Финансирование:. Эта работа был поддержан проект Комитета по науке и технике в Шапинба Чунцин (201302). Доноры не играет никакой роли в дизайн исследования, сбора и анализа данных, решение о публикации или подготовки рукописи
<р> Конкурирующие интересы:.. Авторы заявили, что не существует никаких конкурирующих интересов
Введение
<р> Neuropilins, включая neuropilin1 (NRP1) и neuropilin2 (NRP2), являются многофункциональными не-тирозин-киназы рецепторы, которые впервые были идентифицированы на основе их критических ролей в развивающейся нервной [1] системы. Nrp1 и Nrp2 имеют 44% гомологии и имеют много общих структурных и биологических свойств. NRP1 в основном существует в bloodvesselendothelia, и NRP2 встречается главным образом в лимфатических сосудах [2], [3]. Последующие исследования определили NRP-1 в качестве рецептора сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF) -A изоформы VEGF-165 в эндотелиальных клетках и некоторых опухолевых клеток [4], [5]. Исследования показали, что NRP1 является повышающей регуляции во многих типах опухолей и выражается в различных опухолевых vasculatures [3], [6], предполагая, что NRP1 играет критическую роль в опухолевой прогрессии. Ранние исследования показали, что NRP1 может повлиять на рост опухолей как корецептор из VEGFR [5]. Ученые обнаружили, что позже NRP1 может повысить tumorangiogenesis, ускорить рост опухоли и снаряженная опухоли апоптозу без VEGFR [7]. NRP1 может быть корецептор других факторов роста, который проясняет, почему СЭФР может сигнализировать через neuropilins в отсутствие VEGFR-1 или VEGFR-2 [8], [9]. В корецептор из TβRI /TβRII, NRP1 может сдерживать опухоли апоптозу и ускорить рост опухоли с помощью как канонической и неканонической передачи сигналов [10]. NRP1, как корецептор из PDGFR /CMET, может повысить tumorangiogenesis с помощью р38МАРК и сигнализации ERK [11].
<Р> Как выше по течению регуляторных генов NRP1, транскрипционные факторы sp1 /3 и AP1 может регулировать экспрессию NRP1 [ ,,,0],12]. Некоторые исследования показали, что бутират подавляет экспрессию Neuropilin I в колоректальных клеточных линиях через ингибирование Sp1 трансактивацией [13].
MicroRNAs (микроРНК) являются некодирующие молекулы РНК приблизительно 21-23 нуклеотидов в длину, регулируют экспрессию генов на уровне пост-транскрипционной [14], [15], [16]. микроРНК выражение профилирование анализы выявили глобальную понижающую регуляцию уровней зрелых микроРНК в первичных опухолях человека относительно нормальных тканей [17], [18]. Таким образом, микроРНК может функционировать в качестве супрессоров опухолей или онкогенов и дизрегуляции экспрессии микроРНК может способствовать метастазов опухолевых клеток. Остается неясным, может ли микроРНК регулируют экспрессию NRP1; Поэтому, мы стремились определить целевые микроРНК из NRP1. Дополнительные функции NRP1 могут быть обнаружены путем изучения целевых микроРНК из NRP1.
Человеческие ткани Образцы и клеточные линии изображения
В этом исследовании использованы свежие ткани, в том числе 41 образцы желудочного рака человека и 24 образцов соседних нормальных тканей слизистых оболочек, полученных из 41 пациентов, перенесших операцию на второй филиал больницы Чунцин медицинского университета в период с 2012 по 2013 год Данное исследование было проведено в соответствии с «биомедицинских исследований с участием человека Обзор по вопросам этики (Ориентировочное) "постановление Министерства здравоохранения и Хельсинкская декларация на этических принципах проведения медицинских исследований с участием человека. Все образцы были получены с информированного согласия пациентов и эксперименты были одобрены Институциональным наблюдательным советом второй филиал больницы Чунцин медицинского университета. Все участники дали письменное информированное согласие на участие в данном исследовании
<р> SGC-7901, ГГК-27, АГС, клеточные линии MKN-45 и N87 были получены из Американской коллекции типовых культур (АТСС;. Manassas, VA , США), и клеточная линия ГЭС-1 был приобретен у коллекции типовых культур китайской академии наук (Шанхай, Китай). Линии клеток культивировали в RPMI 1640 (Hyclone, Логан Юта США) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS) и инкубировали при 37 ° С с 5% СО2.
праймеры для MIR-338-3p и U6 были произведены с использованием набора miScript Праймер анализа (Qiagen Дюссельдорф Германия). Последовательности микроРНК, используемые в данном исследовании, были следующими: MIR-338-3p: UCCAGCAUC- AGUGAUUUUGUUG и U6: CGCAAGGAUGACACGCAAAUUCGUGAA- GCGUUCCAUAUUUUU. Обратные праймеры были также использованы в стадии обратной транскрипции. Total микроРНК экстрагировали из культивируемых клеток и образцов тканей человека с использованием RNAiso для малых РНК (Takara Bio, Оцу, Япония) в соответствии с инструкциями изготовителя. Поли-A хвосты были добавлены в MIR-338 и U6 с микроРНК реакционного буфера Mix (Takara Bio), а затем кДНК синтезировали из 5 нг тотальной РНК с использованием микроРНК PrimeScript RT Enzyme Mix (Takara Bio). ПЦР в реальном времени проводили в CFX96 режиме реального времени Система обнаружения ПЦР (Bio-Rad) с SYBR Премикс Ex Taq II (Takara Bio). Условия ПЦР были 95 ° С в течение 30 сек, затем 40 циклов при 95 ° С в течение 5 с и 60 ° С в течение 30 с. Данные были нормализованы против U6 мяРНК. После амплификации, анализ кривой плавления проводили для подтверждения специфичности продуктов.
иммуноблоттинг
<р> Общий белок экстрагировали из трансфицированных клеток с использованием Рипа буфера для лизиса (Beyotime, Китай) в соответствии с инструкциями изготовителя. После того, как экстракты белка целых клеток количественно определяли с использованием анализа ВСА белка, эквивалентные количества клеточных лизатов были решены с помощью 10% электрофореза в SDS-полиакриламидном геле и переносили на поливинилиденфторида мембрану, которая затем блокировали в 5% обезжиренном молоке в TBST в течение 1 часа при 4 ° С. Затем блоты инкубировали с первичными антителами. После инкубации с HRP-конъюгированных вторичных антител, белковые полосы визуализируют с использованием реагента усиленной хемилюминесценции (Millipore, Billerica, MA, USA). Были использованы следующие разведений антител: анти-фибронектин, 1:200; анти-виментин, анти-Е-кадгерина и анти-N-кадгерина, 1:1200; анти-SNAIL и анти-GAPDH, 1:500; анти-фосфо-ERK1 /2, анти-фосфо-Akt и анти-фосфо-р38МАРК, 1:2000; анти-NRP1, 1:600; анти-общее ERK1 /2, анти-Akt и анти-р38МАРК, 1:500; и HRP-конъюгированного IgG, 1:7000.
ксенотрансплантатных Эксперименты Количественное Иммуногистохимическое Stain Intensity Результаты MIR Выбор микроРНК-338 подавляется в рак желудка тканей и клеточных линий Для того, чтобы исследовать роли MIR. -338 в развитии рака желудка человека, мы измерили его уровни экспрессии в 41 образцах рака желудка человека и 24 смежных образцов нормальной слизистой. Согласно анализу QRT-PCR, уровень экспрессии микроРНК-338 был значительно снижен в опухолевых тканях по сравнению с соседними нормальными тканями слизистой оболочки (фиг. 1А). Кроме того, микроРНК-338 экспрессия была снижена в желудочном линий раковых клеток (SGC7901, HGC27, AGS, MKN45 и N87) по сравнению с нормальной слизистой оболочкой желудка клеточной линии (GES1) (фиг.1В). Эти результаты свидетельствуют о том, что микроРНК-338 подавляется в клеток рака желудка, открытие, которое может иметь отношение к развитию рака желудка человека.
<р> Мужчина бестимусных голых мышей от 6 до 8-недельного возраста были получены от животных экспериментального центра Чунцин медицинского университета и были акклиматизации в течение 2 недель. Данное исследование было проведено в строгом соответствии с рекомендациями Руководства по уходу и использованию лабораторных животных Чунцин медицинского университета. Протокол был одобрен Комитетом по этике экспериментов на животных Чунцин медицинского университета по. Все операции проводились под пентобарбиталнатрием анестезией, и все усилия были сделаны, чтобы свести к минимуму страдания. Равное число клеток AGS (10 6) с принудительным выражением MIR-338 или Бесконт Mir, с добавлением или без восстановления NRP1, суспендировали в 100 мкл PBS и вводили подкожно в правый задний бок каждой мыши (10 мышей в группе) рост .Tumor контролировали ежедневно в каждой группе. Объем опухоли рассчитывали по формуле V = 1/2 × b2, где самая длинная ось опухоли, и б является самой короткой оси опухоли. Мышей умерщвляли 5 недель спустя и опухоли были разделены на две части. Одна часть была зафиксирована в формалине для последующего иммуногистохимического анализа, а другая часть была сохранена в жидкий азот для вестерн-блоттинга или QRT-PCR.
Immunohistochemistry
<р> Опухоли сохранившиеся в формалине, помещали в парафиновые блоки и разрезали на положительно заряженные предметные стекла микроскопа. Срезы депарафинизировали в ксилоле, гидратируют в градуированном спирте, и предварительной обработке для извлечения антигенов в цитратном буфере в течение 20 мин в 98 ° C пароходе (CD34 и NRP1). Срезы инкубировали при 4 ° С в течение ночи с CD34 (1:200, Santa Cruz Biotechnology) и NRP1 (1:100 R &Amp; D Systems). Иммунологическое проводили с помощью сверхчувствительного S-P Detection Kit (KIT-9720, Maixin, Фучжоу, Китай), и цвет был разработан с использованием набора DAB (PW017, Sangon Biotech, Шанхай, Китай) .Subsequently, секции были контрастно гематоксилином. Слайды были затем окрашивали H &Amp;. E для оценки морфологии
<р> Для определения плотности опухоли микрососудов, пять случайно выбранных Светлое микроскопические изображения (увеличение 40 ×; площадь 0,89 мм 2) в образце, были получены, как описано выше, и положительно окрашивали микрососудов подсчитывали с использованием программы ImageJ. Красный канал, соответствующий CD34 окрашивания, был выделен и оцифровывается в бинарное изображение, с черными пятнами с указанием суда и белый указывает на отсутствие окрашивания. Сосуды с просветами были заполнены в цифровом виде, а также композитный D-MVA был количественному. С помощью программы ImageJ, коричневого цвета изображения, специфичные для окрашивания DAB были извлечены с помощью цвета деконволюции макроса. Все значения интенсивности в пределах той же группы были усреднены для вычисления соотношения между различными группами.
Статистический анализ
<р> SPSS 17.0 Программное обеспечение использовали для статистического анализа. Данные представлены как среднее значение ± стандартное отклонение (S.D.). Группа сравнения проводились с использованием Т-теста Стьюдента. Различия считались значимыми при р &ЛТ;. 0,05
<р> Чтобы быть включенным в нашем последующем анализе, белковые мишени NRP1 должны были быть конкордантно предсказывали по крайней мере, три из следующих четырех инструментов прогнозирования: Миранда (http://www.microrna.org), PicTar (http://pictar.bio.nyu.edu/), TargetScan (http://genes.mit.edu/targetscan /index.html) и miRDB (mirdb.org/miRDB/). На основе версии января 2012 года мы нашли 11 микроРНК, которые потенциально целевых NRP1. Ранее мы определили несколько микроРНК ненормально, выраженные в раке желудка с использованием генного чипа [19] (таблица 1). Исходя из приведенного выше двух, мы предсказали вверх по течению от микроРНК NRP1: микроРНК-338
микроРНК-338 непосредственно Цели онкогенных NRP1
<р> NRP1 было сообщается, что важной молекулой, которая движет желудка миграции рака и вторжения. Использование инструментов прогнозирования, мы предсказывали, что целевой микроРНК из NRP1 был микроРНК-338. Для дальнейшего подтверждения, что микроРНК-338 непосредственно нацелен на онкогена NRP1, мы провели люциферазы анализы для изучения, взаимодействует ли микроРНК-338 непосредственно с целевой онкогенного NRP1. Мы определили два потенциальных сайтов связывания микроРНК-338 на 3'-UTR мРНК NRP1. Для того, чтобы определить, является ли NRP1 регулируется MIR-338 путем прямого связывания с 3'UTR из NRP1, мы построили ряд 3'UTR фрагментов, в том числе полноразмерного дикого типа NRP1 3'UTR, сайт связывания 1 и мутантом сайт связывания 2 мутант (рис. 2А). Эти фрагменты были затем вставлены в репортерной плазмидой psiCHECK2 люциферазы. Мы обнаружили, что Котрансфекция СИК-338 и дикого типа NRP1 3'UTR вызвало значительное снижение люциферазы единиц по сравнению с контрольной группой. Тем не менее, Котрансфекция СИК-338 и мутантного NRP13'UTR не приводят к снижению люциферазы единиц (рис. 2В). Эти результаты свидетельствуют о том, что микроРНК-338 цели NRP1 непосредственно.
микроРНК-338 Препятствует рака желудка миграции клеток, инвазии и пролиферации и стимулирует апоптоз с помощью NRP1
<р> Чтобы проверить функциональное значение MIR-338 оверэкспрессии при раке желудка, мы заразили желудка линий раковых клеток AGS и MKN45 с LV-HSA-MIR-338. По сравнению с выражением прод-Mir, микроРНК-338 был значительно избыточно экспрессируется в AGS и линий MKN45 клеток после заражения LV-HSA-MIR-338 (рис 3А). Мы также обнаружили, что, по сравнению с прод-Mir, экспрессия NRP1 значительно подавлялась в AGS и линий MKN45 клеток после заражения LV-HSA-MIR-338 (рис 3B). Клетки с принудительной экспрессии микроРНК-338 показали значительно уменьшилось пролиферацию по сравнению с клетками с принудительным выражением прод-Mir (рис 3C). В микроРНК-338-инфицированные клетки также демонстрируют пониженную способность образования колоний: количество очагов в микроРНК-338-экспрессирующих клеток уменьшилось по сравнению с прод-Mir-инфицированных клеток (рис 3D). Миграция Transwell и инвазионные анализы Матригель показали, что микроРНК-338 значительно сократило миграции и инвазии потенциала АГС и MKN45 клеток (рис 3e). Флуоресцентно-активированных клеток сортировки (FACS) анализ показал, что вынужденное экспрессия микроРНК-338 приводит к желудочной раковых клеток апоптоза. Процент от общего количества апоптотических клеток (ранний апоптическая + поздняя апоптическая) значительно увеличился на 11% в ответ на микроРНК-338 оверэкспрессии по сравнению с прод-Mir избыточной экспрессии в клетках AGS. Увеличение числа апоптотических клеток 10% наблюдалась в клетках MKN45 с микроРНК-338 по сравнению с избыточной экспрессией Бесконт MIR (рис 3F). микроРНК-338 может регулировать экспрессию NRP1 путем прямого ингибирования NRP1 запись или иные косвенные схемы, поэтому мы в следующий раз установлено ли снижение экспрессии NRP1 может объяснить ингибирование желудочной миграции клеток рака, инвазию и пролиферацию, наблюдаемому после вынужденного экспрессии зер- 338. Поэтому мы вынуждены экспрессию микроРНК-338 в AGS клетках вместе с конструкцией, содержащей NRP1 кодирующей последовательности, но не обладающего 3'UTR мРНК NRP1. В результате, эта конструкция дала мРНК NRP1, который был бы устойчив к MIR-338. Мы обнаружили, что миграция клеток рака желудка, инвазия, пролиферации и апоптоза были восстановлены в клеточной линии AGS с принудительным выражением микроРНК-338 и восстановление NRP1 (рис 3G-3J). Эти результаты показывают, что микроРНК-338 ингибирует миграцию раковых клеток желудка, инвазию и пролиферацию и стимулирует апоптоз путем пристреливать NRP1.
Влияние MIR-338 на путях передачи сигналов в AGS клетки
<р> В качестве не- тирозинкиназы рецептора, NRP1 может умеренно повышать экспрессию фосфорилирование ERK1 /2, Akt и р38МАРК способствовать пролиферации опухолевых клеток и метастазирование, а также сдерживать апоптозу и иммунные ответы. Поскольку NRP1 является нижестоящей мишенью MIR-338, мы предположили, что микроРНК-338 может уменьшить экспрессию фосфорилирования ERK1 /2, Akt и р38МАРК. Мы обнаружили, что принудительное выражение микроРНК-338 ингибирует фосфорилирование ERK1 /2, но относительный уровень экспрессии общего ERK1 /2 существенно не изменялся. микроРНК-338 может также уменьшить фосфорилирование р38 МАРК и Akt (рис 4а). микроРНК-338 может связать 3'UTR мРНК NRP1 регулировать фосфорилирование ERK1 /2, Akt и р38МАРК; Однако, мы не знали, может ли микроРНК-338 связывают 3'UTRs других генов для достижения равного эффекта. Так спасательное эксперимент был проведен, и восстановление экспрессии NRP1 было подтверждено с помощью анализа иммуноблоттинга (рис 4В). Мы обнаружили, что уровни фосфорилирование ERK1 /2, АКТ и р38МАРК не были значительно изменены в AGS клетках с принудительной экспрессии микроРНК-338 и восстановление NRP1 (фиг.4С). Таким образом, мы приходим к выводу, что микроРНК-338 регулирует фосфорилирование ERK1 /2, p38 МАРК и Akt через NRP1.
микроРНК-338 Определяет эпителиального фенотипа рака желудка
<р> EMT является важным механизмом связанный с инвазивность и метастазирование раковых. Явление ЕМТ определяется как переход эпителиальных клеток к fibroblastoid- или мезенхимальных-подобных клеток. ЕМТ характеризуется потерей эпителиальных маркеров и приобретение компонентов мезенхимы. Е-кадгерин, occludin и цитокератин являются подавляются во время EMT, в то время как N-кадгерина, виментину, фибронектин и улитка позитивно регулируются. NRP1 усиливает сигнализации с помощью трех основных путей, которые были связаны с EMT, т.е. TGF-β, Hh и HGF /CMET. Для того, чтобы выяснить роль NRP1 в поддержании мезенхимальных фенотипа желудочного клеток, мы сбиты экспрессию NRP1 РНК-интерференции (RNAi) (рис. 5А) и исследовали экспрессию маркеров мезенхимальных, таких как фибронектин, виментину, N-кадгерина и улитка, а также эпителиальной маркер Е-кадгерин, в AGS клетках. Мы обнаружили, что уровни экспрессии фибронектина, виментину, N-кадгерина и улитка были уменьшены, но экспрессия Е-кадгерина была увеличена в NRP1 обедненного опухолевых клеток (рис. 5, б). Результат показывает, что NRP1 может управлять EMT процесс в рак желудка. Поскольку NRP1 является нижестоящей мишенью MIR-338, мы предположили, что микроРНК-338 может определить эпителиального фенотипа рака желудка. Для того, чтобы определить, произошло ли молекулярные изменения, характерные для пониженной ЕМТ в микроРНК-338-клеток, экспрессирующих, мы исследовали экспрессию мезенхимальных и эпителиальных маркеров в клетках AGS. Анализ иммуноблот показал, что уровни экспрессии фибронектина, виментину, N-кадгерина и улитка в клетках AGS с форсированными экспрессии микроРНК-338 уменьшались. Кроме того, принудительная экспрессия микроРНК-338 усиливает экспрессию Е-кадгерина в клеточной линии AGS, тогда как контрольная-инфицированные клетки оставались Е-кадгерин отрицательным. Мы обнаружили, что микроРНК-338 регулируется фосфорилирование ERK1 /2, p38 МАРК и Akt через NRP1; Поэтому, необходимо было установить, может ли микроРНК-338 регулирует EMT через NRP1. Анализ иммуноблот показал, что экспрессия указанных маркеров мезенхимальных в микроРНК-338-клеток, экспрессирующих был восстановлен до нормального уровня путем восстановления экспрессии NRP1 (рис. 5в). В целом, эти результаты показали, что микроРНК-338 может ингибировать EMT через NRP1 в желудочном раковых клеток.
микроРНК-338 Уменьшает рост опухоли и Подавляет D-MVA с помощью таргетинга NRP1 В естественных условиях
<р> на основании наблюдаемых уменьшается перелетных, инвазивные и пролиферативных поведения в AGS и MKN45 клеток, инфицированных LV-HSA-MIR-338, мы затем исследовали роль микроРНК-338 в росте в естественных условиях. Мы прививали подкожно голым мышам с одинаковыми номерами (1 × 10 6 клеток на мышь) из AGS клеток с принудительной экспрессии микроРНК-338 или прод-Mir, с или без восстановления NRP1. Опухоль Заболеваемость оценивали раз в две недели, и опухоли появились у всех мышей. выражение микроРНК-338 в обнаженном виде опухолей мышей измеряли с использованием QRT-PCR, и мы обнаружили, что микроРНК-338 экспрессия значительно увеличилось в опухолях, которые суперэкспрессированный MIR-338 (6А). Принудительная экспрессия микроРНК-338 значительно ингибирует рост опухоли в естественных условиях, но избыточная экспрессия NRP1 может восстановить рост опухоли (рис 6б). Далее, мы исследовали экспрессию NRP1 в обнаженном виде опухолей мыши с помощью Вестерн-блоттинга и иммуногистохимии. Мы обнаружили, что экспрессия NRP1 значительно уменьшилось в опухолях, которые суперэкспрессированный MIR-338; Однако, экспрессия NRP1 была восстановлена в опухолях, которые суперэкспрессированный NRP1 (рис 6C, 4D). Таким образом, мы сделать вывод, что подавлял рост опухоли микроРНК-338, сдерживая экспрессию NRP1 в естественных условиях. NRP1 может повысить tumorangiogenesis; Таким образом, мы предположили, что принудительная экспрессия микроРНК-338 будет ингибировать tumorangiogenesis через NPR1. Иммуногистохимическое окрашивание на CD34 использовали для оценки числа и морфологическими характеристик кровеносных сосудов в каждой опухоли. Сосуды подсчитывали путем подсчета числа структур с дискретным окрашиванию в пределах каждой области независимо от размера судна или проходимость. Сосуды в опухолях, которые суперэкспрессированный MIR-338 были субъективно меньше прод-Mir сверхэкспрессией опухолей; Тем не менее, количество сосудов было восстановлено в опухолях, которые избыточно экспрессируется NRP1 (рис 6е). Оцифрованные площадь микрососудов (D-MVA) анализировали включать размер сосудов и проходимость в нашем анализе опухолевой сосудистой, обеспечивая оценку комплексной области светового потока и, по-видимому, ортогональное приток крови к опухоли секции. D-MVA был сокращен в микроРНК-338 суперэкспрессированный опухолей. К нашему удивлению, мы обнаружили, что NRP1-суперэкспрессированный опухолей значительно не показывают повышенную ангиогенез, но уменьшение D-MVA в связи с микроРНК-338 оверэкспрессии была восстановлена в опухолях, которые суперэкспрессированный NRP1 (рис 6F и 6G). Мы полагаем, что выражение NRP1 уже усиливается в раке желудка, поэтому далее суперэкспрессированный NRP1 не может значительно увеличить кровоснабжение опухоли, но можно восстановить сосудистую сеть опухоли, которая была уменьшена на MIR-338. Эти результаты показали, что микроРНК-338 уменьшает рост опухоли и подавляет D-MVA путем охвата NRP1 в естественных условиях.
Обсуждение
<р> Использование генных чипов и биоинформатики, мы предсказывали, что целевой микроРНК из NRP1 был микроРНК -338. Исследования показали, что экспрессия микроРНК-338 варьирует в различных опухолях. Хуан XH и др. показали, что микроРНК-338-3p подавлено вторжение раковых клеток печени путем пристреливать сглажены [20]. Кроме того, в меланом, микроРНК-193A, микроРНК-338, и были показаны микроРНК-565, чтобы быть underexpressed у пациентов с BRAF мутации [21]. Исходя из этих данных, мы сделать вывод, что микроРНК-338 может действовать как супрессор опухоли. Там нет опубликованной литературы относительно того, является underexpressed микроРНК-338 при раке желудка. В нашем исследовании уровни экспрессии микроРНК-338 впервые были измерены в 41 образцах рака желудка человека и 24 образцов соседних нормальных тканей слизистой оболочки. Затем мы оценивали экспрессию микроРНК-338 в пяти желудочных линий раковых клеток и в нормальных слизистой оболочке желудка клеточных линий. Мы обнаружили, что экспрессия микроРНК-338 подавлялась в обеих тканях опухолей и клеточных линий рака. Кроме того, суперэкспрессированный микроРНК-338 может ингибировать желудочную миграцию раковых клеток, инвазию и пролиферацию, а также содействовать апоптозу. В то же время, эти tumourigenic качества могут быть полностью восстановлены NRP1 избыточной экспрессии. Кроме того, люциферазы анализы предположили, что микроРНК-338 цели NRP1 непосредственно. Таким образом, мы приходим к выводу, что микроРНК-338 действует в качестве потенциального супрессоров опухоли при раке желудка, функции, которая достигается путем обуздания экспрессии NRP1.
<Р> В качестве не тирозинкиназы рецептора, NRP1 может умеренно увеличить выражение фосфорилирование ERK1 /2, Akt и р38МАРК. M Акаги и др. обнаружили, что ингибирование NRP-1 снижала экспрессию фосфорилирование ERK1 /2, Akt и р38МАРК [22]. Кроме того, исследования показали, что экспрессия ERK1 /2 фосфорилирования повышающей регуляции в NRP-1-избыточно экспрессирующие клетки [23]. В этом исследовании мы обнаружили, что суперэкспрессированный микроРНК-338 может уменьшить экспрессию фосфорилирования ERK1 /2, Akt и р38МАРК, эффект, который было отменено после восстановления NRP1. Активация ERK, Akt и р38МАРК совместно с выживанием апоптозом сопротивление /клеток были хорошо документированы в различных модельных системах [24], [25], [26].
Исследование предполагает связь между употреблением пробиотиков и «затуманенностью мозга».
Хорошие новости для людей, страдающих СРК, поскольку исследователи определяют «кишечный зуд».
Органические яблоки обладают пробиотическими свойствами
Микробиом кишечника и ВЗК - связь, возможно, в диете, говорится в исследовании
Исследователи используют фаговую терапию для успешного лечения алкогольной болезни печени.
Обычный грибок, обнаруженный на коже, может вызвать воспалительное заболевание кишечника.
Правильно ли указаны уровни микробов на этикетках коммерческих кефирных продуктов?
Микробиом кишечника - важная часть человеческого организма, как это стало совершенно очевидно из множества исследований, проведенных за последние несколько десятилетий. Международная научная ассоциаци
Распространение супербактерии E. coli из-за плохой гигиены туалета,
не через еду Новое исследование опубликовано в Ланцетные инфекционные болезни 22 октября, 2019, говорит, что одна распространенная супербактерия вызывает более 5, 000 случаев пищевого отравления в А
Западная диета может увеличить риск «смертельного сепсиса»,
предупредить экспертов Новое исследование, проведенное в Государственном университете Портленда, предполагает, что западная диета может увеличить риск тяжелого сепсиса и смертности от инфекции.