Kärn apoptosinducerande faktor 1 (NAIF1) har tidigare rapporterats att inducera apoptos. Dessutom uttrycket av NAIF1 var signifikant nedreglerade i humana gastriska cancervävnader jämfört med intilliggande normal vävnad. Emellertid är den mekanism genom vilken NAIF1 genen inducerar apoptos inte helt klarlagda. Våra resultat visar att NAIF1 minimalt uttrycktes i alla de testade gastriska cancercellinjer. Våra data visar också att NAIF1 är lokaliserad i kärnan av celler, såsom detekteras genom övervakning av grön fluorescens av NAIF1-GFP-fusionsproteinet med användning av fluorescerande konfokalmikroskopi. Därefter tillsattes en jämförande proteomik metod som används för att identifiera det differentiella uttrycket av proteiner mellan gastriska cancercellinjer MKN45 /NAIF1 (-) och MKN45 /NAIF1 (+). Vi hittade fem proteiner (proteasom 26S subenhet 2, proteasomen 26S subenhet 13, NADH dehydrogenas Fe-S-protein 1, chaperonin innehållande TCP1 subenhet 3 och thioredoxin reduktas 1) som var upp-reglerade och tre proteiner (ribonukleasinhibitor 1 14-3- 3 protein epsilon isoformen och apolipoprotein AI-bindande protein) som nedregleras i MKN45 celler som överuttrycker NAIF1. Vi upptäckte också att NAIF1 kan inducera cellcykelstopp vid G1 /S-fas genom att förändra uttrycket av cellcykelns proteiner cyclinD1, cdc2 och p21. De differentiellt uttryckta proteinerna identifierade här är relaterade till olika cellulära program som involverar cellcykeln, apoptos, och signaltransduktion reglering och tyder på att NAIF1 kan vara en tumörsuppressor i magcancer. Vår forskning visar att belyser roll hur NAIF1 funktioner i magcancer
Citation. Yang M, Zhong J, Zhao M, Wang J, Gu Y, Yuan X, et al. (2014) Överuttryck av Nuclear apoptosinducerande faktor 1 Förändrat proteomik profil Human Gastric Cancer Cell MKN45 och inducerade cellcykelstopp vid G1 /S-fasen. PLoS ONE 9 (6): e100216. doi: 10.1371 /journal.pone.0100216
Redaktör: Rossella Rota, Ospedale Pediatrico Bambino Gesu ', Italien
emottagen: 27 oktober 2013; Accepteras: 23 maj, 2014; Publicerad: 13 juni 2014
Copyright: © 2014 Yang et al. Detta är en öppen tillgång artikel distribueras enligt villkoren i Creative Commons Attribution License, som tillåter obegränsad användning, distribution och reproduktion i alla medier, förutsatt den ursprungliga författaren och källan kredit
Finansiering:. Denna forskning stöddes av Nationalnyckeln Basic Research Program of China (2007CB914700). Finansiärerna hade ingen roll i studiedesign, datainsamling och analys, beslut att publicera, eller beredning av manuskriptet
Konkurrerande intressen:.. Författarna har förklarat att inga konkurrerande intressen finns
Introduktion
Gastric cancer är en av de vanligaste maligniteter i världen som orsakar ca 8% och 10% av de årliga cancerfall och dödsfall, respektive. Enligt världsomfattande epidemi rapport från Världshälsoorganisationen, är nästan en miljon gastric cancerfall och 738,000 dödsfall beräknas ha skett under 2008 [1], [2]. Många ansträngningar har gjorts i klinisk; är emellertid dödligheten hos patienter med ventrikelcancer fortfarande så hög som 70% [2]. En orsak till denna höga dödlighet är att gastric cancerpatienter ofta inte diagnostiseras förrän ett framskridet stadium, vilket är för sent att ge effektiv behandling. Det finns därför ett uppenbart behov av att hitta nya biologiska markörer och effektiva strategier för tidig diagnos och behandling av magcancer.
Proteomics har använts i många forskningsområden, bland annat cancerforskning. Vanliga prover i proteomik analys för cancerforskning inkluderar vävnad och blod från cancerpatienter, liksom cancercellinjer med olika bakgrunder eller olika behandlingar [3] - [6]. Dessa proteomik analyser användes för att undersöka uppkomsten och utvecklingen av cancer eller att leta efter diagnostiska biomarkörer. De resultat vi som erhållits genom proteomik metoder är inte bara på grund av direkt reglering av transkriptionsnivå, men också spegla posttranslationella modifieringar av proteiner [3], [7]. Därför kan vi analysera både uttryck och reglering av protein med proteomik analyser. Trots massor av ny teknik, har två-dimensionell elektrofores i kombination med masspektrometri förblivit den mest använda metoden för proteomik analys.
Den humana genen som kodar för kärn apoptosinducerande faktor 1 (NAIF1) ligger på kromosom 9q34.11 . NAIF1 kodar för ett protein med en myb I föreliggande studie använde vi proteomic teknik som bygger på två-dimensionell elektrofores i kombination med MALDI-TOF masspektrometri för att identifiera proteiner som är associerade med biologiska funktioner NAIF1. De proteinexpressionsprofiler hos magcancer-cellinjen, MKN45 med eller utan NAIF1 överuttryck analyserades och jämfördes med användning av 24 cm pH 3-10 NL range immobiliserad pH-gradient (IPG) remsor. För att validera dessa data mätte vi RNA-expressionsnivåer av alla annorlunda uttryckta proteinerna och tre proteinerna verifierades ytterligare genom western blotting. Våra resultat visar att NAIF1 inducerar cellcykelstopp vid G1 /S-fas genom reglering av expressionsnivåer av cyclinD1, cdc2 och p21-protein. Resultaten av vår studie kan leda till en bättre förståelse för hur NAIF1 fungerar inducera apoptos och kan även belysa diagnos och behandling av magcancer i framtiden. cellodling och transfektion Human gastriska cancercellinjer MKN45, BGC823, AGS och SGC7901 erhölls från Tumör cell Bank av kinesisk Academic av medicinska vetenskaper och odlades i flytande Dulbeccos minimala essentiella medium (DMEM) kompletterat med 10% värmeinaktiverat fetalt bovint serum (FBS), 100 lU /ml penicillin, 100
-liknande domän vid sin N-terminala regionen [8], [9]. Tidigare studier har visat att överuttryck av NAIF1 i humana cancercellinjer HeLa och MKN45 inducerar apoptos [8], [10]. . Dessutom Luo et al
fann att NAIF1 signifikant uttryckt i normal gastrisk vävnad, medan dess uttryck nedregleras eller förlorade i magcancer vävnader ( P <
0,001). Dessutom NAIF1 uttryck var högre i väl differentierade ( P
= 0,004) än i moderately- eller dåligt differentierade magcancer [10]. Emellertid är okänd roll NAIF1 vid reglering av cellulär proteinexpressionsprofil.
Material och metoder
Studie tyder på koppling mellan probiotisk användning och "hjärntimmighet"
Åtgärder för att förhindra överföring av SARS-CoV-2 genom avloppsvatten i fattiga regioner
Husdjur som osannolikt kommer att överföra SARS-CoV-2,
Vad kan forntida avföring berätta om utvecklingen av människans tarmmikrobiom?
Svampar och bakterier i tarmen kan också påverka människors hälsa och sjukdomens svårighetsgrad
Immunceller reparerar skadad tarm hos barn med IBD
Nytt verktyg för att dechiffrera tarmmikrobiomet
De miljontals bakterier som bor i tarmen spelar en mycket viktig roll för hälsa och sjukdom. Dock, en ständig fråga har varit bristen på förståelse för den faktiska sammansättningen av det friska huma
Tarmmikrobiom och IBD - kopplingen kanske i kosten säger studie
En ny studie har visat avgörande bevis för att inflammatorisk tarmsjukdom eller IBD är nära förknippad med tarmmikrobiell miljö som kan ändras med receptbelagd kost. Mikrobiomet i människans tarm är e
Vita blodkroppar och deras roll i hjärnan
I en banbrytande studie, en grupp internationella forskare har funnit att hjärnan har specifika interna immunceller som hjälper till med normal hjärnutveckling och spelar en roll vid vissa neurologisk