Stomach Health > Mo. Gesondheet >  > Gastric Cancer > Gastric Cancer

PLOS NËMMEN: Geographie Expression vun Long Non-Coding RNS HOTAIR Ass Associéierten mat der Entwécklung vun Gastric Cancer

Wat VerfÜgung

Déi laang Net-coding RNS HOTAIR gouf confirméiert aarmséileg prognostic uweist an enger Rei vu gin malignant erhéijen. Allerdéngs ass, wéineg iwwert d'Associatioun vun HOTAIR mat gastric Kriibs bekannt. Mir iwwerpréift den Ausdrock vun HOTAIR zu 68 gastric Kriibs Echantillon benotzt grouss real-Zäit RT-Hinnen alleguer an analyséiert seng Korrelatioun mat de Medeziner Parameteren. Déi funktionell Roll vun HOTAIR war vun generéieren Mënsch gastric Kriibs Zell Linnen mat méi oder opgeléist HOTAIR Ausdrock iwwerpréift. Hafen -independent Wuesstem war vun mëll Agar assay évaluéieren. Déi grouss oder opgeléist HOTAIR gastric Kriibs Zellen ausdrécken sech an de Schwanz verfeelt oder peritoneal Discours vun immunodeficient Mais heijen den Effet vun dëser Protein op Metastasen an peritoneal Publikatioun ze iwwerpréifen. Den Ausdrock vun HOTAIR war wiesentlech méi héich zu Kriibs lesions wéi zu bascht Net-kriibserreegend Stoffer zu Mënsch gastric Cancers. An der diffusen Typ vun gastric Kriibs, d'High-HOTAIR Grupp (HOTAIR /GAPDH > 1) zougedréckt a vill méi eng Schwächt Invasioun, heefeg lymph Node Investitiounen an engem nidderegen globale Iwwerliewe Taux am Verglach zu der Low-HOTAIR Grupp (HOTAIR /GAPDH &Si besteet; 1). Kolonie Équipe op der mëller Agar gouf zu engem HOTAIR-ofhängeg Manéier gestäerkt. HOTAIR-ausdrécken MKN74 geformt méi Liewer Metastasen Verglach ze kontrolléieren wann se an de Schwäif Sënn vun Mais heijen goufen. Zousätzlech, reduzéiert Ausdrock vun HOTAIR vun Kato III peritoneal Weiderleede opgeléist. Dës Resultater hindeit, datt HOTAIR enger Jarnéier Roll an der Entwécklung vun gastric Kriibs spillt VerfÜgung

Fro:. Endo H, Shiroki T, Nakagawa T, Yokoyama M, Tamai K, Yamanami H, et al. (2013) Geographie Expression vun Long Non-Coding RNS HOTAIR Ass mat der Entwécklung vun Gastric Cancer Associéierten. PLoS NËMMEN 8 (10): e77070. Doi: 10.1371 /journal.pone.0077070 VerfÜgung

Redakter: Dajun Deng, Korea University Cancer Hospital an Institut, China VerfÜgung

Arnaque: 10 Juni, 2013; Akzeptéiert: 5 September 2013; Publizéiert: 10 Oktober 2013 VerfÜgung

Copyright: © 2013 Endo et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung

Funding:. Dës Aarbecht war vun JSPS KAKENHI heimat numbers24791480 an 24591022 (http://www.jsps.go.jp/j-grantsinaid/index.html), an domat-zu-Hëllef vu Hiromi Medical Research Foundation (http ënnerstëtzt: //www.smtb .jp /perséinlech /entrustment /Direktioun /ëffentlech /Beispill /pdf /natierlech-06a.pdf) an Daiwa Securities Gesondheet Foundation (http://www.daiwa-grp.jp/dsh/grant/outline.html). D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung

Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung

Aféierung VerfÜgung

d'Heefegkeet a veruerteelt vun gastric Kriibs hun an de meeschte Beräicher vun der Welt dramatesch an de leschte 50 Joer erofgaangen ass, mä et bleift nach ëmmer déi zweet Virwaat Ursaach vum Kriibs-Zesummenhang Doudesfäll weltwäit [1]. Trotz leschte Schrett an diagnostic Techniken, wéi Lupp endoscopy mat schmuele Band Imaging (NBI) [2], an am Traitement dorënner Zil- Therapie [3,4], ginn et nach ëmmer grouss Zuel vun gastric Kriibs Patienten mat aarmséileg hätt. D'pathogenic Mechanismus fir déi aggressiv biologescher Fonktioun vun dëser Kriibs Contributioun bleift Keess ze ginn. VerfÜgung

Den Daniel Nepgen sequencing Projeten verroden, datt de Mënsch Nepgen vun manner wéi 2% FAQ coding Genen aus ass, a méi wéi 90% vun der Nepgen ass ausserdeem als Net-coding RNAs (ncRNA) [5-7]. Dës ncRNAs sinn an zwou Gruppen séiert jee op der Nukleotid Gréisst. Mikro RNAs sinn ongeféier 18-25 nucleotides zu Längt, iwwerdeems laang Net-coding RNS vu méi wéi 200 nucleotides besteet. HOTAIR ass eng laang Net-coding RNS datt aus engem Mooss tilling Partie vun der HOXC nët identifizéiert huet. HOTAIR huet dës Distanz zu histon H3 lysin-27 vun HOXD nët mat der polycomb repressive komplex 2 (PRC2) an inhibit HOXD Gentherapie Ausdrock, läit op enger anerer chromosome [8] trimethylate. HOTAIR ënnerstëtzt Metastasen duerch dÉxistenz PRC2 der Reunioun vu multiple Metastasen suppressor Genen vun Broscht Kriibs ze géint [9]. Déi verstäerkte Ausdrock vun HOTAIR ass mat invasiveness, Metastasen an aarme hätt an enger Rei vu Cancers wéi Broscht, Colon, pancreatic an haett Kriibs [9-12] assoziéiert. Allerdéngs ass, wéineg iwwert den Ausdrock an /oder d'Funktioun vun HOTAIR zu gastric carcinoma Entwécklung bekannt. An der aktueller studéieren, ze propagéieren mir d'Bedeelegung vun HOTAIR zu mënschlech Entwécklung gastric Kriibs an iwwerpréift ob hiren Ausdrock mat der aggressive Verhalen vun gastric Kriibs vergläichen wier. VerfÜgung

spontan a Methode VerfÜgung

Stoffer VerfÜgung

68 gastric Kriibs Stoffer sech vu Patiente kritt deen Agrëff bei Haptstad Cancer Center (Natori, Japan) mécht, tëscht 2007 an 2011. All Echantillon direkt geschwënn gefruer waren am flëssegem Stéckstoff der resection an gespäichert bei -80 ° C oder fix an 10% gefiermt formalin an paraffin Faarwen Ënnerbewosstsinn. D'gastric Cancers sech histopathologically als intestinal Typ klassifizéiert (n = 36), diffusen Typ (n = 32) laut der Klassifikatioun vun der Weltgesondheetsorganisatioun a virdrun Rapporten [13]. Nee Patienten scho Chimiotherapie an radiotherapy virum Agrëff. Fir statistesch Analyse, war vum Doud globale Iwwerliewe vun all Ursaach definéiert, an Kaplan-Meier Iwwerliewe Kéiren benotzt goufen. VerfÜgung

Zell Linnen VerfÜgung

D'gastric Kriibs Zell Linnen MKN74 (intestinal Typ) [14] a Kato III (diffusen Typ) [15] goufen aus RIKEN BioResource Center (Tsukuba, Japan) kritt. Béid Zell Strecken an RPMI-1640 (Gibco /Life Technologien Co., CA) mat 10% inactivated FBS (EuroClone, Milano, Italien) mat 100 Unitéiten /ML penicillin an 100 μg /ML streptomycin (Gibco /Life Technologien Co. haten CA,) an cultured zu engem humidified 5% CO 2 incubator bei 37 ° C. VerfÜgung

RNS Virbereedung, ëmgedréint Transkriptiouns, a grouss real-Zäit Hinnen alleguer VerfÜgung

Total RNS aus gefruerenem Echantillon an Zell Linnen war vun ISOGENE (NIPPON Gene, Tokyo, Japan) ofgebaut laut den Hiersteller d'Protokoll. cDNAs aus all Echantillon waren aus 1.0 μg vun insgesamt RNS vun PrimeScript® 1. staarkt cDNA Synthes Kit (TaKaRa Bio, Siga, Japan) folgenden Fabrikant d'Protokoll Wierderbuch. Den Ausdrock vun HOTAIR war vun LightCycler Brilliant SYBR Green qRT-Hinnen alleguer Kit (Roche Obwuel Science, IN) folgenden Fabrikant d'Protokoll mat der konkreter primer baut no der leschter Etude [9] laachen. Den Niveau vun HOTAIR Ausdrock an all Prouf huet déi jeeweileg GAPDH Ausdrock Niveau normalized. D'Spezifizitéit vun all Hinnen alleguer Reaktioun war vun vermëschen Kéier confirméiert analyséiert. VerfÜgung

HOTAIR Ausdrock Realitéit Vecteure VerfÜgung

Mënscherechter HOTAIR cDNA (addgene, Cambridge, MA) war vun Hinnen alleguer Kick an huet an der pBabe Puro hin Vecteure (pBabe -HOTAIR). Recombinant Aen do war mat Platin-A (wehrpflichteg-A, Virbehalt vun Prof. Kitamura) produzéiert Verpackungen Zell Linnen wéi virdru beschriwwen [16]. Kuerz, goufen wehrpflichteg-A Zellen mat pBabe -HOTAIR oder pBabe-Puro Vecteure (ev) transfected. Fugene-6 (Roche Obwuel Science) an Opti-Mem ech (Gibco /Life Technologien Co.) huet folgend de Protokoll d'Produktioun notéiert. Véierzeg-aacht Stonnen no transfection, war d'Aen do-haltege supernatant gesammelt an batter duerch eng 0,45 μm agin. MKN74 Zellen sech mat der recombinant ëm Krankheet an duerno mat puromycin ausgewielt. VerfÜgung

RNS Amëschen VerfÜgung

HOTAIR vun Kato III Fir knockdown, déi mir Knockout ™ RNAi Systemer (Clontech Laboratoiren, Inc., Mountain View, CA) no de Protokoll d'Hiersteller. Kuerz, mir véier shRNA Haaptrei HOTAIR geziilte entworf wéi an Table 1. No annealing vun der ergänzen shRNA oligonucleotides gewisen, Jonglenster mir de genannt oligonucleotides an pSIREN Vecteure (shHOTAIR). Dann, mir transfected wehrpflichteg-A Zellen mat shHOTAIR oder pSIREN Vecteure (ev), a Personal Kato III mat der recombinant ëm a mat puromycin ausgewielt. D'Zellen transduced mat der head-HOTAIR2 an -3 Vecteure sech fir weider studéieren an dëse Match gaangen. All zu vitrto VerfÜgung Experimenter war zu triplicate gesuergt, widderholl dräi Mol an Vertrieder Daten sinn gewisen. VerfÜgung shRNA VerfÜgung liichtkraaftarm
shHOTAIR-1sensegatccgaacgggagtacagagagattttcaagagaaatctctctgtactcccgttcttttttganti-senseaattcaaaaaagaacgggagtacagagagatttctcttgaaaatctctctgtactcccgttcgshHOTAIR-2 sensegatccgccacatgaacgcccagagattttcaagagaaatctctgggcgttcatgtggttttttg anti-senseaattcaaaaaaccacatgaacgcccagagatttctcttgaaaatctctgggcgttcatgtggcgshHOTAIR-3 sensegatccgtaacaagaccagagagctgttttcaagagaaacagctctctggtcttgttattttttganti-senseaattcaaaaaataacaagaccagagagctgtttctcttgaaaacagctctctggtcttgttacgshHOTAIR-4sensegatccaattcttaaattgggctggttcaagagaccagcccaatttaagaattttttttganti-senseaattcaaaaaaaattcttaaattgggctggtctcttgaaccagcccaatttaagaattgTable 1. Message vun shRNA Text fir d'shHOTAIR ausdrécken Vecteure. VerfÜgung CSV CSV Luet

Zell Wuesstem assay VerfÜgung

1 x 10 4 Zellen sech zu 96 och Telleren an normal Zell Wuesstum pro gutt rakommen Medien. D'3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide, giel tetrazole (MTT) assay war mat enger Zell Prolifératioun Kit ech (GE Gesondheetswiesen Life Sciences, NJ) standing no de Protokoll d'Hiersteller. Miessunge vun absorbance bei 570 nm vun VersaMax (cuisine Comments, CA) gemaach goufen no 24, 48 an 72 Stonnen incubation MTT-formazan Produktioun ze schätzen. Den Index op 48 an 72 Stonnen bewäert gouf op 24 Stonnen fir dass normalized. VerfÜgung

Haart Agar Kolonie Opstellung assay VerfÜgung

Haart Agar assays sech zu 6-gutt Placke gebaut. D'Basis duerstellt vun all bestoung och vun 1ml mat Finale Konzentratioune vun 1 x Medien (RPMI-1640 plus 10% inactivated FBS) an 0.6% niddreg vermëschen Punkt agarose. Placke waren bei Raumtemperatur bis staark ausklénge, op deem Punkt en 1-ml Wuesstem Agar futti parfüméiertem war, aus 1 x 10 4 suspendéiert Zellen an 1 x Medien an 0.3% niddreg vermëschen Punkt agarose. Placke waren nees bei Raumtemperatur ausklénge bis de Wuesstem futti congealed. Eng weider 1 ml vun 1 x Medien ouni agarose war op den Dag 0 op widdert de Wuesstem futti notéiert an erëm op den Dag 14 vum Wuesstem. Zellen sech op 37 ° C fir 4 Wochen an total Kolonien gezielt sech ze wuessen erlaabt. VerfÜgung

Déieren VerfÜgung

6-Woch-al weiblech gewënnt /Shi-scid-IL2Rγ Texter (NOG ) Mais sech aus Central Institut fir hun Déieren (CIEA, Kawasaki, Japan) an benotzt an dësem Experiment kaaft. Si goufen fir eng Woch virun der Experimenter ze acclimate erlaabt. Si huet zu enger propper Sall vun der Déier Gebei um Haptstad Cancer Research Center an huet ënner normale Temperatur, Loftfiichtegkeet an iwwerschratt Beliichtung Konditiounen a gëtt Maus Chow /Waasser ad libitum waren. VerfÜgung

Schwäif verfeelt assay vun Kriibs Zell Metastasen VerfÜgung

den Effet vun HOTAIR Ausdrock op Blutt-dréit Metastasen ze diskutéieren, heijen mir 1.0 x 10 5 Zellen vun HOTAIR- (n = 9) oder Print-ausdrécken (n = 9) MKN74 mat 0,2 ml PBS an de Schwäif Sënn vu Mais. Mais sech fir d'Längt vun de Experimenter allgemeng fir Unzeeche vu Krankheeten Wochenzeitung observéiert, a si goufen 8 Wochen no Sprëtz geaffert. D'Longen, livers, Nier, adrenal Glands, an spleens vun der Mais sech excised a sech macroscopically iwwer d'Präsenz vun Metastasen ze propagéieren. VerfÜgung

Peritoneal Metastasen VerfÜgung

1.0 x 10 6 Zellen vun shHOTAIR- (n = 5) oder Print-ausdrécken (n = 5) Kato III sech mat 0,2 ml PBS an der peritoneum heijen vun Mais den Effet vun HOTAIR Ausdrock op peritoneal Metastasen ze diskutéieren. Mais sech fir d'Längt vun de Experimenter allgemeng fir Unzeeche vu Krankheeten Wochenzeitung observéiert, a si goufen 8 Wochen no Sprëtz geaffert. D'Präsenz vu Véi a ascites am peritoneal Discours propagéieren war. VerfÜgung

Histologie an Immunohistochemistry VerfÜgung

D'excised Stoffer sech fir 24 Stonnen an 10% gefiermt formalin fix, dann a fir microscopic zu paraffin Ënnerbewosstsinn Géigewier Enquête. D'Echantillon waren Géigewier an 4-μm-décke Rubriken an Kierchefënster mat hematoxylin an eosin (H & E). Mir propagéieren der Präsenz vun Mikro-Metastasen datt net macroscopically unerkannt gouf. D'unerkannt erhéijen sech weider immunohistochemically benotzt Primärschoul antibody fir Mënscherechter cytokeratin (Anti Cytokeratin Low, DC10 /5D3, Nichirei Co, Tokyo, Japan), fir sécher ze propagéieren, datt si aus heijen Mënsch gastric Kriibs Zell ofgeleet goufen. No deparaffinization, déi endogenous peroxidase Aktivitéit ze blockéieren Otemschwieregkeeten Rubriken sech zu methanol mat 0.3% Waasserstoff Hem zu destilléiert Waasser fir 20 Minutten incubated. Antigen retrieval war déi Drock gemaach fir 5 min bei 95 ° C ze kachen an 10 mm citrate Prellbock, pH 6.0, an huet da fir 30 Minutte bei Raumtemperatur zu cool. Endogenous biotin- oder avidin-verbindlech Siten sech fir 30 Minutten duerch mi incubation gespaart. D'Sektiounen sech Nuecht op 4 ° C mat der Primärschoul antibody beschriwwen virun incubated an huet mat der zweeter antibody geklot. An avidin-biotin- peroxidase komplex war benotzt der zweeter antibody z'entdecken. D'staining war mat diaminobenzidine (botzt) visualized. D'Sektiounen sech mat hematoxylin counterstained, gewäsch a léif engem Temperaturgefäll vun Ethanol benotzt fir xylene. VerfÜgung

statistique Analyse VerfÜgung

D'Korrelatioun vun HOTAIR Ausdrock mat der clinicopathological Verännerlechen de Patient an den Taux vun Metastasen am heijen Mais sech vun der Chi-Feld Test analyséiert. Statistique Bedeitung vun Differenzen tëscht 2 Gruppe war mat Wilcoxon Test alles an P VerfÜgung Wäert (VerfÜgung

&Si besteet; 0,05) war den statistesch relevant erauskoum. Statistique Ënnerscheed tëscht 3 Gruppe war mat Steel Dwass Test oder Bonferroni Analyse évaluéiert an P VerfÜgung Wäert (&Si besteet; 0.017) als statistesch relevant Allgemeng Survival Probabilitéit erauskoum war vun der Kaplan-Meier Methoden analyséiert gouf a bewäert vun umellen-Platz Test, a P VerfÜgung Wäert (&Si besteet; 0,05) war den statistesch relevant erauskoum. All Statistik analyséiert goufen benotzt Ekuseru-Toukei 2012 (Sozial Research Informatiounen Co., Ltd., Tokyo, Japan) gesuergt. D' P VerfÜgung Wäert (&Si besteet; 0,05) war den statistesch groussen Deel zur VerfÜgung

IFLA- VerfÜgung

den institutionnelle Kritik Verwaltungsrot vun der Haptstad Cancer Center (MCC) dëser Etude Protokoll guttgeheescht,. a schrëftlech informéiert Averständnes war vun all Patient (hänkt Number: MCC-22-30) kritt. De Protokoll vu Déiereschutz Experiment war vun der MCC Déieren Care an Benotzt Comité (hänkt Number: MCC-Ae-2011-12) abruecht. VerfÜgung

Resultater VerfÜgung

D'HOTAIR Ausdrock vun mënschlecher gastric Kriibs Echantillon

d'HOTAIR Ausdrock Niveau vun kriibserreegend a bascht noncancerous Stoffer aus der gastric Kriibs Patienten goufen duerch qRT-Hinnen alleguer an normalized vun der GAPDH Ausdrock Niveau iwwerpréift. Déi heeschen Ausdrock Niveau vun HOTAIR war 4,952 ± 6,462 an 3,804 ± 6.721 (HOTAIR /GAPDH ± normale deviation) zu carcinoma an Net-kriibserreegend lesions, bzw.. Den Ausdrock Niveau vun HOTAIR sech vill méi héich an carcinoma lesions am Verglach zu deene vun Net-kriibserreegend lesions ( P VerfÜgung = 0,019, Dorënner 1A). VerfÜgung

Association tëscht dem Ausdrock vun HOTAIR an der clinicopathological Facteure mënschlechen gastric Cancers VerfÜgung

De Mënsch Stoffer goufen gastric Kriibs histopathologically an intestinal kléngen (n = 36) an diffusen Zorte (n = 32). De Mënsch gastric Kriibs Stoffer ausseet weider no der HOTAIR Ausdrock Niveau an d'High-HOTAIR Grupp (HOTAIR /GAPDH > 1.0) a Low-HOTAIR Grupp (HOTAIR /GAPDH &Si besteet; 1.0) (Sauerdall 1B an C). D'Associatioun vun HOTAIR Ausdrock mat der clinicopathological Fonctiounen am intestinal an diffusen Typ vun gastric Kriibs ass respektiv zu Bedeitung 2 an 3, zesummegefaasst. An der intestinal Typ vun gastric Kriibs, war kee groussen Korrelatioun tëscht HOTAIR Ausdrock an der clinicopathological Conclusiounen (Table 2) fonnt. Ausserdeem, war kee groussen Relatioun tëscht HOTAIR Ausdrock a Punkto Iwwerliewe gesinn, obwuel den High-HOTAIR Grupp kuerz Iwwerliewe wéi de Low-HOTAIR Grupp (Dorënner 2A) ze weisen Lien. Op der aner Hand, war e wesentleche association tëscht HOTAIR Ausdrock an lymph Node Metastasen (P = 0.043), eng Schwächt einfach ( P VerfÜgung = 0.0083), a kuerz globale Iwwerliewe ( P VerfÜgung = fonnt 0.018) an den diffusen Typ gastric Kriibs (Table 3 an Dorënner 2B). Mä et war kee Associatioun tëscht der Bühn an HOTAIR Ausdrock.
HOTAIR niddereg VerfÜgung HOTAIR héich VerfÜgung P VerfÜgung Wäert VerfÜgung Age73.07 ± 9.1870.87 ± 10.650.53Gender0.63Male1016female37T0.87T1, T2610T3, T4713N0.26N078N1, N2 , N3615Ly0.68ly069ly1, ly2, ly3714v0.19v089v1, V2, v3514Stage0.501,27153,4680.50Table 2. D'Associatioun vun HOTAIR Ausdrock mat clinicopathological Fonctiounen am intestinal Typ vun gastric Kriibs. VerfÜgung CSV CSV Luet VerfÜgung HOTAIR niddereg
HOTAIR héich VerfÜgung P VerfÜgung Wäert VerfÜgung Age59.250 ± 10.7566.35 ± 10.160.07Gender0.71male812female48T0.87T1, T212T3, T41118N0.043*N086N1,N2,N3414ly0.40ly067ly1,ly2,ly3613v0.0083*v0119v1,v2,v3111Stage0.311,2783,4512Table 3. D'Associatioun vun HOTAIR Ausdrock mat clinicopathological Charakteristike vun diffusen Typ vun gastric Kriibs. VerfÜgung CSV CSV Luet

Generation vun HOTAIR Bastelen a verwandelt-reegelen Zellen a Korrelatioun mat Zell Nuetsvolen VerfÜgung

d'Fir Bewäert funktionell Roll vun HOTAIR an Entwécklung gastric Kriibs, generéiert mir MKN74 Zellen (MKN-HOTAIR) an stably shHOTAIR ausdrécken Kato III Zellen (Kato-shHOTAIR) stably HOTAIR ausdrécken. qRT-Hinnen alleguer Analyse Teamchef MKN-HOTAIR Zellen engem Niveau vun HOTAIR ausgedréckt 10 iwwert déi vun Print fantastesch ausdrécken (MKN-Print) oder Elteren MKN74 Zellen an datt d'Ausdrock vun dëser Protein war vun 30 bis 70% vun Kato-shHOTAIR Zellen reduzéiert Verglach zu Print transduced (Kato-Print) oder Elteren Kato III (Kato-Print) Zellen (Dorënner 3A). D'Resultater vun der MTT assay bewisen, dass weder up-Regulatioun nach erof-Regulatioun vun HOTAIR gastric Kriibs Zell Prolifératioun (Dorënner S1) betraff. VerfÜgung

Haart Agar Kolonie Opstellung assay VerfÜgung

Fir d'Funktiounen entschlësselen vun HOTAIR am Hafen-onofhängeg Wuesstem vun gastric Kriibs Zellen, geheescht mir eng mëll Agar assay. MKN-HOTAIR Zellen e groussen Zuel vun Kolonie wéi MKN-Print Zellen geformt ( P VerfÜgung = 0,009, Dorënner 4A). Konsequent mat dëser fannen, huet Kato-shHOTAIR Zellen bedeitend manner Kolonie wéi Kato-Print Zellen (Dorënner 4B). Zousätzlech, geformt gastric Kriibs Zellen mat ähnlechen HOTAIR Ausdrock Niveau (MKN-HOTAIR an shHOTAIR-3, Dorënner 3B) ähnlech Zuel vun Kolonien, wat beweist, datt Hafen-onofhängeg Wuesstem vun gastric Kriibs Zellen war an engem HOTAIR-ofhängeg Manéier reegelen.

HOTAIR Ausdrock an gastric Kriibs Zell Metastasen an peritoneal Weiderleede VerfÜgung

Well HOTAIR verstäerkte Hafen-onofhängeg awer net Hafen-ofhängeg Wuesstem vun gastric Kriibs Zellen, mir Hypothes, datt HOTAIR ze wäit Metastasen bäidroen kënnen an /oder peritoneal Weiderleede amplaz direkt Invasioun zu Nopeschlänner Organer. Zu dësem Thema Adress ugestallten mir e Schwäif verfeelt assay an peritoneal Sprëtz vun Zellen ze iwwerpréifen, ob HOTAIR Ausdrock Blutt -borne Metastasen an peritoneal Verbreedung ënnerstëtzt, respektiv. Wéi erwaart, MKN-HOTAIR Zellen Schatzkummer dacks Liewer Investitiounen ( P VerfÜgung = 0.01) am Verglach zu MKN-Print Zellen. Ausserdeem huet d'Zuelen a Gréissten vun der metastatic Liewer erhéijen bedeitend méi grouss mat MKN-HOTAIR Zellen wéi mat MKN-Print Zellen ( P VerfÜgung = 0,03 a P VerfÜgung = 0,019, respektiv, Sauerdall 5A a B). Spannen, awer eng Maus heijen mat MKN-HOTAIR Metastasen fir d'Nier an der adrenal drüs Nieft der Liewer, iwwerdeems mat MKN-Print Zellen nëmmen an der Liewer geformt metastatic erhéijen. Konsequent, war peritoneal Weiderleede bedeitend reduzéiert (1/5, P VerfÜgung = 0.009) wann HOTAIR vun Kato III Zellen inactivated war iwwerdeems all peritoneal Publikatioun gemaach Kontroll Zellen (5/5) (Sauerdall 6A a B). D'metastatic erhéijen sech histologically bestätegt a si huet enorm positiv staining fir Mënscherechter cytokeratin (Sauerdall 5C an 6C). VerfÜgung

Diskussioun VerfÜgung

An dëser Etude, mir den Ausdrock vun HOTAIR zu gastric Kriibs propagéieren an iwwerpréifen seng Korrelatioun mat der clinicopathological Fonctiounen dorënner Patienten hätt. Eis Resultater réischt kloer verstäerkte Ausdrock vun HOTAIR zu Kriibs Stoffer Verglach zu Net-kriibserreegend Stoffer vun de Mo an datt d'héije Ausdrock vun dëser Protein mat lymph Node Metastasen Schwächt Invasioun an aarme Iwwerliewe vun der diffusen Typ vun gastric Kriibs verbonne war,. Dës Conclusiounen sinn konsequent mat der rezenter Etude weist datt an-Regulatioun vun HOTAIR ass zu gastric Kriibs Verglach zu normal Stoffer fonnt an ass mat der entholl Etapp an lymph Node Metastasen soll [17]. Ausserdeem, d'Opléisung vum Hafen-onofhängeg Zell Wuesstem gastric Kriibs Zellen HOTAIR-ausdrécken Schatzkummer kënschtlech VerfÜgung an Investitiounen an d'Liewer zu VIVO VerfÜgung iwwerdeems reduzéiert Ausdrock vun HOTAIR vun Zellen gastric Kriibs schéinen Hafen-onofhängeg Wuesstem an peritoneal Weiderleede ofgeholl, suggeréiert datt HOTAIR enger Jarnéier Roll an gastric Kriibs Werdegang spillt. VerfÜgung

driwwer Ausdrock vun HOTAIR war zu Kriibs Zellen wéi an den entspriechende Net-entholl Zellen zu verschiddenen Cancers dorënner Broscht, Colon, Liewer, Bauchspaicheldrüs an nasopharyngeal Kriibs festgestallt [9-11,18-20]. An dës Cancers, mat Metastasen an /oder aarm hätt HOTAIR war och ze ginn, verbonne gewisen. Doriwwer eraus, war héich Niveau vun HOTAIR Ausdrock mat kuerzer Krankheet-gratis Iwwerliewe vun haett Kriibs soll [12]. Dofir, sinn eis heiteg Conclusiounen konsequent mat virdrun Studie beweist, dass d'Expressioun vun HOTAIR an der verstäerkter aggressiveness vu verschiddenen Zorte vun carcinoma Zellen Équipe ass. Op der aner Hand, konnt mer net negativ prognostic Effet vun HOTAIR an der intestinal Typ vun gastric Kriibs fannen, obwuel d'High-HOTAIR Grupp Verglach globale kuerz Iwwerliewe ze weisen Lien zu der Low-HOTAIR Grupp. Dëst kéint wéinst der klenger Zuel vu Patienten zu der aktueller Etude, well gezwongen Ausdrock vun HOTAIR an eng intestinal gastric Kriibs Zell Linn (MKN74) déi aggressiv phenotype verdengten kënschtlech VerfÜgung a zu VIVO
. Weider Ënnersich mat grouss Zuelen vun Echantillon vun Nieft der experimentell Etude aner intestinal gastric Kriibs Zell Linnen Hëllef wier néideg dës Fro ze Adress. VerfÜgung

An der aktueller Etude, war kee Veräin tëscht HOTAIR Ausdrock an Zell Wuesstem fonnt an gastric Kriibs. An Broscht, Colon an Liewer Kriibs, huet den Asatz vun HOTAIR zu Zell Wuesstem net bewisen gouf [9,10,18] hierkommen HOTAIR gefördert a reduzéiert Zell Verbreedung zu pancreatic Kriibs [11] an haett Kriibs [12], respektiv. Weider, war kee groussen Ënnerscheed zu subcutaneous entholl Wuesstem zu NOG Mais fonnt tëschent HOTAIR-ausdrécken a Kontroll Zellen an der aktueller Etude (Donnéeën net gewise goufen). Baséierend op dëse Conclusiounen, ass et wahrscheinlech, datt de Lien tëscht HOTAIR Ausdrock an Zell Prolifératioun op den Typ vu Kriibs ofhängeg ass. Am Géigesaz, huet den Hafen-onofhängeg Wuesstem vun gastric Kriibs Zellen zu engem HOTAIR-ofhängeg Manéier däitlech gestäerkt. Zousätzlech, ëmmer HOTAIR Ausdrock méi Investitiounen an d'Liewer an an aner Organer, an e Feeler vun HOTAIR der peritoneal Weiderleede vun gastric carcinoma Zellen opgeléist. Dës Observatiounen, zesumme mat der Tatsaach, datt HOTAIR Ausdrock ze Metastasen zu verschiddenen carcinomas dréit [9-12,18], weist datt HOTAIR an der metastatic Prozess haaptsächlech Équipe ass amplaz vun de Wuesstem vun der Primärschoul entholl. VerfÜgung

An Conclusioun, verstäerkte HOTAIR Ausdrock vun der diffusen Typ vun gastric Kriibs war mat der Heefegkeet vu Schwächt Invasioun an aarme hätt verbonne onofhängeg vun T Faktor, an gezwongen Ausdrock vun HOTAIR zu gastric Kriibs Zellen gefördert Hafen-onofhängeg Zell Wuesstem kënschtlech VerfÜgung an Investitiounen ze Liewer zu VIVO VerfÜgung. Dës Resultater weisen, datt HOTAIR Wahrscheinlechkeet ass zu der Entwécklung vun gastric Kriibs Équipe ze ginn an eventuell och eng therapeutesch Zil vun der Behandlung vun gastric Kriibs ginn. VerfÜgung

Informatiounen Ennerstëtzung VerfÜgung Dorënner S1. VerfÜgung D'Associatioun vun Zell Prolifératioun mat HOTAIR Ausdrock. D'Resultater vun MTT assay op 72 Stonnen bewäert sech op 24 Stonnen fir dass normalized. Nee Relatioun war tëscht HOTAIR Ausdrock an gastric Kriibs Zell Verbreedung fonnt VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0077070.s001 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung

Arbeschterlidder VerfÜgung

Mir Merci Professer Kitamura (D'Universitéit vun Tokyo, Tokyo, Japan) fir déi Platin-A Zellen. VerfÜgung

Other Languages