PLoS ONE: Vereniging van mTOR en AKT Gene Polymorfismen met Gevoeligheid en overleving van maagkanker

De abstracte

Achtergrond

De fosfoinositide 3-kinase (PI3K) /proteïne kinase B (PKB, AKT) /zoogdieren doelwit van rapamycin (mTOR) signaalweg speelt een cruciale rol in angiogenese en celgroei, proliferatie, metabolisme, migratie, differentiatie en apoptose. Genetische diversiteit in de belangrijkste factoren van deze route kan eiwit functie en signaaltransductie beïnvloeden, bij te dragen aan de ziekte initiatie en progressie. Studies suggereren dat mTOR
rs1064261 en AKT
rs1130233 polymorfismen zijn geassocieerd met het risico en /of prognose van meerdere soorten kanker. Echter, deze relatie met maagkanker (GC) blijft onduidelijk. Het doel van deze studie was om de rol van de mTOR Kopen en AKT
polymorfismen van het risico en de prognose van GC.

Methods

De Sequenom onderzoeken MassARRAY platform werd gebruikt tot genotype 1.842 individuen voor mTOR
rs1064261 T → C en AKT
rs1130233 G → A polymorfismen. ELISA werd gebruikt om Helicobacter pylori
antilichamen in serum te detecteren. Immunohistochemische analyse werd gebruikt om de totale en gefosforyleerd mTOR en AKT eiwitten op te sporen.

Resultaten

De mTOR
rs1064261 (TC + ​​CC) genotype en de AKT
rs1130233 (GA + AA) genotype werden in verband gebracht met een verhoogd risico van GC bij mannen ( P
= 0,049, P
= 0.030). In H
. pylori
-negatieve individuen, de AKT
rs1130233 GA en (GA + AA) genotypen waren gerelateerd aan een verhoogd risico op atrofische gastritis (AG; P
= 0,012, P
= 0.024). Met name de AKT
rs1130233 (GA + AA) genotype vertoonden een significante interacties met H
. pylori
in de progressie van de ziekte van gezonde controles (CON) naar AG ( P
= 0,013) en van AG naar GC ( P
= 0,049). Bovendien, voor personen met de AKT
rs1130233 variant, die in de H. pylori-positieve groep had hogere niveaus van gefosforyleerd AKT (p-AKT) expressie. De AKT
rs1130233 genotype bleek geassocieerd te worden met klinisch-pathologische parameters, waaronder lymfeklier metastase en alcohol drinken ( P Restaurant < 0,05).

Conclusie

mTOR
rs1064261and AKT
rs1130233 polymorfismen werden geassocieerd met een verhoogd risico GC bij mannen en een verhoogde AG risico in H
. pylori
-negatieve individuen. Een significante interactie bestond tussen de AKT
rs1130233 genotype en H
. pylori
infectie in CON → AG → GC progressie van de ziekte. De AKT
rs1130233 genotype beïnvloed p-AKT eiwitexpressie in H
. pylori
geïnfecteerde individuen

Visum:. Piao Y, Li Y, Xu Q, Liu J-w, Xing C-z, Xie X-d, et al. (2015) Vereniging van mTOR Kopen en AKT
Gene Polymorfismen met Gevoeligheid en overleving van maagkanker. PLoS ONE 10 (8): e0136447. doi: 10.1371 /journal.pone.0136447

Editor: Masaru Katoh, National Cancer Center, JAPAN

Ontvangen: 2 maart 2015; Aanvaard: 3 augustus 2015; Gepubliceerd: 28 augustus 2015

Copyright: © 2015 Piao et al. Dit is een open toegang Artikel gedistribueerd onder de voorwaarden van de Creative Commons Attribution License, die onbeperkt gebruik, distributie en reproductie maakt in elk medium, op voorwaarde dat de oorspronkelijke auteur en de bron worden gecrediteerd

Data Beschikbaarheid: Alle relevante gegevens zijn binnen het papier en de Ondersteunende informatie bestanden

Financiering:. Dit werk werd ondersteund door subsidies van de National Key Basic Research Program van China (. 973 Program ref geen 2010CB529304), de National Natural Science Foundation of China ( Ref No.31200968)

Competing belangen. de auteurs hebben verklaard dat er geen tegenstrijdige belangen bestaan ​​

Introductie

Maagkanker (GC) is één van de meest voorkomende vormen van kanker. wereldwijd en een belangrijke oorzaak van kanker-gerelateerde sterfte [1]. De initiatie en ontwikkeling van GC is een meerstaps proces door genetische en omgevingsfactoren. Studies hebben aangetoond dat exogene omgevingsfactoren zoals Helicobacter pylori
(HP) infectie, dieet gewoonten, roken, alcohol drinken en economische factoren dragen bij aan de maag carcinogenese [2]. Onder vergelijkbare milieuomstandigheden, individuen met verschillende genetische achtergrond te lijden verschillende risico op kanker met diverse klinische resultaten. Tot nu toe is de interactie van genetische en omgevingsfactoren met maag carcinogenese grotendeels onbekend zijn.

polymorfismen zijn een klasse van genetische factoren die deelnemen aan de maag carcinogenese en het bepalen van inter-individuele variaties in GC risico. Genetische polymorfismen kan verzwakken intrinsieke beschermingsmechanismen en het verhogen van de schade veroorzaakt door het milieu kankerverwekkende stoffen. Dragers van vatbare genotypes zijn op een groter risico op het ontwikkelen van kanker dan degenen met resistente genotypen onder soortgelijke omstandigheden. Daarom genetische factoren spelen een cruciale rol in GC risico's en de klinische uitkomst.

De fosfoinositide 3-kinase (PI3K) /proteïne kinase B (PKB, AKT) /zoogdieren doelwit van rapamycin (mTOR) route regelt verschillende cellulaire functies, waaronder groei, proliferatie, migratie en apoptose. Tapia et al. gemeld dat de PI3K /AKT /mTOR route wordt geactiveerd GC en dat de meeste eiwitten (gefosforyleerd en gefosforyleerde vormen) studeerde nu toe in deze route zijn overexpressie in tumorweefsels [3]. MTOR is een belangrijk lid van de PI3K /AKT /mTOR-route en een kern metabole signaalmolecuul [4, 5]. Single nucleotide polymorphisms (SNPs) van invloed kunnen zijn mTOR expressie en transcriptie-activiteit, waardoor eiwitten functie te veranderen. Tot nu toe zijn in totaal 14 polymorfismen in het gen bestudeerd, waarvan er drie SNPs (rs2295080, rs1883965 en rs2536) zijn wijdst gerapporteerd. De rs2295080 polymorfisme in het promotorgebied gerapporteerd aan het risico van niercelcarcinoom beperken [6], GC [7], en prostaatkanker [8] door neerwaarts reguleren endogene eiwitexpressie. De rs1883965 polymorfisme is geassocieerd met een verhoogd risico van GC [9] en slokdarmkanker squameuze kanker [10]. Bovendien wordt rs2536 polymorfisme betrekking op een significant verhoogd risico op prostaatkanker [8]. Bovendien, de mTOR
rs11121704 polymorfisme is geassocieerd met een slechtere klinische parameters (dood, metastase en chemotherapie weerstand) [11]. Er zijn 45 exons in de mTOR
gen en het rs1064261 polymorfisme in exon 18. De T → C variatie ligt op de grens van exon 18 en intron 19, maar zijn relatie met de ziekte is nog onduidelijk .

de AKT
gen is van cruciaal belang voor de overleving van de cel en codeert voor een belangrijk stroomafwaartse effector van de PI3K / AKT Twitter / mTOR
traject dat regelt sleutel celfuncties waaronder glucose en de eiwitsynthese. AKT
, als alternatief bekend als AKT1
, heeft vijf bestudeerde polymorfismen (rs3803300, rs1130214, rs2494732, rs2498804 en rs1130233); de eerste vier zijn gekoppeld aan het risico of prognose nasofarynxcarcinoom, oraal plaveiselcelcarcinoom, en niet-kleincellig longcarcinoom. De rs1130233 polymorfisme in exon 8 en de G → A variant ligt op de grens van exon 8 en intron 7. AKT
1 AA haplotype voor zowel rs1130233 en rs2494732 is gerapporteerd dat zij een verhoogd risico verlenen nasofarynxcarcinoom [12]; het haplotype met variante allelen van rs1130214 en rs3803300 polymorfismen verhoogt de gevoeligheid voor orale plaveiselcelcarcinoom [13]. Dragers van de (GT + GG) genotype van AKT
1 rs2498804 of CT /TT genotype van AKT
1 rs2494732 bleken een verhoogde kans op hersenmetastasen van niet-kleine cel longkanker [14]. AKT
1 rs3803300, rs1130214 en rs2494732 hebben significante effecten op de overleving bij niet-kleincellige longkanker-patiënten: patiënten met de rs3803300 G-allel en rs1130214 G-allel had een kortere totale overleving (OS) en ziektevrije overleving (DFS) keer [15].

Hoewel de variaties in de mTOR Kopen en AKT
spelen een belangrijke rol in de maag carcinogenese, geen enkele studie heeft de relatie van onderzocht AKT
polymorfisme met GC risico en de prognose. Bovendien is de mechanische koppeling tussen mTOR
rs1064261 en zowel kanker gevoeligheid en overleving zijn onbekend. Of mTOR Kopen en AKT
polymorfismen kunnen als risico en /of prognostische markers voor GC dienen, onderzochten we mTOR
rs1064261 en AKT
rs1130233 helderen polymorfismen ten opzichte van GC risico en hun interacties met H
. pylori
in een case-control studie van 1842 proefpersonen. In 205 personen met voldoende gegevens werden clinicopathologische parameters geanalyseerd om de vereniging van deze twee polymorfismen met GC prognose te verkennen en daarmee identificeren nieuwe biomarkers voor GC risico en de prognose.

Materialen en methoden

Study ontwerp en studiepopulatie

het ontwerp van deze studie werd goedgekeurd door de Human ethische commissie van de eerste Affiliated Hospital van de China Medical University (Shenyang, China). Elke deelnemer verstrekt schriftelijk toestemming tijdens een epidemiologisch onderzoek. De opzet van het onderzoek bestond uit twee delen (polymorfisme en eiwitgehalte analyses) en de associaties tussen polymorfismen en risico van de ziekte en de prognose werden onderzocht. In de GC-risico-analyse, de GC patiënten waren afkomstig uit de First Affiliated Hospital van de China Medical University, die chirurgie operatie resectie of gastroscopisch diagnostiek /behandeling verkregen tussen 2004 en 2013. De AG patiënten en controles werden gerekruteerd uit een health check-programma in Zhuanghe, Liaoning provincie, tussen 2002 en 2013. Alle diagnoses waren gebaseerd op gastroscopisch en histopathologische onderzoeken

Daarnaast werden GC gevallen ingedeeld in intestinaal type en diffuus soort gebaseerd op rangschikking van Lauren's [16, 17].; AG classificatie en staging waren gebaseerd op het nieuwe systeem Sydney [18, 19]. Controle deelnemers hadden normale maag bevindingen of gastritis alleen. De informatie over de rookgewoonte, alcoholgebruik en familiegeschiedenis werden verworven door "face to face" enquête. De rokers en alcoholische dranken werden gedefinieerd als volgt: als iemand rookte meer dan een keer per dag en als dit duurde meer dan 1 jaar, dan is deze persoon gedefinieerd als rokers, en deze situatie onder de huidige rokers en ex-rokers die roken voor meer was gestopt dan 1 jaar. Personen die deze situatie niet voldeed werden gedefinieerd als niet-rokers. Als men verbruikt een fles bier of een vijfde pond sterke drank per dag en als deze situatie meer dan 1 jaar heeft geduurd, dan is deze persoon werd beschouwd drinkers. Personen die niet deze norm paste werden gedefinieerd als niet-drinkers. Nuchter veneus bloed werd verkregen van elke deelnemer en bewaard bij -20 ° C als serum en geklonterde cellen.

De verhouding van polymorfismen met klinisch-pathologische parameters en overleving van GC verder te evalueren, voerden we een voorspellende analyse GC patiënten voor wie voldoende klinische gegevens beschikbaar was. Histologie gegevens werden beoordeeld op basis van Health Organization criteria en tumor-node-metastase (TNM) enscenering van postoperatieve pathologische monsters werd uitgevoerd volgens de 7de editie van de van de International Union Against Cancer (UICC) /Amerikaanse Joint Committee on Cancer (AJCC) ( 2010) criteria. Patiënten met metastasen op afstand voor de operatie, die radiotherapie of chemotherapie voor de operatie, en die met onvoldoende informatie voor prognostische analyses uitgesloten. Een gevoeligheidsanalyse uitgevoerd om te testen of de uitgesloten patiënten werking als de overlevingsanalyse. Follow-up voor alle patiënten werd voltooid in mei 2014.

SNP genotypering

Genoom DNA werd geëxtraheerd uit bloedmonsters met behulp van het fenol-chloroform methode [20] en verdund tot het werken concentratie van 50 ng /ul voor mTOR
rs1064261 T → C en AKT
rs1130233 G → A genotypering. Monsters werden willekeurig in 384 putjes gebracht en geanalyseerd op een blinde wijze ziektestatus. Genotypering werd uitgevoerd met behulp van de Sequenom MassARRAY platform (Sequenom, San Diego, California, USA) volgens de instructies van de fabrikant. Voor kwaliteitscontrole, 5% van de monsters onderging herhaalde genotypering; de resultaten waren 100% overeen.

H. pylori serologie onderzoek

serologie analyse op te sporen H
. pylori
infectie werd uitgevoerd met behulp van ELISA ( H
. pylori
IgG ELISA-kit, BIOHIT, Helsinki, Finland), zoals eerder beschreven [21]. Een lezing van > 34 enzyme immuun eenheden werd beschouwd om aan te geven H
. pylori
positiviteit.

Detectie van mTOR en AKT eiwitten in weefsel

immunohistochemische analyse werd gebruikt om de expressie van totale en gefosforyleerd AKT en mTOR (p-mTOR en p bepalen -Akt) eiwitten bij 65 formaline gefixeerde, in paraffine ingebedde weefselmonsters GC. Weefsel monsters werden gesneden in 4-urn dikke secties en gemonteerd op glasplaatjes-poly-l-lysine gecoate. Na citroenzuur antigen retrieval, werd primair antilichaam geïncubeerd met weefselsecties bij 4 ° C gedurende de nacht (concentratie verdunning: mTOR en p-mTOR 1: 100, AKT 1: 300 en p-AKT 01:50, allen werden gekocht bij Cell Signaling Technologie). Na driemaal 5 minuten wassen in fosfaatbuffer zoutoplossing, werden weefselcoupes geïncubeerd met gebiotinyleerd secundair antilichaam (Maixin, Fujian, China) en streptavidine-biotine-peroxidase gedurende 10 min elk bij 37 ° C. Voor negatieve controles werd primair antilichaam vervangen door PBS-buffer.

Statistische analyse

Statistische analyse werd uitgevoerd met SPSS (versie 18.0) statistische software (SPSS, Chicago, IL, USA). Hardy-Weinberg evenwicht (HWE) werd voor het eerst geëvalueerd in gezonde controles. Gecorrigeerde odds ratio's en 95% betrouwbaarheidsintervallen (CI's) voor de relatie tussen beide polymorfismen en risico van de ziekte werden berekend met multivariabele logistische regressie, met een correctie voor geslacht, leeftijd, en H
. pylori
infectiestatus. . In een gelaagde analyse, wanneer gestratificeerd naar leeftijd, het geslacht en de H
pylori
infectiestatus werden aangepast; . Wanneer gestratificeerd naar geslacht, de leeftijd en de H
pylori
infectiestatus werden aangepast; en wanneer gestratificeerd door H
. pylori
infectiestatus, het geslacht en de leeftijd werden aangepast. De likelihood ratio test werd uitgevoerd om de interactie-effecten van het genotype en H
beoordelen. pylori
over de ziekte van risico's door het vergelijken van het model waarbij slechts de belangrijkste effecten van geslacht, leeftijd, H
. pylori
status en genotype met de volle model (ook met de interactie looptijd van genotype met H
. pylori
status). Pearson χ ^{2 test werd gebruikt om de relatie van verschillende genotypen met de klinische en parameters van GC evalueren. Fisher's exacte methode werd gebruikt wanneer de verwachte frequentie was minder dan vijf. De Kaplan-Meier-methode werd gebruikt voor het OS te visualiseren door genotype groep. De log-rank test werd gebruikt om de verschillen in overleving distributies te onderzoeken. Univariabele en multivariabele Cox proportional hazards modellen werden uitgevoerd om het ruwe of gewijzigde risico's en 95% CI berekeningen voor elke genotype om het effect op de overleving schatten met of zonder correctie voor verstorende factoren. Logistische regressieanalyse werd gebruikt om het effect van polymorfismen op eiwitexpressie aangepast geslacht, leeftijd staand en H
. pylori
-status. Tweezijdig P
waarden. ≪ 0,05 werden beschouwd als statistisch significant}

Resultaten

Baseline patiënt kenmerken

De demografische en klinische kenmerken van de 1842 personen die bij de risicoanalyse die GC 483 patiënten, 686 AG patiënten en 673 gezonde controles worden getoond in Tabel 1. Beide SNPs aanwezig HWE waren; het genotype verdeling wordt weergegeven in Tabel 2. Het resultaat van de gevoeligheidsanalyse is getoond in tabel S1, die geverifieerd werden patiënten geen effect op de overleving analyse had. De demografische en klinische kenmerken van de 205 GC patiënten betrokken bij de survival analyse zoals leeftijd, geslacht, Borrmann classificatie, classificatie Lauren's, TNM stadium, groeipatroon, invasie diepte, lymfeklieren metastase, roken, drinken, familiegeschiedenis, en H
. pylori
infectie zijn weergegeven in tabel 3.

Vereniging van SNPs met GC en AG risico

multivariabele logistische regressie werd gebruikt om de associatie van mTOR rs1064261and AKT
rs1130233 met GC en AG risico. Er was geen significant verschil van mTOR
rs1064261 en AKT
rs1130233 over het risico van CON → AG, AG → GC, CON → GC, of ​​CON + AG → GC progressie (tabel 2) .

In de gelaagdheid analyse van de mannen (tabel 2), dragers van de TC genotype van mTOR
rs1064261 had een 1,55-voudig verhoogd risico op GC, vergeleken met AG ( P
= 0,049, 95% CI 1,00-2,38); het allel van AKT
rs1130233 verleende 1,32-voudig, 1,29 maal en 1,30-voudige toename in AG → GC, CON → GC en (CON + AG) → GC progressie respectievelijk via G allel ( P
= 0,013, 95% BI 1,06-1,64; P
= 0,038, 95% CI 1,01-1,64, en P
= 0,008, 95% CI 1,07-1,58, S2 Table). In de H
. pylori
-negatief groep, de AKT
rs1130233 GA genotype was geassocieerd met een 1,69-voudig verhoogd risico op AG, vergeleken met CON ( P
= 0,012, 95% CI 1,12-2,54, tabel 2). Bovendien werd geen significante associatie gevonden tussen deze twee polymorfismen en intestinale-type of diffuse type GC in de globale en gestratificeerde analyses (S3 en S4 Tables).

Vervolgens voerden een interactie analyse voor mTOR
rs1064261 en AKT
rs1130233 met H
. pylori
infectie. De resultaten gaven aan dat de AKT
rs1130233 (GA + AA) genotype had een significante interactie met H
. pylori
infectie in CON → AG en AG → GC progressie ( P
= 0,013 en P
= 0,049; Tabel 4). Er zijn echter geen significante interactie van de mTOR
rs1064261 met AKT
rs1130233 werd waargenomen voor CON → AG → GC progressie in de algehele en gestratificeerde analyses (S5 tabel). Bovendien was er geen significante interactie tussen deze twee polymorfismen en H
. pylori
infectie in CON → AG → GC progressie (tabel 4).

Verenigingen van SNPs met klinisch-pathologische parameters van GC patiënten

De analyse van de relatie van de mTOR
rs1064261 en AKT
rs1130233 met clinicopathologische parameters in GC patiënten gesuggereerd dat de AKT
rs1130233 GA en (GA + AA) variant genotypes komen vaker voor in GC patiënten zonder lymfklier metastase dan in die met lymfekliermetastasen (GA 89,1% vs. 71,1%, P
= 0,012; GA + AA 92,2% vs. 81,1%, P
= 0.030). De GA, AA, en (GA + AA) genotypes kwamen vaker voor bij drinkers dan bij niet-drinkers (GA 61,0% vs. 95,8%, P
= 0,047; AA 63,6% vs. 88,9%, P
= 0,047; GA + AA 76,8% vs. 96,9%, P
= 0,038; Tabel 5). Er werd echter geen significant verband waargenomen tussen de mTOR
rs1064261 varianten en clinicopathologische parameters in GC patiënten.

Geen verband tussen SNPs en GC overleving van patiënten

univariabele en multivariabele Cox proportionele risico's modellen werden uitgevoerd om het effect van de mTOR
rs1064261 en evalueren AKT
rs1130233 polymorfismen op GC overleving (tabel 6). Omdat indeling Lauren's TNM, groeipatroon, invasie diepte en lymfeknoop metastase waren significant geassocieerd met overleving ( P
< 0,05, Tabel 3), ze werden beschouwd aangepast co-variabelen in het Cox proportional hazards regressie model. De resultaten toonden geen significante associatie tussen de twee SNPs en GC prognose (Tabel 6). Op dezelfde manier heeft een gelaagde analyse geen significant verband tussen SNP genotype en GC prognose (S6 Table) aantonen.

SNP genotype correleert met de totale en gefosforyleerde eiwitten meningsuiting

De expressie van totale en gefosforyleerd mTOR en AKT eiwitten werd geanalyseerd in weefsels van de verschillende groepen deelnemers (figuur 1). Over het algemeen was er geen significant verband tussen de mTOR
rs1064261 of AKT
rs1130233 polymorfisme en volledig of gefosforyleerd mTOR en AKT eiwitten. In de H
.
pylori-positieve subgroep, het aantal p-AKT-positieve cellen was de variant genotype groep significant hoger dan in de wild-type groep ( P
= 0,045; Tabel 7).

Discussie

In deze studie rapporteren we voor het eerst een vereniging van de mTOR
rs1064261 en AKT
rs1130233 polymorfismen met GC risico en de prognose . Bij mannen, de mTOR
rs1064261 (TC + ​​CC) genotype en allel van AKT
rs1130233 waren geassocieerd met een verhoogd risico GC. In H
. pylori
-negatief mannetjes, de AKT
rs1130233 (GA + AA) genotype was geassocieerd met een verhoogd risico AG. Bovendien, de AKT
rs1130233 (GA + AA) genotype een significante interactie met H
. pylori
infectie in CON → AG → GC progressie. De variant genotype van AKT
rs1130233 werd geassocieerd met een verhoogde p-AKT eiwitexpressie. De AKT
rs1130233 polymorfisme werd ook geassocieerd met lymfeklier metastase en alcohol drinken. Deze bevindingen verschaffen experimenteel bewijs mTOR en AKT ondersteunen als potentiële biomarkers van specifieke GC en ook aanwijzingen voor de interactie tussen H
. pylori
infectie en mTOR /AKT signalering.

De mTOR
gen bevindt zich op de menselijke chromosoom 1p36.2 en codeert de 289 kDa mTOR-eiwit, dat bestaat uit 2549 aminozuren . MTOR is een lid van fosfatidylinositol kinase (PIK) familie en heeft serine /threonine kinase activiteiten. We vonden dat de mTOR
gen (TC + ​​CC) variant genotype was geassocieerd met een verhoogd risico GC bij mannen, suggereert dat het betrokken is bij carcinogenese. MTOR bestaat voornamelijk in het cytoplasma bij normale omstandigheden en gaat de kern na activering naar de stroomafwaartse doelwitten eukaryote initiatiefactor 4E (eIF-4E) bindend eiwit 1 (4E-BP1) reguleren en ribosoom 40S kleine subeenheid S6 proteïne kinase (p70S6K) [22 -24]. Dit laatste is een belangrijk lid van de PI3K /AKT /mTOR route en een centrale metabole signaalmolecuul. MTOR integreert diverse cellulaire signalen van groeifactoren en voedings- en energiestatus; Zo heeft belangrijke biologische functies in angiogenese en celgroei, proliferatie, metabolisme, migratie, differentiatie en apoptose [25]. Zijn functie is nauw verbonden met de transformatie van normale kankercellen en kanker celproliferatie. Genetische variaties in genen van de mTOR signaleringsroute ( PI3K
, AKT
en PTEN
) kan bevorderen carcinogenese [26-28]. mTOR
SNPs worden in verband gebracht met gevoeligheid voor GC [7, 9], niercelcarcinoom [6], prostaatkanker [8], en esophageal squameuze kanker [10]. Deze SNPs invloed kunnen zijn op het niveau van mTOR expressie en transcriptie-activiteit, waardoor het eiwit functie te veranderen. Het G-allel van mTOR
rs2295080 polymorfisme is geassocieerd met een verlaagd risico GC met mogelijk van lagere promotoractiviteit en mRNA expressie [7]. Een andere mTOR
polymorfisme in de promotor regio, rs1883965 G → A, het karakter van verhoogde risico's van GC [9] en slokdarmkanker squamous kanker [10]. Onze resultaten suggereren dat de (TC + ​​CC) genotype geassocieerd is met een verhoogd risico GC bij mannen, hoewel geen effect op eiwitexpressie werd waargenomen. mTOR
kunnen celproliferatie en enigszins "oncogene" kenmerken te promoten. De variant genotype zou zelfs meer oncogene activiteit. Als mannen hebben meer kans te worden blootgesteld aan meervoudige belichting risicofactoren (roken, drinken en ongezonde leefgewoonten), kunnen dragers van bepaalde genotype vatbaar zijn voor een verhoogd risico op GC zijn.

AKT
de v- AKT
murine thymoma viraal oncogeen homoloog, toegewezen aan menselijk chromosoom 14q32.32 en codeert voor een 56 kDa eiwit, dat bestaat uit 480 aminozuren [15]. AKT is een belangrijke effector van de PI3K /AKT /mTOR signaalroute en genetische mutatie of abnormale eiwitexpressie een grote celprocessen zoals migratie, proliferatie, groei en overleving veranderen. Bovendien wordt AKT activering betrokken bij celproliferatie en apoptose, die verband houden met kanker initiatie en progressie [29]. AKT
SNPs worden in verband gebracht met gevoeligheid voor en /of de prognose van verschillende soorten kanker, waaronder nasofarynxcarcinoom [12], oraal plaveiselcelcarcinoom [13, 30], niet-kleincellig longcarcinoom [14 , 15], pancreatische ductale adenocarcinoom [31] en GC [32] via effecten op eiwitexpressie en transcriptionele activiteit. Wang et al. studeerde vier SNPs waaronder rs1130233 in een Chinese bevolking [13], en vond dat drie polymorfismen werden geassocieerd met de gevoeligheid voor orale plaveiselcelcarcinoom of DFS, maar met geen significante relatie voor rs1130233. Zhang et al. gemeld dat AA haplotypen van AKT
rs1130233 en rs2494732 verleende een verhoogd risico nasofarynxcarcinoom [12] en sommige AKT
haplotypes veroorzaken verhoogde AKT eiwitexpressie [33, 34], wat leidt tot veranderde cellulaire migratie en proliferatie. Daarom is de AKT
rs1130233 A-allel zou hebben proliferatie activiteit toegenomen. In deze studie hebben we vastgesteld dat de AKT
rs1130233 A-allel verleende een verhoogd risico op GC bij mannen. In het algemeen, mannetjes hebben een hogere incidentie GC en GC een hogere sterfte dan volwassen vrouwen [35]. Het hoge niveau van blootstelling van de mannen aan risicofactoren van het milieu (roken, drinken en ongezonde leefgewoonten) verhoogt hun gevoeligheid voor GC [36]. Als de A-allel sterkere proliferatie activiteit, het gecombineerde effect van AKT
polymorfisme en geslacht gedeeltelijk de waargenomen hoge GC risico in verband met de AKT
rs1130233 polymorfisme bij mannen zou kunnen verklaren zou kunnen hebben.

Bovendien, vonden we dat in de H
. pylori
-negatief subgroep, de AKT
rs1130233 (GA + AA) genotype was geassocieerd met een verhoogd risico AG. De AKT
rs1130233 polymorfisme vertoonden een significante interactie met H
. pylori
infectie in CON → AG → GC progressie. Het is algemeen aanvaard dat H
. pylori
is een belangrijke oorzaak van GC. H
. pylori
virulente factoren kunnen abnormale proliferatie en apoptose induceren door middel van het reguleren van signaalwegen (waaronder PI3K /AKT); Dit is een recent onderzoek hotspot [37-39]. Tabassam et al. gesuggereerd dat de AKT fosforylering geïnduceerd door de H
. pylori
virulentiefactoren CAG PAI en OIPA regelt intracellulaire signalen die verantwoordelijk zijn voor een reeks van cellulaire functies die betrokken zijn bij de maag carcinogenese. De specifieke bevordering van AKT serine 473 en threonine 308 fosforylering door cag PAI en OIPA stroomafwaarts proliferatie en apoptose signaal verstoren. Een combinatie van cag PAI en OIPA volstaat om de PI3K /PDK1 route en AKT /ERK /downstream signaling [39] te activeren. Nakayama et al. gemeld dat H
. pylori
virulentie factor VacA induceert β-catenine-functie door het activeren van de PI3K /AKT-route en het inactiveren van GSK33β [38], waardoor het reguleren van celproliferatie, differentiatie en apoptose. Deze gegevens suggereren dat de interactie van H
. pylori hotels met geactiveerde AKT heeft een biologische functie. Echter, geen van beide SNPs in deze studie, noch H
.
pylori infectie in het kader van deze SNPs een significante interactie met GC. Over het algemeen, deze gegevens onderstrepen de belangrijke rol van de AKT
rs1130233 polymorfisme in het PI3K /mTOR /AKT-route. Bovendien, in de H
. pylori
-positieve subgroep, die met de AKT
rs1130233 variant genotype was toegenomen p-AKT expressie. Aangezien dit polymorfisme toonde een interactie met de H
. pylori
infectie, het effect van dit polymorfisme op proteïne expressie kan alleen ontstaan ​​in de aanwezigheid van H
. pylori
infectie. Een genetische mutatie die tot abnormale AKT expressie gerapporteerd celmigratie en proliferatie [40, 41], wat kan verklaren waarom dit polymorfisme verhoogd risico van AG bevorderen. Toekomstige grootschalige studies zijn nodig om deze resultaten te bevestigen.

We vergeleken ook het genotype verdeling van deze twee polymorfismen in groepen met verschillende klinische en pathologische parameters en beoordeeld hun relatie met de GC prognose. We vonden dat de AKT
rs1130233 GA, AA, en (GA + AA) genotypes kwamen vaker voor bij drinkers dan bij niet-drinkers. Daarom veronderstellen dat drinkers met AKT
rs1130233 GA, AA, en (GA + AA) genotypen zijn gevoeliger voor GC. Avan et al. [31] meldde dat de AKT
rs1130233 A-allel is geassocieerd met een verminderde overleving van de pancreas ductaal adenocarcinoom patiënten, wat kan worden toegeschreven aan verminderde AKT1
mRNA en eiwit expressie en een verminderde apoptosis efficiency [33 , 42]. De AKT
rs1130233 Een allel is een risico genotype voor kanker, eventueel in combinatie met alcohol drinken als alcohol was een van de verhoogde risicofactoren van GC [43-46]. Er zijn echter geen significante associatie van deze twee SNPs met GC overleving werd gevonden door Cox regressie-analyse. Als gevolg van de relatief kleine steekproef, kan de recall vooroordelen bestaan ​​in de case-control studie, en de status uitkomst kan hebben veroorzaakt gevallen om hun blootstelling profiel wijzigen. Daarom is verdere experimenten en grootschalige studies nodig om onze resultaten te bevestigen.

De huidige studie heeft een aantal beperkingen. Ten eerste, de steekproefomvang was relatief klein, vooral op overleving en eiwitexpressie analyses, die beide nodig verdere bevestiging in grote populaties. Ten tweede werd slechts OS geanalyseerd in de survival analyse en andere prognostische parameters zoals progressievrije overleving ook gerechtvaardigd. Ten derde werd de survival analyse alleen uitgevoerd in een subset van de gehele GC patiënten die de kans op een selectieve voorspanning kan maken, en een grote steekproef voor prognostische studie moet worden uitgevoerd in de nabije toekomst. Ten vierde, zijn functionele experimenten nodig om de onderliggende ziekte mechanisme te ontrafelen.

Conclusie

In het kort, de relatie van de mTOR
rs1064261 en AKT
rs1130233 polymorfismen met GC gevoeligheid en OS is aangetoond voor de eerste keer. mTOR
rs1064261 en AKT
rs1130233 polymorfismen werden significant geassocieerd met GC risico bij mannen. De AKT
rs1130233 polymorfisme en H
. pylori
infectie vertoonden een significante interactie in CON → AG → GC progressie. De AKT
rs1130233 polymorfisme was geassocieerd met een verhoogde p-AKT eiwitexpressie in H
. pylori
-positieve personen.

• PLoS ONE: vetinname en risico van maagkanker: een meta-analyse van observationeel Studies
• PLOS Computational Biology: Ontdekking van de Drug Synergies bij maagkanker Cellen voorspeld door Logical Modeling