PLOS ONE: Den inhiberande effekten av Pseudolaric Acid B on Gastric Cancer och Multidrug Resistance via Cox-2 /PKC-α /P-gp Pathway

Abstrakt

Sikta

För att undersöka den hämmande effekten av pseudolaric syra B på subkutana xenografter mänskliga magcancer och de underliggande molekylära mekanismer som är involverade i dess multiresistens.

metoder

Human gastriska adenokarcinom SGC7901 celler och läkemedelsresistenta SGC7901 /ADR-celler injicerades i nakna möss för att etablera en subkutan xenograftmodell. Effekterna av pseudolaric syra B med eller utan adriamycin behandling jämfördes genom bestämning av tumörstorlek och vikt. Cyklooxygenas-2, var protein kinaseC-α och P-glykoprotein uttrycksnivåer bestäms av immunohistokemi och Western blot.

Resultat

Pseudolaric syra B tryckte signifikant tumörtillväxt inducerad av SGC7901 celler och SGC7901 /ADR-celler. Kombinationen av pseudolaric syra B och den traditionella chemotherapydrog adriamycin uppvisade mer potenta hämmande inverkan på tillväxten av magcancer in vivo än behandling med antingen pseudolaric syra B eller adriamycin enbart. Proteinuttrycksnivåer av cyklooxygenas-2, var protein kinaseC-α och P-glykoprotein inhiberas genom enbart eller i kombination med adriamycin i SGC7901 /ADR-cell xenotransplantat pseudolaric syra B.

Slutsats

Pseudolaric syra B har en signifikant hämmande effekt och ett tillsatsmedel-hämmande effekt i kombination med adriamycin på tillväxten av magcancer in vivo, som vänder den multidrogresistens av gastrisk tumör till kemoterapi droger genom nedreglering av Cox-2 /PKC-α /P- gp /MDR1-signaleringsvägen

Citation:. sön Q, Li Y (2014) Den inhiberande effekten av Pseudolaric Acid B on Gastric Cancer och Multidrug Resistance via Cox-2 /PKC-α /P-gp pathway. PLoS ONE 9 (9): e107830. doi: 10.1371 /journal.pone.0107830

Redaktör: Soumitro Pal, barnsjukhuset Boston & Harvard Medical School, USA

emottagen: 15 maj, 2014; Accepteras: augusti 20, 2014; Publicerad: 24 september 2014

Copyright: © 2014 Sun, Li. Detta är en öppen tillgång artikel distribueras enligt villkoren i Creative Commons Attribution License, som tillåter obegränsad användning, distribution och reproduktion i alla medier, förutsatt den ursprungliga författaren och källan kredit

datatillgänglighet. Det författarna bekräftar att all data som ligger till grund resultaten är helt utan begränsning. Alla relevanta uppgifter inom pappers-

Finansiering:. Detta arbete stöddes av Science Program Foundation Shenyang Kommunal Science and Technology Bureau (1091136-9-02). Finansiären hade ingen roll i studiedesign, datainsamling och analys, beslut att publicera, eller beredning av manuskriptet

Konkurrerande intressen:.. Författarna har förklarat att inga konkurrerande intressen finns

Introduktion

gastric cancer är en av världens vanligaste cancer [1], och kemoterapi är en viktig strategi mot magcancer [2]. Eftersom flera kemoterapeutiska läkemedel av olika klasser används för att behandla magcancer, känsligheten hos anticancerläkemedel till magcancer minskar gradvis, och resistens mot många olika läkemedel med olika kemiska strukturer och olika verkningsmekanismer kan ske. Denna typ av motstånd kallas multidrogresistens (MDR) och signifikant minskar effektiviteten av terapi på magcancer. MDR har blivit ett stort problem för framgångsrik behandling av cancer [3]. Det har visat sig att den främsta orsaken till MDR i cancer är överuttryck av P-glykoprotein (P-gp), en produkt av mänsklig MDR1 genen. P-gp är ett ATP-beroende effluxpump som kan minska ackumulering av läkemedlet i cancerceller. Det föreslås att P-gp, en väl accepterad biomarkör av MDR, också bör betraktas som ett molekylärt mål i multiresistent cancer [4]. Nyligen genomförda studier har visat att i cancerceller med MDR är de uttrycksnivåer av cyklooxygenas-2 (Cox-2) och en isoform av protein kinaseC (PKC-α) båda uppregleras, och deras inhibering kan vända neoplastisk MDR [5] -. [10]

Pseudolaric syra B (PAB, figur 1), en diterpen syra isolerad från roten och stammen barken på trädet Pseudolarix kaempferi
Gordon (Pinaceae), används i traditionell kinesisk medicin för sitt breda spektrum av biologiska funktioner, såsom anti-svamp effekter och antifertilitetseffekter. Dessutom är dess anti-angiogena effekter har också successivt erkänts under de senaste åren [11], [12]. Nyligen genomförda studier har visat att PAB inducerar tillväxthämning, cellcykelstopp och apoptos. Dessutom PAB vänder multiresistens hos cancerceller [13], [14]. PAB undertrycker tillväxten av mag neoplastisk AGS cellinje och inducerar sin apoptos [15]. Vår tidigare forskning har visat att PAB har också en dramatisk hämmande effekt på humana magcancer SGC7901 celler in vitro [16]. Men in vitro studier av cancer effekten av PAB är sällsynta, och varken effekten av denna nya växtbaserade förening mot tumörer eller dess exakta molekylära mekanism mot MDR in vivo har utretts fullständigt.

Syftet med föreliggande studien är att utvärdera den anti-neoplastiska effekten av PAB in vivo, inklusive återföring av MDR, med användning av en xenograftmodell i nakna möss och utforska huruvida PAB underliggande molekylära mekanismen är relaterad till hämningen av MDR via Cox-2 /PKC-α /P-gp-vägen.

Material och metoder

Material

RPMI-1640 odlingsmedium och fetalt bovint serum (FBS) för cellodling köptes från Gibco BRL, Gaithersburg , MD, USA. Kanin-anti-COX-2 monoklonal antikropp, mus-anti-PKC-a och mus-anti-P-gp monoklonala antikroppar köptes från Santa Cruz Corporation, CA, USA. Sekundära antikroppar mot kanin och mus-antikroppar, streptavidin-peroxidas (SP) kit, och 3,3'-diaminobensidin (DAB) erhölls från Peking Shan Biotechnology, Kina. BCA proteinanalyssatser och SDS-PAGE gel förberedelse kit erhölls från Beyotime Institutet för bioteknik, Shanghai, Kina. PAB köptes från Liaoning institutet för läkemedelskontroll, Kina nr 201003 (renhet: > 98%). Adriamycin (ADR) erhölls från Zhejiang Hisun Pharmaceutical Co., Ltd., Kina No. 120906. Tween 80 och polyetylenglykol inköptes från Sigma Chemical, St. Louis, MO, USA.

Cellodlings

mänskliga gastric adenocarcinom SGC7901 celler odlades i den centrala laboratorium Shengjing Hospital Anslutna till Kina Medical University [16], och adriamycin-resistent SGC7901 /ADR-celler begåvad från Institute of Digestive Diseases i Xijing-sjukhuset Anslutna till fjärde militära Medical University [17]. Humana gastriska adenokarcinom SGC7901 celler och adriamycin-resistent SGC7901 /ADR-celler odlades i RPMI-1640-medium kompletterat med 10% FBS och antibiotika (100 U /ml penicillin och streptomycin) med 5% CO _{2 i en fuktad inkubator vid 37 ° C. ADR (1}

• PLOS ONE: kemoterapi eller riktad terapi som andrahandsbehandling av avancerad magsäckscancer. En systematisk genomgång och metaanalys av Publicerad Studies
• PLOS ONE: intratumör IL-17-positiva Mastceller är den största källan till IL-17 Det förutsäger överlevnad i ventrikelcancer Patients