MicroRNAs (miRNAs) goufen e kriteschen Roll an Kriibs Invasioun an Metastasen ze spillen gemellt. Eis virdrun Etude gewisen, datt Mir-375 dacks zu gastric Kriibs downregulated Zell Prolifératioun vun gezielt Janus kinase 2 (JAK2) Hien. Hei, fonnt mir weider, datt den Ausdrock Niveau vum Mir-375 ass vill an metastatic gastric Kriibs Stoffer erofgaangen am Verglach mat den Net-Metastasen Kontrollen. Ectopic Ausdrock vu Mir-375 bremst d'Wanderung an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen deelweis duerch JAK2 gezielt. Ausserdeem, ass Mir-375 Ausdrock vun der Metastasen verbonne Transkriptiouns Faktor Wéngertsschleek negatif reegelen, deen direkt zu der putative Promoteur vum Mir-375 Photo'en. Desweideren, overexpression vun Wéngertsschleek kënnen deelweis d'inhibition vun gastric Kriibs Zell Migratioun ëmgedréint déitlech Mir-375. Geholl zesummen, dës Donnéeën hindeit, datt Mir-375 kann negativ vun Wéngertsschleek an eventuell zu gastric Kriibs Zell Wanderung an Invasioun wollten regulariséiert ginn duerch gezielt JAK2 VerfÜgung
Fro:. Xu Y, Jin J, Liu Y, Huang Z, Deng Y, Dir T, et al. (2014) Wéngertsschleek-reegelen Mir-375 bremst Migratioun a Missiounen Gastric Cancer BTS vum JAK2 gezielt. PLoS NËMMEN 9 (7): e99516. Doi: 10.1371 /journal.pone.0099516 VerfÜgung
Redakter: Ming Tan, Universitéit vu South Alabama, Vereenegt Staate vun Amerika VerfÜgung
Arnaque: 7 Februar 2014; Akzeptéiert: 15 Mee, 2014; Publizéiert: 23. Juli 2014 zu
Copyright: © 2014 Xu et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung
Funding:. Dës Aarbecht war vun Natural wëssenschaftlech Foundation vu China (31301149, 31071221, 31190063, 31125017 oder 31100975), gestäipt vu Wëssenschaft an Technologie vu China ënnerstëtzt (2013CB945603, 2012CB945004 a (2011CBA01001), Edukatiounsministère vu China (20110101110103 a (20130101120001), Natural wëssenschaftlech Foundation vun Zhejiang Province, China (LQ13H160013, LQ14H160003, Z2100247 an Y2100106), déi 111 Project (B13026), d'Grondrechter Research Suen fir de Central Universitéiten (2014QNA7015) an Zhejiang Provincial plangen fir den ubauen vun High-Niveau innovativ Gesondheet Talenter. d' funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung
Wettsträit Interessen:.. d'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung
Metastasen ass déi schrecklech Aspekter vum Kriibs an huet fir méi wéi 100 Joer [1], [2] studéiert ginn. An gastric Kriibs, Attributer déi héich veruerteelt haaptsächlech zu verspéiten Diagnos wéinst dem Manktem vun spezifesch Symptomer fréi Etapp. An Metastasen ass responsabel fir d'gastric Kriibs-Zesummenhang veruerteelt [3], [4]. Migratioun an Invasioun vu Kriibs Zellen essentiel Prozesser während Kriibs metastatic Cortège deen vun enger Serie vun interrelated Schrëtt besteet, dorënner Prolifératioun, huele wëllt, Fueren, Transport, verhaft an Organer, onvergläichleche ze pompelen Mauer, extravasation, Opstelle vun engem microenvironment, an Verbreedung vun wäit Organer. An gastric Kriibs, Zellen Invasioun an der Géigend Otemschwieregkeeten ass e wichtege fréi Schrëtt [3], [5]. Allerdéngs hunn d'Mechanisme vun gastric Kriibs Zellen Migratioun, Iwwerfall a Metastasen net ganz verstan ginn. VerfÜgung
An de leschte Joeren, verschidden Molekülle, zum Beispill, Wuesstem Faktoren, cytokines, extracellular Matrixentgasung-Remodeling Molekülle, an e puer Transkriptiouns Facteure wéi Wéngertsschleek, Twist an ZEB1 [6], [7], [8], [9], [10], [11], hunn d'Fortschrëtter vun Kriibs Zellen Migratioun ze fueren, Iwwerfall a Metastasen opgedeckt gouf. Zënter kuerzem ass et evident ginn, datt, nieft abnormalities zu FAQ-coding Genen, hire Restaurant an Net-coding Genen kann och zu Kriibs Zellen Migratioun, Iwwerfall a Metastasen, wéi miRNAs, deen eng nei Klass vu klenge sinn bäidroen Single-gekëmmert Net-coding RNS Molekülle datt Gentherapie Ausdrock mat grousse Potential regléieren an hunn zu der Regelung vun Kriibs Zellen Migratioun, Iwwerfall a Metastasen als activators oder suppressors [12], [13], [14], [15], [16] agebonne ginn . Fir Datum, hunn eng Zuel vun miRNAs studéiert ginn an gastric Kriibs Metastasen Werdegang agebonne ginn, fir zum Beispill, Mir-218, Mir-9, Mir-7, a Mir-146a [6], [17], [18], [19]. Mir hunn d'Associatioun tëscht spezifesch dysregulated miRNA a speziell Metastasen Schrëtt vun gastric Kriibs studéiert, deen Abléck an d'Potential Mechanisme vun gastric Kriibs Zellen Migratioun, Iwwerfall a Metastasen suerge wäert. VerfÜgung
An eiser leschter Etude, Mir-375 huet zu gastric Kriibs an inhibited gastric Kriibs Zellen Prolifératioun vun gezielt JAK2 [20] vill downregulated. Spannen, an de Moment studéieren, hunn mir weider, datt den Ausdrock Niveau vum Mir-375 huet och manner an gastric Kriibs Echantillon vun Metastasen-positiv Patienten compaired mat deem aus Metastasen-gratis z'offréieren. Sou, proposéiert mir dat Mir-375 engem causal Roll an gastric Kriibs Metastasen hunn kéinten. Eis Studien sënnlech datt ectopic Ausdrock vu Mir-375 der Migratioun an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen inhibited och deelweis vun JAK2 gezielt. Mir weiderer fir erauszefannen, wéi Mir-375 Ausdrock vun gastric Kriibs reglementéiert ass. Resultater uginn dass Mir-375 gouf eng Zilscheif vun der Metastasen verbonne Transkriptiouns Faktor Wéngertsschleek a sengem Ausdrock inversely mat Wéngertsschleek zu gastric Kriibs soll. Overexpression vun Wéngertsschleek kann d'inhibition vun gastric Kriibs Zell Migratioun deelweis ëmgedréint déitlech Mir-375. Sou, eis Conclusiounen bewisen, datt Mir-375 gastric Kriibs Zellen Wanderung an Invasioun duerch Wéngertsschleek /Mir-375 /JAK2 Regulatioun Passerelle bremst. VerfÜgung
Séminairen Echantillon (IFLA- breakpoint) an Zell Linnen VerfÜgung
Séminairen gastric Kriibs uplanzen an hir Pair-stemmt Net-malignant gastric Echantillon vun 39 Patiente gastric Kriibs resection Jongen vun Sir Run Run Shaw Hospital (Hangzhou, China) gëtt waren. All d'Echantillonen sech mat schrëftlech Erlaabnes vun de Patienten gesammelt wéi virdru beschriwwen [20]. Béid gastric entholl Stoffer an bascht nontumorous gastric gesammelt Stoffer an der Chirurgie an an zwee Deeler opgedeelt waren. One war zu flëssegem Stéckstoff direkt fir weider benotzen gefruer, aneren Deel vun formalin fir wirklech Analyse gespäichert gouf. D'Patienten an eiser Etude Équipe sech an Metastasen-gratis getrennt an Metastasen-positiv Gruppen (9/30). D'gastric Kriibs Zell Linnen (AGS an MGC-803) an een Net-malignant gastric epithelial Zell Linn (GES-1) sech virdrun beschriwwen [20]. VerfÜgung
RNS Extraktioun VerfÜgung
Total RNS aus gastric Echantillonen an Zell Linnen war mat der mirVana miRNA Isolatioun Kit Quecksëlwer (Ambion, Suerge, USA) folgenden de Protokoll d'Chimie. VerfÜgung
Chemeschen real-Zäit Hinnen alleguer Analyse VerfÜgung
den Ausdrock vun Mir-375 huet mat der Taqman MicroRNA Assays (Obwuel Biosystems, CA, USA) mat spezifesche primers (P /N: 4373151, Obwuel Biosystems) assayed. Ëmgekéierte Transkriptiouns Reaktioun war aus 10 NG vun insgesamt RNS gemaach ab der Bande ënnerwee primers benotzt. Chemeschen real-Zäit Hinnen alleguer (qRT-Hinnen alleguer) war mat der Norm Taqman MicroRNA Assays Protokoll op ABI7500 Real-Time Hinnen alleguer Detektioun System gesuergt. D'ΔΔCt Method fir famill quantization war benotzt miRNA Ausdrock ze bestëmmen. D'CT ass d'fractional Zyklus Zuel bei déi de fluorescence vun all Prouf fix loung Zack. aus der CT vun der miRNA interesséieren: d'ΔCt war vun subtracting der CT vun snRNA U6 (4373381, Obwuel Biosystems RNU6B, P /N) berechent. D'ΔΔCt war vun subtracting der ΔCt vun der Referenz Prouf (vläit Net-malignant Otemschwieregkeeten fir chirurgesch Echantillonen, normal Stoffer an GES-1 Zell fir gastric Kriibs Zell Linnen) aus dem ΔCt vun all Prouf berechent. war fantastesch ännere sech den 2 Migratioun an Invasioun assay VerfÜgung BTS sech mat 20 Pre-Mir-375 oder negativ Kontroll benotzt Transfection Agent (Ambion nm transfected, Suerge, USA) folgenden Fabrikatioun d'Protokoll am 24-gutt Placken. 24 h der transfection, Transwell Migratioun assay an Matrigel Invasioun assay sech getrennt standing mat 24-gutt Transwell Text mat 8 μm pore Gréisst (Corning ëmsou Verletzung). Fir Transwell Migratioun assay, 2 × 10 Letzeburger Politiker-Meter verkënnegt assay VerfÜgung BTS transfected sech als virdru beschriwwen an Chat'en Niewebaach ze wuessen. D'Zellen sech dann cultured an entspriechend mëttelfristeg ouni FBS fir 12 h an duerno mat enger Pipette Tipp Kapp. Meter Beräicher goufen ausgeprägt an op 0 h fotografeschen, 12 h, 24 h an 36 h, ofginn. Den Taux vun Migratioun Zellen war esouwuel Fotograféieren évaluéiert an Quantifizéierung der migrated Distanz vun Zellen aus der Wonn Grenz an Direktioun Zentrum mat IPP 6.0 System geplënnert. All Experimenter waren dräi Mol widderholl. VerfÜgung gesond VerfÜgung pGL3-375pro plasmid, d'DNA Haaptrei wouvun pri-Mir-375 (Primärschoul Mir-375) Promoteur Implikatioune war vun RT-Hinnen alleguer ze produzéiere mat der primers 5'-ATCG CTCGAG ACA GAC CCT GCT AAG CGA CTC-3 'an 5'-ATCG AAGCTT ACG CCT TGG AGC TTG tcc-3 "an dann gekloonten an pGL3-Basis Vecteure (Promega). Fir d'plasmid bauen, datt Wéngertsschleek vun Zellen äussert, war oppen liesen Rumm (ORF) Haaptrei vun Wéngertsschleek gekloonten an mammalian Ausdrock Vecteure pEGFP-C1 (Clontech, CA, USA) vun der primers benotzt 5'- ATCG AA GCT TCG ATG CCG CGC TCT TTC CTC G-3 'an 5'-ATCG GGA tcc TCA GCG GGG ACA tcc Name GCA-3 ". Fir ectopic Ausdrock vun FÄNDEL-afp JAK2, Mënsch JAK2 mat Regioun coding war gekloonten an pCMV-Tag 2C Vecteure. Fir d'plasmid bauen, datt zu mammalian Zellen Mir-375 äussert, déi vläit oligonucleotides op der Primärschoul Haaptrei opgrond vun ass-mir-375 a sengem Reliefsailen Regioune waren pEGFP-C1 (Clontech, CA, USA) an mammalian Ausdrock Vecteure gekloonten. All vun der gesond sech duerch sequencing confirméiert. VerfÜgung Luciferase assay VerfÜgung Forty- dausend Zellen am 24-gutt Placke 24 h virun transfection rakommen goufen. Zellen sech mat entweder pGL3-375pro oder pGL3-Grondakommes Vecteure transfected. Der Praxis-TkLanguage Vecteure (Promega, allem, USA) mat Renilla VerfÜgung luciferase war och als Referenz Kontroll cotransfected. Liichtkäfer a Renilla VerfÜgung luciferase Aktivitéiten waren andems Dual-Luciferase Reporter Assay (Promega) 24 h der transfection gemooss. Liichtkäfer war luciferase Aktivitéit normalized zu Renilla luciferase Aktivitéit. VerfÜgung statistique Analysë VerfÜgung Data vertruede wéi heeschen ± normale Fehler (SE) vun dräi onofhängeg Experimenter. Relatiounen tëschent dem Wëllen vum Mir-375 an den Ausdrock vun Wéngertsschleek mRNA lant sech duerch Pearson d'VerfÜgung Korrelatioun souguer gemaach ginn, wat virdru beschriwwen huet [20]. Student d' t VerfÜgung Azeton a X VerfÜgung Mir-375 dramatesch an gastric Kriibs Zellen an Stoffer aus Metastasen-positiv Patienten downregulated ass VerfÜgung. aus fir Figur ob mir-375 mat gastric Kriibs Metastasen verbonnen ass, mir festgestallt éischt den Ausdrock Niveau vum mir-375 am primäre gastric Kriibs Stoffer aus Metastasen-positiven an Metastasen-gratis z'offréieren. Am Verglach mat Echantillon vun Metastasen-gratis Patienten, den Ausdrock Niveau vum Mir-375 war bal zwee-Weeër Reduktioun vun Stoffer aus Metastasen-positiv Patienten ( P VerfÜgung &Si besteet; 0,05) (Dorënner 1A). An consonance mat dësem Resultat, war den Ausdrock Niveau vum Mir-375 zu gastric Zell Linnen negatif mat der Kraft vun Zellen Wanderung an Invasioun assoziéiert. D'metastatic Eegeschafte vun gastric epithelial Zell Linnen (GES-1, MGC-803, AGS) gekennzeechent. Als zu Dorënner 1c an 1D gewisen, Migratioun an Invasioun Fähegkeeten vun AGS Zell Linn méi grouss waren wéi déi vun MGC-803 an GES-1 Zell Linnen ( P VerfÜgung &Si besteet; 0.01). Mir-375 Ausdrock vun AGS Zellen Inversely, méi niddreg wéi déi vun MGC-803 an GES-1 Zellen ( P VerfÜgung &Si besteet; 0.01) (Dorënner 1B). An engem Wuert, ass Mir-375 zu gastric Kriibs Stoffer aus Metastasen-positiv Patienten an gastric Kriibs Zellen mat méi Migratioun an Invasioun Fähegkeeten downregulated. Dëst Korrelatioun beweist dass Mir-375 engem causal Roll an gastric Kriibs Metastasen hunn kéinten. VerfÜgung Overexpression vum Mir-375 Migratioun gastric Kriibs Zellen bremst a Invasioun VerfÜgung d'Roll vum Mir-375 ze wëssen an gastric Kriibs Metastasen, iwwerpréift mir den Effet vum mir-375 overexpression op der Migratioun an Invasioun vun AGS an MGC-803 gastric Kriibs Zellen mat niddereg endougenous Ausdrock vu mir-375. Zellen sech mat entweder Mir-375 Virleefer (Mir-375) oder beim Bocuse-negativ Kontroll oligonucleotides (Negativ) oder weder vun der uewen (mierkt) transfected. D'Transwell Migratioun assay zougedréckt datt overexpression vum Mir-375 daitlech der Wanderung vun AGS (Dorënner 2A, 2B) an MGC-803 Zellen (Dorënner S1A, S1B) inhibited. An konsequent mat deene Resultater, Teamchef vum Null-Meter verkënnegt assay och dass d'Vitessen vun AGS (Dorënner 2C, 2D) an MGC-803 Zellen (Dorënner S1C, S1D) Migratioun géintiwwer der Wonn no overexpression vum Mir-375 bedeitend reduzéiert sech . Mir weider assay Matrigel Invasioun Employé an fonnt dass overexpression vum Mir-375 Nerve enger méi wéi zwee-Weeër Reduktioun vun der invasiv Eegeschafte vun AGS (Dorënner 3A, 3B) an MGC-803 Zellen (Dorënner 3C, 3D). Zesummen, weg dës Resultater datt overexpression vum Mir-375 genuch ass souwuel d'Wanderung an Invasioun Fähegkeeten vun gastric Kriibs Zellen ze inhibit. VerfÜgung Mir-375-reegelen JAK2 ass an d'Regulatioun vun gastric Kriibs Zellen Wanderung an Invasioun Équipe VerfÜgung Eis virdrun Etude huet JAK2 als afgerappt Zil vum Mir-375 identifizéiert [20]. Hei, si mer interesséiert ënnersicht ob JAK2 zu der Regelung vun gastric Kriibs Zellen Wanderung an Invasioun Équipe ass. Mir ugestallten Vecteure-baséiert RNAi Technik endogenous JAK2 ze ewech a fonnt, datt d'Migratioun an Invasioun Aktivitéite vun AGS (Dorënner 4) an MGC-803 Zellen (Dorënner S2) waren immens souwuel inhibited. Parallel studéiert mir ob JAK2 d'inhibition Effet vun gastric Kriibs Zellen Wanderung an Invasioun vum Mir-375 ëmmer Krise konnten. Zellen sech mat Mir-375 Virleefer Co-transfected an entweder JAK2 overexpression Vecteure (Mir-375 + JAK2) oder Kontroll eidel Vecteure (Mir-375 + Vec). Overexpression vun JAK2 kloer Zellen Wanderung an Invasioun gefördert wéi zu Dorënner 4 an S2 gewisen. Sou, an konsequent mat eis Hypothesen, Mir-375 kënnen d'Wanderung an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen deelweis JAK2 vun gezielt inhibit. Mir weider alles dat JAK2 overexpression keen Effekt op den Ausdrock Niveau vum Mir-375 huet wéi zu Dorënner S3 gewisen. Allerdéngs kënne mir net d'Méiglechkeet vir, datt de dysregulation vum Mir-375 mat aneren Ziler interferes gastric Kriibs Zellen Wanderung an Invasioun néideg fir. VerfÜgung Wéngertsschleek downregulates Mir-375 Ausdrock VerfÜgung D'virun Resultater weisen, datt mir-375 kann duerch verschidden Transkriptiouns Faktoren cibléiert ginn, datt mat Kriibs Invasioun an Metastasen Prozess verbonne sinn. Natierlech, mir konzentréieren op wéi Mir-375 Ausdrock reglementéiert ass. Mir fonnt éischt Offloss vun pri-Mir-375 Gentherapie eng conversed DNA Regioun eraus, wat d'pri-Mir-375 Gentherapie Promoteur [21] zu enthale gemellt war. Mir standing dann Consite Programm (http://asp.ii.uib.no:8090/cgi-bin/CONSITE/consite) a fonnt, datt et sechs bindend Siten vun Transkriptiouns Faktor Wéngertsschleek vun der DNA Regioun (Dorënner 5A) waren. Den DNA Regioun war an pGL3-Basis Vecteure (Promega) (pGL3-375pro) gekloonten de Promoteur Aktivitéit ze moossen. An konsequent mat den Donnéeën vun Walker Grupp [21], huet eist Resultat datt dës DNA Regioun de pri-Mir-375 Gentherapie Promoteur enthält an ass kapabel Dréi luciferase Ausdrock (Dorënner 5B). Luciferase Aktivitéit war effizient repressed wann pGL3-375pro Vecteure mat Wéngertsschleek Ausdrock Vecteure (Wéngertsschleek) Co-transfected war awer net wann Co-transfected mat den eidelen Kontroll Vecteure (mierkt) (Dorënner 5C). Ausserdem hätt Wéngertsschleek overexpression den Ausdrock Niveau vum Mir-375 vun 46% (Dorënner 5D) reduzéieren. Fir de Medeziner Relevanz vun dëse Resultater ze bestëmmen, soll mir weider de Ausdrock Niveau vum Mir-375 mat de Wéngertsschleek mRNA Niveau am selwechten gastric Kriibs Patienten. Als zu Dorënner 5E gewisen, war eng eegestänneg ëmgedréit, et gesäit Korrelatioun tëschent den Ausdrock Niveau vum Mir-375 an Wéngertsschleek mRNA ( P VerfÜgung &Si besteet; 0,05, r = -0.6) fonnt. Dofir, vermëttelt dës Observatiounen datt Wéngertsschleek e Potential Offloss regulator vum Mir-375 Ausdrock ass. VerfÜgung Wéngertsschleek ass an d'Regulatioun vun gastric Kriibs Zellen Migratioun Équipe vun gezielt Mir-375 VerfÜgung Fir weider fir d ' Korrelatioun vun mir-375 an Wéngertsschleek, studéiert mir ob Wéngertsschleek vun gezielt mir-375 zu der Regelung vun gastric Kriibs Zellen Migratioun Équipe ass. Mir ugestallten Vecteure-baséiert Technik Wéngertsschleek Ausdrock Niveau ze upregulate a fonnt, datt d'Migratioun Aktivitéit vun AGS Zellen (Dorënner 6) waren immens ënnerstëtzt. Parallel studéiert mir ob Wéngertsschleek kéint d'inhibition Effet vun gastric Kriibs Zellen Wanderung duerch Mir-375 ëmmer Krise. Zellen sech mat Mir-375 overexpression Vecteure an Wéngertsschleek overexpression Vecteure (Wéngertsschleek + Mir-375) Co-transfected. Overexpression vun Wéngertsschleek kloer Zellen Migratioun gefördert a konnt d'inhibition Effet vun gastric Kriibs Zellen Migratioun déitlech Mir-375 deelweis Krise wéi zu Dorënner 6. Sou gewisen, an konsequent mat eis Hypothesen, Wéngertsschleek kann d'Migratioun vun gastric Kriibs Zellen deelweis inhibit vun gezielt mir-375. VerfÜgung MiRNAs muss gemellt ginn entholl Migratioun, Iwwerfall a Metastasen dorënner gastric Kriibs [6], [22] ze regléieren. Mir-375 war virdrun hien eng wichteg Roll am gastric Kriibs Zellen Prolifératioun ze spillen [20], [23]. Allerdéngs bleiwen d'reglementaresche Mechanismen onkloer. Am Moment studéieren, lant mer weider d'Funktioun a Potential Mechanisme vum Mir-375 vun der Migratioun an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen. Mir hu fonnt, datt overexpression vum Mir-375 inhibited Prolifératioun, Migratioun, an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen deelweis duerch JAK2 gezielt. Dat huet iwwer e Jorzéngt zënter JAK2 éischt gekloonten war [24]. JAK2 ass an bal all Otemschwieregkeeten ausgedréckt an verbonne mat vill pathologic Verlaf. Obwuel et evident ass, datt JAK2 als oncogene Akten an zwee myeloproliferative Entwécklungsstéierungen an e puer staark erhéijen [25], [26], [27], keen direkten Abannung vun JAK2 zu Kriibs Migratioun, Invasioun oder Metastasen huet gemellt ginn. Excitingly, eiser Etude bewisen éischt, datt déi RNAi JAK2 Sax iwwer d'Wanderung an Invasioun Aktivitéite vun gastric Kriibs Zellen gläicht dofir deem vun den overexpression vum Mir-375 inhibited. Nieft, overexpression vun JAK2 kéint d'Wanderung an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen förderen. Sou, gemengt mir dass JAK2 kéint d'inhibitory Effekt op d'Zellen Wanderung an Invasioun vum Mir-375 ëmmer Krise. Am Bezug op déi kritesch Roll vum Mir-375 an JAK2 als Meeschter Legislateuren an gastric Kriibs Zellen Prolifératioun, Migratioun, an Invasioun, ass souwuel vun hinnen therapeutesch Potential am Traitement gastric Kriibs. Dofir, bleift et ënnersicht ginn, ob et aner Ziler an Mir-375 mediated gastric Metastasen matmaachen ass. VerfÜgung Of besonnesch interesséieren, mir weider studéiert wéi Mir-375 zu der gastric carcinogenesis Équipe. Obwuel et eng evident, datt DNA methylation an histone deacetylation de méiglech Mechanisme vun der downregulation vum Mir-375 zu gastric Kriibs Équipe ginn [23]. D'Mechanisme Mir-375 dysregulation zu gastric Kriibs Metastasen Basisdaten sinn nach ganz wéineg verstan. Et ass Méiglechkeet fir e transcriptional Baustau vum Mir-375 Gentherapie Ausdrock an dësem Prozess. Hei weisen mir dat den Metastasen verbonne Transkriptiouns Faktor Wéngertsschleek ass eng potentiell Offloss regulator vum Mir-375 Ausdrock. Wéngertsschleek engem DNA-verbindlech Zénk Fanger FAQ an huet als transcriptional repressor [28] gemellt ginn. Acumulating dofir ze weisen, datt Wéngertsschleek Photo'en ze E-Këschte vun de Promoteur vum E-cadherin an represses seng Transkriptiouns entholl Invasioun Entwécklung [29] ze regléieren. Desweideren, overexpression vun Wéngertsschleek zu Cancers fonnt gouf mat lymph Node Metastasen, entholl Réckwee an hätt verbonne ginn [30], [31], [32], [33], [34], [35]. An konsequent mat anere Rapporten, fonnt eiser Etude dass Wéngertsschleek mRNA zu gastric Kriibs Stoffer overexpressed ass wou mat hiren zwéin Net-malignant Stoffer Verglach. Wéi de Promoteur Aktivitéit vum Mir-375 vun Wéngertsschleek an overexpression vun Wéngertsschleek opgeléist ginn hätt kéinten Mir-375 Ausdrock Niveau bedeitend reduzéieren, hu mer weider en z'ënnerscheedde ëmgedréit, et gesäit Korrelatioun tëschent den Ausdrock Niveau vum Mir-375 an dem Niveau vun Wéngertsschleek mRNA zu gastric Kriibs Echantillon. Wéngertsschleek ass och duerch gezielt Mir-375 zu der Regelung vun gastric Kriibs Zellen Migratioun fonnt Équipe ze ginn. VerfÜgung An Conclusioun, hu mir festgestallt, datt Mir-375 aberrantly an der gastric Kriibs Stoffer aus Metastasen-positiv Patienten ausgedréckt huet oder gastric Kriibs Zellen mat méi Migratioun an Invasioun Aktivitéiten wou mat Stoffer aus Metastasen-gratis Kranken oder Net-invasiv gastric epithelial Zell Linn GES-1 respektiv Verglach. Overexpression vum Mir-375 reduzéiert gastric Kriibs Zellen Wanderung an Invasioun Aktivitéiten op d'mannst deelweis duerch JAK2 gezielt. Desweideren, en Offloss regulator vum Mir-375 Wéngertsschleek kann déi negativ der Ausdrock vu Mir-375 reguléieren a war an der Regulatioun vun gastric Kriibs Zellen Wanderung duerch gezielt Mir-375 Équipe. Zesummen, déi eis Resultater eng undescribed Passerelle, an deem e Transkriptiouns Faktor Wéngertsschleek den Ausdrock vun Mir-375 reguléieren, déi hiren direkten Zil- JAK2 Hien, Spëtzekandidat vun der Migratioun an Invasioun vun gastric Kriibs Zellen ze inhibit. Eis Donnéeën ugëtt dass Restauratioun vum Mir-375 oder inhibition vun Wéngertsschleek oder JAK2 therapeutesch nëtzlech kann Strategien fir gastric Kriibs behandelt. Et gëtt sécherlech ganz interessant ginn weider op d'Potential Wierksamkeet vun deene Molekülle beschen gezielt Mir-375, JAK2 oder Wéngertsschleek an der Behandlung vun gastric Kriibs. Aner interessant Thema fir Zukunft Fuerschung gëtt d'Identifikatioun vun anere méiglech Ziler vum Mir-375 ginn, an, méi spezifesch, déi méiglech Abannung vun JAK2 zu gastric Kriibs Metastasen. VerfÜgung Resultater VerfÜgung
Diskussioun VerfÜgung
Ennerstëtzung Informatiounen VerfÜgung Dorënner S1. VerfÜgung Ectopic Ausdrock vu Mir-375 Hien der Wanderung vun MGC-803 Zellen. MGC-803 transfected Zellen mat Mir-375 Virleefer (Mir-375), negativ Kontroll (Negativ) oder weder vun der uewen (mierkt) sech un Transwell Migratioun assay (A) ënnerworf an Null-Meter verkënnegt Analyse (C). (A) Vertriederin Felder vun invasiv Zellen op der Sypiewski Membran déi mat DAPI sech fest an Kierchefënster. (B) Total Zuel vun migrated Zellen op der Sypiewski Membran vun IPP 6.0 Software gezielt gouf. (C) D'Zellen Migratioun fir de Blesséierten Géigend war vun microscopy op 0 h fotografeschen, 12 h, 24 h an 36 h Post-wounding. D'agekreest Linnen weg de Beräicher subtil Zellen. (D) Den Taux vun Migratioun gouf duerch Miessunge vun der Distanz vun Zellen aus der Wonn Grenz an Direktioun Zentrum vun 36 h der Schëtter geplënnert iwwerpréift. D'Donnéeë sinn als mengen ± SE vun op d'mannst dräi onofhängeg Experimenter presentéiert. Erausgoen, 50 μm. * P VerfÜgung &Si besteet; 0,05, ** P VerfÜgung &Si besteet; 0,01 VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0099516.s001 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung Dorënner S2 . VerfÜgung Overexpression vun JAK2 reverses Mir-375 entschlof inhibition vun MGC-803 Zellen Wanderung an Invasioun. D'Zellen transfected mat der uginn vectors oder oligonucleotides sech mat Transwell Migratioun (A) oder Matrigel Invasioun assay (C) ënnerworf. De Rettungsplang Experiment fir Mir-375 overexpression sech duerch ectopic Ausdrock vun JAK2 standing ouni 3'-UTR zu Mir-375-behandelt Zellen. (A, C) Vertriederin Felder vun den Zellen op der leschter Chamber um 12 h Post Migratioun oder Invasioun huet dës Distanz. Skala Baren, 50 μm. (B, D) Den Total vun migrated oder invasiv Zellen aus néng per Zoufall ausgewielt Felder war vun IPP 6.0 gezielt. * P VerfÜgung &Si besteet; 0,05, ** P VerfÜgung &Si besteet; 0,01 VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0099516.s002 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung Dorënner S3 . VerfÜgung JAK2 huet keen Effet op Mir-375 Ausdrock. D'AGS an MGC-803 Zellen sech mat JAK2 overexpression Vecteure oder Kontroll Vecteure transfected an RT-Hinnen alleguer Analyse fir d'Expressioun Niveau vum Mir-375 ënnerworf. Den Niveau vun RNS U6 war als Kontroll benotzt VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0099516.s003 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung
Wat Dir ësst kann de Wee änneren wéi Antibiotike Ären Darm beaflossen
Darmmikrobiom verbonnen mat Verhalensproblemer bei Kanner
Schwéier COVID-19 Komplikatioune verbonne mat der Darmbarriär Pann
Mënschlech Koronavirus brauch organesch Material fir effizient tëscht Uewerflächen ze transferéieren
Heartburn verstoen
Mouthwash beaflosst d'Auswierkunge vun der Übung
Spider Venom Peptid kéint hëllefen de Péng am irritablen Darmsyndrom ze stoppen
DUniversitéit vu Queensland Fuerscher hunn erausfonnt datt e spezifesche Peptid, dat am Spannergift fonnt gouf, Eegeschafte kéint hunn, déi et nëtzlech kënne maachen fir Péng bei Patienten mat irritab
Fuerscher benotzen Phagtherapie fir erfollegräich alkoholesch Liewerkrankheet ze behandelen
Fir déischte Kéier, Fuerscher hunn erfollegräich Bakteriophage (Phage) Therapie benotzt fir alkohol-verbonne Liewerkrankheet an engem Déieremodell ze eliminéieren. Bildkreditt:Christoph Bur
Geess Mëllech-baséiert Formel gutt fir Puppelcher Darmgesondheet
Fuerscher aus dem RMIT Lab hunn dGeessmëllechformel analyséiert a gekuckt op dOligosacchariden, déi et enthält. Dës einfach Zucker an dPrebiotika präsent an der Geessmëllech baséiert Puppelchersformel