PLOS NËMMEN: MUC4 an MUC1 Expression zu Adenocarcinoma vun de Mo. deemolegt Weltbild mat Zuchstreck Missiounen an Lymph Node Metastasen: Eng Immunohistochemical Sécuritéit vun Early Gastric Cancer

Wat VerfÜgung

Mir hu virdrun erwähnt, dass MUC4 Ausdrock aarmséileg prognostic Faktor zu verschiddenen carcinomas ass. Eis virdrun Etude awer och, datt MUC1 Ausdrock vun gastric Cancers, dorënner d'fréi an fortgeschratt Etappe ass e schlechte prognostic Faktor. Am Moment studéieren, den Ausdrock Profiler vun MUC4 an MUC1 sech duerch immunohistochemistry (IHC) mat zwou anti-MUC4 monoclonal antibodies (MAbs), 8G7 an 1G8, an anti-MUC1 Kollegen DF3 zu 104 gastrectomy uplanzen vun fréi gastric adenocarcinoma mat submucosal iwwerpréift Invasioun (pT1b2), dorënner 197 histological subtype lesions. Virun der IHC Etude vun der mënschlecher uplanzen, évaluéiert mir d'Spezifizitéit vun den zwou MAbs vun Western blotting an IHC vun zwee MUC4 mRNA Linnen gastric Kriibs Zell ausdrécken. Kollegen 8G7 reagéiert kloer hierkommen Kollegen 1G8 keng ofbaubar show hat, an entweder Western blotting oder IHC. An der IHC vun der gastric Cancers, erwëscht de Ausdrock Tariffer vun MUC4 /8G7 vun Kollegen 8G7, MUC4 /1G8 Réckstänn vun Kollegen 1G8 an MUC1 /DF3 vun Kollegen DF3 fonnt an och ënnerscheet Zorte (70%, 38/54; 67%, 36/54; 52%, 28/54) sech vill méi héich wéi déi vun Pro ënnerscheet Zorte (18%, 10/55, 36%, 20/55; 13%, 7/55) ( P VerfÜgung &Si besteet; 0,0001; P VerfÜgung = 0,0021; P VerfÜgung &Si besteet; 0,0001), bzw.. Den Ausdrock MUC4 /8G7 war mat lymphatic Invasioun (r = 0,304, P VerfÜgung = 0.033) ze dinn. Op der aner Hand, war d'MUC4 /1G8 Ausdrock mat lymphatic Invasioun (r = 0,395, P VerfÜgung = 0.001) an lymph Node Metastasen (r = 0,296, P VerfÜgung = 0.045) ze dinn. D'MUC1 /DF3 Ausdrock war mat lymphatic Invasioun (r = 0,357, P VerfÜgung = 0.032) an eng Schwächt Invasioun (r = 0,377, P VerfÜgung = 0.024) ze dinn. Zu der Konklusioun, ass den Ausdrock vun MUC4 souwéi MUC1 zu fréi gastric Cancers eng nëtzlech Bewaacher aarmséileg prognostic Faktoren Zesummenhang mat Zuchstreck Invasioun ze soe VerfÜgung

Fro:. Tamura Y, Higashi M, Kitamoto S, Yokoyama S, Osako M, Horinouchi M, et al. (2012) MUC4 an MUC1 Expression zu Adenocarcinoma vun de Mo. deemolegt Weltbild mat Zuchstreck Missiounen an Lymph Node Metastasen: Eng Immunohistochemical Sécuritéit vun Early Gastric Cancer. PLoS NËMMEN 7 (11): e49251. Doi: 10.1371 /journal.pone.0049251 VerfÜgung

Redakter: Fazlul H. Sarkar, Wayne State University School vun der Medezin, Vereenegt Staate vun Amerika VerfÜgung

Arnaque: 17 August 2012; Akzeptéiert: 5 Oktober 2012; Publizéiert: 13. November 2012 VerfÜgung

Copyright: © 2012 Tamura et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung

Funding:. Dës Etude war am Kader vun Princes Takamatsu Cancer Research Fund zu S. Yonezawa ënnerstëtzt; Stipendien-zu-Hëllef fir wëssenschaftlech Fuerschung op wessenschaftlech Fuerschung (B) 23390085 zu S. Yonezawa; Wëssenschaftlech Fuerschung (C) 21590399 ze M. Higashi; Jonk Wëssenschaftler (B) 24701008 zu S. Yokoyama; Wëssenschaftlech Fuerschung op Prioritéit Gebidder 239349 bis S. Kitamoto (JSPS Gemeinschaft) aus dem Ministère vun der Education, Science, Sport, Kultur a Technology, Japan; engem Lëtzebuergesch Research Foundation vu Japan ze S. Yokoyama; an der Kodama Memorial Foundation, Japan ze M. Higashi. S. Batra ass am Kader vun der National Instituter Gesondheetsminister Subventioune (CA78590, CA163120, CA133944 an CA111294) ënnerstëtzt. D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren. Nee zousätzlech externen Investitioun fir dës Etude scho VerfÜgung

Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren erklären, datt se kee Konflikt vun Intressi iwwer d'Aarbecht vun der Etude hu VerfÜgung

Aféierung VerfÜgung

Gastric Kriibs ass de véiert stäerkste gemeinsam Kriibs weltwäit a méi wéi 90% vun gastric Cancers sinn adenocarcinomas [1]. Viru Kuerzem, huet am Japan, fréi ze erkennen, déi der Iddi Bild Examen an der gastroenterology Kliniken korrekt Diagnosen duerchgesat an effikass chirurgesch oder Bild Behandlungen, an engem relativ besser hätt doraus. An der Analyse vun 11.261 Patienten mat vun gastric resection behandelt gastric Kriibs, d'TNM 5-Joer Iwwerliewe Tarif fir Etapp IA war 91,8% a fir Bühn manner normal war d'Iwwerliewe Taux 84,6% [2]. Fir d'fréi gastric Cancers, e Bild submucosal dissection (ESD) ass den éischte Choix Behandlung an Japan, mee d'Critèrë vun der zousätzlech Agrëff dorënner lymph Node dissection no der ESD nach kontrovers [3]. VerfÜgung

Eis Serie vun immunohistochemistry (IHC) Studien fir zu verschiddenen Mënsch neoplasms Ausdrock mucin hunn jo bewisen, dass den Ausdrock vun der MUC1 mucin (Pan-epithelial Membran-verbonne mucin) vun der invasiv Zouhuelen vun der erhéijen an aarme Resultat vun de Patienten, wobäi d'Ausdrock Zesummenhang ass der MUC2 mucin (intestinal Typ secretory mucin) ass mat den net-invasiv Zouhuelen vun der erhéijen an engem gutt Resultat fir d'Patienten [4], [5] dinn. Eis virdrun Etude gewisen, datt MUC1 Ausdrock vun gastric Cancers ass aarmséileg prognostic Faktor [6]. VerfÜgung

MUC4 war éischt als tracheobronchial mucin gemellt [7] an ass eng Membran-verbonne mucin [8]. An eiser Etude Serie, den Ausdrock vun MUC4 zu intrahepatic cholangiocarcinoma, pancreatic ductal adenocarcinoma, war extrahepatic Bile duct carcinoma, haett adenocarcinoma, a mëndlech squamous Zell carcinoma eng onofhängeg Faktor fir aarm hätt an ass eng nëtzlech Bewaacher d'Resultat vun de Patienten ze soe [ ,,,0],5], [9], [10], [11], [12], [13]. Mee, et sin e puer Studien vun der MUC4 Ausdrock Profil an mënschlechen gastric Kriibs. Am Moment studéieren, iwwerpréift mir den Ausdrock Profiler vun MUC4 souwéi MUC1 zu fréi gastric Kriibs Stoffer, an fonnt dass Ausdrock MUC4 an MUC1 am Ufank gastric Cancers aarmséileg prognostic Faktoren vun lymph Zuchstreck Invasioun ginn hätt, Blutt pompelen Invasioun an lymph Node Metastasen. VerfÜgung

Als anti-MUC4 monoclonal antibodies (MAbs), 8G7 an 1G8, verschidden Siten vun MUC4 Protein ze entdecken sinn bekannt. D'Kollegen 8G7 erkennt eng zwee widderhuelen Haaptrei (STGDTTPLPVTDTSSV) vun der mënschlecher MUC4α subunit [14]. D'Kollegen 1G8 ass opgewuess géint d'Grenzwäerter Haaptrei (Grenzwäerter ASGP-2), an erkennt en epitope op d'Grenzwäerter ASGP-2 subunit, déi zu der mënschlecher MUC4β subunit entsprécht, a weist e Kräiz ofbaubar mat mënschlechen Echantillon [15]. Sou, war eng speziell Opmierksamkeet fir de Verglach vun zwee anti-MUC4 MAbs vun Western blotting an IHC vun zwee gastric Kriibs Zell Linnen bezuelt, virun der IHC Etude vum Mënsch gastric Kriibs Stoffer. Desweideren, well kontroverse iwwert d'prognostic Bedeitung vun dësen Anti-MUC4 MAbs do ass, war e Literatur review vun MUC4 Ausdrock vun verschiddenen Cancers och gesuergt. VerfÜgung

spontan a Methode VerfÜgung

kennen a Ray Echantillon

Gastrectomy uplanzen vun 104 fréi gastric Cancers, déi submucosal Invasioun weisen, pT1b2, mat oder ouni lymph Node Metastasen, sech aus der Datei tëscht 1994 an 2008 vun der Kagoshima-Shi Medical Association Hospital Sensor. Déi heeschen Alter vun de Patienten war 65.7 (S.D., 9,8; Rei, 39-92 Joer; Steiren Alter, 66 Joer); 64 Fäll goufen männlech, an 40 Fäll goufen weiblech. Dës Etude gouf am Aklang mat der wéider Prinzipië vun der Deklaratioun vun Helsinki, a ofgeseent vun der Ethik Komitee fir Kagoshima-Shi Medical Association Hospital (KMAH 2011-02-02) gehaal. Informéiert, schrëftlech Erlaabnes war vun all Patienten kritt. An de Fäll mat méi wéi zwee histological Typen an eng lesion gemëscht, all histological Muster onofhängeg évaluéiert huet, laut der japanescher Course vun Gastric Carcinoma (JCGC) [16]. VerfÜgung

Evaluatioun vun Monoclonal Antibodies fir MUC4

BTS a Kultur Konditiounen. VerfÜgung

Mënscherechter gastric Kriibs Zell Linnen (SNU-16 an NCI-N87) an pancreatic Kriibs Zell Linnen (PANC1 an CAPAN1) aus der American Type Kultur Collection (Manassas kaaft huet, VA). Béid gastric Kriibs Zellen sech am RPMI-1640 (Fläch-Aldrich, St Louis, MO) haten; PANC1 Zellen sech am DMEM (Fläch-Aldrich) haten; Capan1 Zellen sech am DMEM /F-12 (Fläch-Aldrich) haten. All Medien sech mat 10% An et Bovine serum (GIBCO, Breda, Holland) an 100 U /ML penicillin /100 μg /ML streptomycin (Fläch-Aldrich) ergänzt. All Zellen sech an 5% CO2 bei 37 ° C an haten um Sous-Spuenien wär Niveauen. VerfÜgung

RNS erauszéien an RT-Hinnen alleguer incubated. VerfÜgung

Total RNS war vun der Zellen mat der RNeasy Mini ofgebaut Kit (QIAGEN, Hilden, Däitschland) a vun NanoDrop ND-1000 spectrophotometer laachen. Déi kritt mRNA (2ug) war ëmgedréint mat der Héich- Kapazitéit RNS zu cDNA Kit (Obwuel Biosystems, Foster City, CA) zu cDNA annescht. Déi folgend primers sech fir d'Kierzunge Hinnen alleguer entworf: MUC4, 5'- TGGGACGATGCTGACTTCTC-3 ", 5'-CCCCGTTGTTTGTCATCTTTC-3"; ACTB, 5'-CTCTTCCAGCCTTCCTTCCTG-3 ", 5'-GAAGCATTTGCGGTGGACGAT-3". Hinnen alleguer war mat der AmpliTaq Gold Fast Hinnen alleguer Master Mix (Obwuel Biosystems) folgenden Fabrikant d'Protokoll gesuergt. VerfÜgung

Protein erauszéien a westlech blotting. VerfÜgung

Total Zell lysates sech mat bereet Ripa gefiermt protease inhibitor Cocktail mat (Nacalai Tesque, Kyoto, Japan). D'FAQ Konzentratioun war vun der BCA assay (Thermo Wëssenschaftlech, Rockford, IL) gemooss. Eng gläichberechtegt Montant vun FAQ lysate war op 2% agarose gelies wouvun SDS geléist an passively op PVDF Membran Nuecht op Raumtemperatur transferéiert. Schläimhait sech mat 1% z'iesse Mëllech /PBST iwwer 2 Stonnen an deen zu der Norm immunodetection Prozedur mat spezifesche Primärschoul antibodies gespaart. Der Primärschoul antibodies gi wéi follegt: Anti-Mënsch MUC4 Kollegen 8G7 (1:1000, entsteet duerch Dr. Surinder K. Batra, Universitéit vun Nebraska Medical Center, bidd, héich) an 1G8 (1:1000, kaaft aus Invitrogen, Camarillo, CA), an anti-Mënsch e-tubulin Kollegen DM1A (1:2,000, Fläch-Aldrich). VerfÜgung

Immunocytochemistry fir cultured Zellen. VerfÜgung

fir MUC4 staining zu cultured Zellen, goufen Zellen rakommen an 8-Chambre drënner (Becton Dickinson an Company, Franklin Séien, NJ) a fir Iwwernuechtung incubated. Zellen sech Iwwernuechtung respektiv bei 4 ° C, mat 3,7% formaldehyde fir 10min bei Raumtemperatur an Kierchefënster mat Kollegen 8G7 (1:24,000) a Kollegen 1G8 (1:4,000) fest. Signal erkennen war duerch eng immunoperoxidase Method standing mat engem Vectastain Elite ABC Kit (Vecteure Laboratoiren, Inc., Burlingame, CA) no der Taktik vum Produzent. VerfÜgung

Immunohistochemistry fir Mënscherechter Stoffer VerfÜgung

IHC fir Mënscherechter gastric carcinomas war mat der folgender antibodies am maximal Géigewier Rubriken an all entholl gemaach. MUC4 war vun zwee MAbs, 8G7 an 1G8 fonnt. Fir de Komparativ studéieren, war MUC1 Ausdrock och vun Kollegen DF3 (Maus IgG, TFB, Tokyo, Japan) iwwerpréift. IHC war vun der immunoperoxidase Method standing wéi follegt. Antigen retrieval war mat CC1 antigen retrieval Prellbock (pH8.5 héich, 10037 ° C, 30 min., Ventana Medical Systemer, Tucson, AZ) standing fir all Sektiounen. No incubation mat der Primärschoul antibodies (Kollegen MUC4 /8G7 1:3000 verdënntem, 37 ° C, 32 min .; Kollegen MUC4 /1G8 1:500 verdënntem, 37 ° C, 24 min .; Kollegen MUC1 /DF3 verdënntem 1:50, 37 ° C, 32 min.) an phosphate gefiermt Salins pH 7.4 (PBS) mat 1% albumin Bovine serum, Rubriken sech op en Ulass XT automatiséiert Rutsch Stainer mat engem diaminobenzidine erkennen Kit (ultraView botzt, Ventana MEDICAL SYSTEMS) geschriwwen. Fir Simplicitéit MUC4 /8G7, MUC4 /1G8 an MUC1 /DF3 agesat der mucin antigens vun all antibody fonnt unzeginn. VerfÜgung

Buteur vun de Resultater a statistesch Analyse. VerfÜgung

Véier Enquêteuren blinded ( YT, MH, MG a Sy) bewäert onofhängeg der IHC staining Daten. Wann d'Evaluatioun ënnert de véier ënnerscheet, war eng Decisioun vun Konsens gemaach. D'Resultater goufen baséiert op de Prozentsaz vun positif Kierchefënster carcinoma Zellen bewäert, an de Prozentsaz Date goufen duerch sechs hierer kategoriséiert folgend ukomm System benotzt: negativ, keent vun der carcinoma Zellen Kierchefënster; liichtschwaache, &Si besteet; 5% vun carcinoma Zellen Kierchefënster; 1+, ≥5% bis &Si besteet; 25%; 2+, ≥25% bis &Si besteet; 50%; Iwwer 3, ≥50% bis &Si besteet; 75%; an 4+: ≥75% Kierchefënster. Fäll mat ≥5% vun carcinoma Zellen Kierchefënster sech positiv geduecht. Statistesch Analyse vun nonparametric Methoden Leeschtung war mat iwwerschratt-Statistics ver.3 Software entsteet duerch Hisae Yanai, Fakultéit vun Science, Saitama University (OMS publizéiert, Japan). VerfÜgung

Iwwerliewe vun de Patienten war tëscht der Grupp mat positive Verglach MUC4 /8G7, MUC4 /1G8 oder MUC1 /DF3 Ausdrock an der Grupp mat negativen Ausdrock laut der Kaplan-Meier Method, an Ënnerscheeder tëscht der Iwwerliewe Kéiren sech mat der Läschlëscht-Platz Test getest. A Wahrscheinlechkeet vu P &Si besteet; 0,05 war statistesch relevant als VerfÜgung

Resultater VerfÜgung

Evaluatioun vun Two Monoclonal Antibodies fir MUC4 VerfÜgung

d'Differenz zu antibody Spezifizitéit tëscht 8G7 an 1G8 ze ermëttelen, mir. duerchgefouert RT-Hinnen alleguer, Western blotting an IHC Analyse mat zwee gastric Kriibs Zell Linnen, SNU-16 an NCI-N87 Zellen. D'MUC4 mRNA war an zwou gastric Kriibs Zell Linnen (Figebam. 1A) fonnt. Konsequent mat der viregter Rapport [14], eisen Daten zougedréckt datt 8G7 engem Héich molekulare Gewiicht FAQ unerkannt (iwwer 500 Beien zB stéiert dat, wat d'erwaart Gréisst fir gebierteg MUC4 war). Am Géigendeel, 1G8 weisen net all immunoreactive Bands (Figebam. 1B). D'selwecht Resultat war an der IHC Analyse (Figebam. 1c). VerfÜgung

Immunohistochemical Staining vun Gastrectomy uplanzen VerfÜgung

Immunohistochemical staining vun Net-neoplastic gastric mucosa observéiert. VerfÜgung

An der asbl -neoplastic mucosa vun de Fäll mat gastric Kriibs, MUC4 /8G7 war heiansdo an der Zytoplasma vun Uewerfläch Panz epithelium ausgedréckt, an dacks awer schwaach an der Zytoplasma vun fundic an pyloric Glands (Dorënner S1 a an d). MUC4 /1G8 war an der Zell Giewelspëtz an Zytoplasma vun der Uewerfläch Panz epithelium, an dacks awer schwaach an der Zytoplasma vun fundic an pyloric Glands (Dorënner S1 B an E) dacks ausgedréckt, a war permanent op der wiere endothelium gesinn. MUC1 /DF3 war heiansdo an der Uewerfläch Panz epithelium ausgedréckt, an ëmmer am fundic Glands (besonnesch schwéier an der Zell schedden), mee net an der pyloric Glands (Dorënner S1 C an F). VerfÜgung

Immunohistochemical staining vun gastric adenocarcinoma. VerfÜgung

mir iwwerpréift gastrectomy uplanzen vun 104 fréi gastric Cancers (pT1b2), well mer déi grouss degenerative Ännerungen ze vermeiden wollt, datt am fortgeschratt Kriibs Stoffer dacks gesi sinn, an d'Etapp fir de korrekt Verglach ze ajustéieren tëscht IHC Conclusiounen an der clinicopathologic Facteuren. VerfÜgung

Wa méi wéi zwou histological Typen an eng lesion an der gastrectomy uplanzen vun 104 fréi gastric Cancers gemëscht huet, all histological Muster war onofhängeg évaluéiert, laut der JCGC [16]. Dofir, an der 104 gastrectomy uplanzen, kéint mir 197 carcinoma Foci vun verschiddenen histological Zorte am Ganzen diskutéieren. VerfÜgung

Vun de 197 lesions, waren et 15 lesions vun papillary adenocarcinoma (PAP) (ausstinn. 2A-D), 39 vu gutt ënnerscheet Bléien adenocarcinoma (tub1) (ausstinn. 2E-H), 52 vun mëttelméisseg Bléien adenocarcinoma ënnerscheet (tub2) (ausstinn. 2I-L), 6 vun mucinous carcinomas (bess) (ausstinn. 2M-P), 8 vu staark Typ schlecht ënnerscheet adenocarcinoma (por1) (ausstinn. 2Q-T), 47 vun Net-staark Typ schlecht ënnerscheet adenocarcinoma (por2) (ausstinn. 2U-X) an 30 vun signet-Ring Zell carcinoma (SIG) (ausstinn. 2Y-b), baséiert op de Kontext vun gemeinsam histological Klassifikatioun vun gastric Kriibs zu JCGC [16]. Laut dem Kontext vun der SE Klassifikatioun vun erhéijen vun de Mo [17] wéi dat zu JCGC [16], PAP an tub1 waren an klengen "gutt-ënnerscheet adenocarcinoma", an por1 an por2 ausseet an "Pro-ënnerscheet adenocarcinoma ". D'Daten vum Ausdrock Taux vun MUC4 /8G7, MUC4 /1G8 an MUC1 /DF3 sech zu Dorënner 3. Déi detailléiert Zuel an Prozentsaz vun positif Kierchefënster neoplastic Zellen mat der spillen System zesummegefaasst huet an Table S1 zesummegefaasst. VerfÜgung

Ausdrock Profil vun MUC4 /8G7. VerfÜgung

vun de 197 adenocarcinoma lesions, MUC4 /8G7 war zu 83 lesions (42%) ausgedréckt. MUC4 /8G7 weisen eng wiesentlech méi héich Rate vun de positiven Ausdrock (≥5% vun carcinoma Zellen Kierchefënster) an och ënnerscheet Zorte (PAP + tub1: 70%, 38/54) wéi dat schlecht ënnerscheet Zorte vun (por1 + por2: 18% , 10/55) ( P VerfÜgung &Si besteet; 0.0001) (Lalumi 3A, Feiler).. MUC4 /8G7 war haaptsächlech am Zytoplasma vun der neoplastic Zellen vun PAP ausgedréckt (Figebam. 2B), tub1 (Figebam. 2F) an tub2 (Figebam. 2J), an de Fäll mat positiven Ausdrock. VerfÜgung

Expression Profil vun MUC4 /1G8. VerfÜgung

vun de 197 adenocarcinoma lesions, MUC4 /1G8 war zu 95 lesions (48%) ausgedréckt. MUC4 /1G8 zougedréckt a vill méi héich Préisser vun de positiven Ausdrock an och ënnerscheet Zorte (PAP + tub1: 67%, 36/54) wéi dat zu guer ënnerscheet Zorte (por1 + por2: 36%, 20/55) ( P VerfÜgung = 0.0021) (Figebam. 3B, Feiler). MUC4 /1G8 war haaptsächlech bei der Zell schedden vum PAP ausgedréckt (Figebam. 2C), tub1 (ausstinn. 2G) an tub2 (Figebam. 2K), oder an der intracytoplasmic mucin Substanz vun SIG (Figebam. 2a), an de Fäll mat positiven Ausdrock. VerfÜgung

Expression Profil vun MUC1 /DF3. VerfÜgung

vun de 197 adenocarcinoma lesions, MUC1 /DF3 war zu 62 lesions (31%) ausgedréckt. MUC1 /DF3 zougedréckt a vill méi héich Préisser vun de positiven Ausdrock an och ënnerscheet Zorte (PAP + tub1: 52%, 28/54) wéi dat zu guer ënnerscheet Zorte (por1 + por2: 13%, 7/55) ( P VerfÜgung &Si besteet; 0.0001) (Lalumi 3C, Feiler).. MUC1 /DF3 war haaptsächlech bei der Zell schedden vun PAP, tub1 an tub2 ausgedréckt (Figebam. 2L), an de Fäll mat positiven Ausdrock. VerfÜgung

Se mucin Ausdrock vun all histologic Typ. VerfÜgung

an tub1, Ausdrock Tariffer vun MUC4 /8G7 an MUC4 /1G8 sech vill méi héich wéi déi vun MUC1 /DF3 ( P VerfÜgung = 0,0106 an P VerfÜgung = 0,039, bzw.) (Figebam. 3, * 1). An por2, war den Ausdrock Taux vun MUC4 /1G8 bedeitend méi héich wéi déi vun MUC4 /8G7 ( P VerfÜgung = 0.0286) oder déi vun MUC1 /DF3 ( P VerfÜgung = 0.0005) (Figebam. 3, * 2). An nerven, Ausdrock Taux vun MUC4 /1G8 war méi héich wéi déi vun MUC4 /8G7 ( P VerfÜgung = 0.0158) oder déi vun MUC1 /DF3 (SIG, P VerfÜgung = 0.0019) (Lalumi . 3, * 3). Am anere histolgical Zorte (PAP, tub2, bess an por1), gouf et keen groussen Ënnerscheed zu den Ausdrock Taux ënnert MUC4 /8G7, MUC4 /1G8 an MUC1 /DF3 (Figebam. 3). VerfÜgung

Bezéiung tëscht MUC4 oder MUC1 Ausdrock an lymph Zuchstreck Invasioun, Blutt pompelen Invasioun an lymph Node Metastasen. VerfÜgung

Semiquantitative Evaluatioun vun lymphatic Invasioun (Ly), eng Schwächt Invasioun (v) an lymph Node Metastasen Status (N) ass an der JCGC definéiert [16]. Lymphatic Invasioun (Ly) huet als Konsequenz bewäert; ly0, kee lymphatic Invasioun; ly1, minimal lymphatic Invasioun; ly2, moderéiert lymphatic Invasioun; an ly3, markéiert lymphatic Invasioun. Fir d'Schwächt Invasioun (V), ähnlech Evaluatioun (v0 zu v3) war mat elastesche staining (Victoria-Blue) gemaach déi zu hematoxylin-eosin staining derbäi war. Den Total vun lymph Wirbelen a vun der Zuel vun Équipe lymph Wirbelen bei all nodal Gare (N) sech wéi follegt zesummen opgeholl; N0, keng regional lymph Node Metastasen; N1, Metastasen an 1-2 regional lymph Wirbelen; an N2, Metastasen an 3-6 regional lymph Wirbelen. Regional lymph Node Metastasen war zu 55 Patienten (; N2, 14 Fäll N1, 41 Fäll) observéiert. Et war kee groussen Korrelatioun tëscht der histological Typen an lymphatic Invasioun, Schwächt Invasioun oder lymph Node Metastasen Status. VerfÜgung

An all Fall, der héchster vun de sechs IHC hierer (negativ, wäiss, 1+, 2+, Iwwer 3 oder 4+) an de verschiddenen histological Zorte war den IHC stoung an eenzelne gezielt, zB "IHC stoung 4+" fir engem Fall mat [tub1 stoung, Iwwer 3; tub2 stoung, 4+]. Mir Uschléi Korrelatioun tëscht der IHC stoung an der benotzt, v an N Faktoren vun all Patient. Wéi an Table 1 gewisen, huet d'MUC4 /8G7 Ausdrock mat lymphatic Invasioun (r = 0,304, P VerfÜgung = 0.033) ze dinn. Den Ausdrock MUC4 /1G8 war mat lymphatic Invasioun (r = 0,395, P VerfÜgung = 0.001) an lymph Node Metastasen (r = 0,296, P VerfÜgung = 0.045) ze dinn. D'MUC1 /DF3 Ausdrock war mat lymphatic Invasioun dinn (r = 0,357, P VerfÜgung = 0.032) an eng Schwächt Invasioun (r = 0,377, P VerfÜgung = 0.024). VerfÜgung

Ausserdeem, iwwerpréift mir d'Korrelatioun ënnert der IHC Fändelen vun MUC4 /8G7, MUC4 /1G8 an MUC1 /DF3. Wéi 2 an Table gewisen, et war eng Korrelatioun tëscht MUC4 /8G7 stoung an MUC4 /1G8 stoung (r = 0,486, P VerfÜgung &Si besteet; 0.0001). Am Géigesaz, gouf et keng Korrelatioun tëscht MUC4 /8G7 stoung an MUC1 /DF3 stoung (r = 0,267, P VerfÜgung = 0.202), an do war keen Korrelatioun tëscht MUC4 /1G8 stoung an MUC1 /DF3 stoung (r = 0,245, P VerfÜgung = 0.269). VerfÜgung

Bezéiung tëscht MUC4 oder MUC1 Ausdrock an Survival. VerfÜgung

vun de 104 Patienten, Suivi vun Daten fir 87 Patiente kritt huet. Paracetamol Suivi Period war 47,5 Méint (Rei, 0-193 Méint). An der 87 Patienten, gestuerwen ee Patient vun der gastric carcinoma 39 Méint nom Agrëff, ee Patient Liewer Metastasen zougedréckt mee fir 78 Méint erëmfonnt, an zwee Patienten vun aner Krankheete gestuerwen. An 85 Patiente ausser zwee Patienten gestuerwen vun anere Krankheeten, war Kaplan-Meier schätzt aloggen-Platz Test getest benotzt. Tëschent de positive Grupp an negativ Grupp (MUC4 /8G7 + vs -, MUC4 /1G8 + vs - oder MUC1 /DF3 + vs -), Log-Platz Test vun globale Iwwerliewe (MUC4 /8G7, P = 0,27; MUC4 /1G8, P = 0,37; MUC1 /DF3, P = 0.22) an Werdegang-gratis Iwwerliewe (MUC4 /8G7, P = 0,85; MUC4 /1G8, P = 0,23; MUC1 /DF3, P = 0.83) zougedréckt keng grouss Ënnerscheeder. Weider Analyse vun 42 Patiente erëmfonnt fir méi wéi 5 Joer och keng Differenze zougedréckt. VerfÜgung

Diskussioun VerfÜgung

Viru Kuerzem, mir hu confirméiert dass den Ausdrock vun MUC4 ass eng onofhängeg aarmséileg prognostic Faktor vun pancreatobiliary adenocarcinomas [ ,,,0],10], [11], [12] souwéi haett adenocarcinoma [13] a mëndlech squamous Zell carcinoma [9]. MUC1 huet och en armen prognostic Faktor gin an verschidden Mënsch neoplasms [4], gemellt ginn [5]. Eis virdrun studéieren an gastric Cancers, dorënner zwee fréi Cancers an fortgeschratt Cancers bewisen, dass MUC1 eng nëtzlech prognostic Faktor fir aarm Resultat vun de Patienten ass [6]. Am Moment studéieren, d'Relatioun tëscht mucin Ausdrock an d'Resultat vum Patient kann net bewäert ginn, well d'gastric Cancers am Ufank Etapp um pT1b2 sinn an déi meescht vun de Patienten hunn e positivt Resultat haten. Trotzdem, huet sech den folgenden Resultater kritt: (1) D'MUC4 /8G7, MUC4 /1G8 an MUC1 /DF3 Ausdrock sech mat lymphatic Invasioun dinn. (2) Den Ausdrock MUC4 /1G8 war mat lymph Node Metastasen dinn. (3) D'MU1 /DF3 Ausdrock war mat Schwächt Invasioun dinn. An Japan, ass ESD d'éischt presentéiert Behandlung fir fréi gastric Cancers [3]. Ënnersichung vun MUC4 souwéi MUC1 vun der ESD uplanzen kann ob den zousätzleche Agrëff, dorënner lymph Node dissection oder reegelméissegen Suivi fir d'Metastasen sinn néideg. VerfÜgung

Eis virdrun Studien bewisen klären, datt et kee siginificant Korrelatioun tëschent MUC4 Ausdrock an MUC1 Ausdrock [10], [11], [12], [13]. Och am Moment Etude vun der gastric Cancers an de fréie Phase, do war keen siginificant Korrelatioun tëscht Ausdrock vun MUC4 an MUC1. Béid MUC4 an MUC1 Ausdrock vun der gastric Cancers vläicht mat der aarmséileg prognostic Facteuren, wéi lymphatic Invasioun, Schwächt Invasioun an lymph Node Metastasen, mat Hëllef vun ënnerschiddleche Mechanismus. VerfÜgung

An der leschter Etude vun gastric Cancers Zesummenhang ginn mat Kollegen 8G7, Senapati et al. bewisen, datt Ausdrock MUC4 /8G7 net mat entholl Typ, Bühn oder mat dem Ofschloss vun de dat [18] verbonne war. Spannen, huet hir Resultater eng 42% Ausdrock Taux vun der Etapp ech Cancers (n = 19), déi am Aklang mat eisem Donnéeën ass (MUC4 /8G7: 42% an MUC4 /1G8: 48%) vun der haiteger Etude Etapp ech iweerpréifen Cancers (n = 104). Mä eis Etude verroden, datt souwuel MUC4 /8G7 an MUC4 /1G8 Ausstralung verschiddene ënnert der histological Zorte goufen, a sech vill méi héich an d'gutt ënnerscheet Zorte wéi an der Pro ënnerscheet Typ. MUC1 /DF3 Ausdrock ass och vill méi héich an d'gutt ënnerscheet Zorte wéi an der Pro ënnerscheet Typ. Mir gemellt dass MUC1 Ausdrock vun der gutt ënnerscheet adenocarcinoma zu gastric Cancers dorënner fortgeschratt Cancers héich war, an déi héich MUC1 Ausdrock kënnt d'Iwwerliewe vu Patienten mat gutt ënnerscheet adenocarcinoma vun Mo [6] betreffen. Déi héich Ausdrock vun MUC4 an och ënnerscheet adenocarcinoma kann och d'Iwwerliewe vu Patienten mat gastric Kriibs betreffen. An eiser leschter Etude [6], war den Taux vun héich Ausdrock vun MUC1 /DF3 bedeitend méi héich am fortgeschratt gastric Cancers wéi dat am Ufank gastric Cancers. D'Relatioun vun MUC4 Ausdrock mat der Invasioun vun gastric Cancers géif en interessanten Deel vun studéieren ginn. VerfÜgung

Et ass kontroverse iwwert d'prognostic Bedeitung vun MUC4 /8G7 an MUC4 /1G8 Ausdrock. Sou, hu mir 19 Artikele vun MUC4 IHC Etude fir verschidde Mënsch Kriibs Stoffer (Table 3) applizéiert iwwerschafft. D'Bedeitung vun MUC4 /8G7 an MUC4 /1G8 hätt net zu 8 vun de 19 Studien bewäert ginn. Eng Etude polyclonal anti-MIUC4 antibody benotzt gemellt dass MUC4 Ausdrock zu engem fovorabel Resultat Zesummenhang ass [19], dräi Studie weisen keng Korrelatioun tëscht MUC4 Ausdrock an hätt [20], [21], [22], déi aner dräi Etuden net hunn all Kommentaren op der Korrelatioun tëscht MUC4 Ausdrock an hätt [18], [23], [24], an de Rescht eng Etude vun Schild Kriibs gemellt kee MUC4 Ausdrock vun de Kriibs [25]. Op der aner Hand, an déi aner 11 Artikelen, war et eng visuell Differenz vun der prognostic Bedeitung tëscht MUC4 /8G7 Ausdrock an MUC4 /1G8 Ausdrock. Meeschten Etüden benotzt 8G7, déi géint Mënscherechter MUC4 generéiert gouf, MUC4 /8G7 Ausdrock ass ze aggressiv entholl Verhalen oder e schlecht Resultat an mënschlechen carcinomas [9], [10], [11], [12], [13], wëssenschaftlech [ ,,,0],26]. Am Géigesaz, déi Studie mat 1G8, déi géint Grenzwäerter ASGP-2 erwächt war, sanktionéieren, datt MUC4 /1G8 Ausdrock fir e gutt Resultat Zesummenhang ass [27], [28], [29], [30], obwuel eng Etude vun pancreatic adenocarcinoma beschriwwen, datt MUC4 /1G8 Ausdrock aarmséileg Iwwerliewe Zesummenhang ass [31]. Dëst kloer Differenz hieft d'Fro ob 8G7 an 1G8 hunn am Fong verschiddene Personnagen. D'Kollegen 1G8 war mat Grenzwäerter Muc4 epitope opgewuess [15]. Mënsch MUC4 a Grenzwäerter Muc4 weist méi wéi 60% peptide Haaptrei Ähnlechkeet [32], mä si sinn net identesch. Et ass wichteg, datt IHC mat Kollegen 1G8 ëmmer positiv staining am wiere endothelium weist, deen aussergewéinlechen wéi den Ausdrock vun MUC4 ass dat eent vun den Memberen vun mucins ass. VerfÜgung

Sou, évaluéiert mir d'Spezifizitéit vun de Kollegen 8G7 a Kollegen 1G8 vun Western blotting an IHC vun zwee gastric Kriibs Zell Linnen. Eis Western blotting Analyse gewisen, datt Kollegen 8G7 engem Héich molekulare Gewiicht FAQ unerkannt (iwwer 500 Beien zB stéiert dat, wat d'erwaart Gréisst fir gebierteg MUC4 war), wobäi Kollegen 1G8 keng immunoreactive Bands et weisen. D'IHC Analyse huet och Kollegen 8G7 positive staining mä Kollegen 1G8 negativ staining am zwou gastric Kriibs Zell Linnen. MUC4 mRNA war och an der zwee gastric Kriibs Zell Linnen an de Grëff ze studéieren ausgedréckt, wéi an der viregter Etude analyséiert d'pancreatic Kriibs Zell Linnen vun RT-Hinnen alleguer an northen blot analyséiert dës [33], [34]. Zwee Kollegen 8G7 a Kollegen 1G8 reagéiere mat mënschlechen gastric Kriibs Stoffer, obwuel d'Plaze vun MUC4 /8G7 an MUC4 /1G8 Ausdrock enger markéiert Ënnerscheed gewisen. An gastric Kriibs Stoffer, war MUC4 /8G7 ausgedréckt haaptsächlech am Zytoplasma vun der neoplastic Zellen vun PAP an Dëppchen hierkommen MUC4 /1G8 haaptsächlech op der Zell schedden vum PAP an Dëppchen oder intracytoplasmic mucin Substanz vun SIG ausgedréckt huet. Zënter der cytoplasmic Ausdrock Muster vun MUC4 /8G7 ass och zu pancreatic adenocarcinoma, intrahepatic cholangiocarcinoma, extra hepatic Bile duct carcinoma, haett adenocarcinoma a mëndlech squamous Zell carcinoma gesinn [9], [10], [11], [12], [13 ], kann de intracytoplasmic MUC4 /8G7 Ausdrock Muster an gastric Kriibs Stoffer raisonnabel. Am Géigesaz, kann de linear Ausdrock Muster vun MUC4 /1G8 zesumme mat der Zell schedden vun gastric Kriibs Stoffer spigelen onbekannt Funktiounen oder Charakteristiken vun der MUC4β subunit vun Kollegen 1G8 fonnt opgewuess géint Grenzwäerter epitope [15], wéi den haitegen Etude dass MUC4 bewisen /1G8 Ausdrock sech ze lymphatic Invasioun an lymph Node Metastasen Zesummenhang arm prognostic Faktoren och am Ufank gastric Kriibs ginn. Besonnesch am por2 a nerven, war den Ausdrock Taux vun MUC4 /1G8 bedeitend méi héich wéi déi vun MUC4 /8G7 oder déi vun MUC1 /DF3. Ausserdeem gouf et eng siginificant Korrelatioun tëscht MUC4 /8G7 Ausdrock an MUC4 /1G8 Ausdrock am iwwerpréift Patienten. Sou, erwëscht de IHC Signal vun MUC4 /1G8 an der gastrectomy uplanzen kann e wesentleche Bedeitung vun der vun Kollegen 1G8 fonnt epitope weisen, obwuel et kee ofbaubar vun MUC4 /1G8 Ausdrock vun mënschlecher Zell gastric Kriibs Linnen war (SNU-16 an NCI- N87). D'epitope Réckstänn vun Kollegen 1G8 ass en Deel vun Interessi fir Zukunft ze studéieren. VerfÜgung

An Conclusioun, am haitegen Etude vun Ufank gastric Cancers, MUC4 /8G7, MUC4 /1G8 an MUC1 /DF3 Ausdrock haaptsächlech observéiert goufen an och ënnerscheet adenocarcinomas. D'MUC4 /8G7 Ausdrock war mat lymphatic Invasioun dinn. D'MUC4 /1G8 Ausdrock war mat lymphatic Invasioun an lymph Node Metastasen dinn. D'MUC1 /DF3 Ausdrock war mat lymphatic Invasioun an Schwächt Invasioun dinn. D'Ënnersiche vun MUC4 an MUC1 Ausdrock am gastric Cancers géif eng nëtzlech Bewaacher méi aarm prognostic Facteure mat Zuchstreck Invasioun, och am Ufank Etapp Zesummenhang mat virauszesoen. VerfÜgung

Informatiounen Ennerstëtzung VerfÜgung Dorënner S1. VerfÜgung An d'Net-neoplastic mucosa vun de Fäll mat gastric Kriibs, MUC4 /8G7 war heiansdo an der Zytoplasma vun Uewerfläch Panz epithelium ausgedréckt, an dacks awer schwaach an der Zytoplasma vun fundic an pyloric Glands (A an D). MUC4 /1G8 war an der Zell Giewelspëtz an Zytoplasma vun der Uewerfläch Panz epithelium, an dacks awer schwaach an der Zytoplasma vun fundic an pyloric Glands (B an E) dacks ausgedréckt, a war permanent op der wiere endothelium gesinn. MUC1 /DF3 war heiansdo an der Uewerfläch Panz epithelium ausgedréckt, an ëmmer am fundic Glands (besonnesch schwéier an der Zell schedden), mee net an der pyloric Glands (C an F). Original Vergréisserung × 100 (A, B, C), × 400 (D, E, F) VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0049251.s001 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung Table S1. VerfÜgung Detailéiert Zuel an Prozentsaz vun positif Kierchefënster neoplastic Zellen d'ukomm System benotzt VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0049251.s002 VerfÜgung (Intrigue) VerfÜgung

Arbeschterlidder VerfÜgung

mir Merci Här Y. Atsuchi, Här K. Matsuo Joffere C. Baba Joffere Y. Nishimura, Madame S. Yoshimura an Joffere I. Houjou fir hir technesch Assistenz. VerfÜgung

• PLOS NËMMEN: Haut Niveauen vun aromatesche Aminosaier Saieren zu Gastric Juice während de Grondsteen vun Gastric Cancer Progression
• PLOS NËMMEN: CYP2E1 RsaI /PstI Polymorphism an Gastric Cancer waat: Meta-Analysen Baséierend op 24 Case-Control Studies