Abstrakt
Målsætning
Biomarkører i stand til at diskriminere de patienter, der er tilbøjelige til at reagere på visse kemoterapeutiske midler kunne forbedre den kliniske effektivitet. De sulfataser (SULFs) spiller en kritisk rolle i patogenesen af en række forskellige humane cancere. Her har vi fokuseret vores undersøgelse på prognostiske og prædiktive effekt af SULF2 Promotor CpG ø methylering af SULF2 Resultater methyleret SULF2 Hotel ( SULF2M SULF2 Henvisning:. Shen J, Wei J, Wang H, Yang Y, Yue G, Wang L et al. (2013) SULF2 Redaktør: Dong Zhang, Nanjing Medical University, Kina Modtaget: Juni 12, 2013; Accepteret: 14. august 2013; Udgivet: 4 okt 2013 Copyright: © 2013 Shen et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres Finansiering:. Dette arbejde blev finansieret af tilskud fra National Natural Science Foundation of China (Grant nr 81220108023 og 81.172.094) og Top Seks Talents projekt i Jiangsu-provinsen (Grant nr 2011ws005). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser Introduktion mavekræft er en af de hyppigste årsager til kræft-relaterede dødsfald på verdensplan [1], [2]. Multimodale behandlingsprotokoller, hovedsagelig baseret på platin og 5-fluorouracil (5-FU), har vist sig at forlænge patientens overlevelse; dog med en hvilken som helst kombination af kemoterapeutiske midler, svarprocenten er kun ca. 30% -50% [3], [4]. I et forsøg på at forbedre den kliniske effektivitet, er det vigtigt og nødvendigt at identificere biomarkører i stand til at diskriminere de patienter, der er tilbøjelige til at reagere på visse kemoterapeutiske stoffer [4] -. [9] heparansulfatproteoglycaner (HSPGs ) er co- receptorer for heparinbindende vækstfaktorer og cytokiner fordelt på celleoverfladen og i den ekstracellulære matrix. To isoformer af de ekstracellulære heparansulfat 6-O-endosulfatases (SULFs), SULF1 og SULF2, er blevet afsløret i pattedyr. Begge proteiner udskilles til celleoverfladen at modulere sulfatering af HSPGs [10]. Selvom tidligere rapporter utvetydigt har fremhævet den kritiske rolle, SULFs spiller i patogenesen af forskellige humane kræftformer, har udtalelserne om rolle SULFs i udviklingen af kræft været noget polariseret. Adskillige beviser viser, at SULFs er negative regulatorer af tumorcellevækst, og at overekspression af SULFs i tumorceller inhiberer cellevækst ved at deregulere flere faktorer, herunder FGF-2, HB-EGF og HGF [11] - [13]. Andre undersøgelser af den opfattelse, at SULFs er positive regulatorer af oncogenetic signalveje, herunder Wnt, BMP, pindsvin og GDNF [14] - [16], og forøget ekspression af SULFs er udbredt i forskellige kræftformer, herunder gastrisk, hepatocellulær, bugspytkirtel og bryst kræft, ikke-småcellet lungekræft (NSCLC) og hoved og hals tumorer [10], [13], [17] - [20]. Høj ekspression af SULF2 er blevet forbundet med ringe overlevelse hos patienter med hepatocellulær carcinom og NSCLC [18], [20]. Den foreliggende dokumentation på methylering status og ekspressionsniveauer af SULFs i denne undersøgelse har vi analyseret promoter CpG øen methylering af SULF2 Materialer og metoder Etik Statement Alle forskning med mennesket deltagere er blevet godkendt af det menneskelige forskningspotentiale Beskyttende Komité Drum Tower Hospital Tilknyttet til Medical School Nanjing Universitet og skriftligt informeret samtykke blev opnået fra alle patienter. patienter og vævsprøver Tilmeldte patienter var dem, der gennemgår den gastrektomi i Institut for Almen Kirurgi af Drum Tower Hospital, Nanjing, Kina i perioden fra august 2010 til oktober 2011. kriterier for optagelse i studiet omfattede følgende parametre: (1) alder > 18 år; (2) histologisk bekræftet gastrisk adenocarcinom, mucinøs eller signetring celle adenocarcinom; (3) ingen andre end mavekræft tidligere eller samtidige maligniteter; (4) ingen tidligere kemoterapi eller strålebehandling, enten adjuvans eller palliativ; og (5) passende funktion af alle større organer. Vævsprøver blev ekstraheret fra 100 frisk fjernede gastriske tumorer. Hver tumorvæv var opdelt i to dele: (1) den ene del blev holdt i 4 ° C Hanks 'balanceret saltopløsning med 1% penicillin /streptomycin efter indsamling, og derefter sendt til laboratoriet inden for 15 minutter i 4 ° C, for In vitro HDRA procedurer blev udført som tidligere rapporteret af Furukawa og kolleger [21], [22]. Kort fortalt blev frisk tumorvæv vasket to gange med Hanks balancerede saltopløsning og hakket i små stykker på ca. 10 mg i vægt og 0,5 mm i diameter, som derefter blev anbragt på tilberedt collagen (Health Design, Rochester, NY) overflader i 24 -Nå mikroplader. Optimale koncentrationer af lægemidler, der anvendes til at skelne in vitro Absorbansen per gram dyrkede tumorvæv blev beregnet ud fra den gennemsnitlige absorbans af væv fra 8 parallelle dyrkningsbrønde, og tumorvævet vægt blev bestemt før kultur. Inhiberingen af hvert enkelt anticancermiddel blev beregnet ved anvendelse af følgende formel: Inhibition rate (%) = (1-T /C) x 100, hvor T er den gennemsnitlige absorbans af behandlede tumor /Vægt og C er den gennemsnitlige absorbans af kontrol tumor /vægt. De afskårne hæmning kurser, der anvendes til at skelne den følsomme og resistente tilfælde blev vedtaget på 30%, 40%, 50% og 60% for hvert testet lægemiddel. in vitro Patienter 'Kemoterapi af alle patienter, 56 med Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) performance status (PS) ≤2 modtaget en modificeret FOLFOX (en kombination af 5-FU og platin) kemoterapi efter resektion af primære tumorer som følger: oxaliplatin 85 mgm -2 plus folinsyre 200 mgm -2 som en 2 h infusion på dag 1, efterfulgt af en 22 h infusion af 5-FU 2000 MGM -2 på dag 1 og 2, hver anden uge. Disse 56 patienter blev yderligere fulgt op og deres overlevelse tid blev beregnet fra datoen for diagnosen til datoen for den sidste opfølgning eller død uanset årsag. Tre 7 um snit blev fremstillet fra primære tumorblokke der indeholdt mindst 80% tumorceller. Efter hæmatoxylin-eosin-farvning blev de ondartede dele mikrodissekeres og overført til et mikrocentrifugerør. DNA blev isoleret rutinemæssigt og blev derefter kemisk modificeret ved natriumbisulfit at konvertere alle ikke-methylerede cytosiner til uraciler mens methylcytosines uforandret [18]. Derefter blev de opbevaret ved -20 ° C til yderligere analyse. MSP blev udført for at bestemme status for methylering af SULF2 Værdier blev udtrykt som middelværdi ± standardafvigelse. Forskelle i hæmning satserne mellem grupper blev evalueret ved brug af t-test. De mulige sammenslutninger af SULF2 methylering med kliniske karakteristika og in vitro Patienternes Kendetegn karakteristika for alle patienter er vist i tabel 1. Størstedelen af patienterne var mænd (73%), og den fremherskende histologi var adenocarcinom (79%). I 35 (35%) patienter, blev tumoren placeret i den distale mave, i 38 (38%) i den proximale mave, og i 27 (27%) i hele mave. Treogtres (63%) patienter havde stadium III eller IV sygdom. Lymfeknudemetastaser var til stede i 75 (75%) patienter. Methyleret SULF2 In vitro For yderligere at undersøge den mulige sammenhæng mellem SULF2 Foreningen af SULF2 Blandt de 56 patienter, der fik den modificerede FOLFOX regime, den mediane overlevelse var 434 dage ( interval: 111-641 dage). En signifikant sammenhæng blev observeret mellem overlevelse og tumorsted ( P diskussion Selvom tidligere undersøgelser har vist, at inddragelsen af SULF2 i kræft patogenese, dens værdi for kemosensitivitet forudsigelse er fortsat uklart. Denne undersøgelse fokuserer på promotor CpG øen methylering af SULF2 I tidligere undersøgelser af mavekræft, resultaterne vedrørende methylering status og ekspressionsniveauer af SULFs Undersøgelser af SULF2 En væsentlig synergistisk effekt af cisplatin og DNA methyltransferase (DNMT) hæmmere 5-aza-dC (DAC) på celleviabilitet blev observeret i cisplatin-resistente AGS cellelinie, men ikke i cisplatin-sensitive MKN28 cellelinje [32]. Data fra at analysere kolonidannelse kapacitet viste, at knockdown af DNMT1 forårsagede en stigning i cisplatin følsomhed [32]. Den molekylære mekanisme er stadig uklar. Men forholdet mellem SULF2 Som konklusion vores undersøgelse tilvejebringer nye beviser, SULF2
methylering i mavekræft.
Metoder
blev analyseret i 100 mavekræft prøver. in vitro
følsomhed over for cisplatin, docetaxel, gemcitabin, irinotecan og pemetrexed blev bestemt ved histoculture lægemiddelrespons assay (HDRA). Derudover 56 gastric kræftpatienter behandlet med en modificeret FOLFOX regime (hver anden uge oxaliplatin plus 5-FU og folinsyre), blev efterfølgende analyseret for yderligere at vurdere den prognostiske og prædiktive effekt af SULF2
methylering i mavekræft.
) blev påvist i 28 patienter, mens de resterende 72 patienter viste umethyleret SULF2 Hotel ( SULF2U
, methylering rate: 28%). Prøver med SULF2U
var mere følsomme over for cisplatin end dem med SULF2M
(hæmning rate: 48,80% vs. 38,15%, P
= 0,02), mens prøver med SULF2M
var mere følsomme over for irinotecan end SULF2U
(hæmning rate: 53,61% vs. 40,92%, P
= 0,01). Der var ingen sammenhæng mellem SULF2
methylering og in vitro
følsomhed over for docetaxel, gemcitabin og pemetrexed. SULF2
methylering viste sig at have en signifikant sammenhæng med cisplatin effekt ( SULF2M
: 57,14%, SULF2U
: 80,56%, P
= 0,02 ) og irinotecan effekt ( SULF2M
: 89,29%, SULF2U
: 62,50%, P
= 0,01). Blandt de 56 patienter, der fik den modificerede FOLFOX regime blev der observeret en signifikant sammenhæng mellem overlevelse og SULF2
methylering status ( SULF2M:
309 dage, 95% CI = 236 til 382 dage; SULF2U:
481 dage, 95% CI = 418 til 490 dage; P
= 0,02). Multivariat analyse viste, at SULF2
methylering var en uafhængig prognostisk faktor af den samlede overlevelse i mavecancerpatienter behandlet med platinbaseret kemoterapi.
Konklusion
methylering er negativt forbundet med cisplatin følsomhed in vitro
. SULF2
methylering kan være en roman prognostisk biomarkør for mavecancerpatienter behandlet med platinbaseret kemoterapi
Methylering er associeret med In Vitro
cisplatin Følsomhed og Klinisk effekt for mavekræft patienter behandlet med en modificeret FOLFOX regime. PLoS ONE 8 (10): e75564. doi: 10,1371 /journal.pone.0075564
i gastrisk kræft, dog er ikke-afgørende, og prognostiske eller prædiktive værdi af SULFs
for kemosensitivitet forudsigelse fortsat ukendt.
, det gen, der koder for SULF2 endosulfatase, og dens tilknytning til in vitro
følsomhed over for cisplatin, docetaxel , gemcitabin, irinotecan, og pemetrexed i 100 humane gastriske cancer prøver. Til dette formål udføres vi en serie af in vitro
følsomhed test på frisk fjernede gastrisk tumor væv og evalueret den mulige brug af SULF2
methylering status til at forudsige den kemoterapeutiske effekt af der agenter. Derefter analyserede vi efterfølgende SULF2
methylering i en kohorte af 56 mavecancerpatienter behandlet med en modificeret FOLFOX regime og konkluderede, at SULF2U
fungerer som en selvstændig prognostisk biomarkør i mavecancerpatienter behandlet med en modificeret FOLFOX regime.
evaluering af kemosensitivitet ved histoculture lægemiddelrespons assay (HDRA) [21], [22]; (2) den resterende del blev omdannet formalinfikserede paraffinindlejrede (FFPE) tumorblokke for patologisk observation og detektion methylering. Vi efterfølgende revideret patienternes journaler og kirurgi rapporter til at identificere kliniske og histopatologiske data, herunder køn, histologi, tumor site, scene, histologisk kvalitet og lymfeknude metastaser. Tumorer blev klassificeret i henhold til International Union Against Cancer (UICC) TNM klassifikation. Skriftligt informeret samtykke blev opnået fra alle patienter og protokollerne til denne undersøgelse blev godkendt af Human Research Protective Komité Drum Tower Hospital.
HDRA
følsomhed og modstand var 20 ug /ml for cisplatin [23], 100 ug /ml for docetaxel [22], 50 ug /ml for gemcitabin [23], 20 ug /ml for irinotecan [23], og 400 ug /ml for pemetrexed [5], i henhold til dens maksimale plasmakoncentration hos patienter. Cisplatin, docetaxel og irinotecan blev opnået fra Jiangsu Hengrui Medicine Company (Jiangsu, Kina), mens pemetrexed og gemcitabin blev opnået fra Eli Lilly and Company (Shanghai, Kina). 8 parallelle dyrkningsbrønde blev anvendt til hver lægemiddelkoncentration, samt til kontrol. Pladerne blev inkuberet i 7 dage ved 37 ° C i nærværelse af lægemidler opløst i RPMI 1640 medium indeholdende 20% føtalt kalveserum og efterlades i en fugtig atmosfære indeholdende 95% luft-5% CO 2. Efter histoculture, 100 pi type I collagenase (0,1 mg /ml, Sigma, Shanghai, Kina) og 100 pi 3- (4,5-dimethyl-2-thiazotyl) -2,5-diphenyl-2H- tetrazoliumbromid ( MTT) opløsning (5 mg /ml, Sigma, Shanghai, Kina) blev tilsat til hver kultur brønd og inkuberet i yderligere 16 timer. Efter ekstraktion med dimethylsulfoxid blev opløsningens absorbans i hver brønd læses ved 540 nm.
Evaluering af følsomhed til Anti-cancer Agenter i HDRA
effekt rate blev også estimeret baseret på cut-off hæmning sats som følger:. Effekt rate (%) = antal følsomme sager /samlede antal sager
DNA Udvinding og Modification
methyleringsspecifik polymerasekædereaktion (MSP)
anvendelse af ABI Prism 7300HT Sequence Detection System (Applied Biosystems). Hver PCR reaktion indeholdt genomisk DNA 2 pi, SYBR Green PCR Mix (Takara, Japan) 10 pi, vand 7,7 pi, og primere 0,15 pi (10 pmol /l). PCR-betingelserne var 95 ° C i 10 minutter, efterfulgt af 45 cykler ved 59 ° C i 30 s, 72 ° C i 30 s og 95 ° C i 30 s. Primere til SULF2
methylerede PCR (Takara, Japan) var som følger: fremad 5'TAAGTGTTTTTTTTATAGCGGC 3 ', omvendt 5'TACCGTAATTTCCGCTATC 3'. Primere til SULF2
umethyleret PCR (Takara, Japan) var som følger: fremad 5'GTTTATAAGTGTTTTTTTATAGTGGT3 «, omvendt 5'TACCATAATTTCCACTATCCCT 3 '. Hver batch af reaktionen omfattede en positiv kontrol fra methyltransferase (M.SssI) -behandlede humant genomisk DNA (fuldt methyleret), en negativ kontrol fra DNA-prøver, som var blevet bekræftet som ikke-methyleret og en anden negativ kontrol uden DNA. Samtlige forsøg blev udført in duplo. Resultaterne blev valideret for udvalgte prøver gennem kombineret bisulfit modifikation og bisulfit sekventering.
Statistisk analyse
kemosensitivitet virkningsfuldhed blev analyseret under anvendelse af Fishers eksakte sandsynlighedstest. Alle statistiske tests var to-sidet og en P-værdi på mindre end 0,05 blev betragtet som statistisk signifikans. Statistisk analyse blev udført ved hjælp af SPSS version 16.0.
Resultater
( SULF2M
) blev påvist i 28 patienter, mens de resterende 72 patienter viste umethyleret SULF2 Hotel ( SULF2U
, methylering rate: 28 %). De RT-PCR-amplifikation kurver af SULF2M
og SULF2U
blev vist i figur S1. Der var ingen sammenhæng mellem SULF2
methylering og nogen af patienternes karakteristika, herunder køn, histologi, tumor site, scene, histologisk kvalitet og lymfeknude metastaser.
In vitro
Effektivitet Sats for testet Narkotika
følsomhed over for cisplatin, docetaxel, gemcitabin, irinotecan og pemetrexed testet og godkendt i alle prøverne. De gennemsnitlige hæmning satser for hver testet lægemiddel er anført i tabel 2. Prøver med SULF2U
var mere følsomme over for cisplatin end dem med SULF2M
(48,80% mod 38,15%, P
= 0,02), mens prøver med SULF2M
var mere følsomme over for irinotecan end SULF2U
(53,61% mod 40,92%, P
= 0,01, tabel 2 og figur 1). Der var ingen sammenhæng mellem SULF2
methylering og in vitro
følsomhed over for docetaxel, gemcitabin eller pemetrexed (tabel 2). Som vist i tabel 3, var der ingen sammenhæng mellem de hæmning satser observeret for de anti-cancer agenter og nogen af de kliniske karakteristika.
methylering og cisplatin eller irinotecan følsomhed, blev in vitro
effekt på hver lægemiddelkoncentration undersøgt oprette forskellige cut-off hæmning satser (tabel 4). blev vedtaget fire forskellige afskæringsværdier: 30%, 40%, 50% og 60%. Ved cut-off på 30% hæmning sats, SULF2
methylering viste sig at have en signifikant sammenhæng med cisplatin effekt ( SULF2M
: 57,14%, SULF2U
: 80,56 %, P
= 0,02) og irinotecan effekt ( SULF2M
: 89,29%, SULF2U
: 62,50%, P
= 0,01, figur 2 og tabel 4). Ved cut-off på 40%, 50% og 60% hæmning sats, var der en tendens til, at SULF2M
prøver viste højere irinotecan effekt, men lavere cisplatin effektivitet end den SULF2U
prøver (tabel 4).
Methylering med klinisk respons på kemoterapi
= 0,01). Ingen anden forbindelse mellem kliniske karakteristika og overlevelse blev fundet (tabel 5 og figur 3). SULF2M
blev påvist hos 19 patienter, mens SULF2U
blev fundet i 37 patienter ( SULF2
methylering rate: 34%). En signifikant sammenhæng blev observeret mellem overlevelse og SULF2
methylering status. Den mediane samlede overlevelse var 309 dage (95% CI = 236 til 382 dage) for patienter med SULF2M
, og 481 dage (95% CI = 418 til 490 dage) for dem med SULF2U
( P =
0,02, figur 3). Brug både univariate og multivariate Cox proportional risikoanalyse, der tog hensyn til alder, køn, tumor site, scene, histologisk klasse, lymfeknude metastaser og SULF2
methylering som kovariater, tumorsted og SULF2
methylering forblev signifikante markører for samlet overlevelse i mavecancerpatienter behandlet med platinbaseret kemoterapi (tabel 6).
som en potentiel biomarkør i mavekræft. De store resultaterne af den foreliggende undersøgelse viser, at: (i) antallet af SULF2M
i human gastrisk cancer er omkring 30%; (Ii) de første beviser for SULF2U
er forbundet med cisplatin følsomhed i kræft; (Iii) bevis for SULF2M
er forbundet med irinotecan følsomhed i gastrisk kræft; (Iv) en retrospektiv undersøgelse og godtgørelse for SULF2
methylering i en kohorte af 56 patienter med mavekræft, der tillod os at opdage, at SULF2U
er en uafhængig prognostisk biomarkør i mavecancerpatienter behandlet med en modificeret FOLFOX regime.
var resultatløse. I en undersøgelse, kun 13 tidlige fase bryst og mave kræftformer, hvoraf de fleste var fase I, blev analyseret af semi-kvantitativ RT-PCR for SULF1
udtryk [24]. Det blev vist, at lav udtryk for SULF1
var fremherskende i disse to typer af kræft. I en anden undersøgelse udtryk for både SULF1
og SULF2
mRNA blev bestemt ved real-time RT-PCR for en stor kohorte af mavekræft væv, konstatering af, at SULFs
blev udtrykt ved højere niveauer i mavekræft sammenlignet med normale væv. I den aktuelle undersøgelse fandt vi ved at undersøge SULF2
methylering i 100 mavekræft prøver, at satsen for SULF2M
var ca. 30%, hvilket indikerede, at fremherskende mavekræft var SULF2U
. Nylige undersøgelser af integrerede genomiske analyser afslørede, at SULF2
fungerer som en nedstrøms effektor af p53, og at aktivering af p53 kunne føre til SULF2U
opregulering af SULF2
. Den mulige sammenhæng mellem p53 og SULF2 i vækstfaktor signalvejen foreslog en mulig rolle for SULF2 i kræft udvikling og kræftpatienters udfald [25]. Forholdet mellem SULF2
unmethylation og SULF2
opregulering skal yderligere testet i disse prøver. Den forskellige udtryk niveauer og methylering status SULF2
mellem tumor og normalt væv også nødt til at blive yderligere verificeres.
methylering som kemosensitivitet prædiktor er knappe. Methylering af SULF2
promotor er blevet forbundet med bedre overlevelse resektion lunge adenocarcinom patienter, og også med en marginal forbedring i overlevelse af avanceret NSCLC patienter, der fik standard kemoterapi (hazard ratio = 0,63, P
= 0,07) [18]. Efterfølgende undersøgelser viste, at NSCLC cellelinjer med SULF2M
var 134 gange mere følsom over for topoisomerase I inhibitor end dem med SULF2U
. I den aktuelle undersøgelse har vi påvist, at gastriske tumorer med SULF2M
er mere følsomme over for irinotecan end dem med SULF2U
. Desuden vi demonstreret for første gang, at SULF2
methylering er også en potentiel prædiktiv biomarkør for cisplatin effekt. Gastric tumorer med SULF2U
var mere følsomme over for cisplatin end dem med SULF2M
, og gastrisk cancer patienter med SULF2U
viste lavere dødelighed, når de modtager platinbaseret kemoterapi. Selv om flere prædiktive biomarkører er blevet identificeret for cisplatin, såsom ERCC1 [7], BRCA1 [4], [26], [27] og XRCC1 [28] - [30], i betragtning af de relativt lave responsrater på de almindeligt anvendte platin /5FU-baserede neoadjuverende behandling protokol for avancerede gastrisk karcinom patienter, er et presserende behov for identifikation af biomarkører til at forudsige respons. Opdagelsen af en roman prædiktiv biomarkør, der kan undersøges ved methylering analyse er spændende og supplerende. Grunden SULF2
unmethylation øger tumor følsomhed over for cisplatin kan ligge på ubiquitin konjugerende enzymer (UBE). Det er blevet rapporteret, at SULF2
methylering resulterer i øget ekspression af UBE [18]. UBE tilføjede ubiquitin til visse lysinrester og var involveret i DNA-reparation, mutagenese og celleproliferation. Overekspression af visse UBE'er, ligesom RAD6B, kan resultere i en betydelig modstand mod cisplatin [31]. Yderligere undersøgelser skal udføres for at undersøge den molekylære mekanisme af SULF2M
induceret cisplatin modstand.
methylering og cisplatin følsomhed delvis kan forklare dette fænomen. Behandling af mavekræft med DNMT hæmmere kan resultere i demethylering af SULF2
og dermed øge følsomheden over for cisplatin. Således, ud over den prædiktive virkning, vores data understøtter også optagelse af en DNMT inhibitor i aktuelle behandlingsprotokoller i mindst en delmængde af mavecancerpatienter.
methylering er negativt forbundet med cisplatin følsomhed in vitro
. SULF2
methylering er en potentiel prognostisk biomarkør for mavecancerpatienter behandlet med platinbaseret kemoterapi.
Støtte oplysninger
figur S1.
Den RT-PCR-amplifikation kurver SULF2M og SULF2U. Den røde kurve står for amplifikation af SULF2M, og den blå kurve står for amplifikation af SULF2U. Figur S1a angiver forstærkningen kurver af prøven med SULF2M; Figur S1b viser forstærkning kurver af prøven med SULF2U
doi:. 10,1371 /journal.pone.0075564.s001
(TIF)
Er kvinder mere tilbøjelige til at udvikle lang COVID?
Hvis du er over 50,
Forskere finder en ny måde at beskytte mod sygdom i MS -modellen
Allergi forbundet med højere junkfood -forbrug,
Hvorfor COVID-19-patienter har flere patogene bakterier i næsen
Mennesker kontra vira - Kan vi undgå udryddelse i nær fremtid?
Håndtering af cøliaki
Cøliaki er en immunreaktion mod at spise gluten. Gluten er et protein, der findes i hvede, rug, byg, og triticale. De fleste mennesker tænker på glutens med pasta, brød, pizza skorpe, og lignende, men
Alkohol skader mikrobiomet i munden
En ny undersøgelse har vist, at alkohol ændrer og skader det naturlige bakteriemiljø i munden. Undersøgelsen med titlen, Drikke alkohol er forbundet med variation i det humane orale mikrobiom i en sto
Hvorfor har jeg brug for en koloskopi?
Folk har hørt rædselshistorier nok om koloskopier til at fylde et Halloween -hjemsøgt hus. Selvom du ikke er gammel til at have haft en, du har sikkert hørt om dem. Så, hvis de er så besværlige, hvo