Background VerfÜgung
Trotz Beweiser datt macrophages Akt zu enger demagogesch microenvironment ageschalt gastric tumorigenesis ze förderen via β- catenin sécher, goufen d'Auswierkunge vun β-catenin sécher op gastric Kriibs Zell Metastasen an d'Relatioun vun deenen Zellen mat entholl verbonne macrophages Ëmfeld net direkt studéiert. VerfÜgung
Method VerfÜgung
Immunohistochemical staining ze gouf geschafft 103 Patienten analyséieren. Eng Invasioun assay war benotzt der Relatioun tëscht macrophages an gastric Kriibs Zellen ze diskutéieren. β-catenin gewannen-vun-Funktioun a Verloscht-vun-Funktioun Approche gesuergt huet. Fir d'β-catenin Regulatioun Mechanismus zu gastric Kriibs Zellen, Western blotting an ëmgedréint-Transkriptiouns polymerase Kette Reaktioun bewäerten sech benotzt. VerfÜgung
Resultater VerfÜgung
erhéicht Dicht vun macrophages war mat fortgeschratt Etapp an aarme Iwwerliewe assoziéiert . Gastric Kriibs Zell Linnen Co-cultured mat macrophages bedingt mëttelfristeg zougedréckt nuklear Heefung vun β-catenin fräi a fräi Fähegkeet hypothetesch. AKT mä Erk net reglementéiert β-catenin br. MMP7 an CD44, souwuel β-catenin afgerappt Genen, sech an macrophage-ageschalt gastric Kriibs Zell Invasioun. VerfÜgung
Conclusioun (s) VerfÜgung
erginn, de Medeziner Donnéeën proposéiere Équipe datt macrophage einfach ass soll mat fräi Schouljoer an aarme hätt fir gastric Kriibs Patienten déi radikal resection mécht. Macrophages kann invasiveness induce vun der β-catenin Passerelle activating VerfÜgung
Fro:. Wu MH, Lee WJ, Hua KT, Kuo ML, Lin MT (2015) Macrophage einfach Induces Gastric Cancer Invasiveness vun der β-Catenin Passerelle Activating . PLoS NËMMEN 10 (7): e0134122. Doi: 10.1371 /journal.pone.0134122 VerfÜgung
Redakter: Fabrizio Mattei, Istituto Superiore di Sanita, Italien VerfÜgung
Arnaque: 16. September 2014; Akzeptéiert: 6 Juli 2015; Publizéiert: 30. Juli 2015 zu
Copyright: © 2015 Wu et al. Dëst ass eng oppen Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz CC BY verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt si vum original Auteur an d'Quell Kaiser VerfÜgung
Data Disponibilitéit: All Daten sinn bannent de Pabeier a seng Ennerstëtzung Informatiounen Fichieren VerfÜgung
Funding:.. Dës Aarbecht vun Stipendien aus National Science Conseil, Taiwan (NSC 98-2314-B-002-055-MY2) ënnerstëtzt huet VerfÜgung
Wettsträit Interessen: d'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung
Gastric Kriibs (GC) ass ënnert den heefegen Cancers gëtt weltwäit a bal zwee-Drëttel vun esou Patienten stierwen vun. hirer Krankheet. [1] GC ass enk verbonne mat Helicobacter pylori VerfÜgung Krankheet, déi fir chronesch inflammation féiert. [2] dat demagogesch microenvironment vun der Präsenz vun Provider leukocytes mat haaptsächlech macrophages zu souwuel d'Entstoen stroma charakteriséiert ass an entholl Stoffer. [3] eng weg datt entholl-verbonne demagogesch Äntwerte, souwuel lokal a systemesch, wichteg onofhängeg Facteuren zu entholl Werdegang an Metastasen sinn. [4, 5] Mä, d'Linken tëschent dësen molekulare mediators a chronescher inflammation sinn net ganz verstan . VerfÜgung Activatiounscode vun der Wnt Passerelle ass e wichtege Schrëtt an carcinogenesis. Projet'en laanscht de Wnt-β-catenin Passerelle geschéien an ongeféier 90% vun colorectal an hepatocellular carcinomas an zu ronn 30% vun GCs. [6, 7] Doriwwer, entholl necrosis Faktor-α (TNF-α) aus ageschalt macrophages ofgeleet ënnerstëtzt β-catenin Aktivitéit am GC Zellen. [8, 9] Mä trotz Beweiser datt macrophages Akt zu enger demagogesch microenvironment Noutbrems ze gastric tumorigenesis via β-catenin sécher förderen, d'Effete vun der Aktivatioun β-catenin sécher op GC Zell Metastasen an der Relatioun vun deenen Zellen mat Ëmfeld entholl verbonne macrophages (TAMs) net direkt studéiert goufen. VerfÜgung Baséierend op uewendriwwer Conclusiounen, Hypothes mir datt de β-catenin Passerelle och zu Regulatioun macrophage-entschlof GC Metastasen Équipe kann. An dëser Etude, iwwerpréift mir éischt d'Dicht vun communal macrophages an den Ausdrock vun β-catenin zu Stoffer gastric carcinoma benotzt immunohistochemistry (IHC). D'clinicopathological Charakteristiken vun gastric carcinoma an hätt sech bewisen. Doriwwer eraus, hunn mir dass macrophages nuklear br vun β-catenin induce an der Invasioun Fähegkeet vun GC Zellen verbesseren. Eis Conclusiounen weisen an weider eng wichteg Lien tëscht TAM a seng afgerappt sécher Vermëttler, β-catenin, an Regulatioun GC Metastasen Ënnerstëtzung. VerfÜgung kennen an uplanzen VerfÜgung d'Etude gouf vun den institutionnelle Kritik Komitee a Mënscherechter IFLA- Comité vun National Taiwan University Hospital guttgeheescht. Schrëftlech Erlaabnes fir den Echantillon fir Fuerschung Zwecker benotzt gouf vun all Patienten virewech ze gesin kritt. Patient Informatiounen war anonymized a virun Analyse de-identifizéiert. VerfÜgung D'Etude retrospectively Coursë 205 Patienten mat GC festgestallte déi radikal chirurgesch resection am Departement vun General befënnt, National Taiwan Universitéit vu Januar 1998 bis Januar scho 2002 Of dës, 102 Patienten déi Suivi Donnéeën gefeelt oder deen gestuerwen aus perioperative komplizéiert waren ausgeschloss an de Rescht 103 Patienten goufen an analyséiert abegraff. Clinicopathological Verännerlechen sech no TNM Klassifikatioun (5. Editioun, 1997) séiert an d'Charakteristiken sinn an Table 1. Allgemeng Survival (OS) war den Tëscht Agrëff an Doud oder tëscht Agrëff an der lescht fir Eos Patienten Suivi definéiert zesummegefaasst. Monoclonal Antibodies an IHC VerfÜgung D'resected uplanzen vun GC sech zu formalin fix an paraffin Ënnerbewosstsinn. Sektiounen sech fir TAM einfach an β-catenin benotzt monoclonal anti-CD68 antibody (Copie KP1, DakoCytomation, Glostrup, Dänemark) an monoclonal β-catenin antibody (Copie 15B8, Fläch-Aldrich, St. Louis, MO) iwwerpréift, bzw.. Evaluatioun vun Immunostaining VerfÜgung fir d'Dicht vun Otemschwieregkeeten-infiltrating CD68 + macrophages, Otemschwieregkeeten Rubriken goufen vun engem Comité zertifizéiert pathologist (CI Jan) op niddereg Muecht opgefouert (100 ×) fier an der fënnef dat representatiivst Felder sech um 400 × Vergréisserung ausgewielt. D'Resultater goufen manuell gezielt a goufen wéi d'Zomm vun der Zuel vun Zellen zu fënnef 400 × microscopic Felder fir all Beräich vun all specimen. VerfÜgung Zell Kultur VerfÜgung GC Zellen AGS ausgedréckt, N87 (kaaft vun der amerikanescher Type Kultur Collection (Manassas, VA)), MKN45) an TSGH (kaaft aus der Bioresource Collection an Research Center (Hsinchu, Taiwan)) a mënschlech monocytic Zell (aus der Gesondheet Science Research Resources Bank (Rekorder, Japan kaaft) Linn THP-1 Zellen zu RPMI-1640 mëttelfristeg (Life Technologies, Inc., Rockville, MD) mat 10% an et Bovine serum (FBS, Life Technologies Galaxy ugebaut goufen (aus American Type Kultur Collection (Manassas, VA) kaaft) ) an 2 mm L-glutamine (Life Technologies Galaxy). VerfÜgung THP-1 Zellen sech an der Kultur Platen rakommen a mat 100 Dummeldéng /ml 12-O-tetradecanoylphorbol-13 differenzéiert an macrophages vun incubation entschlof -acetate (TPA, Fläch-Aldrich) fir 24 h. D'macrophages waren dräi mol mat RPMI mëttelfristeg wouvun 10% FBS gewäsch, fir aner 24 h an dëser mëttelfristeg incubated den Effet vun TPA an serum-fräi Medien fir aner 24 h incubated eliminéiert. Déi gesammelt an hinzeginn Kultur supernatants sech als macrophage bedingt mëttelfristeg benotzt (CM) wéi virdru beschriwwen. [5, 10] VerfÜgung prolifération /Nuetsvolen Assay VerfÜgung GC Zellen sech am 96-gutt Placke rakommen an Co-cultured mat oder ouni macrophage CM. Der Prolifératioun /Nuetsvolen gouf vun engem colorimetric assay sech mat 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) (Fläch-Aldrich). VerfÜgung kënschtlech Missiounen Assay VerfÜgung D'Invasioun assay war mat transwell Zell Kultur CHAMBERS (Millipore Corp., Billerica, MA) gehaal. D'hypothetesch Zellen sech fir all Neiegkeet op 400 × Vergréisserung an 10 verschiddene Beräicher gezielt. D'Experimenter dräi Mol widderholl huet. VerfÜgung RNS erauszéien an RT-Hinnen alleguer VerfÜgung No Stimulatioun mat oder ouni macrophage CM fir 6 h, goufen GC Zellen gesammelt an total RNS mat der reagent Kit Trizol Quecksëlwer ( Invitrogen, Karlsbad CA) folgenden d'Uweisungen d'Hiersteller. cDNA vun polymerase Kette Reaktioun (Hinnen alleguer) benotzt primers fir MMP7 Implikatioune war (vir: 5'- AGTCAATCCTGCCTTCTTAGCC, ëmgedréint: 5'- GCTCCCACCTTCCCTCTTGG), CD44 (vir: 5'- TGCCGCTTTGCAGGTGTAT, ëmgedréint: 5'- TCCCATGTGAGTGTCTGGTAGC), cyclin D1 ( vir: 5'- CCCAGCCATGGAACACCA, ëmgedréint: 5'- GGAGGGCGGATTGGAAATGA), c-myc (vir: 5'- AAAGAAGGTGTTGGGGTCGG, ëmgedréint: 5'- TGGCTCCCCCTGTTATTTGG) an GAPDH (vir: 5'- GGGTGATGCAGGTGCTACTT, ëmgedréint: 5'- GGCAGGTTTCTCAAGACGGA) . VerfÜgung Nuclear an VerfÜgung Cytoplasmic Zersteckelung mat oder ouni macrophage CM fir 6 Stonnen no Stimulatioun, sech zu 300 μl lysis gefiermt op Äis a Fall bei 5400 Ziichter GC Zellen lysed. Supernatant war als cytosolic Ëmwandlung gesammelt. Nuclear ufale sech gesammelt, duerno zu Natrium dodecyl sulfate polyacrylamide gelies electrophoresis (SDS-PAGE) fir Western blot Analyse lafen. VerfÜgung Western Blotting Analys VerfÜgung No Stimulatioun mat macrophage CM, goufen Zellen mat PBS Katakombe Prellbock, knappen an Ripa an centrifuged. D'Zell lysates zu 10% SDS-PAGE ënnerworf waren an zu engem polyvinylidene fluoride (PVDF) Membran (Millipore Corp.) d'Membran war mat Primärschoul antibodies fir β-catenin, AKT Komedie transferéiert, Erk, JNK (SC1496, SC8312, SC154, SC474, Santa Cruz Laboratoiren, Santa Cruz, CA, USA), MMP7 (MAB3322, CHEMICON, Temecula, CA, USA), CD44 (ab51037, Abcam, Cambridge, MA, USA), c-myc (GTX103436, GeneTex, Hsinchu Stad , Taiwan), cyclin D1 (SC246, Santa Cruz Laboratoiren, Santa Cruz, CA), β-actin (ab8226, Abcam), HDAC1, p-AKT, p-Erk, p-JNK (SC7872, SC7985-R, SC7383, SC6254, Santa Cruz Laboratoiren, Santa Cruz, CA) a Secondaire antibody (Santa Cruz déi). VerfÜgung Immunocytochemistry VerfÜgung Anti-total β-catenin antibody wéi de primären antibody benotzt gouf, a anti- Maus Immunoglobulin G (IgG) Alexa 594 war wéi de Secondaire antibody benotzt. Cover Ausrutscher sech dann schéi Opriichte mëttelfristeg benotzt DAPI fir nuklear staining wouvun. VerfÜgung Lentiviral Produktioun an Wonn VerfÜgung Short hairpin RNAs (shRNAs) aus der National RNAi Kär Facility um Akademesch Sinica (Taipei kaaft huet, Taiwan). D'Zil Haaptrei vun β-catenin shRNA 1 war 5'- CCGGTCTAACCTCACTTGCAATAATCTCGAGATTATTGCAAGTGAGGTTAGATTTTTG-3 "; dass vun β-catenin shRNA 2 war 5'-CCGGTTGTTATCAGAGGACT-AAATACTCGAGTATTTAGTCCTCTGATAACAATTTTTG-3 ". D'lentiviral Vecteure a seng Verpakung vectors sech duerch Kalzium phosphate transfection an 293T Verpackungen Zellen transfected. Kuerz, goufen 293T Zellen gedeelt (10 statistique Analys VerfÜgung statistique Analyse vun de Medeziner Fonctiounen gemaach huet mat der χ Korrelatioun vun Immunohistochemical Variablen mat Clinicopathologic Funktiounen an GC kennen VerfÜgung Immunohistochemical Analyse engem cytoplasmic CD68 staining Muster zougedréckt fir macrophages. CD68 + macrophages goufen uechter peritumoral an intratumoral Stoffer verdeelt awer nëmmen fonnt an der normal mucosa (Lalumi 1A-1c) Fragmenter. D'Dicht vun CD68 + macrophages war besonnesch héich an agebousst entholl Etapp 4 (pT4) entholl lesions Verglach mat pT1 lesions (Lalumi 1D). Fir d'Associatioun tëscht Medeziner Beméien an CD68 + macrophage Dicht, zielt vun CD68 + macrophages bestëmmen sech an deenen uewe ënnerdeelt an ënnert d'Steiren Wäerter. D'Zuel vun CD68 + macrophages gouf fonnt mat entholl Déift a Etapp assoziéiert gin (p = 0,001 an p = 0,043, bzw.) (Table 1). Dëst observation hindeit datt CD68 + macrophages doran entholl Invasioun wichteg kënnen. Fir weider Analyse, goufen Kaplan-Meier Iwwerliewe Kéiren opgezeechent der Associatioun vun macrophages mat Iwwerliewe (Lalumi 2) ze bestëmmen. D'Dicht vun CD68 + macrophages am entholl Otemschwieregkeeten war negatif mat globale Iwwerliewe (p = 0.0073) assoziéiert. Patienten mat héich Zuelen vun tumoral CD68 + macrophages hat kuerz globale Iwwerliewe wéi déi mat héich Zuelen vun CD68 + macrophages. VerfÜgung erhéicht Ausdrock a staark Signal vun β-catenin sech zu erhéijen vun IHC staining observéiert. An de meeschte Fäll, war β-catenin Ausdrock virun allem an der Zytoplasma (Lalumi 3A) läit. Spannen, staark nuklear staining vun β-catenin GC Zellen war mat CD68 + macrophages an der entholl lesions assoziéiert, besonnesch erfollegräich vun der entholl Invasioun (Lalumi 3B). Op der Basis vun dëse Resultater, Hypothes mir dass macrophage einfach β-catenin sécher an gastric entholl Zellen aktivéieren kann, wat dann zu enger Invasioun vun der gastric malignancy wahrscheinlech féiert. VerfÜgung Viraussetzung vun Macrophages fir entholl Missiounen am GC an ausgeléist Macrophage-entschlof Missiounen GC BTS VerfÜgung weider fir eis Medeziner Conclusiounen kënschtlech VerfÜgung, mir éischt Co-cultured macrophages mat verschiddene GC Zell Linnen (AGS, N87, MKN-45 an TSGH) confirméieren . All GC Zell Linnen géif do- macrophages getest ze opgeholl an de macrophage-zousätzlech ëmmer war ofhängeg op d'Mooss vun malignancy vun de Kriibs Zellen als duerch hir invasiveness (Lalumi 4A) geschoss. [11] Fir diskutéieren ob invasiveness oder Prolifératioun vu GC Zellen kann ginn duerch macrophages reegelen, AGS, N87, MKN45 an TSGH sech Co-cultured mat an ouni macrophages oder CM aus macrophage fir 24 h an hir Invasioun an Prolifératioun Fähegkeeten getest. All Zell Zorte Co-cultured mat macrophage oder CM aus macrophage zougedréckt eng Géigend 2-fantastesch Erhéijung vun der Zuel vun Zellen hypothetesch (Verglach mat negativen Kontrollen, p &Si besteet; 0,05), déi net mat hirer Verbreedung Fähegkeet (Lalumi 4B-4D assoziéiert ass ). VerfÜgung Nuclear br vun β-catenin am GC Zellen vun VerfÜgung ageschalt Macrophages Mir kënschtlech en Experiment gehaal ze verstoen ob β-catenin sécher Équipe war am-ageschalt macrophage GC Zell Invasioun. Als zu Lalumi 5A gewisen, war β-catenin immunoreactivity an der Nuklearenergie Ëmwandlung vun N87 Zellen esou fréi wéi 15 Minutten nom macrophage CM Behandlung, an den Undeel vun Nuklearenergie β-catenin FAQ zu enger Zäit-ofhängeg Manéier fräi fonnt. An Linn mat dëse Conclusiounen, zougedréckt immunofluorescence Heefung an nuklear Lokalisatioun vun β-catenin am GC Zellen Co-cultured mat CM macrophage wéi zu Kontrollen Verglach cocultured zu N87 (Lalumi 5B). Dës Resultater proposéiere staark, dass d'soluble Faktoren ofgeleet vun macrophages hëllefen der Heefung an nuklear br vun β-catenin am GC Zellen Mediate. Mir Uewerschenkel transiently β-catenin vun shRNA verwandelt an fonnt β-catenin FAQ Ausdrock bannent 24 h ofgeholl. Genetesch ablation vun β-catenin zu N87 Zellen klappt hir invasiv ëmmer no macrophage CM Behandlung ze erhéijen. Par contre, Net-transfected a Kontroll shRNA hat keng Ännerung vun der invasiv Méiglechen stoussen op N87 Zellen ënner macrophage CM Behandlung (Lalumi 5C). De Montant vun der Nuklearenergie β-catenin FAQ war och am AGS fräi an MKN45 Zellen der macrophage CM Behandlung (S1 Lalumi). VerfÜgung Effects vun Macrophage op Expression vum β-catenin an der afgerappt Genen an N87 BTS Mir Uschléi traditionell Wnt /β-catenin afgerappt Genen MMP7, CD44, c-myc an cyclin D1 zu Datumer wann se vun macrophages ageschalt ginn. D'mRNA an FAQ Niveau vun MMP7, CD44 an c-myc Genen huet all bedeitend an N87 Zellen mat macrophage CM an de Niveau vun cyclin D1 fräi gehumpelt (Lalumi 6A) incubated fräi. β-catenin, MMP7, CD44 an cyclin D1 ofgeholl Invasioun Aktivitéit aus Sax verwandelt awer net c-myc zougedréckt FAQ verwandelt-Regulatioun (Lalumi 6B) No wourop. Fir der Relatioun tëscht Invasioun Fähegkeet an MMP7 an CD44 confirméieren, getest mir d'Kapazitéit vun engem neutralizing antibody MMP7 an CD44 Aktivitéit ze blockéieren. Invasioun ëmmer war vun pretreatment mat 2,5 μg /ml anti-MMP7 a mat 10 μg /ml anti-CD44 (Lalumi 6C) bzw. bedeitend reduzéiert, proposéiert d'Bedeelegung vu béiden Genen vun macrophage-ageschalt GC Zell Invasioun. Mir hunn d'FAQ Niveau vun CD44 an cyclin D1 Genen huet an déi aner GC Zell Linnen fräi (AGS an MKN45) mat macrophage CM incubated mä MMP7 an c-myc sech net relevant geännert (S2 Lalumi). VerfÜgung aner eng méiglech Kräizung vun der MAPK Passerelle mat der Wnt /β-catenin sécher Passerelle gemellt hunn. [12, 13] Mir standing dofir eng natierlech Etude Zäit a fonnt, datt nëmmen phospho-AKT an phospho-Erk Ausdrock upregulated waren wou mat macrophage CM behandelt (S3A Lalumi). Fir d'Interaktioun tëscht der AKT /Erk Passerelle an β-catenin confirméieren, pretreated mir Zellen mat entweder d'Erk inhibitor (U0126) oder déi AKT inhibitor (LY294002). Erof vun β-catenin br an den helle war nëmmen zu Zellen mat der AKT inhibitor awer net Erk inhibitor, déi besot macrophage-avtivated Wnt /β-catenin sécher Passerelle vun AKT (S3B Lalumi) kéint reegelen behandelt fonnt. An GC Zellen, schéngt de AKT Effekt am Wnt /β-catenin sécher Passerelle ageschalt macrophage dominant gin. Virdrun Studien proposéiert och, datt TNF-α vun macrophages produzéiert e Schlëssel Vermëttler fir inflammation ass a kéint β-catenin Aktivitéit zu entholl Zellen förderen. Mir hu fonnt, datt β-catenin Aktivéierung ënner aussetzt macrophage CM (S4 Lalumi) an N87 oofgesinn antibody géint TNF-α schreiwen neutralizing. VerfÜgung D'microenvironment vun engem entholl ass vu kritescher Bedeitung vun Bestëmmung leukocyte Funktioun an phenotype. Konflikter Daten huet besonnesch antitumorigenic oder protumorigenic Funktiounen op macrophages gewisen, awer eis Donnéeën ugëtt macrophages engem protumorigenic Roll Patienten am GC Leeschtung. An der Majoritéit vun erhéijen, produzéiere TAMs enger ganzer Rei vu Facteuren, datt entholl Wuesstem an angiogenesis förderen. [14, 15] Den Ofschloss vun macrophage einfach an d'Nascht Kriibs Zell ass och e wesentleche Estimatioun vun Iwwerliewe vun GC Patienten. [16-18] IHC Conclusiounen vun dëser Etude weisen kloer dass d'Dicht vun macrophages am GC Otemschwieregkeeten mat dem Ofschloss vun de Medeziner Etapp (virun allem an der entholl [T] Bühn) a Iwwerliewe vun Patienten soll ass. Déi aktuell Studien préziséiert och dass macrophages zu fortgeschratt GC schiedlech Roll spille kann. Dat brengt et mat Studien am Aklang datt hindeit, datt d'immun microenvironment protumoral kann anstatt antitumoral, trotz e puer contraire Daten. [19, 20] VerfÜgung Nuclear Heefung vun β-catenin huet an ongeféier een Drëttel-Rapport schonn souwuel intestinal an diffusen Zorte vun gastric adenocarcinomas,. [18] β-catenin ass eng 92 kDa FAQ Haftung déi Funktiounen direkt zu Zell-ze-Zell. [21] Projet'en vun β-catenin an aberrant Ausdrock vu sengem FAQ agebonne ginn an entholl Invasioun an Metastasen. [22, 23] an eiser IHC Conclusiounen, β-catenin war an der Keimzell um invasiv virun entholl Zellen läit, mee net an de meeschte zentrale Beräich vun der Primärschoul erhéijen, wou et fir d'Plasma Membran localizes . Sou Observatioune kann och zu colorectal entholl uplanzen. [24] Wnt /β-catenin Aktivéierung zu Kriibs Zellen am invasiv virun wellkomm fonnt ginn ass als e wichtege Schrëtt an entholl Wuesstem an Werdegang postulated ginn. [25] VerfÜgung Spannen, fonnt mir β-catenin och am helle entholl Zellen mat macrophages wellkomm adjacently etabléiert, eng méiglech Relatioun tëscht macrophages an d'nuklear br vun β-catenin zu entholl Zellen suggeréiert. β-catenin um invasiv virun GCs ass deelweis vun Interaktioune bannent de entholl microenvironment erkläert. Mir bestätegt kënschtlech VerfÜgung datt macrophages der Invasioun Fähegkeet vun GC Zellen Erhéijung. Benotzt immunofluorescence confocal microscopy, alles mir Lokalisatioun an Heefung vun β-catenin am helle zu behandelt macrophages. Sou, Verdächtege mir dat vun macrophages induce β-catenin nuklear br am GC Zellen secreted cytokines, also hir Invasioun ëmmer waarden. D'invasiv virun epithelial erhéijen stellt eng microenvironment zu deem macrophages mat parenchymal Zellen zesummekomm vun extracellular Matrixentgasung produzéiert a vun cytokines a Wuesstem Facteuren déi lokal Promotioun Zell Prolifératioun an Invasioun. [26, 27] Allerdéngs, an eiser Etude, fräi β-catenin secreting Ausdrock kënschtlech VerfÜgung hutt ofzeänneren net Prolifératioun, wat beweist, datt déi selwer, net genuch ass entholl malignancy zu augment. Dat fannen ass och virdrun bewisen, dass β-catenin Haftung Siten nëmmen focally zu Form ënnerstëtzt an koum Direktional Wanderung an Invasioun vu Kriibs Zellen Colon awer net zu der Verbreedung vun gastric an Aarbecht Kriibs Zellen Équipe. [28-30] Trotzdem, de stromal Zell paracrine modulation vun Wnt sécher an epithelial Zellen ass vun enger méi komplex Reseau vu Promotioun an inhibiting secretion Faktoren wahrscheinlech koordinéiert. D'afgerappt Auswierkunge vun dësen veschidden Nivo'en vun Wnt /β-catenin sécher (an besonnesch deenen nächste Zell Prolifératioun, EMT a lokal Invasioun) sinn esou vun nach ganz wéineg verstan. β-catenin translocates zu ervirgaangen wou et Photo'en ze Transkriptiouns Facteuren vun der T Zell Faktor /lymphocyte enhancer Faktor (TCF /LEF) Famill a Initiaten Transkriptiouns vun Zil- Genen wéi cyclin D1 VerfÜgung, c- myc VerfÜgung a MMP-7 VerfÜgung [31, 32] zu Prolifératioun, entholl Invasioun an Metastasen Équipe. [33, 34] Eis Conclusiounen hindeit, datt d'sécher Weeër duerch dat de och β-catenin macrophages induce induce Ausdrock vun Zil- Genen. Konsequent mat eis virdrun Aarbecht, [5] MMP-7 an CD44 waren zwee Hinnen alleguer flamenden Ofgrond der coculture mat macrophages als differentially ausgedréckt Genen mat Metastasen vun GC Zellen verbonne identifizéiert. Ofgeschnidden vun der extracellular Matrixentgasung vun Matrixentgasung metalloproteinases (MMPs) mediated ass e wichtege Mechanismus während entholl Invasioun an Metastasen. Esou ofgeschnidden ass néideg engem microenvironment ze schafen, datt de Wuesstem vun der Primärschoul erhéijen an Metastasen ënnerstëtzt. De β-catenin /TCF komplex activéiert dono eng grouss Zuel vun oncogenes, dorënner vegf, c-myc, c-jr, Fra-1 an gastrin datt och zu macrophage ageschalt β-catenin afgerappt Evenementer Équipe kann. [35] a ville routes well wahrscheinlech de Wnt /β-catenin Passerelle a Regulatioun vun β-catenin sécher ähnlech komplizéiert ginn. Rezent Studien fonnt dass macrophage CM kontrolléiert an der Erk Passerelle an Wnt activéiert Erk zu endothelial Zellen. [36, 37] Hei hu mer dat macrophages induce phosphorylation souwuel Erk an AKT am GC Zellen. Mir bewisen datt Behandlung mat AKT inhibitor awer net Erk inhibitor β-catenin br verklengert. Dës Resultater weisen, datt Akt spillt Rollen an macrophage ageschalt β-catenin sécher an gastric Zell Typen. VerfÜgung erginn, proposéiere de Medeziner Donnéeën datt macrophage einfach mat fräi Schouljoer soll ass an aarme hätt fir GC Patienten déi radikal resection mécht. Macrophages kann GC invasiveness vun activating der β-catenin Passerelle induce. An anere Wierder, vertrieden d'Ennerdréckung vun macrophage einfach an Ennerdréckung vun Aktivéierung vun der β-catenin Passerelle Potential Strategien fir Behandlung vun GC. VerfÜgung Material a Methoden VerfÜgung
Resultater VerfÜgung
Diskussioun VerfÜgung
Konklusiounen VerfÜgung
Informatiounen Ennerstëtzung VerfÜgung S1 Figebam. . Effet vun macrophage CM op β-catenin Passerelle VerfÜgung β-catenin Äschen am helle der Behandlung mat macrophage CM fir 30 Minutten an AGS an MKN45 Zellen VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0134122.s001 VerfÜgung (Name) VerfÜgung S2 Figebam. Effet vun macrophage CM op FAQ Ausdrock vun β-catenin verwandelt-bäiginn Genen vun AGS an MKN45 Zellen VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0134122.s002 VerfÜgung (Name) VerfÜgung S3 Figebam. (A) Macrophage CM AKT an Erk Aktivatioun vun N87 Zellen entschlof. (B) N87 Zellen sech am viraus-behandelt mat 10 μM vun der β-catenin inhibitors:. LY294002 oder U0126 fir 1 Stonn duerno cultured an der Präsenz vun macrophage CM fir 1 zousätzlech Stonn VerfÜgung AKT, Erk an β-catenin FAQ Ausdrock sech duerch Western blot sech VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0134122.s003 VerfÜgung (Name) VerfÜgung S4 Figebam. . Neutralizing antibody géint TNF-α VerfÜgung N87 Zellen an der Präsenz vun macrophage CM fir 24 Stonnen goufen Précoce-behandelt mat oder ouni TNF-α inhibitor fir 1 Stonn VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0134122.s004 VerfÜgung (Name) VerfÜgung
Milchsäure Bakterien a Darmbakterien droen zu de gesondheetleche Virdeeler vum Roggen bäi,
Entdeckung vun 100 nei Genen kann d'Fuerschung iwwer Pigmentéierungskrankheeten hëllefen
Darmmikroben a Wasps hëllefen Pestiziden ze iwwerwannen
Roman superaktivéierende Makrophag Rezeptor kéint Hyper-Entzündung a schwéiere COVID-19 erklären
Probiotika kënnen therapeutesch Virdeeler fir biopolare Patienten ubidden
Fuerschung weist wéi Darmmikroben d'Maugripp beaflossen
Verdauungsmanifestatiounen heefeg awer mëll ënner hospitaliséierten COVID-19 Patienten
Eng Equipe vun 121 Fuerscher aus den USA a Kanada bericht datt wärend Verdauungsmanifestatiounen üblech sinn ënner Leit hospitaliséiert mat Coronavirus Krankheet 2019 (COVID-19), dMajoritéit schéngt m
Fuerschung seet an der SARS-CoV-2 Hënninfektioun,
Iwwerdroung onwahrscheinlech Eng nei Studie verëffentlecht um Pre -Print Server bioRxiv* am September 2020 weist datt Hausdéieren krank gefall sinn a stierwen un enger mysteriéiser Atmungsinfektioun
Leaky Darm a Raumfluch - de Mechanismus opgedeckt
Eng nei Studie iwwer dEffekter vun der simuléierter Mikrogravitatioun, dKonditioun, déi Astronauten am Weltraum stellen, stéiert depithelial Barriär vum Darm, an den Effekt bestoe bleift och nodeems d