PLoS One: Enhanced kifejezése Hosszú nem-kódoló RNS Hotair társul fejlesztési Gyomor Cancer

absztrakt katalógusa

A hosszú, nem kódoló RNS Hotair leírták, hogy rossz prognózisú biomarker a különböző rosszindulatú daganatok. Azonban keveset tudunk a szövetség Hotair a gyomorrák. Megvizsgáltuk a kifejezés a Hotair 68 gyomorrák minták kvantitatív valós idejű RT-PCR-rel és elemeztük annak összefüggést a klinikai paraméterek. A funkcionális szerepe Hotair vizsgáltuk olyan humán gyomor rákos sejtvonalak fokozott vagy elfojtott Hotair kifejezés. A rögzítési -függetien növekedés értékelték lágyagarban vizsgálattal. A megnövekedett vagy elnyomott Hotair expresszáló gyomorrák sejteket injektáltunk a farokvénába, vagy hasüregébe immunhiányos egerekbe, hogy megvizsgálja a hatását ez a molekula a metasztázis és peritoneális terjesztés. A kifejezés a Hotair szignifikánsan magasabb volt a rákos elváltozások, mint a szomszédos, nem rákos szövetekben a humán gyomor rák. A diffúz típusú gyomorrák, a Magas-Hotair csoport (Hotair /GAPDH > 1) szignifikánsan nagyobb vénás invázió, gyakori a nyirokcsomó metasztázisok és összességében alacsonyabb túlélési arány, mint a Low-Hotair csoport (Hotair /GAPDH < 1). Colony kialakulása a lágy agar fokozta egy Hotair-függő módon. Hotair expresszáló MKN74 kialakított több máj metasztázis a kontrollhoz képest, amikor injektáltunk a farokvénába az egerek. Emellett csökkent expressziója Hotair Kato III elnyomott peritoneális terjesztését. Ezek az eredmények azt sugallják, hogy Hotair kulcsfontosságú szerepet játszik a fejlesztés a gyomorrák.

bevezető hivatkozás: Endo H, Shiroki T, Nakagawa T, Yokoyama M, Tamai K, Yamanami H, et al. (2013) Fokozott kifejezése Hosszú nem-kódoló RNS Hotair társul a gyomorrák kialakulásával. PLoS ONE 8 (10): e77070. doi: 10,1371 /journal.pone.0077070 katalógusa

Szerkesztő: Dajun Deng, Peking University Cancer Kórház és Intézet, Kína katalógusa

Beérkezett: június 10, 2013; Elfogadva: szeptember 5, 2013; Megjelent: október 10, 2013 katalógusa

Copyright: © 2013 Endo és mtsai. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: Ez a munka támogatott JSPS KAKENHI támogatás numbers24791480 és 24591022 (http://www.jsps.go.jp/j-grantsinaid/index.html), és a támogatás-in-támogatás Hiromi Medical Research Foundation (http: //www.smtb .de /személyes /megbízási /irányítási /public /example /pdf /természetes 06a.pdf) és a Daiwa Securities Health Foundation (http://www.daiwa-grp.jp/dsh/grant/outline.html). A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

a megbetegedési és elhalálozási gyomorrák drasztikusan csökkent az elmúlt 50 évben a legtöbb területen a világ, de még mindig a második vezető oka a rák összefüggő halálesetek világszerte [1]. Annak ellenére, hogy legújabb előrelépések diagnosztikai technikák, mint például a nagyító endoszkópia keskeny sávban képalkotás (NBI) [2], és a kezelés, beleértve a megcélzott terápia [3,4], még mindig nagy számban gyomor rákos betegek rossz prognózissal. A patogén mechanizmus hozzájárul az agresszív biológiai funkció ebben a rák továbbra is tisztázni kell.

A genom szekvenálása projektek során kiderült, hogy az emberi genom tartalmaz kevesebb mint 2% fehérjét kódoló gén, és több mint 90% -a a genom transzkripciója nem-kódoló RNS-ek (ncRNA) [5-7]. Ezek ncRNAs sorolják két csoportra függően nukleotid méretű. Mikro RNS-ek körülbelül 18-25 nukleotid hosszúságú, míg a hosszú nem-kódoló RNS áll, több mint 200 nukleotid. Hotair egy hosszú, nem kódoló RNS-t azonosítottak egy egyedi talajművelést tömb a HOXC locus. Hotair kimutatták, hogy trimethylate Histon H3 lizin-27 HOXD lókusz a Polycomb elnyomó komplex 2 (PRC2) és gátolja HOXD génexpresszió, található egy másik kromoszómán [8]. Hotair elősegíti metasztázis kölcsönhatás révén PRC2 elfojtani transzkripciójának többszörös metasztázis szupresszor gének emlőrákban [9]. A fokozott expressziójának Hotair társul invazivitását, metasztázis és rossz prognózissal különféle rákok, például a mell-, vastagbél-, hasnyálmirigy- és a tüdőrák [9-12]. Azonban keveset tudunk arról, expresszióját és /vagy funkcióját Hotair a gyomor karcinóma fejlődését. A jelenlegi vizsgálat során azt vizsgáltuk, hogy bevonása Hotair humán gyomorrák fejlődés és megvizsgálták annak kifejezése lenne korrelál az agresszív viselkedés a gyomorrák. Katalógusa

Anyagok és módszerek katalógusa

A szöveteket katalógusa

68 gyomorrák szöveteket nyert átesett betegek műtét a Miyagi Cancer Center (Natori, Japán), 2007 és 2011 között Minden mintát azonnal lefagyasztottuk után hamarosan reszekció folyékony nitrogénben, és -80 ° C-on vagy rögzített 10% -os pufferolt formalinnal és paraffinba ágyaztuk. A gyomor rákos elváltozást szövettanilag besorolt ​​intesztinális típusú (n = 36), a diffúz típusú (n = 32) besorolása szerint a World Health Organization és a korábbi jelentések [13]. Nem beteg kemoterápia és sugárkezelés a műtét előtt. A statisztikai analízis, teljes túlélés definíció szerint bármely okból bekövetkező halál, és Kaplan-Meier túlélési görbéket használtuk.

sejtvonalak

A gyomorrák-sejtvonalak MKN74 (intesztinális típusú) [14] és a KATO III (diffúz típusú) [15] kaptuk RIKEN Bioresource Center (Tsukuba, Japán). Mindkét sejtvonalat RPMI-1640 (Gibco /Life technologies Co., CA), amely 10% inaktivált FBS-sel (EuroClone, Milano, Olaszország), 100 egység /ml penicillinnel és 100 ng /ml sztreptomicinnel (Gibco /Life technologies Co. , CA), és tenyésztjük, nedvesített, 5% CO _{2 inkubátorban 37 ° C-on.}

RNS-preparálás, reverz transzkripció és a kvantitatív valós idejű PCR-

teljes RNS-t fagyasztott mintákat és sejtvonalak extraháltuk ISOGENE (Nippon Gene, Tokió, Japán) alkalmazásával a gyártó protokollja. cDNS-eket az összes mintát szintetizáltunk 1,0 jig teljes RNS által PrimeScript® 1. szál cDNS Synthesis Kit (Takara Bio, Siga, Japán), a gyártó utasításai szerint. A kifejezés a Hotair mennyiségileg által LightCycler Brilliant SYBR Green QRT-PCR kit (Roche Applied Science, IN) a gyártó utasításai szerint a specifikus láncindító szerint az előző tanulmány [9]. A szint Hotair expresszió mindegyik mintában normalizáltuk az adott GAPDH expressziós szintet. A specificitás az egyes PCR-reakcióban igazoltuk olvadási görbe analízissel.

Hotair expressziós retrovirális vektor

Emberi Hotair cDNS-t (addgene, Cambridge, MA) amplifikáltuk PCR-rel és került be a pBabe Puro vektor (pBabe -HOTAIR). Rekombináns retrovírus-ben előállított platina-A (Plat-A által nyújtott, Prof. Kitamura) csomagoló sejtvonalak a korábban leírtak szerint [16]. Röviden, Plat-A sejteket transzfektáltunk pBabe -HOTAIR vagy pBabe-Puro Vector (EV). Fugene-6 (Roche Applied Science) és Opti-MEM-I (Gibco /Life technologies Co.) adtunk a gyártó utasításai szerint. Negyvennyolc órával a transzfekciót követően, a retrovírus-tartalmú felülúszót összegyűjtjük és átengedjük egy 0,45 um-es szűrőn. MKN74 sejteket fertőztünk a rekombináns retrovírusok, majd kiválasztott puromicin.

Az RNS-interferencia katalógusa

knockdown Hotair Kato III szoktuk Knockout ™ RNAi Systems (Clontech Laboratories, Inc., Mountain View, CA), a gyártó utasításai szerint. Röviden, terveztünk négy shRNS szekvenciát célzott Hotair amint az 1. táblázatban látható illesztés után a komplementer shRNS oligonukleotidokat, mi ligáltuk az összeillesztett be pSIREN vektorba (shHOTAIR). Ezután mi transzfektált Plat-A sejtek shHOTAIR vagy pSIREN Vector (EV), és a fertőzött KATO III, a rekombináns retrovírusok és kiválasztott puromicin. A sejteket transzdukált Az SH-HOTAIR2 és -3 vektor választottuk további vizsgálat céljából. Minden vitrto katalógusa kísérletet végeztünk háromszor, háromszor ismétlik és reprezentatív adatok jelennek meg.
shRNS katalógusa Sequence
shHOTAIR-1sensegatccgaacgggagtacagagagattttcaagagaaatctctctgtactcccgttcttttttganti-senseaattcaaaaaagaacgggagtacagagagatttctcttgaaaatctctctgtactcccgttcgshHOTAIR-2 sensegatccgccacatgaacgcccagagattttcaagagaaatctctgggcgttcatgtggttttttg anti-senseaattcaaaaaaccacatgaacgcccagagatttctcttgaaaatctctgggcgttcatgtggcgshHOTAIR-3 sensegatccgtaacaagaccagagagctgttttcaagagaaacagctctctggtcttgttattttttganti-senseaattcaaaaaataacaagaccagagagctgtttctcttgaaaacagctctctggtcttgttacgshHOTAIR-4sensegatccaattcttaaattgggctggttcaagagaccagcccaatttaagaattttttttganti-senseaattcaaaaaaaattcttaaattgggctggtctcttgaaccagcccaatttaagaattgTable 1. Sequences of shRNS betétek a shHOTAIR kifejező vektor.
CSV letöltése CSV

sejtnövekedési vizsgálati eljárás

1 x 10 ^{4 sejtet oltottunk lyukanként 96 lyukú lemezeken a normális sejtnövekedés média. A 3- (4,5-dimetil-tiazol-2-il) -2,5-difenil-bromid, sárga tetrazol (MTT) vizsgálatot végeztünk sejtproliferáció Kit I (GE Healthcare Life Sciences, NJ) alkalmazásával a gyártó protokollja. Mért abszorbancia 570 nm-en VERSAmax (Molecular Devices, CA) végeztük becslésére MTT-formazán termelés után 24, 48 és 72 óra inkubálás után. Az index értékeltük 48 és 72 órával normalizálódott, hogy, hogy a 24 órán át.}

Lágy agar telepképző assay

Lágy agar assay épültek 6 lyukú lemezeken. Az alapréteg mindegyik jól állt 1 ml a végső koncentrációja 1 x média (RPMI-1640 + 10% inaktivált FBS) és 0,6% -os alacsony olvadáspontú agaróz. A lemezeket hűtve szobahőmérsékleten, amíg szilárd anyag, ekkor egy 1 ml-es növekedési agart fázist jégre öntöttük, amely 1 x 10 ^{4 sejteket szuszpendáltuk 1 x média és 0,3% -os alacsony olvadáspontú agaróz. A lemezeket ismét hűtve szobahőmérsékleten, amíg a növekedés réteg megdermedt. Egy további 1 ml 1 x média nélkül agaróz adunk a tetején a növekedés réteg a 0. napon, és ismét a 14. napon a növekedés. A sejteket hagytuk növekedni 37 ° C-on 4 hétig teljes telepeket megszámoltuk. Katalógusa}

Állatok katalógusa

6-hetes nőstény NOD /SCID Shi--IL2Rγ ^{null (NOG ) egereket vásároltunk a Central Institute for Experimental Állatok (CIEA, a Kawasaki, Japán), és ebben a kísérletben használt. Ezeket hagyunk akklimatizálódni, egy héttel a kísérletek. Az állatokat egy tiszta szobában az állat gondozás létesítmény Miyagi Cancer Research Center és rendszeresen szabványos hőmérséklet, páratartalom és időzített fényviszonyokat, és feltéve, egértáplálék /víz ad libitum.}

farokvénába assay a rákos sejtek metasztázis

hatásának értékelésére Hotair expresszió vér útján metasztázis, injektáltunk 1,0 x 10 ^{5 sejtek HOTAIR- (n = 9) vagy EV-t expresszáló (n = 9) MKN74 0,2 ml PBS-t a egerek farokvénájába. Az egereket általában jeleit betegség hetente a hossza a kísérlet, és leöljük 8 hét injekció beadása után. A tüdő, a máj, a vese, a mellékvese mirigyek, és lépét az egerek kivágtuk és vizsgáltuk makroszkopikusan körülbelül jelenlétében metasztázist.}

Peritoneális metasztázis

1,0 x 10 ^{6 sejtek shHOTAIR- (n = 5), vagy EV-t expresszáló (n = 5) KATO III oltottunk be 0,2 ml PBS-t a hashártya az egerek, hogy értékelje a hatása Hotair expresszió peritoneális áttétek. Az egereket általában jeleit betegség hetente a hossza a kísérlet, és leöljük 8 hét injekció beadása után. A jelenléte a csomók és az ascites a hasüregben vizsgáltuk.}

Szövet- és Immunhisztokémia

A kimetszett szöveteket rögzítettük 10% -os pufferolt formaiinban 24 órán át, majd vágjuk és paraffinba ágyaztuk a mikroszkópos vizsgálat. A mintákat vágjuk 4-um vastag metszeteket megfestettük hematoxilin és eozin (H &E). Megvizsgáltuk a jelenlétét a mikro-metasztázis, hogy nem ismerték fel makroszkóposan. Az elismert daganatok tovább vizsgáltuk immunhisztokémiai primer antitest emberi citokeratinnal (Anti Cytokeratin Low, DC10 /5D3, Nichirei Co, Tokyo, Japán), hogy megbizonyosodjon arról, hogy azok származnak injektált humán gyomorrák sejt. Miután deparaffinization, a szöveti metszeteket metanolban 0,3% hidrogén-peroxidot desztillált vízben 20 percig, hogy blokkolja az endogén peroxidáz aktivitást. Antigén-visszanyerés végeztük nyomás főzés 95 ° C-on 5 percig 10 mM citrát pufferrel, pH = 6,0, majd hagytuk lehűlni szobahőmérsékleten 30 percig. Az endogén biotin vagy avidin-kötőhelyeket blokkoltuk szekvenciális inkubálás 30 percig. A metszeteket egy éjszakán át inkubáltuk 4 ° C-on a primer antitest a fent leírt és reagáltatunk a második antitesttel. Egy avidin-biotin-peroxidáz komplex kimutatására használják a második ellenanyag. A festési tettük láthatóvá diaminobenzidin (DAB). A metszeteket hematoxilinnel ellenfestettük, mosott és szárított gradiens alkalmazásával etanol xilol.

Statisztikai analízis

A korrelációját Hotair kifejezés a beteg klinikopatológiai változókat és az arány a metasztázis az injektált egereket vizsgáltak a chi-négyzet próba alapján. A statisztikai szignifikancia közötti különbségek 2 csoport segítségével határoztuk meg Wilcoxon-teszt és a P katalógusa érték (katalógusa

< 0,05) tekintettük statisztikailag szignifikánsnak. Statisztikai különbség 3 csoport segítségével értékelték Steel Dwass teszt vagy Bonferroni elemzés és P katalógusa érték (< 0,017) tekintettük statisztikailag szignifikáns összesített túlélési valószínűsége elemeztük a Kaplan-Meier módszer és értékeli log-rank vizsgálat, és a P katalógusa érték (< 0,05) tekintettük statisztikailag szignifikánsnak. Minden statisztikai analízist végeztük Ekuseru-Toukei 2012 (Social Survey Research Information Co., Ltd., Tokyo, Japán). A P katalógusa érték (< 0,05) tekintettük szignifikánsnak. Katalógusa

Etikai katalógusa

Az intézményi Review Board Miyagi Cancer Center (MCC) jóváhagyta ezt vizsgálati protokollt, és írásos beleegyezését adta minden beteg (engedély száma: MCC-22-30). A protokoll az állatkísérletek hagyta jóvá az MCC Animal Care and Use Committee (engedély száma: MCC-AE-2011-12). Katalógusa

Eredmények katalógusa

A Hotair kifejezés az emberi gyomorrák minták

a Hotair expressziós szintje a rákos és nem rákos szomszédos szöveteket a gyomorrákos betegek vizsgáltunk qRT-PCR és normalizált a GAPDH expressziós szintet. Az átlagos expressziós szintje Hotair volt 4,952 ± 6,462 és 3,804 ± 6,721 (Hotair /GAPDH ± szórás) karcinóma és nem rákos elváltozások, ill. Az expressziós szintje Hotair szignifikánsan magasabbak voltak carcinoma elváltozások, mint azok a nem rákos elváltozások ( P katalógusa = 0,019, 1A). Katalógusa

közötti társulás kifejezése Hotair és klinikopatológiai faktorok a humán gyomor rákos

Az emberi gyomorrák szöveteket kórszövettanilag soroltuk intesztinális (n = 36) és a diffúz típusú (n = 32). Az emberi gyomor rákos szövet tovább osztályozták szerint Hotair expressziós szintjét a Magas-Hotair csoport (Hotair /GAPDH > 1,0) és alacsony Hotair csoport (Hotair /GAPDH < 1,0) (az 1B és C). A Szövetsége Hotair kifejezés a klinikopatológiai jellemzői a bél és a diffúz típusú gyomorrák táblázat foglalja össze a 2. és 3., ill. A bél típusú gyomorrák, szignifikáns korrelációt találtunk Hotair expresszió és a klinikopatológiai eredményeket (2. táblázat). Ezen kívül nincs lényegi kapcsolatban láttak között Hotair expresszió és a teljes túlélés, bár a magas Hotair csoport inkább azt mutatják, túlélés szempontjából, mint az Alacsony-Hotair csoport (2A ábra). Másrészt, szignifikáns összefüggést találtunk az Hotair expresszió és a nyirokcsomó áttétek (P = 0,043), a vénás beszűrődés ( P katalógusa = 0,0083), és rövid a teljes túlélés ( P = katalógusa 0,018), a diffúz típusú gyomorrák (3. táblázat és 2B ábra). Azonban nem volt összefüggés a színpad és Hotair kifejezést. Matton Hotair alacsony katalógusa Hotair magas katalógusa P katalógusa érték katalógusa Age73.07 ± 9.1870.87 ± 10.650.53Gender0.63Male1016female37T0.87T1, T2610T3, T4713N0.26N078N1, N2 , N3615Ly0.68ly069ly1, ly2, ly3714v0.19v089v1, v2, v3514Stage0.501,27153,4680.50Table 2. Az egyesület Hotair kifejezés klinikopatológiai jellemzők bél típusú gyomorrák.
CSV letöltése CSV katalógusa Hotair alacsony
Hotair magas katalógusa P katalógusa érték katalógusa Age59.250 ± 10.7566.35 ± 10.160.07Gender0.71male812female48T0.87T1, T212T3, T41118N0.043*N086N1,N2,N3414ly0.40ly067ly1,ly2,ly3613v0.0083*v0119v1,v2,v3111Stage0.311,2783,4512Table 3. Az egyesület Hotair kifejezés klinikopatológiai jellemzők diffúz típusú gyomorrák.
CSV letöltése CSV

Generation Hotair felfelé és a lefelé szabályozni sejtek és korreláció a sejtek életképességét katalógusa

Annak felmérése funkcionális szerepe Hotair gyomorrákban fejlesztés generáltunk stabilan expresszáló Hotair MKN74 sejteket (MKN-Hotair) és stabilan shHOTAIR kifejező KATO III sejtek (KATO-shHOTAIR). QRT-PCR analízis kimutatta, hogy MKN-Hotair sejtek expresszálták szintet Hotair körülbelül 10-szeres, hogy az EV expresszáló (MKN-EV) vagy szülői MKN74 sejteket és hogy a kifejezés ezen molekula csökkent 30-70% Kato-shHOTAIR sejtek míg a EV transzdukálódnak (KATO-EV) vagy szülői KATO III (KATO-EV) sejtek (3A). Az eredmények a MTT assay kimutatták, hogy sem up-rendelet, sem down-regulációja Hotair érintett gyomorrák sejtek proliferációját (ábra S1).

Lágy agar telepképző assay

tisztázása funkcióit Hotair a rögzítéstől független növekedését a gyomor rákos sejtek, mi hasznosított lágy agar vizsgálat. MKN-Hotair kialakult sejtek nagyobb számú telep mint MKN-EV sejtek ( P katalógusa = 0,009, 4A). Összhangban van ez a megállapítás, KATO-shHOTAIR sejtek szignifikánsan kevesebb telepek mint KATO-EV sejtek (4B ábra). Ezen túlmenően, a gyomor rákos sejtek hasonló Hotair expressziós szint (MKN-Hotair és shHOTAIR-3, 3B, ábra), amely hasonló számok a kolóniák, jelezve, hogy rögzítéstől független növekedését gyomorrák sejtek szabályozni Hotair-függő módon.

Hotair kifejezés és gyomorrák-metasztázis és peritoneális terjesztése katalógusa

Mivel Hotair fokozta a rögzítéstől független, de nem lehorgonyzástól függő növekedését gyomorrák sejtek feltételeztük, hogy Hotair hozzájárulhat a távoli áttét és /vagy peritoneális terjesztése helyett közvetlen invázió a szomszédos szervek. Ennek a kérdésnek mi foglalkoztatott farokvénába vizsgálattal és a peritoneális injekció sejtek vizsgálni, hogy Hotair kifejezés elősegíti a vér -borne metasztázis és peritoneális terjesztése, ill. Ahogy az várható volt, MKN-Hotair sejtek gyakran mutatott májáttétek ( P katalógusa = 0,01), mint a MKN-EV sejteket. Ezen túlmenően, a számát és méretét a metasztatikus májtumorok szignifikáns volt nagyobb a MKN-Hotair sejtek, mint a MKN-EV sejteket ( P
= 0,03 és P
= 0,019, illetve, ábrák 5A és B). Érdekes módon, az egyik egér injektáltunk MKN-Hotair megmutatta metasztázis a vese és a mellékvese mellett a májban, míg MKN-EV sejtek metasztázisos daganatok alakult csak a májban. Következetesen, peritoneális terjesztését jelentősen csökkent (1/5, P katalógusa = 0,009), amikor Hotair inaktiváltuk Kato III sejtekben, míg az összes kontroll sejtek kialakult peritoneális terjesztés (5/5) (6A és B). Az áttétes tumorokat szövettani vizsgálattal igazolt, és mutattak intenzív pozitív festéssel az emberi citokeratinnal (5c és 6C). Katalógusa

Vita katalógusa

Ebben a tanulmányban azt vizsgáltuk kifejezése Hotair a gyomorrák és megvizsgálja való összefüggéseit klinikopatológiai funkciók, többek között a betegek prognózisát. Eredményeink egyértelműen kimutatta, fokozott expressziójának Hotair a rákos szövetekben, mint a nem-rákos szövetekben a gyomor, és hogy a magas szintű expressziója e molekula társult nyirokcsomó-metasztázis, vénás invázió és szegény túlélés a diffúz típusú gyomorrák. Ezek az eredmények összhangban vannak azzal a nemrégiben készült tanulmány azt mutatja, hogy up-regulációját Hotair található gyomorrák, összehasonlítva a normál szövetek és összefüggésben van a tumor stádiuma és a nyirokcsomó-metasztázis [17]. Emellett Hotair expresszáló gyomorrák sejteknél javítására rögzítéstől független sejtnövekedést in vitro katalógusa és az áttétek a májba in vivo katalógusa, míg a csökkentett kifejezése Hotair gyomorrákban sejtek eredményezett csökkent kötött növekedés és a peritoneális terjesztését, ami arra utal, hogy Hotair kulcsfontosságú szerepet játszik a gyomor daganatos progresszió.

magasabb szintű expresszióját Hotair kimutatható volt a rákos sejtekben, mint a megfelelő nem-daganatos sejtek különböző rákokban, beleértve a mell, vastagbél, máj, hasnyálmirigy és orrgarat rák [9-11,18-20]. Ezekben a rákos megbetegedések, Hotair is kimutatták, hogy részt metasztázis és /vagy rossz prognózissal. Továbbá, a magas szintű Hotair expresszió korrelált rövid betegségmentes túlélés a tüdőrák [12]. Ezért a jelen a megállapítások összhangban vannak a korábbi tanulmányok azt jelzi, hogy a kifejezés a Hotair részt vesz a fokozott agresszivitás különböző típusú karcinóma sejtekben. Másrészt, nem találtunk negatív prognosztikai hatását Hotair a bél típusú gyomorrák, bár a magas Hotair csoport jellemzően mutatják rövidebb teljes túlélés, szemben az alacsony Hotair-csoport. Ez lehet az oka, hogy a kis betegek száma a jelenlegi vizsgálatban, mivel kényszer kifejezése Hotair egy bél gyomorrák sejtvonal (MKN74) szerzett az agresszív fenotípus in vitro katalógusa és in vivo
. További vizsgálatok nagyszámú minta mellett a kísérleti vizsgálatban más bélrendszeri gyomor rákos sejtvonalak szükség lenne a probléma kiküszöbölésére. Katalógusa

A jelenlegi vizsgálatban nem találtak összefüggést a Hotair expresszió és a sejtnövekedést gyomorrák. A mell-, a vastagbél- és a májrák, bevonása Hotair a sejtek növekedését nem sikerült kimutatni [9,10,18], míg Hotair támogatni és csökkentett sejtburjánzás hasnyálmirigyrák [11] és a tüdőrák [12], ill. Továbbá, nem volt szignifikáns különbség a szubkután tumor növekedését NOG egerek között Hotair expresszáló és kontroll sejtek a jelenlegi vizsgálatban (adatokat nem mutatjuk). A fenti eredmények alapján, akkor valószínű, hogy a kapcsolat a Hotair expresszió és a sejtproliferáció függ a rák típusától. Ezzel szemben a rögzítéstől független növekedését gyomorrák-sejtek egyértelműen fokozott egy Hotair-függő módon. Ezen túlmenően, Hotair kifejezés okozott több áttétek a májban és más szervekben, és egy hibája Hotair elnyomta a peritoneális terjesztését gyomor karcinóma sejteket. Ezek a megfigyelések, azzal a ténnyel együtt, hogy a Hotair expresszió hozzájárul a metasztázis különböző karcinómákban [9-12,18], azt sugallják, hogy Hotair főként részt vesz a metasztatikus folyamatban, nem pedig a növekedés a primer tumor.

Végeredményben fokozott Hotair kifejezést a diffúz típusú gyomorrák járt a vénás invázió és a rossz prognózisú függetlenül T tényező, és a kényszerű kifejezése Hotair gyomorrákban sejtek támogatni rögzítéstől független sejtnövekedést in vitro katalógusa és áttétek a májban in vivo katalógusa. Ezek az eredmények azt jelzik, hogy Hotair valószínűleg részt vesz a fejlesztés a gyomorrák és is lehet egy terápiás célpont a kezelés a gyomorrák.

alátámasztó információk
ábra S1.
Az egyesület sejtek szaporodását Hotair kifejezést. Az eredmények a MTT assay 72 órával értékeltük normalizáltuk, hogy 24 órán át. Nem összefüggést találtak a Hotair expresszió és gyomorrák sejtek szaporodását. Katalógusa doi: 10,1371 /journal.pone.0077070.s001 katalógusa (TIF) hotelben

Köszönetnyilvánítás katalógusa

Köszönjük professzor Kitamura (The University of Tokyo, Tokió, Japán), amely platina-A sejtekben. katalógusa

• PLoS One: Natural History of rosszindulatú csontbetegség gyomorrákban: Végeredményeket multicentrikus csontáttét felmérés
• PLoS One: aktiválása STAT3 humán gyomorkarcinóma sejtek keresztül interleukin (IL) -6-Type citokin jelző korrelációban van a klinikai következményei