PLoS One: elhallgattatása XB130 társul Mind a Prognózis és kemoszenzitivitás Gyomorsav Cancer

absztrakt katalógusa

XB130 egy újonnan jellemzett adapter protein, amely a jelentések szerint a pajzsmirigyműködést tumor növekedését, de a szerepe a progresszió más típusú rák, például gyomorrák (GC) továbbra is ismeretlen. Ennek megfelelően megvizsgáltuk, milyen kapcsolatban XB130 kifejezés és prognózisát GC betegeknél. Az alanyok 411 beteg GC szakaszokban az I-IV. XB130 kifejezés vizsgáltuk műtéti mintából GC. Kaplan-Meier analízis és a Cox-féle arányos kockázati modell használták, hogy értékelje a prognosztikai jelentősége XB130 a túlélés és a kiújulás. Sőt, GC stabilan transzfektált sejteket XB130 rövid hajtű RNS hoztak létre, hogy elemezzék a hatását XB130 érzékenység a kemoterápia. Az eredmények azt mutatják, hogy mind a XB130 mRNS és fehérje expressziós kimutatható volt a normál gyomor szövetekben. A teljes túlélés színpadi IV betegek és a betegségtől mentes időszak után reszekcióra GC szakaszban I-III betegek szignifikánsan rövidebb, ha immunhisztokémiai festéssel XB130 alacsony volt, mint amikor a festést magas volt (mind p <katalógusa 0,05). XB130 kifejezés is megjósolta tumor érzékenysége több kemoterápiás szerekkel. Életképessége mindkét XB130-Silenced SGC7901 sejtek és vad típusú sejtek elnyomta az 5-fluorouracil (5-FU), a ciszplatin, és irinotekán dózis-függő módon, de a ciszplatin és irinotekán érzékenyebbek voltak ellen sXB130-hangtompítós GC sejtek és az 5-FU megmutatta nagyobb érzékenységet a vad típusú sejtekben. Amennyiben a kezelt 5-FU, a betegek magas expressziója XB130 tumorok magasabb volt a túlélési arány, mint az alacsony expressziós daganatok. Ezek az eredmények azt jelzik, hogy a csökkent XB130 fehérje kifejezés egy prognosztikai biomarker rövidebb túlélés és a magasabb kiújulási arányt betegekben GC, valamint a válasz a kemoterápiára.

bevezető hivatkozás: Shi M, Huang W, Lin L , Zheng D, Zuo Q, Wang L, et al. (2012) elhallgattatása XB130 társul Mind a Prognózis és kemoszenzitivitás a gyomorrák. PLoS ONE 7 (8): e41660. doi: 10,1371 /journal.pone.0041660 katalógusa

Szerkesztő: Zilong Wen, Hong Kong University of Science and Technology, Kína katalógusa

Beérkezett: március 31, 2012; Elfogadott: Június 24, 2012-ben; Megjelent: augusztus 23, 2012 katalógusa

Copyright: © Shi et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: Ez a munka ben támogatták a Nemzeti Program Key Basic Research Project (2012CB945100, WL és YL), a csapat Program Természettudományi Alapítvány Guangdong tartomány, Kína (S2011030003134, WL és YL). A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

onkogének és anti-onkogének létfontosságú szerepe van a kialakulásában és progressziójában gyomorrák (GC) és a genetikai heterogenitás bebizonyosodott, hogy befolyásolják a prognózist jelentősen. Ezért vadászik új gének és fehérjék potenciális értékét diagnosztikai vagy prognosztikai eszközök fontos, és a célzás újszerű onkogének újabb ígéretes megközelítése rákterápia. Katalógusa

XB130 egy újonnan azonosított adapter protein, amely erősen kifejezett lép és pajzsmirigy az emberek, miközben ez azt mutatja, gyenge expresszió a vese, agy, tüdő, és a hasnyálmirigy [1]. XB130 észlelt follikuláris és papilláris pajzsmirigy-karcinóma, valamint a humán tüdő karcinóma sejtvonalakban [2]. Bár expresszió csökkent pajzsmirigy-karcinóma, XB130 találták, hogy egy tumor promoter [2]. Leírták, hogy a XB130 nem csak egy szerepet sejtproliferáció, túlélés, a motilitás és invázió [2], [3], [4], de szintén részt vesz jelátviteli [1]. XB130 szabályozza Rac és a citoszkeleton [3], és ez az aktivációban részt vevő c-Src [1] és a foszfatidil-inozitol-3-kináz (PI3K) /Akt útvonal [4], ami viszont szabályozza citoszkeleton funkció [3]. Ezek a jelátviteli útvonalak is kimutatták, hogy lényeges szerepet a kialakulásában és progressziójában GC [5], [6], [7]. Ezért, ott lehet a szerepe a XB130 GC is. Azonban nem kutatás ezen újonnan talált adapter protein megtörtént terén gasztroenterológia eddig. Ebben a tanulmányban azt feltételeztük, hogy az XB130 kifejezés esetleg összefüggésbe hozhatók a túlélés és /vagy a tumor kiújulásának valamint a kemoszenzitivitás a GC. Katalógusa

Eredmények katalógusa

XB130 expresszió normál gyomor szövetek és GC

eltér a korábbi jelentések azt megerősítette, hogy XB130 folyamatosan expresszálódik a normális szövetekben az emberi máj, vastagbél, lép és a gyomor (1a ábra). Immunhisztokémiai vizsgálatot végeztünk, hogy értékelje XB130 expressziót minden 411 pár paraffinba ágyazott metszeteket GC és azok szomszédos, nem-tumor szövetekben. Azt találtuk, hogy XB130 túlnyomórészt kifejezett citoplazmában a normál gyomor szövetben, míg jelentősen downregulált a szövetekben a GC. Mi tovább osztályozzuk a GC be XB130 pozitív (magas expressziót pontszám ≥3) és negatívok (alacsony expressziót pontszám < 3) a festés pontszámot (1b ábra). Előfordulási XB130 pozitív és negatív szakaszban I-III GC voltak nincs különbség, de az a része, XB130 negatívok magasabb volt a színpadi IV és a műtét utáni kiújulás csoportok (1c ábra). Számszerűsített mRNS szintje XB130 mutattunk szakaszban IV palliatív reszekció mintákat, és jelentősen csökkentette az előrehaladott GC (1D). Hasonlóképpen, a csökkent fehérje kifejeződését XB130 fejlett GC is igazolta western blot (ábra 1e). Katalógusa

Alacsony kifejezése XB130 korrelál rossz prognózissal katalógusa

Az elemzés teljes 411 esetben GC az első lépcsőben az I-IV, kumulált túlélése betegek XB130 negatív festéssel szignifikánsan alacsonyabb volt, mint azok a pozitív festéssel (2a ábra). Stádiumú IV GC, akik elvesztették a műtét kúra lehetőséget, azt mutatta, hogy szignifikánsan alacsonyabb a túlélési arány XB130 negatív csoportban (2b ábra). Medián teljes túlélési idő betegek előrehaladott volt már XB130 pozitív csoportban, mint a negatív csoportban (16,7 vs. 8,5 hónap, HR negatív csoportban 1,72, p = 0,011; 1. táblázat). Azoknál a betegeknél az első lépcsőben az I-III GC akik radikális reszekál műtét, betegség-mentes túlélés XB130 pozitív csoportban magasabb volt, mint a negatív csoportban (p < 0,05; 2c ábra), míg a medián idő kiújulása 36 és 24 hónap pozitív és negatív csoportban (1. táblázat, HR negatív betegek 1,2, p = 0,022). Ezek az eredmények azt mutatják, hogy az alacsony kifejeződése XB130 társul rövidebb túlélés és magasabb kiújulásának GC betegeknél. Katalógusa

prognosztikai más klinikopatológiai paraméterek katalógusa

A hatása más klinikopatológiai paraméterek a teljes túlélést, és betegségtől mentes túlélési arányt az 1. táblázatban felsorolt ​​és a 3. ábra felül XB130 eredményeit Kaplan-Meier túlélési funkció elemzés betegeknél IV fázisban szerint csoportosítva a jól ismert tényezők, például a karcinoembrionális antigén (CEA) koncentráció, differenciális fokozat, metasztázis , ascites és kemoterápia bizonyította jelentős befolyást a kumulált túlélést (3. ábra a-e). Egy egyváltozós Cox regressziós analízis betegek radikális kezelést, azt megjegyezte, hogy a szakaszban is szignifikáns prognosztikai tényező kiújulása (1. táblázat). Katalógusa

Egy többváltozós elemzés segítségével Cox modellben megjegyezte, hogy XB130, CEA, kemoterápia és hasvízkór (minden esetben p < 0,01) független tényezők megjósolni HR halálozás betegek szakaszban IV, míg XB130 (p = 0,044) és színpadi (p < 0,000) független tényezők megjósolni HR kiújulása után reszekcióra GC betegeknél az első lépcsőben az I-III (2. táblázat). katalógusa

Kemoterapeutikumok érzékenység válaszul XB130 hangtompító katalógusa

Annak érdekében, hogy megtudja, a terápiás potenciál célzó XB130 megvizsgáltuk sejtviabilitását SH XB130 válaszul az 5-FU, ciszplatin és irinotekán. A sejt életképességének SH-XB130 és vad típusú csoportokat egyaránt elnyomja mind a három kemoterápiás szerek dózisfüggő módon. Illetve, hasonlítsuk össze sh-XB130, vad típusú kontroll kimutatta érzékenyebbek az 5-FU által nyilvánul meg szignifikánsan alacsonyabb a sejtek életképességét (4a ábra), míg a ciszplatin (4b ábra) és irinotekán (4c ábra) bebizonyosodott, hogy hatékonyabban SH XB130 csoportban, mint a vad típusú kontroll. katalógusa

túlélési analízis GC részesülő betegek 5-FU kezelés katalógusa

Rendezés XB130 negatív és pozitív, értékeltük az 5-FU kezelés a színpadi IV GC betegszám retrospektív vizsgálatban. Kezelt 5-FU, betegek XB130 pozitív festődés élvezte magasabb túlélési arány, mint a negatív csoportban (ábra 4d). Ennek megfelelően, XB130 pozitív és 5-FU kezelés volt a hosszabb medián teljes túlélési idő (ábra 4d). Mivel nem volt kevés kezelt betegek ciszplatinnal vagy irinotekán, a befolyása a XB130 expressziós szintjének a klinikai terápiás hatásait nem hasonlították a jelen tanulmányban.

Discussion

XB130 egy nemrégiben klónozott 130 kDa-adapter fehérje, és közölték, hogy túlnyomóan a pajzsmirigy és a lép szövetek által hitelesített northern blot és játszik multifunkcionális szerepet játszik a sejtek túlélését, szaporodását, invázió pajzsmirigy tumor [2], [3], [4], de a mRNS és fehérje expresszió más szövetekben nem erősítette meg real-time PCR, Western blot vagy immunhisztokémiai. Ebben a cikkben, azt először azt igazolta, hogy a XB130 mRNS és fehérje is expresszálódik a normális gyomor szövetek és viszonylag alacsonyabb expressziót GC sejtekben. Ezek a megállapítások ellentétben állnak a korábbi jelentéseket, hogy XB130 mRNS alig volt kimutatható más szövetekben, kivéve a pajzsmirigy és a lép [1], [4], részben azért, mert csak akkor kell használni northern blot megerősítést. XB130 expressziója csökken pajzsmirigy tumor, de továbbra is teljesen világos, hogy XB130 egy prognosztikai biomarker más rosszindulatú daganatok, mint például a gyomorrák (GC) [2]. Annak érdekében, hogy erősítse meg, hogy XB130 részt vesz a GC progresszió, mi elemezte a túlélés vagy a kiújulás 411 beteg GC és megjegyezte, hogy az XB130 alacsony expressziós jósolt alacsonyabb túlélési és magasabb kiújulás. Továbbá, kemoterápiás érzékenység alapozva XB130 expressziós értékeltük az első alkalommal, és a celluláris kísérletek és a klinikai retrospektív tanulmány kimutatta, hogy alulszabályozása XB130 növeli a hatóanyag-érzékenység a ciszplatin és irinotekán, és csökkenti a hatóanyag-érzékenység és 5-fluor-uracil.

Mivel a rákkeltő a korábbi jelentésekben [2], [8], [9], XB130 kell tekinteni onkogén eltérő tumor-gátló fehérje, bár további vizsgálatok szükségesek annak tesztelésére, hogy ez is a helyzet GC. Akkor, hogyan magyarázza a klinikai jelentősége a klinikai megfigyelés, hogy XB130 alulszabályozottsághoz jósolja össztúlélés fejlett GC és magasabb visszaesési arány a kezelt betegek reszekcióra műtét? Tény, hogy ismert, hogy a tumorigenezis eredhet elváltozásai többszörös gének és fehérjék, míg XB130, az adapter protein egynél több funkcionális domént, hatással lehet többszörös upstream és downstream tényezők. Ezért túl korai megítélni, hogy egy gén vagy egy fehérje onkogén vagy nem csak alapozva az expressziója klinikai mintákban, bár az utóbbi utalt néhány nyomokat. Tulajdonképpen downregulációját XB130 GC tekinthető kompenzációs kiigazítás, mert néhány tumor szupresszor lenne mobilizálni ellenállni XB130 progressziója során GC. Hasonlóképpen, azt jelentették, hogy a tumor-szuppresszor a p53 gén expressziója magasabb volt gyengén differenciált GC, mint a jól differenciált is [10], míg a korai gyomorrák kialakulása alacsony szintű apoptózis, megnövekedett expressziója a Bcl-2 és a p53 volt nagyobb valószínűséggel hogy elősegítse metasztázis [11], [12].

XB130 lehet egy proto-onkogén, amely megőrzi a normális szövetben. Az ilyen proto-onkogének hozzájárulhat fenntartsák a fizikai funkcióit a sejtek megújulását, és felfelé irányuló migrációját normál gyomorban. Közben van egy másik a gének szabályozásában, amelyek megakadályozzák a normál sejtek túlzott proliferáció és metaplasia. Azonban, ha a microecological egyensúly disequilibrated, sejtburjánzás és metasztázis ellenőrizhetetlenné, előidézve, melynek köszönhetően a rákkeltő képességet. [13] Ez a klasszikus elmélet a proto-onkogén adhat elfogadható magyarázatot, hogy miért normális szövet ilyen magas XB130 kifejezés továbbra is "egészséges". Ismeretes, hogy számos gén és jelátviteli utak játszanak pro-onkogén vagy anti-onkogén szerepei egy kontextus-függő módon, így nem ritka, hogy ugyanaz a gén fejthet ki különböző hatás különböző szakaszaiban vagy különböző szöveti típusú rák fejlődését [ ,,,0],14], [15], [16]. A jelen vizsgálatban, bár nem érintette a funkciókat XB130 normál gyomor szöveteiben, ez a téma érdekes is, és szükség van a további kutatást. Katalógusa

Ha XB130 kifejezés minta szolgálhat helyettesítő marker prediktív kemoterápia válasz, akkor is magyarázatot ad a prognózist. Jelenleg fluoropirimidin származékok alapú és a platina-bázisú kombinációs kezelések elfogadták, mint a hagyományos első vonalbeli kezelését GC [17], míg az irinotekán, a topoizomeráz I inhibitor, alkalmazható, mint a második vonalbeli kezelés [18], és a ciszplatin nagyrészt használt a kezelés előrehaladott, inoperábilis GC [19]. A jelen kutatás, kemoterápiás érzékenység vizsgálatok alapozva XB130 expressziós szintje végeztünk. GC-sejtek, XB130 knockdown jelzett jobb érzékenységet a ciszplatin és irinotekán, de kevésbé érzékeny az 5-FU. A klinikai adatok azt mutatták, rövidebb teljes túlélési idő az 5-FU-val kezelt betegek alacsony expressziója XB130, ami arra utal, hogy a XB130 downregulation csökkenti a fogékonyság az 5-FU, ami lehet egy másik magyarázat a rossz prognózist a betegek alacsony expressziója XB130 ebben a tanulmányban. Eredményeink GC sejtvonal belekeverni, hogy a fejlett GC, amelyek többsége szerepelt a XB130 alacsony expresszió előnyös lehet inkább a ciszplatin és irinotekán kivételével 5-FU. Tekintettel a heterogén genomi háttér, mint például a különböző expresszióját XB130 GC, lehetséges, hogy egyes populációk válhat a irinotekán és /vagy ciszplatin javasolta a mi cellás kísérletben, és érdemes további vizsgálat céljából. További prospektív vizsgálatok meghatározhatják, hogy XB130 expressziós mintázatok lehet alkalmazni, hogy segítsen stratify betegek különböző multimodális kezelésükhöz. Katalógusa

Összefoglalva, a jelen vizsgálat eredménye az első bizonyíték arra, hogy XB130 létezés gyomor szövetek és GC először . Igazoltuk, hogy a kemoterápiás érzékenység értékelés alapozva XB130 kifejezést először irányította, jelezve, hogy XB130 alacsony expressziója beteg érzékeny lehet cisplatin és irinotekán, mégis vezető bizonyítékokat igényel. A klinikai prospektív E tanulmány tartalmazza (1) XB130 járhatnak GC prognosztikai biomarker alacsony expressziós hozó számára kedvezőtlen eredményekhez; (2) Mivel XB130 alacsony kifejezett GC reagálnak a cisplatin és irinotekán felülmúlja 5-fluorouracil mi kemoterápiás érzékenység vizsgálata, értékelése XB130 véleménynyilvánítás segítse klinikai gyógyszert GC. Katalógusa

Anyagok és módszerek katalógusa

betegek és szövetminták

Minden 411 beteget szövettanilag diagnosztizált Nanfang Kórház, Dél Orvostudományi Egyetem (Guangzhou, Guangdong, Kína) 2000-től 2011-tumor stádium meghatározása szerint a 7. kiadás a AJCC rák staging utasítás 2010. mintákat diagnosztikai célokra vették hozzájárulásával minden egyes beteg. A tanulmány által jóváhagyott intézményi Review Board a Nanfang Kórház, Dél Orvostudományi Egyetem. Az átlagos követési idő minden beteg 59,5 (95% CI: 55,5-63,5) hónap. A klinikai jellemzői és XB130 expresszióját az összes GC betegek 1. táblázat A betegek az I-III szakaszban GC végeztünk reszekcióra, míg a betegek az első lépcsőben a IV kapott palliatív működését.

megelőzően immunhisztokémia elemzés paraffinba ágyazott primer szövetmintákban vágtuk 4 um vastag metszeteket, és üveg tárgylemezekre. Kilenc pár tumor és rák-szomszédos normál szövetben a színpadról IV GC betegeket véletlenszerűen kvantitatív valós idejű PCR és hat pár Western blot analízishez. Katalógusa

Az immunhisztokémiai katalógusa

Az immunhisztokémiai festéssel végeztük a Dako Envision rendszer (Dako, Carpinteria, CA), és nyúl anti-XB130 Ab (1:100; Abnove) a gyártó által ajánlott protokollt. Mert XB130 értékelés alapján a szöveti metszetet beolvasott teljesen rendelni a pontszámok. A festés intenzitását pontozni 0 (negatív), 1 (gyenge), 2 (közepes) vagy 3 (erős). A mértéke festést pontoztuk 0 (0%), 1 (1% -25%), 2 (26% -50%), 3 (51% -75%), vagy 4 (76% -100%), szerint a százalékokat a pozitívan festődő területek vonatkozásában az egész karcinóma terület (vagy a teljes szakaszt a normál mintákat). A összege festődés intenzitása és mértéke pontszámok használtunk a végső festési pontszámok (0-7) számára XB130. Céljára a túlélés értékelése, daganatok, amelynek végső festési pontszám ≥3 tekintettük pozitívnak. XB130 immunfestést értékeltük függetlenül két személy vak, hogy a klinikai paraméterek.

Fluorescence kvantitatív PCR

Teljes RNS-t extraháltunk Trizol kit (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). Reverz transzkripció A cDNS-t ezután kapott iScript ™ cDNA Synthesis Kit (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, USA) a gyártó utasításait követve. Minden RNS adatokat mutattak viszonyítva háztartási gén β-aktin a ΔΔCt módszerrel. Rutin PCR-t is végeztünk, hogy megvizsgálja az expressziós XB130 különböző szervi humán és egér (primer szekvenciák táblázat S1).

Western blot

A szöveteket kétszer mossuk hideg foszfáttal pufferolt sóoldattal ( PBS), és lizáltuk fehérje lízis puffert 30 percig. A centrifugálást végeztünk, és a fehérje-tartalmú felülúszót megmarad. A fehérje lizátumokat elválasztjuk electrophorectically 10% -os SDS-poliakrilamid gélen és átvisszük polivinilidén fluorid membrán (Immobilon P, Millipore, Bedford, MA). Ezután immunblot végeztünk a nyúl anti-XB130 antitest (PradoWalnut, CA, USA) és β-aktin (Santa Cruz, CA). Immunreaktív sávokat láthatóvá kemilumineszcencia módszerrel (Amersham) Western blot-érzékelő rendszer (Kodak Digital Science, Rochester, NY, USA) és mennyiségileg Image szoftver QuantityOne v4.6.2. Katalógusa

Sejtkultúra

származó sejteket SGC7901 sejtvonalat tenyésztettünk komplett tápközegben [Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 közegben (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA), amely 10% magzati borjúszérumot (FBS) (Hyclone)]. A stabilan transzfektált sejteket tartottunk fenn média puromicin jelenlétében (Sigma-Aldrich). A sejteket 5% CO _{2 37 ° C-on.}

A stabilan transzfektált sejtvonalak létrehozását

Három különböző shRNS szekvenciák XB130 klónoztuk pSuper-Rretro-puromicin plazmidot BglII restrikciós enzimet, Hind III (New England Biolabs) és T4 DNS-ligázt (Takara). Mindkét pSuper-Rretro-Puro-shXB130 és pSuper-Rretro-Puro épültek. pSuper-Rretro-puromicin-shXB130 kombinált csomagolás plazmid vektor vagy tülekedés vektor negatív kontrollként töltjük vírus segítségével a kalcium-foszfát módszerrel. SGC7901 sejteket transzfektáltunk shRNS plazmidokat Lipofectamine 2000 (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA), háromszor ismétlik. A sejteket tenyésztettük, amint a fentiekben említettük, és egyedi kolóniákat választott Western-blottal és fluoreszcencia kvantitatív PCR és használtuk a további kísérletekben. Három shRNS célzás XB130 és egy tülekedés volt a célja (táblázat S2). Mindkét mRNS és protein expresszióját XB130 (primer szekvenciát táblázat S1, kifejezés ábrán látható eredmények S1A, B) megerősítette real-time PCR és Western-blottal. Adenovírus fertőzés hatékonyság kimutatta ábrán S1C és D.

A sejtek életképességét elemzés

tripszinizáltuk és szélesztettünk 96 lyukú lemezeken a kezdeti sűrűsége 0,2 × 10 ^{4 /lyuk, sejteket tenyésztjük és a megfigyelt 1, 3, 5 és 7 nap. A sejtek életképességét úgy határoztuk meg, a metil-thiazolyltetrazolium (MTT) vizsgálat szerint a gyártó utasításai szerint. Az abszorbanciát mérjük 570 nm-en, és 655 nm-en, mint a referencia-hullámhossz. Minden kísérletet háromszoros ismétlésben.}

Kemoterapeutikumok-érzékenység értékelését GC sejtekben

A sejteket a vad típusú kontroll és SH-XB130 voltak a közegben tenyésztjük 5-fluorouracil (5-FU), ciszplatin vagy irinotekán különböző koncentrációban. Negyven nyolc órával később, a sejtek életképességét értékeltük.

Statisztikai analízis

Az eredményeket átlag ± SEM vagy medián. A chi-négyzet próba a kategorikus változók és t-próba a folyamatos változókat használtak. A túlélés és a kiújulás aránya szerint számolva a Kaplan-Meier-módszerrel. A szignifikancia elfogadott egy p katalógusa értéke kisebb, mint 0,05. Katalógusa

alátámasztó információk katalógusa ábra S1.
validálása géncsendesítéssel hatása a kis hajtű RNS XB130 (sh-XB130), valamint a fertőző hatékonyságát adenovírus. XB130 downregulált sejteket vonal modelleket is megerősítette valós idejű PCR (a) és Western-blot (B). -Sejteket transzfektáltunk Scramble vektor szolgált negatív kontrollként, és a nem-transzfektált MOCK kontrollként. A fertőző hatékonyságát adenovírus 293FT tenyésztett sejtekben igazoltuk normál (C) és a fluoreszcencia (D) mikroszkópiák. Fóliagombjai az amplifikációs görbe a valós idejű PCR. Katalógusa doi: 10,1371 /journal.pone.0041660.s001 katalógusa (PPT) hotelben táblázat S1.
primer szekvenciák Real-time PCR, vagy rutin. katalógusa doi: 10,1371 /journal.pone.0041660.s002 katalógusa (DOC) hotelben táblázat S2.
XB130 Sh-RNS-szekvenciák. katalógusa doi: 10,1371 /journal.pone.0041660.s003 katalógusa (DOC) hotelben

• PLoS One: adenovírus kézbesítése EMX2 Gene elnyomja Growth in Human gyomorkarcinóma
• PLoS One: eltérő tendenciákat a Recent Lakosság-alapú túlélési arány nyelőcső és a gyomorrák