abstraktné
Účel
Táto štúdia skúmala klinický význam transmembránového proteázy, serínové 4 (TMPRSS4) a extracelulárnej signál regulované kinázy 1 (ERK1) vo vývoji, progresiu a metastázy rakoviny žalúdka.
Metódy
Imunohistochémia bola použitá na analýzu TMPRSS4 a ERK1 výraz v 436 žalúdočných prípadov rakoviny a 92 non-rakovinové ľudské žalúdočné tkaniva.
Výsledky
úrovne Proteínové TMPRSS4 a ERK1 bola up-regulovaná v žalúdočných rakovinových lézií v porovnaní s priľahlými noncancerous tkanív. Vysoká expresia koreluje s TMPRSS4 veku, veľkosti, Lauren klasifikácie, hĺbkou invázie, lymfatické uzliny a vzdialené metastázy, regionálnej fáze lymfatických uzlín a TNM fáze, a tiež s expresiou ERK1. V štádiu I, II a III, 5-ročné prežitie u pacientov s vysokou expresiou TMPRSS4 bol významne nižší ako u pacientov s nízkou expresiou. Ďalej multivariačný analýzy vyplýva, že up-regulácia TMPRSS4 a ERK1 boli nezávislé prognostické indikátory pre ochorenie, spolu s hĺbkou invázie, lymfatické uzliny a vzdialené metastázy a TNM fáze.
Vyjadrenie TMPRSS4 u karcinómu žalúdka je významne spojená s lymfatické uzliny a vzdialené metastázy, vysokú expresiou ERK1 a zlou prognózou. TMPRSS4 a ERK1 proteíny by mohli byť užitočné markery predpovedať progresiu nádoru a prognózu rakoviny žalúdka
Citácia :. Luo ZY, Wang YY Zhao ZS, Li B, Chen JF (2013) Vyjadrenie TMPRSS4 a ERK1 koreluje s metastáz a zlou prognózou u čínskych pacientov s karcinómom žalúdka. PLoS ONE 8 (7): e70311. doi: 10,1371 /journal.pone.0070311
Editor: Rajeev Samanta, University of Alabama v Birminghame, Spojené štáty |
prijatá: 20.februára 2013; Prijaté: 18. júna 2013; Uverejnené: 29. júla 2013
Copyright: © 2013 Luo et al. Toto je článok o otvorený prístup distribuovaný pod podmienkami Creative Commons Attribution licencie, ktorá umožňuje neobmedzené použitie, distribúciu a reprodukciu v nejakom médiu, za predpokladu, že pôvodný autor a zdroj sú pripísané
Financovanie :. Táto štúdia bola podpora grantom z provincie Zhejiang oddelenia vedy a Technology Research Foundation (2008C33040) a národných špeciálnych fondov Foundation zdravie (200802112). Platcovia mal žiadnu úlohu v dizajne štúdie, zber a analýzu dát, rozhodnutie publikovať, alebo prípravu rukopisu
Konkurenčné záujmy: .. Autori vyhlásili, že žiadne konkurenčné záujmy neexistujú
Úvod
typu II transmembránového serinproteázy (TTSPs) boli uznané ako nový podčeľade serínových proteáz s proteolytickým domény, transmembránovej domény, krátke cytoplazmatickej doméne a kmeňová oblasť premennej dĺžky, ktorý obsahuje modulárne štruktúrnych domén [ ,,,0],1] - [2]. Väčšina TTSPs boli zapojené do vzniku nádoru a progresie, a to predovšetkým na základe ich porušenú reguláciou výrazu. Transmembránovej proteázy, serínové 4 (TMPRSS4) je TTSP, ktorý je vysoko exprimovaný v pankrease, štítnej žľazy, pľúc a hrubého čreva a konečníka [3] - [4]. TMPRSS4 indukovanej invázie a epiteliálne-mezenchýmových prechod (EMT) aktiváciou FAK signalizácie a EQF [5]. Extracelulárna signál regulované kinázy 1 (Erk1) je členom skupiny kináz MAP a pôsobí v signálne kaskáde, ktoré regulujú rôzne bunkové procesy, ako je proliferácia, diferenciácia a progresiu bunkového cyklu v odozve na rôzne extracelulárne signály [6]. Biologické funkcie a klinický význam TMPRSS4 a ERK1 u karcinómu žalúdka sa nerozumie. Súčasná štúdia skúmala expresie TMPRSS4 a ERK1 na 436 chirurgických vzoriek rakoviny žalúdka pomocou imunohistochémia, aby preskúmala koreláciu TMPRSS4 a ERK1 prejavu s klinicko-premenných, a určiť prognózovanie hodnotu TMPRSS4 a ERK1 prejavu.
materiály a metódy
Archívne žalúdočné vzorky tkaniva a nenádorových sliznice
rakovinou žalúdka tkaniva boli odobraté z gastrektómia vzoriek od 436 pacientov (311 mužských, 125 samica; medián veku 60,0 rokov, rozpätie 30-91) z oddelenia chirurgie, provincia Zhejiang ľudovej nemocnice, od januára 1998 do januára 2004. Tkanivá boli formalínu fixované, do parafínu vložené a určil ako klinicky a histopatologicky na oddelenie gastrointestinálne chirurgie a patológie. Všetci pacienti mali nadväzujúci záznamy > 5 rokov. Následná lehota bola stanovená na december 2008. doba prežitia bola vypočítaná odo dňa chirurgia termíne alebo dátum následnej smrti, čo bolo spôsobené najmä karcinómu recidívy alebo metastáz. Deväťdesiatdva non-rakovinové ľudské žalúdočné tkaniva boli získané od gastrektómii susedných karcinómu žalúdka Okraje a kyseliny 5 cm. Rutina chemoterapia bola venovaná pacientov s ochorením v pokročilom štádiu po operácii, ale nie radiačná liečba bola podávaná niektorého z pacientov zaradených v našej štúdii.
bloky, ktoré obsahovalo celkom 436 vzoriek nádorového tkaniva a 92 vzoriek normálne žalúdočnej sliznice boli pripravené, ako bolo opísané skôr [7] - [8]. biopsia tkaniva jadro (2 mm v priemere) boli odobraté z jednotlivých nádorov žalúdka parafínových blokov (donor) a usporiadané príjemcu parafínové bloky (tkanivo matice blokov) za použitia trepania. Vzhľadom na to, že bolo dokázané, že výsledky farbenie získané z rôznych oblastí nitronádorových v rôznych nádoroch korelujú [9], jadro boli odobraté vzorky v každom prípade. Adekvátne prípad bola definovaná ako nádor zaberá > 10% z oblasti jadra [10]. Každý blok obsahoval viac ako tri kontroly, ktorá sa skladala z nenádorových žalúdočnej sliznice. Štyri-mikrometer silné rezy boli narezané z každého poľa bloku tkaniva, deparafinizovány a dehydrovaná.
Projekt bol schválený etickou komisiou provincia Zhejiang ľudovej nemocnice a písomný súhlas boli získané od všetkých účastníkov.
Imunohistochémia
Imunohistochemické analýza [11] - [12] bola vykonaná štúdia zmenené expresie proteínu v 92 nerakovinových ľudských vzoriek žalúdočnej tkaniva a 436 ľudských nádorových tkanív žalúdka. Stručne povedané, bola sklíčka pečie pri teplote 60 ° C počas 2 hodín a následne Deparafinizace xylénom a rehydratovaný. Rezy boli ponorené do EDTA antigénne vyhľadávacím pufra a mikrovlnami pre antigén vyhľadávanie, po ktorej bol podávaný 3% peroxidu vodíka v metanole uhasiť endogénnej peroxidázy, s následnou inkubáciou s 1% hovädzieho sérového albumínu na blokovanie nešpecifickej väzby. Rezy boli inkubované s králičím anti-TMPRSS4 (Proteintech Group, Inc.) a králičie anti-Erk1 (Cell Signaling Technology), cez noc pri 4 ° C. Normálny kozie sérum bolo použité ako negatívna kontrola. Po umytí sa tkanivové rezy boli ošetrené sekundárnou protilátkou. Tkanivové rezy potom boli kontrastne hematoxylínom, dehydrované, a nasadol.
TMPRSS4 a Erk1 boli zafarbené ako buffy farebné v cytoplazme a jadre. Stupeň immunostaining bol preskúmaný a pripísal si nezávisle na sebe dvaja pozorovatelia na základe intenzity farbenie [11], [13], [14]. Farbenie intenzita bola odstupňovaná podľa nasledujúcich kritérií: 0 (žiadne farbenie), 1 (slabé farbenie = svetlo žltej), 2 (stredná farbenie = žltá hnedá), a 3 (silné farbenie = hnedá). Mierne a silné farbenie boli použité na definovanie nádory s vysokým TMPRSS4 alebo výrazu ERK1 a nie a slabé farbenie boli použité na označenie nízky TMPRSS4 alebo výraz Erk1.
Všetky štatistické analýzy boli vykonané pomocou softwaru SPSS 12.0. Namerané dáta boli analyzované pomocou t Vyjadrenie TMPRSS4 v archivovaných žalúdočnej vzorky tkaniva a nenádorových sliznice TMPRSS4 bielkoviny bola detekovaná u 14 z 92 (15,22%) vzoriek ľudskej nenádorových sliznice, a všetky vzorky vyjadril proteín na nízkej úrovni. TMPRSS4 proteín bol detekovaný v 245 436 (56,19%) prípadov ľudskej rakoviny žalúdka, vysoká expresia TMPRSS4 proteínu bola detekovaná u 203 (46,56%) nádorov. TMPRSS4 bol lokalizovaný hlavne v cytoplazme alebo jadrá primárneho karcinómu (obrázok 1 A, B, a C). ERK1 proteínu detekované v 16 z 92 (17,39%) vzoriek ľudskej nenádorových sliznice, a všetky vzorky vyjadril proteín na nízkej úrovni. ERK1 proteín bol detekovaný v 231 436 (52,98%) prípadov ľudskej rakoviny žalúdka, vysoká expresia ERK1 proteínu bola detekovaná vo 173 (39,68%) nádorov. Erk1 bol lokalizovaný prevažne v cytoplazme alebo jadre primárnej rakoviny (obrázok 1D, E a F). vysokou expresiou TMPRSS4 korelované s vekom, veľkosti, Lauren klasifikácie, hĺbkou invázie, lymfatických uzlín a vzdialených metastáz, regionálnych lymfatických uzlín fáze a fáze TNM ( P Hotel &0,05) (tabuľka 1). TMPRSS4 expresia nekoreluje s pohlavím, umiestnenia nádoru, diferenciácie alebo histologické klasifikácie ( P Hotel > 0,05). (Tabuľka 1) Korelácia medzi Erk1 up-regulácia a klinických príznakov žalúdočných rakovina Vysoká expresia ERK1 koreluje s vekom, lokalizácia nádoru, veľkosť, hĺbka invázie, diferenciácie, Lauren klasifikácie, lymfatické uzliny a vzdialené metastázy, regionálnej etapa lymfatických uzlín a TNM štádium ( P Korelácia medzi TMPRSS4 prejavu a prognóza vo fáze I, II a III nádorov, miera prežitia 5 rokov u pacientov s vysokou expresiou TMPRSS4 bola významne nižšia ako u pacientov s nízkou expresiou ( P Hotel < 0,05) (obrázok 2). V Etapa IV nádory, výrazom TMPRSS4 nekoreluje s mierou 5-ročné prežitie ( P Hotel > 0,05). (Obrázok 2) Korelácia medzi ERK1 prejavu a prognóza vo fáze i, II a III nádorov, miera prežitia 5 rokov u pacientov s vysokou expresiou ERK1 bola významne nižšia ako u pacientov s nízkou expresiou ( P Hotel < 0,05) (obr 3). V Etapa IV nádory, výraz ERK1 nekoreluje s mierou prežitia 5 rokov ( P Hotel > 0,05). (Obrázok 3) viacrozmerné analýza klinicko-parametrov a prognózy K faktorom, ktoré by mohli mať prognostické efektov v karcinómu žalúdka bola analyzovaná regresnej analýzy Cox. Štúdia odhalila, že lymfatické uzliny a vzdialené metastázy ( P Dvesto štyri žalúdočné prípadov rakoviny mal nízku expresiu ako TMPRSS4 a ERK1 a sto štyridsať štyri prípadov karcinómu žalúdka mal vysokú expresiu ako TMPRSS4 a ERK1. Bola významná korelácia medzi TMPRSS4 a ERK1 (χ 2 = 155,1; P = 0,0001) (tabuľka 3). Tiež zistené výsledkov žalúdočné pacientov TMPRSS4-pozitívne /Erk1-negatívna, TMPRSS4-pozitívne /Erk1-pozitívne, TMPRSS4-negatívne /Erk1-pozitívnych a TMPRSS4-negatívnych /ERK1-negatívne, a zistili sme, že existuje významný rozdiel v celkové porovnanie (χ 2 = 256,9; P = 0,000, obrázok 4). Priemerná doba prežitia bola 42,8 ± 2,23, mesiacov pre TMPRSS4 (+) /Erk1 (-) skupina, 27,9 ± 1,27 mesiac pre TMPRSS4 (+) /Erk1 (+), 54,7 ± 0,72 mesiac pre TMPRSS4 (-) /Erk1 (- ), 39,2 ± 3,19 mesiaca pre TMPRSS4 (-.) /Erk1 (+), v danom poradí Diskusia z mnohých molekúl podieľajúcich sa na karcinogenéze a rozvoj ľudských nádorov, proteázy boli podrobne študované ako dôležité účastníkmi v karcinogenéze mnohých nádorov. V poslednej dobe sa veľká pozornosť bola zameraná na úlohu typu II transmembránových serinproteázy (TTSPs) počas vývoja nádoru [15] - [16]. TTSPs sú členmi rodiny bunkových povrchových asociovaných proteázy, ktoré sprostredkovávajú rad bežných bunkových funkcií, rovnako ako nádorové invázie a metastáz. TMPRSS4 je TTSP, ktoré bolo známe, že je up-regulovaná v niekoľkých druhov rakoviny, najmä v pankrease a štítnej žľazy, rakoviny [4], [17], a expresie TMPRSS4 bola v korelácii s metastatickým potenciálom rakovinou pankreasu [3]. TMPRSS4 je nevyhnutná a dostatočné na bunkové línie ľudského karcinómu pľúc NCI-H322, bunková línia adenokarcinómu hrubého čreva Colo205 a kolorektálny karcinóm bunkové línie HCT15 dosiahnuť migráciu a inváziu [18]. Štúdia odhalila, že expresia TMPRSS4 v žalúdočných rakovinových lézií boli úzko spojené s vekom, veľkosť tumoru, umiestnenie nádoru, hĺbku invázie invázne plavidlá, lymfatické uzliny a vzdialené metastázy a TNM štádiu. Bolo zistené, že expresia TMPRSS4 významne koreluje s prognózou rakoviny žalúdka. Vo fázach I, II a III, sadzby 5-ročné prežitie u pacientov s vysokou expresiou TMPRSS4 bola významne nižšia ako u pacientov s nízkou expresiou. V štádiu IV, TMPRSS4 expresie nekoreluje s mierou prežitia 5 rokov. Ďalej multivariačný analýza ukázala, že hĺbka invázie, lymfatické uzliny a vzdialené metastázy, TNM štádiu, a up-regulácia TMPRSS4 boli nezávislé prognostické indikátory pre rakovinu žalúdka. Nadmerná expresia TMPRSS4 má rozhodujúcu úlohu pri žiarením vyvolanej dlhodobej šírenia a metastáz zvyškového hepatocelulárneho karcinómu uľahčením epiteliálne-mezenchýmových prechod (EMT) [19]. Bolo zistené, expresia TMPRSS4 u nádorov s karcinóm skvamóznych buniek (SCC) histológiu byť výrazne vyššia ako u adenokarcinómu (AC) histológiu. Kaplan-Meierove krivky preukázala, že vysoké hladiny TMPRSS4 boli významne spojené so zníženým celkovým prežívaním u pacientov s histologicky SCC, pričom nebola nájdená žiadna korelácia pre histológiu AC [20]. Erk1 podieľa na karcinogenéze prostredníctvom regulácie rôzne bunkové procesy, ako je proliferácia, diferenciácia a progresiu bunkového cyklu v reakcii na rôzne extracelulárne signály. rastový faktor odvodený hepatómy je zapojený do žalúdka procesu karcinogenézy a podporuje proliferáciu a metastáz cez ERK1 aktivácia /2 [21]. ERK1 ako dôležitý mediátor signalizácia kyselina lysofosfatidová vedie k up-reguláciu sfingozín kináza 1 (SphK1) a bodom na SphK1 a výrobu sfingozín-1-fosfát ako potenciálny terapeutické ciele v karcinómu žalúdka [22]. Interakcia medzi FVIII a TF indukuje aktiváciu proteázy-activated receptor 2, čím sa spúšťa ERK1 /2 a IKB-α /NF-kB signálne transdukcia pre reguláciu génovej expresie IL-8, TF, a kaspázy-7, a v konečnom dôsledku podporuje proliferáciu buniek SW620 a migrácii [23]. Expresie ERK1 v žalúdočnej rakoviny a jej klinický význam nie sú chápané. Súčasná štúdie bolo preskúmať expresiu ERK1 vo 436 chirurgických vzoriek rakoviny žalúdka pomocou IHC. Štúdia ukázala, že bola zistená vysoká expresia ERK1 proteínu vo 173 (39,68%) nádorov. Vysoká expresia ERK1 koreluje s vekom, lokalizácia nádoru, veľkosť, hĺbkou invázie, diferenciácie, Lauren klasifikácii, lymfatické uzliny a vzdialené metastázy, fázu regionálnych lymfatických uzlín, TNM štádiu a zlou prognózou. ďalej skúmaná expresia TMPRSS4 vo vzorkách žalúdočné rakovinou a jeho korelácia s ERK1 výrazom. Zistili sme pozitívnu koreláciu medzi expresiou TMPRSS4 a ERK1, čo naznačuje, že TMPRSS4 môžu byť zapojené do karcinogenézy, progresiu a metastázy karcinómu žalúdka prostredníctvom podpory proliferácie buniek aktiváciou ERK1.
skúšku študenta, zatiaľ čo kategorické údaje boli študované pomocou ×
2 alebo Fisherov presný test. Krivky prežitia boli odhadnuté použitím metódy Kaplan-Meier a log-rank test bol použitý na výpočet rozdielov medzi krivkami. Analýza s mnohými premennými pomocou Cox proporcionálneho rizika regresného modelu bola vykonaná za účelom posúdenia prognostické hodnoty expresiu proteínu. Korelačné koeficienty medzi expresiu proteínu a klinicko-nálezy sa odhadli pomocou porovnávacej metódy Pearson. Štatistická významnosť bola stanovená na P Hotel <0,05.
Resuts
Expresia ERK1 v archivovaných žalúdočnej tkanivových vzoriek a nenádorových sliznice
Korelácia medzi TMPRSS4 up-regulácia a klinickými príznakmi rakovina žalúdka
menšia ako 0,05) (tabuľka 2). Erk1 expresia nekoreluje s pohlavím alebo histologické klasifikácie ( P Hotel > 0,05). (Tabuľka 2)
= 0,005), TNM štádium ( P
= 0,005), expresie TMPRSS4 ( P
= 0,000) a Erk1 ( P
= 0,000) boli nezávislé prognostické faktory u pacientov s karcinómom žalúdka. Avšak, vek, pohlavie, tumor umiestnenie a veľkosť, histologické klasifikácie, nádorové diferenciácie, hĺbka invázie, Lauren klasifikácie a štádium uzol v regionálnych lymfatických nemal prognostickú hodnotu.
Združenie medzi Vyjadrenie TMPRSS4 a ERK1
Niektoré druhy baktérií môžu zvýšiť riziko HIV u žien,
Črevné mikróby vo vosách pomáhajú prekonať pesticídy
Pacienti na imunoterapiách by mali konzumovať viac vlákniny,
Črevná mikroflóra môže predpovedať závažnosť ochorenia COVID-19
Čo nám môžu staroveké výkaly povedať o vývoji mikrobiómu ľudského čreva?
Rastúce riziká biologickej obrany, ktoré predstavuje syntetická biológia
Západná strava môže zvýšiť riziko „smrteľnej sepsy“,
varujú odborníci Nový výskum uskutočnený na Štátnej univerzite v Portlande naznačuje, že západná strava môže zvýšiť riziko závažnej sepsy a úmrtnosti na infekciu. hurricanehank | Shutterst
Antioxidanty v strave môžu zvýšiť riziko rakoviny čriev,
nová štúdia odhaľuje Zdravotné prínosy antioxidantov v potravinách boli preukázané v celom rade vedeckej literatúry. Teraz, nová štúdia ukazuje, že príliš veľa dobrej veci nemusí byť také dobré! Obvyk
Proteín SARS-CoV N vyvoláva produkciu IFN-β provokáciou ubikvitinácie RIG-I,
nachádza štúdiu Mnoho členov rodiny Coronaviridae, ako je respiračný syndróm na Blízkom východe (MERS), závažný akútny respiračný syndróm (SARS), a je známe, že závažný akútny respiračný syndróm koron