PLoS One: a kifejezés a TMPRSS4 és Erk1 korrelál metasztázis és rossz prognózissal kínai betegek Gyomor Cancer

absztrakt katalógusa

Cél katalógusa

A jelen vizsgálatban a klinikai jelentősége transzmembrán proteáz, szerin 4 (TMPRSS4) és az extracelluláris szignál-regulált kináz 1 (Erk1) a fejlesztési, progresszió és metasztázis gyomorrák. katalógusa

módszerek

immunhisztokémiai alkalmazott elemezni TMPRSS4 és Erk1 kifejezést 436 gyomor- rákos megbetegedések és a 92 nem rákos emberi gyomor szövetekben. katalógusa

Eredmények katalógusa

Protein szintek TMPRSS4 és Erk1 került fel szabályozott gyomorrákban elváltozások, mint a szomszédos jóindulatú szöveteket. Nagy kifejezése TMPRSS4 korrelált az életkorral, a méret, Lauren besorolását, mélysége invázió, nyirokcsomó és távoli áttétek, regionális nyirokcsomó színpad és TNM, valamint a kifejezése Erk1. Szakaszosan I, II és III, az 5 éves túlélési arány a betegek magas TMPRSS4 expresszió szignifikánsan alacsonyabb volt, mint a betegek alacsony expressziót. További többváltozós elemzés azt sugallja, hogy up-szabályozása TMPRSS4 és Erk1 volt független prognosztikai mutatók a betegség, valamint mélysége invázió, nyirokcsomó és távoli áttétek és TNM. Katalógusa

Következtetések katalógusa

kifejezése TMPRSS4 a gyomorrák szignifikánsan összefügg a nyirokcsomó és távoli áttétek, magas Erk1 kifejezés, és a rossz prognózissal. TMPRSS4 és Erk1 fehérjék hasznos lehet markerek megjósolni tumor progresszióját és gyomorrák prognózisa. Katalógusa

Citation: Luo ZY, Wang YY, Zhao ZS, Li B, Chen JF (2013) A kifejezése TMPRSS4 és Erk1 Correlates áttétes és rossz prognózissal kínai gyomorrákos betegeknél. PLoS ONE 8 (7): e70311. doi: 10,1371 /journal.pone.0070311 katalógusa

Szerkesztő: Rajeev Samant, University of Alabama at Birmingham, Egyesült Államok katalógusa

Beérkezett: február 20, 2013; Elfogadva: június 18, 2013; Megjelent: július 29, 2013 katalógusa

Copyright: © 2013 Luo et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: Ez a tanulmány Támogatták támogatásából Zhejiang tartományi Tanszék Tudományos és Technológiai Alapítvány (2008C33040) és az Országos különleges alapok egészségügyi Alapítvány (200802112). A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

II típusú transzmembrán szerin-proteázok (TTSPs) már elismert, mint egy új alcsaládja szerin-proteázok egy proteolitikus domén, egy transzmembrán domént, egy rövid citoplazmatikus domént és egy szárrész változó hosszúságú, amely tartalmazza a moduláris szerkezeti domének [ ,,,0],1] - [2]. A legtöbb TTSPs hozták összefüggésbe a daganat kifejlődésének és progressziójának, főleg azok szabályozatlan expressziója. A transzmembrán proteáz, szerin 4 (TMPRSS4) egy TTSP hogy erősen expresszálódik a hasnyálmirigy, pajzsmirigy, tüdő- és vastagbélrák [3] - [4]. TMPRSS4 indukált invazív és epithelialis-mesenchymalis tranzíció (EMT) aktiválásával FAK jelző- és Erk [5]. Extracelluláris szignál-szabályozott kináz 1 (Erk1) egy tagja a MAP-kináz család és cselekszik jelátviteli kaszkádot, amely szabályozza a különböző sejtes folyamatokat, mint a proliferáció, differenciálódás, és a sejtciklus progressziójában, válaszul a különböző extracelluláris szignálok [6]. A biológiai funkciók és klinikai jelentősége TMPRSS4 és Erk1 gyomorrákban nem ismert. A jelenlegi tanulmány kifejeződését vizsgáltuk TMPRSS4 és Erk1 436 műtéti mintából gyomorrák immunhisztokémiai módszerrel, hogy vizsgálja meg a lehetséges összefüggés a TMPRSS4 és Erk1 kifejezést klinikopatológiai paramétereivel, és meghatározza a prognosztikai TMPRSS4 és Erk1 kifejezést. Katalógusa

anyagok és módszerek katalógusa

archivált Gyomor szöveti minták és a nem daganatos nyálkahártya katalógusa

A gyomorrák szöveteket gyűjtöttünk gastrectomián példányok 436 beteg (311 férfi, 125 nő; átlag életkor 60,0 év, tartomány 30-91), a Department of Surgery, Zhejiang tartomány népi Kórház, 1998 januárjától 2004. január szöveteket már formalinban fixált, paraffinba ágyazott, és diagnosztizált klinikailag és szövettanilag is a megyék Emésztőrendszeri Sebészeti és Patológiai. Valamennyi beteg nyomon követése rekordokat > 5 év. A nyomon követés határidő 2008. december túlélési időt attól a naptól számítják a műtét a nyomon követés vagy határideje a halál időpontjától, amelynek oka elsősorban a rák kiújulásának vagy áttét. Kilencven-két nem rákos emberi gyomor szöveteket nyert gastrectomián szomszédos gyomorrák árrés > 5 cm. Szokásos kemoterápiát kapott a beteg előrehaladott stádiumú működés után, de nincs sugárzás-kezelést bármely beteg szerepel a vizsgálatban. Katalógusa

Tissue microarray analízis katalógusa

Blocks, benne egy összesen 436 tumor szövetminták és 92. minták a normál gyomornyálkahártya állítottunk elő a korábban leírtak [7] - [8]. Core szöveti biopsziák (2 mm átmérőjű) vettünk egyedi paraffinba ágyazott gyomor daganatok (donor blokkok) és elrendezve recipiens parafintömböket (szöveti tömb blokkok) alkalmazásával trephine. Mivel bebizonyosodott, hogy festéssel kapott eredményeket a különböző intratumorális területek különböző tumorok jól korrelál [9], egy mag mintát vettünk minden esetben. Megfelelő esetben definiáltuk, mint a tumor elfoglaló > 10% a mag terület [10]. Minden blokk tartalmazott több mint három belső ellenőrzés, amely abból állt, nem neopláziás gyomor nyálkahártyáját. Négy mikrométer vastag metszeteket egyes szövetek array tömb, paraffint és kiszáradt. Katalógusa

A projektet hagyott jóvá az etikai bizottság a Zhejiang tartomány népi Kórház és írásbeli hozzájárulását kaptuk a résztvevők. Katalógusa

az immunhisztokémiai katalógusa

az immunhisztokémiai analízis [11] - [12] végeztük, hogy tanulmányozza a megváltozott fehérje expressziót 92 nem rákos emberi gyomorban szövetminták és 436 emberi gyomorrák szöveteket. Röviden, a tárgylemezeket sütött 60 ° C-on 2 óra hosszat, majd deparaffinization xilollal, és rehidratált. A metszeteket merítettük EDTA antigén visszakeresés puffer és mikrohullámmal antigén visszakeresés, ami után kezeltük 3% -os hidrogén-peroxiddal metanolban oltja endogén peroxidáz aktivitás, majd inkubáltuk 1% szarvasmarha-szérum-albumin, hogy blokkolja a nem-specifikus kötődés. Metszeteket nyúl anti-TMPRSS4 (Proteintech Group, Inc) és a nyúl anti-Erk1 (Cell Signaling Technology), éjszakán át 4 ° C-on. Normál kecske szérumot használtunk negatív kontrollként. Mosás után, a szöveti metszeteket kezeltük másodlagos antitesttel. A szöveti metszeteket ellenfestjük hematoxilinnel, dehidratált, és szerelt. Katalógusa

eredmények értékelése katalógusa

TMPRSS4 és Erk1 festjük a Buffy színű a citoplazmában és a sejtmagban. A mértéke immunfestést felül, és gólt függetlenül két megfigyelő erőssége alapján festés [11], [13], [14]. A festési intenzitást osztályoztuk az alábbi kritériumoknak: 0 (nincs festés), 1 (gyenge festést = halványsárga), 2 (közepes festési = sárga, barna) és 3 (erős festés = barna). Mérsékelt és erős festési meghatározására használt tumorok nagy TMPRSS4 vagy Erk1 kifejezés, és nem, és gyenge festést használtak a kis TMPRSS4 vagy Erk1 kifejezés. Katalógusa

Statisztikai elemzés katalógusa

A statisztikai elemzéseket végeztünk SPSS 12.0 szoftver segítségével. Mérési adatok segítségével elemeztük Student t katalógusa vizsgálat, míg a kategorikus adatok alkalmazásával vizsgáltuk a χ katalógusa ^{2 vagy Fisher egzakt teszt. A túlélési görbéket kiszámításához a Kaplan-Meier-módszerrel, és a log-rank teszttel kiszámítható egyes görbék közötti különbséget. A többváltozós elemzés során a Cox-féle regressziós modell végeztek, hogy felmérjék a prognosztikai értéke fehérje expresszióját. Közötti korrelációs együtthatók fehérje expresszió és a klinikopatológiai eredményeket kiszámításához a Pearson-féle korrelációs módszerrel. Statisztikai szignifikancia meg P katalógusa < 0,05. Katalógusa}

Resuts katalógusa

kifejezése TMPRSS4 archivált Gyomor szöveti mintákat és nem-daganatos nyálkahártya katalógusa

TMPRSS4 fehérje kimutatható volt a 14. 92 (15,22%) emberi nem-daganatos nyálkahártya minták, és az összes mintát expresszált fehérje alacsony szinten. TMPRSS4 detektáltunk fehérjét 245. 436 (56,19%) esetben a humán gyomorrák, magas expresszióját TMPRSS4 detektáltunk fehérjét 203 (46.56%) daganatok. TMPRSS4 lokalizálódott főként a citoplazmában vagy nucleus primer rák (1A ábra, B és C).

Expression Erk1 archivált Gyomor szövetmintákban és nem tumoros nyálkahártyába

Erk1 fehérje volt detektáltunk 16 92 (17,39%) emberi nem-daganatos nyálkahártya minták, és az összes mintát expresszált fehérje alacsony szinten. Erk1 detektáltunk fehérjét 231 436 (52,98%) esetben a humán gyomorrák, magas expresszióját Erk1 detektáltunk fehérjét 173 (39,68%) daganatok. Erk1 lokalizálták elsősorban a citoplazmában vagy a sejtmagban primer daganat (1D, E és F). Katalógusa

Korreláció TMPRSS4 Up-szabályozás és klinikai jellegzetességei a gyomorrák katalógusa

Nagy kifejezése TMPRSS4 korrelált kor, méret, Lauren besorolását, mélysége invázió, nyirokcsomó és távoli áttétek, regionális nyirokcsomó színpad és TNM ( P katalógusa < 0,05) (1. táblázat). TMPRSS4 kifejezés nem korrelál a szex, a tumor helye, differenciálódás vagy szövettani osztályozás ( P katalógusa > 0,05) (1. táblázat). Katalógusa

Korreláció Erk1 Up-szabályozás és Klinikai jellemzők Gyomor- rák katalógusa

Nagy kifejezése Erk1 korrelált az életkorral, a daganat elhelyezkedése, mérete, mélysége invázió, differenciálódás, Lauren besorolás, nyirokcsomó és távoli áttétek, regionális nyirokcsomó színpad és TNM ( P katalógusa < 0,05) (2. táblázat). Erk1 kifejezés nem korrelált a szex, vagy szövettani osztályozás ( P katalógusa > 0,05) (2. táblázat). Katalógusa

korrelációja TMPRSS4 Expression és kórjóslat katalógusa

Az I. stádiumú, II és III tumorok, az 5 éves túlélési arány a betegek magas expressziója TMPRSS4 szignifikánsan alacsonyabb volt, mint amit a betegek alacsony expresszió ( P
< 0,05) (2. ábra). Ebben a szakaszban a IV daganatok, a kifejezés TMPRSS4 nem korrelál az 5 éves túlélési arány ( P katalógusa > 0,05) (2. ábra). Katalógusa

korrelációja Erk1 Expression és kórjóslat

szakaszban I, II és III tumorok, az 5 éves túlélési arány a betegek magas expressziója Erk1 szignifikánsan alacsonyabb volt, mint amit a betegek alacsony expresszió ( P
< 0,05) (Figure 3). Ebben a szakaszban a IV daganatok, a kifejezés Erk1 nem korrelál az 5 éves túlélési arány ( P katalógusa > 0,05) (3. ábra). Katalógusa

többváltozós klinikopatológiai paraméterek és a Prognózis

A tényezők lehetséges prognosztikai hatását a gyomor carcinoma elemeztük Cox regressziós analízissel. A tanulmány kimutatta, hogy a nyirokcsomó és távoli áttétek ( P katalógusa = 0,005), TNM ( P katalógusa = 0,005), kifejezése TMPRSS4 ( P katalógusa = 0,000) és Erk1 ( P katalógusa = 0,000) független prognosztikai faktorok betegek gyomorrák. Ugyanakkor az életkor, a nem, a tumor helye és mérete, szövettani osztályozás, tumor differenciálás, invázió mélysége, Lauren besorolását, és a regionális nyirokcsomó szakaszban nem volt prognosztikai értéke. Katalógusa

Szövetsége között kifejezése TMPRSS4 és Erk1 katalógusa

Kétszáz és négy gyomorrák esetek alacsony volt kifejezése mind TMPRSS4 és Erk1 és 144 gyomorrák esetben magas volt a kifejezése mind TMPRSS4 és Erk1. Szignifikáns korrelációt TMPRSS4 és Erk1 (χ ^{2 = 155,1; p = 0,0001) (3. táblázat). Azt is kimutatták eredményeinek TMPRSS4-pozitív /Erk1-negatív, TMPRSS4-pozitív /Erk1-pozitív, TMPRSS4-negatív /Erk1-pozitív és TMPRSS4-negatív /Erk1-negatív gyomor beteg, és azt találtuk, hogy nem volt szignifikáns különbség általános összehasonlítást (χ 2 = 256,9; p = 0,000, 4. ábra). Az átlagos túlélési idő volt 42,8 ± 2,23, hónap TMPRSS4 (+) /Erk1 (-) csoport, 27,9 ± 1,27 hónapos TMPRSS4 (+) /Erk1 (+), 54,7 ± 0,72 hónapos TMPRSS4 (-) /Erk1 (- ), 39,2 ± 3,19 hónapos TMPRSS4 (-) /Erk1 (+), ill.}

Discussion

a sok molekulák részt vesznek a karcinogenezis és humán tumorok kifejlődését, proteázok széleskörűen tanulmányozni, mint fontos résztvevői a karcinogenitási számos daganat. Mostanában sok figyelmet fordítanak a szerepét II típusú transzmembrán szerin proteázok (TTSPs) során a daganat kialakulásában [15] - [16]. TTSPs tagjai a család sejtfelszíni-asszociált proteázok, amelyek közvetítik a különböző normál celluláris funkciókat, valamint a tumor invázió és metasztázis.

TMPRSS4 egy TTSP, hogy már ismert, hogy fokozódik egyes rákok, különösen a a hasnyálmirigy és a pajzsmirigy rákok [4], [17], és a kifejezés a TMPRSS4 került korrelál a metasztatikus potenciálját hasnyálmirigyrák [3]. TMPRSS4 szükséges és elégséges a humán tüdőrák sejtvonal NCI-H322, a vastagbél adenokarcinóma sejtvonal Colo205, és a kolorektális rák sejtvonal HCT15 elérni migrációs és behatolás [18]. A tanulmány kimutatta, hogy ez a kifejezés TMPRSS4 gyomorrákban elváltozások szorosan kapcsolódó életkor, tumor mérete, elhelyezkedése tumor mélységi invázió, hajó invázió, nyirokcsomó és távoli áttétek és TNM. A kifejezés a TMPRSS4 találtuk, hogy jelentősen korrelál a gyomorrák prognózisa. Szakaszosan I, II és III, az 5 éves túlélési arány a betegek magas expressziója TMPRSS4 szignifikánsan alacsonyabb volt, mint azok a betegek alacsony expressziót. Ebben a szakaszban a IV TMPRSS4 kifejezés nem korrelál az 5 éves túlélési arány. További többváltozós elemzés azt javasolta, hogy a mélysége invázió, nyirokcsomó és távoli áttétek, TNM és up-szabályozása TMPRSS4 volt független prognosztikai mutatók gyomorrák. Túlexpressziója TMPRSS4 kritikus szerepe van a sugárzás által kiváltott hosszú távú terjesztése, valamint az áttétek maradék hepatocelluláris karcinóma megkönnyítésével epithelialis-mesenchymalis tranzíció (EMT) [19]. Expressziója TMPRSS4 tumorokban laphámrák (SCC) szövettani Azt találtuk, hogy jelentősen magasabb, mint azok a adenokarcinóma (AC) szövettan. Kaplan-Meier görbék kimutatták, hogy a magas szintű TMPRSS4 szignifikáns összefüggést mutattak a csökkentett teljes túlélés tekintetében a betegek SCC szövettan, mivel nem találtunk összefüggést az AC szövettani [20]. Katalógusa

Erk1 részt vesz a karcinogenezissel szabályozásával különböző celluláris folyamatokat, mint a proliferáció, differenciálódás, és a sejtciklus progressziójában, válaszul a különböző extracelluláris szignálok. Hepatoma-eredetű növekedési faktor részt vesz a gyomor karcinogenezis folyamatot, és elősegíti a proliferációt és metasztázis keresztül ERK1 /2 aktiválása [21]. ERK1 mint egy fontos közvetítő a lizofoszfatidsav jelátvitel vezet túlszabályzását szfingozin kináz 1 (SphK1) és pont SphK1 és a szfingozin-1-foszfát termelés, mint potenciális terápiás célpontok gyomorrák [22]. Közötti kölcsönhatás FVIIa és TF indukál proteáz-aktivált receptor-2 aktiváció, ezáltal kiváltja az ERK1 /2 és IκB-α /NF-kB jelátviteli útvonal, hogy szabályozzák a génexpresszió az IL-8, TF, és kaszpáz-7, és végül elősegíti a SW620 sejtek proliferációját és migrációját [23]. A kifejezés Erk1 gyomorrákban és a klinikai jelentősége nem ismert. A jelenlegi vizsgálata volt a kifejezés Erk1 436 műtéti mintából gyomorrák immunhisztokémiai módszerrel. A tanulmány kimutatta, hogy a magas expresszióját Erk1 detektáltunk fehérjét 173 (39,68%) daganatok. Nagy kifejezése Erk1 korrelált az életkorral, a daganat elhelyezkedése, mérete, mélysége invázió, differenciálódás, Lauren besorolás, nyirokcsomó és távoli áttétek, regionális nyirokcsomó szakaszban TNM és rossz prognózissal. Katalógusa

tovább vizsgálták TMPRSS4 kifejezése a gyomorrák példányok és annak kapcsolatát a Erk1 kifejezést. Találtunk egy pozitív korrelációt TMPRSS4 és Erk1 kifejezés arra utal, hogy TMPRSS4 is be lehet vonni a karcinogenezis, progresszió és metasztázis gyomorrák előmozdítása révén sejtburjánzást Erk1 aktiválás. Katalógusa

• PLoS One: Frekvencia-kockázat és időtartama kockáztatott közötti kapcsolatok aszpirin használata és a gyomorrák: rendszeres felülvizsgálatát és meta-analízis
• PLoS One: Műtét kemoradioterápiában versus Műtét utáni kemoterápia Teljesen reszekált gyomorrák D2 Lymphadenectomia: meta-analízis