PLoS ONE: cirkulirajućih stanica tumora (CTCs) Otkrivena pomoću RT-PCR i njegova prognostička uloga u rak želuca: meta-analiza objavljenih književnost

Sažetak pregled

Cilj pregled

Prognostički značaj cirkulirajućih tumorskih stanica (CTCs) je sporno kod raka želuca (GC). Izvršili smo meta-analizu dostupnih studija procijeniti njegovu prognostičku vrijednost otkriven pomoću RT-PCR za pacijente sa GC dijagnozom. pregled

Metode pregled

EMBASE, PubMed, Ovidije, Web of Science, Cochrane knjižnica i Google Scholar za pretraživanje baze podataka je provedeno na svim studijama izvješćivanje rezultate interesa. Studije su postavljeni u skladu s kriterijima uključivanja /isključivanja. Meta-analiza je provedena pomoću slučajnih efekata modela; omjer rizika (HR), omjer rizika (RR) i njihove interval pouzdanosti 95% (95% CI) bili su postavljeni kao učinak mjera. Informacije o probnom dizajn, proizlazi iz podataka neovisno je izvađen. Heterogenost studija je testiran za svaku skupnu analizu. Pregled

Rezultati pregled

Devetnaest studije objavljene odgovara kriterijima odabira i bili uključeni u meta-analizi. CTCs pozitivnost je značajno povezana s siromašnih relapsa slobodan opstanak (RFS) (HR 2,42, 95% CI: [1,94-3,02] P 0,001) i siromašnih ukupno preživljenje (OS) (HR 2,42, 95% CI: [1,94-3,02 ] P 0,001). CTCs pozitivnost također su značajno povezane s regionalnim limfnim čvorovima (RLNs) metastaziranje (RR 1,42, 95% CI: [1,20-1,68]; p &0.0001), dubinu infiltracije (RR 1,51, 95% CI: [1.27-1.79]; p 0.0001), vaskularne invazije (RR = 1,43, 95% CI: [1,18-1,74], p = 0,0002) i TNM faza (i, II nasuprot III) (RR 0,63, 95% CI [0,48 do 0,84]; p = 0,001) pregled

Zaključak pregled

Preoperativna CTCs pozitivnost ukazuje na lošu prognozu u bolesnika s karcinomom želuca, a povezana je s lošim kliničkopatološkim prognostičkih čimbenika pregled

Izvor:.. Wang s, Zheng G Cheng B, Chen F, Wang Z, Chen Y, et al. (2014) cirkulirajućih stanica tumora (CTCs) Otkriveni pomoću RT-PCR i njegova prognostička uloga u rak želuca: meta-analiza objavljenih književnosti. PLoS ONE 9 (6): e99259. doi: 10,1371 /journal.pone.0099259 pregled

Urednik: Andreas-Claudius Hoffmann, Zapadne Njemačke Cancer Center, Njemačka pregled

Primljeno: 28. rujna 2013; Prihvaćeno: 12. svibnja 2014; Objavljeno: 5. lipanj 2014 pregled

Copyright: © 2014 Wang et al. Ovo je otvorenog pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan

financiranja. Rad je podržan od strane National High Technology programa istraživanja i razvoja Kine (Grant br 2012AA02A502, 2012AA02A506). U financijeri nisu imali ulogu u studiju dizajna, prikupljanja i analize podataka, Odluka o objavi, ili pripremu rukopisa pregled

U konkurenciji interese.. Autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled

Uvod

Globalno, rak želuca (GC) je četvrti najčešći rak i to je drugi vodeći uzrok raka povezani s grupom smrti [1]. U Kini, rak želuca drži treće mjesto pobola među probavnog raka sustava, s obzirom na teškoće u ranoj dijagnostici, količine bolesnika s GC dijagnosticira dok u svojoj poodmakloj fazi; na žalost, čak i nakon radikalne operacije i adjuvantna terapija, 5-godišnje preživljavanje (OS) GC pacijenta je relativno niska (ispod 50%) [2]; tijekom proteklog desetljeća, terapija strategija karcinoma želuca stalno mijenja, ali još uvijek ne uspijeva poboljšati ukupnu prognozu bitno, većina pacijenata umire zbog udaljenih metastaza i recidiva. Stoga, kako bi se unaprijedila kliničko ishod GC pacijenata, trebamo nove biomarkera koji nam mogu pomoći za otkrivanje bolesnika s visokim rizikom od metastaza i provoditi specifične strategije terapije. Pregled

Kao što je poznato nam je, metastaza tumora sastoji se niz bioloških postupaka, jedan važan korak je tumorske stanice širiti u krvotok i cirkulaciju [3]; na taj način, da bi dobili bolji uvid u metastaza kaskade, studije cirkulirajućih stanica tumora (CTCs) energično postaje jedan od vrućih akademskih tema. Koncept CTCs datirati u proučavanju Ashworth [4] in1869 i pokazana je Engell [5] 1955. godine koji je dokazao postojanje tih rijetkih stanica. Tu je i velika količina dokaza ukazuje na to da su CTCs prolio iz primarne mase tumora po najranijim fazama malignog progresije [6]; ove stanice, koji cirkuliraju kroz krvotok, koji putuju u različitim tkivima tijela, su glavni uzrok vidljive metastaze [7]. Danas, brojne studije su istraživali prognostičku važnost CTCs pozitivnosti bolesnika s rakom dojke [8], raka debelog crijeva [9], i dokazao da CTCs mogla biti loša prognostički marker. Pregled

S obzirom na rak želuca, iako postoji mnogo studija osmišljen kako bi saznali odnosa između CTCs i prognoze ili druge kliničko parametara, nedostatak statističke snage, zajedno sa svojim drugom studiju dizajna i rezultati ograničeni individualni kliničku vrijednost i prognostički učinak CTCs pozitivnosti. Pogotovo, vrijednost preoperativne CTCs pozitivnosti u bolesnika s karcinomom želuca još nije jasno prikazano. Tako smo proveli kombinirano analizu dostupnih istraživanja koja će omogućiti precizniju procjenu o prognostičku važnost CTCs u bolesnika s GC. Pregled

Metode

Literatura pretrage pregled

PubMed, EMBASE, Ovidije, Web of Science, Google Scholar i Cochrane baze knjižnica podataka sustavno su tražili bez vremenskog ograničenja. Istraživanja izvještavaju o molekularnu detekciju CTCs i njezin utjecaj na prognozu karcinoma želuca su identificirani. Korištene su sljedeće ključne riječi: '' cirkulirajućih stanica tumora '' ili '' CTCs '', "rak želuca ''," prognoze "i" PCR "se koristi kao ključnih riječi. Kako bi se spriječilo nedostaje relevantne publikacije "srodnih proizvoda" funkcija PubMed i Google znalcu su korišteni za identifikaciju i druge potencijalno relevantne publikacije. Reference članaka je rukom potražio relevantnih članaka, uključujući i pregledne članke. Dva recenzenti (S.Y. Wang i G Zheng) nezavisno prikazan i preuzeti popis literature i, u slučaju potencijalno relevantnih referenci, dobiva puni članaka; Slučajevi neslaganja razriješene su raspravljali naslov i sažetak; Full-text članci (n = 39) su ispitani i 20 su isključeni sljedeći navedenih kriterija. Pregled

Literatura Screening Kriteriji pregled

Kako biti uključeni u analizu, studije morali odgovarati slijedeće kriterije za uključivanje : (1) bilo koji oblik obrnute transkripcije PCR (RT-PCR) koja se koristi za procjenu povezanosti između navodnih markere cirkulirajućih tumorskih stanica i bilo ukupno preživljenje (OS), recidiv bez preživljavanje (RFS), ili prognostički čimbenici rak želuca; (2) > 20 analizirao pacijente i dovoljno podataka za izračun omjera opasnosti (HR) ili omjer rizika (RR) s intervalom povjerenja od 95% (95% CI) kao procjena sličnim učinkom; (3) uzorci koji se koriste u ovim studijama trebao biti periferne krvi i trebaju biti prikupljeni prije operacije; (4) Isključenje pisma uredniku, recenzije i članke objavljene u ne-engleskom jeziku knjige ili radovi. Pregled

Podaci Ekstrakcija pregled

Dvije recenzenti (SY Wang i G Zheng) nezavisno izvukao sljedeće podatke iz svakog istraživanja: godine izdanja, prvo prezime autora, broj predmeta i kontrole, broj različitih kliničkih i patoloških parametara i metoda procjene izražavanja preživljavanja. Nesuglasice su riješene raspravom i bili provjereni od strane treće istražitelja pregled

Statistička analiza pregled

Statističke analize su učinili s Review Manager (RevMan) (verzija 5.2 Kopenhagenu.. Nordic Cochrane Centra, Cochrane Suradnja, 2012.). Za statistički procijeniti prognostički učinak CTCs, ekstrahira se omjer rizika (HR) i njihove povezane standardne greške na relapsa slobodan opstanak (RFS) i /ili ukupno preživljenje (OS) od uključenih studija. Ako sati i pripadne standardne pogreške, intervali pouzdanosti (CIS), ili P vrijednosti nisu izravno dostavili u izvornim člancima, aproksimirati smo HRS-a u skladu s postupkom koji su opisali Parmar et al [10]. Po dogovoru, a HR > 1 znači lošiju prognozu u CTCs-pozitivne grupe u odnosu na negativnu grupu. Angažirali smo izvađen HRS-a uz korištenje generičkog obrnutom metodom analize varijance na raspolaganju u pregled Manager. Zato smo očekivali interstudy heterogenost, primjenjuje se model slučajni učinak [11], jer je više konzervativan stvaranjem šireg CI oko udružuje HR nego model analize fiksnog učinka. Kada su analizirali povezanost između CTCs i ostale parametre, izračunat relativni rizik (RR), a RR > 1 implicirano CTC-pozitivnih grupa je povezana s parametrom. Svi ekstrakcija podataka provedene su odvojeno po SY Wang i G Zheng. Nesuglasice su riješene raspravom. Heterogenost između studija je testiran s Q testom i ja ^{2 statistiku. Procijenili smo potencijalni objavljivanje pristranost strane lijevka parceli, koja je dodatno ispitan od strane Egger [12] i Begg testa [13] pomoću Stata softvera (verzija 11.0, College Station, TX). I skupe analiza dijagnostičke točnosti CTCs pozitivnosti također je izračunata Stata. Pregled}

Rezultati

Baseline Studija Karakteristike

sustavno traženje literature (Sl. 1) dobiveno je ukupno 19 studija [14] - [32] za konačnu analizu. Studije su provedene u 6 zemalja (Kina, Njemačka, Japan, Koreja i Sjedinjene Američke Države) i objavljeni između 2000. i 2013. godine svih 19 studija analiziranje perifernu krv prije operacije primjenjuje metodu molekularnu detekciju (PCR, RT-PCR ili RT slijedi kvantitativnim PCR) tumorskih stanica, CEA mRNA ispitan je u 6 studije, a ostali geni su testirani ne više od 3 studija. Osnovne karakteristike uključene studije sažeti su u (Tablica 1) pregled

Dijagnostička točnost CTCs Detection Netlogu

Da bi se procijenila ukupnu testu od uključenih studija [14] -. [17], [ ,,,0],19], [21] - [32], izračunali smo skupni dijagnostičku točnost detekcije CTCs. Kombinirani Osjetljivost i specifičnost bila je 0,45 (95% CI: [0,34-0,57]) i 0.99 (95% CI: [0,96-1,00]), odnosno (Slika S1), uz značajnu heterogenost (I ^{2 = 91%, p < 0.05 sam 2 = 69,83%, p 0.05). Pozitivna Vjerojatnost omjer (PLR) je 37.1 (95% CI: [11,7 - 118,1]), Negative Vjerojatnost omjer (NLR) bio je 0,55 (95% CI: [0,38-0,89]) (Slika S2). U kombinaciji dijagnostički omjer izgleda je 67.08 (95% CI: [19,75 do 227,86]) (Slika S3), a površina ispod krivulje SROC bio je 0,93 (95% CI:. [0,91 do 0,95] (Slika S4) pregled}

Sveukupno Analiza preživljenja za rak želuca pacijenata

Podaci o RFS su dostupni u 10 studija [16], [18], [19], [22] - [24], [26], [28], [29], [31], ispitivani analiza pokazala je prognostički učinak CTCs pozitivnosti (HR = 2,42, [95% CI: 1.94-3.02]; p < 0,001) (slika 2), bez među-studija heterogenosti (I ^{2 = 0%, p = 0,54). Mi također stratificirani studije HUP-mRNA pozitivne CTCs [16], [18], [19], [22], [29] podskupine, grupiran analiza je upućivala na povezanost između siromašnih RFS i CTCs pozitivnosti (HR = 2,51, 95% CI: [1,32-4,76], p 0,001%), te između studij heterogenost bio umjeren (i 2 = 44%, p = 0,13) Objava. pristranosti, testirana Egger-ovim testom (p = 0,578) i lijevak zemljište (Slika S5), bio je zanemariv za udruženu analizu RFS. pregled}

Sakupljanje analiza studija [21], [23], [25], [27], [30], [32] u OS su pokazali da prisutnost CTCs je povezana s lošim OS (HR = 1,66, 95% CI: 1.26-2.19; p < 0,001) (slika 3), a između-studija heterogenost (I ^{2 = 35%, p = 0,15) nije bio značaj. Egger-ov test (p = 0,017) i lijevak zemljišta (Sl. S6) pokazali su to u kombinaciji analiza imala objavljivanje pristranost pregled}

Korelacija cirkulirajućih stanica tumora uz kliničko parametrima pregled

14 studija [16]. - [ ,,,0],18], [20] - [23], [25], [26], [28] - [32] su ocijenili odnos između CTCs pozitivnosti i regionalnih limfnih čvorova (RLNs) metastaza (RR = 1,42, 95% CI: [1,21-1,66]; p <. 0,0001) (Slika 4A), bez značajnih između-studija heterogenosti (i ^{2 = 32%, p = 0,08), podskupina analiza pokazala je da HUP-mRNA pozitivne CTCs bili su povezani s RLNs metastaza (RR = 1,69, 95% CI: [27.1.-23.2.]; p = 0.0003), a heterogenost između-studiji smanjena (i 2 = 0%, p = 0,44). Studije [16] - [18], [20] - [23], [26], [30] - [32] procjenjuje udružuje analize pokazali značajnu povezanost CTCs pozitivnosti s dubine od tumora infiltracije (RR = 1,51, 95 % CI. [1,27-1,79] p 0.0001) (Slika 4B), između-studiji heterogenost značajno (i 2 = 41%, p = 0,04), podskupina analiza je pokazala da CEA-mRNA pozitivne CTCs bili povezane s dubine od tumora infiltracije (RR = 1,56, 95% CI: [1,09-2,23], p = 0,01), s istim između-studija heterogenosti (I 2 = 51%, p = 0,09). Vaskularnu invaziju [18], [22] - [25], [28], [30], [32] (RR = 1,43, 95% CI: [1,18-1,74]; p = 0,0002) bila je povezana s CTCs pozitivnosti ( Sl. 4C), no između-studija heterogenost bila značajna (I 2 = 55%, p = 0,01) pregled}

Osam studija [14] -. [17], [20], [22 ], [23], [29], izvijestio je odnos između CTCs pozitivnosti i TNM stadiju, ukupna pozitivna stopa CTCs u fazi i i II skupine bio je 36,7% u usporedbi s 56,6% u grupi fazi III. Sakupljanje je analiza pokazala da CTCs pozitivnost u fazi III je veći nego na pozornici I i II (RR 0,63, 95% CI 0,48 do 0,84, p = 0,001), a među-studija heterogenosti (I ^{2 = 52%, p = 0,01) kao što je prikazano na slici 4D. Kada se spoje analiza [14] - [17], [20], [22], [23], [26], [29] uveden usporediti CTC pozitivnosti u fazi I s pozornice II je CTCs pozitivnost bila je veća u fazi II nasuprot prvom stadiju (RR = 0,55, [95% CI 0,36 do 0,84]; p = 0.005). Međutim, kada su uspoređeni faza II i III faza grupe [15] - [17], [20], [22], [23], [29], pokazali su podaci statistički značajna (RR = 0,87; [95% CI: 0,73-1,04], p = 0,93). pregled}

Rasprava pregled

iz kliničke perspektive, procjenu prognoze pacijenata detekcijom CTCs u PB mogu dostaviti važan prognostički informacije. Bizard sur [33] su otkrili da čak i jedan CTC otkrivena u 7,5 ml krvi je bio povezan s kasnijim razvojem metastaza, što znači CTCs imaju snažan potencijal udaljenih metastaza. Osim toga, detekcija CTCs, uz prednost vremenu i troškova i štednje, čini se udobna za pacijenta, a može se lako ponavljati kao alat za praćenje. Do danas, ohrabrujuće rezultate o pridruživanju između CTC pozitivnosti i metastatski napredovanje u bolesnika s metastatskim dojke [34], prostate [35], i debelom crijevu [36] rak su nedavno objavljeni. Međutim, tu je trenutno vrlo ograničeni podaci o kliničkoj važnosti CTC pozitivnosti u GC pacijenta, rezultati naše kolektivne procjene ukazuju na to da CTCs pozitivnost u PB doista treba uzeti u obzir kao prognostički biljeg. Pregled

Tijekom procesa naša meta-analiza, ograničili smo vrijeme uzorkovanja i stranicu za našeg dizajna kako bi se umanjili heterogenost, ali još uvijek ima određeni stupanj heterogenosti. Potencijalni izvori heterogenosti može proizlaziti iz razlika u protokolu za detekciju, vrste i broj ciljnih gena selekcije, standard CTCs pozitivnosti, kao iu demografskim ili kliničko podataka uključenih pacijenata. U teoriji, status postoperativni CTCs može biti važno i informativan, to odražava kombinaciji informacije preoperativne CTCs i intraoperacijske izdanju tumorskih stanica po kirurške manipulacije [37]. No, brzo apoptoze smrt svježe isjeckan CTCs može osloboditi masovno gen tumora ili antigena zbog gubitka opstanak mikro okolinu u sistemskoj cirkulaciji; to može dovesti do određenog stupnja pristranosti detekcije. Uzorkovanje vrijeme je još jedan važan faktor koji ometa u prognositic vrijednost CTCs pozitivnosti i dovodi do heterogenosti. Ikeguchi M et al. [21] proučavao povezanost između postoperativni CTCs pozitivnosti i prognozu, otkrili su da, ako su uzorci krvi nakon operacije prikupljeni u roku od 48 sata, CTCs pozitivni bolesnici imali bolju prognozu nego CTCs one negativne. Dakle, daljnje studije CTCs trebao uzeti vremena uzorkovanja u obzir, procijeniti i potvrditi najbolje vrijeme uzorkovanja. Daljnji izvor za promatrano heterogenosti može biti sama CTCs bazen, to je sastojala od heterogene populacije stanica raka, u ovoj populaciji samo određeni dio imao prognostičku snagu [38]. Nadalje, karakterizacija CTCs s rakom dojke, raka želuca, raka debelog crijeva su pokazali da je samo manji broj ovih stanica eksprimiraju proliferacije povezano markere, receptori faktora rasta, imuni odgovor antigena, adhezijske molekule i proteaze ili proteaza-povezane proteine ​​[39] .U toga, tumorske stanice diseminacija je rani događaj u udaljenim metastazama, a slučajni aberacije za gen metastaze specifična može steći nakon CTCs prolijevanja u krvotok [40]. Ovaj model može objasniti genomske i funkcionalnu heterogenost CTCs. Pregled

Postoje neka ograničenja ove meta-analize. Prvo, ograničenja uzrokovana heterogenosti spomenuo prije i nemogućnosti pristupa primarne podatke uključenih studija. obratili smo problem heterogenosti strane rigorozne metodološki pristup koji koristi model slučajnih učinaka za više konzervativnim procjenama. Prognostički čimbenici raka želuca su komplicirani, naši podaci za meta-analize je od uključenih studija i primarne podatke je teško doći, ne možemo isključiti sve moguće određeni čimbenici; pristupi temelje na RT-PCR imaju visoku osjetljivost za otkrivanje CTCs, ali oni ne mogu kvantificirati broj CTCs i nemaju biološku specifičnost [38]. Drugo, jezici izbor donosi drugu pristranost, ograničili smo našu analizu objavljenih studija napisana na engleskom jeziku, drugi jezik, kao što su japanski, njemački su isključeni na temelju kriterija jezika. To može dovesti do pristranosti jezika koja vodi do viših vrijednosti veličina učinka [41]. Treće, vidimo da je određeni stupanj objave pristranosti postoji, posebno u skupnu analizu za OS, jedan od razloga može biti da su studije izvijestile pozitivni rezultati su mnogo lakše biti objavljen i pristupiti; Osim toga, studija uvedeni skupnu analizu imaju relativno male veličine uzorka. Iako nismo bili u mogućnosti provoditi analize s obzirom na određene potencijalno relevantne čimbenike, CTC pozitivnost predstavlja pokazatelj loše prognoze u GC bolesnika koja je neprekidno prisutna u udruženu analizu; Međutim, naši rezultati treba tumačiti s oprezom i to treba detaljnije i točne podatke kako bi potvrdili. pregled

Na kraju, naša studija na temelju dostupnih dokaza podupire ideju o jakom prognostički vrijednosti CTCs u perifernoj krvi i odnosi se na loše prognoze GC. Identifikacija različitih metodoloških nedostataka i izvora heterogenosti u trenutno dostupnih prognostičkih faktora istraživanjima, može doprinijeti poboljšanju dizajna i izvještavanje o budućim prognostičkih i prediktivnih faktora studija. Naši rezultati također nude naslutiti da dodatne studije treba koristiti standardizirane metode ispitivanja, optimizirano vrijeme uzorkovanja, kompletnu analizu i izvješće s rezultatima ili identifikaciju određene stanične podskupine, kao što su cirkulirajućih matičnih stanica nalik [42]; na ovaj način možemo izvući jasniji i točniji prognostički značaj CTCs u GC pacijenata. pregled

popratne podatke
Slika S1. pregled šuma Zemljište za udruženu analizu SEN i SPE. SEN, osjetljivost; . SPE, specifičnost pregled doi: 10,1371 /journal.pone.0099259.s001 pregled (TIF) pregled Slika S2. pregled šuma Zemljište za udruženu analizu PLR i NLR. PLR, pozitivna vjerojatnost omjer; . NLR, negativan omjer vjerojatnosti pregled doi: 10,1371 /journal.pone.0099259.s002 pregled (TIF) pregled slika S3. pregled šuma Zemljište za udruženu analizu DOR. . DOR, dijagnostički omjer vjerojatnosti pregled doi: 10,1371 /journal.pone.0099259.s003 pregled (TIF) pregled slika S4. pregled Sažetak ROC krivulja s povjerenjem i predviđanja područja osjetljivosti i specifičnosti pregled doi:. 10,1371 /journal.pone.0099259.s004 pregled (TIF) pregled slika S5.
toka zemljište za sažete procjenama RFS. . RFS, recidiv Preživljenje bez pregled doi: 10,1371 /journal.pone.0099259.s005 pregled (TIF) pregled slika S6.
toka zemljište za sažete procjenama OS. . OS, ukupno preživljenje pregled doi: 10,1371 /journal.pone.0099259.s006 pregled (TIF) pregled Podsjetnik S1. pregled PRISMA popis za pregled doi:. 10,1371 /journal.pone.0099259.s007 pregled (DOC) pregled

• PLO ON: Interleukin 17A promovira rak želuca invazivnosti preko NF-kB, posredovano matričnih metaloproteinaza 2 i 9 Expression
• PLoS ONE: histon deacetilaze HDAC4 promovira rak želuca SGC-7901 stanica Progresija preko p21 Repression