Photoimmunotherapy (PIT) ass eng nei Kriibs Behandlung datt d'Spezifizitéit vun antibodies fir gezielt erhéijen mat der toxicity vun photosensitizers der Belaaschtung ze wäit Infrarout (Nir) Liicht entschlof kombinéiert. Mir standing PIT zu engem Modell vun disseminated gastric Kriibs peritoneal carcinomatosis an iwwerwaacht Efficacitéit mat zu VIVO VerfÜgung GFP fluorescence Imaging. An kënschtlech VerfÜgung a zu VIVO VerfÜgung Experiment mat enger HER2-ausdrécken, GFP-ausdrécken, gastric Kriibs Zell Linn (N87-GFP) gehaal. A conjugate vun engem photosensitizer aus, asetzen-700, conjugated ze Stad (Tra-IR700), gefollegt vun Nir Luucht war fir PIT benotzt. An kënschtlech VerfÜgung PIT gouf duerch Miessunge cytotoxicity mat dout staining an enger Ofsenkung GFP fluorescence bewäert. An VIVO VerfÜgung PIT gouf zu engem disseminated peritoneal carcinomatosis Modell an enger Säit xenograft benotzt entholl Volumen Miessungen an GFP fluorescence Intensitéit bewäert. An VIVO VerfÜgung anti-entholl Auswierkunge vun PIT déi bedeitendst Kierzunge entholl Volumen bestätegt goufen (um Dag 15, p &Si besteet; 0,0001 vs. Kontroll) an GFP fluorescence Intensitéit (Säit Model: um Dag 3, behandelt PIT vs. Kontroll p &Si besteet; 0,01 an peritoneal disseminated Model: um Dag 3 PIT vs. Kontroll, p &Si besteet behandelt; 0,05). Cytotoxic Effekter kënschtlech VerfÜgung huet dës Distanz op d'Liicht Portioun ofhängeg ze ginn an ëmmer necrotic Zell Broch ze GFP release Haaptfiguren an enger Ofsenkung fluorescence Intensitéit kënschtlech. VerfÜgung Sou, Verloscht vun GFP fluorescence zerwéiert als nëtzlech uweist vun Zell necrosis der PIT VerfÜgung Fro:. Sato K, Choyke eens, Kobayashi H (2014) Photoimmunotherapy vun Gastric Cancer Peritoneal Carcinomatosis zu enger Mouse Model. PLoS NËMMEN 9 (11): e113276. Doi: 10.1371 /journal.pone.0113276 VerfÜgung Redakter: Irina V. Lebedeva, Columbia University, Vereenegt Staate vun Amerika VerfÜgung Arnaque: Juli 2, 2014; Akzeptéiert: 21 Oktober 2014; Publizéiert: 17. November 2014 VerfÜgung Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel, fräi vun all Copyright, a ginn fräi kopéiert kënne, verdeelt, iwwerdroen, geännert, opgebaut, oder soss duerch iergendeen fir all erlaabt Zweck benotzt. D'Aarbecht ass net ënnert der Creative Commons CC0 Domaine public Engagement sinn VerfÜgung Data Disponibilitéit:. D'Auteuren confirméieren datt all Daten d'Conclusiounen Basisdaten sinn ouni Restriktioun voll sinn. All Daten sinn bannent de Pabeier a seng Ennerstëtzung Informatiounen Fichieren VerfÜgung Funding:. Dës Aarbecht vun der NIH Intramural Programm an JSPS Research Gemeinschaft ënnerstëtzt gouf. D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung Gastric carcinoma bewierkt méi wéi 740.000 Kriibs-Zesummenhang Doudesfäll pro Joer weltwäit besonnesch an Asien [1] - [3]. D'Majoritéit vun gastric Kriibs Patienten präsent mat lokalen fortgeschratt, onbekannt oder metastatic Krankheet precluding curative Agrëff dass meeschtens vun Net-curative Therapie [1] verlängert gëtt. Peritoneal carcinomatosis a Liewer Metastasen sinn gemeinsam Liewen-verkaaft Manifestatiounen vun fortgeschratt Etapp gastric Kriibs [1], [4]. Peritoneal carcinomatosis existeiert och zu spillt, appendiceal, Colon, Bauchspaicheldrüs an gastric Cancers. Iwwregens hätt ass Ekzeptioun aarm a lokal Traitementer sinn ëmmer Mëssgléckt mat héije Terrain Tariffer an morbidity verbonne mat ascites an bowel dogéint. D'Therapie ass och meeschtens Mëssgléckt. Sou, nei Methode vun peritoneal carcinomatosis bestéet gi waren. VerfÜgung Photoimmunotherapy (PIT) ass e neien Zil--Zell spezifesch Kriibs Behandlung datt en antibody photosensitizer conjugate (APSC) duerno bei Infrarout (Nir) Liicht stéiert beschäftegt. An APSC besteet aus engem Kriibs Zell-spezifesch monoclonal antibody (MAB-) an engem photosensitizer, IR700, déi engem Silikatsubstrat-phthalocyanine ADR ass covalently zu der antibody conjugated. D'APSC Photo'en Zil- Molekülle op der Zell Membran an dann induces bal direkt Zell necrosis der aussetzt Nir Liicht bei 690 nm. An kënschtlech VerfÜgung Studien PIT hunn dës héich Zell-spezifesch ze sinn, also, Net-ausdrécken Zellen direkt nieft geziilte Zellen weisen keng gëfteg Effekter [5]. Zellen mat PIT hi Expansioun rapid Volumen behandelt Virwaat zu Broch vun der Zell Membran, extrusion vun Zell Inhalter an de extracellular Raum, an irreversibel necrosis [6] - [8]. Eis Resultater an anerer weisen, datt cytotoxicity vun PIT entschlof guer net op reaktiv Sauerstoff Arten setzen oder d'Existenz vun singlet Sauerstoff quenchers [9]. Ausserdeem, cytotoxicity vun PIT entschlof ass virun allem an der Zell Membran éischter am Mitochondrie wéi mat PDT existeiert. VerfÜgung Iwwerdeems PIT rapid bewosst necrosis Resultater vun de globale Volume vun der entholl net fir e puer Deeg ännere kann. Dëst ass well et op d'mannst e puer Deeg dauert fir macrophages, Prozess eran an d'behandelt entholl verloossen. Dofir, déi nei Methoden, iwwer Gréisst Miessunge, si waren d'Auswierkunge vun PIT ze kontrolléieren. Fluorescence Proteinen (sozial a finanziell) gi fir visualizing bewosst Prozesser Toast benotzt [10], [11]. Iwwerdeems déi meescht apoptotic Zell Doud Resultater am Erhalen vun der Zell Membran an Reklassement vun der voll nees fluorescence Géigestand seng Identitéit verléiert Doud [12] zu Zell, [13], an PIT, de Blëtz Broch vun Zell Schläimhait Resultater am extrusion vun cytoplasmic sozial a finanziell an duerfir, e relativ rapid readout vun Zell Doud. En Virdeel vun sozial a finanziell fir zu VIVO VerfÜgung Imaging ass dass se extrinsic injections vun Agenten (wéi luciferin am Fall vun bioluminescence) net do brauchen a kënnen an Echtzäit [14] iwwerwaacht ginn - [18]. Well se Gentherapie transfection verlaangen, wier se wahrscheinlech net nëmmen nëtzlech an Etuden Pre-Medeziner. VerfÜgung An dëser Etude, iwwerpréift mir d'Efficacitéit vun PIT zu enger Maus Modell vun disseminated peritoneal gastric Kriibs mat Hëllef vun VIVO GFP fluorescence Imaging ze Äntwert kontrolléieren. VerfÜgung Reagents VerfÜgung Waasser soluble, Silicon-phthalocyanine kuckt virdrun, IRDye 700DX Regierung dementéiert Ester an IRDye 800 Cw Regierung dementéiert Ester vun LI-Cor Bioscience kritt huet (Lincoln, héich, USA). Panitumumab, e voll humanized IgG 2 MAB- géint EGFR française, war aus Amgen (Mär Oaks, CA, USA) kaaft. Stad, 95% humanized IgG 1 MAB- géint HER2 française, aus Genentech (South San Francisco, CA, USA) kaaft gouf. All anere Chemikalien huet vun reagent Schouljoer. VerfÜgung Synthes vun IR700-conjugated Stad oder panitumumab, an IR800-conjugated Stad VerfÜgung unhéier vun Hoer mat mAbs enger viregter Rapport no [19] gesuergt huet. An dowéinst, panitumumab oder Stad (1 mg, 6,8 nmol) war mat IR700 Regierung dementéiert Ester (60.2 μg, 30,8 nmol) oder IRDye 800 Cw Regierung dementéiert Ester (35.9 μg, 30,8 nmol) zu 0,1 mol /L Na 2HPO Zell Kultur VerfÜgung N87-GFP Zellen stably GFP ausdrécken sech kaaft vum Anti LÄB (San Diego, CA, USA). Héich GFP Ausdrock war an der Feele vun enger Auswiel Agent mat 10 Passagen confirméiert. Ze diskutéieren spezifesch Zell Dout vun PIT, 3T3 Zellen als negativ Kontroll stably benotzt goufen DsRed (3T3 /Dsred) ausdrécken [5]. Zellen sech am RPMI 1640 (Life Technologies, Gaithersburg, MD, USA) ergänzt mat 10% An et Bovine serum an 1% penicillin /streptomycin (Life Technologies) an Otemschwieregkeeten Kultur Kréi zu engem humidified incubator bei 37 ° C an eng Atmosphär vu 95 ugebaut % Loft a 5% Kuelendioxid VerfÜgung fluorescence microscopy VerfÜgung der antigen-spezifesch Lokalisatioun vun IR700 conjugates an der Verännerung Zell Wirklechkeet no PIT, fluorescence microscopy (IX61 oder IX81 Leeschtung war ze entdecken. Olympus Amerika, Melville, NY, USA). Dausend Zellen sech rakommen op Cover-Glas-bottomed Platen a fir 24 HR incubated. Tra-IR700 war dann notéiert zu der Kultur mëttelfristeg (phenol rout gratis) um 10 μg /ML a fir 6 HR bei 37 ° C incubated. D'Zellen sech dann mat PBS zou; Propidium Kaliumiodid (PI) (1:2000) oder Cytox Blue (1:500) (Life Technologies) war fir d'Medien 30 min dobäi virun PIT dout Zellen ze entdecken. D'Zellen sech dann zu Nir Liicht ausgesat an Serien Biller kritt huet. Een Dag no PIT, goufen Zellen gewäsch a incubated mat neie mëttel- der PIT (0,5 J /cm Flow Cytometry VerfÜgung Fluorescence vun Zellen der incubation mat Pan-IR700 oder Tra-IR700 war mat engem Flux cytometer (FACS Calibur, BD BioSciences, San Jose, CA, USA) an CellQuest Software (BD BioSciences) gemooss. Zellen (1 × 10 An kënschtlech PIT VerfÜgung One honnertdausend Zellen sech an 24 gutt Placke rakommen a fir 24 HR incubated. Kultur Medien ersat mat frëschen Kultur Medien 10 μg /ml vun Tra-IR700 mat an d'Zellen bei 37 ° C fir 6 HR incubated goufen. Nom Wäschen mat PBS, phenol rout gratis Kultur mëttelfristeg ugebaut. Dunn, Zellen sech op 685 bis 695 nm Wellelängt mat Nir Laser Liicht irradiated (BWF5-690-8-600-0.37; B &. W TEK INC, Newark, DE, USA). Déi aktuell Muecht Dicht vun MW /cm Cytotoxicity assay VerfÜgung D'cytotoxic Auswierkunge vun PIT mat Tra-IR700 sech duerch onkontrolléiert cytometric PI staining alles, wat kompromettéiert Zell Schläimhait bieden. Fir de Flux cytometric assay, goufen Zellen 1 HR der Behandlung trypsinized a mat PBS gewäsch. PI war cytometry an der Zell Ophiewe (final 2 μg /ml) an incubated bei Raumtemperatur fir 30 min, gefollegt vun Flux notéiert. VerfÜgung Estimatioun vun GFP fluorescence Intensitéit kënschtlech VerfÜgung One honnertdausend Zellen sech op Cover-Glas-bottomed Platen rakommen a fir 12 HR incubated. Tra-IR700 war dann notéiert zu der Kultur mëttelfristeg (phenol rout gratis) um 10 μg /ML a fir 6 HR bei 37 ° C incubated. D'Zellen sech mat PBS gewäsch a ersaat mat engem neien, phenol rout gratis Kultur mëttel- an der ënnert Säit vun der Cover Glas markéiert huet (bis op d'Positioun vun der Observatioun festzestellen). No PIT, sech nees d'Zellen fir 1 Dag incubated. Een Dag no PIT, goufen d'Zellen nees observéiert. D'GFP Intensitéit war mat total Pixel mat der selwechter loung an der selwechter Plaz [20] bewäert. Analyse vun den Biller war mat ImageJ Software gesuergt (http://rsb.info.nih.gov/ij/). VerfÜgung Fluorescence aus behandelt Zellen war och e Flux cytometer (FACS Calibur) gemooss benotzt. Déieren an entholl Modeller VerfÜgung All zu VIVO VerfÜgung Prozeduren sech mat de Guide fir d'Fleeg an Uwendung vun schafft Déieren Resources (1996) an Anhale gehaal, US Fuerschungen, an vun der NIH Déieren Care an Benotzt Comité ofgeseent. Six- bis aacht-Woch-al weiblech homozygote athymic Sauna Mais sech aus Charles River (NCI-Friedrich) kaaft. Fir nëmmen déi direkt entholl Zell Märder Effet vun zu VIVO VerfÜgung PIT, immunocompromised Sauna Mais benotzt goufen diskutéieren. Während Prozeduren, sech Mais mat isoflurane Nodeel. Zéng Milliounen N87-GFP Zellen sech subcutaneously zu Recht ee Biergréck vun der Mais heijen. Fir entholl Volumen, déi gréisste longitudinal Duerchmiesser (Längt) an de gréisste Queeschformat Duerchmiesser (Breet) waren gemooss mat engem externen caliper ze bestëmmen. Entholl Bänn baséiert op caliper Miessunge vun den folgenden Formule berechent goufen; entholl Volumen = Längt × Breed An VIVO fluorescence Imaging VerfÜgung An VIVO Characterization vun disseminated peritoneal Maus Modell VerfÜgung Mais mat entweder peritoneal Kriibs disseminated (um 6 Wochen an der Zell ofgestouss) oder Säit erhéijen (um 7 Deeg an der Zell ofgestouss) waren intravenously mat 100 μg vum Tra-IR700 an Tra-IR800 heijen. Een Dag no beim Sprëtzen, goufen Serien Biller mat engem Pearl pauschal fënnt standing IR700 /IR800 fluorescence ze entdecken, an d'Maestro fir GFP. White Liicht Biller vun de Mais sech mat enger iphone5 (Apple Galaxy Cupertino, CA, USA) kritt. VerfÜgung An VIVO PIT VerfÜgung Fir d'Wierkung vun PIT vun der Säit Modell ze diskutéieren , N87-GFP entholl-Träger Mais sech an 4 Gruppe vun op d'mannst 10 Déiere pro Grupp zoufälleg wéi follegt: (1) nee Behandlung (Kontroll); (2) nëmmen aussetzt Nir Liicht um 50 J /cm Fir disseminated peritoneal Kriibs diskutéieren, Mais an 4 Gruppe vu 5 Déiere fir dësen Traitementer pro Grupp zoufälleg huet:. (1) nee Behandlung (Kontroll); (2) nëmmen aussetzt Nir Liicht um 50 J /cm statistique Analys VerfÜgung Data sinn ausdrécke wéi heescht ± Sem vun engem Minimum vu véier Experimenter, wou net anescht uginn. Statistique analyséiert goufen higeriicht enger Statistik Programm benotzt (GraphPad Prism; GraphPad Software, La Jolla, CA, USA). Fir verschidde Vergläicher, e eent-Manéier Analyse vun Varianz (ANOVA) mat Post Test (Kruskal-Wallis Test mat der Post-Test) a war Tukey d'Test benotzt. Entwéckele Probabilitéit vun Iwwerliewe, alles ëmzestoussen als entholl Duerchmiesser nokënnt 2 cm ze erreechen, gouf an all Grupp mat der Benotzung vun der Kaplan-Meier Iwwerliewe rop Analyse geschat, an d'Resultater sech mat der Läschlëscht-Platz Test an Wilcoxon Test Verglach. Student d' t VerfÜgung Test war och déi zwou ze vergläichen benotzt kënschtlech VerfÜgung studéieren; p &Si besteet; 0,05 war eng statistesch groussen Ënnerscheed ze weisen, als VerfÜgung Confirmatioun vun Ausdrock Profil vun N87-GFP Zellen als Zil fir PIT VerfÜgung Mir der fluorescence Signaler iwwerpréift. vun Pan-IR700 an Tra-IR700 zu N87-GFP Zellen vun FACS gebonnen. No 6 HR incubation mat entweder Pan-IR700 oder Tra-IR700, N87-GFP Zellen zougedréckt a konsequent héijer Hellegkeet mat Tra-IR700 wéi Pan-IR700 (Figebam. 1A). Dës Signaler ware bal komplett vun der Zousätzlech vun iwwerschësseg Stad oder panitumumab blockéiert, proposéiert spezifesch verbindlechen a confirméiert den héichen Ausdrock vun HER2 wéi EGFR [21]. Dës Donnéeë ugeholl datt HER2 der preferable Zil fir PIT zu N87-GFP Zellen war wéinst hirer héijer Ausdrock. VerfÜgung Microscopy vun kënschtlech PIT VerfÜgung Serial fluorescence microscopy vun N87-GFP Zellen virun Leeschtung war an der PIT. No aussetzt Nir Liichtjoer (2 J /cm Evaluatioun vun kënschtlech PIT Effekt VerfÜgung fir d'Wierkung vun kënschtlech VerfÜgung PIT zu quantitate, standing mir eng cytotoxicity assay baséiert op Aktivitéiten vum PI, déi bewisen, dass Zell Doud mat waarden Liicht Portioun fräi (Figebam. 1c). Nee bedeitendst cytotoxicity war mat Nir Liicht aussetzt oder Tra-IR700 eleng fonnt. VerfÜgung Evaluatioun mat GFP fluorescence kënschtlech no PIT VerfÜgung Een Dag no aussetzt Nir Liichtjoer vun 0,5 J /cm an VIVO PIT verklengert am Säit xenograft Modell entholl Volumen VerfÜgung Next, mir den Effet vun PIT zu VIVO VerfÜgung op Säit entholl Träger Mais iwwerpréift (Figebam. 2A). PIT bedeitendst Kierzunge entholl Volumen (n = 10 vun all Grupp, * p = 0,0456 &Si besteet; 0,05, Tukey d'Tester) entschlof. Véier Mais aus zéng zu PIT Grupp sech komplett vun der Behandlung gekachten (Figebam. 2B). Survival war an der PIT Grupp Verglach mat Kontroll Grupp vill noliesen (n = 10 vun all Grupp, ** p &Si besteet; 0,0001, laang-Platz Test an Wilcoxon Test) (Lalumi 2C.). Dës Donnéeë hindeit, datt PIT bedeitendst entholl Reduktioun an allem Iwwerliewe ëmmer zu VIVO VerfÜgung. VerfÜgung GFP Fluorescence Imaging no Am VIVO PIT am Säit xenograft Modell VerfÜgung Fir ze kontrolléieren zu VIVO VerfÜgung PIT, GFP Imaging real-Zäit war am Mais mat N87-GFP bilateral Säit erhéijen (Figebam. 3A) gesuergt. GFP fluorescence bewisen entholl Belaaschtung an der Äntwert op PIT. GFP fluorescence war mat IR700 fluorescence soll, déi séier ofgeholl der PIT (Figebam. 3C). Total fluorescence Imaging (TFI) vun GFP an onbehandelt erhéijen (Kontroll) an zu erhéijen Erhalen Liicht nëmmen wéinst entholl Wuesstem fräi. An erhéijen mat PIT behandelt, TFI vun GFP ofgeholl lues am behandelt entholl, iwwerdeems de Géigendeel entholl am selwechten Maus (IV nëmmen, keng Luucht) Gewise fräi GFP fluorescence (Figebam. 3B). VerfÜgung Quantification vun am Ganzen GFP fluorescence Intensitéit verroden, dass et eng drastesch ofgeholl der PIT (n = 5 Mais vun all Grupp, * p = 0,0118 &Si besteet; 0,05, ** p = 0,0010 &Si besteet; 0,01, *** p = 0,0049 &Si besteet; 0,01, Tukey d'Test mat ANOVA) (Figebam. 3C). Wéinst entholl du-Wuesstem, fräi nees de GFP Verhältnis vum Dag 4 no PIT, obwuel et wéi aner Kontroll Gruppen niddreg war. D'real-Zäit GFP fluorescence Imaging a seng quantification aktivéiert real-Zäit Verglach vun de Gruppen a weisen eng staark Korrelatioun tëschent héich GFP fluorescence an entholl Werdegang vun all Grupp. VerfÜgung dësem Effet ze confirméieren, ex VIVO VerfÜgung Analyse war gesuergt (Figebam. 4A). D'PIT Effekt huet mat enger Ofsenkung IR700 fluorescence (Figebam. 4B) confirméiert. Ënnert dëser Bedingung, GFP Intensitéit vun ex VIVO VerfÜgung erhéijen ofgeholl der PIT (Figebam. 4B). Dës Donnéeë hindeit, datt real-Zäit GFP liewen Imaging ass konsequent mat ex VIVO VerfÜgung Imaging. VerfÜgung Wann PIT Wochenzeitung widderholl huet, GFP fluorescence Aktivitéit séiere verschwonnen (Figebam. 4C an D), beweist komplett Dout vun der entholl. VerfÜgung Characterization vun der disseminated peritoneal Modell mat fluorescence Imaging VerfÜgung an fir standing der natierlecher Geschicht vun der disseminated peritoneal Modell, Serien fluorescence Imaging war ze bestëmmen. D'implanted erhéijen bewisen héich fluorescence Signal mat IR700, IR800, an GFP, all déi mat all aneren-durech en der (IR800 benotzt gouf intestinal autofluorescence ze vermeiden) (Figebam. 5). Dës Donnéeë hindeit, datt dëse Modell vun disseminated peritoneal Kriibs kann am liewen Mais benotzt GFP fluorescence iwwerwaacht ginn. VerfÜgung GFP Fluorescence Imaging no Am VIVO PIT zu disseminated peritoneal Modell VerfÜgung Real-Zäit GFP fluorescence Imaging war an der disseminated peritoneal Model virun an no PIT (Figebam. 6A) gesuergt. IR700 fluorescence ofgeholl der PIT (Figebam. S4). GFP TFI sech lues an d'Net-PIT Gruppen wéinst entholl Wuesstem. An der PIT behandelt Grupp, ofgeholl GFP TFI vun 1 Dag bis 3 Dag no PIT (Figebam. 6B). Quantification vun insgesamt GFP fluorescence Intensitéit Teamchef eng drastesch ofgeholl der PIT (n = 5 Mais vun all Grupp, * p = 0,0295 &Si besteet; 0,05, ** p = 0,0355 &Si besteet; 0,05, Kruskal-Wallis Test mat der Post-Test) (Figebam. 6C). Wéinst der entholl du-Wuesstem, fräi GFP Verhältnis erëm aus 4 Dag no PIT, obwuel se manner wéi aner Gruppen haten, wéi mat der Säit entholl Modell observéiert. Sou, ëmmer PIT geziilte entholl groussen Effet Dout vun zwee der Säit a disseminated peritoneal entholl Modeller an dëst mat GFP TFI iwwerwaacht ginn hätt. VerfÜgung Dës Etude beweist, dass den Effet vun PIT kann mat GFP fluorescence Imaging iwwerwaacht. Anescht apoptosis [12], [13], an déi GFP an Zesummenhang unisse Proteinen méi hell wéinst der falender cytoplasmic Volumen, während necrotic Zell Doud mat PIT, Membran Schued vun cytoplasmic Inhalter dorënner GFP fräiginn féiert. Dësen eenzegaartegen Charakteristik vun GFP an Zesummenhang unisse Proteinen mecht hinnen nëtzlech biomarkers fir PIT. VerfÜgung An VIVO VerfÜgung GFP fluorescence Imaging erméiglecht de voll Prozess vun tumorigenesis, Behandlung, Réckgang, Metastasen, oder um Terrain, zu an der selwechter Déier ouni invasiv Prozedure fonnt ginn [10], [11]. Vun Zellen ausdrécken cytoplasmic GFP, déi antitumor Effekter entschlof vun PIT astellen erhale wéinst extrusion vun GFP aus behandelt Zellen iwwerwaacht ginn hätt. VerfÜgung D'Konzept vun geziilte Liicht Therapie benotzt gëtt iwwer dräi Joerzéngten al [22]. Wéinst der hydrophobicity vun traditionell sensitizers photodynamic Therapie (PDT), ass d'pharmacokinetics vun antibody conjugated PDT Agenten seng Fähegkeet héich limitéiert conjugates un d'Zil ze liwweren. Dofir, mat antibodies geziilte PDT sensitizers huet nëmme Succès gouf an Modeller wou d'conjugate direkt an der entholl oder peritoneum heijen war [23]. Fir eng antibody-photosensitizer conjugate (APSC) systemesch ze liwweren, soll d'photosensitizer zéien hydrophilic ginn. D'hydrophilic phthalocyanine-baséiert photosensitizer, IR700DX wéini eng antibody conjugated gëtt eng APC datt intravenously verwalte kënnen. Dës Form vun der Therapie, Limburg PIT, Ënnerscheed traditionell PDT net nëmmen an der hydrophilicity vun der photosensitizer, mä och an sengem Gebräuch op Nir Liicht der photosensitizer ze aktivéieren. Nir Liichtjoer huet besser Otemschwieregkeeten Pénétratioun wéi niddreg Wellelängt Liichtjoer vun PDT benotzt. Dës nei Generatioun vu APCs Sarkasmus ähnlechen intravenous pharmacokinetics zu plakeg antibodies geplatzt héich geziilte entholl Heefung mat minimal Net Zill décisiv a kënnen zu engem breede Spektrum vun antibodies applizéiert ginn, vill Potential Uwendungen ganze Kierper astellen. VerfÜgung Trotz cytotoxic Chimiotherapie goen, d'Resultat fir fortgeschratt Etapp gastric Kriibs bleift aarm. Well, ass d'Majoritéit vun de Patienten mat peritoneal Investitiounen präsent mat esou ëmfaassend Symptomer wéi aarm Hausaufgabe, Gewiichtsverloscht, bloating Sensatioun, Péng oder anemia Diagnos oft Verspéidung a lokal Therapien sinn net méi machbar [24]. PIT ass eng villverspriechend Method vun disseminated peritoneal Kriibs bestéet. Fir effektiv PIT zu Leeschtunge, soll d'APSC systemesch an d'Luucht geliwwert ginn soll selektiv un der peritoneum applizéiert ginn. Ënner dëse Konditiounen ass et genuch Liwwerung vun APSCs zu Reduktioun vun disseminated erhéijen der PIT zu Resultat. Dëse Prozess kann mat real Zäit zu VIVO VerfÜgung GFP fluorescence Imaging iwwerwaacht ginn. VerfÜgung Et ginn e puer Aschränkungen an dëser Etude. Et ass ze bemierken, datt net all gastric Cancers HER2 Liesprojet an duerfir, Tra-IR700 kann net uniform effektiv zu disseminated gastric Kriibs. Iwwerhaapt, kann et néideg ginn vun engem Cocktail vun APSCs ze benotzen efficacer Meeschter vun der Ausdrock Profiler vun enger bestëmmter entholl Cover [25]. Aner Dofir vun dëser Etude ass, datt Liicht transcutaneously zu klenge Mais verwalt ginn hätt mä dat ass net méiglech a Mënschen. Fir effektiv Mënschen mat PIT dierf, ass et néideg ginn Liicht ze gëllen laparoscopically Tellur vun der Haut ze verhënneren. Aner begrenzten Dauer ass datt eise Modell nëmmen zu immunocompromised Mais bewäert huet. D'immunological Reaktioun vun PIT wäert an Zukunft an immunocompetent Mais bewäert ginn. Endlech, gëtt zu kuerzfristeg GFP fluorescence Imaging Déiereschutz Studien gin limitéiert, wéi et transfection vun der entholl mat enger endogenous FAQ verlaangt. Trotzdem, ass dat eng nëtzlech readout fir preclinical Studien. VerfÜgung PIT ass effikass géint HER2-positiv peritoneal carcinomatosis gastric Kriibs an enger Maus Modell an GFP fluorescence Imaging erméiglecht Iwwerwachung vun PIT Effekter. dëst Fuerschung war vun der Intramural Research plangen vun der National Instituter vun Gesondheet, National Cancer Institut, Center fir Cancer Research ënnerstëtzt. Kazuhide Sato ass mat JSPS Fuerschung hëllefen fir japanesch Biomedical an Erweiderunge virdrun Fuerscher am NIH ënnerstëtzt. VerfÜgung
Aféierung VerfÜgung
spontan a Methode VerfÜgung
fluorescence Biller ware fir z'entdecken IR700 /IR800 fluorescence, an engem Maestro pauschal fënnt (CRI, Woburn, MA, USA) fir GFP mat engem Pearl pauschal fënnt (LI-Cor Bioscience) kritt. Fir GFP, engem filter Band-Ugrëff vun 445 bis 490 nm (excitation) an engem laange-Ugrëff blo filter iwwer 515 nm (Emissiounslinnen) sech benotzt. D'tunable Emissioun filter gouf automatesch an 10 nm Soue vun 500 bis 600 nm fir de grénge filter baut op permanent aussetzt (500 msec) eleng. Der Spektralklass fluorescence Biller aus autofluorescence Spektren an d'Spektren vun GFP (N87-GFP entholl), déi dann onvermëschten huet, baséiert op charakteristesche Spektralklass Muster vun GFP, mat Maestro Software (CRI). Regioune vun interesséieren (ROIs) waren manuell Wolleken entweder op der Säit entholl oder iwwer d'postwendend misse Regioun als sënnvoll de Modell an fluorescence Intensitéit gemooss gouf [19]. VerfÜgung Resultater VerfÜgung
Diskussioun VerfÜgung
Konklusiounen VerfÜgung
Informatiounen Ennerstëtzung VerfÜgung Dorënner S1. VerfÜgung Spezifësch geziilte necrotic Zell Doud war observéiert der PIT kënschtlech. VerfÜgung N87-GFP Zellen mat 3T3 /DsRed (Net-KLENGE ausdrécken) Zellen Co-cultured goufen. Si huet sech mat Tra-IR700 behandelt a (virun an no irradiation vun Nir Liichtjoer) observéiert. Cibléiert spezifesch necrotic Zell Doud oblige excitation mat Nir Liichtjoer (no 30 min) observéiert. Nee Schued war am 3T3 /DsRed Zellen bewisen. . * 3T3 /DsRed Zellen, Bar = 25 μm VerfÜgung Doi: 10,1371 /journal.pone.0113276.s001 VerfÜgung (Name) VerfÜgung Dorënner S2. VerfÜgung Diminishing vun GFP-fluorescence op 1 Dag no PIT war observéiert kënschtlech. VerfÜgung Diminishing GFP-fluorescence Intensitéit op 1 Dag no PIT observéiert gouf an enger Fassong op d'Liicht Portioun ofhängeg ze ginn. Bar = 100 μm. Déi schwaarz Linn op der Südsäit gouf de Bewaacher d'Positioun vun der Observatioun ze bestëmmen VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0113276.s002 VerfÜgung (Name) VerfÜgung Dorënner S3. VerfÜgung Verloschter am GFP-fluorescence op 1 Dag no PIT cytometry duerch onkontrolléiert bewäert. Diminishing GFP-fluorescence Intensitéit op 1 Dag no PIT zu enger Art op d'Liicht Dosis vun Flux cytometric Analyse ofhängeg war VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0113276.s003 VerfÜgung (Name) VerfÜgung Dorënner S4. VerfÜgung An VIVO VerfÜgung fluorescence Imaging an Äntwert ze widderhuelen PIT an de Modell peritoneal disseminated Mais. An VIVO VerfÜgung fluorescence Imaging an Äntwert ze widderhuelen PIT. IR700 fluorescence war an Äntwert ze PIT ofgeholl VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0113276.s004 VerfÜgung (Name) VerfÜgung Video S1. VerfÜgung Time-unzeginn DCR Biller vun engem N87-GFP Zell vun PIT behandelt. Time-unzeginn mi DCR Biller (mat Video) vun engem N87-GFP Zell weist morphologic Ännerunge vun der Zell der Nir Liicht irradiation vun Zellen mat Tra-IR700 behandelt (fir 25 min Blumm am Ganzen). Enorm Liichtjoer ass Nir Liicht irradiation (2 J /cm
Arbeschterlidder VerfÜgung
Kuerzkette Fettsäure -Ergänzung verbessert den Erhuelung vum Schlag,
Wat ass den Deal mat Hepatitis C?
Neit Tool fir den Darmmikrobiom ze entschlësselen
DeNovix annoncéiert Gewënner vum Platin DS11 FX+ Spektrofotometer / Fluorometer
Darmmikrobiom kann en Deel am schwéiere COVID-19 spillen
Studie suggeréiert eng Verbindung tëscht probiotescher Notzung an "Gehirnfogginess"
Migratioun beaflosst Darmmikrobiota déi ofwiesselnd d'Gesondheet fënnt Fuerscher
De mënschlechen Darm enthält Billiounen hëllefräich a frëndlech Bakterien, déi de Mikrobiom ausmaachen. Dës Mikroben gi fonnt datt se staark beaflosst vu mënschleche Bedéngungen abegraff allgemeng Ges
Ganz Vibratioun hëlleft Entzündung ze reduzéieren,
dank dem Darmmikrobiom Ganz Vibratioun schéngt vill Symptomer vum Typ II Diabetis mellitus ze verbesseren, wou Glukos an destruktiv Entzündung opschéisst. DProzedur hëlleft dem Kierper Glukos als Ener
Kanner sinn immun virbereet op SARS-CoV-2
Op dmannst 30 nei Krankheeten sinn an de leschten 20 Joer opgetaucht a bedrohen elo zesummen dGesondheet vun Honnerte vu Millioune Leit. Fir vill vun dëse Krankheeten, et gëtt keng Behandlung, geheelt