PLoS ONE: circulantes cellules tumorales (CTC) détectés par RT-PCR et son rôle pronostique dans le cancer gastrique: une méta-analyse de publication Literature

Résumé

Objectif

La signification pronostique de les cellules tumorales circulantes (CTC) est controversée dans le cancer gastrique (GC). Nous avons effectué une méta-analyse des études disponibles pour évaluer sa valeur pronostique détectée par RT-PCR pour les patients diagnostiqués avec GC.

Méthodes

EMBase, PubMed, Ovid, Web of Science, la bibliothèque Cochrane et la recherche de base de données Google Scholar a été menée sur toutes les études rapportant les résultats d'intérêt. Les études ont été mises en place en fonction des critères d'inclusion /exclusion. La méta-analyse a été réalisée en utilisant un modèle à effets aléatoires; hazard ratio (HR), rapport de risque (RR) et leurs intervalles de confiance à 95% (IC à 95%) ont été définies comme des mesures d'effet. Les informations relatives à la conception des essais, les résultats des données ont été extraites indépendamment. Hétérogénéité des études a été testé pour chaque analyse groupée.

Résultats

Dix-neuf études publiées correspondaient aux critères de sélection et ont été inclus dans cette méta-analyse. CTCs positivité était significativement associée à la survie sans mauvaise rechute (RFS) (HR 2,42, IC 95%: [1,94 à 3,02]; P < 0,001) et la survie globale médiocre (OS) (HR 2,42, IC 95%: [1,94 à 3,02 ]; P < 0,001). CTCs positivité ont également été significativement associée à des ganglions lymphatiques régionaux (RLNs) métastase (RR 1,42, IC à 95%: [1,20 à 1,68]; p < 0,0001), la profondeur de l'infiltration (RR 1,51, IC à 95%: [1,27 à 1,79]; p < 0,0001), l'invasion vasculaire (RR = 1,43, IC 95%: [1,18 à 1,74], p = 0,0002) et le stade TNM (I, II contre III) (RR 0,63, IC à 95% [0,48 à 0,84]; p = 0,001)

Conclusion

préopératoire CTCs positivité indique un mauvais pronostic chez les patients atteints de cancer gastrique, et associés à des facteurs pronostiques clinico pauvres

Citation:.. Wang S, Zheng G , Cheng B, Chen F, Wang Z, Chen Y, et al. (2014) des cellules tumorales circulantes (CTC) détectés par RT-PCR et son rôle pronostique dans le cancer gastrique: une méta-analyse de la littérature publiée. PLoS ONE 9 (6): e99259. doi: 10.1371 /journal.pone.0099259

Editeur: Andreas-Claude Hoffmann, Cancer Center Allemagne de l'Ouest, l'Allemagne

Reçu le 28 Septembre 2013; Accepté: 12 mai 2014; Publié 5 Juin, 2014

Droit d'auteur: © 2014 Wang et al. Ceci est un article en accès libre distribué sous les termes de la licence Creative Commons Attribution, qui permet une utilisation sans restriction, la distribution et la reproduction sur tout support, à condition que l'auteur et la source originelle sont crédités

Financement:. Le travail a été appuyé par le Programme national de recherche et de développement de haute technologie de Chine (Grant No. 2012AA02A502, 2012AA02A506). Les bailleurs de fonds ont joué aucun rôle dans la conception de l'étude, la collecte et l'analyse des données, la décision de publier, ou de la préparation du manuscrit

Intérêts concurrents:.. Les auteurs ont déclaré aucun conflit d'intérêts existent

Introduction

À l'échelle mondiale, le cancer gastrique (GC) est le quatrième cancer le plus commun et est la deuxième cause de cancer mort la PI [1]. En Chine, le cancer gastrique occupe la troisième place de la morbidité parmi les cancers du système digestif, en raison des difficultés de diagnostic précoce, les quantités de patients ont été diagnostiqués avec GC jusque dans son stade avancé; malheureusement, même après l'opération radicale et un traitement adjuvant, la survie globale à 5 ans (OS) du GC patient est relativement faible (moins de 50%) [2]; au cours de la dernière décennie, la stratégie de traitement du cancer gastrique en continu des changements, mais encore ne parvient pas à améliorer le pronostic global de manière significative, la plupart des patients meurent à cause de métastases à distance et la récurrence. Ainsi, afin d'améliorer les résultats cliniques des patients du GC, nous avons besoin de nouveaux biomarqueurs qui peuvent nous aider à identifier les patients à risque élevé de métastases et de poursuivre la stratégie spécifique de thérapie.

Comme nous est connu, les métastases tumorales se compose d'une série de procédures biologiques, une étape importante est les cellules tumorales diffusent dans la circulation sanguine et de circuler [3]; ainsi, pour obtenir plus d'idées dans la métastase cascade, des études de cellules tumorales circulantes (CTC) devient vigoureusement l'un des sujets académiques chauds. Le concept de CTCs remontent à l'étude de Ashworth [4] in1869 et a été démontrée par Engell [5] en 1955 qui a prouvé l'existence de ces cellules rares. Il existe un ensemble considérable de preuves indiquant que les CTC sont éliminées de la masse de la tumeur primaire à un premiers stades de la progression maligne [6]; ces cellules, qui circulent dans le sang, se rendant dans différents tissus du corps, sont la principale cause des métastases manifestes [7]. De nos jours, de nombreuses études ont étudié la pertinence pronostique de CTCs positivité des patients atteints d'un cancer du sein [8], le cancer colorectal [9], et prouvé que les CTC pourrait être un marqueur de mauvais pronostic.

En ce qui concerne le cancer gastrique, bien qu'il existe de nombreuses études visant à déterminer la relation entre les CTC et le pronostic ou d'autres paramètres clinicopathologiques, le manque de puissance statistique ainsi que leur conception de l'étude différente et les résultats limités de la valeur clinique individuelle et l'effet pronostique de CTCs positivité. En particulier, la valeur de positivité CTCs pré-opératoire chez les patients atteints de cancer gastrique n'a pas encore été clairement illustré. Ainsi nous avons effectué une analyse combinée des études disponibles qui fournira une estimation plus précise sur la pertinence pronostique des CTC chez les patients avec GC.

Littérature Rechercher

PubMed

Méthodes, Embase, Ovid, Web of science, Google Scholar et Cochrane bases de données de la bibliothèque ont été systématiquement recherché sans restriction de temps. Les études des rapports sur la détection moléculaire de CTCs et son effet sur le pronostic dans le cancer gastrique ont été identifiées. Les mots clés suivants ont été utilisés: '' cellules tumorales circulantes '' ou '' CTCs '', "cancer de l'estomac ''," pronostic "et" PCR "ont été utilisés comme mots clés. «Articles connexes» de la fonction de Pubmed et Google Scholar Afin d'éviter que manquant des publications pertinentes, ont été utilisés pour identifier d'autres publications potentiellement pertinentes. Références des articles étaient des articles pertinents, y compris les articles de revue recherché à la main. Deux examinateurs (S.Y. Wang et G Zheng) sélectionnés indépendamment et récupérés dans la liste de la littérature et, dans le cas des références potentiellement pertinentes, obtenu les articles complets; Les cas de désaccord ont été résolus en discutant le titre et le résumé; articles en texte intégral (n = 39) ont été examinés et 20 ont été exclus selon les critères ci-dessous.

Critères Littérature de dépistage

Pour être inclus dans l'analyse, les études devaient répondre aux critères d'inclusion suivants : (1) toute forme de transcription inverse PCR (RT-PCR) utilisé pour l'évaluation de l'association entre les marqueurs putatifs de cellules tumorales circulantes et soit la survie globale (OS), la survie sans récidive (RFS), ou des facteurs pronostiques de cancer de l'estomac; (2) > 20 patients analysés et les données suffisantes pour calculer un rapport de risque (HR) ou un rapport de risque (RR) avec un intervalle de confiance de 95% (IC à 95%) comme une estimation de l'effet comparable; (3) échantillons utilisés dans ces études devraient être du sang périphérique et doivent être recueillies avant la chirurgie; (4) l'exclusion des lettres à l'éditeur, des critiques et des articles publiés dans des livres ou des documents de langue non anglaise.

Extraction
données

Deux examinateurs (SY Wang et G Zheng) extrait indépendamment du suivant les données de chaque étude: l'année de publication, le nom de famille du premier auteur, le nombre de cas et les témoins, le nombre de différents paramètres cliniques et pathologiques, ainsi que les méthodes d'expression de survie d'évaluation. Les désaccords ont été résolus par la discussion et ont été vérifiés par un tiers enquêteur

Analyse statistique

L'analyse statistique a été faite avec Review Manager (RevMan) (Version 5.2 Copenhague:.. Le Nordic Cochrane Centre, The Cochrane Collaboration, 2012). Pour évaluer statistiquement l'effet pronostique de CTCs, nous avons extrait Hazard Ratio (HR) et leurs erreurs types associées sur la survie sans récidive (SSR) et /ou la survie globale (OS) à partir des études incluses. Si les RR et leurs erreurs types associées, les intervalles de confiance (IC), ou les valeurs de P ne sont pas directement fournis dans les articles originaux, nous approximer HRs selon la méthode décrite par Parmar et al [10]. Par convention, un HR > 1 implique un plus mauvais pronostic dans le groupe CTCs-positifs par rapport au groupe négatif. Nous avons regroupé les RR extraites avec l'utilisation de la méthode de la variance inverse générique disponible dans le gestionnaire d'examen. Parce que nous nous attendions à une hétérogénéité Interstudy, nous avons appliqué un modèle d'effet aléatoire [11], car il est plus prudent en créant un CI plus large autour de la HR commun que le modèle d'analyse des effets fixes. Lors de l'analyse de l'association entre les CTC et d'autres paramètres, le risque relatif (RR) a été calculé, un RR > 1 groupe CTC-positif implicite a été associé à un paramètre. Toutes les extractions de données ont été réalisées séparément par SY Wang et G Zheng. Les désaccords ont été résolus par la discussion. Hétérogénéité entre les études a été testé avec le test de Q et I ^{2 statistique. Nous avons évalué le biais potentiel de publication par un graphique en entonnoir, qui a ensuite été examiné par le Egger [12] et le test de Begg [13] en utilisant le logiciel STATA (version 11.0, College Station, TX). Et analyse groupée de la précision diagnostique de CTCs positivité a également été calculé par STATA.}

Résultats Caractéristiques Étude de base

La recherche systématique de la littérature (Fig. 1) ont donné un total de 19 études [14] - [32] pour l'analyse finale. Les études ont été menées dans 6 pays (Chine, Allemagne, Japon, Corée et les États-Unis) et publiés entre 2000 et 2013. Les 19 études analysant le sang périphérique avant la chirurgie a appliqué une méthode de détection moléculaire (PCR, RT-PCR, ou RT suivi par PCR quantitative) des cellules tumorales, le CEA a été testé dans l'ARNm de 6 études, et d'autres gènes ont été testés au plus 3 études. Les caractéristiques de base des études incluses sont résumées dans le (tableau 1)

Précision de diagnostic de CTC Détection

Pour évaluer les performances du test global des études incluses [14] - [17]. [ ,,,0],19], [21] - [32], nous avons calculé la précision diagnostique groupée de détection des CTC. La sensibilité et la spécificité combinée était de 0,45 (IC à 95%: [0,34 à 0,57]) et 0,99 (IC 95%: [0,96 à 1,00]), respectivement (figure S1), avec une hétérogénéité significative (I ^{2 = 91%, p < 0,05 et I 2 = 69,83%, p < 0,05). Rapport de vraisemblance positif (PLR) est de 37,1 (IC 95%: [11,7 à 118,1]), rapport de vraisemblance négatif (NLR) était de 0,55 (IC 95%: [0,38 à 0,89]) (Figure S2). Ratio combiné de cotes de diagnostic était de 67,08 (IC 95%: [19,75 à 227,86]) (Figure S3) et l'aire sous la courbe de SROC était de 0,93 (IC à 95%:. [0,91 à 0,95] (figure S4)}

Analyse globale de survie pour

données de patients atteints de cancer gastrique sur RFS étaient disponibles dans 10 études [16], [18], [19], [22] - [24], [26], [28], [29], [31], l'analyse groupée a montré un effet pronostique de CTCs positivité (HR = 2,42 [IC à 95%: 1,94 à 3,02]; P < 0,001) (Figure 2), sans entre-étude hétérogène (I ^{2 = 0%, p = 0,54). Nous avons aussi des études stratifiées de CTCs positifs CEA-ARNm [16], [18], [19], [22], [29] du sous-groupe, analyse groupée a suggéré une association entre les pauvres RFS et CTCs positivité (HR = 2,51, IC 95%: [1,32 à 4,76], p < 0,001%), et entre l'étude de l'hétérogénéité a été modérée (I 2 = 44%, p = 0,13) publication. biais, testé par le test de Egger (p = 0,578) et graphique en entonnoir (Figure S5), a été négligeable pour l'analyse groupée de RFS.}

l'analyse combinée des études [21], [23], [25], [27], [30], [32] sur OS a montré que la présence de CTC a été associée à un mauvais système d'exploitation (HR = 1,66, IC à 95%: 1,26 à 2,19; p < 0,001) (figure 3), et l'hétérogénéité entre les études (I ^{2 = 35%, p = 0,15) n'a pas d'importance. Le test de Egger (p = 0,017) et graphique en entonnoir (Fig. S6) a montré cette analyse combinée a un biais de publication}

Corrélation des cellules tumorales circulantes avec

14 études de clinicopathologique Paramètres [16] -. [ ,,,0],18], [20] - [23], [25], [26], [28] - [32] ont été évalués la relation entre CTCs positivité et les ganglions lymphatiques régionaux (RLNs) métastase (RR = 1,42, IC à 95%: [1,21 à 1,66]; p <. 0,0001) (figure 4A), sans hétérogénéité significative entre les études (I ^{2 = 32%, p = 0,08), l'analyse de sous-groupe a montré que les CTC positifs CEA-ARNm ont été associés à RLNs métastase (RR = 1,69, IC 95%: [1,27 à 2,23]; p = 0,0003), et l'hétérogénéité entre les études ont diminué (I 2 = 0%, p = 0,44). Des études [16] - [18], [20] - [23], [26], [30] - [32] évaluée par analyse groupée a montré une association significative de CTCs positivité avec la profondeur de l'infiltration tumorale (RR = 1,51, 95 % CI:. [1,27 à 1,79]; p < 0,0001) (figure 4B), entre l'étude de l'hétérogénéité était significative (I 2 = 41%, p = 0,04), l'analyse de sous-groupe a montré que les CTC positifs CEA-ARNm étaient associée à la profondeur de l'infiltration tumorale (RR = 1,56, IC 95%: [1,09 à 2,23], p = 0,01), avec la même hétérogénéité entre les études (I 2 = 51%, p = 0,09). L'invasion vasculaire [18], [22] - [25], [28], [30], [32] (RR = 1,43, IC 95%: [1,18 à 1,74]; p = 0,0002) a été associée à la positivité CTCs ( . la figure 4C), mais l'hétérogénéité entre les études était significative (I 2 = 55%, p = 0,01)}

Huit études [14] -. [17], [20], [22 ], [23], [29] ont rapporté la relation entre CTCs positivité et le stade TNM, le taux global positif des CTC dans la phase I et le groupe II était de 36,7% par rapport à 56,6% du groupe de stade III. L'analyse combinée a montré que la positivité CTCs au stade III est supérieure à la phase I et II (RR 0,63, IC à 95% 0,48 à 0,84; p = 0,001), avec entre-étude hétérogène (I ^{2 = 52%, p = 0,01) comme illustré sur la figure 4D. Lorsque mis en commun l'analyse [14] - [17], [20], [22], [23], [26], [29] a été introduit pour comparer CTC positivité dans la phase I à la phase II, la CTCs positivité était plus élevé dans l'étape II par rapport à la phase I (RR = 0,55; [IC à 95% de 0,36 à 0,84], p = 0,005). Cependant, lorsque des groupes de la phase II et la phase III ont été comparés [15] - [17], [20], [22], [23], [29], les données ont montré aucune différence statistiquement significative (RR = 0,87; [IC à 95%: 0,73 à 1,04], p = 0,93).}

Discussion

du point de vue clinique, l'évaluation du pronostic des patients par la détection des CTC dans le PB peut fournir une information pronostique importante. Bizard et al [33] ont trouvé que même un seul CTC détecté dans 7,5 ml de sang a été associée avec le développement ultérieur des métastases, ce qui signifie que les CTC ont un fort potentiel de métastases à distance. En outre, la détection des CTC, avec l'avantage de temps et d'économie des coûts, semble confortable pour le patient et peut être facilement répété comme un outil de surveillance. À ce jour, des résultats encourageants concernant une association entre la CCT positivité et la progression métastatique chez les patients atteints du sein métastatique [34], de la prostate [35], et colorectal [36] cancer ont été publiés récemment. Toutefois, il existe actuellement très peu de données sur la pertinence clinique de CTC positivité au GC du patient, les résultats de notre évaluation collective suggèrent que CTCs positivité dans PB devrait en effet être considéré comme un marqueur pronostique.

Pendant le processus de notre méta-analyse, nous restreindre le temps d'échantillonnage et le site de notre conception afin de minimiser l'hétérogénéité, mais nous remarquons encore un certain degré d'hétérogénéité. Les sources potentielles d'hétérogénéité peuvent provenir de différences dans le protocole de détection, les types et le nombre de cibles de sélection de gènes, standard de CTCs positivité, ainsi que des données démographiques ou clinicopathologiques de patients inclus. En théorie, le statut de CTCs postopératoires peut être important et instructif, il reflète l'information combinée de CTCs préopératoires et peropératoires libération des cellules tumorales par manipulation chirurgicale [37]. Mais la mort apoptotique rapide de CTCs fraîchement râpées peut libérer le gène de la tumeur de masse ou des antigènes en raison de la perte de la survie microenvironnement dans la circulation systémique; cela peut conduire à certain degré de polarisation de détection. le temps d'échantillonnage est un autre facteur important qui interfèrent la valeur prognositic de CTCs positivité et conduit à l'hétérogénéité. Ikeguchi M et al. [21] ont étudié l'association entre CTCs postopératoires positivité et le pronostic, ils ont constaté que, si les échantillons de sang ont été prélevés après l'opération dans les 48 heures, les patients positifs CTC avaient un meilleur pronostic que les CTC négatifs. Ainsi, d'autres études de CTCs devraient prendre le temps d'échantillonnage en considération, d'évaluer et de confirmer le meilleur temps d'échantillonnage. Une autre source de l'hétérogénéité observée peut être la piscine elle-même CTCs, on a consisté population hétérogène de cellules cancéreuses au sein de cette population ne représente qu'une fraction spécifique avait un effet pronostique [38]. En outre, la caractérisation des CTC atteints d'un cancer du sein, le cancer gastrique, ou le cancer colorectal a montré que seule une minorité de ces cellules expriment des marqueurs de prolifération associés, des récepteurs de facteurs de croissance, des antigènes de la réponse immunitaire, des molécules d'adhérence, et des protéases ou des protéines de protéase associée à [39] .En outre, les cellules tumorales de diffusion est un événement précoce au cours de métastases à distance, et les aberrations aléatoires pour gène spécifique de métastases peut être acquise après CTCs excrétion dans la circulation du sang [40]. Ce modèle peut expliquer l'hétérogénéité génomique et fonctionnelle de CTCs.

Il y a quelques limites de cette méta-analyse. Tout d'abord, les limitations dues à l'hétérogénéité mentionné précédemment et l'impossibilité d'accéder à des données primaires des études incluses. Nous avons abordé la question de l'hétérogénéité par une approche méthodologique rigoureuse qui a utilisé le modèle à effets aléatoires pour plus des estimations prudentes. Les facteurs pronostiques du cancer gastrique sont compliquées, nos données pour la méta-analyse était des études incluses et des données primaires a été difficile à obtenir, nous avons été incapables d'exclure tous les possibles facteurs de confusion; approches basées sur RT-PCR ont une grande sensibilité pour la détection des CTC, mais ils ne peuvent pas quantifier le nombre de CTC et manquent de spécificité biologique [38]. Deuxièmement, le choix des langues apporte un autre biais, nous avons limité notre analyse des études publiées écrites en anglais, autre langue comme le japonais, l'allemand ont été exclus sur la base de critères linguistiques. Cela peut se traduire par le biais de la langue conduisant à une surestimation des tailles d'effet [41]. Troisièmement, nous constatons que certain degré de biais de publication existe, en particulier dans l'analyse groupée pour OS, une raison peut être que les études ont rapporté des résultats positifs sont beaucoup plus faciles à être publié et accessible; en outre, des études mises en place pour l'analyse groupée ont relativement petite taille de l'échantillon. Bien que nous avons été incapables de mener des analyses tenant compte de certains facteurs potentiellement pertinents, CTC positivité représentant un indicateur de mauvais pronostic chez les patients du GC a été constamment présent dans l'analyse groupée; Cependant, nos résultats doivent être interprétés avec prudence et il faut disposer de données plus détaillées et précises pour vérifier.

En conclusion, notre étude basée sur des données disponibles appuie l'idée d'une forte valeur pronostique de CTCs dans le sang périphérique et se rapporte à un mauvais pronostic du GC. Identification des différents défauts méthodologiques et sources d'hétérogénéité dans les études actuellement disponibles des facteurs pronostiques pourrait contribuer à améliorer la conception et la présentation des futures études sur les facteurs pronostiques et prédictifs. Nos résultats offrent également une allusion au fait que des études supplémentaires devraient utiliser la méthode normalisée d'essai, le temps d'échantillonnage optimisé, l'analyse complète et le rapport des résultats, ou l'identification de certains sous-groupe cellulaire tel que cellules souches en circulation comme [42]; de cette manière que nous pouvons tirer plus clair et plus précis signification pronostique des CTC chez les patients du GC.

Informations complémentaires
Figure S1. Terrain
Forêt pour analyse groupée de SEN et SPE. SEN, la sensibilité; . SPE, spécificité
doi: 10.1371 /journal.pone.0099259.s001
(TIF)
Figure S2. Terrain
Forêt pour l'analyse groupée des PLR et NLR. PLR, rapport de vraisemblance positif; . NLR, le rapport de vraisemblance négatif
doi: 10.1371 /journal.pone.0099259.s002
(TIF)
Figure S3. Terrain
Forêt pour analyse groupée de DOR. . DOR, odds ratio de diagnostic
doi: 10.1371 /journal.pone.0099259.s003
(TIF)
Figure S4.
Résumé courbe ROC avec des régions de confiance et de prédiction de la sensibilité et de la spécificité
doi:. 10.1371 /journal.pone.0099259.s004
(TIF)
Figure S5.
Entonnoir parcelle pour des estimations sommaires de RFS. . RFS, la survie sans rechute
doi: 10.1371 /journal.pone.0099259.s005
(TIF)
Figure S6.
Entonnoir parcelle pour des estimations sommaires des OS. . OS, la survie globale
doi: 10.1371 /journal.pone.0099259.s006
(TIF)
CheckList S1.
PRISMA liste
doi:. 10.1371 /journal.pone.0099259.s007
(DOC)

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