Patvarūs H.pylori kolonizacijos pradžioje įsigijimo amžiaus pelių, susijusių su aukštuoju skrandžio sialylated Lewis x, IL-10, bet mažesnis interferonas-γ posakiai

Patvarūs H.pylori
kolonizacijos pradžioje įsigijimo amžiaus pelių, susijusių su aukštuoju skrandžio sialylated Lewis X, IL-10, tačiau mažesnis interferono-γ išraiškas
tezės
Background pervežimas H. pylori infekcijos
yra mažiau paplitęs vaikystėje. Šis tyrimas patvirtinti, ar H. pylori
kolonizacijos normos priklauso nuo įvairių įsigijimo amžių ir koreliuoja su įvairiais skrandžio Lewis antigenų ar citokinų išraiškos po H. pylori
įsigijimo.
Metodai
Mes pritaikė jauni (7-dienų) C57BL /6 pelių grupei (n = 50) ir suaugusiųjų (6-savaitę-amžiaus) C57BL /6 pelių grupei (n = 50). Kiekvienoje grupėje, 30 pelių buvo užginčytos su H. pylori parsisiųsti ir 20 pelių tarnavo kaip naivus kontrolę. H. pylori pervežimas kolonizacijos sėkmė buvo vertinama remiantis 2 -oji savaitė, o 8 -osios savaitės, atitinkamai. Iš Lewis x intensyvumas, sialylated Lewisas x (sialyl-Le X), ir citokinų posakių, įskaitant TNF-alfa, IFN-gama, IL-6, IL-10, ir IL-1β, buvo immunochemically tamsintas ir rezultatai balais.

dėl 2 -osios savaitę po H. pylori
iššūkis, kolonizacija normos H. pylori pervežimas, buvo panašus tarp jaunų pelių grupėje ir suaugusių pelių grupėje (89 %, lyginant su 100%, P
> 0,05). Tačiau, remiantis 8 -osios savaitės, H. pylori
kolonizacija lygis buvo gerokai mažesnis jaunas pelių grupėje nei suaugusių pelių grupėje (53% vs 95%, p
= 0,003). Dėl 8 -asis savaitę, jaunas peles su H. pylori pervežimas kolonizacijos atkaklumo turėjo didesnis sialyl-Le x didesnis IL-10 ir mažiau IFN-γ nei pelių, kad prarastas kolonizacija per 2 -osios į 8 -oji savaitė (P pervežimas < 0,05).
Išvada Viesbutis The H. pylori
kolonizacijos atkaklumo galėtų būti įsigijimo amžiaus veiksnys procesas. Po H. pylori
poveikio ankstyvame įsigijimo amžiaus, priimančioji reakcija su didesne sialyl-Le x ir IL-10, bet mažesnę IFN-gama koreliuoja su tuo susijusią atkaklumo H. pylori
kolonizacijos.
Įvadas
Helicobacter pylori
infekcija gali sukelti chronišką gastritą ir net skrandžio opa tiek vaikams, tiek suaugusiems [1, 2]. Be epidemiologinių tyrimų duomenimis, H. serologinis pozityvumas pylori
buvo įrodyta, kad būti mažiau vaikų nei suaugusiųjų [3, 4]. Tolesni veiksmai grupės tyrimas parodė, kad didžiausias sergamumas serokonversijai pasireiškia ankstyvoje vaikystėje ir palaipsniui mažėja [3] amžiaus. Keletas tyrimų parodė, kad anksti įsigijimas H. pylori
infekcijos vaikystėje galbūt sukelti vėlesnio nuostolio kolonizacijos [3-6]. Tačiau tikslios taisyklės atstumu vaikams nustatyti arba nuostolius arba atkaklumą H. pylori
kolonizacijos po ankstyvo įsigijimo lieka nėra gerai žinoma.
A kraujo grupė privalomą adhezinus (BABA) H. pylori
Už selektyviai jungiasi į fucosylated Lewis antigeno ( "Le b) skrandžio ląstelių tarpininkavimo sunkiųjų bakterijų kolonizaciją [7-9]. Kitas Seilių rūgšties privalomas adhezinas (Saba) H. pylori pervežimas prisijungia prie skrandžio sialylated Lewis x antigeno (sialyl-Le X) alternatyviai padėti nuolatinis kolonizaciją po lėtinis uždegimas [10], ir ypač tampa svarbus kai Le b antigeno priimančiosios nėra arba silpnas [11]. Mūsų Neseniai atliktas tyrimas atskleidė, kad H. pylori
-infected vaikai turėjo žymiai padidinti sialyl-le X, bet ne "Le B išraiška [12]. Todėl įdomu patikrinti, ar pradžioje įsigyti H. pylori pervežimas vaikystėje atkaklumas gali būti susiję su kintamojo šeimininko atsakymų skrandžio uždegimas arba epitelio sialylation pritaikyti H. pylori pervežimas Saba.
su suaugusiais C57BL /6 pelių vyresni nei šešių savaičių amžiaus, klinikinė H. pylori
padermės gali sėkmingai kolonizuoja dauguma pelių daugiau nei šešis mėnesius [13, 14]. Lėtinis H. pylori
infekcija sukelia įvairių Th1 tipo vyraujančių skrandžio uždegimams su kintančia PRO-uždegiminių ir Th1-dominuojančių tipo citokinų atsakymų tarp skirtingų šeimininkų [15-18]. Taigi, dabartinė Tyrimo tikslas iš pradžių patikrinkite, ar H. pylori
kolonizacijos atkaklumas gali būti įsigijimas amžiaus veiksnys procesas. Be to, šis tyrimas pabandė atsakyti, ar kintamasis sialyl-Le X ir uždegimo citokino posakiai po H. pylori
iššūkį galėtų nustatyti nuolatinę kolonizaciją H. pylori
infekcijos, ypač pelių gavimo iššūkis pradžioje įsigijimo.
medžiagos ir metodai
pelės grupės ir H. pylori
izoliatų užkrėtimo eksperimento
Šis tyrimas naudojamas 100 C57BL /6 pelėms (50 septynių dienų senumo jaunų pelių ir 50 šešių -week amžiaus suaugusiųjų pelių patinams), įskaitant 60 eksperimentinės grupės juslėmis tipo 1 Saba teigiamas H. pylori
klinikinė izoliatas (AG 625) ir 40 negydytiems kontrolės. Šio H. daugybos pylori
izoliatai buvo taikomi tuo pačiu metodu, kaip mūsų ankstesnį pelės modelio tyrimo pasiekti 0,8 × 10 8 KSV /ml tankiui. [19]. Dėl eksperimentinės grupės, bakterijos pakaba 0,1 ml jauniems pelių ir 0,5 ml suaugusių pelių buvo žodžiu užsėti tris dienas iš eilės, atitinkamai. Dešimt kiekvieno iš jaunų ir suaugusių pelių kontrolinės grupės buvo paaukota ne 2 -asis ir 8 -osios savaitės. Eksperimentiniuose pelių, dešimt kiekvienoje iš jaunų ir suaugusių pelių 2 -osios savaitę ir 20 kiekvieno iš jaunų ir suaugusių pelių 8 -osios savaitės po skiepijimo buvo paaukojo intraperitoninio injekcijos pentobarbitalio ( 150-200 mg /kg). Izoliuoti skrandžiai buvo įpjauti išilgai didesne ar mažesne kreivumą į dvi dalis. Vienas pusei buvo formalino-embedded už histologiją ir Lewis antigeno egzaminus. O kita pusė buvo iš karto dedamas į buferinio tirpalo, sušaldytos ant sauso ledo, ir saugomi -80 ° C temperatūroje citokinų nagrinėjimo. H.pylori
infekcija buvo įrodyta greitai karbamido bandymo ir histologinio tyrimo.
Skrandžio histologinių pelių
du tyrėjai, įskaitant vieną patologas, nežino demografiniais duomenimis ir sudaryti kolonijas rezultatus, analizavo skrandžio histologinių. Taikant mūsų ankstesnį peles modelio metodą [19], histologinės parametrus, įskaitant H. pylori
tankis (Diapazonas 0-4), ūminio uždegimo balas (AIS, asortimentas 0-3), lėtinis uždegimas balas (NVS, asortimentas 0-3), atrofinė kaita (AT, diapazone 0-1) ir žarnyno metaplazija (MP, asortimentas 0-3) buvo įvertintas topografiškai per Ertmė, corpus ir Cardia, atitinkamai. Klasifikavimo sistema H. ​​pylori
tankis buvo naudojamas taip: 0, jokių bakterijų aptinkama; 1, lengvas lygis kolonizacijos ir neaptikta kiekvieną skrandžio kriptoje bakterijų; 2, lengvas lygis kolonizacijos nustačius į kriptos dabartinių dauguma bakterijų; 3, vidutinio sunkumo ir sunkaus kolonizacijos visose kriptos; ir 4, sunkūs kolonizacija su visais kriptos tankiai supakuota su bakterijomis. Pateikti rezultatai yra vidutinė vertė kolonizavimo kiekvienai grupei. Bendras H.pylori
tankis (THPD) buvo apibrėžta kaip tankių gautas Ertmė, corpus ir Cardia sumą, ir tokiu būdu svyravo nuo 0 iki 12. Bendras ūmaus (TAIS) ir lėtinis (TCIS) uždegimo balų taip pat buvo iš partitūros iš trijų vietų (nuo 0-9) suma.
Bakterinė infekcija H. pylori
buvo apibrėžiamas kaip bet kokių skrandžio skyriuose bakterijų, o pelėms buvo manoma, kad nepavyko būti užkrečiama, kai nėra bakterijos buvo pastebėtas histologijos ir neigiamas CLO testą.
Imunohistocheminiais dažymo ir taškų skrandžio Lewis išraiškos pervežimas imunodažymu skrandžio egzempliorių Lewis antigenų buvo atliekama naudojant avidino-biotino-peroksidazės techniką su VECTOR Ms.OM Imunodetekcijos komplektas. Pagrindinis monokloninis antikūnas (anti-Le x Signet Laboratories, Inc. ", Dedham, MA) buvo pasirinktas, siekiant nustatyti skrandžio Le X antigenus [11, 12]. Be Le X antigenas dažymo, monokloninis antikūnas prieš sialyl-le X (pelės IgM MAB2096, Chemicon International, Inc, Temecula, Kalifornija), buvo naudojamas [12]. Nespecifinių privalomus vietos buvo prisotintas 2-2,5% galvijų serumo albumino. Už kiekvieną skrandžio svetainėje, pelnytas Le intensyvumas X (nuo 0-5) ir sialyl-Le X (nuo 0-4) pagal prie dažymo (1 paveikslas) topografijos. Iš viso skrandžio Lewisas antigenas intensyvumas Le X ir sialyl-Le X buvo iš Ertmė, corpus ir Cardia (ribos 0-15 Le suma X ir 0-12 sialyl-le x). 1 pav imunohistocheminis (IHC) dažymo ir rūšiavimas Lewisas x (Le x) ir sialyl-Lewisas x (sialyl- Le x) antigenai yra rodomas skrandžio biopsijos pelių (200 ×). IHC dažymo parodė neigiamą dvi Lewis antigenų ir buvo vadinama rezultatas 0. Dėl Lex, rezultatas 1 (a): šykščios dažymo (< 5% pakauškaulio ląstelių giliai liaukų; rezultatas 2 (b): giliai liaukos 5 -50% dažymo ir silpnas; rezultatas 3 (C): giliai liaukos > 50% dažymo ir stiprus; pelnyti 4 (d): visas sluoksnis giliai liaukų su paviršiniu epitelio dažymo, jokių gleivių išraiška; pelnyti 5 (E): visa . sluoksnis su gleivių išraiška sialyl- Lex, rezultatas 1 (F): tik paviršius gleives teigiamas rezultatas 2 (g): gleivės ir viršutinės epitelis; rezultatas 3 (H): viršutinę epitelis ir giliai liaukos (vyriausiasis ląsteles < 50% .); rezultatas 4 (I): viršutinė epitelio ir giliai liaukos (vyriausiasis ląstelių ≥ 50%)
Imunohistocheminiais dažymo ir balais prouždegiminio citokino išraiškos
įšaldytą skyriuose (4 mkm) buvo džiovinti kambario temperatūroje 2 val, ir fiksuoto su 3,7% formaldehido už 1 min. Po plovimo su PBS du kartus, mėginiai buvo nustatyti su šaltu acetonu ir tada plaunamas PBS. Pelės Ig Blokavimo reagento (Vector Laboratories, Burlingame, Kalifornija, USA) buvo naudojamas blokuoti nespecifinių privalomus svetainėse. Tai žiurkės anti-pelės monokloniniai antikūnai (TNF-alfa, IL-6, IL-10, IL-1β, ir IFN-gama) ir triušio prieš pelės polikloninis antikūnas (IL-1β) buvo naudojami kaip pirminis antikūnas. HRP polimeras konjuguota plataus spektro (Zymed Laboratories Inc. "Pietų San Franciskas, CA, USA) buvo naudojama kaip 2 -osios antikūnų. AEC rinkinys buvo naudojamas iliustruoti dėmę. Kiekvieno citokino intensyvumas buvo balais pagal teigiamų dažymo ląstelių pasiskirstymas dėl epitelio (grupę 0-3), ir ant plono sluoksnio propria komponentų, įskaitant matricą, polimorfonuklearinių ląstelių, limfocitų, o fibrocitas (1 lentelė) .table 1 Balai citokinų išraiškos dėl skrandžio epitelio ir plonų sluoksnių Propria.

balas

0
1
2
3
epitelio
Neigiama
:%
33% -67%
Mažiau nei 33 daugiau nei 67%
lamina Propria
Matrica
nebuvimas
buvimas
limfocitų
nebuvimas
buvimas
fibrocitas
nebuvimas
buvimas
neutrofilų
nebuvimas
akivaizdoje
kiekybinių balais kiekvieno citokino dėl epitelio taip: rezultatas 1: teigiamą dažymo į epitelio ląstelių Cytoplasma tik viršutinis 3/1 dalis epitelio; tikslo 2: ant viršutinio ir vidurinės dalies epitelio (1 /3-2 /3); tikslo 3: ant viso sluoksnio epitelio (> 2/3). Teigiamas dažymo kiekvieno citokino dėl plonų sluoksnių Propria (limfocitai, fibrocitas ir neutrofilų) reiškia, ten buvo daugiau nei penki teigiami ląstelės į didelės galios lauku į mikroskopiškai ištirti.
Statistinė analizė Viesbutis The Pirsono χ 2 bandymas buvo naudojama patikrinti kolonizacijos kursų tarp eksperimentinių ir kontrolinių pelių skirtumą. Histologinės parametrai, Lewis antigenai ir citokinų išsireiškimai buvo palyginti su miesto Fisher testo skirtingų pogrupių. Friedman testas buvo naudojamas išbandyti H. pylori
tankio skirtumą tarp Ertmė, corpus ir Cardia į kiekvieno pele skrandį. Visi bandymai buvo vertinami du-tailed ir p
vertė < 0,05 buvo laikomas reikšmingu.
Rezultatai
sėkmingų H. pylori pervežimas kolonizacijos kainos pelėms su skirtingais įsigijimo amžių
ant 2 -oji savaitė po H. pylori pervežimas iššūkis, H. pylori
kolonizacija buvo sėkmingas 89% (8-9) jauno pelių grupėje ir 100% (10/10) iš suaugusių pelių grupei. Priešingai, nuo 8 -asis savaitę po H. pylori
iššūkis, kolonizacijos dažnis buvo žymiai mažesnis jaunų pelių negu suaugusių pelių (53% vs 95%, p = 0,003
). Dėl šių pelių su sėkmingo kolonizacijos arba dėl 2 ND arba 8 -osios savaitės, H. pylori
tankis buvo tolygiai paskirstytas ant Ertmė, corpus ir Cardia tiek jaunų ir suaugusių pelių ( P
> 0,05)
Amžius konkrečių skrandžio Lewis antigeno ir citokinais posakių naivus pelių
naivus pelių tiek jaunų ir suaugusių grupėms, Le išraiškos x ir sialyl-. le x buvo silpna skrandžio antralinėje dalyje. Tačiau palaipsniui didinti bendro intensyvumo Le X ir sialyl-Le x išraiška buvo atskleistas amžiaus žingsniais (2a pav & 2B). Toks padidėjimas pasiekė plato nuo chronologine amžiaus šalia 5 savaičių amžiaus. Tuo 2 -osios savaitę ir 8 -osios savaitę po H. pylori
iššūkis, Le x išraiška nesiskyrė tarp kolonijos ir kontrolinės pelių abiejų jaunų ir suaugusių grupėms. 2 pav skrandžio Lewis intensyvumas antigenai naivus pelių įvairaus amžiaus gyvenimo (A) Lewis x, (B) sialyl-Lewisas x.
Skrandžio citokinų išraiškos svyravo tarp skirtingų amžiaus grupių pelių bei vietovę intensyvumą. Už priešuždegiminiais citokinų, nebuvo teigiami stainings TNF alfa ir IL-6 žvilgterėjus epitelio bet kurį iš naiviąją pelių. Teigiami stainings TNF alfa ir IL-6 apie limfocitų, fibrocitas ir neutrofilų per plonų sluoksnių Propria buvo reikšmingai didesnis jaunesniems ≥ 5 savaites nei amžiaus <pelių; 5 savaites (P
< 0,01; 3A pav & 3B). Teigiamas dažymo IL-1β daugiausia buvo rasti ant epitelio ir išreiškė anksti amžiaus <pelių; 5 savaites. Pozityvaus dažymo IL-1β apie neutrofilų dažnis buvo didesnis vyresniems ≥ 5 savaites nei amžiaus <pelių; 5 savaites (P
< 0,05; Fig.3C). 3 pav Skrandžio citokino raiškai epitelio ir plonų sluoksnių Propria tarp vyresnių ≥ 5 savaites negydytiems pelių ir < 5 savaites. (A), auglys nekrotinės faktoriaus alfa (TNF-α), (B) interleukino 6 (IL-6), (C) interleukino 1 beta (IL-1β), (D) interferono gama (IFN-γ), ir (E ) interleukino 10 (IL-10).
pradžioje gyvenimo pelių, teigiamas IFN-γ dažymo buvo daugumos rasti ant epitelio ir matricos,, kaip teigiamų IFN-gama dažymo intensyvumas sumažėjo po to, kai amžiaus ≥ 5 savaites (P
< 0,01, 3D pav). Tačiau gerokai didesnis tarifas teigiamas IFN-gama dėmių atsiradimą ant limfocitų ir fibrocitas buvo atskleista pelių amžiaus ≥ 5 savaites nei amžiaus < 5 savaites (P
< 0,01).
Skirtingai nuo sunkiųjų IFN-gama nusidažę į ankstyvojo gyvenimo pelių epitelio, IL-10 buvo paprastai yra neigiami dėl epitelio. Teigiamas dažymo IL-10 buvo didesni limfocitų ir fibrocitas į pelių amžiaus ≥ 5 savaites nei vyresniems < 5 savaitės (p
< 0,05; 3E pav.)
Pelės histologija ir Lewisas antigeno ekspresija po H. pylori
infekcijos
Dėl 2 -osios savaitę po H.pylori
iššūkis, H. pylori
-colonized jauna pelės atrodė, kad šiek tiek didesnį tarifą aukštos TCIS (įvertis ≥ 4), nei kontrolinės pelių (88% vs 50%, p
= 0,15), tačiau toks ribinio reikšmė nebuvo atskleista suaugusių pelių (30% vs 30%, p
= 1.00). Be to, jaunas pelių grupėje, pelės patvariųjų kolonizacijos dėl 8 -oji savaitė turėjo akivaizdžiai didesnį tarifą aukštų TCIS nei pelių, kurios prarado kolonizuojamą (40% vs 11%, p
= 0,30) , Dėl 2 -osios savaitę po H. pylori
iššūkis, iš kolonizavo jaunų pelių, turinčių aukštą intensyvumą sialyl-le X išraiška procentais (įvertis ≥ 7) sumažėjo, palyginti su kontrolinių pelių (25%, lyginant su 60%, p
= 0,19). Tačiau toks kritimas nebuvo aišku, apie 8 -oji savaitė (100% vs 90%, p
> 0,05) ir suaugusių pelių dėl 2 -oji savaitė (90%, palyginti su 100 % P
> 0,05) ir 8 -oji savaitė (58% vs 60%, p
>. 0,05), po H. pylori
iššūkių
Skrandžio citokinų išraišką po H. pylori
infekcija
dėl 2 -osios savaitę po H. pylori
iššūkis, jaunas peles su sėkmingo kolonizacijos turėjo žymiai didesnį intensyvumą IL-6 apie fibrocitas (75%, palyginti su 0 %, P
= 0,002) ir matricos (75% palyginus su 20%, p
= 0,05), bet mažesnis IFN-γ (0%, lyginant su 100%, P
< 0,001) dėl matrica nei naiviąją kontrolės (2 lentelė). Taip pat ir suaugusių pelių, pelės su sėkmingo kolonizacijos buvo atskleista turėti mažesnį tarifą IFN-γ raiškos fibrocitas nei kontrolinių pelių (30%, palyginti su 90%, p = 0,02
) .table 2 skrandžio naviko raiškai 2-ojo savaitę jaunų ir suaugusių pelių patvariųjų H. pylori
kolonizacijos ir naivus kontrolinės pelių.


jaunųjų Pelės
suaugusių pelių
parametras (%)
kolonizavo
(n = 8)

Valdymo
(n = 10)
P
vertė
kolonizavo
(n = 10)
Valdymo
( n = 10)
P
Vertė
IL-6 *
Matrica
75
20
0,05
70
30
N
limfocitų
50
10
NS
60
70
NS
fibrocitas
75
0
0,002
80
50
NS
neutrofilų
37,5
20
NS
20 70
0,07
TNF-α *
Matrica
87,5
70
NS
80
90
NS
limfocitų
62,5
40
NS
90
90
NS
fibrocitas
87,5
40
0,07
100
90
NS
neutrofilų
12,5
10
NS
30
40
NS
IL-1β
Epitelinis audinys ≥ 2 100
70
NS
100
90
NS
Matrica
A25
0
NS
100
80
NS
limfocitų
25
20
NS
30
0
NS
fibrocitas
A25
60
NS
100
100
NS
IFN-γ
Epitelinis audinys ≥ 2
0
30
NS
10
0
NS
Matrica
0
100
< 0.001
40 20
NS
limfocitų
0
0
NS
10
30
NS
fibrocitas
12,5
10
NS
30
90
0,02
Neutrophil
0
0
NS
10
20
NS
IL-10*
Matrix
a25
60
NS
100
80
NS
Limfocitų
25
20
NS
60
60
NS
fibrocitas
a37.5
50
NS
100
80
NS
neutrofilų
12,5
0
NS
10
20
NS
NVS: lėtinė uždegiminė rezultatas; AIS: ūmus uždegimo rezultatas. *: Kolonizavo vidurkiai pelės infekuoti H. pylori
su sėkmingo kolonizacijos (teigiamas karbamido bandymų ir histologijos) dėl pasiaukojimo. A: P
vertė < 0,01; B: P
vertė ≤ 0,05 tarp jaunų ir suaugusių kolonizuoti pelių. NS: jokios reikšmės. * Nurodyta šio parametro, epitelis yra gana silpnas tokiam citokino apie imunohistocheminis dažymo.
Dėl 8 -asis savaitę po H. pylori
iššūkis, didelės TNF-alfa lygis (100% vs. 20%, p
= 0,02) nuo matricos ir aukštos IL-1β (100%, palyginti su 20%, p = 0,02
) dėl fibrocitas buvo didesnis jaunas peles su nuolat kolonizacijos nei kontrolinių pelių ( 3 lentelė). Dėl suaugusių pelių su sėkmingo kolonizacijos, didelės IFN-gama normos (30% vs 100%, p
= 0,003), IL-10 (20% vs 100%, p
= 0,001) ir IL-6 (50% vs 100%, p
= 0,03) nuo fibrocitas buvo gerokai mažesnės nei kontrolės negydytiems pelių. Nepaisant to, buvo labiau paplitęs kolonizuotuose suaugusių pelių, nei kontrolinės pelių turėti didesnį IFN-gama (80% vs 40%), IL-10 (80%, lyginant su 40%), ir IL-6 (80% vs 30%) dėl matrix.Table 3 citokinų raiškai 8-osios savaitės jaunų ir suaugusių pelių su patvari ir prarado H.pylori
kolonizacijos ir naivus kontrolės pelės.


jaunųjų Pelės
suaugusių pelių
Kintamieji (% )
Patvarūs kolonizacija
(n = 5)
Pamiršote kolonizacija
(n = 4)
Valdymo
(N = 10)

P
† vertė
Patvarūs kolonizacija
(n = 10)
Valdymo
(n = 10)
p
vertė
IL-6 *
Matrix
100
80
50
NS
80
30
NS
limfocitų
25
60
50
NS
70
70
NS
fibrocitas
100
80
70
NS
50
100
0,03
neutrofilų
0
20
50
NS
20 70
NS
TNF-α *
matrica
100
100
20
NS
100
60
NS
limfocitų
100
80
60
N
90
NS
fibrocitas
100
100
70
NS
100
NS
neutrofilų
90
80 25
20 60
NS
10
40
NS
IL-1β
Epitelinis audinys ≥ 2
100
80
70
N
100
80
NS
Matrica
75
40
30
NS
100 80
NS
limfocitų
50
60
0
NS
50
60
NS
fibrocitas
100
60
20
NS
100
100
NS
neutrofilų
0
0
20
NS
0
10
NS
IFN-γ
Epitelinis audinys ≥ 2
0
80
20
0,048
30
0
NS
Matrica
75
100
40
NS
80
40
NS
limfocitų
75
NS
30
50
NS
60
40 fibrocitas
75-
100
50
NS
30
100
0,003
Neutrophil
0
0
40
NS
20
0
NS
IL-10*
Matrix
100
20
70
0.048
80
40
NS
Limfocitų
100
20
70
0,048
40
50
NS
fibrocitas
100
60
70
NS
20
100
NS
neutrofilų
50
0
10
NS pervežimas 0
10
NS
†: reikšmė buvo lyginami tarp jaunų pelių su pastovaus ir prarado kolonizacijos. * Nurodyta šio parametro, epitelis yra gana silpnas tokiam citokino apie imunohistocheminis dažymo.
Aukštasis sialyl-Lex koegzistuoja su aukštojo IL-10, tačiau mažesnis INF-gama H. ​​pylori
kolonizacija
Ant 2 -asis savaitę, kolonizavo jaunas peles neturėjo reikšmingo skirtumo į sialyl-le x raiškos nei kontrolinių pelių (p
> 0,05) intensyvumo. Tačiau, remiantis 8 -asis savaitę po H. pylori
iššūkis, jaunas peles su nuolat kolonizacijos turėjo didesnį greitį akivaizdžiai sialyl-Le x išraiškos (įvertis ≥ 7) nei pelių, kad prarado kolonizacija (100% vs 56%, p
= 0,03). Be rodo didesnį greitį sialyl-le X išraiška (įvertis ≥ 7), visi atkakliai H. pylori pervežimas -colonized jaunų pelių žymiai egzistavo su mažesniu IFN-gama ir aukštojo IL-10 raiškos nei tie pelių, kad buvo prarastas nuolatinis kolonizaciją ant 8 -osios savaitės (4 lentelė, 100%, palyginti su 0%, p
= 0,008) .table 4 žemo skrandžio IFN-γ (rodmuo ≤ 1) raiškos epitelio sambūvio su dideliu sialyl-Lex (įvertis ≥ 7) ir IL-10 (tiek matricos ir limfocitų) buvo susijusi su nuolat bakterinės kolonizacijos pradžioje įsigijimo amžiaus pelių.
citokinų išraiška (%)
kolonizavimas jaunųjų pelėms
ARBA (95% PI)
P
vertė *

Patvarūs (n = 4) pervežimas pervežimas Lost (n = 5)


Low IFN-gama
100
20
0,2 (0,1-1,2)
0,048 Viesbutis High IL-10
100
0 -
0,008
Žemas IFN-gama ir aukšta sialyl -Lex
100
0 -
0,008
Žemas IFN-γ ir aukštos IL-10
100
0 -
0,008
arba : keista santykis; PI: pasikliautinasis intervalas; *: Fišerio tikslusis testas
5 lentelė rodo IFN-gama taškų ant epitelio ir IL-10 dėl matricos ir limfocitų tarp pelių su patvari ir prarado kolonizacijos prie 8 -osios savaitę po H. pylori
iššūkis. Nė vienas iš jaunas pelių su nuolat bakterijų kolonijų turėjo IFN-gama, išraiška epitelio bet turėjo akivaizdaus IL-10 Raiškos matricos ir limfocitų, palyginti su pelių be colonization.Table 5 d IFN-gama balas epitelio ir IL -10 ant matricos ir limfocitų 8-osios savaitės po H. pylori
iššūkio jaunas peles su ir be nuolat kolonizacijos.



balo IL-10
pervežimas Pelės Nr
kolonizavimas
balas IFN-gama ant epitelio

ant matricos
nuo lymphocyte

1
Yes
0
1
1
2
Yes
0
1
1
3
Yes
0
1
1
4
Yes
0
1
1
5
No
1
0
0
6
No
2
1
0
7
No
2
0
0
8
No
2
0
0
9
No
2
0
1
Diskusija
įsigijimas H. pylori
dažniausiai pasireiškia vaikystėje ir spontaniškas pašalinimas infekcijos paprastai pasireiškia mažiems vaikams [3-6, 20]. Šiame tyrime, kad C57BL /6 suaugusių pelių turėjo palankią H. pylori
kolonizuojamą norma izoliatų svyruoja daugiau nei 80%, kuris yra suderinamas su ankstesnėmis ataskaitomis [13, 14]. Šis aukštos kolonizacija norma suaugusių pelių taip pat yra suderinamas remti tai, kad vėlai įsigijimas H. pylori pervežimas suaugusiųjų sergančių žmonių paprastai sukelia lėtinį kolonizacija [20]. Be to, lyginant su 2 -osios savaitės jaunas peles po H. pylori
įsigijimo, kolonizacija lygis 8 -oji savaitė buvo 53%, o pritaria tam, kad spontaniškas pašalinimas H. pylori
tikrai įvyksta per anksti įsigijimo amžiaus pelių. Taigi dabartinis tyrimas turėtų būti labai originalus įvesti pelės modelis, skirtas patvirtinti, kad ten turėtų būti H. pylori
kolonizacijos nuostolius po ankstesnio įsigijimo H. pylori pervežimas, kuri glaudžiai imituoja klinikinius išvadas jauna vaikai.
Mūsų ankstesniame tyrime parodė, kad skrandžio Le x intensyvumas yra teigiamai susijęs su amžiumi prieaugio žmonėms [12]. Tačiau tiems, kurie be H. pylori
infekcija, apie sialyl-le išraišką X skrandžio epitelio yra silpnas arba trūksta dispepsijos vaikams ir suaugusiems [12]. Suderinamas su žmonėmis, skrandžio sialyl-le intensyvumas X pelių taip pat teigiamai koreliuoja su amžiumi prieaugio (2b pav.) Toks pelėms išvada taip pat yra suderinamas su žiurkių tyrimą, kuris atskleistas amžiaus susijusių prieaugis glikozilinant kepenų audiniuose [21]. Didinti skrandžio sialyl-le x išraišką po H. pylori
infekcijos buvo pranešta žmonėms ir rezus beždžionių [9-12]. Tačiau, mūsų pelėmis, sumažėjusio intensyvumo skrandžio sialyl-le xwas atskleista H. pylori
-infected jaunų pelių, bet ne suaugusių pelių dėl 2 -osios savaitės, palyginti su kontrolės pelių. Daugiau stulbinamai, ant 8 -osios savaitę po H. pylori pervežimas įsigijimo, tokio sialyl-le sumažėjimas X dingo abiem kolonizuoti jaunų ir suaugusių pelių, kurios turėjo visiškai sialylated skrandžio gleivinę. Ši išvada rodo, kad H. pylori
iššūkis turėtų būti įtraukti sutrikdyti amžiumi susijusių brendimo kreivė sialylation į jaunų pelių. Be to, netiesiogiai rodo, kad sialyl-Lewis antigeno pokyčiai jaunas peles reikia stipriai koreliavo su atkaklumo ar praradimo H. pylori
kolonizacijos.
Šiuo gyvūnų modelio, anksti H.pylori
įsigijimas sukėlė didesnės NVS nei kontrolės 2 -osios savaitės (87,5%, palyginti su 50%, p = 0,15 pervežimas), bet ne ant 8 -osios savaitės (40% vs 30%, p
= 0,36), po H. pylori
iššūkis. Darant prielaidą, kad stora uždegimas sukelia daugiau sunkių klinikinių simptomų, tai histologija kaita gali būti susietas su mūsų ankstesnių tyrimų išvadas, kad Helicobacter pylori
infekcija gali sukelti trumpalaikį epigastriumo skausmas vaikams, nors paprastai išspręstas tolesnių [22]. Dėl klinikinius stebėjimus ir in vivo pelių modelių duomenimis, H. pylori,
įsigijimo vaikams paprastai pristato kaip savarankiškai ribotas tęsinys uždegimas.
Po H. pylori
infekcijos, įvairių šeimininkių atsakymus skrandžio citokinai galbūt gali būti susijęs su skirtingų klinikinių rezultatų [14, 18, 23, 24]. Šiame tyrime buvo nustatyta, kad negydyti pelės turėti reguliarų IL-1β ir IFN-γ išraiškas (3c pav & 3D) nuo skrandžio sulčių epitelio, kuri yra suderinama su ankstesnės ataskaitos žmonėms [15]. Mūsų pelių tyrimas eksponuojama konkretaus amžiaus citokinų išraiška nuo skrandžio sulčių epitelio (IFN-gama) ir plonų sluoksnių Propria (IL-6, TNF-α, IFN-γ, ir IL-10). Dėl amžiui specifišką atsakas į citokinų, mūsų tyrimas parodė, kad turėtų būti skirtingi negydyti imuninis atsakas tarp vaikų ir suaugusiųjų.
Remiantis imunohistocheminio tyrimo, šis tyrimas patvirtino, kad pro-uždegiminių citokino raiškai skrandžio lamina Propria gali pasikeisti tiek į 2 -asis ir 8 -asis savaitę po H. pylori pervežimas iššūkis [25, 26]. Tiek pelių ir žmonių, skrandžio citokino atsakymai H. pylori
infekcijos buvo įrodyta, kad būti Th1 dominuojantis, nes IFN-gama lygis padidėjo H. pylori pervežimas -infected dalykų, lyginant su kontrole [15, 18, 23, 27]. Aukšto INF-γ lygis buvo priskirtas kaip prabos H. pylori
AMŽIAUS gastritas, ypač per lėtinis uždegimas ir potencialiai priskirti kaip apsauginis vaidmuo prieš H. pylori pervežimas kolonizacija [16-18, 28]. Kaip parodyta 3 lentelėje, mes atskleidė, kad jauni peles su kolonizacijos nuostolius turėjo didesnį IFN-γ raiškos epitelio nei pelių su nuolat kolonizacijos (P, pervežimas = 0,048). Ši išvada yra suderinama su žmogaus tyrime su vaikais, kurie parodė, kad vaikai su H. pylori infekcija
turėjo mažesnę koncentraciją IFN-gama nei neužkrečiama kontrolės [29]. Tai pelėmis duomenys rodo, kad ten gali būti reikšminga koreliacija su kolonizacijos praradimo, kai yra didelė raiška IFN-gama. Todėl turėtų būti susirūpinęs apžvelgti įvairių šeimininkų atsakas IFN-gama, kuri gali būti susijusi turėti skirtingas H. pylori
infekcijos rezultatų vaikams.
IL-10 yra Th2 citokinų, ir gali būti sukeltas kompensacinė reguliavimas po Th1 pamainos H. pylori
iššūkis apsaugoti skrandžio gleivinę [13, 15, 23, 27]. Todėl ne taip stebina iliustruoti gerokai padidinti IL-10 išraiška jaunas peles su nuolat kolonizacijos (3 lentelė). Kaip parodyta 4 lentelėje, jaunas peles su mažu IFN-gama dėl epitelio turėti H. pylori
kolonizacijos atkaklumas turėjo 100% sambūvį su aukšto IL-10 raiškos matrica ir limfocitų. Šie duomenys dar kartą paremti, kad IL-10 ląstelę tokiose pelėmis turėtų būti bendrai egzistavo kompensacinė reguliavimas po metu IFN-gama lašas tarnauti kaip apsauginis vaidmuo užkrėsto gleivinę.

• Gastritas cystica profunda pasikartojimo po chirurginės rezekcijos: 2 metų tolesnių up
• Laura klasifikacija kartu su HER2 būklės yra geresnis prognostinis faktorius Kinijos skrandžio vėžiu sergantiems pacientams