Pretrvávajúce kolonizácie H. pylori v ranom obstarávacia veku myšou spojených s vyššou žalúdočnej sialylovány Lewis x, IL-10, ale nižšiu interferón-γ výrazy

Pretrvávajúce H. pylori
kolonizácie na začiatku akvizície veku myšou súvisiace s vyšším žalúdočných sialylovány Lewis x, IL-10, ale nižšiu interferón-γ výrazy
abstraktné
pozadia
H. pylori infekcie
je menej prevláda v detstve. Táto štúdia overené, či sadzby H. pylori
kolonizácie závisí na rôznych akvizičných vekových kategórií, a korelujú s rôznymi žalúdočnými Lewis antigény alebo cytokínov výrazov po H. pylori
akvizície.
Metódy uplatňované
sme sa mladých (7-day-old) C57BL /6 myší skupina (n = 50), a pre dospelých (6 týždňov staré) C57BL /6 myší skupina (n = 50). V každej skupine, 30 boli myši infikované H. pylori stroje a 20 myší slúžil ako naivný kontrolu. Úspech H. pylori
kolonizácie bola hodnotená na 2 nd týždeň a 8 th týždeň, resp. Intenzita Lewis x, sialylované Lewis x (sialyl-Le x), a cytokíny výrazy, vrátane TNF-a, IFN-y, IL-6, IL-10, a IL-1, boli imunochemicky zafarbia a
triedi. Výsledky
na 2 nd týždeň potom, čo H. pylori
výzvou, kolonizácia sadzby H. pylori
boli podobné medzi mladou myšou skupinou a skupinou dospelých myší (89 % oproti 100%, P Hotel &0,05). Avšak, na 8. teho týždňa H. pylori
kolonizácie činila u mladých myší skupiny významne nižšie ako v skupine dospelých myší (53% vs. 95%; p = 0,003)
. Na 8. th týždeň, mladý myší s pretrvávajúcim H. pylori
kolonizáciu mal vyššiu sialyl-Le x vyššia IL-10, a dolný IFN-γ ako u myší, ktoré stratené kolonizácie v priebehu 2 nd na 8 th týždeň (P Hotel < 0,05).
Záver
pretrvávania H. pylori
kolonizácie by mohla byť akvizície veku determinant proces. Potom, čo H. pylori
expozície v ranom veku obstaranie je hostiteľ reakcia s vyšším sialyl-Le x a IL-10, ale nižšiu IFN-gama koreluje s následným pretrvávanie H. pylori
kolonizácia.
Úvod
Helicobacter pylori
infekcia môže spôsobiť chronickú gastritídu a dokonca peptickej vredovej choroby u detí aj dospelých [1, 2]. V epidemiologických štúdiách sa séropozitivity H. pylori
bolo preukázané, že u detí nižšie ako u dospelých [3, 4]. Následná kohorta štúdia ukázala, že najvyšší výskyt sérokonverzie sa vyskytuje v ranom detstve a postupne klesá s vekom [3]. Niektoré štúdie preukázali, že skorý akvizícia H. pylori
infekcie v detskom veku môže prípadne viesť k následnej strate kolonizácie [3-6]. Avšak, presné predpisy v rámci deťom určiť buď stratu alebo ich pretrvávanie H. pylori
kolonizácie po začiatku roku akvizície zostane nie je známy.
Záväzný krvná skupina Adhesin (baba) H. pylori
selektívne viaže na fukosylovaných Lewis antigén (Le b) žalúdočných buniek sprostredkováva ťažký bakteriálnu kolonizáciu [7-9]. Druhá Adhesin viažuci kyselinu sialovej (Saba) H. pylori
sa viaže na žalúdočnú sialylovány Lewis x antigén (sialyl-Le x), prípadne pomoc pri trvalé osídlenie po chronický zápal [10], a najmä sa stáva dôležitým keď Le b antigénu v hostiteľskom chýba alebo slabá [11]. Naša nedávna štúdia odhalila, že H. pylori
-infected deti mali výrazný nárast sialyl-Le x, ale nie Le b vyjadrenie [12]. Je preto zaujímavé zistiť, či pretrvávanie ranej obstaranie H. pylori
v detstve môže súvisieť s variabilnými odpoveďou hostiteľských žalúdočné zápalu alebo epiteliálneho sialylace prispôsobiť Saba H. pylori
.
s dospelými C57BL /6 myší staršie ako šesť týždňov veku, klinického H. pylori
kmene môžu úspešne kolonizovať väčšinu myšiam po dobu dlhšiu ako šesť mesiacov [13, 14]. Chronickej infekcie Helicobacter pylori
vedie k rôznym typu Th1 prevládajúcich žalúdočných zápaloch s variabilnými prozápalových a Th1 dominantné reakcií typu cytokínov medzi rôznymi hostiteľov [15-18]. V súlade s tým Súčasná štúdie zamerané na prvý pohľad zistiť, či pretrvávanie H. pylori
kolonizácie by mohol byť proces determinantom akvizície v produktívnom veku. Okrem toho táto štúdia sa pokúsil odpovedať, či premenná sialyl-Le x a zápalové cytokíny výrazy po H. pylori
výzvu by mohli stanoviť, pretrvávajúce kolonizáciu H. pylori
infekcií, a to najmä v myšou obdržania výzva skorého akvizície.
materiály a metódy myši
skupiny a H. pylori
izolátov pre výzvu experiment
Táto štúdia použila 100 myší C57BL /6 (50 sedem dní starých mladých myší a 50 šesť -week-old dospelých myších samcov), vrátane 60 v experimentálnej skupine napadnúť s typom 1, saba-pozitívne baktérie H. pylori klinický izolát
(HP 625) a 40 u doteraz neliečených kontrol. Že násobenie z H. pylori
izoláty boli použité rovnakým spôsobom ako našej predchádzajúcej štúdie myšiam modeli bolo dosiahnuté hustoty 0,8 x 10 8 CFU /ml. [19]. U experimentálne skupiny, bakteriálne suspenzie 0,1 ml pre mladých myši a 0,5 ml pre dospelých myší sa orálne zaočkované počas troch po sebe idúcich dní, v danom poradí. Desať každý z mladých a dospelých myší v kontrolnej skupine bolo usmrtených v polohe 2 nd a 8 th týždeň. V experimentálnych myší, desať každý z mladých a dospelých myší na 2 nd týždeň a 20 každej z mladých a dospelých myší na 8 th týždeň po inokulácii usmrtí injekcií intra-peritoneálnej pentobarbitalu ( 150 až 200 mg /kg). Izolované žalúdky sa nareže po väčšom a menšom zakrivenie na dve polovice. Jedna polovica bola formalínu zaliate pre histológiu a antigénu vyšetrenie Lewis. Druhá polovica bola ihneď umiestnená do vyrovnávacej pamäte, zmrazený na suchom ľade, a skladované pri -80 ° C počas vyšetrení cytokínov. H. pylori
infekcia bola preukázaná rýchlym testom močoviny a histologické vyšetrenie.
Žalúdočné histológiu myšou
dva vyšetrovatelia, vrátane jedného patológa, nevedomý demografických dát a výsledkov kolonizácie, analyzovali žalúdočné histológiu. Použitím metódy nášho predchádzajúceho myšiam modelu [19], histologické parametre, vrátane H. pylori
hustotou (rozmedzie 0-4), akútne zápalové skóre (AIS, rozsah 0-3), chronický zápal skóre (CIS, rozsah 0-3), atrofická zmena (AT, rozsah 0-1), a črevné metaplázia (IM, rozsah 0-3) boli hodnotené topograficky nad dutine, korpus a kardio, resp. Systém triedenia H. pylori
hustote bol použitý nasledujúci: 0, zistené žiadne baktérie; 1, mierny stupeň kolonizácie baktérií a neboli detekované vo všetkých žalúdočné krypty; 2, mierny stupeň kolonizácie baktérií nájdených vo väčšine krýpt prítomných; 3, stredne ťažké až ťažké kolonizácie vo všetkých kryptách; a 4, ťažká kolonizácie so všetkými krýpt husto zabalené s baktériami. Prezentované výsledky sú stredná hodnota kolonizácie pre každú skupinu. Celková H. pylori
hustota (THPD) bola definovaná ako súčet hustôt získaných z antra, korpus a kardio, a tak pohyboval v rozmedzí od 0 do 12. Celková akútnej (TAIS) a chronické (TCis) zápalové skóre bol tiež súčet skóre z troch miest (rozmedzie 0-9).
Bakteriálna infekcia H. pylori
bola definovaná ako prítomnosť akýchkoľvek baktérií v žalúdočnej častiach, pričom boli myši za to, že sa nepodarilo naočkuje kedy sa žiadne baktérie vidieť na histológiu a negatívne na test CLO.
Imunohistochemické farbenie a ozvučenie pre žalúdočné Lewis expresiu
imunologické žalúdočných vzoriek pre Lewis antigénov bola vykonaná za použitia avidín-biotín-peroxidáza techniku ​​s vektorom Ms.OM Imunodetekce Kit. Primárne monoklonálna protilátka (anti-Le x, Prstene Laboratories, Inc., Dedham, MA) bol vybraný pre detekciu žalúdočné Le x antigény [11, 12]. Okrem Le x farbenie antigén, monoklonálne protilátky proti sialyl-Le x (myší IgM MAB2096, Chemicon International, Inc., Temecula, CA) bol použitý [12]. Nešpecifické väzbové miesta boli nasýtená 2-2,5% hovädzieho sérového albumínu. Pre každého žalúdočného mieste, intenzita Le x (rozmedzie 0-5) a sialyl-Le x (rozmedzie 0-4) bola hodnotená v závislosti na topografii farbenie (obrázok 1). Celková žalúdočné Lewis intenzita antigén pre Le x a sialyl-Le x bol súčet dutine, korpus a kardio (rozmedzie 0-15 Le x a 0-12 v sialyl-Le x). Obrázok 1 imunohistochemické (IHC) farbenie a triedenie Lewis x (Le x) a sialyl-Lewis x (sialyl- Le x) antigény sú uvedené pre žalúdočných biopsiou myší (200 ×). Farbenie IHC ukázali negatívne na dvoch Lewis antigénov a bol označovaný ako skóre 0. Lex, skóre 1 (A): mizivou farbenie (< 5% v parietálnych bunkách hlbokých žliaz, skóre 2 (b): hlboké žľazy 5 -50% farbenie a slabý; skóre 3 (c): hlboké žľazy > 50% farbenie a silný; skóre 4 (D): celá vrstva hlbokých žliaz s povrchovým epitelu farbením, bez hlienu prejavu; skóre 5 (E): celý . vrstva hlienu výraz pre sialyl- Lex, skóre 1 (F): iba povrch sliznice pozitívne; skóre 2 (g): hlienu a horná epitel, 3 body (H): horná epitel a hlboké žľazy (vedúci bunky < 50% .); skóre 4 (i): horný epitelu a hlboké žľazy (hlavné bunky ≥ 50%)
Imunohistochemické farbenie a ozvučenie pre expresiu cytokínov
mrazených rezov (4 um) sa suší pri teplote miestnosti po dobu 2 hodín, a fixované 3,7% formaldehydom po dobu 1 minúty. po premytí PBS dvakrát, vzorky boli fixované studeným acetónom a potom sa premyje PBS. Myší Ig blokujúce činidlo (Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) bol použitý na blokovanie nešpecifických väzobných miest. Že potkania anti-myší monoklonálne protilátky (TNF-a, IL-6, IL-10, IL-1 a IFN-y) a králičie anti-myšou polyklonálna protilátka (IL-1β) boli použité ako primárnej protilátky. HRP konjugát polyméru široké spektrum (Zymed Laboratories Inc. South San Francisco, CA, USA) bol použitý ako 2 nd protilátky. Súprava AEC bola použitá pre ilustráciu škvrnu. Intenzita každého cytokínu bola hodnotená podľa klasifikačných pozitívne farbenie buniek na epitelu (rozmedzie 0-3), a na lamina propria prvkov, vrátane matice, polymorfonukleárne bunky, lymfocyty a fibrocytů (tabuľka 1) .Table 1 bodovanie cytokinových výrazov na žalúdočné epitelu a lamina propria.

Skóre

0
1
2
3
epitelu
Negatívne
Menej ako 33%
33% -67%
viac ako 67%
Lamina propria
Matrix
Absencia
prítomnosť
lymfocytov
Absencia
Presence
Fibrocyte
Absencia
prítomnosti
neutrofilov
Absencia
prítomnosti
kvantitatívne hodnotením každej cytokínu na epitelu bolo nasledovné: skóre 1: pozitívny farbenie v cytoplazme epiteliálnych buniek iba na hornej 1/3 časť epitelu; skóre 2: v hornej a strednej časti epitelu (1 /3-2 /3); skóre 3: na celej vrstve epitelu (viac ako 2/3). Pozitívne farbenie každého cytokínu na lamina propria (lymfocyty, fibrocyty a neutrofilov) znamená, že tam bolo viac ako päť pozitívnych buniek vo vysokom výkone zornom poli v mikroskopické vyšetrenie.
Štatistická analýza
Pearsonovho × 2 test bol použitý na testovanie rozdielu kolonizácie sadzbách medzi experimentálne a kontrolných myší. Histologické parametre, Lewisovej antigény, a cytokíny výrazy boli porovnané s Fisherovho exaktného testu na rôznych podskupín. Friedman test bol použitý na testovanie rozdielu H. pylori
hustote medzi antra, korpus a ústí pažeráka v každej myši. Všetky testy boli hodnotené dvojchvostý a p
hodnota < 0.05 odfotil za významné.
Výsledky
sadzby úspešného H. pylori
kolonizácie u myší s rôznymi obstarávacia veku
na 2 nd týždeň potom, čo H. pylori
výzvu, H. pylori
kolonizácie bol úspešný v 89% (8/9) z mladých myší skupiny a 100% (10/10) zo skupiny dospelých myší. Naproti tomu, v 8. th týždeň po H. pylori
výzvu, rýchlosť kolonizácie bol v mladých myší, než je u dospelých myší výrazne nižší (53% verzus 95%, P = 0,003
). U týchto myší s úspešnou kolonizáciu a to buď na 2 nd alebo 8 th týždeň, hustoty H. pylori
boli rovnomerne rozložené na dutine, corpus a kardia v oboch mladých i dospelých myší ( P Hotel > 0,05)
žalúdočné antigén a cytokíny výrazy Vekovo špecifické Lewis v naivných myší
v naivným myší oboch mladých a dospelých skupiny, prejavov Le x a sialyl-. le x boli slabí na žalúdočné dutine. Avšak, postupné zvyšovanie celkovej intenzity Le x a sialyl-Le x výrazy boli zverejnené v krokoch vekom (Obr 2A & 2B). Takéto zvýšenie plató od chronologického veku okolia 5 týždňov starých. Na 2 nd týždni a 8. -tého týždňa po H. pylori
výzvu, Le x výrazy sa nelíšili medzi kolonizovaných a kontrolných myší v oboch skupinách mladých i dospelých. Obrázok 2 Intenzita žalúdočnej Lewis antigénov v naivných myší v rôznych vekových života (A) Lewis x, (B), sialyl-Lewis x.
Intenzita žalúdočné expresie cytokínov menil rôznych vekových myšou a umiestnenie medzi nimi. Pre prozápalových cytokínov neboli zaznamenané žiadne pozitívne farbenie na TNF-a a IL-6 na povrchového epitelu v žiadnom z doteraz neliečených myší. Pozitívne farbenie TNF-a a IL-6 na lymfocyty, neutrofily a fibrocyty cez lamina propria boli významne vyššie u myší vo veku ≥ 5 týždeň, než tie, vo veku < 5 týždňov (P Hotel &0,01; Obrázok 3A dvojica A a 3B). Pozitívne farbenie IL-1 bola predovšetkým nájsť na epitelu a na začiatku vyjadril u myší vo veku < 5 týždňov. Miera pozitívneho farbenie IL-1 na neutrofilov bol vyšší u myší vo veku ≥ 5 týždňov, než tie vo veku < 5 týždňov (P Hotel &0,05; 3C). Obrázok 3 Žalúdočné cytokínov výrazy na epitelu a lamina propria medzi naivných myší vo veku ≥ 5 týždňov a < 5 týždňov. (A) nádorové nekrotické faktoru alfa (TNF-α), (B), interleukín 6 (IL-6), (C), interleukín 1 beta (IL-1), (D), interferón gama (IFN-γ), a (E ) interleukín 10 (IL-10).
na počiatku života myší, pozitívne IFN-γ farbenie bolo v nájdené na epitelu a matice väčšinou, pretože intenzita pozitívny IFN-y škvŕn poklesla po veku ≥ 5 týždňov (P Hotel < 0,01, 3D obrázok). Avšak významne vyššia miera pozitívneho IFN-y škvŕn na lymfocyty a fibrocytů bola popísaná u myší vo veku ≥ 5 týždňov, než tie vo veku < 5 týždňov (P Hotel &0,01).
Na rozdiel od ťažkých IFN-y škvŕn na epitelu na počiatku života myší IL-10 bol zvyčajne negatívny na epitelu. Pozitívne farbenie IL-10 bol vyšší u lymfocytov a fibrocytů u myší vo veku ≥ 5 týždňov, než v tých, vo veku < 5 týždňov (P Hotel &0,05; Obrázok 3E).
Myši histológie a expresie antigénu Lewis po H. pylori
infekcia
Na 2 nd týždeň potom, čo H. pylori
úlohou je H. pylori
-colonized mladých myší sa zdalo, že majú nepatrne vyššiu rýchlosť vysoké TCis (skóre ≥ 4) ako u kontrolných myší (88% verzus 50%, P = 0,15
), ale taký okrajový význam nebol uverejnený v dospelých myší (30% oproti 30%, P = 1,00
). Okrem toho, u mladých myší skupiny, myši s pretrvávajúcou kolonizáciou na 8. th týždeň mala zreteľne vyšší podiel vysokých TCis než myši, ktoré stratené kolonizácia (40% verzus 11%, P = 0,30
) , Na 2 nd týždeň po H. pylori
výzvu, percento kolonizovaných mladých myší, ktoré majú vysokú intenzitu sialyl-Le x výraz (skóre ≥ 7) poklesla v porovnaní s v kontrolných myší (25% verzus 60%, P = 0,19
). Avšak, takéto zníženie nebolo zrejmé na 8. th týždeň (100% verzus 90%, P Hotel &0,05) a dospelých myší na 2 nd týždeň (90% vs. 100 %, P Hotel > 0,05) a 8 th týždeň (58% vs. 60% P Hotel >, 0,05.) po tom, čo H. pylori
výzvy
žalúdočné cytokíny výraz potom, čo H. pylori
infekcia
na 2 nd týždeň potom, čo H. pylori
výzvou, mladí myši s úspešnou kolonizáciu mali významne vyššiu intenzitu IL-6 na fibrocytů (75% vs. 0 %, P = 0,002
) a matice (75% verzus 20%, P = 0,05
), ale nižšiu IFN-γ (0% oproti 100%, P Hotel &0,001) na matrice ako doteraz neliečených kontrol (tabuľka 2). Aj v dospelých myší, myši s úspešnou kolonizácie boli popísané, že majú nižšiu mieru IFN-γ prejave na fibrocytů než u kontrolných myší (30% oproti 90%, P = 0,02
) .Table 2 žalúdočné cytokínov výrazy na 2. týždeň mladých a dospelých myší s pretrvávajúcimi H. pylori
kolonizácie a naivné kontrolných myší.


mladých myší
dospelých myší
parameter (%)
kolónia
(n = 8)

Control
(n = 10)
P
hodnota
kolónia
(n = 10)
Control
( n = 10)
P
Hodnota
IL-6 *
Matrix
75
20
0,05
70
30
NS
lymfocyt
50tich
10
NS
60
70
NS
Fibrocyte
75
0
0,002
80ti
50
NS
Neutrofilov
37,5
20
NS
20
70
0,07
TNF-α *
Matrix
87,5
70
NS
80
s 90
NS
lymfocyt
62,5
40
NS
90
90
NS
Fibrocyte
87.5
40
0,07
100 a
s 90
NS
Neutrofilov
12,5
10
NS
30
40
NS
IL-1β
epitel ≥ 2
100
70
NS
100
90
NS
Matrix
a25 NETHRY.cz 0
NS
100 Pre
80tich
NS
lymfocyt
25
20
NS
30
0
NS
Fibrocyte
a25
60
NS
100
100
NS
IFN-γ
epitel ≥ 2
0
30
NS
10
0
NS
Matrix
0
100 Hotel < 0.001
40
20
NS
lymfocytov
0
0
NS
10
30
NS
Fibrocyte
12,5
10
NS
30
90
0,02
Neutrophil
0
0
NS
10
20
NS
IL-10*
Matrix
a25
60
NS
100
80
NS
Lymfocyt
25
20
NS
60
60
NS
Fibrocyte
a37.5
50
NS
100
80ti
NS
Neutrofilov
12,5
0
NS
10
20
NS
CIS: chronické zápalové skóre; AIS: akútne zápalové skóre. *: Kolonizovaná prostriedky myšou infikovaných H. pylori
s úspešnou kolonizáciu (pozitívna močoviny testovacie a histológia) na obete. a: P
hodnota < 0,01; b: P
hodnota ≤ 0,05 medzi mladých a dospelých kolonizované myšou. NS: žiadny význam. * Uvedené na tomto parametri, epitel je pomerne slabá takého cytokínu na imunohistochemického farbenia.
Na 8. th týždeň potom, čo H. pylori
výzvu sadzby vysoké TNF-alfa (100% vs. 20%, P = 0,02
) na matricu a vysokej IL-1 (100% oproti 20%, P = 0,02)
na fibrocytů boli u mladých myší s pretrvávajúcou kolonizácie vyššia ako u kontrolných myší ( tabuľka 3). U dospelých myší s úspešnou kolonizáciu, sadzby vysoké IFN-y (30% oproti 100%, P = 0,003
), IL-10 (20% vs. 100%, P = 0,001
) a IL-6 (50% oproti 100%, P = 0,03
) na fibrocytů boli tiež výrazne nižšie ako u naivných myší kontrolných. Avšak, to bolo častejšie u kolonizovaných dospelých myší ako u kontrolných myší, že majú vyššiu IFN-y (80% oproti 40%), IL-10 (80% oproti 40%), a IL-6 (80% verzus 30%) na matrix.Table 3 cytokínov výrazy na 8. týždni mladých a dospelých myší s perzistentné a stratil H. pylori
kolonizácie a naivné kontrolných myší.


mladých myší
dospelých myší
premenné (% )
Trvalé kolonizácia
(n = 5)
Lost kolonizácia
(n = 4)
Control
(n = 10)

P
† hodnota
Trvalé kolonizácie
(n = 10)
Control
(n = 10)
P
hodnota
IL-6 *
Matrix
100 a
80
50
NS
80
30
NS
lymfocytov
25
60
50
NS
70
70
NS
Fibrocyte
100
80
70
NS
50
100 Pre
0,03
Neutrofilov NETHRY.cz 0
20
50
NS
20
70
NS
TNF-α *
matrix
100
100
20
NS
100 a
60
NS
lymfocyt
100
80
60
NS
90
90
NS
Fibrocyte
100
100
70
NS
100
80
NS
neutrofilných
25
20
60
NS
10
40
NS
IL-1β
epitel ≥ 2
100
80
70
NS
100
80
NS
Matrix
75
40
30
NS
100
80
NS
lymfocyt
50
60
0
NS
50
60
NS
Fibrocyte
100
60
20
NS
100
100
NS
neutrofilných
0
0
20
NS
0
10
NS
IFN-γ
epitel ≥ 2
0
80
20
0,048
30
0
NS
Matrix
75
100
40
NS
80
40
NS
lymfocyt
75
60
40
NS
30
50
NS
Fibrocyte
75
100
50
NS
30
100
0,003
Neutrophil
0
0
40
NS
20
0
NS
IL-10*
Matrix
100
20
70
0.048
80
40
NS
Lymfocyt
100
20
70
0,048
40
50
NS
Fibrocyte
100
60
70
NS
20
100 a
NS
Neutrofilov
50
0
10
NS
0
10
NS
†: významnosť bol porovnanie medzi mladými myší s trvalou a stratil kolonizáciu. * Uvedené na tomto parametri, epitel je pomerne slabá takého cytokínu na imunohistochemického farbenia.
Vyššia sialyl-Lex koexistuje s vyšším IL-10, ale nižšiu INF-y u H. pylori
kolonizácie
Na 2 nd týždeň, kolonizované mladé myši nemali žiadny významný rozdiel v intenzite sialyl-Le x expresie, ako u kontrolných myší (P Hotel &0,05). Avšak, na 8. th týždeň potom, čo H. pylori
výzvou, mladí myši s pretrvávajúcou kolonizáciou mala vyššiu mieru evidentné sialyl-Le x výrazu (skóre ≥ 7) ako u myší, ktoré stratil kolonizácia (100% verzus 56%, P = 0,03
). Okrem toho vykazuje vyššiu mieru sialyl-Le x výraz (skóre ≥ 7), všetky trvalo H. pylori
-colonized mladých myší významne koexistovali s nižším IFN-gama a vyššie IL-10 výrazov ako tie myši, ktoré stratili trvalé osídlenie na 8. th týždeň (tabuľka 4, 100% oproti 0%, p = 0,008
) .Table 4 s nízkou žalúdočnej IFN-γ (skóre ≤ 1), výraz na epitel spolužitie s vysokou sialyl-Lex (skóre ≥ 7) a IL-10 (na oboch matrice a lymfocytov), ​​bola v korelácii s pretrvávajúcou bakteriálnej kolonizácie na začiatku akvizície veku myšou.
cytokínov výraz (%)
Kolonizácia mladých myší
OR (95% CI)
P
hodnota *

Persistent (n = 4)
Lost (n = 5)


Low IFN-gama
100
20
0,2 (0,1-1,2)
0,048
high IL-10
100
0 -
0,008
Low IFN-y a vysoká sialyl -Lex
100
0 -
0,008
Low IFN-γ a vysoko IL-10
100
0 -
0,008
OR : nepárny pomer; CI: interval spoľahlivosti; *: Fisherov presný test
Tabuľka 5 ukazuje bodovania IFN-y na epitelu a IL-10 na matricu a lymfocytov medzi myší s perzistentné a stratil kolonizácie na 8 -tého týždňa po H. pylori
výzvou. Žiadna z mladých myší s pretrvávajúcou bakteriálnej kolonizácie mala IFN-y expresie v epitelu, ale mala zrejmý IL-10 na expresiu matricu a lymfocytov v porovnaní s myšou, bez toho aby colonization.Table 5 skóre IFN-y na epitelu a IL -10 na matricu a lymfocytov na 8. týždňa po H. pylori
výzvu v mladom myší a bez trvalej kolonizáciu.



skóre IL-10
Mice č
Colonization
skóre IFN-gama v epitelu
na matricu
na lymphocyte

1
Yes
0
1
1
2
Yes
0
1
1
3
Yes
0
1
1
4
Yes
0
1
1
5
No
1
0
0
6
No
2
1
0
7
No
2
0
0
8
No
2
0
0
9
No
2
0
1
Diskusia
Obstaranie H. pylori
sa vyskytuje hlavne v detskom veku a spontánna eliminácia infekcie sa zvyčajne vyskytuje u malých detí [3-6, 20]. V tejto štúdii C57BL /6 dospelých myší malo priaznivý H. pylori
kolonizácie rýchlosť izolátov v rozsahu viac ako 80%, čo je v súlade s predchádzajúcimi správami [13, 14]. Táto vysoká miera kolonizácie v dospelých myší je tiež kompatibilný podporuje skutočnosť, že neskoré získavanie H. pylori
u ľudských pacientov dospelých obvykle vedie k chronickej kolonizácii [20]. Okrem toho, v porovnaní s 2 nd týždňa mladých myší po H. pylori
obstaranie, rýchlosť kolonizácie v 8 th týždeň bola 53%, čo podporuje, že spontánna eliminácia H. pylori
skutočne dochádza v priebehu prvej polovice obstarávacia veku myšou. Takže táto štúdia by mala byť veľmi originálny zaviesť myší model určený na overenie, že by mala byť strata H. pylori
osídlenie po predchádzajúcej akvizícii H. pylori
, ktorá úzko napodobňuje klinické nálezy u mladých deti.
našej predchádzajúcej štúdia ukázala, že intenzita žalúdočné Le x je pozitívne súvisí s prírastku veku u ľudí [12]. Avšak, pre tých, ktorí nemajú H. pylori infekcie,
expresiu sialyl-Le x na žalúdočné epitel je slabý alebo chýba dyspeptických detí a dospelých [12]. Kompatibilný s ľuďmi, intenzita žalúdočné sialyl-Le x myší sa tiež pozitívne koreluje s prírastok veku (obrázok 2B). Takéto zistenie u myší je tiež kompatibilný s štúdiu na potkanoch, ktorý je opísaný prírastok vekom glykozylácie v tkanive pečene [21]. Zvyšovanie žalúdočné sialyl-Le x vyjadrenie po tom, čo H. pylori
infekcie bolo hlásené u ľudí a makakov rézus [9-12]. Avšak, v našej štúdii myší, zníženej intenzite žalúdočné sialyl-Le xwas popísané v H. pylori
-infected mladých myší, ale nie u dospelých myší na 2 nd týždni, v porovnaní s kontrolné myši. Výraznejšie na 8. -tého týždňa po H. pylori
akvizíciu, takéto zníženie sialyl-Le x zmizol v oboch kolonizovaných mladých a dospelých myší, ktoré mali plne sialylovány žalúdočnú sliznicu. Toto zistenie naznačuje, že H. pylori
úlohou by mali byť zapojené rušiť krivku s vekom zrenie sialyzace v mladých myší. Okrem toho nepriamo naznačuje, že zmeny sialyl-Lewis antigén u mladých myší, by mali byť vysoko koreluje s pretrvávanie alebo strate H. pylori
kolonizácie.
V tomto zvieracom modeli, čoskoro H. pylori
získavanie spôsobila vyššia CIS ako u kontroly na 2 nd týždňa (87,5% vs. 50%; p = 0,15
), ale nie na 8 teho týždňa (40% oproti 30%, P
= 0,36) po tom, čo H. pylori
výzvu. Za predpokladu, že hustá zápal spôsobuje závažnejšie klinické príznaky, táto zmena histológie by mohla byť korelované s našimi predchádzajúcimi zisteniami, že H. pylori
infekcia môže spôsobiť krátkodobé bolesti v nadbrušku u detí, hoci zvyčajne riešené na sledovanie [22]. Pokiaľ ide o oba klinický stav pacienta a myši dát modelu in vivo, H. pylori
akvizície u detí zvyčajne prezentuje ako samostatná obmedzené pokračovanie v zápale.
Po H. pylori
infekcie, rôzne hostiteľa odozvy žalúdočných cytokíny by mohlo súvisieť s rôznymi klinickými výsledkami [14, 18, 23, 24]. V tejto štúdii sa zistilo, že naivné myši majú pravidelný IL-1 a IFN-γ výrazy (3C &Co. 3D) na žalúdočné epitel, ktorý je v súlade s predchádzajúcou správy u ľudí [15]. Naša štúdia myši vykazovali expresiu cytokínov podľa veku, na žalúdočné epitel (IFN-y) a lamina propria (IL-6, TNF-α, IFN-γ a IL-10). Vzhľadom na vek špecifickej odozvy cytokínov, naša štúdia podporuje, že by mala existovať rôzne naivné imunitné reakcie medzi deti i dospelých.
Na imunohistochemického základe štúdie táto štúdia potvrdila, že zápalové cytokíny výrazy na žalúdočné lamina propria môže zmeniť na oboch 2 nd a 8 th týždeň potom, čo H. pylori
výzvu [25, 26]. A to ako u myší a u človeka, žalúdočné cytokinové odpovede v H. pylori
infekcie bolo preukázané, že je Th1-dominantné, pretože hladina IFN-y je zvýšená u H. pylori
-infected subjektov v porovnaní s kontrolami [15, 18, 23, 27]. Vysoká hladina INF-γ bol pripočítaný ako punc H. pylori
-příbuzné zápal žalúdka, najmä pri chronickom zápale a potenciálne pripočítaný ako ochrannej úlohe proti H. pylori
kolonizácie [16-18, 28]. Ako je uvedené v tabuľke 3, sme sa uvádza, že mladé myši so stratou kolonizácia mala vyššiu IFN-γ výraz na epitelu, ako u myší s pretrvávajúcou kolonizácie (P
= 0,048). Tento nález je v súlade s ľudskou štúdiu s deťmi, ktorý ukázal, že deti H. pylori
infekcie mali nižšiu koncentráciu IFN-y ako u neinfikovaných kontrol [29]. Tieto údaje naznačujú, že u myší môže byť významná korelácia straty kolonizácie, akonáhle je vysoká expresia IFN-y. Preto by mal mať obavy na prieskum rôznych hostiteľských odozvu IFN-y, ktoré môžu byť v súvislosti s mať rôzne H. pylori infekcie
výsledky u detí.
IL-10 je cytokín Th2, a môže byť spustená vyrovnávaciu regulácia po Th1 posunu podľa H. pylori
výzvu k ochrane žalúdočnej sliznici [13, 15, 23, 27]. Z tohto dôvodu, nie je tak nápadné k ilustráciu významného zvýšenia IL-10 expresie v mladých myší s pretrvávajúcou kolonizácie (tabuľka 3). Ako je uvedené v tabuľke 4, mladé myši s nízkym IFN-gama v epitelu mať perzistencie H. pylori
kolonizáciu mal 100% spolužitie s vysokým IL-10 expresie v matrici a lymfocytov na.

• Gastritídu cystica profunda recidívy po chirurgickej resekcii: 2 roky následného up
• Lauren klasifikácie v kombinácii so stavom HER2 je lepšie prognostický faktor v čínskej rakovina žalúdka patients