PLoS ONE: SULF2 Метилирование связано с In Vitro цисплатин чувствительности и клинической эффективности для больных раком желудка обработали модифицированными FOLFOX Regimen

Абстрактный

Цель

биомаркеров, способных различать пациентов, являющихся скорее всего, реагировать на определенные химиотерапевтические агенты могли бы улучшить клиническую эффективность. В сульфатазы (SULFs) играют важную роль в патогенезе различных злокачественных опухолей человека. Здесь мы сосредоточили наше исследование на прогностической и прогнозного воздействия SULF2
метилирования при раке желудка.

Методы

Promoter CpG островок метилирование SULF2
анализировалась в 100 образцов желудочного рака. в пробирке
чувствительность к цисплатин, доцетаксел, гемцитабин, иринотекан и пеметрекседом определяли с помощью анализа histoculture реакции лекарственного средства (HDRA). Кроме того, 56 больных раком желудка лечение с модифицированной схемой FOLFOX (раз в две недели оксалиплатина плюс 5-ФУ и фолиевая кислоты) ретроспективный анализ для дальнейшей оценки прогностическое и прогностическое влияние SULF2
метилирования при раке желудка.

Результаты
<р> метилированный SULF2
( SULF2M
) был обнаружен у 28 пациентов, в то время как остальные 72 пациентов показали неметилированным SULF2
( SULF2U
, скорость метилирования: 28%). Образцы с SULF2U
были более чувствительны к цисплатин, чем те, с SULF2M
(степень ингибирования: 48,80% против 38,15%, P
= 0,02), в то время как образцы с SULF2M
были более чувствительны к иринотекана, чем SULF2U
(степень ингибирования: 53,61% против 40,92%, P
= 0,01). Там не было никакой связи между SULF2
метилирование и в пробирке
чувствительность к доцетаксел, гемцитабин и пеметрексед. SULF2
метилирование было установлено, что статистически значимую связь с цисплатин эффективностью ( SULF2M
: 57,14%, SULF2U
: 80,56%, P = 0,02
) и иринотекана эффективность ( SULF2M
: 89,29%, SULF2U
: 62,50%, P
= 0,01). Среди 56 пациентов, получавших модифицированный режим FOLFOX, наблюдалась значимая связь между выживанием и SULF2
статус метилирования ( SULF2M:
309 дней, 95% ДИ = 236 до 382 дней; SULF2U:
481 дней, 95% ДИ = 418 до 490 дней; P
= 0,02). Многофакторный анализ показал, что SULF2
метилирование был независимым прогностическим фактором общей выживаемости в больных раком желудка, получавших химиотерапии на основе платины.

Вывод

SULF2 <бр> метилирование отрицательно связана с цисплатин чувствительностью в пробирке
. SULF2
метилирования может быть новым прогностическим биомаркером для больных раком желудка, получавших химиотерапии на основе платины
<р> Образец цитирования:. Shen J, J Вэй, Ван Н, Ян Y, G Юэ, Ван L , и другие. (2013) SULF2
Метилирование связано с In Vitro
Цисплатин Чувствительность и Клиническая эффективность для больных раком желудка обработали Modified FOLFOX Régimen. PLoS ONE 8 (10): e75564. DOI: 10.1371 /journal.pone.0075564
<р> Редактор: Zhengdong Чжан, Нанкин медицинский университет, Китай
<р> Поступила: 12 июня 2013 года; Принято: 14 августа, 2013 года; Опубликовано: 4 октября 2013
<р> Copyright: © 2013 Shen и др. Это статья с открытым доступом распространяется в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution, которая позволяет неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, что оригинальный автор и источник кредитуются

Финансирование:. Эта работа финансируется за счет грантов от Национального фонда естественных наук Китая (грант № 81220108023 и 81172094) и Top Six Таланты проекта провинции Цзянсу (грант № 2011ws005). Доноры не играет никакой роли в дизайн исследования, сбора и анализа данных, решение о публикации или подготовки рукописи
<р> Конкурирующие интересы:.. Авторы заявили, что не существует никаких конкурирующих интересов

Введение
<р> рак желудка является одной из наиболее частых причин связанных с раком смерти во всем мире [1], [2]. Мультимодальные протоколы лечения, главным образом, на основе платины и 5-фторурацил (5-ФУ), было показано, что продлить жизнь пациента; Тем не менее, при любой комбинации химиотерапевтических средств, скорость реакции составляет только приблизительно 30% -50% [3], [4]. В попытке улучшить клиническую эффективность, является важным и необходимым для выявления биомаркеров, способных различать пациентов, которые, вероятно, будут реагировать на определенные химиотерапевтических агентов [4] - [9].

гепарансульфат протеогликаны (HSPGs ) являются корецепторами для гепаринсвязывающих факторов роста и цитокинов, распределенных на поверхности клетки и во внеклеточном матриксе. Две изоформы внеклеточного гепарансульфат 6-O-endosulfatases (SULFs), SULF1 и SULF2, были обнаружены у млекопитающих. Оба белка секретируются на поверхность клетки, чтобы модулировать сульфатации HSPGs [10]. Хотя предыдущие доклады однозначно подчеркнули важную роль, которую играют SULFs в патогенезе различных злокачественных опухолей человека, мнения о роли SULFs в развитии рака были несколько поляризован. Некоторые доказательства показывают, что SULFs являются негативные регуляторы роста опухолевых клеток, а также, что избыточная экспрессия SULFs в опухолевых клетках ингибирует рост клеток путем дерегулирования несколько факторов, включая FGF-2, HB-EGF и HGF, [11] - [13]. Другие исследования придерживаются мнения, что SULFs являются положительными регуляторами oncogenetic сигнальных путей, в том числе Wnt, BMP, Hedgehog и GDNF [14] - [16], а также повышенная экспрессия SULFs распространена в различных видов рака, в том числе желудка, гепатоцеллюлярный, поджелудочной железы и молочной железы рака, немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ) и опухолей головы и шеи [10], [13], [17] - [20]. Высокая экспрессия SULF2 была связана с плохой выживаемости у больных с гепатоцеллюлярной карциномой и НМРЛ [18], [20]. Имеющиеся данные об уровне статуса и экспрессии метилирования SULFs
при раке желудка, однако, не являются окончательными, и прогностический значение SULFs
для предсказания химиочувствительность остается неизвестным.

в этом исследовании мы проанализировали промотор CpG острова метилирование SULF2
, ген, кодирующий endosulfatase SULF2, и ее объединение с в пробирке
чувствительность к цисплатин, доцетаксел , гемцитабина, иринотекана и пеметрексед в 100 образцах рака желудка человека. С этой целью мы провели серию в пробирке
тесты на чувствительность на свеже-удаленных тканей опухоли желудка и оценивали возможное использование SULF2
статус метилирования для прогнозирования эффективности химиотерапевтического там агентов. Затем мы ретроспективно проанализировали SULF2
метилирование в когорте 56 больных раком желудка, обработанных с помощью модифицированного режима FOLFOX и пришел к выводу, что SULF2U
служит независимым прогностическим биомаркером в больных раком желудка, получавших модифицированный режим FOLFOX.

материалы и методы

Этика Заявление
<р> Все исследования с участием человека были утверждены Human Research Protective комитета Drum Tower Hospital аффилированными медицинской школы по Нанкинский университет и письменное информированное согласие было получено от всех пациентов.

пациенты и ткани Образцы
<р> Зарегистрировавшиеся пациенты были те, которые проходят в гастрэктомию в отделении общей хирургии больницы Tower Drum, Нанкин, Китай в период с августа 2010 года по октябрь 2011 года критерии отбора для зачисления в исследование были включены следующие параметры: (1) возраст > 18 лет; (2) гистологически подтвержденный аденокарциномы желудка, коллоидный или перстень клеток аденокарциномы; (3), кроме рака желудка не предыдущие или сопутствующие злокачественные опухоли; (4) отсутствием в анамнезе химиотерапии или лучевой терапии, либо адъювантной или паллиативной; и (5) адекватная функция всех основных органов. Образцы ткани были извлечены из 100 свеже-удаленных опухолей желудка. Каждая ткань опухоли была разделена на две части: (1) одна часть хранилась в сбалансированном солевом растворе 4 ° C Хэнкса с 1% пенициллина /стрептомицина после сбора, а затем отправляется в лабораторию в течение 15 мин при 4 ° С, для в пробирке
оценка химиочувствительность с помощью анализа histoculture реакции лекарственного средства (HDRA) [21], [22]; (2) оставшаяся часть была сделана в фиксированных формалином погруженных в парафин (FFPE) опухолевые блоки для патологического наблюдения и обнаружения метилирования. Мы ретроспективно проанализировали медицинские записи пациентов и отчеты о хирургии, чтобы определить клинические и гистопатологические данные, включая пол, гистологии, опухоли, стадии, гистологического класса и метастазов в лимфатических узлах. Опухоли были классифицированы в соответствии с Международным союзом по борьбе с раком (UICC) TNM классификации. Письменное информированное согласие было получено от всех пациентов и протоколы для этого исследования были утверждены Human Research Protective комитета башни больницы фотобарабана.

HDRA
<р> процедуры HDRA были выполнены, как ранее сообщал Furukawa и его коллеги [21], [22]. Вкратце, свежие ткани опухоли дважды промывали сбалансированным солевым раствором Хенкса и измельчали ​​на маленькие кусочки примерно 10 мг в весе и 0,5 мм в диаметре, которые затем помещают на подготовленную коллагена (дизайн здоровье, Рочестер, штат Нью-Йорк) поверхности в 24 -Ну микропланшетов. Оптимальные концентрации лекарственных средств, используемые для различения в пробирке
чувствительность и сопротивление было 20 мкг /мл для цисплатин [23], 100 мкг /мл для доцетаксела [22], 50 мкг /мл для гемцитабина [23], 20 мкг /мл для иринотекана [23], и 400 мкг /мл для пеметрекседом [5], в соответствии с его пиковой концентрации в плазме крови у пациентов. Цисплатин, доцетаксел и иринотекан были получены из Цзянсу Hengrui медицины Company (Цзянсу, Китай), в то время как пеметрекседа и гемцитабина были получены от Eli Lilly и Company (Шанхай, Китай). 8 параллельных лунки с культурой использовали для каждой концентрации лекарственного средства, а также для контроля. Планшеты инкубировали в течение 7 дней при 37 ° С в присутствии препаратов, растворенных в среде RPMI 1640, содержащей 20% фетальной сыворотки теленка и оставили в увлажненной атмосфере, содержащей 95% воздуха и 5% CO <суб> 2. После того, как histoculture 100 мкл типа I коллагеназы (0,1 мг /мл, Sigma, Shanghai, China) и 100 мкл 3- (4,5-диметил-2-thiazotyl) -2,5-дифенил-2Н-тетразолия бромид ( МТТ) раствор (5 мг /мл, Sigma, Shanghai, China) добавляли в каждую культуральную лунку и инкубировали в течение еще 16 часов. После экстракции диметилсульфоксида, оптическую плотность раствора в каждую лунку считывали при длине волны 540 нм.

Оценка чувствительности к противораковым средствам в HDRA

Поглощение на грамм культивируемой ткани опухоли рассчитывали из средней оптической плотности ткани из 8 параллельных лунки с культурой, а вес опухолевой ткани была определена перед культурой. Степень ингибирования каждого противоракового средства рассчитывали по следующей формуле: Степень ингибирования (%) = (1-T /C) × 100, где Т представляет собой среднее поглощение обработанной опухоли /вес и С среднюю оптическую плотность контрольной опухоли /вес. Скорости ингибирования отрезные, используемые для различения чувствительного и резистентных случаев были приняты на 30%, 40%, 50% и 60% для каждого препарата испытания. в пробирке
показатель эффективности также оценивается на основе скорости ингибирования светотеневой следующим образом:. Показатель эффективности (%) = количество чувствительных случаев /общее число случаев

Пациентов Химиотерапия
<р> из всех пациентов, 56 с Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) статусом (PS) ≤2 получил модифицированный FOLFOX (комбинацию 5-ФУ и платины) режима химиотерапии после резекции первичной опухоли следующим образом: оксалиплатин 85 мгр ^{-2 плюс фолиевая кислота 200 мгр -2 в качестве 2 ч инфузии на 1 день, а затем 22 ч инфузии 5-ФУ 2000 мгр -2 на дни 1 и 2, каждые две недели. Эти 56 пациентов были далее последовали и их продолжительность жизни была рассчитана с момента постановки диагноза до даты последнего наблюдения или смерти от любой причины.}

ДНК Выделение и модификация
<р> Три секций 7 мкм были получены из первичных опухолевых блоков, содержащих по меньшей мере 80% опухолевых клеток. После того, как окрашивание гематоксилином-эозином, раковые части были микродиссекции и переносили в центрифужную пробирку. ДНК выделяли регулярно и затем химически модифицированы с помощью бисульфита натрия, чтобы преобразовать все неметилированные цитозина в урацила, оставляя methylcytosines неизмененном [18]. Затем их хранили при -20 ° С для дальнейшего анализа.

Метилирование-Specific полимеразная цепная реакция (MSP)
<р> MSP была проведена для определения статуса метилирования SULF2
с помощью системы ABI Prism 7300HT Последовательность Detection (Applied Biosystems). Каждая реакция ПЦР содержала геномную ДНК 2 мкл, SYBR Green PCR Mix (Takara, Japan) 10 мкл, вода 7,7 мкл, а также праймеров 0,15 мкл (10 мкмоль /л). Условия ПЦР были 95 ° С в течение 10 мин, затем 45 циклов при 59 ° С в течение 30 с, 72 ° С в течение 30 с и 95 ° С в течение 30 с. Грунтовки для SULF2
метилированный PCR (Takara, Япония) были следующими: вперед 5 'TAAGTGTTTTTTTTATAGCGGC 3', обратный 5'TACCGTAATTTCCGCTATC 3 '. Грунтовки для SULF2
неметилированным PCR (Takara, Япония) были следующими: вперед 5 'GTTTATAAGTGTTTTTTTATAGTGGT3', обратный 5'TACCATAATTTCCACTATCCCT 3 '. Каждая партия реакции включали положительный контроль от метилтрансферазы (M.SssI) -обработанной геномной ДНК человека (полностью денатурат), отрицательный контроль из образцов ДНК, которые были подтверждены как неметилированным и другим негативным контролем без ДНК. Все тесты были выполнены в двух экземплярах. Результаты были подтверждены для выбранных образцов с помощью комбинированного бисульфита модификации и бисульфита секвенирования.

выражались Статистический анализ
<р> Значения, как средние значения ± стандартное отклонение. Различия в показателях ингибирования между группами оценивали с использованием критерия Стьюдента. Возможные ассоциации SULF2 метилирования с клиническими характеристиками и в пробирке
химиочувствительность эффективности были проанализированы с использованием точного критерия вероятности Фишера. Все статистические тесты были двусторонними, и значение Р менее 0,05 рассматривалось как статистически значимо. Статистический анализ проводили с использованием программы SPSS, версия 16.0.

Результаты

Характеристики Пациентов

Характеристики всех пациентов приведены в таблице 1. Большинство пациентов были мужчины (73%), а преобладающим было гистологическое аденокарцинома (79%). В 35 (35%) пациентов, опухоль находилась в дистальной желудка, у 38 (38%) в проксимальном отделе желудка, и в 27 случаях (27%) во всем желудке. Шестьдесят три (63%) пациентов имели стадию III или IV болезни. метастазами Лимфатические присутствовали в 75 (75%) больных. Метилированный SULF2
( SULF2M
) был обнаружен у 28 пациентов, в то время как остальные 72 больных показали неметилированную SULF2
( SULF2U
, скорость метилирования: 28 %). Кривые амплификации RT-ПЦР SULF2M
и SULF2U
были показаны на рисунке S1. Там не было никакой связи между SULF2
метилирование и любой из характеристик пациентов, включая пол, гистологии, опухоли, стадии, гистологического класса и метастазов в лимфатических узлах.

В пробирке
Эффективность Скорость Испытано наркотиков

в пробирке
чувствительность к цисплатин, доцетаксел, гемцитабин, иринотекан и пеметрекседом был успешно испытан во всех образцах. Скорости ингибирования средние для каждого тестируемого препарата приведены в таблице 2. Образцы с SULF2U
были более чувствительны к цисплатин, чем те, с SULF2M
(48,80% против 38,15%, P
= 0,02), в то время как образцы с SULF2M
были более чувствительны к иринотекана, чем SULF2U
(53,61% против 40,92%, P
= 0,01, Таблица 2 и рисунок 1). Там не было никакой связи между SULF2
метилирование и в пробирке
чувствительность к доцетаксел, гемцитабин или пеметрекседом (таблица 2). Как показано в таблице 3, не было никакой связи между показателями торможения, наблюдаемых для противораковых агентов и любой из клинических признаков.
<Р> Для дальнейшего изучения возможной взаимосвязи между SULF2
метилирование и цисплатин или иринотекана чувствительность, тем в пробирке
показатель эффективности каждой концентрации лекарственного средства исследовали установки различных скоростей ингибирования отсечка (таблица 4). были приняты четыре различных пороговых значений: 30%, 40%, 50% и 60%. На отсечке 30% степень ингибирования, был найден SULF2
метилирование иметь значимую связь с цисплатин эффективностью ( SULF2M
: 57.14%, SULF2U
: 80.56 %, P
= 0,02) и иринотекана эффективность ( SULF2M
: 89,29%, SULF2U
: 62,50%, P
= 0,01, рис 2 и таблица 4). На отсечке 40%, 50% и 60% степень ингибирования, наблюдалась тенденция, что SULF2M
образцы показали более высокую эффективность иринотекана, но ниже цисплатин эффективность, чем SULF2U
образцов (таблица 4).

Ассоциация SULF2
метилирования с клиническим ответом на химиотерапию
<р> Среди 56 пациентов, получавших модифицированный режим FOLFOX, медиана выживаемости составила 434 дней ( диапазон: 111-641 дней). Статистически значимая связь наблюдалась между выживанием и опухоли ( P
= 0,01). Ни одна другая связь между клиническими характеристиками и выживаемости не было обнаружено (Таблица 5 и Рисунок 3). SULF2M
был обнаружен у 19 пациентов, в то время как SULF2U
был обнаружен у 37 пациентов ( SULF2
скорость метилирования: 34%). Статистически значимая связь наблюдалась между выживанием и SULF2
статуса метилирования. Медиана общей выживаемости составила 309 дней (95% ДИ = 236 до 382 дней) для пациентов с SULF2M
и 481 дней (95% ДИ = 418 до 490 дней) для тех, кто с SULF2U <бр> ( P = 0,02
, Рисунок 3). Используя как одномерный и многомерный анализ Кокса пропорциональных рисков, учитывающего возраст, пол, место опухоли, стадии, гистологического класса, метастазов в лимфатических узлах и SULF2
метилирование в качестве регрессоров, опухоли и SULF2
метилирование оставались значительные маркеры общей выживаемости в больных раком желудка, получавших химиотерапии на основе платины (таблица 6).

Обсуждение
<р> Хотя предыдущие исследования показали причастность SULF2 в патогенезе рака, его значение для химиочувствительность прогнозирования остается неясным. Это исследование фокусируется на промотор CpG острова метилирования SULF2
как потенциальный биомаркер рака желудка. Основные результаты данного исследования показывают, что: (я) скорость SULF2M
при раке желудка человека составляет около 30%; (II) первое доказательство для SULF2U
ассоциируется с цисплатин чувствительностью при раке; (III) доказательства для SULF2M
связан с иринотекана чувствительностью при раке желудка; (IV) ретроспективное исследование и проверка для SULF2
метилирование в когорте 56 пациентов с раком желудка, что позволило нам обнаружить, что SULF2U
является независимым прогностическим биомаркером в больных раком желудка лечение с модифицированной схемой FOLFOX.

в предыдущих исследованиях рака желудка, результаты по уровням статуса метилирования и экспрессии SULFs
были неубедительными. В одном исследовании, только 13 на ранней стадии рака молочной железы и рака желудка, большинство из которых были I этап, анализировали с помощью полуколичественного ОТ-ПЦР для SULF1
выражение [24]. Было показано, что низкая экспрессия SULF1
была распространена в этих двух типах рака. В другом исследовании, экспрессия и SULF1
и SULF2
мРНК определяли в режиме реального времени RT-PCR для большой когорте желудка тканей рака, находя, что SULFs <бр> были выражены на более высоких уровнях рака желудка по сравнению с нормальными тканями. В настоящем исследовании мы обнаружили, исследуя SULF2
метилирование в 100 образцах рака желудка, что скорость SULF2M
составляла примерно 30%, что указывало, что преобладают рак желудка были SULF2U
. Недавние исследования комплексных геномных анализов показали, что SULF2
действует как нижестоящим эффектором p53, и что активация р53 может привести к SULF2U
и повышающей регуляции SULF2 <бр>. Возможная связь между р53 и SULF2 в фактора роста сигнального пути предложил возможную роль SULF2 в развитии рака и исхода больных раком [25]. Отношения между SULF2
unmethylation и SULF2
вверх-регулирование должно быть дополнительно протестированы в этих образцах. Различные уровни экспрессии и метилирования статус SULF2
между опухолью и нормальной ткани также должны быть дополнительно проверены.
<Р> Исследования SULF2
метилирование в качестве предсказателя химиочувствительность скудны. Метилирование SULF2
промотор был связан с лучшей выживаемостью пациентов резекции аденокарциномы легких, а также с маргинальной улучшением выживаемости НМРЛ пациентов, получающих стандартную химиотерапию (отношение рисков = 0,63, P <бр> = 0,07) [18]. Последующие исследования показали, что клеточные линии НМРЛ с SULF2M
были 134 раз более чувствительны к топоизомеразы I ингибитора, чем те, с SULF2U
. В настоящем исследовании мы показали, что опухоли желудка с SULF2M
более чувствительны к иринотекана, чем те, с SULF2U
. Кроме того, мы показали в первый раз, что SULF2
метилирование также является потенциальным прогностическим биомаркером цисплатин эффективности. Желудочный опухоли с SULF2U
были более чувствительны к цисплатин, чем те, с SULF2M
и рака желудка у пациентов с SULF2U
показали более низкую смертность при получении химиотерапии на основе платины. Хотя некоторые прогностические биомаркеры были определены для цисплатин, такие как ERCC1 [7], BRCA1 [4], [26], [27] и XRCC1 [28] - [30], учитывая относительно низкие скорости отклика обычно используемой платины /5ФУ на основе неоадъювантной протокол лечения для продвинутых больных раком желудка, выявление биомаркеров для прогнозирования ответа необходимо срочно. Открытие нового прогностического биомаркера, которые могут быть исследованы с помощью анализа метилирования является интригующим и дополнительным. Причина, почему SULF2
unmethylation повышает чувствительность опухоли к цисплатин может лежать на убиквитиновых конъюгации ферментов (ВБО). Сообщалось, что SULF2
Результаты метилирования в повышенной экспрессии ВБО [18]. ВБО добавляют убиквитин к определенным остатков лизина и был вовлечен в репарации ДНК, мутагенеза и клеточной пролиферации. Сверхэкспрессия некоторых массовые рассылки, как RAD6B, может привести к значительному резистентности к цисплатину [31]. Дальнейшие исследования должны проводиться, чтобы исследовать молекулярный механизм SULF2M
индуцированное сопротивление цисплатин.
<Р> значительный синергический эффект цисплатина и ДНК метилтрансферазы (DNMT) ингибиторы 5-аза-ПСТ (КСР) на жизнеспособность клеток наблюдалась в цисплатин-резистентный AGS клеточной линии, но не в группе цисплатин-чувствительной клеточной линии MKN28 [32]. Данные анализа возможности образования колоний показали, что нокдаун DNMT1 вызвало увеличение чувствительности цисплатин [32]. Молекулярный механизм остается неясным. Тем не менее, отношения между SULF2
метилирование и цисплатин чувствительность может частично объяснить это явление. Лечение рака желудка с ингибиторами DNMT может привести к деметилирования SULF2
и, следовательно, увеличить чувствительность к цисплатин. Таким образом, в дополнение к предсказательной воздействия, наши данные также поддерживает включение ингибитора DNMT в современных протоколов лечения по меньшей мере, подмножество больных раком желудка.
<Р> В заключение, наше исследование дает новые доказательства того, что SULF2
метилирование отрицательно связана с цисплатин чувствительностью в пробирке
. SULF2
метилирование является потенциальным прогностическим биомаркером для больных раком желудка, получавших химиотерапии на основе платины.

Поддержка данных Рисунок S1
.
Кривые амплификации RT-ПЦР SULF2M и SULF2U. Красная кривая означает усиление SULF2M, а синяя кривая означает усиление SULF2U. На рисунке S1a показаны кривые амплификации образца с SULF2M; На рисунке S1b показаны кривые амплификации образца с SULF2U
DOI:. 10,1371 /journal.pone.0075564.s001
(TIF)

• PLoS ONE: Активация STAT3 в клетках человека рак желудка с помощью интерлейкина (IL) -6-Type цитокинов Signaling коррелируют …
• PLoS ONE: тетрандрина Индуцирует Митохондрии-опосредованному апоптозу в Человека рака желудка BGC-823 клеток