PLoS ONE: heat shock protein 60 Prekomjerna ekspresija povezana s napredovanjem i prognozu u želučanom Cancer

Sažetak pregled

Pozadina pregled

heat shock protein 60 (hsp 60) je chaperonin s esencijalnim funkcijama za stanicu fiziologija i opstanak i njegova ekspresija korelira s prognozom u brojnim malignosti. Cilj ovog istraživanja je utvrditi odnos HSP60 status sa kliničkopatološkim parametara i prognoze u raka želuca. Pregled

Metode

Razine hsp 60 i matrica metalopeptidaze 9 (MMP-9) antigen ocjenjuje imunohistokemijski na 223 uzoraka karcinoma želuca. Povezanost između hsp 60 i MMP-9, kliničkopatološkim parametara i prognozi raka želuca je ispitan. Pregled

Rezultati

Razina HSP60 proteina značajno povezana s dubine invazije, limfnih čvorova metastaza i stadiju bolesti (sve P izvoznici < 0,05). Oba univarijantna i multivarijatna analiza pokazala je da Hsp60 bila samostalna prognostički čimbenik i za ukupno preživljenje (OS) i opstanak recidiva bez (RFS) (i P izvoznici < 0,05). Nadalje, hsp 60 prekomjerna ekspresija bila povezana s lošom prognozom u bolesnika s uznapredovalim rakom želuca u različitim rizičnim skupinama. Štoviše, hsp60 značajno korelira s MMP-9 između 223 želučane tkivu karcinoma ( P pregled < 0,001). Pacijenti koji su imali hsp 60 ekspresiju, u kojem tumorske stanice prikazan visoke invazivnosti, imali slabu OS i kraće RFS. Pregled

Zaključak pregled

hsp 60 igra važnu ulogu na tumorske agresivnosti i prognozu, a može djelovati kao obećavajuća meta za prognostički predviđanje pregled

Izvor:. Li XS, Xu Q, Fu Xy, Luo Ws (2014) protein toplinskog šoka 60 Prekomjerna ekspresija povezana s napredovanjem i prognozu u rak želuca. PLoS ONE 9 (9): e107507. doi: 10,1371 /journal.pone.0107507 pregled

Urednik: Francesco Cappello, Sveučilište u Palermu, Italija pregled

Primljeno: 28. lipnja 2014; Prihvaćeno: 12. kolovoz 2014; Objavljeno: 10. rujna 2014 pregled

Copyright: © 2014 Li i sur. Ovo je otvorenog pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan pregled

Data Dostupnost:. The autori potvrđuju da su svi podaci na kojima se temelji nalaze u potpunosti na raspolaganju bez ograničenja. Svi relevantni podaci se uključuju u rad pregled

Financiranje:.. Autori nemaju podršku ili sredstva za prijaviti pregled

suprotstavljenih interesa. Autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled

Uvod pregled

rak želuca je jedan od vodećih uzroka smrti od karcinoma povezanih u svijetu zbog svoje učestalosti, loša prognoza i ograničenih mogućnosti liječenja [1]. Kompletan resekcija tumora i susjednih limfnih čvorova je jedini učinkovit tretman za liječenje [2]. Nažalost, nakon potpune resekcije, stopa preživljavanja od 5 godina i dalje je niska. [3] Nekoliko je studija pokazalo da su različite genetske i epigenetski promjene su uključeni tijekom karcinogeneze i napredovanje raka želuca [4] - [6]. Međutim, molekularni mehanizam uključen u razvoj raka želuca ostaje nejasno. Pregled

proteini toplinskog šoka (hsp) su skup evolucijski konzerviranih proteina. Hsp klasificirani u različite pod-porodica na temelju njihove molekularne mase [7] ili sustavnih gena simboli [8]. U širem smislu, u sisavaca, četiri glavne porodice HSP priznaje: HSP90 (HSP90α, HSP90β, GPR94), HSP70 (HSP70, HSC70, mHSP70, Grp78), hsp60 i malih Hsp (HSP27, αB-kristalin, HSP22). Akumulacija krivo strukturiran proteina u stresnim stanica, aktivira izraze hsp, koji sprečavaju agregaciju proteina i olakšati presavijanjem ili eliminaciju pogrešno savijenog proteina u svojim kapacitetima kao pratiocima [9]. Nedavno je objavljeno da vezani na značajno su povezane s karcinomima [10]. Pregled

hsp 60 (koji se nazivaju Cpn60) uglavnom sadržano u mitohondrija matrice, iako je također bio otkriven na ekstra-mitohondrijska stranicama [11 ]. Hsp60 pomaže u sklapanju mitohondrija proteina i olakšava proteolitičku razgradnju krivo strukturiran i denaturiranih proteina u ATP-ovisan način [12]. Nedavno je njegova uloga i primjena u razvoju ljudskog karcinoma i trenutno aktivno istražuju, a rezultati su vrlo ohrabrujući [13]. Hsp 60 izgleda kao da ima potencijal u područjima dijagnozu, prognozu, te prevenciju i liječenje različitih oblika raka kod ljudi, uključujući i jednjaka karcinom pločastih stanica [14], bronhijalna karcinogeneze [15], rak debelog crijeva [16] i glioblastom [17]. Međutim, uloga hsp 60 na prognozu bolesnika s rakom želuca ostaje nejasno. Pregled

U ovoj studiji, procjenjuje razinu hsp60 u želučanim tkiva raka imunohistokemijski. zatim analizirana Korelacije HSP60 statusa sa kliničkopatološkim parametara i preživljavanje pacijenata s rakom želuca. Osim toga, objavljeno je da je MMP-9 ima važnu ulogu u želučanom povratka bolesti i prognozu [18]. Zbog toga smo također istraživali odnos HSP60 i MMP-9 proteina raka želuca. Pregled

Ispitanici i metode

Pacijenti i Primjerci pregled

Istraživanje je odobreno od strane Institutional Review odbor odbor i ljudska etika povezanih bolnici Guilin Medicinskom fakultetu Sveučilišta. Pismeni pristanak za korištenje uzoraka za istraživačke svrhe, koji je dobiven od svih bolesnika prije operacije. Pregled

Želučani tkiva karcinoma dobivene su iz gastrektomije primjeraka 223 pacijenata s odjela opće kirurgije, povezanog bolnice u Guilin Medical University ( Guilin, Kina). Svi su postupci provedeni u razdoblju od siječnja 2005. do prosinca 2008. godine kriterije trenutnoj studiji bili su kako slijedi: (1) patološko ispitivanje potvrđuje prisutnost raka želuca i iskusni radikalne operacije, (2) kompletna osnovni klinički podaci, (3 ) nepostojanje ikakvog prethodnog tretmana za rak, i (4) nema ozbiljnih komplikacija ili druga maligna bolest. Bilo je 144 muškaraca i 79 žena (srednja dob, 58,0 godina; raspon, 22-82 godina). Relevantni klinička patološke karakteristike (Tablica 1) su svi dobiveni iz datoteka pacijenata. Tumor faza je klasificirati prema 7. Union International kontrole raka (UICC) TNM sustava [19]. Pregled

Imunohistokem bojenje

korišteni pregled je ukupno 223 uzoraka karcinoma želuca u imunohistokemijski (IHH ) analiza. Prema protokolu [20] za IHC na dijelovima tkiva u parafin-ugrađen, parafin uklopljenih blokovi su razdvojeni oko 4 um debljine. Objektna stakalca su pečena na 60 ° C tijekom 2 h, deparafmizirani ksilenom i rehidrirane korištenjem gradijenta alkohol (100% alkohola i 95% alkohola, 80% alkohola i 70% alkohola). Predmetnice tkiva su zatim tretirane s 3% vodikovog peroksida u metanolu tijekom 30 min kako bi se zaustavila Aktivnost endogene peroksidaze, a antigeni su dobiveni u 0.01 M natrij citrat puferu (pH 6,0), pomoću u mikrovalnoj pećnici. Nakon 30 min prethodne inkubacije na 10% normalnom kozjem serumu za sprječavanje nespecifične bojenje, uzorci su inkubirani preko noći upotrebom primarnih antitijela, ili anti-hsp60 (Abcam, # ab31115, UK, razrjeđenje 1:200) ili anti-MMP-9 ( Abcam, # ab38898, Velika Britanija, razrjeđivanje 1:200), u vlažnoj posudi na 4 ° C. Predmetnice tkiva su tretirane s ne-biotin sustav za otkrivanje je hren peroksidaza-u skladu s uputama proizvođača (Gene Tech). Rezultati IHC su ocijenjeni od strane dva nezavisna ispitivača znao identitet pacijenata i kliničkom stanju. U proturječne slučajevima, patolog pregledao slučajeve, a postignut je konsenzus pregled

hsp 60 i MMP-9 bojanja intenziteti su ocijenjene na skali od 0-3 prema postotku pozitivnih tumora (0, <. 5% pozitivnih stanica, 1, 5-10% 2, 11-50%, ili 3, > 50%). Razina je vrlo niska za 0, niska za 1, umjerena za 2 i visoke 3 (Sl. 1). Razine hsp 60 i MMP-9 su bili klasificirani kao negativni za rezultate ≤1 i pozitivan za rezultate ≥2. Pregled

Follow-up pregled

Trajanje follow-up je definirano kao interval između datum operacije i datum smrti ili zadnji praćenja. Istraživanje je cenzuriran 30. rujna 2013. Medijan praćenja razdoblje je 27.0 mjeseci (raspon, 4-82 mjeseci) u 223 bolesnika. Svi bolesnici su praćeni svakih 1-3 mjeseci u prvoj godini i svakih 3-6 mjeseci nakon toga. Ponavljanje potvrđeni su tumorski markeri razinama, uključujući CEA, AFP, karbohidratni antigen 19-9, ca125 i CA724, B-tipa ultrazvučnom pregledu svaka 3 moljaca i kompjutoriziranom tomografijom (CT) ili magnetsku rezonanciju (MRI) svakih 6 mjeseci nakon gastrektomije. Glavni uzroci smrti bile su želuca povratka bolesti. Ukupno preživljenje (OS) izračunata je iz datuma operacije do datuma smrti ili zadnji praćenja. Ponavljanje bez preživljavanje (RFS) definirana je kao od datuma operacije do datuma recidiva ili iz razdoblja resekcija do datuma zadnjeg promatranja snimljene. Pregled

Statistička analiza pregled

Sve statističke analize su provedene korištenjem SPSS (verzija 16.0, Chicago, IL, USA). Međuovisnost između hsp 60 i kliničkih podataka izračunat je pomoću hi-kvadrat test, a prikazani su u poprečnom tablicama. Korelacija hsp60 s MMP-9 je izračunata Pearson X2 testa. Krivulje preživljavanja su nacrtane pomoću Kaplan-Meier metodi i analizirani pomoću log-rank testa. Sve prijavljene P
vrijednosti su obostrani i P pregled. ≪ 0,05 smatrana je statistički značajna pregled

Rezultati

Udruga hsp 60 s kliničkopatološkim varijabli pregled

Da se razjasni biološki značaj hsp 60 u karcinomu želuca, ispitali smo imunohistokemijsku razinu hsp60 u želučanim tkiva raka (Sl. 1). Hsp60 obojenje uglavnom se nalazi u citoplazmi stanica tumora. Pozitivna stopa hsp 60 je 58,3% (130/223) u uzorcima karcinoma želuca. Pregled

Prema rezultatima imunohistokemijski, u korelaciji smo status Hsp60 u 223 želučanih uzoraka raka s osam drugih naširoko priznat kliničko parametara (Tablica 1 ). Naše analize su pokazali da je razina hsp60 kod raka želuca je značajno korelira s dubinom invazije ( P pregled = 0,043), limfnih čvorova metastaze ( P pregled = 0,018) i stadiju bolesti ( P pregled = 0,048), ali nije bio povezan sa spolom, dobi, veličini tumora, tumora stranice i stupanj diferencijacije ( P izvoznici > 0,05) (Tablica 1). Naime, korelacija HSP60 statusa s istaknutom seroznog invazije i limfnih čvorova metastaza pozitivnosti sugerira potencijalnu ulogu hsp60 povećanom invazije i metastaziranja raka želuca. Pregled

Utjecaj tumora HSP60 razini proteina na prognozu Netlogu

Kako bi se dodatno utvrditi učinke hsp 60 na OS i RFS, prvo izvedena Jednosmjerna analiza tradicionalnih kliničko varijable za prognozu. Rezultati univarijatne analize prikazani su u tablici 2. Prekomjerna ekspresija Hsp60 ( P pregled = 0,001), veća veličina tumora ( P izvoznici < 0,001), tumor stranica ( P pregled = 0,014), istaknuti serozne invazija ( P izvoznici < 0,001) i limfnih čvorova metastaze ( P izvoznici < 0,001) statistički su značajno povezane sa slabom brzinom OS pacijenata s rakom želuca , Osim toga, Kaplan-Meier analiza pokazala je da je prekomjerna ekspresija hsp60 ( P pregled = 0.002), veće veličine tumora ( P pregled i 0,001), tumor stranica ( P pregled = 0,008), istaknuti serozne invazija ( P izvoznici < 0,001) i limfnih čvorova metastaze ( P izvoznici < 0,001) bili su negativni prognostički čimbenici za RFS u bolesnika s rakom želuca (Tablica 2). Nadalje, za procjenu nezavisnog utjecaj HSP60 prekomjernom ekspresijom na OS i RFS, a Multivarijantna Cox regresijska modela prilagođen veličini tumora, tumora stranice, dubini invazije, limfnih čvorova metastaza i hsp 60 je izvedena. Naši rezultati pokazuju da Hsp60 status bio siromašan nezavisni prognostički čimbenik za OS u bolesnika s karcinomom želuca (omjer rizika, 1.594; 95% CI, 1,114 do 2,280). Osim toga, pozitivni pacijenti Hsp60 ekspresije su gotovo 1,5 puta veću vjerojatnost da pate od recidiva od onih s negativnim izrazom HSP60 (omjer rizika, 1.460; 95% CI, 1,024 do 2,081). Veličina tumora, dubina invazije i limfnih čvorova metastaze sve imali nezavisnu prognostičku vrijednost u multivarijatne analize (tablica 3). pregled

Survival analiza pokazala je da OS i RFS bile su značajne različiti među 223 pacijenata s obzirom na razinu hsp60 ( P pregled = 0,001, P pregled = 0,002) (Sl. 2). Postoperativna medijan OS i RFS su 26,0 mjeseci i 20.0 mjeseci, respektivno. Postoperativnom medijan vremena OS u hsp 60-pozitivna (n = 130) i HSP60-negativnih (n = 93) želučane pacijenata oboljelih od raka podskupina su 17,5 mjeseci i 36,0 mjeseci, a medijan RFS vremena bili 14.0 mjeseci i 33.0 mjeseci. Osim toga, stope OS i RFS na 5 godina bila je 30,2%, a 29,3% za hsp 60-pozitivnih bolesnika u odnosu na 48,9% i 43,5% za hsp 60-negativnih bolesnika, odnosno ( P pregled = 0,001 i p pregled = 0,002;. Tablica 2) pregled

kako bi se dodatno ocijeniti prognostičku vrijednost hsp60 u različitim podskupinama, pacijenti su poredani prema veličini tumora (slika 2B, C), dubini invazije (Sl.. 2D, E) i limfnih čvorova metastaze (Sl. 2F, G). Razina hsp60 zadržao prognostičku vrijednost u predviđanju kraće OS i RFS u podskupinama za veličine tumora. Za podskupina T3 /T4 i N1-3 bolesnika, značajne korelacije pronađene su između HSP60 statusa i OS ( P pregled = 0,003 i P pregled = 0,002; respektivno) i RFS ( P pregled = 0,008 i P pregled = 0,003; respektivno). Hsp60 imao prognostičku vrijednost u vezi OS ili RFS bolesnika s T1 /T2 i N0 (sve P izvoznici &0.05). Prema tome, čini se da je hsp 60 može poslužiti kao snažan prognostički faktor za bolesnike s uznapredovalim rakom želuca u različitim rizičnim skupinama. Pregled

hsp 60 pojačanom ekspresijom predviđaju lošu prognozu neovisan od tumora invazivnosti pregled

Da bi bolje razumjeli kliničko značaj hsp 60 na agresivnosti kod raka želuca, istražili smo odnos hsp60 s dubinom invazije i limfnih čvorova metastaza kod raka želuca. Pozitivne stope hsp60 su 63,7% i 63,3% u više istaknutih seroznog invazije skupine (T3 /T4) i češća zahvaćenost limfnih čvorova grupe (N1-3), a bilo je samo 50,0% i 46,2% u T1 /T2 i N0 ( P pregled = 0,043 i P pregled < 0.018, pojedinačno) (tablica 1). Osim toga, razina hsp60 značajno korelira s MMP-9 u 223 uzoraka karcinoma želuca. 93 pacijenata s niskom razinom hsp60 65 bolesnika (69,9%) imalo niska razina MMP-9, dok je 77 od 130 pacijenata (59,2%) s visokom razinom hsp60 imali visoku razinu MMP-9 ( P pregled. <. 0,001) (slika 3) pregled

Mi dalje istraživali utjecaj tumora invazivnosti na prognostičku vrijednost hsp 60 u karcinomu želuca pomoću MMP-9 kao indikator za invazivni potencijal pojedinca tumorske stanice. Svi pacijenti su poredani u bilo niski stupanj invazivnosti podskupine (low MMP-9, n = 118) ili visoku invazivnosti podskupina (visoka MMP-9, n = 105) u odnosu na razinu MMP-9 indeksa. Kaplan-Meier krivulje preživljavanja su tada nacrtane istražiti povezanost između HSP60 status i opstanak (Sl. 4). U visokoj tumora invazivnost podskupini, hsp 60 prekomjerna ekspresija bila povezana s kraćim OS ( P pregled = 0,013) i RFS ( P pregled = 0,032) u usporedbi sa OS i RFS u bolesnika s niskom razinom hsp 60, dok nije bilo prognostička vrijednost u vezi OS ili RFS u niskom invazivnosti podskupine. pregled

Rasprava pregled

u ovom istraživanju, razina hsp60 je istraživana u 223 želučanog tkiva karcinoma imunohistokemijski. Otkrili smo da Hsp60 status značajno povezana s dubine invazije i limfnih čvorova metastaze. Osim toga, Kaplan-Meier analiza preživljavanja pokazala je da su vremena preživljavanja (OS i RFS) od bolesnika s karcinomom želuca sa HSP60 prekomjernom ekspresijom bilo znatno kraće nego s niskom razinom hsp60. Nadalje, multivarijatna analiza Cox modelu pokazala da Hsp60 status bio neovisan faktor za oba prognozu indeksa (OS i RFS) u raka želuca. Ovaj nalaz sugerira da Hsp60 ima važnu ulogu u tumorskoj prognozom, a može biti potencijalni prognostički faktori karcinoma želuca. Naši rezultati su u skladu s ranije prijavljenim rezultatima. U nekoliko ispitivanja, pokazano je da je nenormalna ekspresija hsp60 u stanicama karcinoma je povezana s progresijom tumora. Tanaka et al. [21] je izvijestio da je stopa pozitivnost H. pylori hsp 60 bila je značajno viša u bolesnika s difuznim tipom raka želuca nego u H. pylori pozitivnih bolesnika bez raka želuca, koji je predložio da se H. pylori hsp 60 može biti povezan s želučanim karcinogeneze, posebno u slučaju difuznog raka. Faried et al. [14] u odnosu na povezanost HSP60 statusa sa kliničkopatološkim parametara i prognoze u jednjaka karcinom pločastih stanica i predložio da hsp 60 u korelaciji s prognozom pacijenta u humanog raka jednjaka pločastih stanica. Osim toga, Cappello et al. [22] ocjenjuje prisutnost i ekspresiju Hsp60 i Hsp 10 u crijeva karcinomi s limfnih čvorova metastaza, te je utvrdio da hsp 60 i Hsp 10 pojačanom ekspresijom funkcionalno je povezano s tumorskim napredovanja u crijeva karcinoma. Međutim, Cappello et al. [23] u odnosu na hsp60 i Hsp 10 ekspresiju u pluća s onim kronične opstruktivne plućne bolesti imunohistokemijski i našli kontradiktorne rezultate da je gubitak HSP60 i Hsp 10 immunopositivity odnosi se na razvoj i napredovanje bronhijalne raka kod pušača s kroničnom opstruktivnom plućnom bolest. pregled

Klinički stadij je najvažniji čimbenik koji utječe na prognozu bolesnika s rakom želuca. Nekoliko sustavi su dostupni za klasifikaciju raka želuca. Među njima, Union International kontrole raka (UICC) TNM sustav je jedan od najviše rasprostranjen. Iako je TNM sustav uspješno polaže pacijente o njihovoj prognozi prema kliničkopatološkim varijabli, ona je dosegla svoj limit u davanju važne informacije koje mogu utjecati na strategiju liječenja. To je teško za probavne kirurzi točno predvidjeti što će ljudi doživjeti relaps među naprednim pacijenata koji su prošli kroz kurativno tretiranje. Za prevladavanje ograničenja tih tradicionalnih sustava, mnogi molekularni markeri su istraženi i pokazala da ima potencijal prediktivno značenje. Međutim, do danas, biomarkera koji bi mogli stratifikaciju pacijenata s rakom želuca s ljekovitom izrezivanja u TNM stadij III /IV su još uvijek znatno ograničen. U našoj stratificiranom analizi, otkrili smo da Hsp60 status imali jasnu prognostičku vrijednost za OS i RFS u T3 /T4 i limfnih čvorova metastaze (N1-3) bolesnika. Ovi podaci upućuju na to da Hsp60 mogu djelovati kao prediktivni alat za identifikaciju pacijenata s uznapredovalim rakom želuca na visoki rizik od recidiva. Pregled

Poznato je da je degradacija ekstracelularnog matriksa (ECM) je bio signal za početak invazije i metastaze, te MMP važne molekule uključene u degradaciju ECM za invaziju i metastaziranje [24]. Chu et al. [18] su izvijestili da rak MMP-9 značajno koreliraju s dubinom invazije i metastaza limfnih čvorova i MMP-9-pozitivnih pacijenata s karcinomom želuca imali lošije rezultate nego oni s MMP-9-negativnim tumorima. Zhao i sur. [25] su otkrili da MMP-9 ciljane RNA interferencije vrlo uspješno suzbiti MMP-9 ekspresija i inhibiraju stanični rast i invaziju raka želuca SGC7901 in vitro i in vivo. Osim toga, Lin et al. [26] je izvijestio da je protein toplinskog šoka 60 uz H. pylori poboljšane migracija od želučanih stanica raka i promicati formiranje cijevi, štoviše, to bi moglo ubrzati razvoj raka u načinu izražavanja proupalnih citokina. On je izvijestio da Hsp60 je predložen kao cilj za terapiju tumora [27]. Naši su rezultati pokazali da se razina hsp60 i MMP-9 su povezana jedan s drugim, što znači veću invazivnog i metastaziranja aktivnost hsp60-pozitivne stanice raka. Osim toga, hsp60 jako izražena u dubini invazije, posebno u T3 i T4 karcinoma. Što se tiče statusa limfnih čvorova je u pitanju, pacijenti s limfnih čvorova metastaze imaju tendenciju pokazati povišene hsp 60 izraza. Nadalje, bolesnici koji su imali hsp 60 ekspresiju, u kojem tumorske stanice prikazane visoke invazivnosti, imali slabu OS i kraće RFS. Kolektivno, hsp60 iz želuca rak potiče tumorski agresivnost ukazuje da hsp60 može biti izvediva meta u liječenju raka. Pregled

Ukratko, pokazali smo da hsp60 može igrati važnu ulogu u tumorskoj invaziji, metastazama i prognozu, i može raditi kao obećavajući cilj za prognostički predviđanja u raka želuca. Određivanje hsp60 može pomoći da identificiraju pacijente oboljele od raka želuca visokog rizika i na taj način pomoći izbor prikladnih terapija. Daljnja istraga je potrebno razjasniti ulogu Hsp60 u razvoju raka želuca. Pregled

Izvori pregled

zahvalno kliničke podatke koje odjel patologije (Povezana bolnice u Guilin medicinskog sveučilišta). pregled