PLOS NËMMEN: IL-26 d'Zouhuelen an Iwwerliewe vu Mënscherechter Gastric Cancer BTS förderen duerch d'Balance vun STAT1 an STAT3 Activation

Wat VerfÜgung

Interleukin-26 (IL-26) ass eng vun de cytokines secreted vun Th17 Zellen hir Roll am mënschleche erhéijen bleift onbekannt. Hei, ze propagéieren mir den Ausdrock a Potential Roll vun IL-26 zu Mënsch gastric Kriibs (GC). Den Ausdrock vun IL-26 an Zesummenhang Molekülle wéi IL-20R1, STAT1 an STAT3 war vun real-Zäit Hinnen alleguer an immunohistochemisty iwwerpréift. D'Auswierkunge vun IL-26 op Zell Prolifératioun an cisplatin-entschlof apoptosis sech duerch BrdU Zesummenaarbecht assay an PI-Annexin V Co-staining, bzw. analyséiert. Lentiviral mediated siRNA war benotzt seng Mechanismus Aktiounsradius ze entdecken, an IL-26 Zesummenhang sécher war déi westlech blotting analyséiert. Mënsch GC Stoffer zougedréckt a dem Niveau vun IL-26 fräi a seng wëssenschaftlech Molekülle an Aktivéierung vun STAT3 sécher hierkommen STAT1 Aktivéierung net vill tëscht GC an normal gastric Stoffer ënnerscheeden gemaach. Desweideren, IL-26 war virun allem duerch Th17 an NK Zellen produzéiert. IL-26 gefördert der Verbreedung an Iwwerliewe vun MKN45 an SGC-7901 gastric Kriibs Zellen an enger Portioun-ofhängeg täteg. Ausserdeem, IL-20R2 an IL-10R1, déi sinn zwou wesentlech kenne fir IL-26 sécher, sech an zwee Zell Linnen ausgedréckt. IL-26 ageschalt STAT1 an STAT3 sécher; Ee, d'upregulation vun den Ausdrock vun BCL-2, BCL-XL an c-myc uginn, dass den Effet vun IL-26 vun STAT3 Aktivéierung mediated ass. Knockdown vun STAT1 an STAT3 Ausdrock ugeholl, datt d'proliferative an Anti-apoptotic Auswierkunge vun IL-26 vun der modulation vun STAT1 /STAT3 Aktivéierung mediated sinn. Am Resumé, Promotioun nik Niveau vun IL-26 mënschlechen GC Prolifératioun an Iwwerliewe vun modulating STAT1 /STAT3 sécher VerfÜgung

Fro:. Du W, Tang Q, Zhang C, Wu J, Gu C, Wu Z, et al. (2013) IL-26 ënnerstëtzt d 'Zouhuelen an Iwwerliewe vu Mënscherechter Gastric Cancer BTS vun der Balance vun STAT1 an STAT3 Activatiounscode regelen. PLoS NËMMEN 8 (5): e63588. Doi: 10.1371 /journal.pone.0063588 VerfÜgung

Redakter: Salvatore V. Pizzo, Herzog University Medical Center, Vereenegt Staate vun Amerika VerfÜgung

Arnaque: 11 Oktober 2012; Akzeptéiert: April 2, 2013; Publizéiert: Mee 21, 2013 VerfÜgung

Copyright: © 2013 Du et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung

Funding:. Dës Aarbecht war déi Subventioune vun der National Natural Science Foundation (81170415 fir XC) an Jiangsu Province de Key Provincial Talenter plangen (RC2011079 gaang an RC2007056 fir XC) ënnerstëtzt. D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung

Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung

Aféierung VerfÜgung

Gastric Kriibs (GC) ass déi zweet Équipe gemeinsam Ursaach vum Kriibs-Zesummenhang Doud vun der Welt. GC ass schwéier souguer am westlechen Länner ze heelen, well et oft ass net bis an den Diplôme Etappe vun der Krankheet fonnt [1]. Obwuel eng ganz Rei Facteure mat der Entwécklung an Werdegang vun GC, e Lien tëscht chronescher gastric inflammation wéi atrophic gastritis entschlof vun Helicobacter pylori an de Risiko vun GC verbonne ginn ass an de leschte Joren evident ginn [2]. Chronescher inflammation zu GC Virwaat ass eng laang an komplizéiert Prozess datt iwwer vill Joren existéiert an ass duerch demagogesch Schued un der gastric mucosa, cytokine-entschlof DNA Synthes an Zell Prolifératioun, hyperplasia an carcinogenesis charakteriséiert [3]. VerfÜgung

D' association tëscht chronescher inflammation an der immun System gutt studéiert ginn ass, an lymphocytes sinn d'Haaptgrënn mediators vun inflammation-gefördert carcinogenesis [4]. Th17 Zelle engem Roman Typ vun T lymphocytes datt RORγT an secrete verschidde cytokines dorënner IL-17a, IL-17F, IL-21, IL-22 an IL-26 auszedrécken. D'dat vun Th17 Zellen ass duerch verschidden cytokines reegelen dorënner IL-1β, IL-6, IL-23, alpha Faktor entholl necrosis (TNF-α), an transforméiert Wuesstem Faktor Beta (TGF-β) [5], [6] . Rezent Medeziner Studie weisen dass Th17 Zellen kann enk bis H. pylori verbonne wirklech an carcinogenesis vun GC Zesummenhang sinn [7], [8], [9], [10]. Obwuel verschidde Th17 Zesummenhang cytokines studéiert hunn, ass wéineg iwwert interleukin-26 bekannt (IL-26) par rapport zu gastric erhéijen. VerfÜgung

IL-26 e secreted FAQ ass déi Funktiounen entweder als monomer oder engem homodimer. Et war am Ufank vun Knappe et al beschriwwen. [11] ënner dem Numm vun AK155. IL-26 huet schwaach awer bedeitend Haaptrei homology zu IL-10, a seng encoded FAQ ass also e Member vun der IL-10 Famill vun cytokines, déi meeschtens zu der Klass-2 cytokine Famill gehéiert. IL-26 kënne vun der Primärschoul T Zellen, NK Zellen an T Zell clones an ass normalerweis Co-ausgedréckt mat anere wichtegen IL-10-Zesummenhang cytokines wéi IL-22 [12], [13] secreted ginn. IL-26 Photo'en zu engem z'ënnerscheedde receptor komplex Zell Uewerfläch vun der Ketten IL-20R1 an IL-10R2 besteet, a seng funktionell Aktivitéite sinn verschidde vun deene mediated vun IL-10. IL-20R1 Funktiounen wéi déi spezifesch ligand-verbindlech Kette fir IL-26, an IL-10R2 ass eng wesentlech zweeter Kette Versammlung vun der aktiver receptor komplex ze kompletéieren. antibodies géint entweder d'IL-20R1 oder IL-10R2 Ketten kann Neutralizing Spär Aféierungs- vun IL-26 sécher [12]. Eemol komplett zesummegebaute, awer d'receptor komplex engem conformational änneren (s), déi Aktivatioun vun der receptor-verbonne Janus tyrosine kinases, Jak1 an Tyk2, a Kierzunge flüchteg Kopplungssystem an phosphorylation vun den aktuelle Wäert Proteinen, STAT1 an STAT3 induces [14], [15 ]. VerfÜgung

als cytokine Th17 dinn, huet d'Roll vun IL-26 zu erhéijen propagéieren net ginn. Hei, iwwerpréift mir d'Potential Abannung vun IL-26 zu Mënsch GC fir d'éischte Kéier an lant seng pro-Iwwerliewe an proliferative Effekter kënschtlech VerfÜgung. VerfÜgung

spontan a Methode VerfÜgung

kennen VerfÜgung

déi heiteg Etude dorënner 60 Patiente mat GC deen am Éischte laizistesch Hospital vun Nanjing Medical University, Nanjing, Jiangsu Provënz (Table 1) Agrëff vun 2006 bis 2009 mécht. All Experimenter sech no der an der Deklaratioun vun Helsinki ausgedréckt Prinzipien gehaal. Schrëftlech informéiert Autorisatioune fir Gentherapie Ausdrock Analysë vun Stoffer aus all Patienten virewech ze gesin oder Bild Examen kritt huet. D'Etude Protokoll an Zoustëmmung Prozeduren sech duerch d'Ethik Comité vun der Éischt laizistesch Hospital vun Nanjing Medical University guttgeheescht. D'Diagnos an Stadium vun gastric Kriibs war no der AJCC (TNM) Stadium System gesuergt. VerfÜgung

Chemeschen Real-Zäit Hinnen alleguer VerfÜgung

Réckproduktioun Transkriptiouns Reaktioune waren der SuperScript Éischt-Strand Synthes System standing benotzt ( Invitrogen, CA) an der Behandlung vun RNS Schabloune mat DNase ech Frankräich DNA kontaminéierte ze verhënneren. Fir d'famill Niveau vun cDNA am Géigendeel ausserdeem Echantillonen, real-Zäit Hinnen alleguer war gesuergt mat der Roche LightCycler480 (Roche kinnt IN, USA) benotzt primers fir IL-26 festzestellen wéi follegt zesummen: vir, AAGCAACGATTCCAGAAGACC an ëmgedréint, AAGTCCTCCACAAAGCGTATTTT, mat engem Kick Längt vun 175 BP. GAPDH war wéi enger Kontroll mat der folgender primers benotzt: vir, AAGGTGAAGGTCGGAGTCAAC; Géigendeel, GGGGTCATTGATGGCAACAATA; Implikatioune Längt, 102 BP. D'real-Zäit Hinnen alleguer Reaktioun war no der am SYBR® Premix Ex Taq ™ Kit (Takara, Japan) abegraff Uweisungen gesuergt. Date goufen vun den Echantillon zu der GAPDH Niveauen normalized. VerfÜgung

Elisa VerfÜgung

IL-26 hat an der serum vun GC Patienten a gesond Kontrollen gemooss gouf benotzt kommerziell sinn Sandwich Elisa Trikoten (Biotang Galaxy MA). VerfÜgung

Western Blot Analys VerfÜgung

Proteinen vun MKN45 ofgebaut goufen, SGC7901 an hir STAT1 an STAT3 siRNA geännert Zell Linnen, an laachen eng FAQ assay (Bio-Rad Laboratoiren, CA) benotzt. Protein Echantillon (30 μg) waren déi SDS-PAGE fractionated an zu engem nitrocellulose Membran transferéiert. Immunoblotting war standing antibodies géint IL-26, IL-20R1, IL-10R2, p-STAT3 (S727), STAT3, p-STAT1 (Y701), STAT1, BCL-2, BCL-XL, c-Myc an α- benotzt Tubulin (all aus Abcam, Punktzuel kaaft). D'Resultater goufen mat enger chemiluminescent erkennen System (Pierce ECL Realitéiten Western blot erkennen System, Thermo Wëssenschaftlech, IL) an aussetzt autoradiography Film (Kodak XAR Film) visualized. VerfÜgung

Immunohistochemistry (IHC) VerfÜgung

Stoffer goufen Nuecht op 4 ° C, Filteren, an an 5 μm décke Rubriken Géigewier an 4% paraformaldehyde gesammelt an fix. Immunohistochemical staining vun Sektiounen mat antibodies géint IL-26, IL-20R1, p-STAT3 (S727), an p-STAT1 (Y701) Leeschtung war mat Techniken beschriwwe virdrun [16]. VerfÜgung

BrdU Zell prolifération Assay

Cultured Zellen sech op eng Dicht vun 1 × 10 4 Zellen /gutt am 96-gutt Placken. D'Zell Prolifératioun op 0, 12, 24, 48, 60 an 72 Auer war mat der BrdU Zell Prolifératioun assay Kit bewäert. BrdU Léisung (Zell sécher Technology, MA) war gutt zu all derbäi laut den Hiersteller d'Instruktioune fir 12 h. D'Zell Prolifératioun Taux gouf duerch Miessunge absorbance bei 450 nm mat engem Computer kontrolléiert microplate-Lieser sech. VerfÜgung

Isolatioun a Kultur vun de Mënscherechter GC communal Leukocytes VerfÜgung

Fresh entholl Stoffer sech zweemol zu RPMI 1640 zou geläscht. Fatty, war connective, an necrotic Otemschwieregkeeten. Stoffer sech an RPMI 1640, transferéiert an 1-2 mm Stécker Schwéngs- an 15 oder 50 ml neie Krunn, a incubated mat eent Aktivitéit unzereegen mëttelfristeg wouvun DNase (30 U /ml), hyaluronidase (0,1 mg /ml), an collagenase (1 mg /l) fir 2 h bei Raumtemperatur mat sanft verzweifelt. Stoffer sech an 10 ml RPMI 1640 an Filter duerch e 70-μm Zell strainer (BD Pharmigen) resuspended. wouvun 1 ml vun T-Zell Wuesstem mëttelfristeg zu engem 24-Meter zappen Zellen vun der strainer setzt sech an eenzelne Wells Faarwe fir weider ze erkennen duerch onkontrolléiert cytometry. VerfÜgung

Th17 an NK Zell Isolatioun, Stimulatioun, a Flow Cytometric Analys VerfÜgung

Th17 Zellen sech duerch kritt eng kënschtlech VerfÜgung Stimulatioun vun positive CD4 Randerscheinung Blutt mononuclear Zellen (PBMCs), déi cytometry duerch onkontrolléiert isoléiert sech ënnert de Konditiounen (20 Dummeldéng /mL IL-1β, 20 Dummeldéng /mL IL-6, 20 Dummeldéng /mL IL-23, 5 Dummeldéng /mL TGF-β, 5 μg /mL anti-IL-12, a 5 μg /mL anti-IL-4) virdru beschriwwen [17]. NK Zellen sech mat enger NK Zell Isolatioun Kit vun Miltenyi Biotec kaaft kritt (Cat. 130-092-657). Th17 an NK Zellen sech haten kënschtlech VerfÜgung a stimuléiert vun 100 Dummeldéng /ML LPe a H. pylori VerfÜgung lysates, respektiv, a vun intracellular cytokine staining analyséiert. VerfÜgung

Fir intracellular cytokine staining, goufen Zellen fir 5 h mat engem Leukocyte Activatiounscode Cocktail (BD Pharmingen) bei 37 ° C stimuléiert. Zellen sech dann mat Uewerfläch lues, fix, an permeabilized mat IntraPre Reagent (Beckman Coulter), an endlech Kierchefënster mat intracellular lues Kierchefënster. Date goufen op engem FACSVantage SE Qualifikatiounen a mat CellQuest Software analyséiert. Fluorochrome-conjugated mAbs géint IL-26, CD3, CD4, CD8, CD16, CD56 an RORγT aus BD Pharmingen kaaft huet. VerfÜgung

Cisplatin entschlof Apoptosis a Flow Cytometric Analys VerfÜgung

D'Zellen analyséiert goufen cultured zu komplett mëttelfristeg mat 1 μg /mL cisplatin fir 24 h. Zellen sech weider duerch onkontrolléiert cytometry (FACSCalibur ™; BD Biosciences, NJ) analyséiert. Mat engem PI /Annexin staining Kit (BD Biosciences) VerfÜgung

siRNA Design an Lentivirus Production an Transduction VerfÜgung

D'siRNAs gezielt STAT1 an STAT3 sech entwéckelt a Wierderbuch duerch Genscript Co. (Nanjing, China) als Konsequenz: siRNA gezielt STAT1, GGACAAGGTTATGTGTATA; an siRNA gezielt STAT3, GGACATCAGCGGTAAGACC. D'Wierderbuch siRNAs waren an der lentiviral Vecteure pLL3.7 subcloned vun HapI VerfÜgung a XhoI VerfÜgung (New England Biolab, Vereenegt Kinnekräich) zesumme mat Kontroll siRNA a benannt pLL3.7-CS, pLL3. 7-STAT1-SiRNA an pLL3.7-STAT3-SiRNA. Recombinant lentivirus war vun 293T Zellen entsteet [16]. De Mënsch GC Zell Linnen MKN45 an SGC7901 sech aus Kaiji Biotech Co (Nanjing, China) kaaft an Dulbecco d'geännert Eagle d'mëttel- (DMEM) ergänzt mat 10% An et Kallef serum, 100 U /ML penicillin an 100 U /ML streptomycin (Gibco ugebaut , CA), an transduced mat lentivirus polybrene (8 μg /mL benotzt). VerfÜgung

statistique Analys VerfÜgung

D'Resultater als mengen ± Fils vun der dräi onofhängeg Experimenter ausgedréckt ginn. Vergläicher tëschent Gruppe waren mat de Mann-Whitney U Test gesuergt. D'Korrelatioun vun IL-26 Ausdrock a verschidde Krankheete Beméien war mat der Chi-Feld Test analyséiert. P Wäerter &Si besteet; 0,05 als statistesch relevant considéréiert goufen VerfÜgung

Resultater VerfÜgung

1.. Geklomm Activatiounscode vun IL-26 an Contenu STAT3 sécher an Human Gastric Cancer VerfÜgung

IL-26 Ausdrock vun mënschlecher gastric Kriibs an 60 frësch entholl Stoffer a vläit bascht normal Mo. Stoffer aus 60 GC Patienten iwwerpréift. Real-Zäit Hinnen alleguer Analyse huet bedeitend méi-Ausdrock vun IL-26 mRNA zu Mënsch GC Verglach zu normal gastric Stoffer (P = 0,004, vun Mann-Whitney U Test) (Dorënner 1A). Serum IL-26 Niveauen waren och vill méi héich am GC Patiente wéi an gesond Kontrollen (P = 0,0064, vun Mann-Whitney U Test) (Dorënner 1B). Ausserdeem, Analyse vun IL-26 FAQ Ausdrock vun 60 paraffin Ënnerbewosstsinn Otemschwieregkeeten Echantillon zougedréckt positiven Ausdrock an 47 GC Echantillonen, a schwaach positiv (n = 14) oder negativ (n = 46) Ausdrock vun bascht normal Stoffer. D'IL-26 positive Zellen sech haaptsächlech vun Net-parenchymal Stoffer etabléiert, déi vun immun Zelle begräifen kann Ëmfeld an infiltrating Kriibsfuerschung oder normal gastric Stoffer. Ausserdeem, quantification vun der IHC staining Resultater mat Image-pro plus (Haaptbanalitéite 5.0) am fënnef ënnerschiddleche Beräicher pro Rutsch zougedréckt datt IL-26 Ausdrock vill méi héich am GC Stoffer war wéi an bascht normal Stoffer (P = 0,0087, vun Mann-Whitney U Test). Erkennen an quantification vun den Ausdrock vun IL-20R1, engem receptor vun IL-26, weisen, datt et bei vill méi héich Niveauen an mënschlechen GC wéi am normale Stoffer (P = 0,0041, vun Mann-Whitney U Test) ausgedréckt huet. mat spezifesche antibodies géint d'phosphorylated Reschter der Aktivatioun Status vun STAT1 an STAT3, déi wichteg afgerappt sécher Faktoren vun IL-26 sinn, war vun IHC propagéieren. Eng bedeitend Erhéijung vum p-STAT3 (S727) war am GC Stoffer fonnt, iwwerdeems keng statistesch relevant Ënnerscheeder zu p-STAT1 (Y701) Niveau tëscht Mënsch GC Stoffer an normal Stoffer (P = 0,0094 fir STAT3 a P = 0,392 fir STAT1 fonnt goufen , duerch Mann-Whitney u Test) (Dorënner 1c, d). VerfÜgung

Analys vun der Korrelatioun tëscht IL-26 Ausdrock an clinicopathological Fonctiounen zougedréckt statistesch relevant Associatiounen tëscht IL-26 Ausdrock an entholl Gréisst a H . pylori VerfÜgung Wonn (Table 1). VerfÜgung

2. Th17 an NK Zelle der Main bewosst Sources vun IL-26 zu Mënscherechter Gastric Cancer VerfÜgung

D'bewosst Quelle vun IL-26 sinn der Primärschoul T Zellen, natierlech Killer (NK) Zellen an T Zell clones der Stimulatioun mat spezifesche antigens oder mitogenic lectins [14]. Dofir, d'Quell vun IL-26 zu Mënsch GC, entholl infiltrating leukocytes (TILs) waren vom 20. frësch Mënsch GC Otemschwieregkeeten Echantillonen an Co-Kierchefënster mat verschiddene lues ze definéieren. IL-26 Ausdrock war wiesentlech méi héich an CD3 positive Zellen (T Zellen) vu Mënsch GC TILs wéi am T ofgeleet Zellen aus Randerscheinung Blutt Mono-nuklearen Zellen (PBMCs) (16.52 ± 9,32% fir T-TILs vs. 3,78 ± 2.91% fir T-PBMCs, P &Si besteet; 0.0001), déi mat dem Resultat vun real-Zäit Hinnen alleguer an IHC (Dorënner 2a1 konsequent war, A2). Ënnert der Gesamtzuel vun T Zellen, 13,5 ± 3,71% vun CD4 positive T Zellen ausgedréckt IL-26 iwwerdeems nëmmen 3,21 ± 2,61% vun CD8 T Zellen positive sech fir IL-26 (Dorënner 2a3, A4). Ausserdeem, Co-staining vun IL-26 mat CD4 an RORγt, engem Bewaacher fir Th17 Zellen, huet observéiert, mat 53,21 ± 16,82% vun Th17 Zellen ausdrécken IL-26 zu Mënsch gastric Kriibs Echantillon (Dorënner 2a5, a6). Den Ausdrock vun IL-26 vun NK Zellen, aner dacks gemellt bewosst Quell vun IL-26, gouf duerch Miessunge vun der Zuel vun CD3-, CD16 +, CD56 + Zellen Co-staining mat IL-26 analyséiert, wéi dass 43,81 ± 19,44% zougedréckt vun total NK Zellen secrete IL-26 (Dorënner 2a7, A8). Geholl zesummen, eis Resultater uginn, datt den Haapt bewosst Quelle vun IL-26 zu Mënsch GC sech Th17 an NK Zellen an de Prozentsaz vun all Komponent goufen zu engem Pie Charts (Dorënner 2a9 an A10) zesummegefaasst. VerfÜgung

Fir weider der secretion vun IL-26 ermëttelen an Th17 an NK Zellen, PBMCs sech aus 20 gesond Fräiwëlleger a stimuléiert ënner Th17 polarizing Konditiounen gesammelt. Wéinst Haaptgrond Quell vun IL-26, NK Zellen, war aus PBMCs kritt eng kommerziell Mënsch NK Isolatioun Kit benotzt. De Charakter vun entschlof oder isoléiert Th17 an NK Zellen sech duerch intracellular cytokine staining Fra a weider duerch onkontrolléiert cytometry (Dorënner 2b1, B2) analyséieren. Stimulatioun vun Th17 an NK Zellen mat LPe a H.Pylori VerfÜgung lysates zu engem groussen Zouhuele vun der secretion vun IL-26 virgedroen, wat beweist, datt IL-26 ass eng kruzial cytokine Äntwert zu gastric Kriibs (Dorënner 2C). VerfÜgung

3. An kënschtlech VerfÜgung Proliferative an Anti-apoptotic Effects vun IL-26 VerfÜgung

Den Effet vun IL-26 weider mat enger Serie vun kënschtlech VerfÜgung Studien propagéieren war an zwou Mënsch gesuergt GC Zell Linnen, MKN45 an SGC-7901. Den Effet vun IL-26 op Zell Prolifératioun war mat der BrdU incooperation assay vun Zellen mat verschiddene Konzentratioune vun IL-26 (1, 10 an 50 Dummeldéng /ml) behandelt évaluéieren. Keng Differenze zu Zell Prolifératioun sech tëscht onbehandelt Zellen an deenen behandelt mat 1 Dummeldéng /ML IL-26 fonnt. Allerdéngs huet den Taux vun Zell Prolifératioun bedeitend an Äntwert zu 10 an 50 Dummeldéng /ML IL-26 am Verglach zu deem zu onbehandelt Zellen (Dorënner 3A). Ausserdeem, Beurteelung vun der anti-apoptotic Effet vun IL-26 vum PI-AnnexinV Co-staining vun Zellen mat der Chimiotherapie Drogenofhängeger cisplatin fir verschidde Zäit Flecken behandelt zougedréckt datt IL-26 e wesentleche anti-apoptotic Effekt souguer op enger Portioun 1 Équipe Dummeldéng /mL. D'Anti-apoptotic Effekt fräi mat Konzentratioune vun IL-26 bis 10 a 50 Dummeldéng /ML (Dorënner 3B1, B2) waarden. Dës Resultater uginn dass IL-26 proliferative an Anti-apoptotic Auswierkungen op Mënsch GC Zell Linnen huet, deen deelweis d'Associatioun tëscht IL-26 Ausdrock a verschidde Krankheete Charakteristiken observéiert zu Medeziner Studien erklärt. Allerdéngs, brauch d'Basisdaten molekulare Mechanismus weider analyséiert ginn. VerfÜgung

4. D'Proliferative an Anti-apoptotic Effects vun IL-26 sinn Associéierten mat STAT3 Activatiounscode VerfÜgung

virdrun Etuden hu gewisen, datt seng receptor Komplex vun IL-26 bindend séierer Aktivatioun vun STAT3 induce kann an un enger grousser Distanz Supérieur, STAT1 [ ,,,0],12]. Dofir, alles mir éischt dem Wëllen vun der IL-26 receptor komplex (IL-20R1 an IL-10R2) zu MKN45 an SGC7901 Zellen an ubelaangt, datt béid kenne am GC Zell Linnen präsent waren, datt transduction vun IL-26 Signaler ze confirméieren war méiglech (Well 4A). Mir iwwerpréift dann den Aktivéierungscode vu STAT1 an STAT3 sécher an zougedréckt datt phosphorylation vun der S727 Ermächtegung vun STAT3 an Y701 vun STAT1 an Äntwert zu 10 Dummeldéng /ML IL-26 fräi. IFN-γ (10 Dummeldéng /ml) an IL-6 (30 Dummeldéng /ml) huet den Aktivéierungscode Kontrollen fir STAT1 an STAT3, bzw. (Dorënner 4B) benotzt. Baséierend op virdrun Studie weisen dass STAT1 an STAT3 sécher Weeër Géigendeel Auswierkungen op tumorigenesis hunn [18], ze propagéieren mir afgerappt Ziler vun STAT1 an STAT3 fir weider de Mechanismen entschlësselen Basisdaten der proliferative a pro-Iwwerliewe Auswierkunge vun IL-26 mediated vun STAT1 an STAT3 sécher an GC Zell Linnen. Eis Resultater weisen, datt IL-26 Stimulatioun den Ausdrock vun BCL-2 upregulated, BCL-XL an c-myc suggeréiert datt IL-26 eng staark Wierkung op STAT3 Aktivéierung huet wéi op STAT1 sécher direkt oder indirekt (Dorënner 4B). Dëst Resultat dréit och zu eisem Verständnis vun de pro-Iwwerliewe an proliferative Effet vun IL-26 zu Mënsch GC Zell Linnen. VerfÜgung

5. D'entholl Promotioun Effekt vun IL-26 ass ofhängeg vun der STAT1 /STAT3 Balance VerfÜgung

Den Effet vun IL-26 op d'Equiliberen tëschent STAT1 an STAT3 Aktivéierung war lentiviral mediated siRNA silencing vun STAT1 an STAT3 zu MKN45 propagéieren Hëllef an SGC-7901 Zellen. Déi entspriechend siRNAs effektiv verwandelt-reegelen dem Wëllen vun STAT1 an STAT3 zu souwuel Zell Linnen (Dorënner 5A). Zell Prolifératioun war vun BrdU Zesummenaarbecht assay zu Kontroll siRNA transfected Zellen an STAT1 an STAT3 siRNA behandelt GC Zell Linnen ugebaut zu Medien mat 10 Dummeldéng /ML IL-26 évaluéieren. Knockdown vun STAT3 Ausdrock inhibited bedeitend de Wuesstem vun MKN45 an SGC-7901 Zellen, am Ufank STAT1 knockdown keen Effekt op Zell Prolifératioun (Dorënner 5B1, B2) hat. Cisplatin entschlof apoptosis vum PI-Annexin V Co-staining an der selwechter Zellen haten zu Medien mat 10 Dummeldéng /ML IL-26, an d'Resultater weisen eng bedeitend Diminutioun vun der pro-Iwwerliewe Effet vun IL-26 zu STAT3 knockdown Zellen évaluéieren war hierkommen, kee statistesch groussen Ännerungen an der Taux vun apoptosis an Äntwert ze STAT1 silencing fonnt goufen (Dorënner 5C1, C2). Dës Resultater uginn dass IL-26 pro-Iwwerliewe an proliferative Auswierkungen op Mënsch GC Zell Linnen mediated mannst deelweis duerch STAT1 /STAT3 sécher huet. VerfÜgung

Diskussioun VerfÜgung

virdrun Studie weisen dass IL-26 ass Co-ausgedréckt mat anere wichtegen IL-10-Zesummenhang cytokine, IL-22, deen och vun Th17 Zellen [19], [20] secreted ass. Allerdéngs hunn de Wëllen an d'Roll vun IL-26 zu Mënsch Kriibs net am Detail ënnersicht ginn. Hei, iwwerpréift mir fir d'éischte Kéier den Ausdrock vun IL-26 zu Mënsch GC Stoffer an zougedréckt datt IL-26 an Zesummenhang Molekülle wéi IL-20R1 overexpressed sinn am mënschleche GC Stoffer. VerfÜgung

IL-26 Co ass -expressed mat IFN-γ an IL-22 zu Mënsch Th1 clones, mä net zu Th2 clones. Ausserdeem, IL-26 ass Co-ausgedréckt mat IL-17 an IL-22 vun Th17 Zellen, e wichtegt Ziel vun CD4 + T-Mathëllef Zellen déi aus Th1 an Th2 Zellen isoléiert ass [12], [21]. Am Moment studéieren, war IL-26 fonnt allem duerch CD4 positive T zielt Zellen am mënschleche GC produzéiert ginn, dorënner déi bal d'Halschent vun der Th17 Zellen IL-26 secreted. Mir iwwerpréift aner méiglech bewosst Quell, NK Zellen, déi zu entholl Volumen a Weiderleede vun mënschlech GC [22], [23] an huet am Zesummenhang sinn gemellt ginn, datt NK Zellen goufen och wichteg Quelle vun IL-26 Produktioun. Eis Resultater vun enger rezenter Etude ënnerstëtzt ginn an deem e Roman Ziel vun CD56 + NKp44 + NK Zellen fonnt gouf, fir Co-äussert IL-22 an IL-26, virun allem an Äntwert ze Behandlung mat IL-23 [24]. Hughes et al VerfÜgung. enger anerer Ziel vun Teenie NK Zelle beschriwwen, datt CD56 oder NKp44 net ausdrécklech awer CD117 an CD161 an constitutively auszedrécken IL-22 an IL-26 [25] auszedrécken. Ausserdem, huet eist Resultat fir d'éischte Kéier, datt IL-26 d'Prolifératioun vu mënschlechen GC Zellen ënnerstëtzt duerch d'Gläichgewiicht vun STAT1 an STAT3 Aktivéierung betrëfft, also nei Beweiser vun der Relatioun tëscht NK Zellen an entholl Volumen am mënschleche GC ëmzesetzen. VerfÜgung komponéiert vum IL-20R1 an IL-10R2 Ketten

IL-26 gouf via engem heterodimeric receptor komplex Untersuchungshaft Signal. IL-20R1 Funktiounen wéi déi spezifesch ligand-verbindlech Kette fir IL-26, an IL-10R2 Funktiounen als eng wiesentlech zweeter Kette der Assemblée vun der aktiver receptor komplex ze kompletéieren. Neutralizing antibodies géint entweder d'IL-20R1 oder IL-10R2 Ketten sinn amstand erauszesichen IL-26 sécher. Eemol komplett zesummegebaute, awer d'receptor komplex engem conformational änneren (s), datt d'Aktivéierung vun der receptor-verbonne Janus tyrosine kinases, Jak1 an Tyk2 induces, an der nächster flüchteg Kopplungssystem an phosphorylation vun den aktuelle Wäert Proteinen, STAT1 an STAT3 [26], [27]. Als ee vun den afgerappt sécher Faktoren vun IL-26, ass STAT3 dacks mat tumorigenesis verbonnen an et ass och esou eng oncogene considéréiert. STAT3, déi engem Punkt vun Konvergenz fir vill oncogenic sécher Weeër considéréiert gëtt, ass constitutively souwuel zu entholl Zellen ageschalt an immun Zellen am entholl microenvironment [28], [29], [30]. Besonnesch, STAT3 Aktivéierung huet zu bal 70% vun zolidd an hematological erhéijen, inklusiv Multiple myeloma, e puer lieft an Leukämie, Broscht Kriibs, Kapp an Hals Kriibs, Aarbecht Kriibs, spillt carcinoma, melanoma, keen Auto carcinoma, colorectal carcinoma an thymic gemellt ginn epithelial erhéijen [31]. STAT3 ass bekannt Zell Prolifératioun an angiogenesis ze förderen an eng Roll an entholl immun-Auswee spillen, mä et impairs och de invasiveness an metastatic Potential vun erhéijen. Eis Resultater weisen, datt STAT3 zu Mënsch GC Stoffer a seng Aktivéierung ageschalt ass vläicht mat iwwerdriwwe IL-26 secretion verbonne ginn. Op der aner Hand, sech keng grouss Ënnerscheeder zu der aner afgerappt Zilscheif vun IL-26 erwëscht, STAT1, tëscht entholl an bascht normal Stoffer. STAT1 an STAT3 si geduecht fir Géigendeel Rollen an tumorigenesis [18] spillen. STAT1 huet e komplexe vill Funktiounen am souwuel entholl Zellen an der immun System an ass meeschtens als entholl suppressor consideréiert ginn, well vun hirer Roll am Wuesstem inhibition an apoptosis Promotioun [32]. VerfÜgung

Am Resumé, awer mir dass IL -26 ënnerstëtzt Wuesstem Zell an apoptosis vum Mënsch gastric Kriibs Zellen evitéiert duerch d'Gläichgewiicht vun STAT1 /STAT3 sécher modulating, wat beweist, datt IL-26 e wäertvolle prognostic Luucht kann an therapeutesch Zilscheif vun gastric Kriibs Patienten. VerfÜgung

• PLOS NËMMEN: kuerzfristeg Séminairen Implikatioune vun der Emgeréits Gauche Hepatic verstoppten zu kennen Jongen Radikal Gastrectomy fir Gastric Cancer
• PLOS NËMMEN: Enterococcus faecalis Wonn Erlaabt Inflammation, Intracellular Oxphos-Onofhängeg Ros Production, an DNA DKierperschaftssteier zu Mënscherechter Gastric Cancer BTS