PLoS One: azonosítása szérum mikroRNS as Novel nem invazív biomarkerek korai felismerése és a Gyomor Cancer

absztrakt katalógusa

Háttér katalógusa

Annak vizsgálatára, a lehetséges szérum miRNS mint biomarkerek korai felismerése gyomor rák (GC), a populáció-alapú vizsgálatot végeztek Linqu, magas kockázatú terület GC Kínában. katalógusa

Módszertan /fő eredményei katalógusa

az összes téma közül választották ki a két nagyszabású tanulmányokat . Differenciál miRNS azonosítottak szérum medencék GC és ellenőrzési TaqMan alacsony sűrűségű tömb, és hitelesített egyéni 82 pár GC és ellenőrzése, illetve 46 pár diszplázia és ellenőrzési valós idejű kvantitatív reverz transzkripciós polimeráz láncreakció. Az időbeli tendenciák azonosított szérum miRNS expresszió további vizsgálatára retrospektív tanulmány 58 GC betegeknél, akik legalább egy előre GC diagnózis szérum minta alapján hosszú távú nyomon követés lakosság. A miRNS profil eredmények azt mutatják, hogy 16 miRNS voltak jelentősen fokozódik GC betegeknél, mint a kontroll. További hitelesítés azonosított panel három szérum miRNS (miR-221, miR-744 és miR-376c), mint potenciális biomarkerek GC felderítése, és a vevő működési karakterisztika (ROC) görbe alapú értékelés elemzése azt mutatta, hogy ez a testület tudta különböztetni GCk származó kontrollok 82,4% érzékenység és specificitás 58,8%. MiR-221 és miR-376c szignifikánsan pozitív korrelációt rossz differenciálódása GC, és miR-221 jelenik meg a magasabb szintű dysplasia, mint a kontroll. Továbbá a retrospektív vizsgálat feltárta növekvő tendenciát mutat a három miRNS szinten alatt GC fejlesztés ( P katalógusa tendencia < 0,05), és ez a panel sikerült besorolni szérum mintákban akár 5 évvel megelőzve a klinikai GC diagnózis 79.3 % pontosságot. katalógusa

Következtetések /Jelentés katalógusa

Ezek az adatok arra utalnak, hogy a szérum miR-221, miR-376c és miR-744 erős potenciállal új, nem invazív biomarkerek korai felismerése GC.

Citation: Song My, Pan Kf, Su Hj, Zhang L, Ma Jl, Li JY et al. (2012) azonosítása szérum mikroRNS as Novel nem invazív biomarkerek korai észlelése a gyomorrák. PLoS ONE 7 (3): e33608. doi: 10,1371 /journal.pone.0033608 katalógusa

Szerkesztő: Joseph Califano, John Hopkins Medical School, Amerikai Egyesült Államok katalógusa

Beérkezett: november 15, 2011; Elfogadva: február 13, 2012; Megjelent: március 14, 2012 katalógusa

Copyright: © 2012 Song et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: Ez a munka ben támogatták a Nemzeti Alap Research Program of China (973 Program: 2010CB529303), A3 Foresight Program Természettudományi Alapítvány Kína (30921140311) és a Nemzeti Természettudományi Alapítvány Kína (81041012 és 81171989). A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

a gyomorrák (GC) a második vezető daganatos halálok a világon, közel fele előforduló Kínában [1], [2]. A prognózis a GC változik jelentősen a szakaszában a rák az 5 éves túlélési arány elérte a 90% az I. szakaszban, de kevesebb, mint 5% a Stage IV [3]. Így a korai felismerés a GC kulcsfontosságú intézkedés csökkenti a mortalitást és javítja a prognózist a GC. Katalógusa

Bár gasztroszkopikus szűrés GC rendkívül megbízható, akkor invazív és költséges, különösen a fejlődő országokban. Ezért sok erőfeszítést tettek, hogy dolgozzanak ki kevésbé költséges előzetes szűrővizsgálatok könnyen hozzáférhető példányok. Azonban sok korábban vizsgált analitok, mint például a pepszinogén (PG) I /II arány, karcinoembrionális antigén (CEA) és a szénhidrát antigén 19-9 (CA 19-9), nem érzékeny és specifikus elég GC szkrínelésére [3], [ ,,,0],4]. Így van sürgősen szükség van új, nem invazív biomarkerek, hogy javítsa a korai felismerés a GC. Katalógusa

A mikroRNS (miRNS) vannak bőséges osztály a kis, nem kódoló RNS-ek, amelyek negatívan génexpressziót bázispárosodás a 3'-nem transzlatált régiójának célzott mRNS-ek, így a mindkét mRNS hasítás vagy transzlációs elnyomás [5], [6]. Egyre több bizonyíték azt mutatja, hogy miRNS részt vesznek különféle biológiai folyamatokban, beleértve a fejlesztési, a sejtek differenciálódását, proliferációját és apoptózist [7], és részt vesznek az emberi karcinogenezis mint onkogének vagy tumor szupresszor [8]. Vizsgálatok kimutatták, hogy miRNS expressziós profil között változik a tumor típusát és meg tudja különböztetni a rákos és normál szövetekben [9], [10]. A közelmúltban, keringő miRNS javasoltak nagy potenciállal rendelkezik, mint biomarkerek sok rákos megbetegedések, beleértve a GC [11] - [16]. Értéke azonban keringő miRNS korai felismerése a GC nem számoltak be. Katalógusa

1989 óta, az általunk végzett számos vizsgálatok Linqu megyében, a magas kockázatú terület GC Shandong tartomány, Kína , beleértve a népesség kohorszvizsgálatban rákmegelőző elváltozások gyomor [17], [18], és egy randomizált klinikai vizsgálatban, hogy gátolja a progresszióját gyomorléziók [19]. Ez a csoport lehetővé teszi számunkra, hogy vizsgálja meg a dinamikus változások keringő miRNS szinten alatt GC fejlesztés, és ad nekünk egy egyedülálló lehetőség, hogy vizsgálja meg a lehetséges keringő miRNS korai felismerése GC. Katalógusa

Itt, mi az eredményekről differenciális miRNS-ek a szérumban a GC-diszplázia (DYS), és egy retrospektív tanulmány célja, hogy értékelje a dinamikus változások során GC fejlődését. katalógusa

anyagok és módszerek katalógusa

vizsgálati terv és a népesség katalógusa

A részleteket vizsgálati populációban, eljárások az endoszkópos vizsgálat kritériumai gyomor szövettani és nyomon követése leírták máshol [17] - [19]. Röviden, egy endoszkópos szűrővizsgálatától indult 1989 között 3399 lakos év 35-64 év Linqu megyében, a magas kockázatú terület GC, és az alanyok nélkül GC diagnózis később követte az ismételt endoszkópos vizsgálatra 1994-ben [17 ], [18]. 1995-ben, egy randomizált, placebo-kontrollált vizsgálatban beavatkozás indult ebben a populációban 2003-ig, amikor ismételt endoszkópos vizsgálat történt [19]. Az összes téma ment vérvétel mind a kiindulási és végpont felmérések az egyes vizsgálatok, és néhány fejlett gyomornyálkahártya-elváltozások, mint a intestinalis metaplasia (IM) vagy DYS is biztosított a vér és a kapott endoszkópos vizsgálat 1992-ben és 1999-ben katalógusa

a jelenlegi vizsgálat során, a többlépcsős, eset-kontroll vizsgálat két nagy létszámú volt a célja, hogy azonosítsa és ellenőrizze az eltérés szérum miRNS GC és DYS, és egy retrospektív vizsgálatot végeztek, hogy vizsgálja meg a lehetséges jelölt szérum miRNS korai felismerése GC (1. ábra). katalógusa

Ez a tanulmány négy lépcsőzetes fázisban. Az I. szakaszban, a szérum medencék 14 GC beteget és 14 korban és nemben illesztett diagnózissal felszínes gastritis (SG) vagy enyhe krónikus atrophiás gastritis (CAG) arra használtuk, hogy a miRNS-profilok array analízis. Differenciál miRNS azonosítottak, és a rendkívül serkentett miRNS vagy közepesen serkentett miRNS funkciós vagy biomarker kapcsolatos jelentések választottunk ki további elemzésre. A fázis II, amely miRNS validálták kvantitatív reverz transzkripciós polimeráz-láncreakció (QRT-PCR) az egyes szérumminták 14 GC és vezérlők használtak a tömb teszt fázis I. fázis III, a jelentősen megváltozott miRNS ezt követően érvényesített 68 GC és 46 DYS betegek, valamint azok, korban és nemben illesztett. Vevő működési karakterisztika (ROC) görbe alapú kockázatelemzés elemzést végeztünk azután között 68 GC-kontroll pároknál, hogy értékelje a diszkrimináló hatása szérum miRNS GC. Minden alanyt osztottunk sem magas vagy alacsony kockázatú csoportok összehasonlításával expressziós szintjét miRNS biomarkerek a megfelelő küszöbértékek származó ROC-görbe. Az első fázisban a IV retrospektív vizsgálatot végeztek 58 GC betegeknél, akik feltéve, hogy legalább egy támogatásra jogosult előzetes diagnózis szérum mintát a hosszú távú követéses vizsgálat a fent leírt módon, hogy vizsgálja meg a temporális trend lehetséges miRNS biomarkerek és meghatározza érték a korai felismerés GC. Az egész tanulmány jóváhagyta az Institutional Review Board a pekingi egyetem Cancer Hospital & Intézet, valamint valamennyi tantárgy írásos beleegyező nyilatkozatban. Katalógusa

A minták feldolgozása és RNS extrakció katalógusa

Akár 5 ml teljes vér minden éhomi résztvevő összegyűjtöttük esetek és a kontrollok kelt ugyanabban az évben. Vérmintákat hagytunk állni 30-40 percig, és a szérum elválasztása végeztük centrifugálással 965 g-on 15 percig. A felülúszót szérumot kinyerjük, és -80 ° C-ig elemzést. RNS-t izoláltunk 100 ul szérum felhasználásával miRNeasy Mini Kit (Qiagen, Németország), a gyártó utasításai protokoll kis módosítással [20]. Mert miRNS profilalkotás két medencét kombinálásával létrehozott keverékei felső vizes fázist a fázisok szétválása után és etanol 14 GC beteg (12 férfi, 2 nő, életkor, 62 (SD 6,4) év) és 14 nemben és korban illesztett (életkor, 61 (SD 5,9) év) volt. Kötődés után a membrán a RNeasy Mini spin oszlop és azt követő mosási, RNS-t eluáljuk 40 ul RNáz-mentes vízben. Minden QRT-PCR kísérletekben kivont RNS 100 ul szérumot eluáltuk 100 ni RNáz-mentes vízben. Normalizálni a minta-To-minta variáció RNS izolációs lépésben szintetikus ATH-miR-159a-t adunk az egyes szérumminta esetében miRNS profilozás míg cel-miR-39-t adtunk QRT-PCR analízis által leírt Mitchell et al
[11].

miRNS profilozási

miRNS profilozás végeztük TaqMan kis sűrűségű tömböt (v2.0), a gyártó által javasolt protokoll (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). Ez qRT-PCR profil platform áll egy 384-microfluidic kártyát, amelyen 377 miRNS lehet elemezni együtt három endogén kontroll (U6, RNU44 és RNU48) és egy negatív kontroll független emberi (ath-miR-159a). Röviden, az RNS-t egyesítjük elkülönítve 14 GC betegek és egyeztetett kontrollok között a fent leírtak szerint reverz transzkripció révén TaqMan miRNS reverz transzkripciós kit és TaqMan miRNS multiplex RT assay (humán medence; Applied Biosystems). Minden egyes RNS-medence, 3 ul teljes RNS-t adunk az egyes A multiplex reverz transzkripciós reakciók.

mennyiségének növeléséhez cDNS rendelkezésre álló elemzés dúsítására célgének végeztük Preamplification lépés. A 25 ul reakcióelegy összetétele a következő 2,5 ul hígítatlan cDNS kombinálva 12,5 ul TaqMan előerősítő Master Mix (2 ×), 2,5 ul Megaplex előerősítő alapozók (10 ×), és 7,5 ul nukleáz-mentes vízben. A Preamplification lépést végeztünk egy GeneAmp PCR System 9700 (Applied Biosystems), a gyártó utasításai szerint.

valós idejű PCR-elemzés szerint a termék hozzáadásával meghígítjuk 75 ul nukleáz-mentes vízben, és 9 ul a hígított elegyet ezután egyesítjük 450 ul TaqMan 2 × Universal PCR master Mix nélkül uracil-N-glikoziláz és 441 ul nukleáz-mentes vízben. Betöltése után 100 ul mindegyik multiplex medence keverék, a tömb centrifugáljuk, és lezárjuk. Amplifikálást végeztünk egy Applied Biosystems 7900 HT thermal cycler (Applied Biosystems) a gyártó által ajánlott kerékpározási körülmények között. A statisztikai analízist az RQ Manager szoftver 1.2-es verziója és DataAssist ™ szoftver 2.0 verziója (Applied Biosystems). Normalizálás után felhasználásával a tüskés-in ath-miR-159a, a szeres változást a miRNS-ek szintje GC kontrollhoz képest módszerével számítottuk. Katalógusa

Mirna számszerűsítése valós idejű qRT-PCR katalógusa

a reverz transzkripciót végeztünk TaqMan miRNS reverz transzkripciós kit és miRNS-specifikus szár-hurok primereket (Applied Biosystems). A 7,5-ul reakcióelegy összetétele a következő 0,75 mikroliter 10 x reverz transzkripcióval puffer, 0,095 ul RNáz inhibitor (20 egység /ul), 0,075 ul 100 mM dNTP-k és dTTP-t, 0,5 | il MultiScribe reverz-transzkriptáz (50 egység /ul), 1,5 ul primer, 2,5 ul RNS, és 2,08 ul RNáz-mentes vízben. A reverz transzkripciót végeztünk egy T szakmai PCR System (Biometra, Németország), a gyártó utasításai szerint.

Real-time PCR-t végeztünk, két példányban, és szerepelnek no-templát negatív kontrollok. A 20 ul-es reakció, cDNS-t (3 ul) összekevertük 10 pl TaqMan 2 × Universal PCR Master Mix nélkül uracil-N-glikoziláz, 1 ul TaqMan miRNS teszt-elegyet és 6 | il vízben. Az amplifikációt végeztünk egy 7500 Real-Time PCR System (Applied Biosystems), a gyártó utasításai szerint. Az expressziós szintjét miRNS normalizálódtak a tüskés-in cel-miR-39, és számoltuk módszerrel. Katalógusa

A statisztikai elemzés katalógusa

A párosított t katalógusa tesztet vizsgálatához használt különbséget az átlagos életkor a csoportok között. A Wilcoxon tesztet vagy Mann-Whitney U tesztet használtuk, hogy összehasonlítsuk a szérum miRNS szint különböző csoportok adott esetben. ROC görbéket létre, hogy értékelje a diagnosztikai hatásait miRNS és az általánosított lineáris modellt ismételt mérésekkel alkalmazott elemezni időbeli trendek szérum miRNS szinten alatt GC fejlesztés után logaritmikus transzformáció. Minden P katalógusa értékek kétoldalas és kevesebb, mint 0,05 tekintettük statisztikailag szignifikánsnak. Minden statisztikai analízist végeztük a statisztikai csomag a Social Sciences (SPSS 13.0, Chicago, IL). Katalógusa

Eredmények katalógusa

Tárgy jellemzői

Az összesen 82 GC betegek, 46 alanyok DYS, és 128 kontrollok SG vagy enyhe CAG vontunk be a vizsgálatba. Amint az 1. táblázatban látható, nem volt szignifikáns különbség a korban betegek között GC vagy DYS és a megfelelő kontrollok ( P katalógusa = 0.329 és 0,214-kal). Katalógusa

Mirna profilozó katalógusa

A differenciáltan expresszálódó miRNS azonosítottak szérumminta 14 GC és 14 kontroll TaqMan kis sűrűségű tömb. Közül 377 miRNS elemeztük, 99 azt mutatta, > 2-szeres mértékben serkentett és 40 azt mutatta, < 0,5-szeres downregulált változások GC szérum medence (táblázat S1). Tizenhat serkentett miRNS (miR-221, miR-744, miR-376c, miR-191, miR-27a, let-7e miR-27b, miR-222, miR-21, miR-18a, miR-19a, miR 17, miR-106b, miR-106a, miR-20a és miR-155) igazolja figyelemreméltó change GC szérum, amelynek funkcionális vagy eltérő expressziója jelentések GC szövet került kiválasztásra, mint a jelölt a ökölnyi szakaszban érvényesítés [21] - [28]. katalógusa

Első szintű érvényesítése katalógusa

A kifejezések 16 jelölt miRNS mértük az egyes szérum mintákban 14 GC és vezérlők használtak tömb teszt. Összhangban a profilalkotás eredmények, mind a 16 miRNS magasabb volt a szérum szintek GC csoportban, mint a kontroll csoportban (ábra S1). Közülük 9 szérum miRNS (miR-221, miR-744, miR-376c, miR-191, miR-27a, let-7e miR-27b, miR-222 és miR-21) volt > 2 közepes szeres változást GC csoportban, mint a kontroll csoportban ( P katalógusa < 0,05), és így ezeket választottuk ki további érvényesítését. katalógusa

a második szakaszban érvényesítés katalógusa

Megvizsgáltuk a 9 miRNS kifejezések egy nagy sor szérum 68 pár GC és ellenőrzése. Mint a 2. ábrán látható, 8 ki a 9 miRNS (miR-221, miR-744, miR-376c, miR-191, miR-27a, let-7e miR-27b, és miR-222) szignifikánsan emelkedett GC csoport több mint 2-szeres változást ( P katalógusa < 0,05), és ezek a miRNS választottak ki az alábbi elemzést. katalógusa

a kockázatértékelés a GC esetben egy panel miRNS

Hogy értékelje a diszkrimináló hatása szérum miRNS GC, ROC görbéket létre mind a 8 miRNS segítségével 68 pár GC és ellenőrzés a második szintű érvényesítése (3. ábra). Az eredmények azt mutatták, hogy a miR-744, miR-376c, miR-221 és hagyja-7e eredményezte a legnagyobb területen az ROC görbék (AUC-k), és lehet, hogy megvan a lehetősége, mint biomarkerek GC kimutatására. Katalógusa

A kockázatbecslés alapján a négy miRNS használtuk megkülönböztetésére szérummintákban a GC esetek ellenőrzéseket. Minden miRNS, mi először számolta ki az optimális cut-off érték a relatív expressziós szint (miR-744: 5,49 × 10 ^{-4; miR-376c: 6,05 × 10 -4; miR-221: 1.47 × 10 -3; let-7e: 1,61 × 10 -3), amelynél a Youden index (érzékenység + specificitás-1) GC diagnózis volt a legnagyobb a ROC görbe. Aztán osztva a tárgyat egy magas kockázatú csoportba, ami a lehető GC esetben, ha a szérum a négy miRNS volt egyenlő vagy nagyobb, mint a megfelelő cut-off érték, és az alacsony kockázatú csoportba, ami a kontroll , amikor a szérum a négy miRNS kevesebb volt, mint a cut-off értékek. katalógusa}

ezen értékelés alapján a kritérium, 56 GC és 32 kontrollokat helyesen jósolta a GC és nem GC esetben termelő az érzékenység a 82,4%, specificitása 47,1%. Mivel let-7e mutatták a legkisebb érték és legszélesebb megbízhatósági intervalluma AUC a négy miRNS a ROC görbe analízis (3. ábra), megismételtük a fenti kockázatértékelés kizárását követően hagyja-7e és kapott nagyobb specificitását (40/68, 58,8 %), míg az érzékenység nem változott, jelezve, hogy a hozzájárulás let-7e a differenciáló GC a kontrol elhanyagolható volt, és a három-miRNS panel (miR-221, miR-376c és miR-744) volt hatékonyabb kombinációja biomarkerek GC diagnózis. katalógusa

Ahhoz, hogy tovább vizsgálja a lehetséges e testület korai felismerése GC megvizsgáltuk alcsoportja 30 GC betegek korai stádiumban, és 22 helyesen megjósolt GC esetben az érzékenység 73,3% .

közötti társulás szérum miRNS expresszió és differenciálódását minőségű GC katalógusa

Továbbá azt kérte, hogy vizsgálja meg az összefüggést expressziós szintjét miR-221, miR-744 és miR-376c, és a differenciálódás fokozat GC. Amint az ábra a 4A-C, mind a három miRNS mutatta, magasabb szérum szinteket rosszul differenciált GC-csoport (43 GC beleértve 29 férfi és 14 nő, életkor, 60 (SD 8,3) év), mint jól, vagy mérsékelten differenciált GC-csoport (24 GC köztük 19 férfi és 5 nő, életkor, 60 (SD 6,2) év). Közülük szérum miR-221 és miR-376c szignifikánsan pozitív korrelációt rossz differenciálódása GC ( P katalógusa = 0,006 és 0,004, sorrendben). Katalógusa

Expression szérum miRNS biomarkerek tárgyak a DYS katalógusa

a további megvilágítása a három érintett miRNS a humán papillómavírus gyomorkárosodás megvizsgáltuk arckifejezésük 46 pár DYS és ellenőrzése. Ábrának 4D-F, jelentősen emelkedett szintje a miR-221-ben találtak DYS csoportban a kontrollcsoporthoz viszonyítva ( P katalógusa = 0,027), míg nem volt szignifikáns különbség a miR-376c vagy miR 744. További kockázatelemzés elemzés követi a korábban megállapított eljárások során kiderült, hogy ez a három miRNS panel tudta különböztetni DYS a kontroll az érzékenysége 56,5%, specificitása 47,8%. Katalógusa

Dinamikus változások a szérum miRNS biomarkerek során GC fejlesztés

a retrospektív vizsgálatban a dinamikus változások a három szérum miRNS biomarkerek mutattunk ki 58 GC betegekben, akiket négy csoportra osztottuk szerint az időtartamot, ami a vérvétel a GC diagnózis: előre diagnózis 2-5 év , 6-9 éves, 10-14 éves, és ≥15 év csoportokban (2. táblázat). Egyes területeket lehet egyszerre létezik két vagy több csoport, hiszen amennyiben a szérum minták különböző időpontokban a követési idő alatt. Katalógusa

Amint az 5A, mindhárom szérum miRNS megjelenített jelentősen növeli kifejezés alatt GC fejlesztés, kivéve enyhe növekedése a szérum miR-744 a pre-diagnózis ≥15 év csoport. További trend teszt statisztikailag szignifikáns lineáris trend a három miRNS-értékei között 20 GC betegek, akik hozzájárultak a három szérum mintákban különböző időpontokban során a nyomon követési időszak (5B ábra). Katalógusa

Végül megvizsgáltuk a lehetséges miRNS biomarkerek korai előrejelzésére GC 29 betegnél, akik olyan szérum mintákat 2-5 évvel korábban GC diagnózist. Szerint a kockázatelemzés kritérium előtt létre, 23. 29 GC beteg (79,3%) helyesen besorolni a képviselt GC esetekben ez a három szérum miRNS panel. Katalógusa

Vita katalógusa

A cél ennek a vizsgálatnak az volt, hogy azonosítsa eltérés miRNS szérumában GC és DYS, és vizsgálja a lehetséges szérum miRNS mint biomarker korai felismerése GC. Megtaláltuk a szignifikánsan magasabb szérum miR-221, miR-376c és miR-744 GC betegek szisztematikus microarray alapú szűrés kétfokozatú érvényesítés. Ez a három szérum miRNS panel tudta különböztetni GC-re ellenőrzések és emelkedő tendenciát mutatott során GC fejlődését. A legjobb tudásunk szerint, ez az első populáció-alapú tanulmány vizsgálja a dinamikus változások a szérum miRNS kapcsolódó GC és prekurzorok magas kockázatú terület GC. Katalógusa

Az előfordulási GC nagyon eltér az egész világon a legmagasabb előforduló kelet-Ázsiában, többek között Japánban, Koreában és Kínában [1], [2]. Kínában, a legtöbb glükokortikoid diagnosztizáltak előrehaladott szakaszában ami rossz prognózist átlagosan 5 éves túlélési arány < 30% -os, míg Japánban és Koreában több mint 60% -a GC diagnosztizáltak korai stádiumban közösségi alapú endoszkópos szűrés 5 éves túlélési arány > 80% [29], [30]. Bár a hatás a korai felismerés a GC endoszkópos szűrés jelentős Linqu, ott már csak néhány populáció-alapú szűrés GC Kínában a magas költségek és nincs elegendő képzett endoszkópos. Katalógusa

GC véget eredményeként többlépcsős gyomornyálkahártya-elváltozások eltérő biológiai funkciókat, amely lehetőséget ad arra, hogy érzékelni GC korai stádiumban segítségével biomarkerek. Korábbi vizsgálatunkban azt találtuk, az arány a szérum PG-I /II monoton csökkentek súlyosságától gyomor elváltozások, azonban az érzékenység és specificitás előrejelzésére előrehaladott gyomorrák elváltozások és GC szegények voltak [31]. Nemrégiben, felhalmozódó bizonyítékok azt mutatták, hogy a miRNS-ek fontos szerepet játszanak az onkogenezisben, és a tumor-eredetű miRNS léphetnek be a forgalomba egy rendkívül stabil formában [11], [32], [33], ami arra utal, hogy a miRNS lehetne használni, mint új, nem invazív biomarkerek korai felismerése GC. katalógusa

a közelmúltban, egy tanulmány szerint négy serkentett GC-asszociált miRNS (miR-17-5p, miR-21, miR-106a és miR-106b) [34], amely szintén megjelenik magasabb expressziós szinteket GC szérumot a tömb, míg a sztrájkoló downregulációját let-7a tanulmányukban nem figyeltük meg. Egy másik tanulmány azt találta, öt emelkedett szérum miRNS (miR-1, miR-20a, miR-27a, miR-34 és miR-423-5p) GC betegeknél [13], míg csak a miR-20a és miR-27a arra serkentett a mi tömb, és a miR-27a validált kell méltóan túltermelõdik GC betegeknél. A részben ellentmondó eredmények tükrözik a különbségeket mintatípusok, szűrőeszközökkel vagy mennyiségi módszerek [35]. Katalógusa

A három szérum miRNS azonosított Tanulmányunkban miR-221 találtunk kórosan fokozódik a szövetek számos rákos típusok, mint például a gyomor [24], a kolorektális [21], a prosztatában [36] és a mellrák [37]. MiR-221 lehetett utáni transzkripciós szinten elnyomja p27 és p57, megkönnyítve ezzel a G1 /S fázis átmenet és fokozza a sejtek szaporodását és a tumor növekedését [24], [36], [38], [39]. Tanulmányok kimutatták, hogy az expressziós szintet a miR-221 a plazmában társult teljes túlélés a colorectalis rák [40], és a progresszió a prosztatarák [41]. Csak néhány tanulmány vizsgálta a funkcionális jelentősége a miR-376c, mint a miR-376c javíthatnák proliferáció, túlélés és kemorezisztenciájának petefészek ráksejtek célzott ALK7 [42]. Mert miR-744, annak kifejezése minta, élettani funkciója és kapcsolata karcinogenezissel vannak ismeretlen. Katalógusa

A jelenlegi vizsgálatban azt találtuk, ez a három miRNS panel tudta különböztetni szérum minták GC a kontrol és érzékenysége 82,4%, specificitása 58,8%. Ezen felül, a vizsgálat azt mutatta, hogy ezek között 30 korai stádiumú GC beteg, 22 (73,3%) helyesen besorolni, ami arra utal, ez a panel lehetne a biomarker korai felismerése GC. Ez felveti azt a lehetőséget, hogy ez a testület miRNS hasznos lehet egy előzetes szűrési módszer GC a lakosság körében nagy a kockázata a GC. Katalógusa

Mi is érdekelt feltárása az egyesületek között ez a három szérum miRNS és differenciálódás minőségű GC. Összehasonlítva miRNS szérumban GC betegek különböző minőségben, találtunk egy magasabb szérum miRNS expresszió rosszul differenciált GC. Ez az eredmény azt mutatta, hogy a magas expressziós szintjét ezeknek szérum miRNS GC betegek járt az előrehaladott GC. Bár a mechanizmus ez a jelenség nem világos, a magas szintű ezek miRNS szérum lehet némi értéket jelző progresszió és a kezelés kiválasztása GC. Katalógusa

tovább vizsgálni, hogy ez a három-miRNS panel tudta megjósolni előrehaladott gyomorrák elváltozások, mint például a DYS. Találtunk csak a miR-221 jelenik emelkedett expressziós szintjének DYS, ami arra utal, ezt a panelt több specifikus GC. Annak ellenére, hogy csak korlátozott hatása ennek a panel DYS felderítése, miR-221, az egyik a három szérum miRNS, hasznos lehet azonosításában DYS tantárgyak rendkívül nagy a kockázata a fejlődő GC. Érdekes módon, a prospektív követés alakulását ezek DYS alanyok, azt találtuk, az alacsonyabb aránya regresszió a kevésbé súlyos elváltozásokat és egy incidens GC az előre jelzett magas kockázati csoportba, akik magasabb szintű szérum miR-221 (az adatokat nem mutatjuk be).

visszamenőleg vizsgálva a kifejezés három szérum miRNS előtti diagnózis minták GC betegek, találtunk egy növekvő tendenciát mutatott GC fejlesztés, és a további elemzés azt mutatta, hogy ez a testület sem tudta megjósolni GC akár 5 évvel megelőzve a klinikai GC diagnózist. Ezek az eredmények határozottan támogatta az értéke a három miRNS előrejelzésére GC előfordulása. Ha ehhez még három szérum miRNS aláírás kóros diagnózis fokozhatja a korai felismerés a GC, előrehaladott gyomorrák elváltozások, mint a PM és DYS. Katalógusa

zárja ki annak lehetőségét, hogy a magasabb életkor, a rövidebb tárolási időszak szérummintáinak hozzájárult a magasabb szintű miRNS idővel, elemeztük miRNS expresszió 82 kontrollok átesett vérvétel ugyanakkor pontokat GC betegeknél. Nem volt szignifikáns különbség során a nyomon követési időszak (az adatokat nem tüntettük fel), ami arra utal, hogy a növekvő szérum miRNS szintek egész GC fejlesztés nem tulajdonítható a megnövekedett kor és alátámasztó hogy miRNS-ek voltak jelen a szérumban stabil formában. Ennek megfelelően a keringő miRNS lehet használni, mint egy biomarker, hogy dolgozzon ki egy non-invazív teszt GC kimutatására a jövőben, mert a könnyű megközelíthetőség, nagy stabilitást és alacsony vizsgálati költség. Katalógusa

A tanulmány számos erőssége. Először is, minden tárgy jött egy magas kockázatú populációban a GC-ment szigorú patológiai diagnózis, ami indokolja a hipotézist, hogy a megfigyelt különbség a szérum miRNS szintjei közötti GC és ellenőrzések tudható főleg, ha nem az összes, a daganatos átalakulás. Másodszor, a populáció-alapú vizsgálat a magas megfelelőségi és több mint 20 éves utánkövetés fokozott megbízhatósága a tanulmány, és feltéve, hogy az első bizonyíték a dinamikus változások a szérum miRNS során GC fejlesztés, valamint a bennük rejlő lehetőségeket mint biomarkerek azonosítása magas kockázatú egyének GC. katalógusa

Ez a tanulmány is vannak korlátai. Mert nagyon kevés alanyok diagnosztizáltak normál gyomornyálkahártya ebben a populációban [17], használtuk egyéneknél SG /enyhe CAG kontrollként. Azonban, míg a vizsgálatok során általában normális alanyok kontrollként, a patológiai diagnózis alapú szabályozás szelekciós stratégia hígított közötti egyenlőtlenség esetek és a kontrollok, és így csak okozhat alulbecslésének eredményeket. Ezen túlmenően, a megállapítások előzetes vizsgálat a minta kis mérete szükségessé további megerősítést nagy prospektív tanulmányok és funkcionális jelentősége az újonnan azonosított miRNS tovább kell pontosítani. Katalógusa

Összefoglalva, ezen keresztül a populáció-alapú vizsgálat azonosítottunk egy sor eltérés szérum miRNS (miR-221, miR-376c és miR-744) a GC és a javasolt lehetséges, mint új, nem invazív biomarkerek korai felismerése GC. katalógusa

alátámasztó információk katalógusa ábra S1.
szérumszintje 16 kiválasztott miRNS 14 pár GC és a kontroll az első szakaszban érvényesítés. A medián szeres változások miRNS szinten összehasonlítva GC kontroll kaptak, és a Wilcoxon teszteket végeztünk, hogy vizsgálja meg a különbség a két csoport között. A relatív szintje miRNS (log10 skála Y-tengely) normalizáltuk a tüskés-in cel-miR-39. Katalógusa doi: 10,1371 /journal.pone.0033608.s001 katalógusa (JPG) hotelben táblázat S1.
doi: 10,1371 /journal.pone.0033608.s002 katalógusa (XLS) hotelben