PLOS ONE: PFTK1 Främjar Gastric Cancer Progression Genom att reglera spridning, migration och invasion

Abstrakt

PFTK1, även känd som PFTAIRE1, CDK14, är en ny medlem av Cdc2-relaterade serin /treonin-proteinkinaser. Färska studier visar att PFTK1 uttrycks starkt i flera maligna tumörer såsom hepatocellulärt karcinom, matstrupscancer, bröstcancer, och som deltar i regleringen av cellcykeln, tumörer proliferation, migration och invasion som ytterligare påverkar prognosen av tumörer. Uttrycket och fysiologiska betydelsen av PFTK1 i magsäckscancer är fortfarande oklara. I denna studie analyserade vi uttrycket och kliniska betydelsen av PFTK1 med Western blöt i åtta parade färska magcancer vävnader, nontumorous magslemhinnan vävnader och immunohistokemi på 161 paraffinembedded skivor. Hög PFTK1 uttryck korrelerad med tumörgrad, lymfkörtel invasion samt Ki-67. Genom cellräkning Kit (CCK) -8 assay, flödescytometri, kolonibildning, sårläkning och Transwell-analyser, visade de vitro studier som PFTK1 överuttryck främjas proliferation, migration och invasion av gastriska cancerceller, medan PFTK1 knockdown ledde till motsatt resultat. Våra fynd för första gången stöd att PFTK1 kan spela en viktig roll i regleringen av magcancer spridning, migration och skulle ge en ny lovande terapeutisk strategi mot human magcancer

Citation. Yang L, Zhu J, Huang H, Yang Q, Cai J, Wang Q, et al. (2015) PFTK1 Främjar Gastric Cancer Progression Genom att reglera spridning, migration och invasion. PLoS ONE 10 (10): e0140451. doi: 10.1371 /journal.pone.0140451

Redaktör: Keping Xie, University of Texas MD Anderson Cancer Center, USA

emottagen: 7 maj, 2015; Accepteras: 25 september 2015, Publicerad: 21 oktober 2015

Copyright: © 2015 Yang et al. Detta är en öppen tillgång artikel distribueras enligt villkoren i Creative Commons Attribution License, som tillåter obegränsad användning, distribution och reproduktion i alla medier, förutsatt den ursprungliga författaren och källan kredit

datatillgänglighet: Alla relevanta uppgifter är inom pappers-

Finansiering:. Detta arbete har finansierats med bidrag från Natural Science Foundation i Kina (nr 81.302.285, nr 81.402.015) katalog

konkurrerande intressen. författarna har förklarat att inga konkurrerande intressen finns.

Introduktion

Gastric cancer är den fjärde vanligaste elakartade tumören och den näst vanligaste orsaken till cancerrelaterad dödlighet i alla typer av cancer i världen [1]. Det är svårt att bota om den inte hittas i ett tidigt skede [2]. På grund av brist på specificitet, är tidig diagnos hastighet låg och de flesta av gastric cancerpatienter är på medel sent skede när diagnos. 40% -60% patienter med magsäckscancer fick magcancer radikal operation har ofta postoperativa återkommande och metastasering, dessa egenskaper allvarligt påverka den långsiktiga överlevnaden hos patienter med magsäckscancer [3,4]. Trots stora framsteg av nya diagnos- och behandlingsstrategier magcancer, förblir de exakta molekylära mekanismer av magcancer dåligt förstå. Således kan identifieringen av den molekylära mekanismen under gastric cancer progression och metastasering ge patienter med nya diagnostiska och terapeutiska strategier.

PFTK1 (även känd som PFTAIRE1, CDK14) är en ny medlem av Cdc2 relaterade serin /treonin proteinkinaser som först identifieras i mus nervsystemet och är en viktig regulator av cykliner och cellcykeln [5,6]. Få studier har utförts för att karaktärisera dess fysiologiska funktion eller biologisk betydelse. Det har rapporterats att PFTK1 uttrycks starkt i hjärna, bukspottkörtel, njure, och äggstock. CDK: er binder till specifika cyklin rutan för att bilda funktionella proteinkinaskomplex och regleras delvis av dess subcellulära lokalisering [7]. Till exempel cyklin Y, en roman membranassocierat cyklin, interagerar med PFTK1 förstärker PFTK1 kinasaktivitet och rekryterar PFTK1 till plasmamembranet [8]. PFTK1 interagerar med cyklin B2 samlokalisering i kärnan i hepatocellulär cancer [9]. Den grundläggande funktionen hos PFTK1 redovisas som cyklinberoende kinas (CDK) som reglerar cellcykelprogression och cellproliferation genom att specifikt interagera med medlemmar av cyklin proteiner såsom Cyklin D3 (CCND3), Cyklin Y (CCNY) och bildar ett ternärt komplex med inhibitor p21 cellcykeln, fosforylerar således tumörsuppressor Rb för G1 /S övergång [10]. Knockout Cyklin Y i gliomacellinjer gör cellcykeln blockerats i S perioden [11]. Cyklin Y samverkar med PFTK1 justera M fas av mitos [12]. Dessa upptäckter implicerar varandra att PFTK1 kan fungera som en tumörpromotor via reglera cellcykel. Samtidigt visar flera undersökningar att PFTK1 har även andra viktiga funktioner. PFTK1 modulerar oligodendrocyt differentieringen via PI3K /AKT vägen [13]. Nyligen PFTK1 förlänar HCC cellmotilitet genom inaktivering av aktinbindande motila undertryckande funktion av TAGLN2 via fosforylering [14]. PFTK1-medierad fosforylering möjliggör association av CAD till F-aktinfilament, vilket resulterar i att öka polymerisation av aktin spännings fibrer, vilket främjar cellmigration och invasion i HCC-celler [15,16]. Överuttryck av PFTK1 kan ge en rörlig fenotyp i maligna hepatocyter [9]. I samförstånd med de molekylära fynd, CCNY och /eller PFTK1 ensam kan aktivera noncanonical Wnt-signalering för att förbättra cellrörlighet i HCC-celler [17]. Alla dessa studier antyder att PFTK1 kan vara involverade i celltillväxt och rörlighet, men uttrycket och betydelsen av PFTK1 i gastric cancerceller är fortfarande oklar.

I vår studie, som syftar vi att genomföra en omfattande analys av PFTK1 uttryck och sin prognos roll i gastric cancerceller. Vi undersökte uttrycket av PFTK1 och dess samband med kliniska egenskaper och Ki-67 genom Western blöt och immunohistokemi (IHC). Vår studie visade att PFTK1 förbättrad proliferation, migration och invasions av gastric cancerceller genom CCK-8, flödescytometri analys, kolonibildning analyser, Transwell analys påverkade uttrycket av besläktade proteiner. Dessa fynd först rapporterades i gastric cancerceller och kan ge en ny inblick i utvecklingen av experimentella behandlingar i magcancer.

Material och metoder

Vävnadsprov

Ett hundra sextio -on gastric cancer vävnadsprover och matchade intilliggande noncancer vävnader valdes från patienter som genomgick operation mellan 2007 och 2013 vid Institutionen för patologi, Nantong Tumör Hospital. Dessa vävnader lagrades vid -80 ° C omedelbart efter kirurgiskt avlägsnande. För histologisk undersökning, var alla gastriska vävnadsprover fixerades i 10% buffrad formalin och bäddades in i paraffin för snittning. Opererande prover klassificerades enligt den sjunde upplagan av TNM klassificering för ventrikelcancer [1] .Alla den klinisk-patologisk informationen ålder, kön, infiltration djup, differentieringsstatus, lymfkörtel invasion, nerv invasion och TNM stadium. Godkännandet av avlägsnade vävnader för forskningsändamål erhölls från etikkommitté Nantong Tumör Hospital. Tecknat informerat samtycke erhölls också från varje patient. De kliniska och patologiska variabler sammanfattades i Tabell 1.

Western blot-analys

Western blot-analys användes för att detektera vissa proteiner [18-20]. För det första var de gastriska caner vävnader och celler knäckt i lyseringsbuffert (1 M Tris-HCl pH 7,5, 1% Triton X-100, 10% natriumsulfat (SDS), 1% NP-40, 0,5 M EDTA, 0,5% natrium- deoxicholat, 10 mikrogram /ml aprotinin, 1 mM PMSF, 10

• PLOS ONE: Upptäckt och karakterisering av metastaserande cancerceller i Mesogastrium för magcancer Patients
• PLOS ONE: Dietary fettintag och risk för magcancer: en metaanalys av observations Studies