PLOS ONE: um polimorfismo genético no TOX3 está associado com a sobrevivência de câncer gástrico em um Population

Abstract

Purpose

Recentemente, polimorfismo genético (rs3803662C > T) em TOX3
foi relatado para induzir o risco de câncer de mama. Neste estudo, a hipótese de que rs3803662 poderia influenciar os resultados de sobrevivência de câncer gástrico.

Métodos

Com o método SNaPshot multiplex, nós genotipados TOX3
rs3803662 em 880 pacientes gástricas com a ressecção cirúrgica . A associação entre o genótipo e sobrevivência resultados foi realizada pelo método de Kaplan-Meier, modelos de análise de regressão de Cox eo teste de log-rank.

Resultados

Não houve associação nas análises de rs3803662 e sobrevivência de câncer gástrico. No entanto, a análise estratificada por histologia mostrou que rs3803662 CT /TT genótipo foi associado com uma significativa melhora da sobrevida para o câncer do tipo difuso gástrica (log-rank p = 0,030
, hazard ratio [HR] = 0,67, 95 % intervalo de confiança [CI] = 0,46-0,96), que o genótipo CC. Além disso, este efeito favorável foi especialmente evidente entre os pacientes com câncer gástrico com o tamanho do tumor >. 5 cm, T3 e T4 profundidade de invasão, metástase linfonodal, não beber, não metástases à distância, sem a quimioterapia e câncer de cárdia

Conclusões

TOX3
rs3803662 pode desempenhar um papel importante no resultado e no tratamento do cancro gástrico prognóstico, especialmente, talvez, mais ajuda para explicar a redução do risco de morte associado com câncer gástrico tipo difuso .

Citation: Zhang X, Zhu H, Wu X, Wang M, Gu D, Gong W, et al. (2013) um polimorfismo genético no TOX3 está associado com a sobrevivência de câncer gástrico na população chinesa. PLoS ONE 8 (9): e72186. doi: 10.1371 /journal.pone.0072186

editor: Xiaoping Miao, MOE chave do Laboratório de Ambiente e Saúde, Escola de Saúde Pública, Tongji Medical College, Huazhong Universidade de Ciência e Tecnologia, China

Recebido: 29 Abril 2013; Aceito: 06 de julho de 2013; Publicação: 17 de setembro de 2013

Direitos de autor: © 2013 Zhang et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. O trabalho foi apoiado por subsídios da National Natural Science Foundation da China para Dr. J Chen (Grant No. 81.071.641), Dr. Z Xu (Grant No. 81000880); um subsídio do Programa Nacional de Pesquisa Ciência Básica para Dr. J Chen (2013CB911300); uma bolsa de Jiangsu Programa Quinquenal-Provincial 12 de sobre o Desenvolvimento de Saúde por Tecnologia e Projeto de Educação para Dr. J Chen, Dr. H. Zhu (Grant No. 81.001.274), Dr. Z Zhang (30972444, 81230068 e BK2010080), Dr. M. Wang (81102089 e BK2011773), o Projeto Qin Lan de Jiangsu Departamento Provincial da Educação, e pela prioridade Academic Programa de Desenvolvimento das Instituições de Ensino Superior Jiangsu (Saúde Pública e Medicina preventiva). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

o câncer gástrico é o quarto tipo comum de tumor maligno no mundo e a principal causa de mortes por câncer na China, Japão e países da Europa Oriental [1]. Um tratamento sistemático incluindo cirurgia, quimioterapia, radioterapia e terapia-alvo pode proporcionar uma cura para pacientes com câncer gástrico avançado [2]. Apesar disso, a sobrevida em pacientes com câncer gástrico avançado continua a ser pobre. O cancro gástrico é uma doença complexa e multifactorial que é pensado resultar de uma interacção entre o fundo genético e factores ambientais. Alguns estudos têm sugerido que o Helicobacter pylori
( H. Piloro
) infecção, consumo de alimentos conservados em sal e fumo de tabaco são os principais factores exógenos e aumentar o risco de câncer gástrico [3], [ ,,,0],4]. estudos epidemiológicos extensos demonstraram que variantes genéticas, particularmente polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs), são susceptíveis de modular o efeito de fatores de risco ambientais através de modificar as funções de vários caminhos biológicos envolvidos na carcinogênese gástrica em resposta à exposição ambiental. Nos últimos anos, vários genes de baixo-penetrante comuns foram identificados como potenciais variantes de susceptibilidade genética do cancro gástrico, tais como glutationa-S-transferase (M1 GSTM1
) polimorfismo. Verificou-se variante genética pode ser um marcador útil para a previsão do prognóstico de doentes com cancro gástrico. Estudos anteriores relataram PSCA
rs2294008 e APE1
rs1760944 estão associados com a sobrevivência câncer gástrico [5], [6].

TOX3
gene, uma membro da mobilidade das famílias de alta grupo de proteínas da cromatina não-histonas, também denominado repetição de trinucleotídeos contendo 9 ( TNRC9
) gene está localizado no cromossomo 16q12 [7]. Este gene regula Ca2 + transcrição neuronal dependente através da interação com o campo-resposta-vinculativo elemento de proteína (CREB) [8]. Em tecidos humanos normais, TOX3
é largamente expresso no sistema nervoso central (SNC), no íleo, e dentro do cérebro no córtex frontal e occipital. TOX3
superexpressão induz a transcrição envolvendo elementos que respondem ao estrogénio isolados e promotores que respondem ao estrogénio, e protege as células neuronais de morte celular causados ​​pelo estresse do retículo endoplasmático ou BAX superexpressão através da indução de transcritos anti-apoptóticos e repressão da pro- transcrições apoptóticas [9]. Tem sido sugerido que rs3803662 (a C > transição T) em TOX3
foi associado com um risco aumentado de cancro da mama em ambos os portadores BRCA1 e BRCA2-mutação e os pacientes positivos receptor de estrogénio (ER) [10]. Além disso, Fasching et ai. rs3803662 reportados ( TOX3
) foi associado com OS de câncer de mama [11]. Esta associação foi visto de forma semelhante em outro estudo que mostrou que quando a sobrevivência foi analisada de acordo com os subtipos moleculares, os pacientes diagnosticados com tumores luminal A que carregavam o alelo de risco tinham menor OS, em comparação com pacientes homozigotos para o alelo não-risco [12].

no entanto, GWAS focada em um polimorfismo loci em pacientes positivos gene TOX3
que está associado com a sobrevivência do cancro da mama, especialmente em receptores de estrogénio (ER). Alguns estudos sugeriram que a expressão de ER foi associada com a sobrevivência do cancro gástrico [13]. Portanto, a variante identificada nos estudos do cancro da mama pode ter o mesmo efeito no risco de cancro gástrico. Uma associação da variação genética em TOX3
com a sobrevivência câncer gástrico foi realizado em nosso estudo. Nossa hipótese é que TOX3
rs3803662 está associada à sobrevivência de câncer gástrico em uma população chinesa, que pode ser identificado como um marcador de prognóstico independente de sobrevivência de câncer gástrico.

População do estudo

o estudo foi realizado em um total de 1022 doentes com cancro gástrico com a ressecção cirúrgica do tumor no Hospital de Yixing Pessoas, Yixing City, República Popular da China (PR China), a partir de Janeiro de 1999 a Dezembro de 2006 [6]. Todos os pacientes foram nem administrado pela radioterapia adjuvante nem quimioterapia antes da ressecção cirúrgica. Em nossa população de estudo, todas as análises foram restritos a chinesa. No prazo máximo de 119,0 meses de seguimento, 78 pacientes foram excluídos do estudo por falta de informações suficientes de acompanhamento. O presente estudo foi aprovado pelo Institutional Review Board Ética de Nanjing Medical University, e todos os participantes assinaram termo de consentimento.

Resultados coleção

A sobrevida global foi o principal desfecho do estudo. Pacientes vivos na última data de acompanhamento foram considerados censurados e câncer relacionados com mortes gástricos foram definidas como mortes. O tempo de sobrevida foi definida como a data a partir da cirurgia de câncer de câncer de mortes relacionados com gástricas ou o último follow-up. Data da morte foi obtido a partir de registros hospitalares e ambulatoriais ou os familiares de pacientes através de chamadas telefónicas de acompanhamento. Informações de parâmetros patológicos no local do tumor, histotipo, invasão, linfonodo, estado metástases à distância, beber e tabagismo também foram obtidos para pacientes com câncer gástrico. O critério de Lauren foi utilizado na classificação dos tumores em intestinal-tipo ou difusa do tipo de câncer gástrico [14]. estágio TNM da doença foi medida de acordo com a Comissão Interamericana Conjunta para o cancro preparo (AJCCS) [15]. Havia 306 pacientes tratados com quimioterapia adjuvante com diferentes regimes após a cirurgia. O regime terapêutico incluído FOLFOX4, FOLFOX6, XELOX e assim por diante. Nosso estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética da Universidade Médica de Nanjing, Nanjing, China.

Pacientes e Métodos

A genotipagem

DNA genômico foi extraído de amostras tumorais de proteinase K digestão, extracção de isopropanol e precipitação com etanol [6]. TOX3
(rs3803662) os SNPs foram examinadas por tecnologia multiplex Instantâneo utilizando um método de ensaio de discriminação alélica baseado em fluorescência ABI (Applied Biosystems, Foster City, CA, EUA) como descrito anteriormente [16]. Os SNPs foram analisados ​​usando analisador genético ABI3130 e os genótipos foram determinados usando software Genemapper4.0 (Applied Biosystems). De fato, 880 pacientes gástricas elegíveis foram incluídos na análise final, 64 casos foram excluídos da análises posteriores por causa da qualidade do DNA falhando em genotipagem. Cerca de 10% das amostras foram seleccionados aleatoriamente para a confirmação por genotipagem repetido; os resultados foram 100% concordantes.

A análise estatística

A influência do TOX3
variante de sobrevivência de câncer gástrico foi estimado pelas curvas de sobrevivência de Kaplan-Meier e o log-rank teste. Três modelos genéticos (codominante, dominantes e recessivos) foram usadas para avaliar a associação de TOX3
rs3803662 com o resultado sobrevivência de pacientes com câncer gástrico. Todos os valores P
neste estudo foram de 2 lados. P Art < 0,05 foi considerado estatisticamente significativo. Os rácios brutos de risco (HR), seus intervalos de confiança de 95% (IC) eo HRS ajustados foram estimados por análise de regressão de Cox. análise de regressão Cox também foi realizada para determinar fator prognóstico no câncer gástrico, com um nível de significância de P Art < 0,05 para entrar e P Art > 0,10 para remover as respectivas variáveis ​​explicativas. O tempo médio de sobrevivência foi fornecida quando o tempo médio de sobrevivência (MST) não pôde ser calculado. Todas as análises estatísticas foram realizadas com o software SPSS.

Resultados

As características e funcionalidades clinicopatológicas dos pacientes

As características e funcionalidades clinicopatológicas dos 880 pacientes com câncer gástrico finais deste estudo estão resumidos na Tabela 1. A percentagem de machos foi de 76,9%. O número de pacientes morreram durante o seguimento foi 408. univariada Cox análise de regressão dos parâmetros patológicos revelaram que o tamanho do tumor, histologia, profundidade de invasão, metástase em linfonodo, metástases à distância e estágio TNM foram significativamente associados com o tempo de sobrevida (todo P Art < 0,05, teste log-rank). Especificamente, do tipo difuso pacientes com câncer gástrico teve um risco significativamente maior de morte, em comparação com o tipo intestinal pacientes com câncer gástrico (HR = 1,46, IC 95% = 1,19-1,79). E pacientes com o tamanho do tumor ≤ 5 cm tinha um 41% aumentou significativamente a sobrevivência, em comparação com aqueles com tamanho >tumor; 5 cm (HR = 1,41; IC95% = 1,16-1,71). Além disso, como a profundidade de invasão e TNM fase aumentado, o metástases nos linfonodos e metástases distantes expandido, e, em seguida, o tempo de sobrevivência de cancro gástrico significativamente reduzida em conformidade (log-rank P
< 0,001 para a profundidade de invasão, estágio TNM ea metástase linfática;. log-rank P
= 0,031 para a metástase distante)

Efeitos de rs3803662 na sobrevivência cancro gástrico

Como mostrado na tabela 2, as associações de TOX3
genótipos rs3803662 com sobrevivência de câncer gástrico em diferentes modelos genéticos foram avaliadas por análises de regressão Cox. Não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas entre a sobrevivência de câncer de estômago e genótipos em quaisquer modelos genéticos. Para melhor avaliar a associação, os pacientes foram estratificados por histologia com intestinal-tipo e câncer gástrico tipo difuso. Como resultado, rs3803662 foi encontrado para ser associado com um efeito significativamente favorável entre difusa do tipo (log-rank P
= 0,030, Fig. 1), mas não intestinal-tipo (log-rank P
= 0,720, Fig. 2) pacientes com câncer gástrico em modelo dominante. As análises de regressão Cox revelou que os pacientes com câncer gástrico tipo difuso portadores do genótipo CT /TT reduzida um risco de 33% de morte significativamente (HR = 0,67, 95% CI = 0,46-0,96), em comparação com aqueles que eram portadores de CC.

análises estratificadas entre difusa do tipo de câncer gástrico

TOX3
rs3803662 foi investigada com a sobrevivência do tipo difuso pacientes com câncer gástrico por análise estratificada do tamanho do tumor, histologia, profundidade de invasão, metástase linfática, metástase, estadiamento TNM, estado potável e local do tumor. Como mostrado na Tabela 3, após o ajuste para co-variáveis ​​incluindo a idade e sexo, a redução do risco de morte foi muito evidente em pacientes com o tamanho do tumor > 5 cm (HR = 0,35, IC 95% = 0,21-0,56), T3 e T4 profundidade de invasão (HR = 0,63, 95% CI = 0,42-0,94 para T3; HR = 0,07, 95% CI = ,01-,83 para T4), metástase linfonodal (HR = 0,62, 95% CI = 0,41-0,93), sem metástases distantes (HR = 0,68, 95% CI = 0,46-1,00), não beber (HR = 0,63; IC95% = 0,43-0,92), sem quimioterapia (HR = 0,54, IC 95% = 0,34-0,86) e gástrica cancro cardíaco (IC HR = 0,50, 95% = 0,25-1,00). Embora os pacientes com profundidade T1 de invasão e fase I mostrou um melhor resultado semelhante, pode ter havido um poder estatístico abaixo do ideal para detectar uma diferença estatística no tempo de sobrevivência por causa do pequeno número de pacientes nestes subgrupos. Em contraste, parecia haver uma baixa sobrevida para pacientes com o tamanho do tumor ≤ 5 cm e beber embora não estatisticamente significativo. Além disso, uma análise de regressão multivariada de Cox também foi usado para confirmar um papel independente de genótipos rs3803662 no tipo difuso de sobrevivência de câncer gástrico. Cinco variáveis ​​(bebida, linfonodo metástases, local do tumor, quimioterapia e rs3803662) foram incluídos no modelo de regressão com um nível de significância de 0,05 para entrar e 0,10 para a remoção de uma variável (dados não mostrados). Quando a idade e sexo foram incluídos no modelo final, o rs3803662 CT /TT genótipo mostrou ser um preditor significativamente favorável para a sobrevivência de câncer gástrico tipo difuso. (CT /TT vs. CC: HR = 0,63, 95% CI = ,43-0,90) (Tabela 4)

Discussão

Em nosso estudo, nós investigamos o efeito de TOX3
rs3803662 na sobrevivência de pacientes com câncer gástrico. modelo dominante foi o modelo mais apropriado para TOX3
rs3803662. O CT rs3803662 /genótipo TT apresentou associação significativa com a melhor sobrevivência entre os do tipo difuso pacientes com câncer gástrico. Tal diferença não foi encontrado para o tipo intestinal pacientes com câncer gástrico. O mecanismo de padrões de sobrevivência do cancro gástrico que foram alteradas por subtipos histológicos continua por ser elucidado. Os diferentes resultados nos dois principais tipos histológicos de cancro gástrico pode ser devido à sua divergem em muitas características clínicas e moleculares, incluindo a sua etiologia, epidemiologia, carcinogénese e progressão, ARNm e /ou perfil de expressão de proteínas, o número de cópias do gene, a instabilidade microssatélite, perda de perfil heterozigosidade e mutação [17]. Além disso, dados os efeitos de TOX3
em células neuronais [9], rs3803662 aumentando a sobrevivência de câncer gástrico tipo difuso em um modelo dominante pode ser atribuem a habitar uma célula hospedeira para uma célula tumoral ou células cancerosas multiplicam rapidamente por mecanismos desconhecidos. Em nosso estudo, não beber é um fator de proteção para a sobrevivência do tipo difuso dos pacientes com câncer gástrico, pode ser visto que a prevenção primária popularizado na vida diária das pessoas será benéfica para diminuir o risco de morte entre câncer gástrico tipo difuso. Para o melhor de nosso conhecimento, este é o primeiro estudo a examinar a associação entre rs3803662 e sobrevivência de câncer gástrico TOX3
. Nossos resultados fornecem suporte para os estudos com base no genoma de sobrevivência de câncer gástrico, especialmente para as populações chinesas. Interação

Gene-gene é um tema quente em epidemiologia genética, incluindo o estudo prognóstico. Nem um único lócus pode explicar totalmente a sua susceptibilidade genética e prognóstico. Liu et al. relataram que as interacções entre multifactor polimorfismos em MMP-2, FasL, FAS desempenhar um papel mais importante no desenvolvimento de GCA. Da mesma forma, eles também descobriram que um efeito da dose de gene em associação com o prognóstico de doentes com NSCLC [18], [19]. Winkelmann et al. observou o rs3803662, que está em baixo LD com rs3104767 mostrou associação com RLS (λ corrigida nominal P _{GWA = 7,29 × 10 ^{-7). No entanto, a análise de regressão logística condicionando a rs3104767 demonstraram que esta associação é dependente rs3104767 [20]. Portanto, os resultados acima levantou a possibilidade de que uma combinação de SNPs dentro TOX3
ou em outro lugar no ato gene cumulativamente para aumentar o risco.}}

Riaz et al. descobriram que os alelos de risco de rs3803662 perto do gene TOX3
foi associada a uma menor expressão de TOX3
mRNA no cancro da mama e a hipótese de um papel supressor de tumores deste gene [21]. Estes achados sugerem as funções críticas do TOX3
em doenças. Note-se que os SNPs e genes específicos relacionados com prognóstico podem diferir daqueles envolvidos na susceptibilidade. No entanto, a variante identificada nos estudos do cancro da mama pode ter o mesmo efeito no risco de cancro gástrico. Assim, se rs3803662 qual mudou no prognóstico de cancro gástrico também podem influenciar alto risco para a doença em pacientes é necessária para justificar. Se validado em novas pesquisas, TOX3
rs3803662 também pode ser tomado como potencial marcador genético para susceptibilidade câncer gástrico, exceto para o prognóstico.

Algumas limitações devem ser consideradas quando se interpretar os resultados. Em primeiro lugar, nosso estudo tinha sido implementado em populações de chineses; se existe alguma diferença para o mesmo SNP nas características e sobrevivência de cancro gástrico em diferentes populações necessita de ser mais testadas. Em segundo lugar, mais pesquisas, com populações maiores de pacientes são necessários para confirmar nossos resultados devido a um tamanho relativamente pequeno da amostra em análise estratificada, bem como para excluir a possibilidade de associação ocorreu por acaso. Em terceiro lugar, H. piloro
é geralmente aceite como sendo o principal agente etiológico da doença de úlcera péptica, bem como para o adenocarcinoma gástrico [22]. No entanto, nós não investigar a infecção por H. pylori porque não havia informação clínica do paciente o suficiente.

Em conclusão, TOX3
rs3803662 desempenha um papel importante na sobrevivência de pacientes com câncer gástrico, especialmente pode ser considerada como um marcador de prognóstico do cancro gástrico independente do tipo difuso. Importante, nossos resultados oferecem uma perspectiva muito promissora para explorar e traduzir nossas descobertas em outras potenciais aplicações terapêuticas clínicas e diagnósticos em câncer gástrico.

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