PLoS ONE: Ontdekking van Tumor Markers voor maagkanker door Proteomics

Abstract

Maagkanker (GC) heeft een hoge mate van morbiditeit en mortaliteit tussen de verschillende vormen van kanker wereldwijd. De ontwikkeling van niet-invasieve diagnostische methoden of technologieën voor het volgen van het optreden van GC is urgent, en zoeken betrouwbare biomarkers is considered.This studie bedoeld om direct te ontdekken differentiële biomarkers van GC weefsels door twee-dimensie-differentiële gelelektroforese (2D-DIGE), en eiwit expressie door western blotting (WB) en immunohistochemie verder te valideren (IHC) .Pairs van GC weefsels (maagkanker weefsels en de aangrenzende normale weefsels) verkregen van een operatie werd onderzocht voor 2D-DIEG.Five eiwitten wereconfirmed door WB en IHC, waaronder glucose -gereguleerde eiwit 78 (GRP78), glutathion s-transferase pi (GSTpi), apolipoproteïne AI (ApoAI), alfa-1 antitrypsine (A1AT) en gastrokine-1 (GKN-1). Onder de resultaten, GRP78, GSTpi en A1ATwere significantlyup-gereguleerd en respectievelijk down-gereguleerd bij maagkanker patiënten. Bovendien GRP78 en ApoAI werden gecorreleerd met A1AT voor eiwit expressions.This studie veronderstelt deze eiwitten kunnen kandidaten van betrouwbare biomarkers voor maagkanker

Visum:. Wu JY, Cheng CC, Wang JY, Wu DC, Hsieh JS , SC Lee, et al. (2014) Ontdekking van Tumor Markers voor maagkanker door Proteomics. PLoS ONE 9 (1): e84158. doi: 10.1371 /journal.pone.0084158

Editor: Salvatore V. Pizzo, Duke University Medical Center, de Verenigde Staten van Amerika

Ontvangen: 19 augustus 2013; Aanvaard: 12 november 2013; Gepubliceerd: 3 januari 2014

Copyright: © 2014 Wu et al. Dit is een open-access artikel gedistribueerd onder de voorwaarden van de Creative Commons Attribution License, die onbeperkt gebruik, distributie en reproductie maakt in elk medium, op voorwaarde dat de oorspronkelijke auteur en de bron worden gecrediteerd

Financiering:. Dit werk werd ondersteund door subsidies NSC96-3111-P-042A-004-Y, NSC100-2314-B-037-040, en door de National Science Raad van Republic of China. Dit werk werd ook gesteund door Kaohsiung Medical University Hospital (KMUH97-7R32, KMUH98-8R33). De financiers hadden geen rol in de studie design, het verzamelen van gegevens en analyse, besluit te publiceren, of de voorbereiding van het manuscript

Competing belangen:.. De auteurs hebben verklaard dat er geen tegenstrijdige belangen bestaan ​​

Introductie

Hoewel theprevalence van maagkanker daalt en variërende geografisch, het blijft een van de meest voorkomende vormen van kanker in de Aziatische landen en is de vierde meest voorkomende kanker (9% van alle kankers) wereldwijd. De leeftijd gestandaardiseerde incidentiecijfers (ASR) zijn meer dan 20 per 100.000 in risicolanden hoge zoals China, Japan en Korea [1], [2], [3]. Ook is de tweede belangrijkste oorzaak van kankersterfte bij beide geslachten wereldwijd (737.000 sterfgevallen 9,7% van het totaal). In Oost-Azië, zijn de sterftecijfers geschat op ongeveer 28,1 per 100.000 bij mannen en 13,0 per 100.000 vrouwen, whilein Noord-Amerika, ze zijn ongeveer 2,8 en 1,5 respectievelijk [4].

Vijf-jaarsoverleving variëren van 90% tot minder dan 5 procent, voornamelijk afhankelijk van het stadium van diagnose [5], [6] .Als maagkanker kunnen worden gedetecteerd en in een vroeg stadium behandeld, het vijfjaarsoverleving rateis beter dan 90%; Echter, er isno duidelijk of specifieke symptomen in een vroeg stadium van de maag cancer.Thus, vroeg detectionof maagkanker becomesmore difficult.Although serum pepsinogeen (PG) testssuch zo laag BGA concentratie en /of lage BGA /II-ratio waren suggestief screeningtests in high- risico landen zoals Japan, weregood ze indicatoren van atrofische gastritis in plaats van diagnostische markersof maagkanker [7] - [9] .Essentially heeft endoscopie beenthe veelbelovend hulpmiddel met 2,7-4,6 maal hogere detectiegraad dan barium studies [10]. Echter, vroege diagnose maagkanker door endoscopydependson vakmanschap.

Sommige niet-invasieve biomarkers voor de diagnose of follow-up in het maagdarmkanaal en de lever tumorshave gemeld. Bijvoorbeeld, alfa-foetoproteïne (AFP) is één van de klinisch nuttige biomarkers voor de diagnose en follow-up van hepatocellulair carcinoom (HCC) .AFP werd boven 20 ng /ml verhoogd in een studie bij meer dan 70% van de patiënten met HCC [11]. Volgens de conclusies van de Barcelona-2000 Europese Vereniging voor de Studie van de Lever (EASL) congres, kon HCC worden gediagnosticeerd zonder biopsyin gevallen waarin AFP bedraagt ​​meer dan 400 ng /ml met een knobbeltje groter dan 2 cm, die tekenen van arteriële hypervascularisatie bij patiënten met cirrose [12] .Incolorectal carcinoom (CRC), preoperatieve carcino-antigeen (CEA) niveau is een zeer belangrijke prognostische covariate en het wordt aanbevolen door de American Society of Clinical Oncology (ASCO) dat het moet worden getest pre-operatief aan bieden prognostische informatie [13]. Serial verhogingen van CEA geven hogere kans op herhaling van CRC. Er is echter geen betrouwbare biomarker voor maagkanker.

daarom zoeken naar betrouwbare biomarkers voor maagkanker is zeer belangrijk voor de klinische praktijk. Dit onderzoek was gericht op betrouwbare eiwitbiomarkers matched weefsels (tumor en aangrenzend normaal weefsel) ontdekken tweedimensionale-verschil gelelektroforese (2D-DIGE), en de eiwitten te identificeren door matrix-geassisteerde laserdesorptie /ionisatie imaging massaspectrometrie (MALDI -IMS).

Materialen en methoden

weefselmonsters

Tissue monsters werden na verkregen toestemming op de hoogte werden ondertekend. Gepaard samplesincluding tumor en aangrenzend normaal tissuesfrom patiënten werden afgeleid van endoscopische biopsieën of surgery.The tumor rangen werden bepaald op basis van de Amerikaanse Joint Commission on Cancer Staging (AJCCS) -systeem door pathologen onder methyleenblauw staining.Clinical informatie van de patiënten werd opgenomen, met inbegrip van leeftijd, geslacht, het type tumor, invasie en overleving. Daarnaast werd het CEA-concentratie in het serum ook gemeten door radioactieve immunoassay in routine medische diagnosis.The individualsenrolled in het huidige onderzoek hebben schriftelijk toestemming om deze case details.This studie te publiceren gegeven werd goedgekeurd door de Institutional Review Board van Kaohsiung Medische Universiteit Chung- Ho Memorial Hospital (KMUH-IRB-980382).

Twee dimensie-verschil gelelektroforese

Een (tabel 1) paar weefselmonsters washomogenized (PRO 200, Bertec, Taiwan) in een gematigd volume lysisbuffer (50 mM Tris-HCl, 8M ureum, 4% (w /v) 3 - [(3-Cholamidopropyl) dimethylammonio] -1-propaansulfonaat, en pH 8,5). De individuele 50 ug monstereiwit werd gelabeld met 400 pmol Cy3 of Cy5 afzonderlijk voor 30 minuten (figuur 1B.). Bovendien, de samengevoegde monster mengsel (100 ug) werd gemerkt met 800 pmol CY2 als interne standaard tegelijk. Vervolgens wordt het etiket reactionswere gestopt door incubatie van 1 pi van 10 mM lysine buffer gedurende 30 minuten, daarna één maal volume monsterbuffer (8 M ureum, 20 mM dithiothreitol, 4% (w /v) 3 - [(3 -Cholamidopropyl) dimethylammonio] -1-propaansulfonaat, 0,5% (v /v) IPG buffer en weinig broomfenolblauw) werd added.The eerste scheidingszone, iso-elektrische focussering werd uitgevoerd onder toepassing cap laden op de gel stroken (7 cm, pI 4- 7) bij 20 ° C te houden onder 15000voltage-uren (IPGphor systeem, GE Healthcare). Na equilibratie met natriumdodecylsulfaat, de tweede separationwas uitgevoerd using4-12% natriumdodecylsulfaat-polyacrylamide gelelektroforese. De gel beelden werden respectievelijk verkregen (Typhoon TRIO Variable Mode Imager, GE Healthcare) met behulp van 488, 532 en 633 nm lasers met een uitstoot filter van 520, 532 en 670 nm. Alle beelden werden geanalyseerd met DeCyder 6.5 software (GE Healthcare) aan het differentieel eiwitten die wereselected afhankelijk opde plaatsing onder een significante waarde van 0,05 volgens Student t
-test.

In-gel te selecteren tryptische spijsvertering

De gels gekleurd met SYBRO Ruby (sigma) werden vervolgens ontkleurd met 10% methanol en 7% azijnzuur in gedemineraliseerd water gedurende precies 30 min.The zichtbare vlekken gels onder een UV transilluminator (Spectroline) waren gebruikt om te graven naar de interessante eiwitten handmatig. De gel deeltjes werden in 100 gl 25 mM ammonium bicarbonaat gewassen in 50% acetonitril gedurende 15 min, en vervolgens in 200 ui 25 mM ammonium bicarbonaat gewassen in gedeïoniseerd water gedurende 15 minuten tweemaal, en vervolgens werd genoeg acetonitril toegevoegd krimpen geldeeltjes. Na drogen beneden de afzonderlijke gel particleswereincubated met 3 pl 20 ng /ul trypsine in 25 mM ammonium bicarbonaat bij 4 ° C gedurende 1 uur en vervolgens 3 pi van 25 mM ammonium bicarbonaat werd toegevoegd om de eiwitten te verteren bij 56 ° C gedurende 1 uur. Na in-gel digestie werden 2 pi van 100% acetonitril met 1% trifluorazijnzuur aan de oplossingen toegevoegd en daarna werden monsters gesoniceerd gedurende 10 min om peptiden vrij van geldeeltjes.

Massa spectrometrische analyse voor eiwitidentificatie

Elke eiwitoplossing gedigereerd met trypsine 1:01 gemengd met 10 mg /mlof α-cyano-4-hydroxykaneelzuur opgelost in 50% acetonitril /0,1% trifluorazijnzuur en gespot op AnchorChip MALDI doel (Bruker Daltonics GmbH , Bremen, Duitsland) tot het droog is. Peptiden werden geanalyseerd door MALDI-TOF /TOF UltraflexIII (Bruker Daltonics) onder de 20 KV met positieve model, en de piek gegevens werden overgebracht naar FlexAnalysis ™ 3.0 software (Bruker Daltonics) voor geavanceerde berekening en kalibratie. 2,2 MASCOT (Matrix Science) werd toegepast om de peptiden bij NCBI en Swiss-Prot-database voor eiwitidentificatie passen. De instelling werd beperkt tot de menselijke taxonomie parameters.Meanwhile, werd carbamidomethyl cysteïne gebruikt als een vaste modificatie, en geoxideerd methionine als een variabele modificatie. De waarschijnlijkheid (P) gebaseerd op mowse score berekend -10 × Log (P). Eiwit score hoger dan 56 was significant ( p Restaurant < 0,05). Bovendien is een van de voornaamste peptide pieken die op het spectrum werd gebruikt om de identieke resultaten bevestigen het identificeren van de aminozuursequentie die peptidefragment fingerprintingmethode wordt genoemd.

Western blotting

De paren weefselmonsters werden gehomogeniseerd (Pro 200, Bertec) in lysisbuffer (10 mM natriumfosfaat, 0,9% natriumchloride, 1% triton-X100, pH 7,4) en geïncubeerd op schudden bij 4 ° C gedurende 1 uur. Na het wegwerken van de neergeslagen pellets door high-speed centrifugeren (10000 rpm, 5 minuten) werden de gepipetteerde supernatanten toegevoegd aan buffer (10 mM natriumfosfaat, 0,9% natriumchloride, 8 M ureum, 30% glycerol, 2 proeven % natriumdodecylsulfaat, 0,1% β-mercaptoethanol en 0,1% broomfenolblauw) van 1: 1 verhouding en gekookt bij 100 ° C gedurende 5 min op eiwit denature.Approximately 20 ug van elk monster eiwit werden op de afzonderlijke raster van 4- geladen 12% natriumdodecylsulfaat-polyacrylamide gelelektroforese (SDS-PAGE, Invitrogen). De iblot droge blotting systeem (Invitrogen) werd gebruikt voor het transformeren van de eiwitten polyvinylideenfluoride (PVDF) membraan gebaseerd op ion stroomt samen met een koperen elektrode. Na gebruik van 0,5% melk aan de PVDF-membraan blot gedurende 30 min, theindividual primair antilichaam (2 ug /ml) werd toegevoegd voor incubatie gedurende 2 uur bij schudden. De consistente secundaire antilichamen geconjugeerd met mierikswortelperoxidase (HRP) (2 ug /ml) werden geïncubeerd gedurende 1 uur bij schudden elkaar. Tussen het incuberen processen repeatedlywashings PBS buffer (10 mM natriumfosfaat, pH 7,4 en 0,9% natriumchloride) weredone. De ECL-detectiesysteem (Millipore) werd uitgevoerd, en de beelden die werden verworven door Imaging System (Gel Doc XR System, Bio-Rad), afhankelijk van de gematigde het verkennen van de tijd.

Immunohistochemie

Immunohistochemie was performedusing een standaard-peroxidase gebaseerde kleuring methode. De weefselmonsters werden gesneden met een cryostaat (HM525, Microm) .Fresh weefselsecties (10 um) op lysine gecoate glaasjes waren driedon een verwarming bij 37 ° C en achtereenvolgens ondergedompeld opeenvolgende 75%, 95% en 100% ethanol 1 minuut voor eiwit fixatie. In het kort werd endogene peroxidase activiteit afgeschrikt met 3% waterstofperoxide gedurende 10 minuten. Het antigeen episode werd blootgelegd door het onderdompelen van het weefsel dia in 10 mM citraat zuur in kokend water gedurende 25 minuten. Opeenvolgende incubaties met de individuele primaire antibodyandthe HRP-geconjugeerde secundaire antilichamen werden uitgevoerd voor individuele 1 uur op te schudden. AEC kit (Sigma) werd gebruikt om de weefsels vlekken en de werking volgde de bijgevoegde gebruiksaanwijzing. In het kort wasperformed themixed oplossing van 2,5 M acetaatbuffer, chromogene AEC (3-amino-9ethylcarbazole) en 3% waterstofperoxide direct en achtereenvolgens geïncubeerd met weefsel slides.The beeld kleuring glaasjes werden geobserveerd en verkregen onder een microscoop (BX51 Olympus) .

Statistieken analyse

de statistische software SPSS werd uitgevoerd om de betekenis te berekenen op basis van de Student t Shirts-test en de correlatie tussen GRP78, GSTpi, A1AT, ApoAI en GKN- 1. De significantdifference ( p
waarde) was aanvaardbaar als minder dan 0,5.

Resultaten

Biomarkers discovery op basis van 2D-DIGE

Maagkanker weefsels werden geanalyseerd door 2D-DIGE en vergeleken met gekoppelde normale weefsels te zoeken naar de vermeende biomerkers van maagkanker. Verschillen van proteinexpressions meer dan 1,2 maal waren vermeende kandidaten. Het beeld gel was de presentatie van eiwitten plaats gelabeld met cy-kleurstoffen (afb. 1). Vijftien eiwitten konden worden geïdentificeerd, met inbegrip van glucose gereguleerde eiwit 78 (GRP78), heat shock verwante 71 kDa eiwit (hsc70), proteïne disulfide-isomerase A3 (PDIA3), mitochondriale ATP synthase subunit beta (ATPB), proteïne disulfide-isomerase gerelateerd eiwit 5 (PDIRP5), gastricsin, glutathion s-transferase pi (GSTpi), apolipoproteïne AI (ApoAI), alfa-1-antitrypsine (A1AT) en gastrokine-1 (GKN-1) .In 3 gedupliceerd herhalingen werden enkele identieke eiwitten gevonden op verschillende locaties van de gel en uitgesloten op grond van het vermoeden van post-translationele modificatie. Tot slot, vijf eiwitten waaronder GRP78, GSTpi, ApoAI, A1AT en GKN-1 werden bevestigd en verder gevalideerd als vermeende markers van maagkanker. De gedetailleerde vergelijkingen van stereopicture en uitgebreid gel imageswere figuur 2.

Western blotting en statistische analyse

Twelvepairs weefsels van maagkanker patiënten werden als validatiegroep. Vier patiënten waren stadium I, 3 patiënten waren fase II, 2 patiënten stadium III, en 3 patiënten waren stadium IV. De klinische gegevens werden in tabel 1.Five van de eiwitten (GRP78, GSTpi, ApoAI, A1AT en GKN-1) genoemd werden bevestigd door Western blotting.Amongthe resultaten, GRP78 en GSTpiwere significantlyup-gereguleerd zijn, terwijl A1AT was significant down-gereguleerd in de maag kanker weefsels in vergelijking met normale weefsels (figuur 3). .Voor GSTpi, nineout van 12 patiënten (75%) was opgereguleerd eiwitexpressies in tumortissues; Aan de andere kant 10 van 12 patiënten (83%) hebben neerwaarts gereguleerd A1AT eiwit expression.Regarding de relatie tussen eiwitexpressies en kritiek stadium GRP78 een trend verhoogd van fase I naar fase IValthough geen statistische significantie kon worden gevonden. De expressie van GSTpi en A1AT niet gecorreleerd met klinische fasen (figuur 4)

Interessant de eiwitexpressies van GRP78 deze paren weefsels overeen met die van ApoAI (r ^{2. -0,61, p Restaurant < 0,01) en A1AT (r 2: -0,49, p Restaurant < 0,05) (figuur 5).. Intussen is de eiwitexpressie van ApoAI werd gecorreleerd met die van A1AT (r 2: 0,62, p
< 0,01, Fig. 4). De resultaten gaven aan dat de drie vermeende biomerkers, GRP78, en ApoAI A1AT, geassocieerd met elkaar in eiwitexpressie. Op het contrast, GSTpi en GKN-1 leek onafhankelijk voor eiwit expressie.}

Immunohistochemie

DespiteGRP78, GSTpi en A1AT zijn statisticallydifferent significant de expressional trend van andere eiwitten was hetzelfde als de observatie in de 2D-DIGE experiment. Immunohistochemie werd gebruikt om de verkregen resultaten uit de western blotting experiment te valideren. GRP78, GSTpi, ApoAI, GKN-1 en A1AT werden gevalideerd bij maagkanker weefsels en niet-kankerachtige weefsels zoals getoond in figuur 6. De eiwitexpressies in paren weefsels waren consistent met de waarneming in western blotting. In het bijzonder, de up-gereguleerde eiwitten, GRP78 en GSTpi, werden specifiek op het adenocarcinoom van de maag cellen. Anderzijds, de downgereguleerde eiwitten waaronder ApoAI en A1AT waren aanwezig op de normale maagklieren. Andere down-gereguleerd eiwit GKN-1, werd aangetoond als die verschenen op de mucosa van maagweefsel.

Discussie

Het is belangrijk biomarkers voor de diagnose en follow-up van maag cancer.However, carcino-antigeen (CEA), koolhydraten antigeen (CA19-9) en CA72-4 worden niet vaak gebruikt in klinische practices.The huidige studie gericht op mogelijke biomarkers bekend te maken door het vergelijken van het differentieel eiwitten tussen geëvenaard kanker en normale weefsels. daarna werden deze vermeende biomerkers in validatie group.Five vermeende eiwitten, waaronder GRP78, GSTpi, ApoAI, A1AT en GKN-1 onderzocht, werden die door twee-dimensiondifference gelelektroforese (2D-DIGE), andmatrix-assisted laser desorptie /ionization- imaging massaspectrometrie (MALDI-IMS) en fatherlyvalidated in 12 klinische patients.Among vijf vermoedelijke eiwitten, GRP78 en GSTpi significant up-gereguleerd en in het bijzonder versterkt in kankercellen door western blotting en immunohistochemistry.In contrast, A1AT wassignificantlydown-gereguleerd en positieve en negatieve correlatie tussen de expressie van ApoAI en GRP78.

Veel vermeende biomerkers van maagkanker zijn in eerdere studies.High niveaus van GSTpi in maag carcinomen voorgesteld werd aangetoond [14] .De blijken van GSTpi werden gecorreleerd met maagkanker stagewhere verhoogd GSTpi werefound in 50% bij stadium I of II, en 80% bij stadium III of IV maagkanker patiënten [15] .Een eerdere studie toonde aan dat GSTpi-positieve patiënten had minder vijf-jaars ziektevrije overleving (49,0%) vergeleken met GSTpi-negatieve patiënten (75,0%), aangegeven GSTpi een marker prognostische belang [16] .In deze studie overexpressie van GSTpi in 75% van patiënten met maagkanker was demonstrated.However, de mate van overexpressie van GSTpi was niet gecorreleerd met klinische stadia (Fig. 4).

Over-expressionof GRP78 eiwit werd ook gerapporteerd als een vermeende biomerker voor gastro cancers.GRP78 over-expressies kunnen worden gedetecteerd en gerelateerd aan de fase en prognose van slokdarm adenocarcinoom [17], en colorectale kanker [ ,,,0],18]. Het is een van de cellulaire stressrespons eiwitten die een belangrijke rol spelen in tumorbiologie zoals regulatie van apoptose en het behoud van de intracellulaire calcium saldo [19], [20]. Ook werd gemeld dat teveel blijken van GRP78 door immunohistochemie in maagkanker monsters en metastatische lymfeknopen omgekeerd gecorreleerd met patiëntoverleving [21]. Echter, het wordt gebruikt in de huidige studie methoden waren verschillend van verslag Zhang's. We onderzochten kandidaat eiwitten door 2D-DIGE om differentiële eiwitten scheiden en MALDI-TOF /TOF peptiden in gelijke kanker en normale tissues.In onze studie identificeren de overexpressie van GRP78 verhoogd en had een trend van correlatie met klinische fasen, hoewel geen statistische significantie door de beperking van het aantal gevallen.

Neerregeling van eiwitten een belangrijke rol spelen bij carcinogenese. In deze studie drie eiwitten, ApoAI, A1AT en GKN-1, werd omlaag gereguleerd in de normale gastrische weefsels vergeleken met maagkanker tissues.The relatie ApoAI en maagkanker is niet gemeld. ApoAI is een van de belangrijkste eiwitbestanddelen van high-density lipoproteïne cholesterol (HDL-C) en speelt een primaire rol bij het handhaven cholesterol transport en atherosclerose effect van HDL-C [22] .Apolipoproteins zoals ApoAI kan lipopolysaccharide-inducedinflammatory respons moduleren sepsis [23]. In deze studie is het mogelijk dat verminderde ApoAI is een weerspiegeling van chronische ontsteking, die een oorzaak van kanker. Verder onderzoek is noodzakelijk om de koppeling tussen de afname van ApoAI en dys-regulering van inflammatie aantonen.

Hoewel toegenomen A1AT in beginfase en correlatie met de voortgang van maagkanker stadia waargenomen door Bernacka K. et al. [ ,,,0],24], kan een beperkt aantal gegevens op te helderen toegenomen A1AT als een tumor marker van maagkanker. In plaats daarvan, verminderde A1AT bij maagkanker werd gevonden in onze studie. A1AT bezit anti-inflammatoire activiteit in vitro en bijdraagt ​​tot de onderdrukking van pro-inflammatoire cytokines zoals interleukine-8, TNF-alfa, interleukine-1 beta [25]. Vermeld is dat gastheer genetische factoren die invloed hebben op interleukine-1-bèta kan de ziekte fenotype van H. pylori-infectie te bepalen [26]. Het is mogelijk dat verminderde A1AT remt proinflammatoire cytokine onderdrukkingseffect. [25]. In onze studie, de correlatie tussen verminderde A1AT en ApoA1 werd geacht een indicator van chronische ontsteking.

Gastrokine-1 (GKN-1), bezitten sommige mitogene effecten op de intestinale epitheelcellen (IEC-6), daalde gereguleerde bij maagkanker weefsel in vergelijking met aangepaste normale maagslijmvlies in onze studie. Maagslijmvlies herstel na letsel kan worden belemmerd wanneer GKN-1 is neerwaarts gereguleerd [27], [28] .Het is gerapporteerd dat GKN1 gerelateerd apoptotische signalen die belangrijk zijn voor weefselherstel dat bij neoplastische transformatie [29]. De gegevens van deze studie suggereert ook een verminderde GKN-1 ligt in maagkanker weefsels.

Proteomics gebaseerde methode om apoptose-gerelateerde eiwitten in maagkanker identificeren is eerder beschreven door Bai et al Z. [ ,,,0],30] .Nevertheless, differentiële expressie eiwitten van de onderhavige studie waren niet identiek aan verslag Bai suggereren ENO1, GRP78, GRP94, PPIA, PRDX1 en PTEN als mogelijke maagkanker biomarkers.Regarding de ontwikkeling van maagkanker is een ingewikkeld proces en vertoont interacties tussen gastheer, milieu en bacteriën zoals Helicobacter pylori
.A factor of eiwit kan niet in staat zijn om het optreden en de progressie van maagkanker voorspellen. In het onderhavige onderzoek werden vijf vermeende eiwitten die differentieel tot expressie worden gebracht in gelijke weefsels (tumor en aangrenzend normaal weefsel). Twee van hen (GRP78 en GSTpi) waren up-gereguleerd en de anderen (ApoAI, A1AT, en GKN-1) werden down-gereguleerd. Verdere studies zijn nodig om theseproteins asbiomarkers verhelderen voor detectie van maagkanker.

• PLoS ONE: Toenemend Core-fucosylatie Draagt ​​bij aan Maligniteit bij maagkanker
• PLoS ONE: MYC Deregulering bij maagkanker en haar clinicopathologische Implicaties