PLoS One: Association of mTOR ja AKT geenipolymorfismien kanssa herkkyys ja Survival Mahalaukun Cancer

tiivistelmä

Background

fosfoinositidi 3-kinaasi (PI3K) /proteiinikinaasi B (PKB, AKT ) /nisäkkään rapamysiinin kohde (mTOR) signalointireitin on keskeisessä asemassa angiogeneesissä ja solujen kasvua, lisääntymistä, aineenvaihduntaa, migraatiota, ja apoptoosin. Geneettinen monimuotoisuus keskeisiä tekijöitä tämän reitin voi vaikuttaa proteiinien toiminnan ja signaalitransduktion, edistää taudin aloittamista ja etenemistä. Tutkimukset viittaavat siihen, että mTOR
rs1064261 ja AKT
rs1130233 polymorfismit liittyvät riskin ja /tai prognoosi useiden syöpätyyppien. Kuitenkin tämä suhde mahalaukun syöpä (GC) jää epäselväksi. Tutkimuksen tavoitteena oli tutkia roolia mTOR
ja AKT
polymorfismit riskiä ja ennusteen GC.

Methods

Sequenom MassARRAY alusta käytettiin genotyypin 1842 henkilöitä mTOR
rs1064261 T → C ja AKT
rs1130233 G → a polymorfismit. ELISA käytettiin havaitsemaan Helicobacter pylori
vasta-aineita seerumista. Immunohistokemiallista analyysiä käytettiin kokonaisimmuno- ja fosforyloituu mTOR ja AKT proteiineja.

Tulokset

mTOR
rs1064261 (TC + ​​CC) genotyypin ja AKT
rs1130233 (GA + AA) genotyyppi liittyi suurentunut GC miehillä ( P
= 0,049, P
= 0.030). Vuonna H
. pylori
-negatiivinen yksilöitä, AKT
rs1130233 GA ja (GA + AA) genotyypit liittyvät suurentunut gastriitin (AG; P
= 0,012, P
= 0,024). Huomattavaa on, että AKT
rs1130233 (GA + AA) genotyyppi osoitettiin merkittävä vuorovaikutus H
. pylori
sairauden etenemistä terveiden verrokkien (CON) AG ( P
= 0,013) ja AG GC ( P
= 0,049). Lisäksi yksilöiden AKT
rs1130233 variantti, ne, jotka ovat Helikobakteeri-positiivisten ryhmässä oli korkeampi fosforyloidun AKT (p-AKT) ilmaisua. AKT
rs1130233 genotyypin todettiin liittyvän kliinis muuttujat, kuten imusolmuke etäpesäke ja alkoholin juominen ( P
< 0,05).

Johtopäätös

mTOR
rs1064261and AKT
rs1130233 polymorfismien liittyvän kohonneeseen GC riski miehillä ja lisääntyi AG riski H
. pylori
-negatiivisilla yksilöitä. Merkittävä vuorovaikutus välillä oli AKT
rs1130233 genotyypin ja H
. pylori
infektion CON → AG → GC taudin etenemistä. AKT
rs1130233 genotyyppi vaikutti p-AKT-proteiinin ilmentymistä H
. pylori
infektoiduista yksilöitä.

Citation: kauha Y, Li Y, Xu Q, Liu J-w, Xing C-z, Xie X-d, et ai. (2015) yhdistys mTOR
ja AKT
geenipolymorfismien kanssa herkkyys ja Survival mahasyövän. PLoS ONE 10 (8): e0136447. doi: 10,1371 /journal.pone.0136447

Editor: Masaru Katoh, National Cancer Center, JAPAN

vastaanotettu: 02 maaliskuu 2015; Hyväksytty: 03 elokuu 2015; Julkaistu: 28 elokuu 2015

Copyright: © 2015 Piao et al. Tämä on avoin pääsy artikkeli jaettu ehdoilla Creative Commons Nimeä lisenssi, joka sallii rajoittamattoman käytön, jakelun ja lisääntymiselle millä tahansa välineellä edellyttäen, että alkuperäinen kirjoittaja ja lähde hyvitetään

Data Saatavuus: kaikki asiaankuuluvat tiedot kuuluvat paperin ja sen tukeminen Information tiedostoja.

Rahoitus: Tätä työtä tukivat avustusta National Key Basic Research Program of China (973 Program viite no. 2010CB529304), National Natural Science Foundation of China ( Ref No.31200968).

kilpailevat edut: kirjoittajat ovat ilmoittaneet, etteivät ole kilpailevia intressejä ole.

Johdanto

Mahasyöpää (GC) on yksi yleisimmistä syövistä maailmanlaajuisesti ja suurin syy syöpään liittyvien kuolemaan [1]. Aloittaminen ja kehittäminen GC on monivaiheinen prosessi vaikuttavat geneettiset ja ympäristötekijät. Tutkimukset ovat osoittaneet, että eksogeeniset liittyvät tekijät, kuten Helicobacter pylori
(HP) infektio, ruokavalio tottumukset, tupakointi, alkoholin juominen, ja taloudelliset tekijät vaikuttavat mahasyövän [2]. Samanlaisissa ympäristöolosuhteissa, yksilöiden eri geneettistä taustaa kärsivät eri syöpäriskiä monipuolisia kliinisiä tuloksia. Tähän asti vuorovaikutus geneettisten ja ympäristötekijöiden kanssa mahasyövän on pääosin tuntemattomia.

polymorfismit ovat luokan geneettisiä tekijöitä, jotka osallistuvat mahasyövän ja määrittää yksilöiden välisiä vaihteluita GC riskiä. Geneettisten polymorfismien voi heikentää luontaista suojamekanismeja ja lisätä aiheuttamia vahinkoja ympäristön karsinogeenien. Varustamot alttiiden genotyyppien ovat suurempi riski sairastua syöpään kuin ne, joilla resistenttien genotyyppien samanlaisissa olosuhteissa. Siksi geneettiset tekijät on ratkaiseva rooli GC riskin ja kliiniseen tulokseen.

fosfoinositidi 3-kinaasi (PI3K) /proteiinikinaasi B (PKB, AKT) /nisäkkään rapamysiinin kohde (mTOR) reitin säätelee solujen eri toimintoja, kuten kasvua, proliferaatiota, migraatiota, ja apoptoosin. Tapia et ai. raportoitu, että PI3K /AKT /mTOR -systeemi aktivoituu GC ja että useimmat proteiinit (fosforyloituu ja fosforyloitumaton muodot) tutkittu tähän mennessä tämän reitin yliekspressoituvat kasvainkudoksissa [3]. MTOR on keskeinen jäsen PI3K /AKT /mTOR-reitin ja ydin metabolisen signalointi molekyyli [4, 5]. Yhden emäksen monimuotoisuus (SNP: t) voivat vaikuttaa mTOR ilmaisun ja transkriptioaktiviteettia muuttaen siten proteiinin toimintaan. Tähän mennessä, yhteensä 14 polymorfismien tämä geeni on tutkittu, joista kolme SNP: iden (rs2295080, rs1883965, ja rs2536) on yleisimmin raportoitu. Rs2295080 polymorfismi promoottorialueen on raportoitu vähentävän munuaissyövän [6], GC [7], ja eturauhassyövän [8] mukaan vähen- tämisessä endogeenisen proteiinin ilmentymisen. Rs1883965 polymorfismi on liitetty suurentunut riski GC [9] ja ruokatorven squamous syöpä [10]. Lisäksi rs2536 polymorfismi liittyy huomattavasti suurentunut eturauhassyövän [8]. Lisäksi mTOR
rs11121704 polymorfismi liittyy huonompi kliinisten parametrien (kuolema, etäpesäke, ja kemoterapiaa vastus) [11]. On 45 eksonien mTOR
geeni, ja rs1064261 polymorfismi sijaitsee eksonissa 18. T → C vaihtelun sijaitsee rajalla eksonin 18 ja intronin 19, mutta sen suhde tauti on edelleen epäselvä .

AKT
geeni on kriittinen solujen selviytymisen ja koodaa tärkeän alavirtavaikuttajainhibiittorit PI3K / AKT Twitter / mTOR
joka säätelee avain cellular toimintoja kuten sokeriaineenvaihduntaan ja proteiinisynteesiä. AKT
vaihtoehtoisesti tunnetaan AKT1
, on viisi laajalti tutkittu polymorfismien (rs3803300, rs1130214, rs2494732, rs2498804, ja rs1130233); neljä ensimmäistä on liitetty riskiä tai ennusteeseen nenänielun karsinooma, suun okasolusyöpä, ja ei-pienisoluinen keuhkosyöpä. Rs1130233 polymorfismi sijaitsee eksonissa 8 ja G → Variaatio sijaitsee rajalla eksonin 8 ja introni 7. AKT
1 AA haplotyyppi sekä rs1130233 ja rs2494732 raportoidaan antaa kohonnut nenänielun karsinooma [12]; haplotyyppi, joka sisältää variantin alleelien rs1130214 ja rs3803300 polymorfismien lisää huomattavasti alttiutta suun okasolusyöpä [13]. Harjoittajien (GT + GG) genotyyppi AKT
1 rs2498804 tai CT /TT genotyyppi AKT
1 rs2494732 todettiin lisääntynyt riski aivometastaasi ei-pienisoluisen keuhkosyöpä [14]. AKT
1 rs3803300, rs1130214, ja rs2494732 on huomattavia vaikutuksia eloonjäämiseen ei-pienisoluinen keuhkosyöpä potilaat: potilaiden kanssa rs3803300 G-alleeli rs1130214 G-alleelin oli lyhyempi yleinen (OS) ja taudista vapaan eloonjäämisen (DFS) kertaa [15].

Vaikka vaihtelut mTOR
ja AKT
tärkeä rooli mahasyövän, ei tutkimus on selvittänyt suhde AKT
polymorfismi GC riskiä ja ennustetta. Lisäksi mekanistinen yhteys mTOR
rs1064261 ja sekä syövän alttiuden ja selviytymisen ovat tuntemattomia. Selvittämiseksi, onko mTOR
ja AKT
polymorfismit voivat toimia riskien ja /tai ennustetekijöitä merkkiaineita GC, tutkimme mTOR
rs1064261 ja AKT
rs1130233 polymorfismien suhteen GC riskien ja niiden vuorovaikutus H
. pylori
on tapauskontrollitutkimuksessa 1842 aiheista. Vuonna 205 yksilöiden riittävästi tietoa, kliinis muuttujaa tutkia yhdistyksen näiden kahden polymorfismien GC ennustetta ja näin tunnistaa uusia biomarkkereita GC riskin ja ennusteen.

Materiaalit ja menetelmät

Tutkimusasetelma ja tutkimuspopulaatio

suunnittelussa tämä hyväksyi tutkimuksen Human eettisen komitean ensimmäisen Affiliated sairaala China Medical University (Shenyang, Kiina). Kukin osallistuja toimitti kirjallisen tietoisen suostumuksen aikana epidemiologinen tutkimus. Tutkimusasetelma käsitti kaksi osaa (polymorfismi ja proteiini taso analyysit) ja assosiaatiot polymorfismien ja sairauden riskin ja ennusteen tutkittiin. GC riskianalyysi, GC potilaat olivat ensimmäisen Affiliated sairaala China Medical University, joka on saatu leikkausta toiminta resektio tai gastroskopisten diagnoosi /hoito vuosien 2004 ja 2013. AG potilaiden ja verrokkien rekrytoitiin terveystarkastus ohjelman Zhuanghe, Liaoningin Province, vuodesta 2002 vuoteen 2013. Kaikki diagnoosit perustuivat gastroskopisten ja histopatologisia tutkimuksia.

lisäksi GC tapausta luokiteltiin suoliston tyyppi ja hajanainen tyyppi perustuu Lauren luokitusta [16, 17]; AG luokittelu ja lavastus perustuivat uuteen Sydney järjestelmä [18, 19]. Ohjaus osanottajilla oli normaali mahan havainnot tai gastriitti vain. Tieto Tupakointi, alkoholin kulutus ja suvussa osti "kasvotusten" kyselytutkimuksen. Tupakoitsijoita ja alkoholijuomien määriteltiin seuraavat: jos yksi savustettu useammin kuin kerran päivässä, ja jos tämä kesti yli 1 vuosi, niin tämä yksilö määriteltiin tupakoitsijoita, ja tämä tilanne sisältyvät tupakoijilla ja entiset tupakoitsijat, jotka lopetti tupakoinnin enemmän kuin 1 vuosi. Henkilöt, jotka eivät täytä tätä tilannetta määriteltiin tupakoimattomia. Jos yksi kulutetaan yksi pullo olutta tai viidesosa kiloa nestettä päivässä, ja jos tämä tilanne kesti yli 1 vuosi, niin tämä henkilö pidettiin juovat. Yksilöt, jotka eivät sovi tähän standardia määriteltiin nondrinkers. Paasto laskimoverta saatiin jokaisen osallistujan ja säilytettiin -20 ° C: ssa kuin seerumin ja hyytynyt soluja.

edelleen arvioimista suhde polymorfismien kanssa kliinis parametrien ja selviytymistä GC, suoritimme ennustetyövälineenä analyysi GC potilaiden joille riittävästi kliinistä tietoa oli saatavilla. Histologia tiedot arvioitiin mukaan terveysjärjestön kriteerien ja kasvaimen solmu-etäpesäke (TNM) lavastus leikkauksen jälkeinen patologisten näytteiden tehtiin mukainen seitsemäs painos International Union Against Cancer (UICC) /American sekakomitean Cancer (AJCC) ( 2010) kriteerit. Potilaat, joilla on kaukainen etäpesäke ennen leikkausta, jotka saivat sädehoitoa tai kemoterapiaa ennen leikkausta, ja ne, joilla riittävästi tietoa prognostisiin analyysiä suljettiin pois. Herkkyysanalyysi suoritettiin testata, onko ulkopuolelle potilailla oli vaikutusta selviytymisen analyysin. Seuranta kaikille potilaille valmistui toukokuussa 2014.

SNP genotyypityksen

Genominen DNA uutettiin verinäytteistä käyttäen fenoli-kloroformilla menetelmä [20] ja laimennettu työskentelemään pitoisuuteen 50 ng /pl mTOR
rs1064261 T → C ja AKT
rs1130233 G → genotyypin. Näytteet sijoitettiin satunnaisesti 384-kuoppalevyille ja analysoitiin sokkona tavalla taudin tilasta. Genotyypitys suoritettiin käyttäen Sequenom MassARRAY alustan (Sequenom, San Diego, California, USA) valmistajan ohjeiden mukaisesti. Laadunvalvontaan, 5% näytteistä suorittivat toistuvat genotyypitys; Tulokset olivat 100% johdonmukaisia.

H. pylori serologia tutkimus

serologiset analyysi havaitsemiseksi H
. pylori
infektio suoritettiin käyttäen ELISA ( H
. pylori
IgG ELISA kit, BIOHIT, Helsinki, Suomi), kuten aiemmin on kuvattu [21]. Lukema > 34 entsyymi immuuni yksiköiden katsottiin osoittavan H
. pylori
positiivisuus.

havaitseminen mTOR ja AKT proteiinien kudoksen

immunohistokemiallinen analyysi määrittämiseen käytettiin ilmaisua koko ja fosforyloidun mTOR ja AKT (p-mTOR ja p -AKT) proteiinit 65 formaliinilla kiinnitetyt, parafiiniin upotettujen GC kudosnäytteistä. Kudosnäytteet leikattiin 4 um: n paksuisia leikkeitä ja kiinnitettiin poly-L-lysiinillä päällystettyihin objektilaseille. Sen jälkeen, kun sitruunahappo antigeenin haku, primaarinen vasta-aine inkuboitiin kudosleikkeiden 4 ° C: ssa yön yli (laimennus pitoisuus: mTOR ja p-mTOR 1: 100, AKT 1: 300, ja p-AKT 01:50, kaikki hankittiin Cell Signaling Technology). Kolmen 5 min pesua fosfaattipuskurisuolaliuoksessa, kudoksen leikkeitä inkuboitiin biotinyloidun sekundaarisen vasta-aineen (Maixin, Fujian, Kiina) ja streptavidiini-biotiini-peroksidaasi 10 minuutin ajan kutakin 37 ° C: ssa. Negatiivisia kontrolleja primaarinen vasta-aine korvattiin PBS-puskurilla.

Tilastollinen

Tilastollinen analyysi suoritettiin SPSS (versio 18.0) tilasto-ohjelmalla (SPSS, Chicago, IL, USA). Hardy-Weinberg tasapaino (HWE) ensin arvioitiin terveillä verrokeilla. Oikaistu kertoimet suhdeluvut ja 95% luottamusväli (CI) varten suhde sekä polymorfismien ja sairauden riskin laskettiin monen muuttujan logistinen regressio, oikaistu sukupuolen, iän, ja H
. pylori
infektion tila. Vuonna kerrostunut analyysi, kun ositettu iän, sukupuolen ja H
. pylori
infektiotilanteesta oikaistiin; kun ositettu sukupuolen, iän ja H
. pylori
infektiotilanteesta oikaistiin; ja kun stratifioitu H
. pylori
tartunnan tilan, sukupuolen ja iän säädettiin. Uskottavuussuhde Testi suoritettiin arvioimiseksi vuorovaikutuksen vaikutukset genotyypin ja H
. pylori
sairauden riskin vertaamalla mallin mukana vain tärkeimmät vaikutukset sukupuoli, ikä, H
. pylori
tila, ja genotyyppi täydellä malli (joka sisältää myös vuorovaikutus aikavälillä genotyypin kanssa H
. pylori
tila). Pearsonin χ ^{2 testiä käytetään arvioimaan suhdetta eri genotyyppien kanssa kliinis parametrien GC. Fisherin menetelmää käytettiin, kun odotettu taajuus oli vähemmän kuin viisi. Kaplan-Meier menetelmää käytettiin visualisoimaan OS genotyypin ryhmä. Log-rank-testi käytettiin tutkimaan eroja elossapysymisaikajakaumat. Univariable ja monimuuttuja Coxin suhteellisten riskien mallia tehtiin laskea raakaöljyn tai säätää vaarojen suhde ja 95% CI kunkin genotyypin arvioida vaikutusta eloonjäämiseen tai ilman säätö sekoittavat tekijät. Logistinen regressioanalyysi käytettiin tutkimaan vaikutusta polymorfismien proteiinien ilmentyminen säätää sukupuolen, iän, ja H
. pylori
tila. Kaksisuuntainen P
arvoja < 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.}

Tulokset

Baseline potilasryhmät

demografiset ja kliiniset ominaisuudet 1842 henkilöt, jotka osallistuvat riskianalyysiin käsittää 483 GC potilaita, 686 AG potilaita ja 673 tervettä verrokkia esitetään taulukossa 1. sekä SNP olivat läsnä HWE; genotyyppijakauman on lueteltu taulukossa 2. tulos Herkkyysanalyysi esitetään S1 taulukossa, joka varmisti poissuljettu potilaat ollut vaikutusta selviytymisen analyysin. Väestörakenteen ja kliiniset ominaisuudet 205 GC potilaiden keskuudessa selviytymisen analyysin kuten ikä, sukupuoli, Borrmann luokittelu, Lauren luokitus, TNM, kasvumalli, invaasio syvyys, imusolmuke etäpesäke, tupakointi, alkoholin, suvussa, ja H
. pylori
infektio on esitetty taulukossa 3.

Association of SNP GC ja AG riski

Monimuuttujalähettimet logistisen regression käytettiin tutkimaan yhdistys mTOR
rs1064261and AKT
rs1130233 GC ja AG riski. Ei ollut merkittävää eroa mTOR
rs1064261 ja AKT
rs1130233 riskistä CON → AG AG → GC, CON → GC, tai CON + AG → GC etenemistä (taulukko 2) .

kerrostuminen analyysi miehistä (taulukko 2), kantajia TC genotyyppi mTOR
rs1064261 oli 1,55-kertainen riski GC verrattuna AG ( P
= 0,049, 95% luottamusväli 1,00-2,38); A-alleelin on AKT
rs1130233 Siirretään 1,32-kertaiseksi, 1,29-kertaiseksi, ja 1,30-kertainen nousu AG → GC, CON → GC, ja (CON + AG) → GC eteneminen vastaavasti yli G alleeli ( P
= 0,013, 95% CI 1,06-1,64; P
= 0,038, 95%: n luottamusväli 1,01-1,64; ja P
= 0,008, 95% CI 1,07-1,58, S2 taulukko). H
. pylori
-negatiivinen ryhmä, AKT
rs1130233 GA genotyyppi liittyi 1,69-kertainen riski AG verrattuna CON ( P
= 0,012, 95% CI 1,12-2,54, taulukko 2). Lisäksi mitään merkittävää yhteyttä välillä havaittiin näiden kahden polymorfismien ja suoliston-tyypin tai diffuusi-tyyppinen GC yleisessä ja ositettu analyysejä (S3 ja S4 taulukot).

Suoritimme sitten vuorovaikutuksen analyysi mTOR
rs1064261 ja AKT
rs1130233 kanssa H
. pylori
infektio. Tulokset osoittivat, että AKT
rs1130233 (GA + AA) genotyyppi oli merkittävä vuorovaikutus H
. pylori
infektion CON → AG and → GC etenemistä ( P
= 0,013 ja P
= 0,049; taulukko 4). Kuitenkaan mitään merkittävää vuorovaikutusta mTOR
rs1064261 kanssa AKT
rs1130233 havaittiin CON → AG → GC etenemistä yleisessä ja ositettu analyysit (S5 taulukko). Lisäksi ei ollut merkittävää vuorovaikutusta näiden kahden polymorfismien ja H
. pylori
infektion CON → AG → GC etenemistä (taulukko 4).

Associations of SNP kanssa kliinis parametrien GC potilaiden

analyysi suhteesta mTOR
rs1064261 ja AKT
rs1130233 kanssa kliinis parametrit GC potilailla ehdotti, että AKT
rs1130233 GA ja (GA + AA) variantti genotyyppien esiintyy useammin GC potilailla ilman imusolmuke etäpesäke kuin niillä, joilla imusolmuke etäpesäke (GA 89,1% vs. 71,1%, P
= 0,012; GA + AA 92,2% vs. 81,1%, P
= 0.030). GA, AA, ja (GA + AA) genotyypit olivat tavallisempia juovat kuin nondrinkers (GA 61,0% vs. 95,8%, P
= 0,047; AA 63,6% vs. 88,9%, P
= 0,047; GA + AA 76,8% vs. 96,9%, P
= 0,038, taulukko 5). Kuitenkaan mitään merkittävää yhteyttä ei havaittu mTOR
rs1064261 variantteja ja kliinis parametrit GC potilailla.

Ei yhdistyksen välillä SNP ja GC potilaan selviytymistä

Univariable ja monimuuttuja Coxin suhteellisten riskien malleja tehtiin arvioimaan vaikutuksen mTOR
rs1064261 ja AKT
rs1130233 polymorfismien GC eloonjäämiseen (taulukko 6). Koska Lauren luokitus, TNM, kasvumalli, invaasio syvyyttä, ja imusolmuke etäpesäke liittyivät merkittävästi eloonjäämisen ( P
< 0,05, on esitetty taulukossa 3), niitä pidettiin oikaistuna covariables Coxin suhteellista vaarat regressiomallin. Tulokset osoittivat merkittävää yhdistyksen välillä SNP ja GC ennusteeseen (taulukko 6). Samoin on kerrostettu analyysi ei osoittanut mitään merkittävää yhteyttä välillä SNP genotyypin ja GC ennusteeseen (S6 taulukko).

SNP genotyyppi korreloi koko ja fosforyloidut proteiinien ilmentyminen

ilmentyminen koko ja fosforyloidun mTOR ja AKT proteiinit analysoitiin kudoksissa eri ryhmien osallistujien (kuvio 1). Kaiken kaikkiaan ei ollut merkittävää yhdistyksen välillä mTOR
rs1064261 tai AKT
rs1130233 polymorfismi ja kokonaista tai fosforyloitu mTOR ja AKT proteiineja. H
. pylori
-positiivinen alaryhmä, osuus p-AKT-positiivisten solujen oli huomattavasti korkeampi variantti genotyyppi ryhmässä kuin villityypin ryhmä ( P
= 0,045; taulukko 7).

keskustelu

tässä tutkimuksessa raportoimme ensimmäistä kertaa yhdistys mTOR
rs1064261 ja AKT
rs1130233 polymorfismien GC riski ja ennuste . Miehillä, mTOR
rs1064261 (TC + ​​CC) genotyyppi ja A-alleelin on AKT
rs1130233 liittyi lisääntynyt GC riski. Vuonna H
. pylori
-negatiivinen miehillä, AKT
rs1130233 (GA + AA) genotyyppi liittyy suurentunut AG riski. Lisäksi AKT
rs1130233 (GA + AA) genotyyppi osoittivat merkittävää vuorovaikutusta H
. pylori
infektion CON → AG → GC etenemistä. Variantti genotyyppi AKT
rs1130233 oli yhteydessä lisääntyneeseen p-AKT-proteiinin ilmentymisen. AKT
rs1130233 polymorfismi liittyi myös imusolmuke etäpesäke ja alkoholin juomisen. Nämä havainnot tarjoavat kokeellisia todisteita tukemaan mTOR ja AKT mahdollisina biomarkkerit tietyntyyppisten GC ja myös antaa vihjeitä vuorovaikutusta H
. pylori
infektio ja mTOR /AKT signalointi.

mTOR
geeni sijaitsee ihmisen kromosomissa 1p36.2 ja koodaa 289 kDa mTOR-proteiinin, joka koostuu 2549 aminohaposta . MTOR on jäsenenä inositoli kinaasin (PIK) perhe ja on seriini /treoniini-kinaasi toimintaa. Huomasimme, että mTOR
geeni (TC + ​​CC) variantti genotyyppi liittyy suurentunut GC riski miehillä, mikä viittaa siihen, että se osallistuu syövän synnyn. MTOR pääasiassa olemassa sytoplasmassa normaaliolosuhteissa ja siirtyy tumaan aktivoinnin jälkeen säännellä loppupään tavoitteet eukaryoottinen initiaatiofaktoria 4E (eIF-4E) sitovan proteiinin 1 (4E-BP1) ja ribosomien 40S pientä alayksikköä S6 proteiinikinaasi (p70S6K) [22 -24]. Jälkimmäinen on olennainen jäsen PI3K /AKT /mTOR-reitin ja keskeisen aineenvaihdunnan signalointi molekyyli. MTOR yhdistää erilaisia ​​solujen signaalien kasvutekijöitä ja ravinto- ja energia asema; Siten on tärkeää biologisten tehtävien angiogeneesiä ja solujen kasvua, lisääntymistä, aineenvaihduntaa, migraatiota, ja apoptoosin [25]. Sen tehtävänä liittyy läheisesti muutosta normaalin syöpäsoluihin ja syövän solujen lisääntymistä. Geneettinen vaihtelut geenien mTOR signalointireitin ( PI3K
, AKT
, ja PTEN
) voivat edistää syövän synnyn [26-28]. mTOR
SNP raportoidaan liittyvän alttiuteen GC [7, 9], munuaissolukarsinooma [6], eturauhassyöpä [8], ja ruokatorven suomuinen syöpä [10]. Nämä SNP saattavat vaikuttaa tasot mTOR ilmaisun ja transkriptioaktiviteettia muuttaen siten proteiinin toimintaan. G-alleelin mTOR
rs2295080 polymorfismi liittyy pienempi GC riski, mahdollisesti johtuvat vähentää promoottorin toimintaa ja mRNA: n ilmentymisen [7]. Toinen mTOR
polymorfismi sijaitsee promoottorialueen, rs1883965 G → A, antaa tuotteelle lisääntyneiden riskien GC [9] ja ruokatorven squamous syöpä [10]. Tulosten perusteella näyttää, että (TC + ​​CC) genotyyppi liittyy lisääntynyt GC riski miehillä, vaikka mitään vaikutusta proteiinin ilmentymistä ei havaittu. mTOR
voi edistää solujen lisääntymistä ja hieman "onkogeenista" ominaisuuksia. Variantti genotyyppi saattaa olla vieläkin enemmän kasvaimia synnyttävän aktiivisuuden. Koska miehet ovat todennäköisesti altistuvat useille riskien tekijöitä (tupakointi, juominen ja epäterveelliset elintavat), kantajia tiettyjen genotyyppi voi olla altis suurentunut GC.

AKT
, V- AKT
hiiren thymoma viruksen onkogeenin homologi, kartoittaa ihmisen kromosomiin 14q32.32 ja koodaa 56 kDa: n proteiinin, joka koostuu 480 aminohaposta [15]. AKT on tärkeä efektori PI3K /AKT /mTOR signaalireitin, ja geneettinen mutaatio tai epänormaali proteiinin ilmentyminen voi muuttaa erilaisia ​​soluprosessin kuten muuttoliike, proliferaatio, kasvu ja selviytyminen. Lisäksi AKT aktivaatio on osallisena solujen lisääntymisen ja apoptoosin, jotka liittyvät syöpään aloittamista ja etenemiseen [29]. AKT
SNP: t on raportoitu liittyvän alttiuteen ja /tai ennusteeseen erilaisten syöpätyyppien, kuten nenänielun karsinooma [12], suun okasolusyöpä [13, 30], ei-pienisoluinen keuhkosyöpä [14 15], haiman adenokarsinooma [31], ja GC [32] kautta vaikutuksia proteiinin ilmentymisen ja transkriptionaalisen aktiivisuuden. Wang et ai. tutkittiin neljä SNP lukien rs1130233 kiinalaisessa väestöstä [13], ja totesi, että kolme polymorfismit liittyivät alttiuteen suullinen okasolusyöpä tai DFS, mutta ei ole merkittävää yhteyttä varten rs1130233. Zhang et ai. raportoitu, että AA haplotyyppien AKT
rs1130233 ja rs2494732 sille lisääntynyt nenänielun karsinooman riski [12] ja että jotkut AKT
haplotyyppien aiheuttaa lisääntynyt AKT-proteiinin ilmentymistä [33, 34], mikä johtaa muuttuneisiin solujen muuttoliike ja lisääntymistä. Siksi AKT
rs1130233 alleelin olisi lisännyt lisääntymisaktiivisuus. Tässä tutkimuksessa havaitsimme, että AKT
rs1130233 alleelin siirrettävä suurentunut GC miehillä. Yleensä miehet ovat korkeammat GC esiintyvyys ja korkeampi GC kuolleisuus kuin aikuisten naisten [35]. Korkean altistumisen taso miehillä ympäristön riskitekijöiden (tupakointi, juominen ja epäterveelliset elämäntavat) lisää niiden alttiutta GC [36]. Koska A-alleelin voisi olla vahvempi lisääntymisaktiivisuus, yhdistetty vaikutus AKT
polymorfismi ja sukupuoli saattaa osittain selittää havaitun suuren GC riskejä AKT
rs1130233 polymorfismin miehillä.

lisäksi huomasimme, että H
. pylori
-negatiivinen alaryhmä, AKT
rs1130233 (GA + AA) genotyyppi oli yhteydessä lisääntyneeseen AG riski. AKT
rs1130233 polymorfismi havaittiin merkittävä vuorovaikutus H
. pylori
infektion CON → AG → GC etenemistä. On yleisesti hyväksytty, että H
. pylori
on merkittävä syy GC. H
. pylori
elinvoimaiset tekijät voivat aiheuttaa solujen epänormaali lisääntyminen ja apoptoosia säätelevä signalointipolkujen (mukaan lukien PI3K /AKT); tämä on viimeaikainen tutkimus hotspot [37-39]. Tabassam et ai. ehdotti, että AKT fosforylaatio aiheuttama H
. pylori
virulenssitekijät CAG PAI ja OipA säätelee solunsisäisiä signaaleja vastuussa sarjan solutoiminnoille mukana mahasyövän. Erityinen edistäminen AKT seriinin 473 tai treoniinin 308 fosforylaatio CAG PAI ja OipA voivat häiritä alavirtaan lisääntymistä ja apoptoosia signaaleja. Yhdistelmä CAG PAI ja OipA riittää aktivoimaan PI3K /PDK1 reitin ja AKT /ERK /alavirran signalointia [39]. Nakayama et ai. kertoi, että H
. pylori
virulenssitekijäksi VacA indusoi β-kateniinin toiminto aktivoimalla PI3K /AKT-reitin ja inaktivoimalla GSK33β [38], mikä säätelevät solujen lisääntymistä, erilaistumista ja apoptoosia. Nämä tiedot viittaavat siihen, että vuorovaikutus H
. pylori
aktivoidulla AKT on biologinen toiminto. Kuitenkin kumpikaan SNP mukana tässä tutkimuksessa eikä H
. pylori
infektion yhteydessä nämä SNP osoittivat merkittävää vuorovaikutusta GC. Kaiken kaikkiaan nämä tiedot korostavat tärkeä rooli AKT
rs1130233 polymorfismi PI3K /mTOR /AKT-reitin. Lisäksi H
. pylori
-positiivinen alaryhmä, joilla AKT
rs1130233 variantti genotyyppi oli lisääntynyt p-AKT ilme. Koska tämä polymorfismi osoitti vuorovaikutus H
. pylori
infektio, vaikutus tämän polymorfismin proteiinien ilmentyminen voi syntyä ainoastaan ​​läsnäollessa H
. pylori
infektio. Geneettinen mutaatio johtaa epänormaali AKT ilmentyminen raportoidaan edistää solujen vaeltamiseen ja lisääntymistä [40, 41], mikä saattaa selittää, miksi tämä polymorfismi lisäsi riskiä AG. Tulevaisuuden suuren mittakaavan tutkimuksia tarvitaan vahvistamaan nämä tulokset.

Vertasimme myös genotyyppi jakautuminen näiden kahden polymorfismien erilaisten ryhmien kliinis parametreja ja arvioidaan niiden suhdetta GC ennusteeseen. Huomasimme, että AKT
rs1130233 GA, AA, ja (GA + AA) genotyypit olivat tavallisempia juovat kuin nondrinkers. Siksi oletetaan, että juovat kanssa AKT
rs1130233 GA, AA, ja (GA + AA) genotyypit ovat alttiimpia GC. Avan et ai. [31] ilmoitetaan, että AKT
rs1130233 alleelin liittyy alentunut säilymisen haiman adenokarsinooma potilaille, jotka saattavat johtua pienentää AKT1
mRNA ja proteiini ilmaisun ja vähentää apoptoosia tehokkuutta [33 , 42]. AKT
rs1130233 alleelin on Riskigenotyyppi syöpään, mahdollisesti yhdessä alkoholin juominen alkoholia oli yksi lisääntynyt riskitekijöitä GC [43-46]. Kuitenkaan mitään merkittävää yhteyttä näiden kahden SNP GC eloonjäämistä havaittiin Coxin regressioanalyysiä. Suhteellisen pieni otoskoko, muistaa bias saattaa esiintyä tapauskontrollitutkimuksessa, ja lopputulos tila saattanut aiheuttaa tapauksia muuttamaan altistusominaisuudet. Siksi lisäkokeita ja laajoja tutkimuksia tarvitaan vahvistaa tuloksemme.

Tämä tutkimus on joitakin rajoituksia. Ensinnäkin, otoskoko oli suhteellisen pieni, erityisesti selviytyminen ja proteiinien ilmentyminen analyysit, jotka molemmat tarvitsevat lisävahvistusta suurissa populaatioissa. Toiseksi, vain OS analysoitiin eloonjäämisen analyysin ja muiden ennustetekijöiden parametreja, kuten ilman taudin etenemistä ovat myös perusteltuja. Kolmanneksi eloonjääminen analyysi suoritetaan vain osajoukko koko GC potilaat, jotka voivat tehdä todennäköisyys valikoiva bias, ja suuri otoskoko ennustetekijöiden tutkimus tulisi suorittaa lähitulevaisuudessa. Neljänneksi toiminnallinen kokeita tarvitaan selvittämään perussairaudesta mekanismi.

Johtopäätös

Yhteenvetona suhde mTOR
rs1064261 ja AKT
rs1130233 polymorfismit GC herkkyys ja käyttöjärjestelmä on osoitettu ensimmäistä kertaa. mTOR
rs1064261 ja AKT
rs1130233 polymorfiat liittyi merkittävästi GC riskiä miehillä. AKT
rs1130233 polymorfismi ja H
. pylori
infektio havaittiin merkittävä vuorovaikutusta CON → AG → GC etenemistä. AKT
rs1130233 polymorfismi oli yhteydessä lisääntyneeseen p-AKT-proteiinin ilmentymistä H
. pylori
-positiivisille yksilöitä.

• PLoS ONE: Ravinnon rasvan saanti ja mahalaukun syövän riski: Meta-analyysi havainnointitutkimukset
• PLoS Computational Biology: Discovery of Drug Synergia mahasyövän Cells ennustama Looginen Modeling