали корреляцию с перитонеального карциноматоз (брюшины карциноматоз vs. Hematogenous метастаз: 81% и 9% пациентов, соответственно, р &л; 0,001), в то время как опухоль кишечной гистологии была связана с гематогенных метастазов (перитонеальный карциноматоз против гематогенного метастазов:. 19% и 91% пациентов соответственно, р &л; 0,001) (таблица 2)

Многофакторный анализ <бр>

при многомерном анализе, кишечная гистологии и генотипа переменного тока rs699947 (VEGFA) показал, независимо коррелируют с гематогенных метастазов, тогда как диффузного гистологии и генотипом АА rs2269772 (ITGA3) независимо друг от друга коррелировали с перитонеального только диффузия (р = 0,001 ). Результаты отношение шансов для этих последних факторов подтвердили свою роль в руководстве опухолевых клеток посредством метастатического процесса по направлению к брюшине или гематогенных сайтов (таблица 5).

Обсуждение
<р> Введение нескольких терапевтических возможностей для после хирургического лечения радикально резекции у больных раком желудка открыл вопрос о выборе оптимального пациентов. К сожалению важным сдерживающим фактором для потенциала этих вариантов лечения представлен недостающий клинических и биологических факторов, способных предсказать сайт рецидива. Сдерживание заболевания с локорегионального лечения, такие как внутрибрюшинного химиотерапия может быть фактически неадекватной у больных с высоким риском развития гематогенных метастазов и должна быть лучше, зарезервированное для пациентов с наибольшей вероятностью повторялись с перитонеального только для диффузии. С другой стороны, у пациентов с большей вероятностью повторялись с гематогенных адъювантной химиотерапии метастазов может представлять собой более эффективную стратегию
.

По нашему опыту rs699947 (VEGFA, AC) полиморфизм независимо друг от друга связано с более высоким риском гематогенного метастазирования с оператором ИЛИ 8,08 (95% ДИ 1.7-37.5, р = 0,008). ОНП в промоторной области гена VEGF были уже продемонстрированы повлиять на пациентов исход в ободочной и прямой кишки, молочной железы и рака желудка [17], [30], [31]. Биологический вмешательство на функции гена VEGF, вызванное полиморфных вариантов в области промотора, в действительности могло определить измененную экспрессию гена. Это может как увеличить опухоли, связанные с про-ангиогенез потенциал и в конечном итоге вести метастатического процесса за счет образования новых кровеносных сосудов [16], [17], [30], [31]. Однако никакие данные не доступны о роли VEGFs и VEGF-Rs генотипирования при определении метастатического процесса в радикально резекцию рака желудка. В большинстве исследований изучены лишь несколько ОНП потенциально вовлеченных в ангиогенез опухоли, в то время как в настоящем исследовании нескольких ОНП в генах VEGFs и рецепторы были проанализированы на глобальном уровне наряду с другими известными детерминант.
<Р> Как было описано ранее rs2269772 (ITGA, А.А. ) генотип опухолевых интегринов подтверждено, независимо друг от друга значение при определении перитонеальный диффузии клеток рака желудка [10). Этот вывод, вытекающие из многофакторного анализа, включая опухолевые ангиогенеза факторов, связанных с сильно предполагает, что эта специфическая опухоль интегрин полиморфизм следует рассматривать в будущих исследованиях. Напротив наш анализ не может подтвердить роль опухолевых интегринов при определении гематогенная диффузии. Мы знаем из ранее опубликованных аналитических исследований, которые повышающая регуляция интегринов подклассы могут повысить опухолевые клетки моторику и экспрессию VEGF [32],. Integrins может, следовательно, теряют свою функцию при определении диффузии гематогенная опухоли, когда факторы ангиогенеза, связанные с уже активирована.
<Р> Опухоль гистологии привел еще один фактор, независимо друг от друга, способного идентифицировать желудка потенциал рака, чтобы определить, либо брюшины или гематогенным метастазами. Тем не менее опухоль гистологии в одиночку не представляется достаточным, чтобы точно предсказать метастазирования. По нашему опыту, аналогично предыдущим сообщениям, соответствующее доля пациентов развилась брюшины карциноматоз или гематогенным метастазами независимо друг от опухоли гистологии. Аналогичные соображения, которые могут быть применены к наличию опухолевого серозную и /или вспученного раковых клеток в перитонеального лаважа. Не все опухоли желудка с серозной инфильтрацией в конечном итоге развивается карциноматоз и отрицательным перитонеального лаважа, к сожалению, не исключает будущей перитонеальный диффузии [8], [9]. Мы показали, что генотипирование rs699947 (VEGFA, AC) и rs2269772 (ITGA, АА) имеют самостоятельную роль в определении метастатического участок клеток рака желудка даже при гистологии опухоль включены в анализ. Наши результаты, как представляется, то, чтобы указать, что объединение информации из генотипирования rs699947, rs2269772 и опухоли гистологии может позволить врачам индивидуализировать рак желудка с высоким риском рецидива либо с перитонеальный или с гематогенных метастазов среди пациентов, перенесших кажущейся радикальной операции по поводу рака pT4a без слущенных раковых клеток в перитонеального лаважа. В нашем исследовании генотипирования ДНК проводили только на опухолевой ДНК, и это может представлять собой ограничение для интерпретации данных
.

В мировом масштабе мы считаем, что генотипирование для конкретного VEGFA и интегрином генов могут представлять собой критический актив в определении метастатического диффузии радикально резецированных больных раком желудка. Радикально резецированные больных раком желудка с высоким риском рецидива брюшины могут быть оптимальными кандидатами для внутрибрюшинного терапии, в то время как если риск гематогенных метастазов преобладает системная химиотерапия может представлять собой лучший вариант. Инструмент выбора, вытекающие из этого анализа может затем позволить оптимальное использование имеющихся стратегий лечения и должна представлять собой возможный фактор стратификации в будущих исследованиях у этих больных.

• PLoS ONE: N-Myc Вниз по течению регулируемого гена 1 (NDRG1) Способствует Метастазы клеток человека скиррозных рака жел…
• PLoS ONE: Влияние лимфатического узла Номер на выживаемость больных с лимфоузла негативный рак желудка в соответ…