PLoS ONE: a polimorfizmas (rs2295080) į mTOR Rėmėjas regione ir jų asociacijos su skrandžio vėžio Kinijos gyventojų

Anotacija

Fonas

Kaip imperatyvaus dalis PI3K /Akt /mTOR keliu, žinduolių rapamicino taikinio (mTOR) buvo įrodyta, kad padidinti skrandžio vėžio ląstelių ir navikų. Mūsų tyrimas ištirti ryšį tarp pavienių nukleotidų polimorfizmo (SNP) rs2295080 santykius, mTOR
rengėjas regionas ir skrandžio vėžio (GC). Rizikos

Metodai

septyni šimtai penkiasdešimt -three (753) skrandžio adenokarcinoma sirgusių pacientų ir 854 sveikų buvo įdarbinti į vėžio asociacijos tyrimo ir 60 audiniai buvo naudojami išbandyti mTOR
išraiška. Besąlyginė logistinė regresija buvo pasirinktas siekiant įvertinti tarp rs2295080 T >asociaciją; G polimorfizmo ir GC rizika. tada mes išnagrinėjo šį promotoriaus genetinį variantą funkcionalumą liuciferazės tyrimo ir EMSA.

Rezultatai

Asmenys su G alelio turėjo 23% riziką GC sumažėjo, lyginant su tais, atliekant T alelio (pakoreguota AR = 0,77, 95% PI = 0,65-0,92). Tai apsauginis poveikis G alelio išsiskyrė geriau vyrų grupėje. Tuo tarpu, GC pacientai, vežantys, TG /GG genotipą pat rodomas sumažėjęs iRNR lygį mTOR pervežimas ( P
= 0,004). Be liuciferazės testo T alelis linkę padidinti transkripcijos veiklą mTOR
su apytiksliu 0,5 kartų daugiau nei G alelio. Be to, EMSA testai paaiškino, kad skirtingi aleliai iš rs2295080 rodomas skirtingas pažiūras tam tikru transkripcijos faktorius.

Išvada

mTOR
rengėjas polimorfizmas rs2295080 buvo reikšmingai susijęs su GC rizika. Tai SNP, kuri veiksmingai įtakojo išraišką mTOR
, gali būti naujas biologinis anksti diagnozuoti skrandžio vėžį ir tinkamu rodikliu naudojant mTOR inhibitorių gydyti GC

nurodomoji dalis:. Xu M, Tao G, Kang M, Gao Y, Zhu H, Gong W, ir kt. (2013) polimorfizmas (rs2295080) į mTOR
Rėmėjas regionui ir jo asociacijos su skrandžio vėžio į Kinijos gyventojų. PLoS ONE 8 (3): e60080. Doi: 10,1371 /journal.pone.0060080

redaktorius Paolo Peterlongo, IFOM, Fondazione Istituto FIRC di Oncologia Molecolare, Italija

Įstojo: Lapkričio 26, 2012 m Priėmė: Vasario 21, 2013 m Paskelbta: Kovo 29, 2013

Visos teisės saugomos: © 2013 Xu et al., Tai atviros prieigos straipsnis platinama pagal Creative Commons Attribution licencija, kuri leidžia nevaržomai naudotis, paskirstymo ir dauginimąsi bet kokioje laikmenoje sąlygomis, su sąlyga, kad pirmasis autorius ir šaltinis įskaitomos

Finansavimas:. Šis tyrimas buvo iš dalies remia Nacionalinis gamtos mokslo fondo Kinijos (81230068, 30972444, 81001274 ir 81102089), raktas programa gamtos mokslo fondo Dziangsi provincijos (BK2010080), Gamtos mokslų fondo Dziangsi provincijos (BK2011773 ir BK2012842), raktas programa Svarbiausieji tyrimų Dziangsi provincijos švietimo departamento (11KJB330002 ir 12KJA330002), Čing-Lan Project Dziangsi provincijos švietimo departamento ir prioriteto akademinę programą plėtros Dziangsi aukštojo mokslo institucijų (visuomenės sveikatos ir profilaktinės medicinos). Mes taip pat norėtume padėkoti Luo Y (Nanjing Raudonojo Kryžiaus Kraujo centras) už savo pagalbą funkcinių eksperimentams. Į finansuotojai neturėjo vaidmenį studijų dizainas, duomenų rinkimo ir analizės, sprendimų skelbti, ar ruošiant rankraštį

konkuruojančių interesų. Autoriai pareiškė jokių interesų konfliktų

Įvadas <. Br>

Skrandžio vėžys (GC) yra dažniausiai pasireiškiantis vėžys visame pasaulyje tarp vyrų su 640,556 ir moterų 349,042 naujų atvejų ir 738,069 mirčių 2008 m [1]. Atsižvelgiant į terapinį efektyvumą, chirurginis gali būti pirminis ją gydyti ankstesniame etape GC pacientų [2]. Deja, dauguma skrandžio vėžiu pacientams nustatytas pažengęs, kurių metu navikas yra Neoperuojamo daugiau. Be to, atkryčio po operacijos yra dar vienas baisus įvykis prasta 5 metų išgyvenamumas. Atsižvelgiant į tai, kad pacientams, sergantiems progresavusia arba pasikartojančių skrandžio vėžiu, tai nėra abejonių, kad atradimas biologinius žymenis ir jų taikymas kartu su tradiciniais diagnozė gali būti vertinga nuoroda ir platus padės suformuluoti prevencijos ir gydymo strategiją.

Žinduolių tikslas rapamicino (mTOR) susideda iš 2,549 amino rūgščių išdėstyti labai konservatyvios domeno [3]. Struktūriškai mTOR yra rapamicino surišančio domeno centrinėje dalyje ir kinazės domeno C-galo [4]. Kaip pagrindinis komponentas PI3K /Akt /mTOR keliu, mTOR glaudžiai susijusi su kapitalo korinio procesų, pavyzdžiui, ląstelių augimo, dauginimosi, medžiagų apykaitos, migracijos, angiogenezę bei apoptozės [5] - [7]. Iki šiol, mTOR
produktai yra susiję su dviem skirtingais kompleksų (t.y. mTORC1 ir mTORC2) skirtingo jautrumo [8], [9]. mTORC1 yra rapamicinas jautrus kompleksas, kuris apima mTOR plius FK506 surišančio baltymo 12 kDa (FKBP12), žinduolių LST8 (mLST8) ir reguliavimo susijusių baltymų mTOR (raptor). Priešingai, mTORC2 sudaro su Sin1, mLST8 ir rapamicino-nejautri draugės mTOR (rictor) [10] - [12]. Reguliacijos sutrikimas ir mTOR
dažnai pasirodo įvairių rūšių vėžio per kancerogenezėje ir jo būklės blogėjimo. Tačiau šio nukrypusiu nuo normos reiškinio priežastys vis dar perpildoma su diskusijomis.

Daugybė tyrimų jau tyrė vieno nukleotido polimorfizmas vaidmenį (SNP) ir mTOR
genas į vėžio etiologijos į įvairių organų, įskaitant stemplės vėžio [13], plaučių vėžio [14], šlapimo pūslės vėžio [15], gaubtinės žarnos vėžio, tiesiosios žarnos vėžio [16], ir ūminės limfoblastinės leukemijos [17]. Dauguma šių VNP-ai įsikurti egzonų ar intronai nežinomo funkcinius padarinius. Neseniai, vis daugiau tyrimų orientuota į SNP baldą geno promotoriaus regione, kuris yra įrodyta, turi įtakos privalomą galimybę su kai transkripcijos faktorių (TFS) ir poveikis toks genų transkripciją. Šiame tyrime mes iškėlė hipotezę, kad mTOR
rs2295080 T > G polimorfizmo per promotoriaus regione gali įtakoti imlumą GC. Norėdami patikrinti šią hipotezę, mes genotipą į mTOR dažnį
rs2295080 išbandyti savo svarbos GC rizikos mūsų nuolat, ligoninės pagrindu, atvejo-kontrolės tyrimo, Kinijos gyventojų. Taigi, mes nustatėme, mTOR
iRNR lygius su skirtingais genotipų audiniuose skrandžio vėžiu sergantiems pacientams. Be to, mes dar labiau būdingas šio genetinį variantą funkcionalumą mTOR
rengėjas transkripcija iki liuciferazės tyrimo ir EMSA.

Medžiagos ir metodai

Studijų dalykai

Šis tyrimas apėmė 753 pacientai, sergantys histologiškai patvirtinta skrandžio adenokarcinoma ir 854 vėžiu nemokamai kontrolę. Visi pacientai buvo įdarbinti iš vėžio Clinical Research bazės Nanjing medicinos universiteto nuo 2006 m kovo mėn 2010 m sausio ir visi demografinės ir klinikinės informacijos, įskaitant amžių, lytį, naviko dydžio, naviko svetainėje, histologinių tipų, gylis invazijos, limfmazgių metastazių, tolima metastazės ir TNM stadija, buvo gauti naudojant trumpą klausimyną ir klinikinių medicininius įrašus.

dažnio atitikimo kontrolė šiose bylose pagal amžių (± 5 metai) ir lytį buvo renkami tuo pačiu laikotarpiu ir regionuose nesusiję genetinis ryšys su skrandžio ligos ir virškinimo sistemos navikai. Kiekvienas dalyvis pasirašė rašytinį informuoto sutikimo ir paaukoti 5 ml veninio kraujo genomo DNR ekstrakcijai. Tyrimas protokolas buvo patvirtintas institucinio vertinimo valdybos Nanjing medicinos universitete.

DNR išskyrimo ir SNP genotipo

Genomo DNR buvo išskirta iš kraujo mėginiai, kaip aprašyta anksčiau [18]. Genotipo buvo baigtas TaqMan SNP genotipo nustatymo tyrimai naudojant ABI 7900HT realaus laiko PGR sistema (taikoma BIOSYSTEMS Foster City, CA, JAV) ir sekos atpažinimas sistemos versija 2.4 (SDL 2.4). Į gruntus ir zondai sekos buvo galima užsisakyti ir kontrolė buvo pateikta dėl kiekvienos plokštelės užtikrinti tikslumą genotipo. Genotipa- tyrimas buvo atliekamas pagal dviejų asmenų nepriklausomai akliname būdu. Daugiau nei 10% mėginių buvo atsitiktinės atrankos būdu, siekiant patvirtinti, ir rezultatai buvo 100% Współbrzmieniowy. Gruntai ir zondai buvo išvardytos S1 lentelėje.

Mobilusis Kultūra ir statybos Rėmėjas Žurnalistė plazmidės

Vienas normalus skrandžio gleivinės epitelio ląstelių linija (GES-1) ir tris skirtingus skrandžio vėžio ląstelių linijas (bgc -823, MSV-803, ir Tarybos generalinis sekretoriatas-7901) buvo priimta į šiame tyrime. Visos ląstelės buvo auginamos Dulbecco modifikuota Egale Medium /Aukštas gliukozės mitybinės terpės su 10% FBS, 10 mM HEPES, 2 mM L-glutamino, 1 mM piruvato natrio, 100 U /ml penicilino, ir 100 mikrogramų /ml streptomicino 37 ° C drėgnoje atmosferoje, kuriame 95% oro ir 5% CO _{2. Dauguma reagentų buvo gauti iš GIBCO (Burlington, Ontario, Kanada)}

liuciferazės reporteris plazmidžių, žmogaus mTOR
promotorinės sekas su skirtingų alelių už rs2295080 T >. G polimorfizmo susintetinti ir pagamintos į pGL3 bazinis vektorius (Promega Madison, WI, JAV) Generay Company (Šanchajus, Kinija). Visi plazmidės buvo patvirtinta DNR sekos. Gruntai dalyvaujantys bandymą buvo įtrauktos į S2 lentelėje.

Laikina transfekcijq ir liuciferazės Analizės

GES-1, BGC-823, MSV-803, ir Tarybos generalinis sekretoriatas-7901 ląstelės buvo pernešta iki Lipofectamine 2000 (Invitrogen, Karlovi Varai, CA, JAV) su 0,8 mikrogramų kiekvieno pastatyto vektoriumi, arba su T alelio arba G alelio. Tuo pačiu metu, 10 ng PRL-SV40 už šulinio taip pat buvo pernešta kaip vidaus kontrolės ištaisyti transfekcijq efektyvumą. Prieš tai, ląstelės buvo pasėjamos dėl 24-duobučių lėkštelėse per naktį, siekiant užtikrinti 90% -95% santakoje, transfekciją metu. Dvidešimt keturias valandas po transfekciją, liuciferazės aktyvumas buvo matuojamas Dvejopo liuciferazės reporterio testą sistemos (PROMEGA, Madison, WI, JAV) ir išreikštas Firefly liuciferazės santykis Renilla liuciferazės veiklą. Visos ląstelės buvo atliekamas tris kartus su pačiomis sąlygomis

elektroforeziniai Mobilumas "Shift Analizės (EJSA)

jausmas zondas sekas buvo taip: rs2295080 T zondas, 5'-AGGGTTCCCATCCCTGAGGAC-3."; rs2295080 G zondas, 5'-AGGGTTCCCAGCCCTGAGGAC-3 '. Branduoliniai baltymai buvo ekstrahuojamas NE-PERTM branduolinės ir citoplazmos Ekstrahavimas REAGENTAI (Pierce, Rokas-Ford, IL, JAV). DNR zondai buvo parengta su Biotinas 3'-End DNR Žymėjimas Kit (Pierce, akmens Ford IL, JAV). Elektroforezės mobilumas perėjimas analizė (EMSA) buvo atliktas su LightShift chemiliuminescencijos EMSA Kit (Pierce, Rokas-Ford, IL, JAV). Įrišimo reakcijos buvo atliekamas taip: branduolinių ekstraktai (8 mikrogramai baltymo) ir 1 × privalomas buferio su 2,5% glicerolio, 5 mm MgCl _{2, 50 ng /mikrol poli (di-DC), 0,05% NP-40, ir 20 fmol Biotinas žymėto rs2295080 T /rs2295080 G zondai buvo inkubuojami ant ledo 30 min 20 pL tūrio. Dėl konkurencijos tyrimai, branduolinių ekstraktai prieš pažymėtą oligonukleotido to buvo inkubuojami su nežymėtu oligonukleotido 30 min.}

Expression lygiai mTOR
mRNR.

Iš viso RNR iš 60 skrandžio vėžio audiniuose, įtraukti į 753 atvejų, su skirtingų genotipų buvo paimti naudojant Trizol reagento (INVITROGEN, Carlsbad, CA, JAV). MRNR buvo matuojamas kiekybiniais realaus laiko PGR (ABI 7300) po atvirkštinės transkripcijos. GAPDH buvo naudojamas kaip vidaus kiekybinės kiekvienam mėginiui. , Naudojami mTOR amplifikacijos pradmenys buvo F: 5'-TTGCTTGAGGTGCTACTG-3 'ir R: 5'-CTGACTTGACTTGGATTCTG-3'; už GAPDH pradmenys buvo F: 5'-AAGGTGAAGGTCGGAGTCAAC-3 'ir R: 5'-GGGGTCATTGATGGCAACAATA-3 ". Santykinis kiekybinis mTOR
iRNR buvo apskaičiuojamas naudojant 2-ΔΔCt metodą. Sulenkite pokyčiai buvo normalizuotas atžvilgiu GAPDH, ir kiekvienas tyrimas buvo atliekamas tris kartus.

Statistinė analizė.

Hardy-Weinberg pusiausvyra (HWE) buvo įvertintas chi kvadrato gerumą tinka bandymo palyginti pastebėtiems genotipas dažnius su tikimasi tarp kontrolės. Asociacijos tarp genotipų ir rizikos skrandžio vėžio buvo įvertinta apskaičiuojant šansų santykį (AR) ir 95% pasikliautinasis intervalas (CIS) iš logistinės regresijos analizę su koregavimo amžių ir lytį. Dvipusis χ ^{2 testai statistinio reikšmingumo buvo atlikta naudojant SAS programinę įrangą (versija 9.1.3; SAS Institute, Inc., Cary, NC, JAV) ir P
< 0,05 buvo laikomas statistinis reikšmė.}

rezultatai

charakteristikos studijų dalykų

pažymėtus charakteristikos šių atvejų ir kontrolės apibendrinti 1 lentelėje atvejai ir kontrolės pasirodė būti tinkamai pritaikomas amžius ( P
= 0,424) ir lytį ( P
= 0,406). Tarp 753 atvejais naviko svetainės įtrauktos 295 CARDIA vėžys (39,2%) ir 458 ne CARDIA vėžys (60,8%). Pacientai, sergantys difuzinio tipo (437, 58,0%) parodė šiek tiek didesnis santykis, nei žarnyno tipo (316, 42,0%). Remiantis TNM klasifikaciją Amerikos jungtinio komiteto vėžys (AJCC vėžio sustojimo vadovą, 6 ^{-asis leidimas) [19] 17,3%, 17,3%, 50,6% ir 14,8% pacientų T1, T2, T3, ir T4, atitinkamai. Tuo tarpu, 60,6% pacientų pateikti teigiamą limfmazgių metastazių ir 13,0% egzistavo tolimoje metastazes. Pagal šiuos klinikinių charakteristikų, visi ligoniai buvo pagaliau nustatė, kad I etapas, II, III ir IV su 26,8%, 21,9%, 35,3% ir 16,0%, atitinkamai.}

Bendras poveikio rs2295080 polimorfizmo apie GC
Rizikos

genotipas paskirstymus ir alelių dažniai rs2295080 pateikiami 2 lentelėje genotipas dažnių kontrolės nebuvo susitarusi su HWE modelio ( p
= 0.569). Kaip parodyta 2 lentelėje, genotipas dažniai rs2295080 buvo 64,0%, 32,7%, o 3,3% TT, TG, ir VS genotipų tarp atvejų ir 58,2%, 35,7%, o 6,1% tarp kontrolės, atitinkamai. Skirtumas tarp atvejų ir kontrolės buvo statistiškai reikšmingas (, p =
0,008). Be to, G alelis dažnis buvo žymiai mažesnis tarp atvejų nei kontrolės (19,7%, palyginti su 23,9% P
= 0,003). Be to, kartu, TG /GG genotipą dažnis buvo mažesnis tarp atvejų nei kontrolės (36,0%, palyginti su 41,8% P
= 0,016). Priimdama TT genotipą kaip nuoroda, mes nustatėme, kad variantas genotipai (TG ir GG) buvo susijęs su sumažėjusiu rizika GC dozės-atsako būdu lyginant su TT genotipą (Pritaikytas arba = 0,83, 95% PI = 0.67-1.02 TG, ir 0,49, 0.30-0.80 už GG P
_{tendencija = 0,003). Be to, mes taip pat pažymėjo, kad kartu, TG /GG genotipus susijusius su statistiškai reikšmingai rečiau jautrumu GC palyginti su TT genotipą (0,78, 0.64-0.96). Kartu paėmus, šie duomenys rodo, kad mTOR
rs2295080 G alelis gali būti spėjamas apsauginis alelis.}

Vyrai buvo labiau linkusios į skrandžio vėžio su rs2295080 polimorfizmo

Kadangi tai yra nusistovėjęs, amžius ir lytis, buvo svarbūs veiksniai naviko kancerogenezėje įskaitant skrandžio vėžio. Pagal stratifikacijos analizės nuo amžiaus ir lyties veiksnių, mes nustatėme, kad reikšmingas ryšys buvo pastebėtas vyrų grupė, o ne moterų grupės (3 lentelė). Vyrams, vežančių rs2295080 G alelio buvo reikšmingai sumažėjo rizikos faktorių (arba = 0,72, 95% PI = 0.56-0.93 TG /GG, lyginant su TT), lyginant su nešiojimo T alelio. Tačiau nebuvo statistinis skirtumas tarp jaunų ir senų dalykų.

sluoksninė analizė tarp rs2295080 polimorfizmo ir klinikinių kintamųjų skrandžio vėžio
asociacijų

atliekami stratifikacijos analizės rs2295080 polimorfizmo į Visi dalykai pagal klinikinius požymius GC. Tarp visų nepriklausomų kintamųjų, apsauginiai poveikis dažniausiai stebėtas pogrupių pacientams, sergantiems CARDIA skrandžio vėžio (OR = 0,68, 95% PI = 0.52-0.91), žarnyno tipo (0,73, 0,56-0,96), T3 gylio invazijos (0,78, 0,60 -1,00), teigiama limfmazgių metastazės (0,79, 0,62-1,00), neigiamas tolima metastazės (0,76, 0,62-0,94) ir vietinis etapas (0,76, 0,59-0,98) (4 lentelė).

poveikis rs2295080 polimorfizmas ant Transkripcinis Aktyvumas

Jei įgyti pažvelgti į biologinės funkcinio efekto rs2295080 polimorfizmo apie mTOR
transkripcija, GES-1, BGC823, MGC803 ir Tarybos generalinis sekretoriatas-7901 ląstelės buvo pernešta su skirtingų liuciferazė ataskaita plazmidės, įskaitant laukinio tipo (T alelio) ir paslaugos keitimo tipo (G alelio). Kaip parodyta Fig. 1A, mes nustatėme, kad transkripcijos veikla T alelio buvo didesnis nei G alelio kartu su maždaug 1,5 karto pirmiau keturių ląstelių linijų, tai rodo, kad rs2295080 G alelis dirbo kaip skrandžio vėžio vartus mažinant transkripcijos mTOR
.

Branduolinė jungimasis su baltymais veikla variantai rs2295080

Be to, mes atliko EMSA eksperimentą analizuoti biologinių pasekmių rs2295050 polimorfizmo į SGC-7901 ląstelių. Vieningas ir stiprus juosta (baltymo kompleksas) buvo perkeltas, kai branduolinės ekstraktai buvo inkubuojami biotinu žymėto rs2295080 T zondo, o buvo pastebėtas silpnesnis juostos, kai branduolinės ekstraktai buvo inkubuojami su biotinu žymėto su rs2295080 G zondo. Pasislinkę juostos buvo smarkiai slopino moliniu viršijantys nežymėtu rs2295080 T arba rs2295080 G konkurentą nuo dozės priklauso būdu (1b pav.). Šie rezultatai parodė, kad rs2295080 G alelis gali sumažinti branduolinės jungimosi su baltymais veiklą tam tikru mastu.

asociacija tarp mTOR
rs2295080 polimorfizmas ir išraiškos lygiai mTOR
iRNR

"Šešiasdešimt trys skrandžio vėžio audiniai, įvairių genotipų mTOR
rs2295080 buvo rasti mūsų šio tyrimo. Dėl to, kad žemo dažnio GG genotipo, mes pridėtinės jį į mėginių su TG genotipo analizei. Kaip parodyta Fig. 2, ekspresijos lygis mTOR
iRNR buvo žymiai didesnis asmenims su TT genotipą nei tie, su TG ar GG genotipą (vidurkis ± SEM TT prieš TG /GG: 12,35 ± 1,51, lyginant su 6.17 ± 1.32, p
= 0,004).

Diskusijos

Šiame tyrime mes parodė, kad G alelis, mTOR
rengėjas polimorfizmas rs2295080 buvo susijęs su žymiai sumažėjo rizika GC. Mes nustatėme, kad T G pokytis rs2295080 esmės pakeistos transkripcijos veiklą mTOR
genas per įtakojantys kai transkripcijos faktorius privalomi. Mes taip pat pastebėjo, kad mTOR
rs2295080 T alelis buvo susijęs su aukštojo mTOR
iRNR raiška lygiai in vivo
.

Žinduolių rapamicino taikinio (mTOR) , taip pat žinomas kaip FRAP1, yra viena būtina narys PI3K /Akt /mTOR keliu ir pagrindinis medžiagų apykaitos signalizacijos [20], [21]. Jis gali būti aktyvuojamas insulino, insulino tipo augimo faktorių ir kitų augimo faktorių, ir inaktyvuota per korinio badu. mTOR egzistuoja dviejų skirtingų rūšių kompleksas, pavadintas mTORC1 ir mTORC2, atitinkamai [22]. MTORC1 kompleksas fosforilina savo pasroviui effecter p70S6k, kuris gali sukelti insulino receptorių substrato degradaciją ir toliau didinti insulino varoma Akt veiklą. MTORC2 kompleksas fosforilina C-galas Akt ne ser473, kuris gali sukelti visą aktyvavimo Akt [9]. Kaip terapinio tikslo kitais vėžio [4], [8], [23] - [27], mTOR gali taip pat atsirado kaip potencialų taikinį gydymo skrandžio vėžio, spontaniškai. Sirolimuzas [28] ir everolimuzo [29] mTOR inhibitorių, buvo nustatyta, kad sukelti G1 ląstelės ciklo suėmimo ir slopina skrandžio ląstelių linijų proliferaciją. Neseniai romanas potencialas mTOR
rengėjas polimorfizmas rs2295080 buvo aprašyta keliuose tyrimuose [30] - [32]. Tačiau buvo atliktas nepakankami funkciniai tyrimai, siekiant įvertinti šį genetinį variantą reguliuojant mTOR
išraišką vaidmenį. GC, mūsų išvados pateikė įrodymų, kad rs2295080 T alelio galėtų padidinti transkripcijos veiklą, mTOR
tam tikru mastu GES-1 ląstelių linijos po perkeltų in vitro
. Ir toliau liuciferazė tyrimas trijose skrandžio vėžio ląstelių linijų (t.y. BGC-823, MSV-803, ir Tarybos generalinis sekretoriatas-7901) dar kartą patvirtino šį rs2295080 polimorfizmo įtaką. Šie mūsų Šio tyrimo rezultatai buvo pagal inkstų vėžio ląstelių linijos ir gimdos kaklelio vėžio ląstelių linijos [32] rezultatais. EJSA tyrimą, rs2295080 buvo prognozuojama, kad rasti apie galimą privalomą svetainėje, kurios polimorfinės variantai gali turėti įtakos transkripcijos veiksnių recruit (naudojant P-Match programą, kuri naudoja privalomas svetainių TRANSFAC; www.gene-regulation.com). Į šiuos rezultatus kartu, tai tikėtina, kad mTOR
rs2295080 polimorfizmas gali įtakoti išraiška lygį mTOR
ir individualaus jautrumo įvairių vėžio.

SNP rs2295080, taip pat kaip kitą intronui SNP rs11121704, pirmą kartą pranešė Hildebrandt et al.
įsikurti mTOR
potencialas rengėjas regionas [13]. Kaip aprašyta stemplės vėžio, rs2295080 atrodė jokios asociacijos ar funkciją išlikimo po chemoradioterapija ir operacijos. Tačiau iki šiol, keli tyrimai nustatė, kad šio polimorfizmo poveikį, mTOR
vėžio rizika [30] - [32], kurie visi laikomi rs2295080 T alelio kaip rizikos veiksnys. Atsižvelgiant į dabartinę tyrimo duomenimis, tarp rs2295080 T alelio ir GC rizikos asociacija atitiko ankstesnių trijų tyrimų [30] rezultatus - [32]. Be to, mūsų rezultatai taip pat rodo, kad šis polimorfizmas gali būti biologinis esmė į GC vystymosi. Dėl skirtingų populiacijų ir įvairių mechanizmų tarp atsiradimo, plėtros ir išgyventi, mes spėliojo, kad etniškumas skirtumus ir mechaninius skirtumus gali paaiškinti šiuos disharmonija.

Dar vienas romanas rezultatas ateina iš tarp lyčių asociacijos ir mTOR
rs2295080 polimorfizmas yra sluoksninė analizė. Tai rs2295080 polimorfizmas atskleidė daugiau stiprią reikšmę vyrų nei moterų. Be to, Hartgrink ir kt
. (2009) pranešė apie vyrų užkrėstų skrandžio vėžio moterų santykis yra apie 2:01 per metus [33]. reikia toliau paaiškinimas jungčių šiuos rezultatus reikia ieškoti, o skirtingų rūšių hormonų raiškos vyrų ir moterų tapti geriausia visų dėmesys, racionaliai. Be krūties vėžio tyrime Galoian , et al.,
Davė duomenis, prolinerich polipeptidas-1 daro proliferaciją poveikį per slopina mTOR kinazės aktyvumą ER neigiama MDA-231, bet ne slopinantis poveikis egzistuoja luminal T47 -D ląstelė, kuri atlieka kaip ER teigiami ląstelių linijos [34]. Tačiau studijoms androgenų, buvo tikima, kad androgenų gali skatinti mTOR veiklą PTEN trūkumas prostatos vėžinių ląstelių. Neseniai atliktas tyrimas apie androgenų receptorių pagerino androgenų vaidmenį iki reguliavimo mTORC2 veiklą [35]. Tikėtina, kad androgenų, o estrogenų, gali padidinti mTOR
išraišką; androgenų gali sukelti didelis sergamumas skrandžio vėžiu vyrai ir stiprios reikšmę mTOR
rs2295080 Vyrų grupėje mūsų tyrime.

Kai mūsų Šio tyrimo apribojimai turėtų būti pažymėti taip , Pirma, rs2295080 buvo ne tik polimorfizmas žymiai egzistuojantiems mTOR
ir derinant VNP-ai svarba buvo apleisti mūsų tyrime. Antra, kaip svarbiausių veiksnių skrandžio kancerogenezėje, The trūksta iš Helicobacter pylori
informacija, rūkymo informaciją ir geriamojo informacija taip pat buvo nepakankamas mūsų tyrime, tai blogo mums tolimesniam tyrimui šio polimorfizmo poveikį. Be to, dėl santykinio mažos imties mūsų tyrimo duomenimis, jokių reikšmingų rezultatų atrodė galima rasti ypač sluoksnių (amžiaus pogrupius, moterų pogrupyje ir kitų Klinikos-patologinis pogrupius) ir susisluoksniavusi analizių (lentelė S3 ir S4). Daugiau didesnis tyrimas su daugiau informacijos, buvo tikimasi, kad patikrinti mūsų išvadas.

Taigi, mūsų tyrimo apšviestas mTOR
rs2295080 nukreipiantys į promotoriaus regione mTOR
genas buvo gerokai susijęs su rizika skrandžio vėžio Kinijos gyventojų.

Pagalbinė informacija
S1 lentelėje.
gruntai ir zondai naudojamas genotipo
Doi:. 10,1371 /journal.pone.0060080.s001
(DOC)
S2 lentelėje.
gruntai statybai plazmidžių
Doi:. 10,1371 /journal.pone.0060080.s002
(DOC)
lentelė S3.
Sąveika analizė mTOR
rs2295080 polimorfizmas, ir amžių ar lytį būklės atvejo-kontrolės tyrimo pervežimas doi: 10.1371. /journal.pone.0060080.s003 pervežimas (DOC) pervežimas lentelėje S4 ".
Sąveika analizes, mTOR
rs2295080 polimorfizmas ir amžiaus /lyties ar klinikiniai simbolių ir tik mažosios studijos
Doi:. 10,1371 /journal.pone.0060080.s004
(DOC)

Padėka

Mes norėtume padėkoti Luo Y (Nanjing Raudonojo Kryžiaus Kraujo centras) už savo pagalbą funkcinių eksperimentams.

• PLoS ONE: Asociacija tarp glutationas S-transferazės T1 Null genotipą ir skrandžio vėžio rizika: metaanalizė 48 Studies
• PLoS ONE: Asociacija tarp polimorfizmai EGFR Gene egzonų, gyvenimo būdo ir rizikos skrandžio vėžio su lyčių skirtumai Kinijos Han Subjects