PLoS One: MUC4 és MUC1 expressziója a Adenocarcinoma A gyomor korrelál Hajó Invasion és nyirokcsomómetastasis: immunhisztokémiai vizsgálata Korai gyomorrák

absztrakt katalógusa

Korábban már beszámoltunk, hogy MUC4 kifejezés egy rossz prognózisú különböző carcinoma. A korábbi tanulmány is kimutatta, hogy a MUC1 expressziója gyomor- rákok, beleértve a korai és előrehaladott szakaszában egy rossz prognózisú. A jelen vizsgálatban a kifejezés profilok MUC4 és MUC1 vizsgáltuk immunhisztokémiai (IHC) két anti-MUC4 monoklonális antitestek (MAb), 8G7 és 1G8, és az anti-MUC1 monoklonális DF3 104 gastrectomián példányai korai gyomor adenocarcinoma submucosalis invázió (pT1b2), beleértve a 197 szövettani altípus elváltozások. Mielőtt az IHC vizsgálat az emberi preparátumok értékeltük sajátosságát két Mab Western blot és immunhisztokémiai két MUC4 mRNS gyomorrák sejtvonalakon. MAb 8G7 reagált világosan, míg MAb 1G8 nem mutatott reaktivitást, illetve mindkét Western blot vagy IHC. Az IHC a gyomorrák, a kifejezés aránya MUC4 /8G7 által észlelt Mab 8G7, MUC4 /1G8 érzékeli Mab 1G8 és MUC1 /DF3 kimutatható Mab DF3 jól differenciált típusok (70%, 38/54, 67%, 36/54; 52%, 28/54) szignifikánsan magasabb volt, mint az rosszul differenciált típusok (18%, 10/55; 36%, 20/55, 13%, 7/55) ( P katalógusa < 0,0001; P katalógusa = 0,0021; P katalógusa < 0,0001), ill. A MUC4 /8G7 kifejezést összefügg nyirokér invázió (r = 0,304, P katalógusa = 0,033). Másrészt, a MUC4 /1G8 kifejezést összefügg nyirokér invázió (r = 0,395, P katalógusa = 0,001) és a nyirokcsomó-áttétek (r = 0,296, P katalógusa = 0,045). A MUC1 /DF3 kifejezést összefügg nyirokér invázió (r = 0,357, P katalógusa = 0,032) és a vénás invázió (r = 0,377, P katalógusa = 0,024). Összefoglalva, a kifejezés MUC4 valamint MUC1 korai gyomorrák hasznos marker megjósolni rossz prognosztikai tényezők a hajó invázió. Katalógusa

Citation: Tamura Y, Higashi M, Kitamoto S, Yokoyama S, Osako M, Horinouchi M, et al. (2012) MUC4 és MUC1 expressziója a Adenocarcinoma A gyomor korrelál Hajó Invasion és nyirokcsomómetastasis: immunhisztokémiai vizsgálata Korai gyomorrák. PLoS ONE 7 (11): e49251. doi: 10,1371 /journal.pone.0049251 katalógusa

Szerkesztő: Fazlul H. Sarkar, Wayne State University School of Medicine, Amerikai Egyesült Államok katalógusa

Beérkezett: augusztus 17, 2012; Elfogadva: október 5, 2012; Megjelent: november 13, 2012 katalógusa

Copyright: © 2012 Tamura és mtsai. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: Ez a tanulmány részben támogatta a Princes Takamatsu Cancer Research Fund S. Yonezawa; Grants-in-Aid for Scientific Research tudományos kutatás (B) 23390085 S. Yonezawa; Tudományos kutatások (C) 21590399 M. Higashi; Fiatal Tudósok (B) 24701008 S. Yokoyama; Tudományos kutatások fő területei 239349 S. Kitamoto (JSPS Fellowship) Minisztérium Oktatási, Tudományos, Sport, Kulturális és Technológiai, Japán; a hasnyálmirigy Research Foundation Japán S. Yokoyama; és a Kodama Emlékalapítvány Japán M. Higashi. S. Batra támogatja részben a National Institutes of Health támogatások (CA78590, CA163120, CA133944 és CA111294). A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Nincs szükség további külső finanszírozásra kapott ebben a vizsgálatban. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentik, hogy nincs összeférhetetlenség tekintetében a munkát a tanulmány. Katalógusa

Bevezető katalógusa

A gyomorrák ez a negyedik leggyakoribb rák a világon, és több mint 90% -a gyomor adenokarcinóma [1]. A közelmúltban, Japánban, a korai detektálás a rutin endoszkópos vizsgálat a Gastroenterology klinikákon eredményezett pontos diagnózis és hatékony sebészeti vagy endoszkópos kezelések, így a viszonylag jobb prognózist. Az elemzés 11.261 gyomorrákos betegeknél kezelt gyomor reszekció, a TNM 5 éves túlélési aránya IA stádiumú volt 91,8% és a színpadi IB a túlélési arány 84,6% [2]. A korai gyomorrák, endoszkópos nyálkahártya alá boncolás (ESD) az első választandó kezelés Japánban, de a kritériumoknak a további műtétre, beleértve a nyirokcsomók után ESD még mindig ellentmondásos. [3] katalógusa

A sorozat az immunhisztokémiai (IHC) vizsgálatokat a mucin expresszió különféle humán neoplazmák kimutatták, hogy a kifejezés a MUC1 mucin (pán-epiteliális membrán-asszociált mucin) összefügg invazív proliferáció a tumorok és a rossz kimenetele a betegek, míg a kifejezés a MUC2 mucin (intesztinális típusú szekréciós mucin) összefügg a nem invazív burjánzása a daganatos és a kedvező eredményt a betegek számára [4], [5]. A mi korábbi tanulmány kimutatta, hogy a MUC1 expressziója gyomor rák egy szegény prognosztikai tényező [6].

MUC4 először számoltak mint tracheobronchialis mucin [7] és egy membrán-asszociált mucin [8]. Tanulmányunkban sorozatban, a kifejezés MUC4 a májon belüli epevezeték, hasnyálmirigy-vezeték adenokarcinóma, extrahepatikus epevezeték karcinóma, tüdő-adenokarcinóma, és szájüregi laphámrák volt független tényező a rossz prognózis és hasznos marker megjósolni a kimenetelét a betegek [ ,,,0],5], [9], [10], [11], [12], [13]. Sajnos, kevés tanulmányok a MUC4 expressziós profil humán gyomorrák. A jelen tanulmányban azt vizsgáltuk, expressziós profilok a MUC4 valamint MUC1 korai gyomorrák szöveteket, és megállapította, hogy MUC4 és MUC1 kifejezést a korai gyomorrák lesz rossz prognosztikai faktorok által nyirokér invázió, a véredények invázió és a nyirokcsomó metasztázist.

Mivel az anti-MUC4 monoklonális antitestek (Mab-ok), 8G7 és 1G8, ismert, hogy észlelni különböző helyeire MUC4 molekula. Az mAb 8G7 felismer egy tandem ismétlődő szekvencia (STGDTTPLPVTDTSSV) az emberi MUC4α alegység [14]. Az mAb 1G8 emeljük szemben a patkány szekvencia (patkány ASGP-2), és egy olyan epitópját ismeri fel a patkány ASGP-2 alegység, amely megfelel a humán MUC4β alegység, és mutatja a keresztreaktivitást humán mintákat [15]. Így egy különleges figyelmet fordítottak az összehasonlítás két anti-MUC4 MAb Western blot és immunhisztokémiai két gyomor rákos sejtvonalak, mielőtt az IHC tanulmány az emberi gyomorrák szöveteket. Továbbá, mivel vita van kapcsolatban prognosztikai jelentősége ezeknek az anti-MUC4 MAb a szakirodalom a MUC4 kifejezés különböző rákos is végeztünk. Katalógusa

Anyagok és módszerek katalógusa

Betegek és szövetminták

gastrectomián példányai 104 korai gyomorrák, amelyek azt mutatják, nyálkahártya alatti invázió, pT1b2, vagy anélkül nyirokcsomó áttétek voltak lekérdezett fájl között 1994 és 2008 a Kagoshima-shi Medical Association Hospital. Az átlagéletkor a betegek 65,7 (S. D., 9,8; tartomány 39-92 év; átlag életkor 66 év); 64 esetben volt férfi, és 40 esetben nő volt. Ezt a vizsgálatot megfelelően vezérelve a Helsinki Nyilatkozat, és jóváhagyta az etikai bizottság Kagoshima-shi Medical Association Hospital (KMAH 2011-02-02). Tájékozott, írásos beleegyezésüket adták az összes betegnél. Azokban az esetekben, amelyekben több mint két szövettani típusú keverve egy lézió, minden szövettani mintát értékeltük függetlenül szerint a japán osztályozása gyomor karcinóma (JCGC) [16].

értékelése monoklonális antitestek MUC4

sejtek és tenyésztési körülmények között.

emberi gyomor rákos sejtvonalat (SNU-16 és az NCI-N87), és hasnyálmirigyrák-sejtvonalak (PANC1 és CAPAN1) szereztünk be az American Type Culture Collection (Manassas, VA). Mindkét gyomor rákos sejteket RPMI-1640 (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO); PANC1 sejteket tartottunk fenn DMEM (Sigma-Aldrich); Capan1 sejteket tartottunk fenn DMEM /F-12 (Sigma-Aldrich). Minden tápközeget 10% magzati borjúszérummal (GIBCO, Breda, Hollandia) és 100 U /mL penicillin /100 ng /ml sztreptomicint (Sigma-Aldrich). Minden sejteket 5% CO 2, 37 ° C-on és tartjuk szub-összefolyó szinteken.

RNS extrakció és RT-PCR-rel.

Teljes RNS-t kivontuk a sejtekből az RNeasy mini kit (Qiagen, Hilden, Németország), és mennyiségileg NanoDrop ND-1000 spektrofotométerrel. A kapott mRNS-t (2 ug) t reverz transzkripcióval cDNS-sé a nagykapacitású RNS cDNS-készlet (Applied Biosystems, Foster City, CA). A következő primereket terveztünk a későbbi PCR: MUC4, 5'TGGGACGATGCTGACTTCTC-3 ', 5'-CCCCGTTGTTTGTCATCTTTC-3'; ACTB, 5'-CTCTTCCAGCCTTCCTTCCTG-3 ', 5'-GAAGCATTTGCGGTGGACGAT-3'. PCR-t végeztünk a AmpliTaq arany gyors PCR Master Mix (Applied Biosystems), a gyártó utasításai szerint.

Fehérjeextrakció és Western-blottal.

Teljes sejt lizátumokat készítünk RIPA pufferben, amely proteáz inhibitor koktél (Nacalai Tesque, Kyoto, Japán). A fehérje koncentrációját mértük BCA vizsgálattal (Thermo Scientific, Rockford, IL). Egyenlő mennyiségű fehérjét lizátumot oldani 2% -os agaróz gélen SDS-t tartalmazó és passzívan vittük át PVDF membránra egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. A membránokat blokkoltuk 1% fölözött tej /PBST 2 óra alatt, és alávetni a standard immunológiai eljárás alkalmazásával specifikus primer antitestekkel. A primer antitesteket a következők: anti-humán MUC4 MAb 8G7 (1:1000 által generált, Dr. Surinder K. Batra, University of Nebraska Medical Center, Omaha, NE) és 1G8 (1:1000, vásárolt Invitrogen, Camarillo, CA), és anti-humán a-tubulin MAb DM1A (1:2,000, Sigma-Aldrich).

Immuncitokémia a tenyésztett sejtekben.

MUC4 festéssel tenyésztett sejtekben, sejteket szélesztettünk 8-kamra lemezek (Becton Dickinson and Company, Franklin Lakes, NJ), és inkubáltuk egy éjszakán át. A sejteket rögzítettük 3,7% formaldehiddel 10 percig szobahőmérsékleten, és megfestettük MAb 8G7 (1:24,000) és MAb 1G8 (1:4,000) egy éjszakán át 4 ° C-on, ill. Signal detektálás végeztük immunperoxidáz módszerrel Vectastain Elite ABC készlet (Vector Laboratories, Inc., Burlingame, CA) alkalmazásával a gyártó utasításai szerint.

Immunhisztokémia emberi szövetek

IHC emberi gyomor carcinoma végeztük a következő antitestek a maximális vágási felületeket minden tumor. MUC4 detektáltuk két mAb, 8G7 és 1G8. Az összehasonlító tanulmány MUC1 expresszióját is vizsgáltuk Mab DF3 (egér IgG, TFB, Tokió, Japán). IHC végeztük az immunperoxidáz módszerrel a következők szerint. Antigén-visszanyerés alkalmazásával végeztük CC1 antigén-visszanyerés-puffer (pH = 8,5 EDTA, 10037 ° C, 30 perc., Ventana Medical Systems, Tucson, AZ) minden szakaszok. Az inkubálást követően a primer antitestekkel (MAb MUC4 /8G7 hígított 1:3000, 37 ° C-on, 32 perc .; MAb MUC4 /1G8 hígított 1:500, 37 ° C-on, 24 perc .; MAb MUC1 /DF3 1:50 arányban hígítva, 37 ° C-on 32 perc.) foszfáttal pufferolt sóoldatban, pH 7,4 (PBS), 1% szarvasmarha-szérum-albumin, metszeteket egy Referencia XT automatizált dia Stainer alkalmazásával diaminobenzidin detektáló reagenskészlet (Ultraview DAB, Ventana Medical Systems). Az egyszerűség kedvéért MUC4 /8G7, MUC4 /1G8 és MUC1 /DF3 jelölik a mucin antigének által észlelt egyes antitestek. Katalógusa

pontozása eredményeket és statisztikai elemzés. Katalógusa

Négy vak vizsgálatot ( YT, MH, MG és SY) értékelte a IHC-festéssel adatokat önállóan. Ha az értékelés eltérő közül négy, a végső döntés született konszenzus. Az eredményeket alapján értékeltük a százalékos pozitívan festődő karcinóma sejteket, és a százalékos adatok soroltuk hat fokozat a következő pontozási rendszer: negatív, sem a karcinóma festett sejtek; halvány, < 5% karcinóma festett sejtek; 1+ ≥5% < 25%; 2+, ≥25% < 50%; 3+ ≥50% < 75%; és 4+: ≥75% foltos. Esetben ≥5% carcinoma festett sejtek pozitívnak tekintettük. Statisztikai analízist parametrikus módszerekkel EXCEL-statisztika Ver.3 szoftver által generált Hisae Yanai, Természettudományi Kar, Saitama Egyetem (OMS Publishing, Japán). Katalógusa

A túlélés a betegeknél összehasonlítottuk a csoport pozitív MUC4 /8G7, MUC4 /1G8 vagy MUC1 /DF3 kifejezés és a csoport negatív kifejezése szerint a Kaplan-Meier-módszerrel, és a különbségek a túlélési görbék alkalmazásával vizsgáltuk a log-rank teszt. A valószínűsége P < 0,05 értéket tekintettük statisztikailag szignifikánsnak. Katalógusa

Eredmények katalógusa

értékelése két monoklonális antitestek MUC4 katalógusa

Annak vizsgálatára, a különbség az antitest specificitása közti 8G7 és 1G8, mi végzett RT-PCR, Western-blot és az IHC analízissel két gyomor rákos sejtvonalak, SNU-16 és az NCI-N87 sejteket. A MUC4 mRNS kimutatható volt a két gyomor rákos sejtvonalat (1A.). Összhangban van az előző jelentésben [14], a mi adataink szerint 8G7 elismert igen nagy molekulatömegű fehérje (több mint 500 kD, amely a várt méretű natív MUC4). Éppen ellenkezőleg, a 1G8 nem mutat semmilyen immunreaktív sávokat (ábra. 1B). Ugyanezt az eredményt figyeltünk meg a IHC analízis (ábra. 1C).

immunhisztokémiai festése gastrectomián példányaira

immunhisztokémiai festése nem neopláziás gyomor nyálkahártyáját.

A nem -neoplastic nyálkahártyája az esetek gyomorrák, MUC4 /8G7 fejeztük néha a citoplazmában felületi nyálkahártya epitélium, és gyakran, de gyengén citoplazmájában fundus és a pylorus mirigyek (ábra S1 a és D). MUC4 /1G8-ben gyakran expresszálódik a sejt Apex és a citoplazma a felület nyálkahártya epitélium, és gyakran, de gyengén citoplazmájában fundus és a pylorus mirigyek (ábra S1 B és E) és volt látható állandóan a vaszkuláris endotélium. MUC1 /DF3 néha kifejezett felületi nyálkahártya epitélium, és mindig a fundus mirigyek (különösen intenzíven a sejt tetőgerinc), de nem a pylorus mirigyek (ábra S1 C és F).

immunhisztokémiai festése gyomor adenokarcinóma. katalógusa

Megvizsgáltuk gastrectomián példányai 104 korai gyomorrák (pT1b2), mert szerettük volna elkerülni a nagy degeneratív változások, amelyek gyakran látható előrehaladott rákos szövetekben, és állítsa be a terepet a pontos összehasonlítása IHC eredményeit és a klinikopatológiai faktorok. katalógusa

Ha kettőnél több szövettani típus keverünk egy elváltozás a gastrectomián példányai 104 korai gyomorrák, minden szövettani mintát külön értékelni szerint a JCGC [16]. Ezért a 104 gastrectomián példányok, tudtuk értékelni 197 karcinóma gócok különböző szövettani típusú összesen.

közül a 197 elváltozások voltak 15 léziók papilláris adenokarcinóma (PAP) (füge esetében. A 2A-D), 39. jól differenciált csőszerű adenokarcinóma (tub1) (ábrák. 2E-H), 52. mérsékelten differenciált csőszerű adenokarcinóma (tub2) (ábrák. 2I-L), 6. mucinosus carcinomák (MUC) (ábrák. 2M-P), 8 a szilárd típusú gyengén differenciált adenocarcinoma (por1) (ábrák. 2Q-T), 47 nem-szilárd típusú gyengén differenciált adenocarcinoma (por2) (ábrák. 2U-X) és 30. pecsétgyûrûsejtes sejtes carcinoma (SIG) (ábra. 2Y-b), alapul összefüggésben a közös szövettani osztályozása gyomorrák JCGC [16]. Az összefüggésben a WHO besorolása daganatok a gyomor [17], valamint az, hogy a JCGC [16], pap és tub1 soroltuk "jól differenciált adenocarcinoma", és por1 és por2 soroltuk "rosszul differenciált adenocarcinoma ". Az adatok az expressziós ráta MUC4 /8G7, MUC4 /1G8 és MUC1 /DF3 összegeztük a 3. ábra részletes száma és aránya pozitívan festődő neoplasztikus sejtek segítségével a pontozási rendszer került táblázat foglalja össze az S1.

expressziós profilja MUC4 /8G7. katalógusa

Ezek a 197 adenokarcinóma elváltozások, MUC4 /8G7-ben kifejezve 83 elváltozások (42%). MUC4 /8G7 szignifikánsan magasabb arány a pozitív expresszió (≥5% carcinoma festett sejtek) A jól differenciált típus (PAP + tub1: 70%, 38/54), mint hogy rosszul differenciált típus (por1 + por2: 18% , 10/55) ( P katalógusa < 0,0001) (3A., nyilak). MUC4 /8G7 fejeztük főként a citoplazmában, a neoplasztikus sejtek PAP (ábra. 2B), tub1 (ábra. 2F) és tub2 (ábra. 2J), abban az esetben pozitív expressziót.

expressziós profil a MUC4 /1G8. katalógusa

Ezek a 197 adenokarcinóma elváltozások, MUC4 /1G8-ben kifejezve 95 elváltozások (48%). MUC4 /1G8 szignifikánsan magasabb a pozitív kifejezés jól differenciált típusok (PAP + tub1: 67%, 36/54), mint a rosszul differenciált típusok (por1 + por2: 36%, 20/55) ( P katalógusa = 0,0021) (ábra. 3B, nyilak). MUC4 /1G8 fejeztük elsősorban a sejt csúcsait pap (ábra. 2C), tub1 (ábra. 2G) és tub2 (ábra. 2K), vagy a intracitoplazmikus mucin lényegét sig (2A.), Az esetek pozitív kifejeződése. katalógusa

Expression profilja MUC1 /DF3. katalógusa

Ezek a 197 adenokarcinóma elváltozások, MUC1 /DF3 fejeztük 62 elváltozások (31%). MUC1 /DF3 szignifikánsan magasabb a pozitív kifejezés jól differenciált típusok (PAP + tub1: 52%, 28/54), mint a rosszul differenciált típusok (por1 + por2: 13%, 7/55) ( P
< 0,0001) (3C., nyilak). MUC1 /DF3 fejeztük elsősorban a sejt csúcsait pap, tub1 és tub2 (ábra. 2 liter), abban az esetben a pozitív kifejeződése. Katalógusa

összehasonlítása mucin kifejezés az egyes szövettani típus. Katalógusa

Ebben tub1, kifejezés aránya MUC4 /8G7 és MUC4 /1G8 szignifikánsan magasabb volt, mint a MUC1 /DF3 ( P katalógusa = 0,0106 és P katalógusa = 0,039, sorrendben) (3., * 1). Ebben por2 kifejezés aránya MUC4 /1G8 szignifikánsan magasabb volt, mint a MUC4 /8G7 ( P katalógusa = 0,0286), illetve hogy a MUC1 /DF3 ( P katalógusa = 0,0005) (ábra. 3 * 2). Ebben sig, kifejezés aránya MUC4 /1G8 szignifikánsan magasabb volt, mint a MUC4 /8G7 ( P katalógusa = 0,0158), illetve hogy a MUC1 /DF3 (sig P katalógusa = 0,0019) (ábra . 3 * 3). A többi histolgical típusú (pap, tub2, FRA és por1) nem volt szignifikáns különbség a kifejezés rátája MUC4 /8G7, MUC4 /1G8 és MUC1 /DF3 (3.). Katalógusa

közötti kapcsolat MUC4 vagy MUC1 expresszióját és nyirokér invázió, a véredények invázió és nyirokcsomómetastasis. katalógusa

Szemikvantitatív értékelése nyirokér invázió (ly), vénás invázió (v) és nyirokcsomó áttétek állapot (N) meghatározása a JCGC [16]. Nyirokér invázió (ly) értékeltük az alábbiak szerint ly0 nem nyirokér invázió; Ly1, minimális nyirokér invázió; ly2, mérsékelt nyirokér invázió; és ly3, jelzett nyirokér invázió. A vénás invázió (V), hasonló értékelési (V0 v3) alkalmazásával végeztük rugalmas festéssel (Victoria-kék), melyet hozzáadunk hematoxilin-eozin-festéssel. A teljes száma nyirokcsomók száma és a bevont nyirokcsomók minden csomóponti állomásra (N) feljegyeztük a következők; N0, nincs regionális nyirokcsomó metasztázis N1, áttét 1-2 regionális nyirokcsomók és N2 áttét 3-6 nyirokcsomók. Regionális nyirokcsomó metasztázis volt megfigyelhető 55 beteg (N1, 41 esetben, N2, 14 eset). Nem volt szignifikáns összefüggés a szövettani típus és nyirokér invázió, vénás invázió vagy nyirokcsomómetastasis állapotát. Katalógusa

Minden egyes esetben a legmagasabb pontszámot a hat IHC fokozat (negatív, gyenge, 1+, 2+, 3+ vagy 4+) a különböző szövettani típusú megszámoltuk a IHC pontszámot az egyes, például "IHC pontszámot 4+" egy eset [tub1 pontszám, 3+; tub2 pontszám, 4+]. Értékeltük az összefüggés a IHC pontszámot, és az ly, v és N tényezők minden egyes beteg. Amint az 1. táblázatban látható, a MUC4 /8G7 expresszió összefügg nyirokrendszeri invázió (r = 0,304, P
= 0,033). A MUC4 /1G8 kifejezést összefügg nyirokér invázió (r = 0,395, P katalógusa = 0,001) és a nyirokcsomó-áttétek (r = 0,296, P katalógusa = 0,045). A MUC1 /DF3 kifejezést összefügg nyirokér invázió (r = 0,357, P katalógusa = 0,032) és a vénás invázió (r = 0,377, P katalógusa = 0,024). Katalógusa

Továbbá megvizsgáltuk közötti korreláció IHC pontszámok MUC4 /8G7, MUC4 /1G8 és MUC1 /DF3. Ahogy a 2. táblázatban látható, volt korreláció MUC4 /8G7 pontszám és MUC4 /1G8 pontszám (r = 0,486, P katalógusa < 0,0001). Ezzel szemben nem volt összefüggés MUC4 /8G7 pontszám és MUC1 /DF3 pontszám (r = 0,267, P katalógusa = 0,202), és nem volt összefüggés MUC4 /1G8 pontszám és MUC1 /DF3 pontszám (r = 0,245, P katalógusa = 0,269). katalógusa

közötti kapcsolat MUC4 vagy MUC1 expresszióját és a túlélés. katalógusa

Ezek a 104 beteg, nyomon követése adatokat kaptunk 87 beteg. Medián követési idő 47,5 hónap (0-193 hónap). A 87 beteg, egy beteg meghalt a gyomorrák 39 hónappal a műtét után, egy betegben alakult májmetasztázisos de túlélte a 78 hónap, és két beteg meghalt egyéb betegségek. 85 betegnél kivéve két beteg meghalt egyéb betegségek, Kaplan-Meier becslés teszteltük a log-rank teszt. Közötti pozitív csoport és a negatív csoport (MUC4 /8G7 + vs -, MUC4 /1G8 + vs - vagy MUC1 /DF3 + vs -), log-rank teszt teljes túlélés (MUC4 /8G7, P = 0,27; MUC4 /1G8, P = 0,37; MUC1 /DF3, P = 0,22), és a progressziómentes túlélés (MUC4 /8G7, P = 0,85; MUC4 /1G8, P = 0,23; MUC1 /DF3, P = 0,83) nem mutatott szignifikáns különbségeket. További elemzés 42 beteg túlélte a több mint 5 éve az is kiderült, nem volt szignifikáns különbség. Katalógusa

Vita katalógusa

Az utóbbi időben, már beszámolt arról, hogy a kifejezés a MUC4 független rossz prognózisú a pancreatobiliaris adenocarcinoma [ ,,,0],10], [11], [12], valamint a tüdő adenocarcinoma [13] és szájüregi laphámrák [9]. MUC1 is leírták, hogy egy rossz prognosztikai faktor különféle humán daganatok [4], [5]. A korábbi vizsgálatban a gyomorrák, beleértve a korai rákok és előrehaladott rákok kimutatták, hogy a MUC1 hasznos prognosztikai tényező rossz eredmény a betegek [6]. A jelen vizsgálatban a kapcsolatát mucin expresszió és a páciens eredményét nem lehet értékelni, mert a gyomor rákos megbetegedések korai szakaszban pT1b2 és a legtöbb betegnél volt a kedvező eredmény. Mindazonáltal a következő eredményeket kaptuk: (1) A MUC4 /8G7, MUC4 /1G8 és MUC1 /DF3 kifejezéseket összefügg nyirok- invázió. (2) A MUC4 /1G8 kifejezés kapcsolódik nyirokcsomó áttétet. (3) Az MU1 /DF3 kifejezés kapcsolódik vénás invázió. Japánban, ESD az első választandó kezelés a korai gyomorrák [3]. Vizsgálata MUC4 valamint MUC1 az ESD példányokat tisztázni, hogy a további műtétre, beleértve a nyirokcsomók, illetve gyakori nyomon követése az áttét van szükség. Katalógusa

A korábbi vizsgálatok azt mutatták, hogy nincs összefüggés a siginificant MUC4 kifejezés és MUC1 expresszióját [10], [11], [12], [13]. Szintén a jelen tanulmány a gyomor rák, a korai szakaszban nem volt siginificant korreláció expressziója MUC4 és MUC1. Mindkét MUC4 és MUC1 expresszióját a gyomor rák kapcsolatban lehet a rossz prognosztikai faktorok, mint például a nyirok invázió, vénás invázió és a nyirokcsomó-metasztázis útján különböző mechanizmus.

Az előző vizsgálatban a gyomor rák segítségével MAb 8G7, Senapati et al. Kimutattuk, hogy MUC4 /8G7 kifejezés nem volt összefüggésben a daganat típusa, színpadon, vagy a mértéke differenciálás [18]. Érdekes módon, az eredmények azt mutatták, egy 42% kifejezés aránya az I. stádiumú rákok (n = 19), amely összhangban van az adataink (MUC4 /8G7: 42% és MUC4 /1G8: 48%), a jelen tanulmányt az I. szakaszban rákok (n = 104). Tanulmányunk azonban kiderült, hogy mind MUC4 /8G7 és MUC4 /1G8 kifejezések voltak eltérő a szövettani típusú, és jóval magasabb volt a jól differenciált típusok, mint a rosszul differenciált típus. MUC1 /DF3 expressziója szintén szignifikánsan magasabb volt a jól differenciált típusok, mint a rosszul differenciált típus. Azt jelentette, hogy a MUC1 expressziója magas volt a jól differenciált adenocarcinoma a gyomor rákos megbetegedések, beleértve a fejlett rák, és a magas MUC1 expresszióját befolyásolhatja a betegek túlélési jól differenciált adenokarcinóma gyomor [6]. A magas szintű expresszióját MUC4 a jól differenciált adenocarcinoma is hatással lehetnek a betegek túlélési gyomorrák. A mi korábbi tanulmány [6], az arány a magas expresszióját MUC1 /DF3 szignifikánsan magasabb volt az előrehaladott gyomorrák rákok, mint a korai gyomor rák. A kapcsolat a MUC4 kifejezés az invázió gyomorrák lenne érdekes terület tanulmány. Katalógusa

Van vitának prognosztikai jelentősége MUC4 /8G7 és MUC4 /1G8 kifejezést. Így áttekintettük 19 cikkei MUC4 IHC vizsgálat alkalmazható különböző emberi rákos szövetekben (3. táblázat). A jelentősége MUC4 /8G7 és MUC4 /1G8 nem lehetett értékelni 8. 19 vizsgálatokban. Egy tanulmány poliklonális anti-MIUC4 antitest számolt be, hogy MUC4 kifejezés kapcsolódik egy fovorabel eredmény [19], a három vizsgálatok nem mutatnak összefüggést MUC4 expresszió és a prognózis [20], [21], [22], a másik három vizsgálatban nem bármilyen észrevétele van az összefüggés MUC4 expresszió és a prognózis [18], [23], [24], és a maradék egy tanulmány pajzsmirigyrák nem számolt MUC4 kifejezést a rák [25]. Másrészt, a másik 11 cikkek, nem volt nyilvánvaló különbség a prognosztikai között MUC4 /8G7 expresszió és MUC4 /1G8 kifejezést. A legtöbb tanulmány a 8G7, ami keletkezett az emberi MUC4, MUC4 /8G7 kifejezést olyan agresszív viselkedésű tumort vagy rossz kimenetellel humán karcinóma [9], [10], [11], [12], [13], [ ,,,0],26]. Ezzel szemben a legtöbb tanulmány a 1G8, ami ellen patkány ASGP-2, leírta, hogy MUC4 /1G8 kifejezés kapcsolódik kedvező eredményt [27], [28], [29], [30], bár az egyik tanulmány a hasnyálmirigy adenokarcinóma leírták, hogy MUC4 /1G8 expressziója összefügg a gyenge túlélését [31]. Ez egyértelmű különbség felveti azt a kérdést, hogy a 8G7 és 1G8 lényegében különböző karakter. Az mAb 1G8-ra emeljük patkány Muc4 epitóp [15]. Emberi MUC4 és patkány Muc4 mutat több mint 60% peptid-szekvencia hasonlóság [32], de ezek nem azonosak. Érdemes megjegyezni, hogy felhasználásával IHC MAb 1G8 mindig mutat pozitív festődést a vascularis endothelium, ami némileg szokatlan, mivel a kifejezés a MUC4 amely az egyik tagja mucinok.

Így értékeltük a sajátosságait az MAb 8G7 és Mab 1G8 Western blot és immunhisztokémiai két gyomorrák sejtvonalakon. A Western-blot analízis azt mutatta, hogy MAb 8G7 elismert egy nagyon nagy molekulatömegű fehérje (több mint 500 kD volt, ami a várt méretű natív MUC4), mivel MAb 1G8 nem mutat semmilyen immunreaktív sávokat. Az IHC vizsgálat azt is kimutatta Mab 8G7 pozitív festéssel de Mab 1G8 negatív festéssel a két gyomorrák sejtvonalakon. MUC4 mRNS-t is kifejezve a két gyomorrák sejtvonalak a jelen vizsgálatban, amint azt az előző vizsgálatban elemezve a hasnyálmirigy rákos sejtvonalakban RT-PCR-rel és Northern blot analízisek [33], [34]. Mindkét Mab 8G7 és MAb 1G8 reagálnak az emberi gyomorrák szövetekben, bár a helyét MUC4 /8G7 és MUC4 /1G8 kifejezés mutatott jelentős különbséget. A gyomorrák szövetekben, MUC4 /8G7 fejeztük főként a citoplazmában, a neoplasztikus sejtek PAP és fürdőkád, mivel MUC4 /1G8 fejeztük főként a sejt csúcsa PAP és fürdőkád vagy intracitoplazmatikus mucin lényegét Sig. Mivel a citoplazma expressziós mintázata MUC4 /8G7 látható is hasnyálmirigy adenokarcinóma, májon belüli epevezeték, extra hepatikus epevezeték karcinóma, tüdő-adenokarcinóma és szájüregi laphámrák [9], [10], [11], [12], [13 ], az intracitoplazmatikus MUC4 /8G7 expressziós mintázatot gyomorrák szövetek lehetnek ésszerű. Ezzel ellentétben, a lineáris expressziós mintázata MUC4 /1G8 együtt a sejt csúcsa gyomorrák szövetek tükrözhet ismeretlen függvények vagy jellemzői a MUC4β alegység által észlelt MAb 1G8 ellen patkány epitóp [15], mivel a jelen tanulmány kimutatta, hogy MUC4 /1G8 kifejezés volt kapcsolatos nyirokér invázió és a nyirokcsomó-áttétek a rosszul prognosztikai faktorok még a korai gyomorrák. Különösen por2 és sig, a kifejezés mértékét MUC4 /1G8 szignifikánsan magasabb volt, mint a MUC4 /8G7 vagy hogy a MUC1 /DF3. Ezen kívül volt egy siginificant korrelációt MUC4 /8G7 expresszió és MUC4 /1G8 kifejezést a vizsgáit betegek. Így a IHC jel MUC4 /1G8 kimutatható a gastrectomián példányok mutathat jelentős jelentése az epitóp által észlelt MAb 1G8, bár nem volt reaktivitás MUC4 /1G8 expresszió emberi gyomor rákos sejtvonalat (SNU-16 és NCI N87). Az epitóp által észlelt Mab 1G8 egy olyan terület az érdeklődés a jövő tanulmány. Katalógusa

Végeredményben a jelen tanulmány a korai gyomorrák, MUC4 /8G7, MUC4 /1G8 és MUC1 /DF3 kifejezést észleltek főként jól differenciált adenocarcinoma. A MUC4 /8G7 kifejezést összefügg nyirokér invázió. A MUC4 /1G8 kifejezést összefügg nyirokér invázió és a nyirokcsomó áttétek. A MUC1 /DF3 kifejezést összefügg nyirokér invázió és vénás invázió. A vizsgálat MUC4 és MUC1 kifejezést a gyomorrák kialakulása lesz hasznos marker megjósolni rossz prognosztikai tényezők a hajó invázió, még a korai szakaszban. Katalógusa

alátámasztó információk
ábra S1.
A nem daganatos nyálkahártya az esetek gyomorrák, MUC4 /8G7 fejeztük néha a citoplazmában felületi nyálkahártya epitélium, és gyakran, de gyengén citoplazmájában fundus és a pylorus mirigyek (A és D). MUC4 /1G8-ben gyakran expresszálódik a sejt Apex és a citoplazma a felület nyálkahártya epitélium, és gyakran, de gyengén citoplazmájában fundus és a pylorus mirigyek (B és E) és volt látható állandóan a vaszkuláris endotélium. MUC1 /DF3 néha kifejezett felületi nyálkahártya epitélium, és mindig a fundus mirigyek (különösen intenzíven a sejt tetőgerinc), de nem a pylorus mirigyek (C és F). Eredeti nagyítás × 100 (A, B, C), × 400 (D, E, F).
Doi: 10,1371 /journal.pone.0049251.s001 katalógusa (TIF) katalógusa táblázat S1.
részletes száma és aránya pozitívan festődő daganatsejtek a pontozási rendszer. katalógusa doi: 10,1371 /journal.pone.0049251.s002 katalógusa (DOC) hotelben

Köszönetnyilvánítás katalógusa

köszönetet mondunk Mr. Y. Atsuchi, Mr. K. Matsuo, Ms. C. Baba, Ms. Y. Nishimura, Ms. S. Yoshimura és Ms. I. Houjou azok a technikai segítségnyújtást. katalógusa

• PLoS One: a magas szintű aromás aminosavak gyomornedv korai szakaszában gyomorrák Progression
• PLoS One: CYP2E1 Rsa /PstI-polimorfizmus és a gyomorrák Érzékenység: metaanalízise alapján 24 Case-Control Studies