PLoS ONE: ekspresiji TMPRSS4 i ERK1 korelira s metastazama i lošom prognozom u kineskim bolesnika sa želučanim Cancer

Sažetak pregled

Svrha pregled

Ovaj Istraživani kliničko značenje transmembranski proteaze, serin 4 (TMPRSS4) i izvanstaničnog signala regulirano kinaze 1 (ERK1) u razvoj, napredovanje i metastaziranja raka želuca. pregled

Metode

Imunohistokem se koristi za analizu TMPRSS4 i ERK1 izraz u 436 želuca slučajeva raka i 92 nekancerozne humanog želučanog tkiva. pregled

Rezultati pregled

razine proteina iz TMPRSS4 i ERK1 je doregulirana u želučanim lezijama raka u usporedbi sa susjednim netumorskih tkivima. Visoka izraz TMPRSS4 korelaciji s dobi, veličini, Laurenov klasifikacije, dubini invazije, limfnih čvorova i udaljenih metastaza, regionalni limfni čvor pozornicu i TNM stadiju, a također i sa izrazom ERK1. U fazama I, II i III, 5 godina stopa preživljavanja bolesnika s visokim TMPRSS4 izražavanja bila je značajno niža nego u bolesnika s niskim izražavanja. Nadalje multivarijatna analiza sugerira da je up-regulaciji TMPRSS4 i ERK1 bili neovisni prognostički pokazatelji za bolesti, zajedno s dubinom invazije, limfnih čvorova i udaljenih metastaza i TNM stadiju. Pregled

Zaključci pregled

Izražavanje TMPRSS4 kod raka želuca značajno je povezana s limfnog čvora i udaljenih metastaza, visoke ERK1 izražavanja i lošu prognozu. TMPRSS4 i ERK1 proteini mogu biti korisni biljezi za prognoziranje progresije tumora i prognozu karcinoma želuca pregled

Izvor:. Luo ZY, Wang YY, Zhao ZS, Li B, Chen JF (2013) ekspresiju TMPRSS4 i ERK1 KORELATI s metastazama i lošom prognozom u kineskim bolesnika s rakom želuca. PLoS ONE 8 (7): e70311. doi: 10,1371 /journal.pone.0070311 pregled

Urednik: Rajeev Samant, Sveučilište Alabama u Birminghamu, Sjedinjene Američke Države Netlogu

Primljeno: 20. veljače 2013; Prihvaćeno: 18. lipnja 2013. godine; Objavljeno: 29. srpnja 2013 pregled

Copyright: © 2013 Luo et al. Ovo je otvorenog pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan

financiranja. Ova studija bila je potpora od strane grant od Zhejiang Provincial Odjel za znanost i tehnologiju Research Foundation (2008C33040) i nacionalnih posebna sredstva za Health Foundation (200802112). U financijeri nisu imali ulogu u studiju dizajna, prikupljanja i analize podataka, Odluka o objavi, ili pripremu rukopisa pregled

U konkurenciji interese.. Autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled

Uvod

tipa II transmembranski serin proteaze (TTSPs) prepoznati su kao novi podvrstu serin proteaza s proteolitičke domeni, transmembransku domenu, kratko citoplazmatske domene i matičnih područja varijabilne duljine koja sadrži modularne strukturne domene [ ,,,0],1] - [2]. Većina TTSPs su uključene u razvoj tumora i progresiji, uglavnom na temelju njihove nereguliranom ekspresijom. Transmembranski proteaze serina 4 (TMPRSS4) je TTSP koji je visoko izražen u gušterače, štitnjače, pluća i debelog crijeva [3] - [4]. TMPRSS4 izazvana invazivnosti i epitela-mezenhimalne prijelaza (EMT) aktiviranjem Fak signalizaciju i ERK [5]. Izvanstaničnim signalom-regulirane kinaze 1 (ERK1) je član kinaza MAP i djeluje u signalnoj kaskadi koji regulira razne stanične procese poput proliferacije, diferencijacije i progresiju staničnog ciklusa u odgovor na razne izvanstanične signale [6]. Biološki funkcije i klinički značaj TMPRSS4 i ERK1 kod raka želuca se ne razumije. Trenutna studija ispituje ekspresiju TMPRSS4 i ERK1 u 436 kirurških uzoraka karcinoma želuca imunohistokemijski, istražiti moguću povezanost TMPRSS4 i ERK1 izrazom kliničkopatološkim varijabli, te odrediti prognostičke vrijednosti TMPRSS4 i ERK1 izražavanja. Pregled

Materijali i metode pregled

Arhivirani Želučani uzorci tkiva i ne-tumorske sluznice

Želučani tkiva raka su prikupljeni iz gastrektomije uzoraka od 436 bolesnika (311 muškaraca, 125 ženska; srednja dob 60,0 godina, raspon 30-91) iz Odjela za kirurgiju, Zhejiang Provincial Narodna bolnica, od siječnja 1998. do siječnja 2004. godine Tkiva su formalinom fiksna, parafin-ugrađen, a dijagnosticira klinički i patohistološki u odjelima gastrointestinalne kirurgiju i patologiju. Svi su bolesnici imali follow-up zapise za > 5 godina. Rok follow-up bio je prosinac 2008. godine je izračunata vrijeme preživljavanja od datuma operacije do praćenja roka ili datum smrti, koja je uzrokovana uglavnom karcinom recidiva ili metastaza. Devedeset dva nekancerozne humanog želučanog tkiva nabavljeni su od gastrektomije susjednih rak želuca rubu > 5 cm. Rutinska kemoterapija daje se pacijentima s uznapredovalim stadijem bolesti nakon operacije, ali bez zračenja primjenjuje se na bilo koji od pacijenata uključenih u našem istraživanju. Pregled

Tissue Microarray Analiza pregled

Blokovi, koje su sadržavale ukupno 436 uzoraka tkiva tumora 92 uzorcima normalne sluznice želuca su pripravljeni kao što je prethodno opisano [7] - [8]. Jezgra biopsije tkiva (2 mm promjera) su uzeti od pojedinačnih želučanih tumora parafin uklopljenih (donora blokova) i raspoređeni u primatelja parafinske blokove (polje tkiva blokova) koristeći trephine. Budući da je dokazano da bojanja rezultati dobiveni iz različitih intratumoralno područja u različitim tumorima dobro koreliraju [9], osnovna je uzorkovana u svakom slučaju. Adekvatna slučaj je definiran kao tumor zauzima > 10% središnjem području [10]. Svaki blok sadrži više od tri interne kontrole koja se sastojala od ne-neoplastičnim želučane sluznice. Četiri mikrometra-debeli rezovi su iz svakog tkiva polja bloka, deparafmizirane i dehidrirana. Pregled

Projekt je odobren od strane Etičkog povjerenstva Zhejiang Provincial Narodne bolnice i pismena suglasnost dobiveni su od svih sudionika. Pregled

Imunohistokem pregled

Imunohistokemijska analiza [11] - [12] provedena je studija promijenjena ekspresija proteina u 92 ne-kancerogen ljudskih uzoraka želučane tkiva i 436 ljudskih tkiva raka želuca. Ukratko, stakalca su pečena na 60 ° C tijekom 2 h i zatim se deparaffinization ksilenom i rehidrirane. Sekcije su potopljeni u EDTA antigensku dohvat puferu i djelovanju mikrovalova za dohvat antigena, nakon čega se tretira s 3% -tnim vodikovim peroksidom u metanolu kako bi se zaustavila Aktivnost endogene peroksidaze, a zatim inkubiranjem s 1% albumina goveđeg seruma blokirati nespecifično vezanje. Sekcije su inkubirane s mišjim anti-TMPRSS4 (ProteinTech Group, Inc.) i zeca anti-ERK1 (Cell Signaling Technology), preko noći na 4 ° C. Normalni kozji serum je korišten kao negativna kontrola. Nakon ispiranja, sekcije tkiva su tretirane sa sekundarnim antitijelima. Uzorci tkiva su zatim negativno hematoksilinom, dehidrirane i montiran. Pregled

Procjena Rezultati pregled

TMPRSS4 i ERK1 su obojeni kao Buffy obojena u citoplazmi i jezgri. Stupanj imunološkim je pregledao i postigao samostalno ih dva promatrača na temelju intenziteta bojenja [11], [13], [14]. Bojenje intenzitet se ocjenjuje prema sljedećim kriterijima: 0 (bez bojanja), 1 (slaba obojenost = svijetlo žuta), 2 (umjerena bojenje = žuto smeđe) i 3 (jaka obojenost = smeđa). Umjerena i jaka bojenje su korišteni za definiranje tumora s visokim TMPRSS4 ili ERK1 izražavanja, a ne i slabe bojenja su korišteni za označavanje nisku TMPRSS4 ili ERK1 izraz. Pregled

Statistička analiza pregled

su provedena Sve statističke analize pomoću SPSS 12.0 softvera. Mjerni podaci su analizirani pomoću Student t
testa, dok su rangirane podatke proučavao pomoću χ
^{2 ili Fisher točan test. Krivulje preživljavanja su utvrđene pomoću Kaplan-Meier metodi i log-rank test je korišten za izračun razlike između krivulja. Multivarijatna analiza pomoću Cox proporcionalnih rizika regresijskog modela provedena je procijeniti prognostičke vrijednosti ekspresije proteina. Koeficijenti korelacije između ekspresije proteina i kliničkopatološkim nalaza procijenjene su primjenom metode Pearson korelacija. Statistička značajnost postavljena na P pregled. ≪ 0,05 pregled}

Resuts

Izražavanje TMPRSS4 u Arhivirani želučane uzorci tkiva i ne-tumorske sluznice

TMPRSS4 proteina otkrivena je u 14 od 92 (15.22%) ljudskim ne-tumorskih uzoraka sluznice, a svi uzorci izrazio protein u niskoj razini. TMPRSS4 protein je otkriven u 245 436 (56.19%) slučajeva humanog karcinoma želuca, visoka ekspresija TMPRSS4 proteina detektirana je u 203 (46.56%) tumora. TMPRSS4 je lokaliziran uglavnom u citoplazmi ili jezgri primarnog raka (Slika 1A, B i C). Pregled

Izražavanje ERK1 u Arhivirani želučane uzorci tkiva i ne-tumorske sluznice

ERK1 proteina je otkrivena je u 16 od 92 (17.39%) ljudskim ne-tumorskih uzoraka sluznice, a svi uzorci izrazio protein u niskoj razini. ERK1 protein je otkriven u 231 436 (52.98%) slučajeva humanog karcinoma želuca, visoka ekspresija ERK1 proteina detektirana je u 173 (39.68%) tumora. ERK1 je lokaliziran uglavnom u citoplazmi ili jezgri primarnog raka (Slika 1D, E i F). Pregled

Korelacija TMPRSS4 up-regulacije i klinička obilježja rak želuca Netlogu

Visoka izražavanja TMPRSS4 korelaciji s dobi, veličini, Laurenov klasifikacije, dubini invazije, limfnih čvorova i udaljenih metastaza, regionalni limfni čvor pozornicu i TNM stadiju ( P izvoznici < 0,05) (Tablica 1). TMPRSS4 izraz nije bio u korelaciji sa seksom, lokacija tumora, diferencijacije, odnosno histološkom klasifikaciji ( P izvoznici > 0,05). (Tablica 1) pregled

Korelacija ERK1 up-regulacije i kliničke značajke želučane Rak pregled

Visoka izraz ERK1 povezan s dobi, lokacija tumora, veličina, dubina invazije, diferencijacija, Lauren je klasifikacija, limfni čvorovi i udaljene metastaze, regionalni limfni čvor pozornicu i TNM stadij ( p pregled < 0,05) (Tablica 2). ERK1 izraz nije bio u korelaciji sa seksom ili histološka klasifikacija ( P izvoznici > 0,05). (Tablica 2) pregled

Korelacija TMPRSS4 izražavanja i Prognoza pregled

U fazi I, II i III tumori, stopa preživljavanja od 5 godina u bolesnika s visokom ekspresijom TMPRSS4 bila je značajno niža nego u bolesnika s niskom ekspresijom ( P izvoznici < 0,05) (Slika 2). U Stage IV tumora, izraz TMPRSS4 nije bio u korelaciji sa stopom preživljavanja od 5 godina ( P izvoznici > 0,05). (Slika 2) pregled

Korelacija ERK1 izražavanja i prognoze

u fazi i, II i III tumori, stopa preživljavanja od 5 godina u bolesnika s visokom ekspresijom ERK1 bila je značajno niža nego u bolesnika s niskom ekspresijom ( p izvoznici < 0,05) (Slika 3). U Stage IV tumora, izraz ERK1 nije bio u korelaciji sa stopom preživljavanja od 5 godina ( P izvoznici > 0,05). (Slika 3) pregled

Multivarijatna analiza kliničkopatološkim Parametri i prognoze

faktori s mogućim prognostičkim efekti u želučanom karcinomu su analizirani Cox regresijska analiza. Studija je otkrila da je limfni čvor i udaljene metastaze ( P pregled = 0,005), TNM stadij ( P pregled = 0,005), izraz TMPRSS4 ( P pregled = 0,000) i ERK1 ( P pregled = 0,000) bili nezavisni prognostički čimbenici bolesnika s želučanim karcinoma. Međutim, dob, spol, mjesto tumora i veličine, histološka klasifikacija, diferencijacija tumora, dubina invazije, Lauren je klasifikacija i regionalni limfni čvorovi fazi imao prognostičku vrijednost. Pregled

Udruga među iskazivanje TMPRSS4 i ERK1 pregled

Dvije stotine i četiri slučaja karcinoma želuca je imao nisku ekspresiju i TMPRSS4 i ERK1, i sto četrdeset i četiri slučaja raka želuca je visok ekspresiju i TMPRSS4 i ERK1. Bilo je značajna korelacija između TMPRSS4 i ERK1 (χ ^{2 = 155,1; P = 0,0001) (Tablica 3). Također smo otkrili ishode želučanih bolesnika TMPRSS4-pozitivnih /ERK1-negativne, TMPRSS4 pozitivne /ERK1-pozitivne, TMPRSS4-negativni /ERK1-pozitivnih i TMPRSS4-negativnih /ERK1-negativni, a otkrili smo da postoji značajna razlika u ukupni usporedbe (χ 2 = 256,9; P = 0.000, slika 4). Vrijeme znači preživljavanja su 42,8 ± 2,23, mjeseci TMPRSS4 (+) /ERK1 (-) skupina, 27,9 ± 1,27 mjesec za TMPRSS4 (+) /ERK1 (+) 54,7 ± 0,72 mjesec za TMPRSS4 (-) /ERK1 (- ), 39,2 ± 3,19 mjeseci TMPRSS4 (-). /ERK1 (+), odnosno pregled}

Rasprava Netlogu

od mnogih molekula uključenih u karcinogeneze i razvoju ljudskih tumora, proteaza su ekstenzivno studirao kao važne sudionike u procesu karcinogeneze mnogih tumora. U posljednje vrijeme mnogo je pozornost usmjerena na ulogu tipa II transmembranski serin proteaza (TTSPs) tijekom razvoja tumora [15] - [16]. TTSPs su članovi porodice površinski povezan proteaze stanice koje posreduju u cijelom nizu normalnih staničnih funkcija kao tumorskoj invaziji i metastaziranju. Pregled

TMPRSS4 je TTSP koje je poznato da su doregulirane u nekoliko vrsta raka, naročito u karcinomu gušterače i štitnjače [4], [17], a ekspresija TMPRSS4 u korelaciji s metastaziranja raka gušterače. [3] TMPRSS4 je nužno i dovoljno za ljudski rak pluća staničnoj liniji NCI-H322, stanična linija adenokarcinoma debelog crijeva Colo205 i kolorektalni rak stanična linija HCT15 ostvariti migraciju i invaziju [18]. Studija je otkrila da je ekspresija TMPRSS4 u želučanim lezija raka usko su povezani s dobi, veličini tumora, mjesto tumora, dubina invazije, invazije brod, limfnih čvorova i udaljene metastaze i TNM stadij. Izraz TMPRSS4 je utvrđeno da je značajno korelira s prognozom od raka želuca. U fazama I, II i III, stope preživljenja od 5 godina od bolesnika s visokom ekspresijom TMPRSS4 bila je znatno niže od onih u bolesnika s niskom ekspresijom. U stadiju IV, TMPRSS4 izraz nije bio u korelaciji s stopa preživljavanja od pet godina. Nadalje multivarijatna analiza sugerira da je dubina invazije, limfnih čvorova i udaljenih metastaza, TNM stadiju, i up-regulaciji TMPRSS4 bili neovisni prognostički pokazatelji za rak želuca. Pojačanom ekspresijom TMPRSS4 ima ključnu ulogu u zračenjem inducirane dugoročno širenje i metastaziranja zaostalog hepatocelularnog karcinoma olakšavajući prijelaz epitela-mezenhimalnih (EMT) [19]. Ekspresija TMPRSS4 u tumora karcinoma rožnatih stanica (SCC), histologiju je nađeno da su značajno više od onih s adenokarcinom (AC) histologiju. Kaplan-Meier krivulje pokazala da visoka razina TMPRSS4 su značajno povezane sa smanjenom ukupnom preživljavanju u bolesnika s SCC histologiju, dok ne postoji korelacije za AC histologiju [20]. Pregled

ERK1 uključeni u karcinogeneze kroz reguliranje različite stanične procese poput proliferacije, diferencijacije i progresiju staničnog ciklusa u odgovor na razne izvanstanične signale. faktor rasta hepatoma-derived je uključen u proces želuca karcinogeneze i potiče proliferaciju i metastaze putem ERK1 /2 aktivacije [21]. ERK1 kao važan medijator signalizacije lizofosfatidna kiselina dovodi do podizanja regulacije sfingozin kinaze 1 (SphK1) i točke na SphK1 i proizvodnju sfingozin-1-fosfata kao potencijalne terapijske mete u želučanom raka [22]. Interakcija između FVIIa i TF inducira proteaze aktiviranih aktivacije receptora 2, čime se aktivira ERK1 /2 i prijenos signala /NF-kB IκB-α put za regulaciju ekspresije gena IL-8, TF i caspase-7, i na kraju potiče proliferaciju SW620 i migraciju stanica [23]. Ekspresija ERK1 kod raka želuca i njegovog kliničkog značaja nisu razumjeli. Trenutna studija bio je ispitati ekspresiju ERK1 u 436 kirurških uzoraka raka želuca imunohistokemijski. Istraživanje je pokazalo da visoka ekspresija ERK1 proteina detektirana je u 173 (39.68%) tumora. Visoka izraz ERK1 povezan s dobi, lokacija tumora, veličina, dubina invazije, diferencijaciju Laurenov klasifikacije, limfnih čvorova i udaljenih metastaza, regionalni limfni čvor faze, TNM stadiju i lošu prognozu. Pregled

Mi dalje ispituje izraz TMPRSS4 u želučanim uzoraka raka i njezine povezanosti s ERK1 izražavanja. Pronašli smo pozitivnu korelaciju između TMPRSS4 i ERK1 izražavanja, sugerirajući da TMPRSS4 mogu biti uključeni u karcinogeneze, napredovanje i metastaziranja raka želuca kroz promociju stanične proliferacije ERK1 aktivacije. pregled