Абстрактный
Фон
<р> Плазменные D-димера было показано быть высоким в прогрессирующих больных стадии опухоли и могут быть использованы для прогнозирования клинического исхода у больных раком. Поскольку большинство пациентов стадия запущенная опухоль обнаруживают бессимптомное метастаз, что способствует ранней рецидива опухоли после операции, мы предположили, что D-димер плазменные уровни могут быть использованы для прогнозирования пациентов с потенциальным метастазирования.
Финансирование:. Это исследование при поддержке грантов от Национального научного фонда Природные Китая (№ 30973489 (на CD)). Доноры не играет никакой роли в дизайн исследования, сбора и анализа данных, решение о публикации или подготовки рукописи
<р> Конкурирующие интересы:.. Авторы заявили, что не существует никаких конкурирующих интересов
Введение
<р> Гематогенное метастаз означает через кровь метастаз является наиболее важным осложнением злокачественных новообразований; Тем не менее, наше понимание этого явления остается неполным [1]. После того, как злокачественные клетки попадают в кровоток, они должны быть в состоянии пережить несколько стрессов, в том числе физических повреждений от гемодинамических сил сдвига и убийства иммуноопосредованной клеток [2], [3]. Было высказано предположение о том, что образование агрегатов тромбоцитов фибрин-опухолевых клеток может играть причинную роль в эндотелиальной адгезии и метастатический потенциал [4]. Отложение фибрина в клеточных агрегатов тромбоцитов приверженцем опухоли могут быть обнаружены еще 5 минут после инокуляции опухолевых клеток и сохраняется в течение более 9 часов [5]. Фибриноген является важным источником биодоступной фибрина по отношению к опухолевым клеткам в сосудистую сеть, которая необходима для опухолевых клеток в формировании сосудистой сети, опухолевых клеток экстравазации и метастазирования [2], [3]. Таким образом, плазма D-димера могут быть вовлечены в продвижении метастатического фенотипа в крови.
<Р> D-димера, который является стабильным конечным продуктом деградации сшитого фибрина, является результатом усиленного образования фибрина и фибринолиза. D-димер уровни широко используются для выявления пациентов с подозрением на диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови (ДВС), тромбоэмболии и инфаркта миокарда [6] - [8]. В последнее время, было сообщено, что повышенные уровни D-димера коррелируют с злокачественности [9], [10]. Кроме того, ряд исследований показал, что уровень D-димера связаны со стадией опухоли, прогноз опухоли, поражения лимфатических узлов и общей выживаемости у пациентов с солидными опухолями, такими как рак легких [11], [12], рак молочной железы [ ,,,0],13], рак пищевода [10], рак желудка [14], рак толстой кишки [15], и гинекологических злокачественных новообразований [16]. Плазменные уровни D-димера было показано, высоко продвинутых пациентов стадии опухоли и могут быть использованы для прогнозирования клинического исхода у больных раком [17], [18], [19], [20], [21]. Кроме того, большинство продвинутых пациентов стадии опухоли таил бессимптомных Hematogenous метастазы. Мы предположили, что в плазме D-димера может быть полезным клиническим маркером гематогенного метастазирования в злокачественности.
<Р> На основании предыдущих исследований, мы разработали данное исследование с целью изучения эффективности хозяйствования подозреваются метастазирование с использованием плазмы D-димер тестов в клинические больные раком. В данном исследовании мы установили перспективных клинических испытаний в трех многочисленных клинических центров по лечению рака в Северо-Западном Китае. Рак желудка (GC) является одним из наиболее распространенных злокачественных опухолей, представленных в Азии; Однако, прогноз пациентов с поздними стадиями заболевания остается очень бедным [22], [23]. Разнообразие клинических и биологических переменных были предложены в качестве прогностических факторов для GC, но точный молекулярный механизм, лежащий в основе и прогнозирования развития и прогрессирования GC используется в клинической практике, остается неясным [24]. Таким образом, мы исследовали уровни в плазме D-димера, фибриногена (FIB), продукты деградации фибрина (СвДП), а опухолевый маркер раково антигена (CEA), который также широко используется в клиниках ГХ у больных первичной GC. Мы проанализировали связь этих результатов с клиническими и патологическими факторами, а также выживаемости без признаков заболевания (DFS) и общей выживаемости (ОВ) результата. Кроме того, мы исследовали плазменные уровни D-димера в других злокачественных опухолей, которые легко метастазировать, включая меланому и рак поджелудочной железы, для оценки клинического использования тестов D-димера.
1. Дизайн исследования
<р> Это исследование было основано на гипотезе о том, что уровни D-димера может быть использован для обнаружения метастазов у онкологических больных. Мы сначала проверить нашу гипотезу в крупномасштабном клиническом исследовании. Плазменные уровни D-димера были оценены в 1042 больных первичной GC и по сравнению с клиническими и патологическими факторами. Эффективность управления подозреваемое метастазирование, основанный на плазменных уровней D-димера у больных ГХ оценивали с помощью приемника оператора характеристической (ROC) кривой. И, наконец, мы провели последующее исследование с подмножеством пациентов GC для оценки общей выживаемости (ОВ) и повторения в начале опухоли (ETR, рецидивов в течение 2-х лет), основанный на высоких и низких уровней D-димера на основе кривой ROC. Мы также подтвердили наш вывод путем оценки других солидных опухолей (меланома и рак поджелудочной железы) в нашем клиническом исследовании.
Результаты
1.. Данные пациента и уровни D-димера для различных групп
<р> данные Основные пациентов (возраст и пол) и плазменные D-димера (медиана и 25-75-й процентиль) приведены в таблице S1. В общей сложности 1042 GC больных (837 мужчин и 205 женщин в возрасте 22-88 лет) были включены в исследование; другие пациенты GC были исключены по определенным причинам, как показано в таблице S1. Контрольные группы были включены 50 добровольцев для здоровья (25 мужчин и 25 женщин, в возрасте 36-84 лет, медиана D-димера составляет 0,80 мг /мл), 31 пациентов с GP (10 мужчин и 21 женщин в возрасте 36-75 лет, средний уровни D-димер 0,70 мг /мл) и 35 пациентов (GST 23 мужчин и 12 женщин, в возрасте 36-75 лет, средний D-димера составляет 1,0 мг /мл). Плазменные уровни D-димера были протестированы среди различных групп, и результаты приведены в таблице S1. Результаты отображаются значительные уровни D-димера увеличение среди этапа IV GC группы (в среднем 1,4 мг /л) по сравнению с другими группами (р &л; 0,001), в то время как в плазме D-димера не проявляли существенной разницы в других группах ( Рис. 1А)
2. Корреляция между уровнями D-димера в плазме и связанных с ними факторов
<р> Корреляция между D-димера плазменных уровней и связанных с ними факторов приведены в таблице 1. Результаты корреляционного анализа с помощью множественной линейной регрессии модели показывают, что плазма D-димера уровни только рассматривают инвазию лимфатических узлов (г = 0,167, p = 0,01), наличие сосудистой эмболии рака в образцах ткани (г = 0,367; р = 0,043) и отдаленными метастазами (г = 0,466; р = 0,007); Результаты приведены в таблице 1 и на рисунках 1B-1D
Плазменные уровни FDP отображается линейную зависимость с D-димера (R 2 = 0,853, р &л; 0,001). (Рисунок S1A). Тем не менее, ни одна линейная связь не была обнаружена между уровнями FIB и D-димера (R 2 = 0, р = 0,61) (рис S1B). Эти результаты согласуются с результатами в естественных условиях. Кроме того, уровни CEA показали слабую линейную связь с уровнем D-димера у больных GC (R 2 = 0,056, р &л; 0,001). (Рисунок S1C) 3. Эффективность хозяйствования заподозрили метастаз на основе плазмы D-димера данные 4. Плазменный D-димера, ОС и DFS В общей сложности 395 пациентов были успешно рассмотрены в течение периода наблюдения, 292 пациентов прошли R0 резекция, 4 пациентам была выполнена резекция R1, 65 паллиативная операция Прошел и 34 пациентов получили только исследовательское лапаротомия, 93 GC пациентов с продвинутой стадии опухоли были обработаны с тем же самым дополнительный метод лечения. Мы определили высокие и низкие уровни в соответствии с уровнями D-димера в плазме при 1,5 мг /мл на основе кривой ROC. В ходе последующей деятельности, 177 из 391 пациентов умерли; выживание 2 год был 54,7% в целом. Для GC пациентов с высоким уровнем D-димера, время выживания короткой основан на анализе выживаемости логарифмического. Кроме того, выживаемость коррелировала с опухолевой инвазии (р = 0,002), инвазии лимфатических узлов (р &л; 0,001), метод хирургии (р = 0,025), сосудистый эмболии рака (р = 0,026) и дополнительное лечение (р = 0,026), на основании тестом на выживание лог-ранга. Тем не менее, продолжительность жизни не зависит от пола пациента (р = 0,778), возраст (р = 0,336) или гистологической степени (р = 0,39). На основе пропорциональных рисков регрессионного анализа Кокса, выживаемость под влиянием D-димера (р = 0,012, коэффициент риска = 1.7) (рис 2А), инвазия лимфатических узлов (р = 0,011, отношение рисков = 1.33) и дополнительное лечение (р = 0,045, соотношение риска = 0,61). Результаты приведены в таблице 2. из 269 пациентов со стадией TNM I, II или III, 105 267paitents умерли в течение 2-х лет с выживаемость составляет 60,7%, 114 259 пациенты обнаружили рецидив опухоли в течение 2-х лет с частотой рецидивов составляет 44,0%. Время выживания было коротким для пациентов с высоким уровнем D-димера, но разница не была статистически значимой на основе Кокса регрессионной модели (рис 2С), Интересно, что ДФС был коротким у пациентов с высоким уровнем D-димера (р &ЛТ; 0,001 , отношение риска = 2.7) (рис 2D) в соответствии как лог-ранговый и Cox регрессионного анализа, как показано в таблице 3. 5. Плазменная D-димера в других солидных опухолях
<р> Плазменные уровни D-димера были заметно увеличены у пациентов с метастазированием расстояние по сравнению с контрольной группой, особенно у больных с гематогенным висцерального метастазирования, как показано на рисунке 1D. Плазменный D-димера были повышены в стадии TNM IV пациентов и лимфатических узлов у больных инвазия N3; большинство из этих пациентов имели отдаленные метастазы или потенциальный метастазирование. Поэтому мы предположили, что плазменные уровни D-димера может быть использован для обнаружения метастаз. Оператор Receiver характеристика (ROC) кривые для анализа D-димера в диагностике метастазов показаны на рисунке 1E. Значения отрезные для D-димера уровней был определен как 1,5 мг /мл на основе кривой ROC, а чувствительность и специфичность для прогнозирования метастазирования были 61,9% и 86,6%, соответственно. ROC кривая для обнаружения метастазов с помощью тест плазмы D-димера (P ≪ 0,001, площадь = 0,80, 95% ДИ (0.76-0.83)) и уровни CEA у больных ГХ в настоящем исследовании, как показано на рисунке 1F
.
<р> безрецидивная выживаемость (ДФС) является наиболее важным клиническим событие, связанное с плохим прогнозом хирургической GC до смерти и может рассматриваться как более важное значение, чем смертность. В этом исследовании, 203 из 382 пациентов обнаружили рецидив опухоли в течение 2-х лет; частота рецидивов составила 53,1% в целом. Для того, чтобы лучше интервью значимость плазмы Д-димера, мы исключаем 83 диагностированных пациентов расстояние метастаз GC в начале, 140 из 299 пациентов GC обнаружили рецидив опухоли ИСВН 2-х лет с частотой рецидивов составляет 46,8%. Существенное различие в ДФС наблюдалось между пациентами GC с высоким уровнем D-димера и лиц с низким уровнем. Одномерный анализ показал, что уровни D-димера повышенной плазмы, прорастание опухоли, инвазии лимфатических узлов, а раковые эмболы значительные прогностические факторы для DFS; Однако многомерный анализ показал, что только повышенные уровни в плазме D-димера (р &л; 0,001, соотношение риска = 2,44) (рис 2B) и вторжение лимфатических узлов (р = 0,033, соотношение риска = 1,26) были значимыми независимыми факторами риска Кокса пропорционального опасности модель времени к ДФС, как указано в таблице 2.
<р> В нашем предыдущем исследовании мы обнаружили, что D-димера были значительно выше в стадии TNM рака пищевода у пациентов [25]. Мы также исследовали D-димера в плазме в 44 панкреатических раковых больных (31 метастаз) и 37 пациентов с меланомой (9 метастазирование) и обнаружили, что в плазме D-димера были значительно повышен при раке поджелудочной железы и пациентов с меланомой с метастазами (Фигуры 3А, 3В) , Отсечка значение D-димера уровней был определен как 1,5 мг /мл на основе кривой ROC (рис 3C), а также чувствительность и специфичность для прогнозирования метастазирования были 73,2% и 92,5%, соответственно. Если пороговое значение для уровней D-димера определяется равным 1,5 мг /мл, прогностическая ценность положительного результата составляет 90,9%, а отрицательное прогностическое значение 77,1%.
Метастазы Обсуждение
<р> остается основной причиной неэффективности лечения рака. Коагуляция уже давно известно, для облегчения метастазирования [5], [26], [27], [28], [29]. В клинических исследованиях, мы обнаружили, что оба плазменных D-димер уровни были значительно повышены у пациентов метастаз GC, особенно у больных с гематогенным висцерального метастазирования, а уровни D-димера коррелирует с сосудистой эмболии рака в образцах тканей резецированными. GC пациентов с повышенным уровнем D-димера отображенных снижением выживаемости. Важно отметить, что ДФС было значительно снижено у больных ГХ с высоким уровнем D-димера. Интересно отметить, что у пациентов с TNM I, II и III стадий с уровнем D-димера повышенной плазмы показали более высокую частоту рецидивов опухоли по сравнению с контрольной группой, хотя модель регрессии риска Кокса показал, что ОС не различаются в зависимости от уровня D-димера в плазме , Эти данные привели нас к мысли, что плазма D-димер является прогностическим маркером бессимптомной метастаз, что связано с плохим исходом у больных ГЦ.
<Р> Анализ фибриногена-дефицитных мышей, Палумбо и др. показали, что фибриноген играет определенную роль в адгезии и выживаемости опухолевых клеток, а не рост опухолевых клеток [30], [31]. В начале данного исследования, мы предположили, что фактор свертывания крови может быть использован для обнаружения метастазов в клинических условиях; Таким образом, мы тестировали фибриногена в сочетании с D-димера уровней факторов и СвДП. Мы обнаружили, что фибриногена плазмы не сильно различаются у больных ГЦ. Несмотря на то, что является важным фактором в циркулирующих опухолевых клеток (КТК) выживание и метастазирование, он не доступен в клинических испытаниях с метастазированием. Однако плазменные уровни D-димеров показали преимущество в этой оценке. FDP включает D-димера и деградации фибриногена, она была в первую очередь под влиянием D-димера, как обозначено их линейной связи, обнаруженной в настоящем исследовании.
<Р> Идентификация новых молекулярных маркеров для прогнозирования метастазирования опухоли будет способствовать разработке более эффективных стратегий для лечения пациента. Кроме того, в нашем клиническом исследовании, мы обнаружили, что повышенные уровни в плазме D-димера является независимым фактором риска, связанный с метастазами, сосудистой эмболии рака и безрецидивной выживаемости (рецидив опухоли) и, следовательно, способствуют плохой выживаемости пациентов. Мы обнаружили повышенные плазменные уровни D-димера не только у больных с метастазированием, но и в каком-то этапе IV больных, N3 лимфатических больных инвазия узел без видимых метастазов и каком-то этапе я, я я, и я I больных. После краткого изучения последующего, мы обнаружили, что большинство из этих пациентов наблюдалось рецидива опухоли с гематогенным метастазированием. Повышение уровней D-димера в плазме представляет собой интересное явление, связанное с лежащей в основе микро-метастазировании опухолей большинства этих пациентов, но оно не может быть обнаружено с помощью текущих способов обнаружения, несмотря на то, что повышение плазменных уровней D-димера были первые обнаружены у этих пациентов. D-димер Плазменные уровни представляют собой лучший предсказатель метастазирования у больных ГЦ. Хотя опухолевые маркеры, такие как СЕА широко используются для наблюдения пациентов с желудочно-кишечных раковых образований, их отсутствие чувствительности остается проблемой. Мы также обнаружили, что циркулирующие уровни D-димера являются лучшими предсказателями метастаз, OS и ДПП, чем уровни CEA у больных ГЦ.
<Р> В связи с неточностью КТ и других методов для выявления бессимптомного гематогенного метастазирования, то часто бывает трудно определить, является ли пациенты имеют право на получение потенциально лечебной резекции с помощью текущего сканирования поколения КТ. Современные методы визуализации и опухолевые маркеры иногда бесполезны для мониторинга терапии. Измерение уровней D-димера может быть полезным диагностическим инструментом для прогнозирования бессимптомной гематогенная метастазирование.
<Р> В некоторых высоких заболеваниях злокачественных опухолей, таких как рак поджелудочной железы и меланомы, мы обнаружили, что D-димера были заметно выше у пациентов с метастазированием в этом исследовании. В нашем предыдущем исследовании мы обнаружили, что этот фактор был повышен у пациентов с метастазами рака легких и рака пищевода [25]. Таким образом, мы предполагаем, что этот фактор может быть использован в клинических испытаниях для различных типов опухолей.
<Р> В последующем исследовании, есть некоторые недостаточными существует в нашем настоящем исследовании. Первый из них, как многие из пациентов развилась тромботических осложнений не очищается. Пациенты наблюдались систематически (см NCCN руководящих принципов для GC). Для бессимптомных пациентов, следить за включал полную историю и физическое обследование, КТ грудной клетки и брюшной полости, ультразвуковое B сканирование брюшной полости (живой и надпочечники), сканирование костного мозга и эндоскопии биопсия для исключения рецидивов и метастазов. Но дополнительные тесты для оценки тромб не была включена, если клинические симптомы не обнаруживаются во время рутинного наблюдения. До тех пор пока 3 из 395 пациентов с симптоматическим тромба, в то время как у других пациентов, так как гиперкоагуляция существуют в большинстве раковых больных, так бессимптомно тромб и микро-тромб не может быть исключена. Второй из них является повышение плазменной D-димера у больных с метастазированием, не так высока, как это было испытание у пациентов VTE. Плазменные уровни D-димера у больных метастазами были увеличены примерно в 2 раза, и, следовательно, не были столь же высоки, как наблюдалось у пациентов VTE. Чувствительность не была достаточно высокой, учитывая гетерогенность пациента, и его легко под влиянием других факторов, таких как инфекции.
<Р> Таким образом, мы описали уровни в плазме D-димера, которые могут отражать усиленному образованию фибрина и фибринолиз гипер-свертываемость в большом количестве больных ГЦ. Плазменные уровни D-димера были выше у пациентов метастаз GC, хотя чувствительность и специфичность для прогнозирования метастазирования не были достаточно высоки. Тем не менее, принимая во внимание, что тест является низкая стоимость и легко выполнить, следует учитывать для тестирования онкологических больных, особенно в развивающихся странах.
Поддержка Информация рис S1
.
Отношения между D-димера в плазме и СвДП, FIB и CEA. A, B, плазменные уровни D-димеров показали линейную зависимость с плазменных уровней FDP, но не с уровнями FIB плазмы. C, плазменные уровни D-димера коррелируют с уровнями плазмы СЕА, хотя они не проявляли линейную зависимость
DOI:. 10,1371 /journal.pone.0101125.s001
(TIF)
Таблица S1.
Характеристики пациентов и плазмы D-Димер (мг /л) уровней в различных группах
DOI:. 10,1371 /journal.pone.0101125.s002
(DOC)
Общий генетический вариант объясняет, почему иммунотерапия часто не помогает при болезни Крона.
Пища избирательно влияет на кишечные микробы - результаты исследования
Пробиотики могут помочь обуздать недоедание в течение следующих двух десятилетий.
Тесты, используемые для диагностики ГЭРБ
Оральный секс может вызвать бактериальный вагиноз
Состав и структура микробиома носоглотки связаны с тяжестью заболевания COVID-19
Исследования смотрят на аэробиомы,
деревья и последствия для общественного здравоохранения Микроорганизмы окружающей среды играют важную роль в здоровье человека - разнообразный консорциум, лучше. Разнообразие микроорганизмов помогает
Самые полезные кишечные бактерии с растительной или средиземноморской диетой
Новое исследование показывает, что определенные продукты, содержащиеся в растительной или средиземноморской диете, могут защитить кишечник от воспалительных заболеваний. избирательно способствуя росту
Новая модель трансплантации микробиома влагалища
Бактериальный вагиноз - это заболевание, от которого страдают тысячи женщин во всем мире. и связан не только с вагинальными симптомами, но и с осложнениями, связанными с беременностью, включая преждев