PLOS ONE: Un polymorphisme (rs2295080) dans mTOR Promoteur Région et de son association avec le cancer gastrique chez un Chinois Population

Résumé

Contexte

En tant que composante essentielle de la PI3K /Akt /mTOR , la cible mammalienne de la rapamycine (mTOR) a été démontrée à augmenter dans les cellules et tumeurs cancéreuses gastriques. Notre recherche a exploré la relation entre polymorphisme nucléotidique simple (SNP) rs2295080 dans la région du promoteur de mTOR et le risque de cancer de l'estomac (GC).

Méthodes

Sept cent cinquante -trois (753) patients d'adénocarcinome gastrique et 854 sujets sains appariés ont été recrutés dans l'étude de l'association de cancer et 60 tissus ont été utilisés pour tester l'expression de mTOR
. régression logistique Inconditionnel a été choisie pour évaluer l'association entre le rs2295080 T > G polymorphisme et le risque GC. Nous avons ensuite examiné la fonctionnalité de cette variante génétique du promoteur par dosage de luciférase et EMSA.

Résultats

Les personnes allèle G avaient 23% une diminution du risque de GC, en comparant avec ceux portant l'allèle T (ajusté OR = 0,77, IC à 95% = 0,65 à 0,92). Cet effet protecteur de l'allèle G se distingue mieux dans le groupe masculin. Pendant ce temps, les patients porteurs de GC TG /génotype GG affichent également un niveau d'ARNm diminué de mTOR
( P
= 0,004). Dans dosage de la luciférase, l'allèle T a eu tendance à augmenter l'activité transcriptionnelle de mTOR
avec une participation d'environ 0,5 fois par rapport à G allèle. En outre, des tests EMSA a expliqué que différents allèles de rs2295080 affichent des affinités différentes pour un facteur de transcription.

Conclusion

Le Les rs2295080 promoteur de polymorphisme de mTOR était significativement associé à un risque de GC. Ce SNP, qui a influencé efficacement l'expression de mTOR
, peut être un nouveau biomarqueur de diagnostic précoce du cancer gastrique et un indicateur approprié d'utiliser un inhibiteur de mTOR pour le traitement de GC

Citation:. Xu M, Tao G, Kang M, Gao Y, Zhu H, Gong W, et al. (2013) A Polymorphism (rs2295080) dans mTOR
Promoteur Région et de son association avec le cancer gastrique dans une population chinoise. PLoS ONE 8 (3): e60080. doi: 10.1371 /journal.pone.0060080

Editeur: Paolo Peterlongo, IFOM, Fondazione Istituto di Oncologia FIRC Molecolare, Italie

Reçu le 26 Novembre 2012; Accepté 21 Février 2013; Publié le 29 Mars, 2013 |

Droit d'auteur: © 2013 Xu et al. Ceci est un article en accès libre distribué sous les termes de la licence Creative Commons Attribution, qui permet une utilisation sans restriction, la distribution et la reproduction sur tout support, à condition que l'auteur et la source originelle sont crédités

Financement:. Cette étude a été en partie soutenue par la national Natural science Foundation de Chine (81230068, 30972444, 81001274 et 81102089), le Programme clé de la Fondation des sciences naturelles de la province du Jiangsu (BK2010080), Natural science Foundation de la province du Jiangsu (BK2011773 et BK2012842), le Programme clé pour la recherche fondamentale du Jiangsu ministère provincial de l'éducation (11KJB330002 et 12KJA330002), le projet Qing-Lan du Jiangsu ministère provincial de l'éducation, et la priorité académique Programme de développement du Jiangsu établissements d'enseignement supérieur (santé publique et médecine préventive). Nous tenons également à remercier Luo Y (Nanjing Croix-Rouge Blood Center) pour son aide avec des expériences fonctionnelles. Les bailleurs de fonds ont joué aucun rôle dans la conception de l'étude, la collecte et l'analyse des données, la décision de publier, ou de la préparation du manuscrit

Intérêts concurrents:. Les auteurs ont déclaré aucun conflit d'intérêts

Introduction <. br>

le cancer gastrique (GC) est le cancer le plus fréquent dans le monde entier chez les hommes et les femmes avec 640,556 349,042 738,069 nouveaux cas et de décès liés en 2008 [1]. Compte tenu de l'efficacité thérapeutique, la résection chirurgicale peut être un traitement curatif primaire stade plus précoce des patients du GC [2]. Malheureusement, la plupart des patients atteints de cancer gastrique sont détectés à un stade avancé, période pendant laquelle la tumeur est plus résécable. En outre, la rechute après la chirurgie est un autre événement terrible pour un taux de survie à 5 ans pauvres. Considérant les patients atteints de cancer gastrique avancé ou récurrent, il ne fait aucun doute que la découverte de biomarqueurs et leur demande accompagnée d'un diagnostic traditionnel pourrait être une indication précieuse et une aide étendue à formuler la stratégie de prévention et de traitement.

mammalian target de la rapamycine (mTOR) se compose de 2.549 acides aminés disposés dans le domaine hautement conservé [3]. Structurellement, mTOR contient un domaine de liaison à la rapamycine dans sa partie centrale et un domaine kinase dans l'extrémité C-terminale [4]. En tant qu'élément clé de la voie PI3K /Akt /mTOR, mTOR est étroitement liés à des processus cellulaires de capitaux tels que la croissance cellulaire, la prolifération, le métabolisme, la migration, l'angiogenèse et l'apoptose [5] - [7]. Jusqu'à présent, mTOR de produits sont concernés en tant que deux complexes distincts (à savoir, mTORC1 et mTORC2) avec une sensibilité différente [8], [9]. mTORC1 est un complexe rapamycine-sensible, qui comprend en plus mTOR FK506-binding protein 12 kDa (FKBP12), LST8 mammifères (mLST8) et la protéine régulatrice associée de mTOR (rapace). En revanche, mTORC2 consiste à sin1, mLST8 et rapamycine insensible compagne de mTOR (rictor) [10] - [12]. Dysrégulation de mTOR
apparaît souvent dans divers types de cancers au cours de la cancérogenèse et la détérioration. Cependant, les raisons de ce phénomène aberrant sont encore encombrés avec des débats.

Un certain nombre d'études ont étudié le rôle de polymorphismes nucléotidiques simples (SNP) de mTOR de gène dans l'étiologie des cancers divers organes, y compris le cancer de l'oesophage de [13], le cancer du poumon [14], le cancer de la vessie [15], le cancer du côlon, le cancer rectal [16] et la leucémie lymphoblastique aiguë [17]. La plupart de ces SNPs localiser dans les exons ou introns avec des effets fonctionnels inconnus. Récemment, un nombre croissant d'études ont porté sur les sièges SNP dans le gène région du promoteur, qui sont prouvé à influencer la capacité de liaison avec certains facteurs de transcription (TFS) et l'impact de la transcription du gène suivant. Dans cette étude, nous avons supposé que mTOR
rs2295080 T > G polymorphisme dans la région de promoteur peut influencer la sensibilité à la GC. Pour tester cette hypothèse, nous génotypage la fréquence de mTOR
rs2295080 pour tester son importance sur le risque de GC dans notre, en milieu hospitalier, étude cas-contrôle permanent dans une population chinoise. Par conséquent, nous avons détecté les taux d'ARNm
mTOR avec différents génotypes dans les tissus de patients atteints de cancer gastrique. En outre, nous avons caractérisé en outre la fonctionnalité de cette variante génétique sur le promoteur de transcription de mTOR par dosage de luciférase et EMSA.

Sujets de l'étude des matériaux et méthodes

Cette étude comprenait 753 patients histologiquement confirmé adénocarcinome gastrique et 854 témoins sans cancer. Tous les patients ont été recrutés dans la clinique de base de recherche sur le cancer de l'Université médicale de Nanjing entre Mars 2006 et Janvier 2010. Et toutes les informations démographiques et cliniques, y compris l'âge, le sexe, la taille de la tumeur, le site de la tumeur, les types histologiques, profondeur de l'invasion, métastase ganglionnaire, métastases à distance, et le stade TNM, ont été obtenues à l'aide d'un court questionnaire et les dossiers médicaux cliniques.

les contrôles de fréquences appariés à ces cas par âge (± 5 ans) et le sexe ont été recueillies à la même période et dans les régions de relation génétique non liée à une maladie de l'estomac et de tumeurs du système digestif. Chaque participant a signé un consentement éclairé et a fait don de 5 ml de sang veineux pour l'extraction de l'ADN génomique. Le protocole de recherche a été approuvé par le comité d'examen institutionnel de l'Université médicale de Nanjing.

Extraction ADN et génotypage SNP

L'ADN génomique a été extrait à partir d'échantillons de sang comme décrit précédemment [18]. Le génotypage a été complété par TaqMan SNP Génotypage Assay utilisant le système ABI 7900HT PCR en temps réel (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) et le système de détection de séquence version 2.4 (SDS 2.4). Les séquences des amorces et des sondes sont disponibles sur demande, et les contrôles ont été contenus pour chaque plaque pour assurer l'exactitude du génotypage. Le test de génotypage a été effectué par deux personnes indépendamment de façon aveugle. Plus de 10% des échantillons ont été choisis au hasard pour confirmation, et les résultats étaient 100% concordante. Amorces et sondes ont été répertoriés dans le tableau S1.

Culture cellulaire et la construction du promoteur Reporter Plasmides

Une lignée cellulaire gastrique muqueuse épithéliale normale (GES-1) et trois lignées cellulaires de cancer gastrique différentes (BGC -823, MGC-803, et SGC-7901) ont été adoptés dans cette étude. Toutes les cellules ont été cultivées dans un milieu modifié Égale moyenne /élevée de glucose du milieu de culture Dulbecco avec 10% de FBS, 10 mM HEPES, 2 mM de L-glutamine, 1 mM de pyruvate de sodium, 100 U /ml de pénicilline et 100 pg /ml de streptomycine à 37 ° C dans une atmosphère humidifiée contenant 95% d'air et 5% de CO _{2. La plupart des réactifs ont été obtenus auprès de GIBCO (Burlington, Ontario, Canada):}

Dans les plasmides rapporteurs luciférase, l'humain promoteur des séquences de mTOR avec différents allèles pour rs2295080 T >. G polymorphisme ont été synthétisés et construit dans le vecteur pGL3-basic (Promega, Madison, WI, USA) par Generay Company (Shanghai, Chine). Tous les plasmides ont été confirmés par séquençage d'ADN. Amorces impliqués dans le test ont été répertoriés dans le tableau S2.

Transfection transitoire et dosage de luciférase

GES-1, BGC-823, MGC-803, et les cellules SGC-7901 ont été transfectées par Lipofectamine 2000 (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) avec 0,8 ug de chaque vecteur construit, soit avec l'allèle T ou G allèle. En même temps, 10 ng de pRL-SV40 par puits a également été transfecté comme témoin interne pour la correction de l'efficacité de la transfection. Avant elle, les cellules ont été ensemencées sur des plaques à 24 puits pendant une nuit pour assurer 90% -95% de confluence au moment de la transfection. Vingt-quatre heures après la transfection, l'activité luciférase a été mesurée par le Dual-Luciferase Système Reporter Assay (Promega, Madison, WI, USA) et exprimé par le rapport de Firefly luciférase Renilla activités luciférase. Toutes les cellules ont été réalisées en triple avec les mêmes conditions

mobilité électrophorétique Maj Assay (EMSA)

Le sens des séquences de sondes étaient les suivantes: T sonde rs2295080, 5'-AGGGTTCCCATCCCTGAGGAC-3 ';. rs2295080 G sonde, 5'-AGGGTTCCCAGCCCTGAGGAC-3 '. protéines nucléaires ont été extraites avec NE-PERTM nucléaire et cytoplasmique extraction Réactifs (Pierce, Rock-ford, IL, USA). Des sondes d'ADN ont été préparées avec l'étiquetage Kit biotine 3'-End ADN (Pierce, Rock-ford, IL, USA). Électrophorétique essai de décalage de mobilité (EMSA) a été réalisée avec un kit LightShift chimioluminescente EMSA (Pierce, Rock-ford, IL, USA). Les réactions de liaison ont été effectuées comme suit: les extraits nucléaires (8 pg de protéine) et le tampon 1 x liant avec 2,5% de glycerol mM MgCl 5 _{2, 50 ng /poly ul (dl-dC), 0,05% de NP-40, et 20 fmoles rs2295080 T /G rs2295080 sondes marquées à la biotine ont été mises en incubation sur de la glace pendant 30 minutes dans un volume de 20 ul. Pour les études de concurrence, des extraits nucléaires ont été incubées avec l'oligonucléotide non marqué pendant 30 minutes avant l'addition de l'oligonucléotide marqué.}

Les niveaux d'expression de mTOR de l'ARNm.

ARN total de 60 gastrique les tissus cancéreux, inclus dans 753 cas, avec différents génotypes ont été extraits en utilisant le réactif Trizol (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). L'ARNm a été mesurée par quantitative PCR en temps réel (ABI 7300) après transcription inverse. GAPDH a été utilisé comme un contrôle quantitatif interne pour chaque échantillon. Les amorces utilisées pour l'amplification étaient mTOR F: 5'-TTGCTTGAGGTGCTACTG-3 'et R: 5'-CTGACTTGACTTGGATTCTG-3'; les amorces pour GAPDH ont été F: 5'-AAGGTGAAGGTCGGAGTCAAC-3 'et R: 5'-GGGGTCATTGATGGCAACAATA-3'. quantification relative de mTOR de l'ARNm a été calculé en utilisant la méthode 2-ΔΔCt. Plier les changements ont été normalisées par rapport à GAPDH, et chaque essai a été fait en triple.

L'analyse statistique.

Hardy-Weinberg (HWE) a été évaluée par la bonté de chi-carré de test d'ajustement pour comparer les fréquences génotypiques observées avec l'attendu chez les témoins. Les associations entre les génotypes et le risque de cancer gastrique ont été estimés par des rapports de calcul de cotes (RUP) et les intervalles de confiance à 95% (IC) de régression logistique analyses avec ajustement pour l'âge et le sexe. Deux faces χ ^{2 tests de signification statistique ont été effectuées en utilisant le logiciel SAS (version 9.1.3, SAS Institute, Inc., Cary, NC, USA) et P
< 0,05 a été considérée comme statistique signification.}

Résultats

caractéristiques des sujets d'étude

les caractéristiques de ces cas et les témoins sont résumés dans le tableau 1. les cas et les témoins semblaient être appariés de façon adéquate sur âge ( P
= 0,424) et le sexe ( P
= 0,406). Parmi les cas 753, les sites tumoraux compris le cancer du cardia 295 (39,2%) et 458 non cardia cancer (60,8%). Les patients atteints de type diffus (437, 58,0%) ont montré un taux légèrement supérieur à celui de type intestinal (316, 42,0%). Sur la base de la classification TNM du Comité américain Joint sur le cancer (AJCC manuel de stadification du cancer, 6 ^{e édition) [19], 17,3%, 17,3%, 50,6%, et 14,8% des patients avaient T1, T2, T3, et T4, respectivement. Pendant ce temps, 60,6% des patients présentaient des métastases positives des ganglions lymphatiques et de 13,0% existait des métastases à distance. Selon ces caractéristiques cliniques, tous les patients ont finalement été identifiés à l'étape I, II, III et IV avec 26,8%, 21,9%, 35,3% et 16,0%, respectivement}

. Les effets globaux de rs2295080 polymorphisme sur le risque de GC

les distributions de génotypes et les fréquences des allèles de rs2295080 sont présentés dans le tableau 2. les fréquences des génotypes dans les contrôles étaient en accord avec le modèle de HWE ( P
= 0,569). Comme on le voit dans le tableau 2, les fréquences des génotypes de rs2295080 sont 64,0%, 32,7% et 3,3% pour le génotype TT, TG, et GG parmi les cas et de 58,2%, 35,7% et 6,1% chez les témoins, respectivement. La différence entre les cas et les témoins était statistiquement significative ( P = 0,008
). En outre, la fréquence de l'allèle G était significativement plus faible chez les cas que chez les témoins (19,7% contre 23,9%, P
= 0,003). En outre, le TG /GG fréquence combinée de génotype était plus faible chez les cas que chez les témoins (36,0% contre 41,8%, P
= 0,016). Lors de la prise génotype TT comme référence, nous avons constaté que les génotypes variants (TG et GG) ont été associés à une diminution du risque de GC d'une manière dose-réponse par rapport au génotype TT (OR ajusté = 0,83, IC à 95% = 0,67 à 1,02 pour TG, et 0,49, pour GG 0,30 à 0,80; P
_{tendance = 0,003). De même, nous avons également observé que les génotypes combinés TG /GG associés à une susceptibilité statistiquement significativement plus faible par rapport à la GC avec le génotype TT (0,78, 0,64 à 0,96). Pris ensemble, ces données suggèrent que le mTOR
rs2295080 G allèle peut être un allèle protecteur putatif.}

Les hommes étaient plus sensibles au cancer gastrique avec rs2295080 polymorphisme

Comme il est bien établi, l'âge et le sexe étaient des facteurs importants dans la carcinogenèse de la tumeur, y compris le cancer gastrique. Selon l'analyse de la stratification avec des facteurs d'âge et de sexe, nous avons constaté que l'association significative a été observée dans le groupe des hommes, plutôt que dans le groupe des femmes (tableau 3). Chez les hommes, portant rs2295080 allèle G était une diminution significative des facteurs de risque (OR = 0,72, IC à 95% = 0,56 à 0,93 pour TG /GG contre TT), la comparaison avec l'allèle T portant. Cependant, il n'y avait pas de différence statistique entre les sujets jeunes et vieux.

L'analyse stratifiée des associations entre rs2295080 polymorphisme et les variables cliniques de cancer gastrique

Nous avons mené l'analyse de la stratification du rs2295080 polymorphisme tous les sujets par des caractéristiques cliniques de GC. Parmi toutes les variables indépendantes, les effets protecteurs ont été principalement observées dans les sous-groupes de patients atteints de cancer du cardia gastrique (OR = 0,68, IC à 95% = de 0,52 à 0,91), type intestinal (0,73, 0,56 à 0,96), l'invasion de la profondeur de T3 (0,78, 0,60 -1.00), la lymphe positif métastases ganglionnaires (0,79, 0,62 à 1,00), métastases à distance négative (0,76, de 0,62 à 0,94), et le stade localisé (0,76, 0,59 à 0,98) (tableau 4).

effet de rs2295080 polymorphisme sur l'activité transcriptionnelle

Pour avoir un aperçu de l'effet fonctionnel biologique de rs2295080 polymorphisme sur mTOR de la transcription, GES-1, BGC823, MGC803, et les cellules SGC-7901 ont été transfectées avec différents rapport de la luciférase plasmides, y compris de type sauvage (T allèle) et le type mutate (G allèle). Comme on le voit sur la Fig. 1A, on a trouvé que l'activité de transcription de l'allèle T était supérieur à l'allèle G avec environ 1,5 fois en plus de quatre lignées cellulaires, ce qui suggère que rs2295080 allèle G a travaillé comme un défenseur de cancer gastrique en réduisant la transcription mTOR
.

Protein activité de liaison nucléaire des variantes dans rs2295080

ensuite, nous avons réalisé une expérience EMSA pour analyser les conséquences biologiques de rs2295050 polymorphisme dans les cellules SGC-7901. Une forte bande (complexe de protéine) a été déplacé lorsque les extraits nucléaires ont été incubés avec rs2295080 T sonde marquée à la biotine, tandis que la bande plus faible a été observée lorsque les extraits nucléaires ont été incubées avec de la biotine marquée avec une sonde rs2295080 G. Les bandes décalées sont significativement inhibée par un excès molaire d'un rs2295080 rs2295080 T ou G compétiteur non marqué d'une manière dose-dépendent (Fig. 1B). Ces résultats indiquent que rs2295080 G allèle pourrait diminuer l'activité de liaison de protéine nucléaire dans une certaine mesure.

Association entre mTOR
polymorphisme rs2295080 et les niveaux d'expression de mTOR d'ARNm

Soixante-trois tissus de cancer gastrique avec différents génotypes de mTOR
rs2295080 étaient disponibles dans notre étude actuelle. En raison de la basse fréquence du génotype GG, on a ajouté dans les échantillons avec TG génotype pour l'analyse. Comme on le voit sur la Fig. 2, les niveaux de mTOR de l'ARNm était beaucoup plus élevé chez les personnes ayant le génotype TT que chez ceux avec TG ou génotype GG expression (moyenne ± SEM de TT par rapport TG /GG: 12,35 ± 1,51 contre 6,17 ± 1,32, P
= 0,004).

Discussion

Dans la présente étude, nous avons démontré que l'allèle G de les rs2295080 promoteur de polymorphisme de mTOR a été associé à une manière significative diminution du risque de GC. Nous avons constaté que le changement T à G en rs2295080 modifié sensiblement l'activité transcriptionnelle de gène mTOR de via influencer la liaison d'un facteur de transcription. Nous avons également observé que rs2295080 T l'allèle de mTOR a été associée à plus mTOR
niveaux d'expression de l'ARNm in vivo
.

cible mammalienne de la rapamycine (mTOR) , également connu comme FRAP1, est un membre nécessaire de la PI3K /Akt /mTOR et central à la signalisation métabolique [20], [21]. Il peut être activé par l'insuline, les facteurs de croissance analogues à l'insuline et d'autres facteurs de croissance, et inactivé pendant la famine cellulaire. mTOR existe deux types de complexe, nommé mTORC1 et mTORC2, respectivement [22]. Le complexe mTORC1 phosphoryle son effecteur aval p70S6K, ce qui pourrait induire la dégradation du substrat du récepteur de l'insuline et d'accroître encore l'activité Akt entraîné l'insuline. Le complexe mTORC2 phosphoryle C-terminale de Akt à Ser473, qui pourrait conduire à l'ensemble de l'activation de Akt [9]. En tant que cible thérapeutique dans d'autres cancers [4], [8], [23] - [27], mTOR peut également apparu comme une cible potentielle pour le traitement du cancer gastrique, de façon spontanée. Sirolimus [28] et [29] évérolimus, les inhibiteurs de mTOR, ont été identifiés pour entraîner G1 arrêt du cycle cellulaire et ont inhibé la prolifération des lignées de cellules gastriques. Récemment, un nouveau potentiel Les rs2295080 promoteur de polymorphisme de mTOR a été décrit dans plusieurs études [30] - [32]. Cependant, des études fonctionnelles insuffisantes ont été réalisées pour évaluer le rôle de cette variante génétique dans la régulation de l'expression
mTOR. En GC, nos résultats ont fourni la preuve que rs2295080 T allèle pourrait améliorer l'activité de transcription de mTOR
dans une certaine mesure GES-1 lignée cellulaire après transfectées in vitro
. Et plus loin dosage luciférase dans trois lignées cellulaires de cancer gastrique (à savoir, BGC-823, MGC-803, et SGC-7901) a confirmé encore cet effet de rs2295080 polymorphisme. Voici les résultats de notre étude étaient en accord avec les résultats obtenus dans la lignée cellulaire de cancer du rein et de la lignée cellulaire de cancer du col [32]. En test EMSA, rs2295080 a été prédite pour localiser sur le site de liaison potentiel, dont les variantes polymorphes pourraient influencer le recrutement de facteurs de transcription (en utilisant le programme p-MATCH, qui utilise des sites TRANSFAC liaison; www.gene-regulation.com). Pris ensemble ces résultats, il est plausible que rs2295080 le polymorphisme de mTOR pourrait influencer le niveau de mTOR
et la susceptibilité individuelle à divers cancers expression.

Les rs2295080 SNP, ainsi comme un autre intron SNP rs11121704, a d'abord été rapporté par Hildebrandt et al.
à localiser dans mTOR de région promoteur potentiel [13]. Comme décrit dans le cancer de l'œsophage, rs2295080 semblait pas d'association ou d'une fonction à la survie après radiochimiothérapie et la chirurgie. Mais jusqu'à présent, plusieurs études ont identifié l'effet de ce polymorphisme dans mTOR
pour le risque de cancer [30] - [32], qui considère rs2295080 T allèle comme un facteur de risque. Dans l'étude actuelle, l'association entre rs2295080 allèle T et le risque GC était compatible avec les résultats de trois études précédentes [30] - [32]. En outre, nos résultats ont également suggéré que ce polymorphisme pourrait être un point crucial biologique dans le développement de la GC. En raison de différentes populations et différents mécanismes parmi occurrence, le développement et la survie, nous avons spéculé les différences d'origine ethnique et distinctions mécanistiques pourraient expliquer ces discordances.

Un autre résultat roman vient de l'association entre les sexes et mTOR
rs2295080 polymorphisme dans une analyse stratifiée. Ce polymorphisme rs2295080 a révélé plus forte signification chez les hommes que les femmes. En outre, Hartgrink et al
. (2009) a rapporté le rapport des hommes aux femmes infectées par le cancer de l'estomac est d'environ 2h01 par an [33]. De plus amples explications pour les connexions de ces résultats doit être recherchée, et différentes sortes d'hormones expression chez les hommes et les femmes à devenir la meilleure considération rationnelle. Dans une étude sur le cancer du sein, Galoian et al.
A donné les données prolinerich polypeptide-1 exerce un effet anti-prolifératif via l'inhibition de l'activité kinase mTOR dans l'ER-négatif MDA-231, mais aucun effet inhibiteur existe dans luminal T47 cellule -D qui fonctionne comme une lignée cellulaire ER-positif [34]. Toutefois, pour les études de l'androgène, on croyait que l'androgène peut stimuler l'activité de mTOR dans les cellules cancéreuses de la prostate PTEN déficiente. Une étude récente sur le récepteur des androgènes a amélioré le rôle des androgènes dans la mise régulation de l'activité de mTORC2 [35]. Il est probable que l'androgène, au lieu d'œstrogènes, peut augmenter le mTOR
expression; androgènes peut conduire à la forte incidence du cancer gastrique chez les hommes et la forte signification de mTOR
rs2295080 dans le groupe des hommes dans notre étude.

Certaines limites de notre étude actuelle convient de relever ce qui suit . Tout d'abord, rs2295080 était pas le seul polymorphisme significativement existant sur mTOR
, et l'importance des SNP combinant a été négligé dans notre étude. Deuxièmement, comme des facteurs cruciaux dans la carcinogenèse gastrique, le manque de Helicobacter pylori informations
, fumant des informations, et de boire l'information était également insuffisante dans notre étude, il est fâcheux pour nous pour une enquête plus approfondie des effets de ce polymorphisme. En outre, en raison de la petite taille de l'échantillon par rapport à notre étude, aucun résultat significatif semblait être trouvé, en particulier les couches (sous-groupes d'âge, sous-groupe des femmes, et d'autres sous-groupes clinico-pathologique) des analyses stratifiées (tableau S3 et S4). En outre une étude plus large avec plus d'informations devait vérifier nos conclusions.

En conclusion, notre étude a illuminé les mTOR
rs2295080 localisation dans la région promotrice du gène mTOR de était significativement associée à un risque de cancer gastrique dans une population chinoise.

Informations complémentaires
Tableau S1.
Amorces et sondes utilisées pour le génotypage
doi:. 10.1371 /journal.pone.0060080.s001
(DOC)
Tableau S2.
Amorces pour la construction de plasmides
doi: 10.1371. /journal.pone.0060080.s002
(DOC)
Tableau S3.
Interaction analyse de rs2295080 le polymorphisme de mTOR et l'âge ou le statut de sexe dans l'étude cas-témoins
doi:. 10.1371 /journal.pone.0060080.s003
(DOC)
Table S4.
Interaction analyse de rs2295080 le polymorphisme de mTOR et l'âge /sexe ou caractères cliniques dans l'étude de cas seulement
doi:. 10.1371 /journal.pone.0060080.s004
(DOC)

Remerciements

Nous tenons à remercier Luo Y (Nanjing Croix-Rouge Blood Center) pour son aide avec des expériences fonctionnelles.

• PLOS ONE: Association entre glutathion S-transférase T1 Null Génotype et cancer gastrique risque: une méta-analyse de 48 études
• PLOS ONE: Association entre les polymorphismes dans EGFR Gene exons, mode de vie et le risque de cancer gastrique avec des différences entre les sexes dans les Chinois Han sujets