Vedvarende H. pylori kolonisering i tidlig oppkjøp alder av mus relatert med høyere mage sialylert Lewis x, IL-10, men lavere interferon-γ expressions

Vedvarende H. pylori
kolonisering i tidlig oppkjøp alder av mus relatert med høyere mage sialylert Lewis x , IL-10, men lavere interferon-y uttrykk
Abstract
Bakgrunn
H. pylori
infeksjon er mindre utbredt i barndommen. Denne studien validert om utbredelsen av H. pylori
kolonisering avhenge av ulike oppkjøp aldre, og korrelerer med de ulike mage Lewis antigener eller cytokin uttrykk etter H. pylori
oppkjøpet.
Metoder
Vi benyttet en ung (7 dager gamle) C57BL /6 mus (n = 50) og voksen (6 uker gamle) C57BL /6 mus (n = 50). I hver gruppe ble 30 mus utfordret med H. pylori Hotell og 20 mus fungerte som naive kontroll. Suksessen til H. pylori
kolonisering ble vurdert på to nd uke og åtte th uke, henholdsvis. Intensiteten av Lewis x, sialylert Lewis x (sialyl-Le x), og cytokin uttrykk, inkludert TNF-α, IFN-γ, IL-6, IL-10 og IL-1β, ble immunokjemisk farget og gradert.
Resultater
på to nd uke etter H. pylori
utfordring, kolonisering forekomst av H. pylori
var lik mellom unge mus gruppen og voksne mus gruppen (89 % vs. 100%, P
> 0,05). Men på 8 th uke, H. pylori
kolonisering raten signifikant lavere i ung mus gruppen enn i voksne mus gruppen (53% vs. 95%, P
= 0,003). På 8 th uke, den unge mus med en varighet av H. pylori
kolonisering hadde høyere sialyl-Le x, høyere IL-10, og nedre IFN-γ enn de musene som tapte kolonisering i løpet av 2 nd til 8 th uke (P
< 0,05).
Konklusjon
utholdenhet av H. pylori
kolonisering kan være en oppkjøps-age determinant prosess. Etter H. pylori
eksponering på et tidlig oppkjøp alder, vert respons med en høyere sialyl-Le x og IL-10, men en lavere IFN-γ korrelerer til påfølgende utholdenhet av H. pylori
kolonisering.
Innledning
Helicobacter pylori
infeksjon kan føre til kronisk gastritt og selv magesår sykdom hos både barn og voksne [1, 2]. I epidemiologiske studier var seropositive av H. pylori
har vist seg å være mindre hos barn enn hos voksne [3, 4]. En oppfølgings kohort studie viste at den høyeste forekomsten av serokonversjon oppstår i tidlig barndom og gradvis avtar med alderen [3]. Flere studier har antydet at en tidlig oppkjøp av H. pylori
infeksjon i barndommen kan muligens føre til et påfølgende tap av kolonisering [3-6]. Men til de eksakte regelverket innenfor barn bestemme enten tap eller utholdenhet av H. pylori
kolonisering etter tidlig oppkjøpet fortsatt ikke kjent., En blodtype bindende adhesin (Baba) av H. pylori
selektivt binder til fucosylated Lewis antigen (Le b) av mage celler mediere en tung bakteriell kolonisering [7-9]. Den andre Sialinsyren bindende adhesin (Saba) av H. pylori
binder seg til mage sialylert Lewis x antigen (sialyl-Le x) alternativt bistå vedvarende kolonisering etter kronisk betennelse [10], og spesielt blir viktig når Le b antigen av verten er fraværende eller svak [11]. Vår fersk undersøkelse avslørte at H. pylori
-infected barn hadde en signifikant økning av sialyl-Le x, men ikke Le b uttrykk [12]. Det er derfor interessant å undersøke om utholdenhet av den tidlige oppkjøpet av H. pylori
i barndommen kan være relatert med variabelen verts svarene av mage betennelse eller av epitelial sialysering å tilpasse SABA av H. pylori
.
med voksne C57BL /6 mus eldre enn seks ukers alder, klinisk H. pylori
stammer kan lykkes kolonisere det meste av mus i mer enn seks måneder [13, 14]. Den kroniske H. pylori
infeksjon fører til ulike Th1 typen dominerende mage betennelser med variabel proinflammatoriske og Th1-dominerende typen cytokin respons mellom ulike verter [15-18]. Følgelig til denne studien tar sikte på å først sjekke om utholdenhet av H. pylori
kolonisering kan være en oppkjøps-age determinant prosess. I tillegg har denne studie forsøkte å svare på om den variable sialyl-Le x og det inflammatoriske cytokin uttrykkene etter H. pylori
utfordring kunne bestemme den vedvarende koloniseringen av H. pylori
infeksjon, særlig hos mus som mottar utfordringen for tidlig oppkjøp.
Materiale og metode
mus grupper og H. pylori
isolater for smitte
Denne studien brukte 100 C57BL /6 mus (50 syv dager gamle unge mus og 50 seks -week gammel voksen hann mus), inkludert 60 i den eksperimentelle gruppen utfordret med en type 1, Saba-positive H. pylori
klinisk isolat (HP 625) og 40 i naive kontroller. Multiplikasjonene av H. pylori
isolater ble påført med den samme metode som vår tidligere mus modell studie for å oppnå en tetthet på 0,8 x 10 8 CFU /ml. [19]. For den eksperimentelle gruppen, ble en bakteriesuspensjon 0,1 ml for unge mus og 0,5 ml for voksne mus oralt inokulert i tre påfølgende dager, henholdsvis. Ti hver av de unge og voksne mus i kontrollgruppen ble avlivet ved 2 nd og 8 th uke. I eksperimentelle mus, ti hver av de unge og voksne mus på to nd uke og 20 hver av de unge og voksne mus på 8 th uke etter vaksinasjonen ble avlivet ved intra-peritoneal injeksjon av pentobarbital ( 150-200 mg /kg). De isolerte magene var radert langs større og mindre kurvaturer i to halvdeler. Den ene halvdelen ble formalin-embedded for histologi og Lewis antigen undersøkelser. Den andre halvparten ble umiddelbart plassert i buffer, frosset på tørris og lagret ved -80 ° C i cytokin undersøkelse. H. pylori
infeksjon ble påvist av en rask urea test og histologisk undersøkelse.
Gastric histologi av mus
To etterforskere inkludert en patolog, uvitende om demografiske data og kolonisering resultater, analysert mage histologi. Anvendelse av metoden for vår forrige mus modell [19], histologiske parametere, inkludert H. pylori
tetthet (range 0-4), akutt inflammatorisk score (AIS, range 0-3), kronisk betennelse score (CIS, rekkevidde 0-3), atrofisk endring (aT, range 0-1), og intestinal metaplasi (IM, range 0-3) ble evaluert topografisk over antrum, corpus og Cardia, henholdsvis. Karaktersystemet av H. pylori
tetthet som ble brukt var som følger: 0, ingen bakterier oppdaget; 1, en mild grad av kolonisering og bakterier ikke påvist i hver mage krypten; 2, en mild grad av kolonisering med bakterier påvist i de fleste av krypter tilstede; 3, moderat til tung kolonisering i alle krypter; og 4, alvorlig kolonisering med alle krypter tettpakket med bakterier. Resultatene presentert er middelverdi av koloniseringen for hver gruppe. Den totale H. pylori
tetthet (THPD) ble definert som summen av densitetene oppnås fra antrum, corpus og cardia, og således varierte fra 0 til 12. Summen akutte (TAIS) og kronisk (TCIs) inflammatoriske score var også en sum av resultatet fra tre steder (range 0-9).
bakteriell infeksjon av H. pylori
ble definert som forekomst av bakterier i mage seksjoner, mens musene ble ansett for å ha unnlatt å inokuleres når ingen bakterier ble sett i histologi og negativ for den CLO testen.
immunhistokjemisk farging og scoring for gastrisk Lewis ekspresjon
farging av gastriske prøver for Lewis-antigener ble utført ved anvendelse av avidin-biotin-peroksidase teknikk med en vektor Ms.OM Immundeteksjon Kit. Den primære monoklonalt antistoff (anti-Le x, Signet Laboratories, Inc., Dedham, MA) ble valgt for å detektere gastrisk Le x antigener [11, 12]. Foruten Le x antigen flekker, det monoklonale antistoff mot sialyl-Le x (mus IgM MAB2096, Chemicon International, Inc., Temecula, CA) ble anvendt for [12]. Ikke-spesifikke bindingssteder ble mettet med 2-2,5% bovint serumalbumin. For hver mage området, ble intensiteten av Le x (range 0-5) og sialyl-Le x (range 0-4) scoret i henhold til topografien i farging (figur 1). Total mage Lewis antigen intensitet for Le x og sialyl-Le x var summen av antrum, corpus og Cardia (range 0-15 i Le x og 0-12 i sialyl-Le x). Figur 1 immunhistokjemiske (IHC) farging og gradering av Lewis x (Le x), og sialyl-Lewis x (sialyl- Le x) antigener er vist for mage biopsi av mus (200 ×). IHC farging viste negativt for to Lewis antigener og ble omtalt som poengsum 0. For Lex, score 1 (A): snaut farging (mindre enn 5% i parietalceller de dype kjertler, scorer 2 (B): dype kjertler 5 -50% farging og svak, scorer 3 (C): dype kjertler > 50% flekker og sterk, scorer fire (D): hele laget av dype kjertler med overflateepitel flekker, ingen slim uttrykk, scorer 5 (E): hele . lag med slim uttrykk for sialyl- Lex, score 1 (F): bare overflaten slim positiv, scorer 2 (G): Snørr og øvre epitel, scorer 3 (H): øvre epitel og dype kjertler (sjef celler < 50% .), scorer 4 (i): øvre epitel og dype kjertler (sjef celler ≥ 50%)
Immunhistokjemisk farging og scoring for cytokiner uttrykk Bedrifter Den frosne snitt (4 mm) ble tørket ved romtemperatur i 2 timer, og fiksert med 3,7% formaldehyd i 1 min. etter vasking to ganger med PBS, prøvene ble fiksert med kald aceton og deretter vasket med PBS. Mus Ig Blokkering Reagent (Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) ble anvendt for å blokkere ikke-spesifikke bindingsseter. De rotte-anti-mus-monoklonale antistoffer (TNF-a, IL-6, IL-10, IL-1B, og IFN-y) og kanin-anti-mus polyklonalt antistoff (IL-1β) ble anvendt som det primære antistoff. HRP-polymer-konjugat bredt spektrum (Zymed Laboratories Inc. South San Francisco, CA, USA) ble anvendt som 2 nd antistoff. AEC kit ble brukt til å illustrere flekken. Intensiteten av hvert cytokin ble bedømt i henhold til fordelingen av positive flekker celler på epitelet (område 0-3), og på lamina propria komponenter, inkludert matrise, polymorfonukleære celler, lymfocytter, og fibrocytt (tabell 1) .table 1 scoring av cytokin uttrykk på mage epitel og lamina propria.

Resultat

0
en
2
3
Epitel
Negativ
Mindre enn 33%
33% -67%
mer enn 67%
lamina propria
Matrix
Fravær
Presence
lymfocyttkontroll
Fravær
Presence
Fibrocyte
Absence
Presence
Neutrofil
Fravær Nærvær

kvantitative scoring av hvert cytokin på epitelet var som følger: score 1: positiv farging i cytoplasma av epitelceller bare på den øvre 1/3 del av epitelet; scorer 2: på øvre og midtre del av epitel (1 /3-2 /3); Resultat: 3: på hele laget av epitel (> 2/3). Den positive farging av hvert cytokin på lamina propria (lymfocytter, fibrocytt, og nøytrofile) betyr at det var mer enn fem positive celler i en høy effekt synsfelt i mikroskopisk undersøkelse.
Statistisk analyse
Pearsons χ 2-test ble anvendt for å teste den forskjell av koloniseringshastigheter mellom den eksperimentelle og kontrollmus. De histologiske parametere, Lewis-antigener, og cytokin uttrykk ble sammenlignet med Fishers eksakte test for forskjellige undergrupper. Den Friedman-testen ble anvendt for å teste den forskjell av H. pylori
densitet mellom antrum, corpus og cardia av magen i hver mus. Alle testene ble vurdert tosidige og en p
verdi < 0,05 ble tatt som signifikant.
Resultater
Satsene for vellykket H. pylori
kolonisering i mus med ulike oppkjøps aldre
På to nd uke etter H. pylori
utfordring, H. pylori
kolonisering var vellykket i 89% (8/9) av de unge mus gruppen og 100% (10/10) av voksne mus gruppen. I kontrast på 8 th uke etter H. pylori
utfordring, koloniseringen var betraktelig lavere i de unge mus enn at de voksne mus (53% vs. 95%, P
= 0,003 ). For de musene med vellykket kolonisering enten på to nd eller 8 th uke, tettheten av H. pylori
ble jevnt fordelt på antrum, corpus, og Cardia i både unge og voksne mus ( P
> 0,05)
Aldersspesifikke spesifikke~~POS=HEADCOMP mage Lewis antigen og cytokiner uttrykk i de naive mus
i naive mus av både unge og voksne grupper, uttrykk for Le x og sialyl-. Le x var svake på gastrisk antrum. Men en gradvis økning av den totale intensiteten av Le x og sialyl-Le x uttrykk ble avslørt i alders trinn (Figur 2A og & 2B). En slik økning nådd et platå fra den kronologiske alder av nær 5 uker gamle. På to nd uke og åtte th uke etter H. pylori
utfordring, Le x uttrykk var ikke forskjellig mellom de koloniserte og kontroll mus i både unge og voksne grupper. Figur 2 Intensiteten av mage Lewis-antigener i naive mus ved forskjellige aldersgrupper av liv (A) Lewis x, (B) sialyl-Lewis x.
Intensiteten av mage cytokin ekspresjon varierte mellom de ulike aldre for mus og plassering. For de proinflammatoriske cytokiner, var det ingen positive stainings av TNF-α og IL-6 på overflateepitel i en hvilken som helst av de naive mus. De positive stainings av TNF-α og IL-6 på lymfocytter, fibrocytt, og nøytrofile over lamina propria var signifikant høyere i mus i alderen ≥ 5 uker enn de mellom < 5 uker (P
< 0,01; figur 3A & 3B). Den positive farging av IL-1β ble hovedsakelig funnet på epitelet og uttrykt tidlig i mus alderen < 5 uker. Satsen for positiv farging av IL-1β på nøytrofile var høyere hos mus i alderen ≥ 5 uker enn de i alderen < 5 uker (P
< 0,05; Figur 3C). Figur 3 Gastric cytokin uttrykk på epitel og lamina propria mellom naive mus i alderen ≥ 5 uker og < 5 uker. (A) Tumor nekrose faktor alfa (TNF-α), (b) interleukin 6 (IL-6), (C), interleukin 1 beta (IL-1β), (D) interferon gamma (IFN-γ), og (E ) interleukin 10 (IL-10).
i den tidlige levetid av musene, den positive IFN-γ fargingen var i de fleste som finnes på epitelet og matrise, som intensiteten av positive IFN-γ farging ble redusert etter alder ≥ 5 uker (P
< 0,01, Figur 3D). Men en betydelig høyere rate av positive IFN-γ flekker på lymfocytter og fibrocytt ble beskrevet i musene alderen ≥ 5 uker enn de i alderen < 5 uker (P
< 0,01).
I motsetning til den tunge IFN-γ flekker på epitelet i tidlig i livet til mus, IL-10, som vanligvis var negativ på epitelet. Den positive farging av IL-10 var høyere på lymfocytter og fibrocytt i mus i alderen ≥ 5 uker enn i de i alderen < 5 uker (P
< 0,05; Figur 3E).
Mus histologi og Lewis antigen uttrykk etter H. pylori
infeksjon
På to nd uke etter H. pylori
utfordring, H. pylori
-colonized ung mus syntes å ha en marginalt høyere rate av høy TCIs (skår ≥ 4) enn kontrollmusene (88% vs. 50%, P
= 0,15), men slik en marginal betydning ble ikke offentliggjort i den voksne mus (30% vs. 30%, P
= 1,00). Videre, i den unge mus gruppen musene med vedvarende kolonisering på 8 th uke hadde en tydeligvis høyere forekomst av høye TCIs enn musene som tapte kolonisering (40% vs. 11%, P = 0,30
) . På den 2 nd uke etter H. pylori
utfordring var andelen av koloniserte unge mus med en høy intensitet av sialyl-Le x uttrykket (score ≥ 7) hadde falt i forhold til det i kontrollmusene (25% vs. 60%, P
= 0,19). Men et slikt fall var ikke tydelig på 8 th uke (100% vs. 90%, P
> 0,05) og med voksne mus på to nd uke (90% vs. 100 %, P
> 0,05) og åtte th uke (58% vs. 60%, P
>. 0,05) etter H. pylori
utfordringer
Gastric cytokiner uttrykk etter H. pylori-infeksjon

i 2 nd uke etter H. pylori
utfordring, unge mus med vellykket kolonisering hadde en signifikant høyere intensitet av IL-6 på fibrocytt (75% versus 0 %, P
= 0,002) og matrise (75% vs. 20%, renhet
= 0,05), men lavere IFN-γ (0% mot 100%, P
< 0,001) i matrise enn de naive kontroller (tabell 2). Også i voksne mus, ble musene med vellykkede kolonisering avslørt å ha en lavere rate av IFN-γ uttrykk på fibrocytt enn kontrollmusene (30% vs. 90%, P
= 0,02) .table 2 gastric cytokin uttrykk på den andre uken av unge og voksne mus med vedvarende H. pylori
kolonisering og naive kontrollmusene.


Unge mus
voksne mus
Parameter (%)
kolonisert product: (n = 8)

Kontroll product: (n = 10)
P
verdi
kolonisert product: (n = 10)
Kontroll product: ( n = 10)
P Verdi
IL-6 *
Matrix
75
20
0,05
70
30
NS
Lymfocytt
50
10
NS
60
70
NS
Fibrocyte
75
0
0,002
80
50
NS
nøytrofile
37,5
20
NS
20
70
0,07
TNF-α *
Matrix
87,5
70
NS
80
90
NS
Lymfocytt
62,5
40
NS
90
90
NS
Fibrocyte
87,5
40
0,07
100
90
NS
nøytrofile
12,5
10
NS
30
40
NS
IL-1β
Epitel ≥ 2
100
70
NS
100
90
NS
Matrix
a25
0
NS
100
80
NS
Lymfocytt
25
20
NS
30
0
NS
Fibrocyte
a25
60
NS
100
100
NS
IFN-γ
Epitel ≥ 2
0
30
NS
10
0
NS
Matrix
0
100
< 0.001
40
20
NS
lymfocyttkontroll
0
0
NS
10
30
NS
Fibrocyte
12,5
10
NS
30
90
0,02
Neutrophil
0
0
NS
10
20
NS
IL-10*
Matrix
a25
60
NS
100
80
NS
Lymfocytt
25
20
NS
60
60
NS
Fibrocyte
a37.5
50
NS
100
80
NS
nøytrofile
12,5
0
NS
10
20
NS
CIS: kronisk inflammatorisk poengsum; AIS: akutt betennelses poengsum. *: Koloniserte midler mus infisert med H. pylori
med vellykket kolonisering (positiv urea test og histologi) på offer. a: P
verdi < 0,01; b: P
verdi ≤ 0,05 mellom de unge og voksne kolonis mus. NS: ingen betydning. * Angitt på denne parameteren er Epitel temmelig svak for slike cytokin på immunhistokjemi flekker.
På 8 th uke etter H. pylori
utfordring, satsene for høy TNF-α (100% vs. 20%, P = 0,02
) på matrisen og høy IL-1β (100% vs. 20%, P = 0,02
) på fibrocytt var høyere i den unge mus med vedvarende kolonisering enn i kontrollmusene ( tabell 3). For de voksne mus med vellykket kolonisering, satsene for høy IFN-γ (30% vs. 100%, P
= 0,003), IL-10 (20% vs. 100%, P
= 0,001) og IL-6 (50% mot 100%, P
= 0,03) på fibrocytt var også signifikant lavere enn de for kontroll naive mus. Ikke desto mindre var det mer vanlig i de koloniserte voksne mus enn kontrollmusene for å ha en høyere IFN-γ (80% vs. 40%), IL-10 (80% vs. 40%), og IL-6 (80% vs. 30%) på matrix.Table 3 cytokin uttrykk på den åttende uken av unge og voksne mus med vedvarende og mistet H. pylori
kolonisering og naive kontrollmusene.


Unge mus
voksne mus
variabler (% )
Vedvarende kolonisering product: (n = 5)
Mistet kolonisering product: (n = 4)
Kontroll product: (n = 10)

P
† verdi
Vedvarende kolonisering product: (n = 10)
Kontroll product: (n = 10)
P
verdi
IL-6 *
Matrix
100
80
50
NS
80
30
NS
lymfocytter
25
60
50
NS
70
70
NS
Fibrocyte
100
80
70
NS
50
100
0,03
nøytrofile
0
20
50
NS
20
70
NS
TNF-α *
Matrix
100
100
20
NS
100
60
NS
lymfocyttkontroll
100
80
60
NS
90
90
NS
Fibrocyte
100
100
70
NS
100
80
NS
nøytrofile
25
20
60
NS
10
40
NS
IL-1β
Epitel ≥ 2
100
80
70
NS
100
80
NS
Matrix
75
40
30
NS
100
80
NS
lymfocytt
50
60
0
NS
50
60
NS
Fibrocyte
100
60
20
NS
100
100
NS
nøytrofile
0
0
20
NS
0
10
NS
IFN-γ
Epitel ≥ 2
0
80
20
0,048
30
0
NS
Matrix
75
100
40
NS
80
40
NS
lymfocyttkontroll
75
60
40
NS
30
50
NS
Fibrocyte
75
100
50
NS
30
100
0,003
Neutrophil
0
0
40
NS
20
0
NS
IL-10*
Matrix
100
20
70
0.048
80
40
NS
Lymfocytt
100
20
70
0,048
40
50
NS
Fibrocyte
100
60
70
NS
20
100
NS
nøytrofile
50
0
10
NS
0
10
NS
†: betydningen ble sammenlignet mellom unge mus med vedvarende og tapte kolonisering. * Angitt på denne parameteren, er ganske svak for slike cytokin på immunhistokjemi flekker epitel.
Høyere sialyl-Lex eksisterer på høyere IL-10, men lavere INF-γ for H. pylori
kolonisering
På 2 nd uke, de koloniserte unge musene hadde ingen signifikant forskjell i intensiteten av sialyl-Le x uttrykk enn kontrollmusene (P
> 0,05). Men på 8 th uke etter H. pylori
utfordring, den unge mus med vedvarende kolonisering hadde en høyere forekomst av tydelig sialyl-Le x uttrykk (score ≥ 7) enn de av musene som tapte kolonisering (100% vs. 56%, P
= 0,03). I tillegg til å vise en høyere rate av sialyl-Le x uttrykk (score ≥ 7), all den vedvarende H. pylori
-colonized unge mus betydelig coexisted med lavere IFN-γ og høyere IL-10 uttrykk enn de musene som hadde mistet vedvarende kolonisering på 8 th uke (tabell 4, 100% vs. 0%, P
= 0,008) .table 4 En lav mage IFN-γ (skår ≤ 1) uttrykk på epitel coexisting med høy sialyl-Lex (score ≥ 7) og IL-10 (på både matrise og lymfocytter) ble korrelert til vedvarende bakteriell kolonisering i tidlig oppkjøpet alder av mus.
cytokin uttrykk (%)
Kolonisering av unge mus
OR (95% CI)
P
verdi *

Vedvarende (n = 4)
Tapt (n = 5)


lav IFN-γ
100
20
0,2 (0,1 til 1,2)
0,048
høy IL-10
100
0 -
0,008
lav IFN-γ og høy sialyl -Lex
100
0 -
0,008
lav IFN-γ og høy IL-10
100
0 -
0,008
OR : odd ratio; KI: konfidensintervall; *: Fishers eksakte test
Tabell 5 viser scoring av IFN-γ på epitelet og IL-10 på matrisen og lymfocytter mellom mus med vedvarende og tapt kolonisering ved 8 th uke etter H. pylori
utfordring. Ingen av de unge mus med vedvarende bakteriell kolonisering hadde IFN-γ ekspresjon på epitelet, men hadde åpenbart IL-10 ekspresjon på matrisen og lymfocytter sammenlignet med mus uten colonization.Table 5 Stillingen av IFN-γ på epitelet og IL -10 på matrisen og lymfocytter på åttende uke etter H. pylori
utfordring i den unge mus med og uten vedvarende kolonisering.



Resultat av IL-10
Mus No.
Colonization
Resultat av IFN-γ på epitel <.no> på matrise
på lymphocyte

1
Yes
0
1
1
2
Yes
0
1
1
3
Yes
0
1
1
4
Yes
0
1
1
5
No
1
0
0
6
No
2
1
0
7
No
2
0
0
8
No
2
0
0
9
No
2
0
1
Diskusjon
Oppkjøp av H. pylori
hovedsakelig oppstår i barndommen og spontan eliminering av infeksjon oppstår vanligvis hos små barn [3-6, 20]. I denne studien, C57BL /6 voksne mus hadde en gunstig H. pylori
kolonisering hastighet av isolater som strekker seg til mer enn 80%, som er forenlig med tidligere rapporter [13, 14]. Denne høye kolonisering rate i voksen mus er også kompatibel til å støtte det faktum at sen oppkjøp av H. pylori
hos voksne menneskelige pasienter vanligvis resulterer i kronisk kolonisering [20]. Dessuten, som sammenlignet med to nd uke av unge mus etter H. pylori
anskaffelse, koloniser satsen i 8 th uke var 53%, noe som underbygger at spontan eliminering av H. pylori
virkelig skjer i løpet av tidlig oppkjøpet alder av mus. Så denne studien bør være svært originalt å innføre en musemodell utviklet for å validere at det bør være et tap av H. pylori
kolonisering etter en tidligere oppkjøp av H. pylori
, som etterligner de kliniske funn hos unge barn.
Vår tidligere studie har vist at intensiteten av mage Le x er positivt relatert til økningen av alder hos mennesker [12]. Men for de uten H. pylori
infeksjon, uttrykk for sialyl-Le x på gastrisk epitel er svakt eller mangler i dyspepsi barn og voksne [12]. Kompatibelt med mennesker, intensiteten av mave sialyl-Le x av mus er også positivt korrelert til økning av alder (figur 2B). Et slikt funn i mus er også kompatibel med en studie på rotter som avslørt en aldersrelatert økning av glykosylering i leveren vev [21]. Økende mage sialyl-Le x uttrykk etter H. pylori
infeksjonen har blitt rapportert hos mennesker og rhesusaper [9-12]. Men i vårt studium mus, en redusert intensitet av mave sialyl-Le xwas beskrevet i H. pylori
-infected unge mus, men ikke i voksen mus på to nd uke, sammenlignet kontrollmusene. Mer påfallende, på 8 th uke etter H. pylori
oppkjøpet, slik en nedgang på sialyl-Le x forsvant i begge de koloniserte unge og voksne mus, som hadde et fullt sialylert mageslimhinnen. Dette funnet antyder at H. pylori
utfordring bør være involvert for å forstyrre aldersrelatert modning kurve av sialysering i de unge mus. Videre er det indirekte antyder at endringer av sialyl-Lewis antigen i ung mus bør sterkt korrelert til utholdenhet eller tap av H. pylori
kolonisering.
I denne dyremodell, tidlig H. pylori
oppkjøp forårsaket en høyere CIS enn i kontroller på 2 nd uke (87,5% vs. 50%, P
= 0,15), men ikke på 8 th uke (40% vs. 30%, P
= 0,36) etter H. pylori
utfordring. Forutsatt at tett betennelse fører til mer alvorlige kliniske symptomer, kan dette histologi endringen være korrelert til våre tidligere funn om at H. pylori
infeksjon kan føre til kortsiktig epigastriet smerter hos barn, men vanligvis løses ved oppfølging [22]. Når det gjelder både klinisk observasjon og in vivo-mus modell data, H. pylori
oppkjøp hos barn vanligvis presenterer som en selvbegrensende oppfølger i betennelse.
Etter H. pylori
infeksjon, de ulike verts svarene av mage cytokiner kan muligens være relatert til forskjellige kliniske resultater [14, 18, 23, 24]. I denne studien ble naive mus funnet å ha regelmessig IL-1β og IFN-γ uttrykk (figur 3C &Co. 3D) på den gastriske epitel, som er i overensstemmelse med en tidligere rapport i mennesker [15]. Mus undersøkelse oppviste en aldersspesifikke cytokin ekspresjon på den gastriske epitel (IFN-γ) og lamina propria (IL-6, TNF-α, IFN-γ, og IL-10). På grunn av aldersspesifikke respons av cytokiner, støtter vår studie at det skal være forskjellige naive immunresponser mellom barn og voksne.
Basert på immunhistokjemisk undersøkelse, bekreftet denne studien at de pro-inflammatoriske cytokin uttrykk på mage lamina propria kunne endre på både 2 nd og åtte th uke etter H. pylori
utfordring [25, 26]. Både i mus og i mennesker, har gastriske cytokin svarene av H. pylori-infeksjon
vist seg å være Th1-dominant, fordi nivået av IFN-γ økes i H. pylori
-infected fag sammenlignet med kontroller [15, 18, 23, 27]. En høy INF-γ nivå har blitt tilskrevet som kjennetegner H. pylori
-relaterte gastritt, spesielt ved kronisk betennelse og potensielt tilskrives som en beskyttende rolle mot H. pylori
kolonisering [16-18, 28]. Som vist i tabell 3, er beskrevet vi at unge mus med et tap av kolonisering hadde en høyere IFN-γ ekspresjon på epitelet enn musene med vedvarende kolonisering (P
= 0,048). Dette funnet er kompatibelt med et menneskelig studie hos barn som viste at barn med H. pylori
infeksjon hadde en lavere konsentrasjon av IFN-γ enn hos ikke-infiserte kontroller [29]. Disse data i mus tyder på at det kan være en signifikant korrelasjon til kolonisering tap når det er en høy ekspresjon av IFN-γ. Derfor bør det være opptatt av å kartlegge de ulike vertsrespons av IFN-γ som kan være relatert til å ha forskjellige H. pylori
infeksjon utfall hos barn.
IL-10 er en Th2 cytokin, og kan utløses av kompenserende regulering etter et Th1 forskyvning av H. pylori
utfordring for å beskytte den gastriske mucosa [13, 15, 23, 27]. Derfor er det ikke så slående å illustrere en betydelig økning av IL-10-ekspresjon i den unge mus med vedvarende kolonisering (tabell 3). Som vist i tabell 4, til den unge mus med lav IFN-γ på epitelet har en varighet av H. pylori
kolonisering hadde en 100% sameksistens med en høy IL-10 ekspresjon på matrisen og lymfocytter.

• Gastritt cystica profunda tilbakefall etter kirurgisk reseksjon: 2-års oppfølging
• Lauren klassifisering kombinert med HER2-status er en bedre prognostisk faktor i kinesisk magekreftpasienter