Persistente colonizzazione da H. pylori in età precoce acquisizione di topi connessi con una maggiore gastrica sialylated Lewis x, IL-10, ma più basso di interferone-γ expressions

persistente H. pylori
colonizzazione in età precoce acquisizione di topi connessi con una maggiore gastrica sialylated Lewis x , IL-10, ma inferiore a interferone-gamma espressioni
Abstract
sfondo
H. pylori
infezione è meno diffuso durante l'infanzia. Questo studio ha convalidato se i tassi di H. pylori
colonizzazione dipendono diverse età di acquisizione, e in correlazione con i diversi antigeni Lewis gastrici o espressioni di citochine dopo H. pylori
acquisizione.
Metodi
abbiamo applicato un giovane (7 giorni di età) C57BL /6 topi del gruppo (n = 50) e per adulti (6 settimane di età) C57BL /6 topi del gruppo (n = 50). In ogni gruppo, 30 topi sono stati sfidati da H. pylori
e 20 topi serviti controllo come ingenuo. Il successo di H. pylori
colonizzazione è stata valutata in 2 nd settimana e l'8 ° settimana, rispettivamente. L'intensità del Lewis x, sialylated Lewis x (sialyl-Le x), e citochine espressioni, tra TNF-α, IFN-γ, IL-6, IL-10 e IL-1β, erano immunochimicamente macchiati e classificato
. Risultati recensioni sul nd settimana 2 secondo H. pylori
sfida, i tassi di colonizzazione di H. pylori
erano simili tra il gruppo di giovani topi e il gruppo di topi adulti (89 % contro 100%, P
> 0,05). Tuttavia, l'8 ° settimana, la pylori
tasso di colonizzazione H. era significativamente più bassa nel gruppo di giovani topi rispetto al gruppo di topi adulti (53% vs. 95%, p = 0,003
). L'8 th settimana, il giovane topi con una persistenza di H. pylori
colonizzazione avuto maggiore sialyl-Le x, superiore IL-10 e IFN-γ inferiori rispetto a quelli dei topi che ha perso colonizzazione durante il nd al 8 th settimana (P
< 0,05) 2.
Conclusione
la persistenza di H. pylori
colonizzazione potrebbe essere un fattore determinante acquisizione-età Processo. Dopo H. pylori
esposizione in età precoce acquisizione, la risposta ospite con un sialyl-Le x superiore e IL-10, ma una minore IFN-γ è correlato alla conseguente persistenza di H. pylori
colonizzazione.
Introduzione
Helicobacter pylori
infezione può causare gastrite cronica e ulcera peptica, anche nei bambini e negli adulti [1, 2]. Negli studi epidemiologici, la sieropositività di H. pylori
ha dimostrato di essere meno nei bambini che negli adulti [3, 4]. Uno studio di coorte follow-up ha mostrato che la più alta incidenza di sieroconversione si verifica nella prima infanzia e gradualmente diminuisce con l'età [3]. Diversi studi hanno suggerito che l'acquisizione precoce di H. pylori
infezioni durante l'infanzia può eventualmente portare ad una conseguente perdita di colonizzazione [3-6]. Tuttavia, le regole esatte all'interno bambini per determinare sia la perdita o la persistenza di H. pylori
colonizzazione dopo l'acquisizione precoce rimane non ben noto.
Un adhesin vincolante gruppo sanguigno (Baba) di H. pylori
si lega selettivamente all'antigene fucosylated Lewis (le b) di cellule gastriche mediare una colonizzazione batterica pesante [7-9]. L'altro sialico adhesin acido-binding (SABA) di H. pylori
lega al gastrica sialylated Lewis x antigene (sialyl-Le x) assistere in alternativa, la colonizzazione persistente dopo l'infiammazione cronica [10], e diventa particolarmente importante quando il le B antigene del paese ospitante è assente o debole [11]. Il nostro studio recente ha rivelato che H. pylori
bambini -infected hanno avuto un significativo aumento di sialyl-Le x, ma non Le b espressione [12]. E 'quindi interessante verificare se la persistenza dei primi acquisizione di H. pylori
durante l'infanzia potrebbe essere correlata con le risposte di accoglienza variabili di infiammazione gastrica o di sialylation epiteliale per adattare la SABA di H. pylori
.
Con adulti C57BL /6 topi di età superiore a sei settimane di età, la clinica H. pylori
ceppi possono colonizzare con successo la maggior parte dei topi per più di sei mesi [13, 14]. La cronica H. pylori
infezione porta a diversi tipo Th1 predominanti infiammazioni gastriche con risposte di tipo citochine pro-infiammatorie e Th1-dominanti variabili tra i diversi host [15-18]. Pertanto, questo studio volto a dapprima verificare se la persistenza di H. pylori
colonizzazione potrebbe essere un processo determinante acquisizione età. Inoltre, questo studio ha tentato di rispondere se la variabile sialyl-Le x e le espressioni citochine infiammatorie dopo H. pylori
sfida potrebbero determinare la colonizzazione persistente H. pylori
infezione, specialmente nei topi ricevere il sfida di acquisizione precoce.
Materiali e metodi
gruppi di topi e H. pylori
isolati per l'esperimento sfida
Questo studio ha utilizzato 100 C57BL 6 topi /(50 sette giorni di età giovani topi e 50 a sei settimane di-old adulti topi maschi), di cui 60 nel gruppo sperimentale sfidato con un tipo 1, Saba-positivo H. pylori
isolato clinico (HP 625) e 40 nei controlli naïve. Le moltiplicazioni di H. pylori
isolati sono stati applicati con lo stesso metodo precedente studio modello topi per ottenere una densità di 0,8 × 10 8 UFC /ml. [19]. Per il gruppo sperimentale, una sospensione di batteri 0,1 ml per topi giovani e 0,5 ml per i topi adulti è stato inoculato per via orale per tre giorni consecutivi, rispettivamente. Dieci ciascuno dei giovani e adulti topi del gruppo di controllo sono stati sacrificati al 2 nd e l'8 th settimana. Nei topi sperimentali, dieci ciascuno dei giovani e adulti topi al nd settimana 2 e 20 ciascuna delle giovani e adulti topi a 8 th settimana dopo l'inoculazione sono stati sacrificati per iniezione intraperitoneale di pentobarbital ( 150-200 mg /kg). Gli stomaci isolati sono stati incisi lungo le curvature maggiori e minori in due metà. Una metà è stato incorporato in formalina per l'istologia e gli esami antigene Lewis. L'altra metà è stata immediatamente posta in un tampone, congelato in ghiaccio secco, e conservato a -80 ° C per l'esame di citochine. H. pylori
infezione è stata provata da un test di urea rapido ed esame istologico.
Istologia gastrica dei topi
due investigatori di cui uno patologo, a conoscenza dei dati demografici e dei risultati di colonizzazione, analizzato l'istologia gastrica. Applicando il metodo della nostra precedente modello di topo [19], i parametri istologici, tra cui H. pylori
densità (range 0-4), il punteggio infiammatorio acuto (AIS, range 0-3), il punteggio infiammazione cronica (CIS, gamma 0-3), il cambiamento atrofica (AT, range 0-1), e metaplasia intestinale (IM, range 0-3) sono stati valutati topograficamente sopra l'antro, corpus e Cardia, rispettivamente. Il sistema di classificazione di H. pylori
densità utilizzata è stata la seguente: 0, nessun batteri rilevati; 1, un livello lieve di colonizzazione e batteri non rilevati in ogni cripta gastrica; 2, un livello lieve di colonizzazione con batteri rilevati nella maggior parte delle cripte presenti; 3, da moderata a forte colonizzazione in tutte le cripte; e 4, la colonizzazione severo con tutte le cripte densamente ricco di batteri. I risultati presentati sono il valore medio di colonizzazione per ciascun gruppo. Il H. pylori
densità totale (THPD) è stato definito come la somma delle densità ottenuti da l'antro, corpus e Cardia, e quindi andava da 0 a 12. Il totale acuta (TAIS) e cronica (TCIS) punteggi infiammatorie erano anche una somma del punteggio da tre posizioni (range 0-9).
infezione batterica di H. pylori
è stata definita come la presenza di eventuali batteri nelle sezioni gastrica, mentre i topi sono stati considerati non sono riusciti a essere inoculato quando nessun batteri sono stati osservati in istologia e negativo per il test CLO.
colorazione immunoistochimica e scoring per gastrica Lewis espressione
immunocolorazione di campioni gastrici per antigeni Lewis è stata eseguita utilizzando la tecnica avidina-biotina-perossidasi con un VECTOR Ms.OM Kit immunolocalizzazione. Il primario anticorpo monoclonale (anti-Le x, Signet Laboratories, Inc., Dedham, MA) è stato selezionato per rilevare la gastrica Le x antigeni [11, 12]. Oltre Le x antigene colorazione, l'anticorpo monoclonale contro sialyl-Le x (topo IgM MAB2096, CHEMICON® International, Inc., Temecula, CA) è stato utilizzato [12]. Non specifici siti di legame sono state saturate con 2-2,5% di albumina sierica bovina. Per ogni sito gastrica, l'intensità di Le x (0-5) e sialyl-Le x (range 0-4) è stato ottenuto secondo la topografia della colorazione (Figura 1). gastrica intensità antigene Lewis totale per Le x e sialyl-Le x è la somma del antro, corpus e Cardia (range 0-15 a Le x e 0-12 in sialyl-Le x). Figura 1 L'immunoistochimica (IHC) colorazione e la classificazione di Lewis x (x Le), e sialyl-Lewis x (sialyl- Le x) antigeni sono indicati per le biopsie gastriche di topi (200 ×). La colorazione IHC ha mostrato negativo per due antigeni Lewis ed è stato indicato come il punteggio 0. Per Lex, punteggio 1 (A): colorazione scarsa (< 5% in cellule parietali delle ghiandole profonde, segnare 2 (B): ghiandole profonde 5 -50% di colorazione e debole, segnare 3 (C): profondi ghiandole > 50% di colorazione e forte, segnare 4 (D): intero strato di profonde ghiandole con superficiali colorazione epitelio, nessuna espressione di muco; segnare 5 (e): intero . strato con l'espressione di muco Per sialyl- Lex, punteggio 1 (F): superficie solo muco positiva, segnare 2 (G): muco e dell'epitelio superiore; punteggio 3 (H): dell'epitelio superiore e ghiandole profonde (capo cellule < 50% .); segnare 4 (I): dell'epitelio superiore e ghiandole profonde (cellule principali ≥ 50%)
colorazione immunoistochimica e il punteggio per l'espressione di citochine
Le sezioni congelate (4 micron) sono stati essiccati a temperatura ambiente per 2 ore, e fissati con 3,7% di formaldeide per 1 min. Dopo lavaggio con PBS due volte, i campioni sono stati fissati con acetone freddo e poi lavate con PBS. L'Ig mouse Blocking Reagent (Vector Laboratories, Burlingame, CA, U.S.A.) è stato utilizzato per bloccare i siti di legame non specifici. Gli anticorpi di ratto anti-topo monoclonali (TNF-alfa, IL-6, IL-10, IL-1b, e IFN-y) e il coniglio anti-topo anticorpo policlonale (IL-1β) sono stati utilizzati come anticorpo primario. Il polimero coniugato HRP ampio spettro (Zymed Laboratories Inc. South San Francisco, CA, U.S.A.) è stato utilizzato come 2 nd anticorpi. Il kit AEC stato utilizzato per illustrare la macchia. L'intensità di ogni citochina è stato ottenuto secondo la distribuzione delle cellule colorazione positiva sull'epitelio (range 0-3), e sui componenti della lamina propria, tra la matrice, polimorfonucleati, linfociti e fibrociti (Tabella 1) .table 1 Punteggio di espressioni citochine sul gastrica dell'epitelio e lamina propria.

Nota

0
1
2
3
Epithelium
negativo
inferiore al 33%
33% -67%
più del 67%
lamina propria
Matrix
Assenza
Presenza
linfociti
Assenza
Presenza
fibrocyte
Assenza
Presenza
neutrofili
Assenza
presenza
il punteggio quantitativa di ogni citochina sull'epitelio è stato il seguente: punteggio 1: colorazione positiva nel citoplasma delle cellule epiteliali solo sulla parte superiore 1/3 parte dell'epitelio; punteggio 2: nella parte superiore e centrale dell'epitelio (1 /3-2 /3); punteggio 3: su tutto lo strato dell'epitelio (> 2/3). La colorazione positiva di ogni citochina sulla lamina propria (linfociti, fibrociti e dei neutrofili) significa che non ci sono stati più di cinque cellule positive in un campo ad alta potenza di vista l'esame microscopico. L'analisi statistica
χ del Pearson 2 test è stato utilizzato per testare la differenza dei tassi di colonizzazione tra topi sperimentali e di controllo. I parametri istologici, antigeni Lewis, e le espressioni delle citochine sono stati confrontati con il test esatto di Fisher per i diversi sottogruppi. Il test di Friedman è stato utilizzato per testare la differenza di H. pylori
di densità tra l'antro, corpus e Cardia dello stomaco in ogni mouse. Tutti i test sono stati valutati due code e un valore p
< 0.05 è stato preso come significativo.
Risultati
I tassi di successo H. pylori
colonizzazione nei topi con differenti età di acquisizione recensioni sul 2 nd settimana dopo H. pylori
sfida, H. pylori
la colonizzazione ha avuto successo nel 89% (8/9) del giovane gruppo topi e il 100% (10/10) del gruppo topi adulti. Al contrario, l'8 th settimana dopo H. pylori
sfida, il tasso di colonizzazione era significativamente più bassa nei giovani topi da quello in topi adulti (53% vs. 95%, p = 0,003
). Per quei topi con la colonizzazione di successo sia sul 2 nd o l'8 ° settimana, le densità di H. pylori
sono stati distribuiti in modo uniforme sul antro, corpus, e Cardia sia nei topi giovani e adulti ( P
> 0,05)
gastrici Lewis antigeni e citochine espressioni età-specifica nei topi naive
Nel topi ingenuo di entrambi i gruppi di giovani e adulti, le espressioni di le x e sialyl-. le x erano deboli sul gastrico. Tuttavia, un graduale aumento dell'intensità totale Le x e sialyl-Le x espressioni stati resi noti in incrementi di età (Figura 2A e & 2B). Tale aumento ha raggiunto un plateau a partire dall'età cronologica di quasi 5 settimane di vita. Al nd settimana 2 e l'8 th settimana dopo H. pylori
sfida, il Le x espressioni non erano differenti tra i topi colonizzati e il controllo di entrambi i gruppi giovani e adulti. Figura 2 L'intensità della gastrica Lewis antigeni nei topi naive nelle diverse età della vita (A) x Lewis, (B) sialyl-Lewis x.
L'intensità di espressione delle citochine gastrico varia tra le diverse età di topi e posizione. Per le citochine proinfiammatorie, non c'erano colorazioni positivi di TNF-α e IL-6 sulla dell'epitelio superficiale in qualsiasi topi naive. Le colorazioni positivi del TNF-α e IL-6 sui linfociti, fibrociti, e neutrofili sulla lamina propria erano significativamente più alti nei topi di età ≥ 5 settimane rispetto a quelli di età compresa tra < 5 settimane (P
< 0,01; figura 3A & 3B). La colorazione positiva di IL-1β è stata trovata principalmente l'epitelio ed espressa presto nei topi di età compresa tra < 5 settimane. Il tasso di colorazione positiva di IL-1β sui neutrofili è stata maggiore nei topi di età ≥ 5 settimane rispetto a quelli di età compresa tra < 5 settimane (P
< 0,05; Figura 3C). Figura 3 espressioni citochine gastrici su l'epitelio e lamina propria tra i topi naive età ≥ 5 settimane e < 5 settimane. (A) Tumor fattore necrotico alfa (TNF-α), (B) interleuchina 6 (IL-6), (C) interleuchina 1 beta (IL-1β), (D) interferone gamma (IFN-γ), e (E ) interleuchina 10 (iL-10).
nel primi anni di vita dei topi, l'IFN-γ positivo colorazione era nella maggior parte trovato su l'epitelio e la matrice, come l'intensità della colorazione positivo IFN-γ diminuito dopo ≥ età 5 settimane (P
< 0,01, figura 3D). Tuttavia, un tasso significativamente più alto di positivo colorazione IFN-γ sui linfociti e fibrociti è stato divulgato nei topi in età ≥ 5 settimane rispetto a quelli di età compresa tra < 5 settimane (P
< 0.01).
Contrariamente al pesante colorazione IFN-γ sull'epitelio nella vita iniziale di topi, IL-10 era di solito negativo sull'epitelio. La colorazione positiva di IL-10 era maggiore sui linfociti e fibrociti nei topi in età ≥ 5 settimane rispetto a quelli di età compresa tra < 5 settimane (P
< 0,05; Figura 3E).
Topi istologia e l'espressione dell'antigene Lewis secondo H. pylori
infezione recensioni sul nd settimana 2 secondo H. pylori
sfida, H. pylori
-colonized giovani topi sembrava avere un tasso marginalmente superiore di alta TCIS (punteggio ≥ 4) rispetto ai topi di controllo (88% vs 50%, P = 0,15
), ma tale un significato marginale, non è stato comunicato nei topi adulti (30% vs. 30%, p = 1.00
). Inoltre, nel gruppo di giovani topi, i topi con la colonizzazione persistente sul 8 th settimana ha avuto un evidente più alto tasso di alte TCIS rispetto ai topi che ha perso la colonizzazione (40% vs. 11%, p = 0.30
) . Sulla nd settimana 2 secondo H. pylori
sfida, la percentuale di giovani topi colonizzati che hanno una alta intensità di sialyl-Le x espressione (punteggio ≥ 7) era sceso rispetto a quella nei topi di controllo (25% vs. 60%, P
= 0.19). Tuttavia, una tale calo non era evidente in 8 th settimana (100% vs. 90%, P
> 0,05) e con topi adulti in 2 nd settimana (90% vs. 100 %, P
> 0,05) e l'8 ° settimana (58% vs 60%, P
>. 0,05) secondo H. pylori
sfide
espressione citochine gastrico dopo H. pylori
infezione recensioni sul nd settimana 2 secondo H. pylori
sfida, il giovane topi con la colonizzazione di successo ha avuto un significativamente più alta intensità di iL-6 sulla fibrociti (75% vs. 0 %, P = 0,002
) e matrix (75% vs. 20%, p = 0.05
), ma inferiore a IFN-γ (0% vs. 100%, P
< 0,001) sulla matrix rispetto ai controlli naive (Tabella 2). Anche nei topi adulti, i topi con la colonizzazione di successo sono stati resi noti per avere un tasso più basso di espressione di IFN-γ sulle fibrociti rispetto ai topi di controllo (30% vs 90%, P = 0.02
) .table 2 citochina gastrica espressioni al 2 ° settimana di giovani e adulti topi con persistente H. pylori
colonizzazione e di controllo ingenuo topi.


topi giovani
topi adulti
parametri (%)
Colonizzata (n = 8)

controllo
(n = 10)
P
valore
Colonizzata (n = 10)
controllo
( n = 10)
P
Valore
IL-6 *
Matrix
75
20
0.05
70
30
NS
linfociti
50 10
NS
60
70
NS
fibrocyte
75
0
0.002
80
50
NS
neutrofili
37,5
20
NS
20
70
0,07
TNF-α *
Matrix
87,5
70
NS
80
90
NS
linfociti
62,5
40
NS
90
90
NS
fibrocyte
87,5
40
0,07
100 | 90
NS
neutrofili
12.5 10
NS
30
40
NS
IL-1β
Epithelium ≥ 2
100 | 70
NS
100 | 90
NS
Matrix
A25
0
NS
100 | 80
NS
linfociti
25
20
NS
30
0
NS
fibrocyte
A25
60
NS
100 | 100 | NS
IFN-γ
Epithelium ≥ 2
0
30
NS 10
0
NS
Matrix
0
100 | < 0.001
40
20
NS
linfociti
0 0

NS 10
30
NS
fibrocyte
12,5
10
NS
30
90
0.02
Neutrophil
0
0
NS
10
20
NS
IL-10*
Matrix
a25
60
NS
100
80
NS
Linfociti
25
20
NS
60
60
NS
fibrocyte
a37.5
50 | NS
100 | 80
NS
neutrofili
12,5
0
NS 10
20
NS
CIS: punteggio infiammatorio cronico; AIS: punteggio infiammatorio acuto. *: Mezzi colonizzati topi infettati da H. pylori
con la colonizzazione di successo (test di urea positivo e istologia) sul sacrificio. un: P valore di <
; 0,01; B: P valore
≤ 0.05 tra i giovani e adulti topi colonizzati. NS: nessun significato. * Indicato su questo parametro, l'epitelio è piuttosto debole per tale citochina in immunoistochimica colorazione.
L'8 th settimana dopo H. pylori
sfida, i tassi di alta TNF-α (100% vs. 20%, P
= 0.02) sulla matrice e alti livelli di iL-1β (100% vs. 20%, P
= 0.02) sulla fibrociti erano maggiori nei giovani topi colonizzazione persistente rispetto ai topi di controllo ( Tabella 3). Per i topi adulti con la colonizzazione di successo, i tassi di alta IFN-γ (30% contro il 100%, P = 0.003
), IL-10 (20% contro il 100%, p = 0,001
) e iL-6 (50% vs. 100%, P
= 0.03) sulla fibrocytes erano significativamente inferiori a quelli dei topi naive controllo. Tuttavia, era più comune nei topi adulti colonizzati rispetto ai topi di controllo di avere una maggiore IFN-γ (80% contro 40%), IL-10 (80% contro 40%), e IL-6 (80% vs 30%) sul matrix.Table 3 le espressioni citochine l'8 settimana di giovani e adulti topi con persistente e ha perso H. pylori
colonizzazione e di controllo ingenuo topi.


topi giovani
topi adulti
Variabili (% )
persistente colonizzazione
(n = 5)
perso colonizzazione
(n = 4)
di controllo (n = 10)

P
† valore
persistente colonizzazione
(n = 10)
controllo
(n = 10)
P
valore
IL-6 *
Matrix
100 | 80
50 | NS
80
30
NS
linfociti
25
60
50 | NS
70
70
NS
fibrocyte
100 | 80
70
NS
50
100 | 0,03
neutrofili
0
20
50 | NS
20
70
NS
TNF-α *
Matrix
100 | 100 | 20
NS
100 | 60
NS
linfociti
100 | 80
60
NS
90
90
NS
fibrocyte
100 | 100 | 70
NS
100 | 80
NS
neutrofili
25
20
60
NS 10
40
NS
IL-1β
Epithelium ≥ 2
100 | 80
70
NS
100 | 80
NS
Matrix
75
40
30
NS
100 | 80
NS
linfociti
50
60
0
NS
50 | 60
NS
fibrocyte
100 | 60
20
NS
100 | 100 | NS
neutrofili
0 0

20
NS
0 10
NS
IFN-γ
Epitelio ≥ 2
0
80
20
0,048
30
0
NS
Matrix
75
100 | 40
NS
80
40
NS
linfociti
75
60
40
NS
30
50 | NS
fibrocyte
75
100 | 50 | NS
30
100 | 0,003
Neutrophil
0
0
40
NS
20
0
NS
IL-10*
Matrix
100
20
70
0.048
80
40
NS
Linfociti
100 | 20
70
0,048
40
50 | NS
fibrocyte
100 | 60
70
NS
20
100 | NS
neutrofili
50
0 10
NS
0 10
NS
†: il significato è stata confrontata tra i giovani topi con la colonizzazione persistente e perso. * Indicati su questo parametro, l'epitelio è piuttosto debole per tale citochina in immunoistochimica colorazione.
Superiore sialyl-Lex coesiste con una maggiore IL-10, ma inferiore a INF-γ per H. pylori
colonizzazione recensioni sul 2 nd settimana, il giovane topi colonizzati aveva alcuna differenza significativa nell'intensità di sialyl-le x espressione rispetto ai topi di controllo (P
> 0,05). Tuttavia, l'8 th settimana dopo H. pylori
sfida, il giovane topi con la colonizzazione persistente ha avuto un più alto tasso di evidente sialyl-Le x espressione (punteggio ≥ 7) rispetto a quelli dei topi che colonizzazione perduto (100% vs. 56%, p = 0,03
). Oltre a mostrare un più alto tasso di sialyl-Le x espressione (punteggio ≥ 7), tutti i persistentemente H. pylori
-colonized topi giovani significativamente convissuto con bassa IFN-γ e più elevati di IL-10 espressioni di quei topi che avevano perso la colonizzazione persistente sul 8 ° settimana (Tabella 4, 100% vs 0%; p = 0.008
) .table 4 Un basso gastrica IFN-γ (punteggio ≤ 1) espressione su epitelio coesiste con alta sialyl-Lex (punteggio ≥ 7) e iL-10 (sia su matrice e linfociti) è stata correlata alla colonizzazione batterica persistente in età precoce acquisizione di topi.
espressione di citochine (%)
Colonizzazione di giovani topi
OR (95% CI)
P valore
*

persistente (n = 4)
Lost (n = 5)


basso IFN-γ
100
20
0,2 (0,1-1,2)
0,048
alta IL-10
100 | 0 -
0,008
basso IFN-γ e alta sialyl -Lex
100 | 0 -
0,008
basso IFN-γ e IL-10 ad alta
100 | 0 -
0,008
O : rapporto dispari; CI: intervallo di confidenza; *: Test esatto
Table 5 di Fisher mostra il punteggio di IFN-γ sull'epitelio e IL-10 sulla matrice e linfociti tra topi con persistente e colonizzazione perso al 8 th settimana dopo H. pylori
sfida. Nessuno dei giovani topi con colonizzazione batterica persistente avuto espressione di IFN-γ sull'epitelio ma aveva ovvio IL-10 espressione sulla matrice e linfociti rispetto ai topi senza colonization.Table 5 Il punteggio di IFN-γ sull'epitelio e IL -10 sulla matrice e linfociti alla settimana all'8 secondo H. pylori
sfida nel giovane topi con e senza la colonizzazione persistente.



Punteggio di iL-10
Mice No.
Colonizzazione
Punteggio di IFN-γ in epitelio
su matrice
su lymphocyte

1
Yes
0
1
1
2
Yes
0
1
1
3
Yes
0
1
1
4
Yes
0
1
1
5
No
1
0
0
6
No
2
1
0
7
No
2
0
0
8
No
2
0
0
9
No
2
0
1
Discussione
Acquisizione di H. pylori
si verifica soprattutto durante l'infanzia e l'eliminazione spontanea di infezione di solito si verifica nei bambini piccoli [3-6, 20]. In questo studio, i topi adulti C57BL /6 hanno avuto un positivo H. pylori
tasso di colonizzazione degli isolati che vanno a più del 80%, che è compatibile con le precedenti relazioni [13, 14]. Questo alto tasso di colonizzazione nei topi adulti è inoltre compatibile a sostegno del fatto che tarda acquisizione di H. pylori
in pazienti umani adulti di solito si traduce in colonizzazione cronica [20]. Inoltre, rispetto al 2 ° settimana di giovane topi dopo H. pylori
acquisizione, il tasso di colonizzazione in 8 th settimana era 53%, che sostiene che l'eliminazione spontanea di H. pylori
si verifica realmente durante l'età acquisizione precoce di topi. Così questo studio dovrebbe essere molto originale di introdurre un modello di topo progettato per convalidare che ci dovrebbe essere una perdita di H. pylori
colonizzazione dopo l'acquisizione precedente di H. pylori
, che imita da vicino i risultati clinici nei giovani bambini.
il nostro precedente studio ha dimostrato che l'intensità della gastrico le x è positivamente correlato all'incremento dell'età negli esseri umani [12]. Tuttavia, per quelli senza H. pylori
infezione, l'espressione di sialyl-Le x sul dell'epitelio gastrico è debole o manca nei bambini e negli adulti dispeptici [12]. Compatibile con gli esseri umani, l'intensità della gastrico sialyl-Le x di topi è anche correlata positivamente all'incremento di età (Figura 2B). Tale constatazione nei topi è anche compatibile a una studio sui ratti, che registra un incremento correlato all'età di glicosilazione nei tessuti del fegato [21]. L'aumento gastrica sialyl-Le x espressione dopo H. pylori
infezione è stata riportata negli esseri umani e scimmie Rhesus [9-12]. Tuttavia, nel nostro studio topi, una diminuzione di intensità dei gastrica sialyl-Le xwas divulgato nella H. pylori
-infected topi giovani, ma non nei topi adulti su nd settimana 2, rispetto ai i topi di controllo. Più sorprendentemente, l'8 th settimana dopo H. pylori
acquisizione, una tale diminuzione di sialyl-Le x scomparve in entrambi i giovani e adulti topi colonizzati, che aveva una mucosa gastrica completamente sialylated. Questa scoperta suggerisce che H. pylori
sfida dovrebbe essere coinvolto a disturbare la curva di maturazione legate all'età dei sialylation nei giovani topi. Inoltre, suggerisce indirettamente che i cambiamenti di sialyl-Lewis antigene in topi giovani dovrebbero essere altamente correlati alla persistenza o la perdita di H. pylori
colonizzazione.
In questo modello animale, presto H. pylori
acquisizione causato un più alto CIS rispetto ai controlli sul 2 nd settimana (87,5% vs. 50%, P
= 0,15), ma non sulla 8 th settimana (40% vs. 30%, P
= 0,36) secondo H. pylori
sfida. Supponendo che denso infiammazione provoca sintomi clinici più gravi, questo cambiamento istologia potrebbe essere correlato ai nostri precedenti risultati che H. pylori
infezione potrebbe causare a breve termine dolore epigastrico nei bambini, anche se di solito risolto al follow-up [22]. Per quanto riguarda sia l'osservazione clinica e in vivo dei dati del modello topi, H. pylori
acquisizione nei bambini di solito si presenta come un sequel auto-limitata nel processo infiammatorio.
Dopo H. pylori
infezione, le diverse risposte di accoglienza del gastrica citochine potrebbero eventualmente essere correlati a risultati clinici differenti [14, 18, 23, 24]. In questo studio, i topi naive sono stati trovati ad avere regolari IL-1β e le espressioni IFN-γ (Figura 3C & 3D) sulla dell'epitelio gastrico, che è coerente con una precedente relazione negli esseri umani [15]. Il nostro studio i topi esposti espressione di citochine specifiche per età sulla dell'epitelio gastrico (IFN-γ) e lamina propria (IL-6, TNF-α, IFN-γ e IL-10). A causa della risposta specifica-età di citochine, il nostro studio sostiene che non ci dovrebbero essere diverse risposte immunitarie ingenue tra bambini e adulti.
Sulla base dello studio di immunoistochimica, questo studio ha confermato che le espressioni di citochine pro-infiammatorie sulla lamina gastrica propria potrebbe cambiare sia sul 2 nd e l'8 th settimana dopo H. pylori
sfida [25, 26]. Sia nei topi e negli esseri umani, le risposte delle citochine gastrici di H. pylori
infezione sono stati dimostrato di essere Th1-dominante, perché il livello di IFN-γ è aumentata in H. pylori
soggetti -infected rispetto ai controlli [15, 18, 23, 27]. Un alto livello di INF-γ è stato attribuito come segno distintivo di H. pylori
-related gastrite, soprattutto durante l'infiammazione cronica e potenzialmente attribuito un ruolo protettivo contro H. pylori
colonizzazione [16-18, 28]. Come indicato nella tabella 3, si rivelato che i giovani topi con una perdita di colonizzazione ha avuto un più alto IFN-γ espressione dell'epitelio che i topi con la colonizzazione persistente (P = 0,048
). Questo risultato è compatibile con uno studio umano nei bambini che ha mostrato che i bambini con infezione da H. pylori
avevano una minore concentrazione di IFN-γ rispetto ai controlli non infetti [29]. Questi dati nei topi suggerisce che vi possa essere una correlazione significativa perdita colonizzazione volta vi è una elevata espressione di IFN-γ. Pertanto, dovrebbe essere interessati a rilevare la diversa risposta dell'ospite di IFN-γ che può essere correlato ad avere diversi H. pylori esiti
infezione nei bambini.
IL-10 è una citochina Th2, e può essere attivato da regolamento compensativo dopo uno spostamento Th1 dalla H. pylori
sfida per proteggere la mucosa gastrica [13, 15, 23, 27]. Pertanto, non è così impressionante per illustrare un significativo aumento di espressione di IL-10 nei giovani topi con colonizzazione persistente (Tabella 3). Come mostrato nella Tabella 4, il giovane topi con bassa IFN-γ sull'epitelio avere una persistenza di H. pylori
colonizzazione aveva una convivenza 100% con un alto IL-10 espressione sulla matrice e linfociti.

• Gastrite cistica profunda recidiva dopo resezione chirurgica: 2 anni di follow-up
• classificazione Lauren combinato con lo status di HER2 è un fattore prognostico meglio in pazienti affetti da cancro gastrico cinesi