Plos ONE: Caveolin-1 Izražanje ravni v raka pridruženih fibroblastov napoveduje izid želodčnega raka

Povzetek

Cilji

Altered izraz epitelijske ali stromalni caveolin-1 (Cav-1), je opaziti v različnih vrstah človeških raka. Vendar pa je klinični pomen Cav-1 izražanja v raka želodca (GC) je še vedno v veliki meri neznan. Namen te študije je raziskati clinicopathological pomen in napovedno vrednost obeh tumorskih celic in rakom povezana fibroblastov (KGZS) Cav-1 v GC.

Metode in rezultati

kvantnih pik imunofluorescenčni histokemija je bila izvedena preučiti izraz Cav-1, v 20 primerih gastritis brez intestinalno metaplazijo (IM), 20 primerov gastritis z UI in 286 primerov GC. Pozitivne stopnje epitela Cav-1 v gastritis brez UI, gastritis z UI in GC je zmanjšal ( P
= 0,012). Nizka izraz Cav-1 v KGZS, vendar ne v tumorskih celicah je bil neodvisen napovedovalec slabo prognozo pri bolnikih GC ( P
= 0,034 in 0,005 oziroma v bolezni prostem preživetje in celokupnega preživetja). Stopnja Cav-1 v tumorskih celicah in KGZS ni pokazala pomembno povezanost s klasičnimi clinicopathological funkcije.

Sklepi

Izguba epitelijskih Cav-1 lahko spodbuja maligni napredovanje in nizke KGZS Cav-1 ravni Herald slabše izid GC bolnika, ki kažejo KGZS Cav-1 je lahko kandidat terapevtski cilj in koristen prognostični označevalec GC

Navedba. Zhao X, je Y, Gao J, Fan L, Li z, Yang G, et al. (2013) Caveolin-1 Izražanje ravni v Cancer pridruženih fibroblastov napoveduje izid iz želodca raku. PLoS ONE 8 (3): e59102. doi: 10,1371 /journal.pone.0059102

Urednik: DunFa Peng, Vanderbilt University Medical Center, Združene države Amerike

Prejeto: 6. december, 2012; Sprejeto: 11. februar 2013; Objavljeno: 19. marec 2013

Copyright: © 2013 Zhao et al. To je odprtega dostopa članek razširja pod pogoji Creative Commons Attribution License, ki omogoča neomejeno uporabo, distribucijo in razmnoževanje v katerem koli mediju, pod pogojem, da prvotni avtor in vir knjižijo

Financiranje:. To delo je podprl Nacionalni projekt Dodiplomski inovacije Kitajske (NO. 111048670) in National naravoslovje Foundation Kitajske (št. 30900652). Med financerji imel nobene vloge pri oblikovanju študije, zbiranje in analizo podatkov, sklep, da se objavi, ali pripravi rokopisa "

nasprotujočimi si interesi. Guilin Fanpu Biotechnology Co, Ltd je tehnološko podporo za TMA gradnjo. Ni patenti, izdelki v razvoju ali tržijo proizvode, naj ugotovi. To ne spremeni pripadnost avtorjev vseh PLoS ONE politike o izmenjavi podatkov in materialov.

Uvod

Kot normalnih tkivih, so tumorji sestavljena iz dveh ločenih, vendar interaktivne oddelke, v parenhima in strome. Tumorjev, tumorske celice same parenhima, ker STROMA vključuje mešanico zunajcelični matričnih elementov (ECM) in nemalignih celic, kot so povezani z rakom fibroblaste (KGZS), žilnih endotelijskih celic in imunskih in vnetnih celic [1], [2] [3]. V zadnjih letih so globoki vplivi tumorske strome na rast in metastaz v različnih vrst tumorjev so široko pojasnjen [2] [3]. Tumorske celice lahko sproži odlaganja reaktivne strome vsebuje aktivirane KGZS, imunske in vnetne celice, ECM elemente, ki lahko dajejo prednost invazije in metastaze raka [2] [3]. Poleg tega, čeprav dokončnih vloge proteinov v molekularni navzkrižno pogovor med tumorjem in stromalni celice ostajajo nejasne, spremenjeno izražanje stromalnih proteinov so bile kaže kot novih biomarkerjev v različnih vrstah ljudi, vključno z rakom dojke [4] [5] [6] [7], prostate [8], nazofarinksa [9] in rak bazalnih celic [10]

družina caveolin gen ima tri člane. CAV1
, CAV2
in CAV3
, ki kodira za proteine ​​caveolin-1 (Cav-1), caveolin-2 in caveolin-3, oziroma [11]. CAV1
se nahaja na kromosom 7 (locus 7q31.1) in vsebuje tri eksonov (35, 165 in 324 bp) in dva introne (1,5 in 32 kb) [11]. Cav-1 predstavlja pomembno strukturno komponento caveolae, ki so bučke v obliki vezikularne invaginations v plazemski membrani [12], [13]. Različne receptorje in signalne molekule so lokalizirani v caveolae in so negativno ureja Cav-1 prek odra domeni. Poleg tega, Cav-1 sodeluje neposredno z dvosloj holesterola in sfingolipidov v caveolin, torej vplivajo na lipidov homeostaze in promet [12], [13]. V raka, je vse bolj jasno, da je Cav-1 vpleten v regulacijo več povezanih z rakom, procesov, od celične transformacije, tumorske rasti, invazije in metastaze, da odpornosti proti več in angiogenezo [14]. CAV-1 prikazuje vlogo predala odvisni na tumorje. V epitelijske predelu, Cav-1 vpliva tako pozitivno kot negativno na razvoj tumorjev. V tumorske strome, še posebej KGZS, nizko izražanje Cav-1 proteina napoveduje negativen rezultat v rak dojk in prostate [4], [5] [6] [8] [12] [15]. Kljub temu, klinične vrednosti Cav-1 v GC ostajajo ni povsem jasno. Na podlagi predhodnih raziskav smo hipotezo, da lahko vloge Cav-1 v epitelnih in strome drugačen, vloge epitelnih Cav-1 je negotovo, vendar nizko izražanje Cav-1 v KGZS lahko spodbuja GC napredovanje in povezana z neugodnim izidom bolnikov GC .

Da bi pojasnili odnos med CAV-1 in GC napredovanje bolezni ali zatiranje, smo analizirali posebej tako stromalnega in epitelne izražanje celic Cav-1 v tkivih odsekih, preko sodobnih kvantnih pik (QDs), ki temelji imunofluorescenčni histokemija (QDs-IHC), ki so bile razvite v naših predhodnih študij in ki so bili zelo akreditirani in se uporablja v laboratorijih [16], [17], [18], [19], [20], [21], [22 ]. Fluorescentne polprevodnikov nanokristalne QDs so nov razred večnamenskih anorganskih fluorofori, ki imajo veliko, ki so upravičeni lastnosti, kot so ozkopasovnih emisij vrhov, valovna dolžina njihove fluorescence je močno odvisna od njihove velikosti in različnih QD barv lahko hkrati vzbuja samo en vir svetlobe z minimalnim spektralne prekrivanja [16] [17] [18] [19] [20] [21] [22]. Te lastnosti je QDs zelo koristno za multipleksiranega slikanje molekularno imunofluorescenčni [21], [23]. Napredna več tarče označevanje tehnologija QDs-imunohistokemijo omogočeno natančno analizo Cav-1 ekspresijo na KGZS, s hkratnim odkrivanje alfa-gladka aktin (α-SMA), ki je označevalec KGZS in Cav-1 proteina.

materiali in metode

bolniki in Nadaljnji

Ker je bila časovno omejena in nekateri bolniki so bili iz bolnišnice, zato je težko pridobiti pisno soglasje. Poklicali smo za vsakega bolnika, je pojasnil naši raziskavi je bila uporabljena samo za akademske izmenjave, in ni škodljiva za njihovo zdravje, in ne vsebuje njihove osebne podatke. Ko smo poklicali, je bil notar prisoten, in smo prejeli mobilni telefon kratko sporočilo, ki smo ga morajo bolniki, ki soglašajo študijo za pošiljanje k nam. Če ima bolnik mrtev, smo dobili soglasje od svojega pravnega zastopnika. Na koncu smo dobili ustno soglasje vseh 300 bolnikov. Skupno 340-formalin določen,-parafin vgrajeni tkiv so bili pridobljeni iz bolnikov, zbolelih v obdobju od julija 2005 do februarja 2012, vključno s 300 GK, 20. gastritis brez intestinalno metaplazijo (IM) tkiv in 20 gastritis z IM tkiva. Gastritis brez infrastrukture in z vzorci IM so pridobljeni iz adenokarcinom paracancerous tkiv. Serijska odsek potrjen noben tumorsko tkivo je bilo v teh vzorcih. Primerki so bili zbrani iz arhiva Oddelka za patologijo, Bolnišnica Zhongnan Wuhan University (Hubei, Ljudska republika Kitajska). Histološka diagnoza in stopnje diferenciacije so bili določeni v skladu z merili, Svetovna zdravstvena organizacija (WHO) za GC. Vsi vzorci GC so razvrščene glede na razvrstitev po UICC TNM (2009). Dve patologi-board certifikatom (Yang GF Fan LF) je ponovno potrdil Histopatološka značilnosti teh vzorcev. 326 vzorcev je bilo uspešno ohrani za nadaljnje analize; Medtem je bilo 14 GC vzorci izgubili stekelce med imunskim barvanjem. Clinicopathological dejavniki bolnikov GC so navedene v Tabeli 1. Pri 247 bolnikih GC je bilo dovolj tkiva za analizo tumorskih celic in povezane z rakom fibroblastic Cav-1 imunskim barvanjem. Vsi ti 300 bolnikov je bilo zdravljenih z radikalno resekcijo ali citoreduktivno operaciji GC, pred dajanjem kemoterapije ali radioterapije. Ta študija je bila odobrena s raziskovalno etiko odbor Inštituta medicinske šole osnovne medicinske vede, Wuhan University.

Spremljanje začelo na dan operacije in končala avgusta 2012. Med preostalimi 286 GC tkiv bolnikov , 257, vpisanih v naših nadaljnjih kohorte in 116 bolniki, ki so uspešno dosegle petletni spremljanje, ali so umrli zaradi GC so bile vključene v analizo preživetja. Bolniki, ki niso dosegli petletno spremljanje in umrli zaradi drugih bolezni ali zaradi nepričakovanih dogodkov, so bili izključeni iz študije preživetje. Mediana nadaljevanje od 116 bolnikov je bila 62 (razpon: 1-85) mesecev. Celokupnega preživetja je bila opredeljena kot interval od dneva operacijo do smrti. Brez bolezni je bil definiran kot interval od dneva operacijo do ponovitve. Diagnoza ponovitve je temeljila na naslednjih merilih: lokalna ponovitev bilo z endoskopsko biopsijo ali relaparotomy; metastaze na radiološko, ultrazvočno ali PAP citološki pregled.

Tissue Mikromrežni Gradbena

so bili zgrajeni dve skupini tkiva mikromrež (TMAs). Vsak set vsebuje 5 TMAs, ki so bili nameščeni s 340 osebkov. Najbolj reprezentativne tumor področja so bila opredeljena na hematoxylin- in-eozin obarvajo oddelkov in je označena na diapozitiv. Način, kako smo gradili TMAs in instrument mikromrež sistem so bili enaki pri prejšnji raziskavi [24], [25]. Kot je bilo že študijah niso poročali intratumorska heterogenost Cav-1 izražanja v GC in naše izvedljivosti poskus je navedeno, da je ena žica na tumor na TMA in velikega dela pokazala dobro usklajenost [26], [27] [28], zato, pri testiranju eksperiment, je ena od osrednjih vzorčili v vsakem primeru. Na kratko, je eden jedro s premerom 1,5 mm, vzeta iz vsakega vzorca in vstavljena v prazno "prejemnik" parafinski bloki; Ti bloki smo razrezali na dele (4 mikrometrov debela) in se uporabljajo za analizo QDs-IHC. temelji QDs

Imunofluorescenčni histokemija

Cav-1 radioinkorporacijo so odkrili v enem nizu TMAs. Protitelesa QDs konjugirano Streptavidin sonde (QDs-SA) z valovno dolžino emisije 605 nm in s tem povezanih reagenti za odkrivanje Cav-1 je bilo enako kot prej [16], z naslednjimi glavnimi postopki: deparaffinizing → pridobivanje antigena → blokiranje → primarno protitelo za Cav -1 (Cell Signaling Technology, Beverly, MA) → pranje in blokiranje → biotiniliranega IgG → pranje in blokiranje → 605 nm-QDs-SA → pranje → montažo in opazovanja. Signal pridobljen iz celic označevanju bila odkrita preko uporabi Olympus BX51 fluorescenčno mikroskopijo (CCD DP72). QDs Signal je bil poseben cilj, rdeča in photostable. Avtofluorescenco tkiv ozadju je bila zelena. Ker Cav-1 se običajno lokalizira v endotelijskih celicah žil [27], [29], ki so obravnavani v vsakem TMA, se lahko služil kot notranji pozitivno in kontrolo kakovosti v QDs-IHC. TBS namesto Cav-1 primarno protitelo služil kot negativno kontrolo.
Temelji QDs

Double imunofluorescenčni Označevanje

Uporabili smo en niz TMAs za Cav-1 /α-SMA colocalization, ki jih QDs zazna ki temeljijo na dvojni tehnologija označevanja imunofluorescenčni v skladu z navodili proizvajalca (Wuhan Jiayuan Quantum Dots Co, Ltd). korake vse razredčitve (protitelesa in QDs) smo izvedli v TBS, ki vsebujejo 2% goveji serumski albumin (BSA, Sigma, St. Louis, MO, ZDA). Antigen Preiskovalna bila izvedena v citronske kisline (10 mM, pH 6,0) pri 95 ° C za 10 minut, čemur sledi ohlajanje na 30 minut. TMAs smo najprej inkubirali v 2% BSA pufru pri 37 ° C za 30 minut in nato pri 4 ° C preko noči pri kuncih anti-Cav-1 poliklonsko protitelo in miši anti-α-SMA monoklonsko protitelo (1:300 redčenja, Abcam, Cambridge, MA) z namenom, da bi vezi protiteles. Nato smo TMAs izperemo trikrat s TBS-T (0,5% Tween v TBS) 5 minut vsakič, ter inkubiramo v Biotinilirana kozji anti-mišji IgG (1:400 redčenja, Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA) pri 37 ° C 30 min. Za QDs konjugacijo, protitelo veže na TMAs inkubiramo v 2% BSA pufru pri 37 ° C za 10 minut, inkubirana v QDs (525 nm) konjugirano streptavidin (1:200, Wuhan Jiayuan Quantum pik Co., Ltd.) in QDs (605 nm), konjugiranih na kozji anti-rabbit IgG (1:100, Wuhan Jiayuan Quantum Dots Co, Ltd) za 50 minut, trikrat izprana z TBS-T za vsak 5 min. Končno smo TMAs zapečatena z 90% glicerina (Sigma). Signal imunofluorescenčni opazili s Multispektralna sistemov mikroskopija slikanje šestilom je (Caliper Life Sciences). Ker sta bila imunofluorescenčni signal enotnega označevanja in dvojno označevanje udaril s CCD DP72 in Multispektralna sistemov mikroskopija slikanje oziroma smo kalibriran rezultate teh dveh instrumentov, da se zagotovi primerljivost teh poskusih. Pozitiven signal a-SMA je zelena, in Cav-1 je bila rdeča. Cav-1 izraz v endotelijskih celicah žil [27], [29], α-SMA izražanja v krvnih žilah in znanim pozitivnim tkiva se štejejo kot pozitivne kontrole. TBS namesto dveh primarnih protiteles služil kot negativne kontrole, samo kaže avtofluorescenco signal.

Točkovanje imunofluorescenčni rezultatov

Rezultati so bili ocenjeni z dvema patologov (Yang GF Fan LF) hkrati v istem prikazovalnik , ki so neodvisni in zaslepljeni s kliničnimi znaki študije. Rezultat obeh patologi so primerjali in vse neskladnih rezultati so bili ponovno oceniti prevrednotenju od obarvanih vzorcu tkiva z dvema patologi, da se doseže rezultat konsenza. Metodologijo za točkovanje Cav-1 obarvanje tumorskih celic in KGZS bili enaki. Rezultati so bili določeni z združevanjem delež pozitivno obarvanih celic in intenzivnost obarvanja. Oddelki so bili prvotno skenirani pri nizki moči. Nato so bile celice iz petih reprezentativnih področjih, vsak osebek v visoki povečavi (200 ×) šteje za Cav-1-obarvanih tumorskih celic ali KGZS. Območje pozitivni (AP) so razvrščeni celic, kot sledi: 0 (brez pozitivnega površino ali pozitivno območje < 5%), 1 (pozitivno območje 5-25%), 2 (pozitivno območje 26-50%), 3 ( pozitiven območje 51-75%) in 4 (pozitivno območje > 75%). Cav-1 intenzivnost obarvanja (IS), ki ga je numerična vrednost je povzročilo ocen: 0 (negativen: ni pozitiven signal), 1 (šibka: svetlo ali temno rdeča signal) in 2 (močna: svetlo rdeča signal). Ravni izraz Cav-1 so bili izračunani na podlagi skupno število točk kot naslednji enačbi:. distribucijskega Intenzivnost (ID) = AP × JE

mejna vrednost za visoke in nizke izražanja je bila določena na sprejemniku, ki deluje značilnost ( ROC) analiza krivulja z glede na celokupno preživetje. Glede na optimalno občutljivosti in specifičnosti ROC krivulje splošnem stanju preživetje, 1.5 je bila opredeljena kot optimalno cutoff za Cav-1 imunofluorescenčni rezultat v KGZS (ID-ja ocena ≥1.5 opredeljena visoko izražanja in ID ocena < 1,5 navedeno nizko izraz) 3,5 je bil opredeljen kot optimalno cutoff za Cav-1 imunofluorescenčni rezultat v tumorskih celicah (ID-ja ocena ≥3.5 opredeljena visoko izražanja in ID ocena < 3,5 navedeno nizko izraz).

Statistična analiza

Uporabili smo SPSS 17,0 programske opreme (Chicago, IL, ZDA), da izvede vse statistične analize. Friedman testu je bila uporabljena za analizo razliko Cav-1 originalnih partitur med različnimi želodca poškodb. ROC analiza krivulja je bila izvedena za določitev cutoff točko visoke ali nizke ravni Cav-1 in ocenjuje napovedno vrednost Cav-1 izraz za splošno preživetje. Test χ2 ali Fisherjev natančni test ni bil uporabljen za analizo korelacije med clinicopathological parametrov in Cav-1 izražanja. rang test korelacije Spearman je bila izvedena za analizo povezavo med Cav-1 izražanja v tumorskih celicah in KGZS. Splošna stopnja preživetja in bolezni, preživetje brez bile ocenjene po metodi Kaplan-Meier, in v primerjavi s testom dolgo uvrstitev. Multivariatna analiza z uporabo Cox sorazmerna nevarnosti regresijski model smo uporabili za testiranje neodvisne prognozo vrednosti. Dva tailed P
-values. ≪ 0,05, so bile obravnavane statistično značilno

Rezultati

Izražanje Cav-1 v različnih želodčnih lezij

lokalizacije in izraz Cav-1 v gastritis brez IM, gastritis z IM in GC ocenil QDs-IHC uporabo Cav-1 poliklonsko protitelo je. močne intenzivnosti krof oblikovan na pozitivni signal Cav-1 v strome tumorja je bila notranja kontrola endotelijske ekspresije (sl. 1A). V gastritis brez IM tkiv, negativni Cav-1 signala pretežno v sluzničnih celic na površini (sl. 1A) in pozitiven signal pretežno v bazo in vratu celic fundic žlez (sl. 1C). V gastritis z IM tkiv, v nekaterih primerih ni pokazala distribucijo Cav-1 (sl. 1E) in nekateri so pokazali pozitivno Cav-1 madež na absorpcijsko celico in čašo celico metaplastic žlez (sl. 1G). Izraz Cav-1 radioinkorporacijo je predvsem opazili na celične membrane (sl. 1L) in citoplazmo. Standard signala zadetka, je prikazana na sliki. 1I-K in reprezentativni primeri Cav-1 ekspresijo v PK smo pokazali na sliki. 2. Colocalization CAV-1 in α-SMA proteinov je bila odkrita s sedežem QDs označevanje dvojna imunofluorescenčnim v GC in analiziramo z multispektralno sistemov za slikanje, da natančno opredeliti Cav-1 ekspresijo v KGZS (sl. 3). Porazdelitev signalom Cav-1 v fibroblaste je naključna in nima nobene zveze s statusom Cav-1 v tumorskih celicah.

Tabela 2 povzeti prvotne sto Cav-1 ekspresijo na gastritis brez IM, gastritis z UI in GC. Epitelija predelu, 30% (20/06) za gastritis brez infrastrukture, 55% (11/20) za gastritis z IM, 75% (15/20) GC so bile dosegel 0, ki prikazuje Cav-1 protein izražanje ravni postopoma zmanjšuje . Friedman Test je pokazal, da je razlika Cav-1 barvanja točk med gastritis brez UI, gastritis z bil IM in GC statistično značilna ( P
= 0,012).

Korelacija Izražanje Cav-1 med tumorske celice in KGZS

analizirali smo tudi korelacije med tumorskih celic in KGZS v Cav-1 izražanja. Kot je prikazano v tabeli 3, pri 226 primerih z nizko CAV 1expression v tumorskih celicah, 121 (53,5%) primeri pokazala nizko ekspresijo Cav-1 v KGZS (sl. 2A) in med 21 primeri z visoko Cav-1 ekspresijo v tumorskih celicah, 9 (42,9%) primeri prikazane visoko Cav-1 ekspresijo v KGZS (sl. 2C). Drugi 117cases pokazala poseben status izraz v tumorske celice in KGZS (sl. 2e in G). Ni značilna korelacija je bila ustanovljena med tumorskih celic in KGZS Cav-1 izražanja (r = -0,20, P
= 0,751).

Klinični pomen Cav-1 izražanja v tumorskih celicah in KGZS v GC

Vsi 286 GC vzorci so bili na voljo za analizo Cav-1 imunskim barvanjem v tumorskih celicah in 247 (86,4%) primerih so dovolj tkiva za analizo Cav-1 imunskim barvanjem v KGZS. Tabela 3 povzela korelacijo med tumorskih celic ali KGZS v Cav-1 izražanja in klasične clinicopathological parametre GC, kot so status starosti, spola, odrski T in bezgavk v univariantne analize. Vendar pa ni bilo pomembnih povezav našel.

Poleg tega smo raziskovali napovedni vrednosti Cav-1 izražanja v tumorskih celicah in KGZS. Kaplan-Meier analizo in test log-rank je pokazala, da je nizka izraz Cav-1 v KGZS in ne v tumorskih celicah napovedano slabo preživetje. Mediana celokupnega preživetja nizkih KGZS Cav-1 izraz podskupin je bil 73,0 meseca (95% CI, 55,589-90,411), v intervalu spremljanja, medtem ko je imel visoko KGZS Cav-1 izraz podskupina preračunano stopnjo preživetja približno 0,8 (slika . 4A). Kot je prikazano na sliki. 4B, nizka izraz Cav-1 v KGZS tudi napovedal zgodnjo ponovitev bolnikov GC. Slika 4C in D je pokazala, da tumorske celice stanje Cav-1 ni pomembno povezanost z celokupnega preživetja in brez bolezni preživetja ( P
= 0,178 in 0,104, v tem zaporedju). Poleg tega je bila kumulativna 5-letno preživetje bolnikov, pri katerih tumorji razstavljena visoko KGZS Cav-1 izraz 75,5% (95% CI, 0,642-0,868), medtem ko je bilo le 57,4% (95% CI, 0,456-0,692), v nizkih KGZS Cav-1 skupina ( P
= 0,053).

v univariantne analize, fazo TNM, stadij T, status bezgavk in ravni KGZS Cav-1 je bilo ugotovljeno, da je bistveno povezan z boleznijo preživetje brez bolnikov GC ( P
= 0.001, 0.003, 0.010 in 0.029, v tem zaporedju, tabela 4). TNM faza, faza T in raven KGZS Cav-1 je bila statistično značilna s celokupno preživetje ( P
= 0.012, 0.006 in 0.013, v tem zaporedju, preglednica 4). Da bi ugotovili, ali je KGZS Cav-1 izraz neodvisen napovednik ponovitev in preživetje GC bolnikov je bila multivariatna analiza izvede z uporabo COX sorazmerna regresije nevarnost modela, skupaj s starostjo, razvrščanje T, stadij TNM in drugih funkcij tumorjev. Spet je bila stopnja Cav-1 v KGZS neodvisno in močno povezan s ponovitvijo GC bolnikov in izid ( P
= 0,034 in 0,005, v tem zaporedju; preglednica 4). Nasprotno, tumorske celice raven Cav-1 ni Prognozirati GC bolnikovo ponovitve in preživetje v hkratni modelu (tabela 4).

smrt napovedna vrednost CAV 1 pragov v tumorskih celicah in v KGZS bila analizirana kot dobro. Kot je razvidno iz slike 5, raven Cav-1 v KGZS napovedal smrt z uspešnostjo; površina pod krivuljo je bilo 0,627 (95% IZ: 0,515-0,738; P
= 0,032). Ker je stopnja Cav-1 v tumorskih celicah ni bilo mogoče predvideti smrt, s površino pod krivuljo 0,551. (95% IZ: 0.438-0.664; P
= 0,393)

Pogovor

Tukaj smo poročali, da je Cav-1 radioinkorporacijo večinoma opazili na celično membrano in citoplazmo. V gastritis brez IM tkiv, je Cav-1 signala predvsem odkrita v bazo in vratu celic fundic žleze. V gastritis z IM tkiv, Cav-1 obarvanje predvsem najde v sprejemno celico in Goblet celico metaplastic žlez. Ta rezultat je povezana z drugo študijo, ki je analiziral CAV 1 želodčnega tkiva preko imunohistokemiji [27]. CAV-1 ekspresijo postopoma zmanjšuje z napredovanjem GC in nivo ekspresije v KGZS namesto v tumorskih celicah do neke mere napoveduje ponovitev in preživetje pri bolnikih GC.

Vloge CAV-1 proteina v razvoj tumorjev so tumor odvisni in predelek odvisni [12], [30]. Cav-1 gen je lokaliziran na procesno D7S522 človeškega kromosoma 7q31.1, ki je pogosto črta v nekaterih vrstah tumorjev [11]. Poleg tega, Cav-1 je vpleten v caveolin odra domeni in lahko povzroči inhibicijo signalizacije receptorjev citokinov [14], kar kaže na tumor dušenje vlogo Cav-1. Tumor spodbujanje aktivnosti CAV-1 je splošno potrjena s previdnim odkrivanje svojih ravni izražanja in klinične vrednosti v različnih vrst raka, kot pero ploščatoceličnega karcinoma, požiralnika karcinoma skvamoznih celic, mehurja prehodno celic karcinoma, nazofaringealnega karcinoma in vratu ploščatocelični karcinom [16] [31] [32] [33] [34]. CAV-1 ima različne vloge v tumorskih celicah in stromalnih celic. Na primer, v dojke in raka prostate, izpadanje stromalni Cav-1, vendar ne tumorskih celic Cav-1 napoveduje slabo prognozo [6], [8], [12] [14], navaja vloge razdelka odvisnega od Cav- 1.

Naši rezultati so pokazali, da Cav-1 nivo izražanja v epitelijskih celic postopoma zmanjšal z malignim napredovanje GC. Podobne rezultate so poročali v drugi študiji [26] preiskovalnega Cav-1 izraz UI in GC, kar pomeni, Cav-1 je mogoče šteti kot supresorski tumorja v razvoju GC. Poleg tega sta obe tumorske celice in KGZS Cav-1 proteina izraz stanja niso bili korelirani z značilnimi clinicopathological parametri, kot fazi T, stadij TNM in razvrščanje Lauren. Bilo je v nasprotju z drugimi študijo [26], ki je pokazala, da je bila nizka izraz tumorske celice Cav-1 proteina korelira s stopnjo visokim T, stadij TNM in bezgavke metastaz. Razlika je lahko posledica metode vrednotenja: smo ocenili barvanje z množenjem intenzivnost in delež celic, obarvanih in določili cutoff točko, ki je imela optimalno občutljivost in specifičnost krivulje ROC, ki temelji na splošnem stanju preživetje; medtem ko je v drugih raziskavah so ocenili le odstotek immunopositive celic in pragu pozitiven ali negativen ni bil predstavljen. Poleg tega je večji vzorec naše raziskave lahko vplivali na rezultate, kot dobro.

KGZS so med najbolj bistvenih sestavin tumorske strome, s pomembne funkcije indukcijo odlaganja ECM, ki ureja epitelne diferenciacijo in vnetni odziv in interakcijo z mikrovaskulaturi ga izloča matrične metaloproteinaze in rastni faktor vaskularnega endotelija [35]. Ker Cav-1 proteina je potrebna strukturna komponenta caveolae, spremenjeno ekspresijo Cav-1 proteina v KGZS bi vplivalo različnih patoloških procesov in posledično spodbuja razvoj tumorjev. Izguba Cav-1 proteina v KGZS spodbuja aktiviranje KGZS preko aktiviranja TGF-beta pot, zato olajša tumor mikrookolje tkiva in razvoj tumorjev [12]. Vendar pa je druga študija, objavljena v Cell
poročali v nasprotju funkcije KGZS Cav-1 protein, ki stromalni Cav-1 podpira tumorsko invazijo in metastaze skozi sile odvisna od arhitekturne ureditve mikrookolja [36]. Zato je vloga KGZS Cav-1 je še vedno negotova. Tukaj predstavljeni rezultati so pokazali neodvisen napovedni napove GC vključuje Cav-1 nivoja izražanja v KGZS. Nizko izraz Cav-1 v KGZS, vendar ne v tumorskih celicah, neodvisno prognosticated zgodnje ponovitve in slabe preživetja bolnikov GC. ROC analiza je pokazala smrtno napovedno vrednost nizko Cav-1 v KGZS. Rezultati pomenilo, da tumor inhibicijo vlogo KGZS Cav-1 proteina in so v skladu z ugotovitvijo v rak dojk in prostate, ki pojasnili, da je izguba stromalnih Cav-1 napoveduje slabo prognozo [8], [12] [15]. Tudi pri raku dojke, je jasno, da z razvojem raka, tumor mikrookolje postane hipoksično in slabo prehranjevanje niša, spodbujanje avtofagija v KGZS. Potem je nenormalno aktivira avtofagija razgrajuje Cav-1 v KGZS. Seveda, ali obstajajo podobni mehanizmi GC zahteva več vitro
študij.

Poleg tega je izguba stromalni Cav-1 ima veliko napovedno vrednost v ER (+), PR (+), HER2 (+), in ti bolniki trojni negativni rak dojke (ER (-) /PR (-) /HER2 (-)). Hkrati sprožil endokrine terapija ne vpliva na njegovo napovedno vrednost, zaradi česar je nov univerzalni ali pogosto uporablja za raka dojke prognostični dvojno podajo [37]. GC je četrta skupna in tretja smrt povzroča raka na svetu [38], ki še vedno nima dovolj ustreznih biomarkerjev za prognostično ocenjevanje in prilagojeno zdravljenje proti raku. HER2 bolniki pozitiven GC so koristi od zdravljenja trastuzumaba, vendar je le malo bolnikov so HER2 pozitivni, na primer, le 19% bolnikov GC pokazala HER2 pozitivnega v naši raziskavi. Danes, napredne bolniki GC z negativno HER2 še vedno trpijo zaradi slabega preživetja. Čimer bi se določile več ciljev, ki zavirajo razvoj GC je zelo potrebna. Tukaj smo pokazali vrednosti uporabe stromalne beljakovin v biomarkerjev v GC, ki lahko prispevajo k molekularno tipizacijo GC in posledično zdravljenje GC, preverjanje bistvene vloge tumorske strome v razvoj tumorjev. Poleg tega je študija o možnostih zelo priporočljivo, da bi preverili napovedni vrednosti in raziskati klinični pomen odkrivanja Cav-1 v KGZS.

Zanimivo je, da kljub temu, KGZS Cav-1 lahko stanje se uporablja kot prediktor ko smo analizirali korelacijo med stopnjami KGZS Cav-1 in klasičnih clinicopathological parametrov GC, ni bilo pomembno združenje našel. Tako spodbujanje tumorske invazije in metastaze ne sme biti glavni mehanizmi, s katerimi izguba KGZS Cav-1 spodbuja razvoj GC. Kemoterapija je najpogostejši dodatno zdravljenje, da se priporoča, da na srednji in bolnikih z napredovalo stopnjo GC na Kitajskem. Skupaj z rezultati prikazani tukaj, smo poudarili, da
Nazadnje, v naši raziskavi, ki temelji QDs, ali lahko nizka izraz Cav-1 v KGZS povezana z odporom kemoterapije lahko zasluži nadaljnjo študijo opazno problem.

, s pomočjo naprednih double imunofluorescenčni tehnologija označevanja, je Cav-1 protein v KGZS natančno se nahaja. pseudo-color co-lokalizacijo slike se nam dovoli, da oceni raven Cav-1 v KGZS izključno pa temelji QDs QDs-IHC in tehnologijo dvojne označevanje imunofluorescenčni ni običajno uporabljajo v kliničnih laboratorijih. Imunohistokemija je najpogosteje izvaja tehnologija v kliničnih laboratorijih. Naša predhodna študija kaže, da je QDs-IHC Postopek občutljiv in specifičen kot IHC [22]. dvojno označevanje Če želite odkriti hkrati dveh različnih proteinov, kot Cav-1 in a-SMA iz ene strani na osnovi QDs-, je roman, zanesljivo in alternativno metodo, s katero bomo lahko dobili rezultate čim bolj natančen.

Sklepi

Skratka, naša študija je ocenila Cav-1 izraz v obeh tumorskih celicah in KGZS in raziskovali njihov klinični pomen za bolnike GC. Omeniti je treba, da se lahko izraz Cav-1 v KGZS namesto tumorskih celic posebej uporabljajo pri napovedovanju zgodnje ponovitve in malo možnosti preživetja bolnikov GC, ki kažejo, Cav-1 v KGZS kandidat Terapevtski cilj in koristen prognostični označevalec bolnikov GC . Nadaljnje raziskave so potrebne, da preuči mehanizme, s katerimi visoke stopnje Cav-1 v KGZS zavirajo GC napredovanje in, po možnosti, da razvijajo terapije ciljanje CAV 1. Poleg tega bo nadaljnja klinična preskušanja bistvenega pomena, da se preveri napovedno vrednost KGZS Cav-1 v PK in ali bi lahko prispevali k prilagojeno zdravljenje proti raku.

Zahvala

Avtorji zahvaliti Dr. Kathryn Solka, Odsek za biokemijo, Rush University Medical Center za pisanje pomoč.

• Plos ONE: prognostični Vrednost Cancer Stem Cell Marker CD133 izražanja želodčnega raka: sistematični pregled
• Plos ONE: ciljanje CDH17 Zavira napredovanje tumorjev želodčnega raka, ki ga Downregulating NT /beta-Catenin Signaling